鸡新城疫抗体水平测定
职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项赛题理论竞赛试卷5
全国职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷（五）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0・5分，共10分）1.病原体由亲代传给子代的现象称为O2.病毒衣壳是包围在病毒核酸外面的一层外壳，其化学成分为O3.流感病毒囊膜上的纤突主要成分是血凝素和o4.在自然条件下，增强微生物毒力的最佳方法的回归。
5.外毒素经0∙3%~0.5%甲醛溶液于37℃处理一定的时间后，使其失去毒性，但仍保留很强的抗原性，称。
6.将同种细菌或病毒的不同血清型混合制成的疫苗为o7.革兰阳性菌细胞壁特有的组分是o8.在动物机体局部黏膜免疫中发挥主要作用的抗体是o9.小鹅瘟属于类动物疫病。
10.寄生虫的生活史属于直接发育型，不需要中间宿主，幼虫或虫卵在外界发育到感染期直接感染动物和人，称该寄生虫为。
11.由沙门氏菌引起仔猪发生的一种传染病被称为o12.结核病特征是在患病的组织器官上形成结核结节、病灶和钙化病变。
13.蓝舌病最易感的动物是o14.寄生于宿主体内的蠕虫主要有吸虫、线虫和棘头虫和。
15.牛海绵状脑病病原为与痒病病毒相似的一种o16.小反刍兽疫病理剖检盲、结近端和直肠出现特征性充血、出血。
17.由一个B细胞克隆针对单一抗原决定簇产生的抗体，称抗体。
18.家畜中最易感染口蹄疫病毒的动物是。
19.乙脑病传播媒介为蚊虫，其流行具有明显的o20.动物机体的特异性免疫应答的基本过程包括致敏阶段、反应阶段和O二、单项选择题（每小题1分，共10分）1.鸡产蛋下降综合症是由（）引起。
A.大肠杆菌B.沙门氏菌C.饲养管理不善D.禽腺病毒2.初次体液免疫应答过程中最早产生的抗体是（）。
A.IgGB.IgMC.IgAD.IgE3.机体自然感染病毒后产生的免疫力属于（）。
A.天然被动免疫B.天然主动免疫C.人工主动免疫D人工被动免疫4.与弱毒疫苗相比，灭活疫苗的特点是（）。
A.难保存B.接种量小C.体内可繁殖D.使用安全5.细菌在固体培养基上生长形成的菌落连成一片，称为（）。
鸡新城疫抗体检测步骤,鸡新城疫的症状表现
鸡新城疫抗体检测步骤，鸡新城疫的症状表现1、将样本做去皮和去脂处理，并用均质器均质样本，然后称取适量的均质物至离心管内。
2、依次加入蒸馏水、试剂A、衍生化试剂，振荡混匀后孵育半小时。
3、依次加入试剂B、试剂C、提取剂，并振荡混匀。
4、离心5分钟，取上层有机相至离心管内，再用氮气吹干。
5、用净化剂溶解干燥物，加入试剂D，离心2分钟后待检。
一、鸡新城疫抗体检测步骤1、将鱼虾蟹、畜禽肉、内脏等样本做去皮、去脂肪等处理，再用均质器均质样本，然后称取3±0.05克均质物至15毫升的离心管内。
2、依次加入4毫升蒸馏水、0.5毫升试剂A以及0.6毫升衍生化试剂，并振荡混匀，于65°C水浴中孵育半小时。
3、依次加入1毫升试剂B、0.4毫升试剂C、1瓶4毫升的提取剂，然后振荡混匀。
4、在室温下（20-25°C）以4000r/分钟的速度离心5分钟，取2毫升上层有机相至5毫升的离心管内，在50-60°C水浴中用氮气（或空气吹干仪）吹干。
5、取1毫升净化剂溶解干燥物，再加入0.5毫升试剂D振荡混匀，在室温下（20-25°C）以4000r/分钟的速度离心2分钟，最后待检。
6、若使用全血标本进行检测，标本的移动速度可能较慢，必要时可在加样1分钟后，向加样孔内滴入1滴PBS作辅助液，以促进标本移动。
二、鸡新城疫的症状表现1、急性型（1）病鸡呼吸困难，会发出“咕噜”的特殊怪声。
（2）病鸡的嘴、鼻中有大量黏液，产蛋量下降。
（3）病鸡出现下痢，其粪便的颜色为黄白色或绿色，有麻痹和神经症状。
2、最急性型此类症状大多出现在3-4周龄的小鸡身上，发病时通常不会表现出任何症状，但病发后小鸡会快速死亡。
3、亚急性或慢性型病鸡出现跛行、麻痹、痉挛、运动失调、肌肉抽搐等症状，产蛋鸡发病后期产量会有所降低，一般会发生于成年鸡身上。
4、非典型性新城疫病鸡出现咳嗽、呼吸困难的现象，且伴有分泌物、神经症状，若蛋鸡和种鸡发病，则产蛋量一般会急速降低。
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)背景介绍•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病，严重影响鸡类养殖业。
•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。
实验目的•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。
•提供可靠的数据支持，用于预防和控制鸡新城疫的传播。
实验设计•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•分为实验组和对照组，实验组注射疫苗，对照组不注射。
•定期进行血液检测，测量抗体水平。
实验步骤1.收集血样。
2.提取血清。
3.使用特定抗体试剂盒进行检测。
4.测量光密度值，判断鸡新城疫抗体水平。
5.记录实验结果。
实验结果•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。
•实验组的鸡只无明显临床症状，对疫情具有稳定抵抗力。
•对照组鸡群出现多例感染病例，病死率较高。
结论与建议•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况，为预防和控制疫情提供重要依据。
•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力，减少感染风险。
•鼓励养殖场加强抗体检测工作，及时发现病例并采取相应措施。
致所有鸡农：鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。
本实验通过抗体检测方法，证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力，减少感染的风险。
希望您能严格按照抗体检测规程，提高鸡只的免疫力，保障养殖业的稳定发展。
感谢您的关注与支持！注意：本报告仅为实验结果总结，并非具体实验报告。
具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。
实验方法•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。
•对照组的鸡只不注射疫苗。
•按照一定周期，定期采集血液样本。
数据分析•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。
•实验组的鸡只抗体水平明显升高，且持续稳定。
•对照组的鸡只抗体水平较低，易受感染。
结果讨论•实验结果证明，注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。
•抗体检测是一种可靠的方法，可以快速判断鸡群的感染情况。
•实验结果也表明，饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。
结论•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。
鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告引言本实验旨在对鸡新城疫进行抗体检测，以评估鸡群对该病毒的感染情况。
通过收集血清样本并使用特定检测方法，我们能够确定鸡群中抗体的存在与水平。
这对于制定控制措施、监测疫情以及预防疾病的传播至关重要。
实验设计1. 样本采集我们在鸡群中随机选择了100只鸡进行样本采集，确保样本的代表性。
采集的方法包括抽取少量鸡脉血或者采集鸡羽毛根部进行检测。
2. 抗体检测方法我们采用了酶联免疫吸附试验（ELISA）方法进行抗体检测。
该方法通过将血清样本与鸡新城疫抗原结合，并使用酶标记的二抗检测抗体与其结合，最后通过底物发色反应来检测抗体的存在。
3. 阳性对照与阴性对照为了验证实验结果的准确性，我们使用了阳性对照和阴性对照。
阳性对照为已知感染鸡新城疫的鸡样本，而阴性对照为未感染的鸡样本。
实验结果我们对100个样本进行了抗体检测，并将结果进行统计和分析。
以下是实验结果的详细报告：1. 鸡新城疫抗体检测结果我们将鸡新城疫抗体检测结果分为三类：•强阳性：抗体水平高于阈值的样本。
•弱阳性：抗体水平介于阈值和阴性之间的样本。
•阴性：抗体水平低于阈值的样本。
2. 统计分析经过抗体检测，我们得到了以下统计分析结果：•强阳性样本数：25只鸡•弱阳性样本数：45只鸡•阴性样本数：30只鸡3. 结果解读我们的实验结果表明，在100只鸡样本中，25只鸡的抗体水平高于阈值，可以确认为感染了鸡新城疫。
另外，45只鸡的抗体水平介于阈值和阴性之间，可能存在早期感染的迹象。
剩余的30只鸡样本抗体水平低于阈值，说明它们未感染鸡新城疫。
结论与讨论本次实验通过鸡新城疫抗体检测方法对100只鸡样本进行了检测，并得出了实验结果。
结果表明鸡新城疫在该鸡群中流行的程度较高，25%的样本具有强阳性抗体水平。
我们认为，对鸡新城疫进行抗体检测有助于早期发现感染情况，及时采取控制措施以避免疫情的进一步传播。
此外，对鸡新城疫的抗体检测也可以作为鸡群健康监测的重要指标，帮助决策者制定防控策略和掌握疫情动态。
门源县泉湾养鸡场新城疫抗体水平监测
６ ０一
中国动物检 疫 ２ １ 年 第２ ０１ ８卷第 ６期
门源县 泉湾养鸡场 新城疫 抗体水 平监 测
童海 龙
（ 青海省 门源县青石嘴兽 医站 ， 青海 门源
摘
８ ０ ０） １ ３１
要 ： 过抽取 鸡血清作血凝 （ Ａ 实验来进行新城疫检疫 ， 通 Ｈ ） 作血凝抑制 （ Ｉ实验进行 抗体 水平的监 测， 以 了解养鸡场 的 Ｈ） 可
出现 。
被 引格 式 ：
童海 龙． 门源县泉 湾养鸡场 新城疫 抗体水平 监测 ［ ． Ｊ 中国动物 ］ 检疫 ，０ １２ （） ６ ．１ ２ １ ， ８６ ：０６ ．
４ 根据 试验 结果 对该 鸡场 新城 疫 防治 的建 议 ４ １ 由试验 结果可 知新城疫抗ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 效价 ５ｏ２的仅 为 ． １ｇ
的 鸡 只死 亡 的情 况 出现 ， 过 病 理表 现 及 （ ） 验 通 ＨＡ 实 检 疫 ， 发病 鸡 为 新城 疫 感 染 ， 虑 到 该场 已作 过 新 所 考
单 位 的稀释 度 为 １１８ 将 １ ： ， ２ ｍＬ抗 原 加 入 １７ｍＬ生 ２
理 盐水 ， 即为 ４单位 抗 原【 ３ ］ 。 ２ ４ 配制 １ ． ％的红细 胞 悬浮 液
中国动物检 疫 ２ １ 年第２ ０１ ８卷第 ６期
一６ １一
细胞应 该 明显 呈纽 扣状 。 定 血凝 滴度 ： 判 将板 倾斜 ， 观
分 依赖 疫 苗接 种 。今 年 来 的研 究 表 明 ， 要 Ｎ 只 ＤＶ 强
察红细胞有无蹭泪珠状流淌 ， 完全血凝 的最高稀释倍
数 代表 一个 血凝 单位 。 ２５ ２ 血凝 抑制 试验 （ ） ．． ＨＩ 微 量 反 应 板 每 孔 加 入 ０００ｍＬ 理 盐 水 。第 １ ． 生 ５ 孔 加入 ００ ０ｍＬ 品血 清 。将 血清 做 ００ ０ｍＬ 积 ．１ 样 ．１ 体 作倍 比稀 释 。倍 比稀 释至 最后 １ ， 出 ０００ｍＬ 孔 吸 ．１ 液 体弃 去 。弃去 之后 ， 每孔 加 入含 有 ４个单 位 的病 毒 抗
鸡新城疫免疫抗体水平评价试验
入） 。振荡 混匀 ， 在室 温 ２ ０ ～ ２ ５ 。 【 ＝ 下静 置 ４ ０分钟 后 ， 观
②疫苗 重组新城疫灭活疫苗。 ③ 试剂 新 城疫 血凝 抑制 试 验抗 原 ，新 城疫 血
凝 抑 制试 验 阳性血 清 ， １ ％鸡 红 细胞悬 液 ， 阿 氏液 ， ｐ Ｈ
察结 果 。 如果 环境 温度太 低或 者太 高 ， 可置 ２ ５ ℃温箱
数 作 为终点 ，终 点稀 释倍 数 除 以 ４即为 含 ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释 倍数 。所 以 ， ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释倍 数 为 １ ： ６ ４ 。
③血凝抑制（ Ｈ Ｉ ） 试验（ 微量法） 在微量反应板
ｌ ～ ｌ ｌ 孔加入 ０ ． ０ ２ ５毫升 Ｐ Ｂ Ｓ ． 第 １ ２孑 Ｌ 加入 ０ ． ０ ５毫 升 Ｐ Ｂ Ｓ 。 吸取 ０ ． ０ ２ ５毫升被 检血 清加入 第 １ 孑 Ｌ 内， 充分 混 匀后 吸 ０ ． ０ ２ ５毫 升于 第 ２孔 ，依 次倍 比稀 释 至 第
制 ｌ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ：量 取 ４ ０毫 升 ２ ５ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ，加 入 ８ ． ５克氯 化 钠， 加蒸馏水 定容 至 １ ０ ０ ０毫升 。
３ ． 试 验 方 法
性、 败血 性传 染病 。 此 病 的特征是 鸡呼 吸困难 、 下痢 ， 神 经 紊乱 ， 黏膜 和浆 膜 出血 坏 死 ， 精神沉郁 ， 离 群呆
参照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ １ ８ ９ ６ ３ — ２ ０ ０ ３ （ 高 致病 性 新城 疫 诊 断技
术》 中 的血凝 （ ＨＡ） 和血 凝抑 制 （ Ｈ Ｉ ） 试 验进 行 。
４ ． 血凝 试验 （ ＨＡ） （ 微 量 法） 测 定
死。 嗉囔 内有 充满 臭味 的稀 薄液 体和 气体 ， 腺 胃黏膜
鸡新城疫不同免疫程序的抗体水平测定及攻毒保护试验
和广西本地 分离株 Ｇ Ｃ Ｘ １进行 攻毒 。结 果 表 明， 免 各 疫组 的 ｍ 抗体水平 消长规律类 似 ， 差异 不显著 ， １ 在 ４
日龄、１日龄时最低 ， ５ｌ ２左右 ，８ 日龄至 ７ 日 ２ 仅 ｓ ｏ ２ ０
（ ａ ｏ 株 一Ｈ ２ Ｌ ｔ Ｓａ １０株 ） Ｓ Ｆ （ （ Ｐ ） 以下简称 Ｎ Ｉ Ｄ＋ Ｂ
活苗 ） 自乾 元 浩 生 物 股 份 有 限 公 司 ， 号 为 购 批
Ｓ ０９ ２ ０８ ０ ８。
．
１１２ 鸡新城疫 中等毒力活疫苗 （ 系） 以下简 ．． Ｉ （ 称 Ｎ Ｄ Ｉ系） 鸡新 城疫 灭活 油苗 （ 、 以下简 称 Ｎ Ｄ
１ ２
广西 畜牧兽 医
２１ ０ １年 Ｖ １２ １ ｏ．７（ ）
［ ］ 进 说 ， 少 芬 ， 安 光 ， ． 西 地 方 标 准 Ｄ ４／ ２黄 谭 韦 等 广 Ｂ ５
实行人工补料 ， ５ 龄提前 断奶与 ７ ０日 ０日龄 自然断 奶的羔羊的增重效果差异不大 ， 采用提前断奶可使
母 羊提前发 情配 种 ， 利 于缩短 生 产 周 期 、 殖周 有 繁 期， 提高繁殖 率 ， 林 山羊 羔羊 人 工提 前 断奶 是可 隆
用 Ｆ Ｅ攻 毒死亡 鸡 的剖 检可见 直肠条 索状 出 嘏
血， 盲肠扁桃体 出血 ； ００２ 攻毒死亡鸡的剖检 用 ８０３ 可见腺 胃乳头 出血 ， 腺有 白色坏死灶 ， 胰 直肠 出血 ， 盲肠扁桃 体 出血 ； Ｇ Ｃ 攻 毒死亡 鸡 的剖检 可见 用 Ｘ１
的病例 。典型 症状是 以扭 头 为主 的神经症 状 ， 主要
大体病 变是腺 胃乳头 出血 ， 肠道 淋 巴组织 结枣核样
1-鸡新城疫抗体水平测定
附件1：高职农林牧渔专业类鸡新城疫抗体水平测定赛项技能竞赛规程、评分标准及选手须知一、竞赛内容本项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行。
本赛项不设理论考试，只对技能操作进行综合考核，技能竞赛题为公开试题，见本赛项规程的主要技术规程及要求。
二、竞赛方式本赛项为2人小组赛，以院校为单位组队参赛，不得跨校组队。
三、竞赛时量比赛时间为3小时。
比赛时由参赛队自行确定分工完成相关竞赛内容。
四、名次确定办法本赛项满分100分，采用分项计分法。
按总分由高到低排序，总分相同按完成时间先后排序，用时少者列前；若二项均相同，则按抗体滴度报告、西凝试验得分高低依次排序。
五、评分标准与评分细则1．评分标准及分值项目技能竞赛评分标准及分值见表1。
表1项目技能竞赛评分标准及分值2．评分细则项目技能竞赛评分细则见表2。
表2项目技能竞赛评分细则六、赛点提供的设施设备仪器清单仪器设备按《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2008）标准要求配制，且均为常用仪器、设备与材料。
本赛项所用的仪器、设备与材料见表3。
表3项目竞赛用仪器、设备与材料七、选手须知（一）主要技术规程及要求鸡新城疫抗体水平测定（微量法）按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行，具体步骤及其分值如下:（一）试验器材准备（占总成绩的8%）按照操作规程进行器材准备，要求器材摆放有序，物品标识合理，桌面整洁（二）配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜等。
（三）血凝试验（占总成绩的20%）按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，正确判定抗原的血凝效价。
要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果正确等。
鸡新城疫抗体检测实验报告
鸡新城疫抗体检测实验报告
引言
•鸡新城疫（Newcastle Disease，ND）是一种由鸡新城疫病毒引起的急性、高度传染性疾病。
•对鸡新城疫的抗体检测是确保家禽养殖业安全和疫情控制的重要手段之一。
实验目的
•通过检测鸡群中的抗体水平，判断其是否感染了鸡新城疫病毒，从而进行及时的干预和控制措施。
实验方法
1.样本采集：
–从鸡群中选取一定数量的鸡只，代表样本群体。
–采集鸡只的血液样本，确保采样的无菌和无血栓。
2.抗体检测：
–使用ELISA技术或HI技术等方法，对血液样本中的鸡新城疫抗体进行检测。
–按照相关试剂盒说明书的步骤进行操作，确保准确性和可重复性。
3.结果分析：
–根据检测结果，对鸡群中抗体水平的高低进行评估。
–判断鸡群是否处于鸡新城疫感染风险中，从而制定相应的预防措施。
实验结果
•检测结果显示，样本群体中的抗体水平明显升高。
•鸡群中的抗体阳性率达到95%以上，为鸡新城疫感染的警戒线。
结论
•根据本次实验的结果，可以推断该鸡群已经感染了鸡新城疫病毒。
•建议立即采取相应的疫情控制措施，包括隔离感染鸡只、加强清洁消毒等。
展望
•随着科技的发展，抗体检测方法将更加准确和高效。
•将来可以探索更多的抗体检测技术，如PCR等，以提高鸡新城疫的早期检测和预防效果。
参考资料
•[鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展](
•鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展. 农业科学研究. 2020. •鸡新城疫病毒感染与抗体检测技术综述. 动物医学进展. 2018.。
鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷
全国职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷（一）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0.5分，共10分）1. 传染病的传播方式可分两大类：和。
2. 传染病流行的三个基本环节是、传播途径和。
3. 细菌的特殊结构包括、、和。
4. 病毒的复制过程包括、穿入、、、和五个阶段。
5.根据动物机体感染病原体后病程长短的不同，感染可以分为、、和。
6.当口蹄疫流行时，绵羊是口蹄疫病毒的储存器，是感染的放大器，是发病的指示器。
7. 抗原的性质包括__________和__________两个方面。
二、单项选择题（每小题1分，共10分）1. 国家对动物疫病实行的主要方针是（）。
A. 预防为主B. 加强检疫C. 监督管理D. 扑杀2. 鸭传染性浆膜炎的主要特征不包括（）。
A. 纤维素性心包炎B. 纤维素性肝周炎C. 纤维素性气囊炎D. 纤维素性肠炎3. 下列哪一条关于禽霍乱的表述是错误的？（）A. 病原为禽多杀性巴氏杆菌B. 产蛋鸡常发C. 肉髯肿胀，变青紫色D. 对水禽无致病性4. 关于病毒的特点，叙述错误的是（）A. 对抗生素敏感B. 能通过细菌滤器C. 增殖方式为复制D. 不能在人工培养基上生长5.细菌的运动器官是（）。
A. 荚膜B. 鞭毛C. 菌毛6.下列属于人工主动免疫的是（A.注射卵黄抗体获得的免疫C.通过胎盘获得的免疫7. 下列（ D.芽胞B. 患传染病康复后获得的免疫D.接种疫苗获得的免疫）属于中枢免疫器官。
A. 脾脏B. 胸腺C. 淋巴结D. 哈德尔氏腺8. 抗感染免疫的主力抗体为（ ）A. IgGB. IgMC. IgAD. IgE9. 对动物采取免疫接种的目的是（ ）A ．降低易感动物的易感性B ．控制传染源C ．切断传播途径D ．控制疫源地10. 牛结核病检疫是利用了（ ）变态反应。
A. Ⅰ型B. Ⅱ型C. Ⅲ型D. Ⅳ型三、多项选择题（每题至少有2个及以上答案，多选、少选均不得分。
职业院校技能大赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项规程
职业院校技能大赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项规程一、赛项名称赛项编号：GZ-108赛项名称：鸡新城疫HI抗体水平测定。
英语翻译：Detection of the antibody titer against the Newcastle disease virus赛项组别：高职组赛项归属产业：农林牧渔大类二、竞赛目的本赛项考核的核心技能是鸡的采血方法、1%鸡红细胞悬液配制、红血球凝集（hemagglutination，HA）试验操作与结果判定、四个血凝单位（HAU）病毒溶液配制、红血球凝集抑制（hemagglutination inhibiion，HI）试验操作与结果判定、HI抗体滴度报告撰写等技能。
本赛项考核的核心知识是《动物微生物学》、《兽医免疫学》、《兽医临床诊疗技术》、《动物传染病学》等专业课程理论知识。
本赛项由学校、行业、企业共设，是高职畜牧兽医专业的核心技能，通过技能竞赛有效促进学校建设并完善实验、实训平台，加强核心技能的训练，提升高职畜牧兽医专业的人才培养质量。
同时，通过竞赛方式也有效促进学校与企业之间的合作交流，推动高职畜牧兽医等专业教学改革和校企合作，共同培养畜牧兽医行业一线技能型人才。
三、竞赛内容该项目由两人配合完成，按照操作规程进行试验器材的准备，并进行标识，合理摆放；之后进行采血、离心、洗涤，配制1%鸡红细胞悬液；用微量移液器在96孔V形微量反应板上进行红血球凝集试验，测定新城疫标准抗原的血凝价；根据血凝试验测定的新城疫标准抗原的血凝效价，配制4个血凝单位病毒溶液；进行被检血清的血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取HI抗体滴度结果，并完成试验相关记录和测定结果报告。
四、竞赛方式本赛项为团体赛。
每组参赛学生2名，比赛由2名学生配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生。
每组选手限2名指导教师，指导教师须为本校专兼职教师。
五、竞赛流程本项目竞赛日程与流程安排见表1。
1-鸡新城疫抗体水平测定
附件1：高职农林牧渔专业类鸡新城疫抗体水平测定赛项技能竞赛规程、评分标准及选手须知一、竞赛内容本项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行。
本赛项不设理论考试，只对技能操作进行综合考核，技能竞赛题为公开试题，见本赛项规程的主要技术规程及要求。
二、竞赛方式本赛项为2人小组赛，以院校为单位组队参赛，不得跨校组队。
三、竞赛时量比赛时间为3小时。
比赛时由参赛队自行确定分工完成相关竞赛内容。
四、名次确定办法本赛项满分100分，采用分项计分法。
按总分由高到低排序，总分相同按完成时间先后排序，用时少者列前；若二项均相同，则按抗体滴度报告、西凝试验得分高低依次排序。
五、评分标准与评分细则1．评分标准及分值项目技能竞赛评分标准及分值见表1。
表1 项目技能竞赛评分标准及分值2．评分细则项目技能竞赛评分细则见表2。
表2 项目技能竞赛评分细则六、赛点提供的设施设备仪器清单仪器设备按《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2008）标准要求配制，且均为常用仪器、设备与材料。
本赛项所用的仪器、设备与材料见表3。
七、选手须知（一）主要技术规程及要求鸡新城疫抗体水平测定（微量法）按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行,具体步骤及其分值如下：（一）试验器材准备（占总成绩的8%）按照操作规程进行器材准备，要求器材摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等。
（二）配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜等。
（三）血凝试验（占总成绩的20%）按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，正确判定抗原的血凝效价。
要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果正确等。
鸡新城疫的免疫检测程序
教学实习内容一．鸡新城疫的免疫检测目的：系统掌握鸡新城疫的抗体检测技术。
实验材料：新城疫疫苗、待测鸡蛋、生理盐水、5%柠檬酸钠、1%鸡红细胞悬液、胶头滴管、注射器、锥形瓶、15ml离心管、试管、96孔V型板、离心机等1.1%鸡红细胞悬液的制备（1）每组采取3ml左右健康鸡静脉血，迅速注入装有约0.3-0.4ml抗凝剂的离心管内，轻轻颠倒混匀；（2）加入适量生理盐水，混匀，3000rpm*10min，吸弃上清液和红细胞沉淀上层的白细胞层（3）加入适量生理盐水，重悬红细胞，3000rpm*10min，吸弃上清液。
如此，重复3次。
（4）量取红细胞沉淀的体积，用生理盐水配成1%的红细胞悬液，待用。
2.HA试验1%红细胞根据所用NDV液的凝集价，配制4单位病毒液。
3.HI试验（1）待测卵黄样品的制备：用镊子敲破鸡蛋小头，将蛋清倒去，留蛋黄在蛋壳内；吸取0.5ml 生理盐水，放入小试管内；去掉部分蛋壳，用1ml注射器（不带针头）吸取蛋黄0.5ml，加到有生理盐水的试管内，混匀（避免其很多泡）待检。
（2）按照检测血清抗体的方法检测卵黄中的抗体。
被检鸡蛋卵黄1%红细胞（3）判定和记录所检测鸡蛋的卵黄抗体效价。
结果与分析对所测得的结果进行分析，确定该鸡群目前的免疫状态，并对生产提出合理建议或给出科学指导。
分析并指出影响本实验结果的主要因素。
二．传染病的分子生物学检测——PCR检测（以PCV2为例）1.DNA提取：将猪肝脏称重后，按照1:3（W:V）的比例加入PBS，用组织研磨器研磨成组织悬液，反复冻融3次后8000 rpm离心5 min，取上清300 μL提取DNA。
取冻融、离心后的组织悬液/血清300μL，加入300 μL细胞裂解缓冲液和5 μL的蛋白酶K(20 mg/mL)，混匀，置50 ℃消化2 h，每隔30 min，剧烈震荡一次；加入等体积的Tris饱和酚，充分振荡混匀，4 ℃ 12000 rpm 离心10 min；取上层水相转入一新的l.5 mL eppendorf管中，加入等体积的酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）混匀后，4 ℃ 12000 rpm 离心10 min；用酚：氯仿：异戊醇（25:24: l）重复抽提一次；取上层水相转入一新的l.5 mL eppendorf管中，加入2倍体积冰预冷的无水乙醇和1/10体积的3 mol/L醋酸钠（pH 5.2），室温放置30 min 以沉淀基因组DNA；4 ℃ 12000 rpm离心15 min，弃上清；用75%乙醇1 mL 洗涤沉淀，4 ℃ 12 000 rpm 离心10 min后，弃去上清，自然晾干。
实验一_鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法讲解
鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法1．本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法，以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2．实验内容或原理某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等)能够与动物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验(HI)。
3．需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只，被检鸡15-25只。
器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0.025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂（1）浓缩抗原；（2）生理盐水或磷酸缓冲盐水（PBS）；（3）Alsever细胞保存液；（4）红细胞悬液；（5）待检血清4．实验步骤(1)发现与鉴定病毒：鸡新城疫和禽流感病毒分离后，这些病毒能凝集鸡的红细胞，又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应，即可鉴定此病毒。
(2)诊断病毒性疾病：如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验，如抗体效价有4倍以上升高，即有诊断意义。
（3）免疫机体抗体效价的测定：3.鸡新城疫（ND）的HA和HI（1）试验准备①抗原：一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原，进行试验。
② 0.7％细胞悬浮液：由鸡翅静脉或心脏采血，放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8％灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂)内，迅速混匀。
如当时不用，可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份，血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制：将血液注入离心管中，经3000转／分钟，离心5-10分钟，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。
再用离心机3000转／分钟离心5-10分钟，弃上清，再加稀释液洗涤，如此反复洗涤三次，将最后一次离心后的红细胞泥，按0.7％的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。
鸡感染新城疫的诊断及抗体水平检测
39疾病防治2017年3月9日山西省晋中地区某养鸡场150日龄的蛋鸡发生疾病，此养鸡场存栏鸡8000只，近期部分鸡发生疾病。
整群精神状态差，采食量和饮水量均下降。
场主携带3只发病鸡（2只活鸡，1只死鸡）来笔者研究室进行诊断。
1 临床症状病鸡精神沉郁、垂头缩颈、翅翼下垂、鸡冠、肉髯发紫呈暗红色、呆立、状似昏睡、食欲减少。
主要症状表现在呼吸道，包括咳嗽、张口呼吸、呼吸时偶尔会伴有拉长的怪叫声。
嗉囊内积有液状内容物，倒提时常从口角流出大量酸臭的暗灰色液体。
排黄绿色或黄白色水样稀便，有时混有少量血液。
鸡产蛋下降或停产，蛋壳质量变差。
2 病理变化病变主要集中在消化道，腺胃、小肠和盲肠病变最为明显。
腺胃乳头肿胀、出血或溃疡，尤其是在与食道或腺胃交界处最明显。
十二指肠黏膜及小肠黏膜出血或溃疡，有的可见到“枣核状溃疡灶”，表面有黄色或灰绿色纤维素膜覆盖。
盲肠扁桃体肿大、出血和坏死。
呼吸道以卡他性炎症和气管充血、出血为主。
鼻道、喉、气管中有浆液性或卡他性渗出物。
3 PCR 鉴定从发病鸡的肺脏、肝脏、脾脏等器官取样1g，剪碎混匀后取0.05g 研磨，8000r p m 离心后取上清液，使用新城疫病毒通用型RT-PCR 检测试剂盒检测NDV，取已处理的样品，加入裂解液600μL，充分颠倒混匀，室温静置3～5min。
将液体吸入吸附柱中，13000rpm 离心30s。
弃去收集管中的液体，加入600μL 洗液，13000rpm 离心30s。
重复上一步。
弃去收集管中液体，13000rpm 空柱离心2min，以除去残留的洗涤液。
将吸附柱移入新的1.5mL 离心管中，向柱中央加入洗脱液50μL，室温静置1min，13000rpm 离心30s，离心管中液体即为模板RNA。
反转录条件为：42℃ 45min，94℃ 3min；PCR 反应条件为：94℃30s，55℃ 30s，72℃ 30s，共循环35次，72℃延伸7min。
使用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果，结果见图1。
鸡新城疫抗体水平测定
2017年安徽省职业院校技能大赛高职组“鸡新城疫抗体水平测定”项目文件（2017年安徽省职业院校技能大赛高职组赛事筹备组制，2017年1月）2017年安徽省职业院校技能大赛高职组“鸡新城疫抗体水平测定”项目竞赛规程一、竞赛项目名称鸡新城疫抗体水平测定二、竞赛目的通过竞赛，检验参赛选手在真实的工作环境与条件下进行新城疫抗体测定操作能力、以及参赛队的团队协作能力、计划组织能力等综合职业素质。
引导安徽省高等职业院校动物科学与技术、动物防疫与检疫等专业的教育教学改革，促进工学结合人才培养模式改革与创新，培养可持续发展、满足企业需求的“高素质、技能型”动物疫病检测岗位技术人才。
三、竞赛方式和内容（一）竞赛方式1．竞赛以团队方式进行，每支代表队参赛学生限报2人，须为2017年同校在籍高职学生，不分性别，不分年级，每代表队报指导教师1-2名，在指导教师中指定领队1名。
2．竞赛不设理论考试，只对操作技能进行综合考核。
实际操作由2名参赛队员共同完成。
要求选手根据竞赛题目的具体要求，以现场操作的方式，按照正确的操作步骤，在规定时间内完成鸡新城疫抗体水平测定的操作。
（二）竞赛内容竞赛项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法）。
测定方法参考《新城疫诊断技术》（GB/T16550—2008）标准，具体分为6个部分。
（1）试验器材准备按照操作规程进行试验器材的准备，并进行标识，合理摆放。
（2）配制1%鸡红细胞悬液按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液。
（3）血凝试验按照操作规程使用微量移液器在96孔V型血凝反应板滴加稀释液、新城疫标准抗原并充分混匀和递倍稀释，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡和感作，正确判定出1个血凝单位。
（4）配制四单位病毒根据HA试验测定的新城疫标准抗原的血凝效价，按照操作规程配制四单位病毒。
（5）血凝抑制试验按照操作规程进行被检血清的血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阳性对照。
（6）抗体滴度报告按照操作规程正确读数，并完成报告单填写。
鸡新城疫抗体水平检测参考课件
2020/3/24
2
血凝与血凝抑制试验
• 通过已知病毒，检查待检血清中是否含有相应的抗体及抗体效价， 监测免疫后鸡群抗体水平的动态变化，评价疫苗免疫效果。
2020/3/24
3
实验内容
2020/3/24
6
2020/3/24
7
鸡新城疫病毒血凝试验判读
2020/3/24
8
新城疫病毒血凝抑制试验判读
2020/3/24
9
202041实验器材禽用采血器托盘天平离心管移液枪离心机微型振荡器96孔v型反应板生理盐水鸡新城疫病毒液待检血清等202041鸡新城疫病毒血凝试验判读202041新城疫病毒血凝抑制试验判读
鸡新城疫抗体水平检测
--血凝与血凝抑制实验
主讲人：李明书
1
由副粘病毒引起的高度接触性传染病。又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟。
2020/3/24
4
血凝与血凝抑制试验原理
• 某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等)具有血凝素，能够与动 物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HA)。这种红细胞 凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞 凝集抑制试验(HI)。
2020/3/24
5பைடு நூலகம்
实验器材
禽用采血器、托盘天平、离心管、移液枪、离心机、微型 振荡器、96孔v型反应板、生理盐水、鸡新城疫病毒液、待 检血清等
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2018年全国职业院校技能大赛拟设赛项规程一、赛项名称赛项编号:GZ－2０18011赛项名称：鸡新城疫抗体水平测定英语翻译：Deteｃtioｎof the Aｎtｉbody agａiｎst Chicｋen Ne ｗCastｌe DｉsｅasｅViｒｕｓ赛项组别:高职组赛项归属产业：农林牧渔二、竞赛目得本赛项由学校、行业、企业共设，通过技能竞赛,能有效促进全国高职院校畜牧兽医类专业之间得交流，引领专业建设与课程改革；能进一步深化学校与企业之间得合作交流，加大行业人才队伍建设力度，提升行业产业发展水平.同时，通过本赛项得资源转化，可以向社会展示畜牧兽医类专业得师生风采与建设成果，提高专业得教学水平，提升人才培养质量。
三、竞赛内容本赛项为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫诊断技术》（GB／T１6550－2008）标准，竞赛时间为１80分钟.具体步骤及其分值如下:（一)试验器材准备(占总成绩得8％）按照操作规程进行器材准备，要求器材选择正确、摆放有序，物品标识合理,桌面整洁等.(二)配制１%鸡红细胞悬液（占总成绩得1８%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1％鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜、配制过程规范、1％鸡红细胞量适宜等。
(三）血凝试验(占总成绩得２0%)按照操作规程,用微量移液器在９6孔V型血凝反应板１－12孔滴加稀释液、新城疫标准抗原,充分混匀，倍比稀释后，再次滴加稀释液,再添加１％鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，静置感作适当时间后,正确判定抗原得血凝效价。
要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果判定正确等。
（四）配制四单位病毒（占总成绩得10％)根据血凝试验结果，按照操作规程配制四单位病毒。
要求稀释倍数计算正确，稀释液体积加入得当、四单位病毒配制量适宜等。
(五)血凝抑制试验(占总成绩得20%）按照操作规程，对20个被检血清进行血凝抑制试验操作,并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取标准阴性血清、标准阳性血清及被检血清得结果，确定抗体滴度，完成报告。
要求移液器使用规范、反应板各孔得稀释正确、感作时间得当、对照成立、结果判断正确等.(六)抗体滴度报告（占总成绩得24％)按照操作规程，正确判定抗体滴度,完成报告.要求抗体滴度判读正确、报告方式正确、结果误差符合要求、场地整洁等。
四、竞赛方式本赛项为团体赛。
每组参赛学生2名，比赛由2名学生配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生,不得跨校组队。
竞赛安排上午、下午各一场(每场两个赛场）,竞赛场次由领队抽签决定。
竞赛场座位号由选手抽签决定,竞赛用设备、材料及实验动物与工位号对应.本赛项不邀请境外代表队参赛。
五、竞赛流程本项目竞赛日程与流程安排见表1。
六、竞赛赛卷本赛项不设理论考试,只对操作技能进行综合考核,技能竞赛题为公开赛卷,见本赛项规程得竞赛内容。
七、竞赛规则１、参赛选手须为高职院校全日制在籍专科学生;本科院校中高职类全日制在籍学生；五年制高职四、五年级学生.参赛选手必须持本人身份证与参赛证参加比赛。
参赛选手年龄须不超过2５周岁，年龄计算时间截止20１８年５月1日.凡在往届全国职业院校技能大赛中获一等奖得选手,不能再参加同一项目同一组别得比赛。
2、参赛选手与指导教师报名获得确认后不得随意更换。
如比赛前参赛选手与指导教师因故无法参赛，须由省级教育行政部门于本赛项开赛10个工作日之前出具书面说明，经大赛执委会办公室核实后予以更换.竞赛开始后，参赛队不得更换参赛队员。
3、参赛选手出场顺序、位置、比赛所用器材等均由抽签决定,不得擅自变更、调整。
4、参赛选手提前30分钟检录进入赛场,按照抽签工位号参加比赛,竞赛开始后迟到1５分钟以上者取消比赛资格;开赛3０分钟后，选手方可离开赛场。
5、选手进入赛场后须检查实验用品就是否齐全，如有疑问向裁判询问。
选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意,选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在比赛时间内。
6、选手应在竞赛试卷或实物标签上填写工位号.试卷（或实物标签)上不得有任何暗示选手身份得记号与符号，否则取消成绩.比赛过程中如果动物出现死亡等意外情况，举手示意，可更换实验动物。
各参赛选手要按照规定做好详细记录;判定试验结果时要举手示意裁判.7、竞赛在规定时间结束时，选手应立即停止操作,不得以任何理由拖延。
选手若提前完成操作,需举手示意,由裁判员记录结束时间,确认后方可离开比赛现场。
八、竞赛环境赛场照明、控温良好。
赛场内设有相对独立得长实验台并标明编号，选手根据抽签结果在相应得实验台完成比赛.赛场内设置摄像头,可将实时赛况直播到观摩室。
九、技术规范本赛项以教育部颁布得职业院校相关专业教学指导方案与国家职业标准《动物疫病防治员》(三级)规定得知识与技能要求为基础，依据《新城疫诊断技术》（GB/T165５0-200８）标准，确定比赛内容及方式。
十、技术平台仪器设备按《新城疫诊断技术》(GB/T1６55０—2008)标准要求配制。
本赛项所用得仪器、设备与材料见表2。
十一、成绩评定成绩评定按照公平、公正、客观得原则进行。
（一)裁判组成项目组设裁判员1９名,其中裁判长１名,加密裁判2名，评分裁判16名(２个赛场同时举行比赛）。
(二）评分方法本赛项采取过程评分得方式评分,结果评定采用百分制。
竞赛现场每位裁判对每一组选手分别打分,由项目裁判组统一评分，去掉一个最高分，去掉一个最低分,其余得分得算术平均值作为参赛队伍得最后得分。
各裁判员首先审核选手原始打分成绩,并签名；赛项裁判长对所有裁判员得打分成绩进行审核，并签名。
（三)成绩审核为保障成绩评判得准确性，监督组将对赛项总成绩排名前30%得所有参赛队伍(选手)得成绩进行复核；对其余成绩进行抽检复核,抽检覆盖率不得低于1５%。
如发现成绩错误以书面方式及时告知裁判长,由裁判长更正成绩并签字确认。
复核、抽检错误率超过5％得，裁判组将对所有成绩进行复核。
（四）成绩公布记分员将解密后得各参赛队成绩汇总成最终成绩单，经裁判长、监督组签字后，在指定地点、以纸质形式进行公示，公示时间为２小时。
成绩公示无异议后,由仲裁长、监督组长在成绩单上签字,并在闭赛上公布竞赛成绩。
项目技能竞赛评分标准见表3.十二、奖项设定本赛项设一、二、三等奖。
以赛项实际参赛队总数为基数,一、二、三等奖获奖比例分别为１０％、20%、3０%（小数点后四舍五入)。
获得奖项得参赛队，授予相应得荣誉证书。
获得一等奖得参赛队指导教师由大赛组委会颁发优秀指导教师证书。
十三、赛项安全(一）比赛环境1、执委会须在赛前组织专人对比赛现场、住宿场所与交通保障进行考察,并对安全工作提出明确要求。
赛场得布置,赛场内得器材、设备，应符合国家有关安全规定.如有必要，也可进行赛场仿真模拟测试，以发现可能出现得问题。
承办单位赛前须按照执委会要求排除安全隐患。
2、赛场周围要设立警戒线，要求所有参赛人员必须凭执委会印发得有效证件进入场地,防止无关人员进入发生意外事件.比赛现场内应参照相关职业岗位得要求为选手提供必要得劳动保护。
在具有危险性得操作环节,裁判员要严防选手出现错误操作.3、承办单位应提供保证应急预案实施得条件。
对于比赛内容涉及高空作业、可能有坠物、大用电量、易发生火灾等情况得赛项,必须明确制度与预案,并配备急救人员与设施。
4、严格控制与参赛无关得易燃易爆以及各类危险品进入比赛场地,不许随便携带书包进入赛场。
5、配备先进得仪器,防止有人利用电磁波干扰比赛秩序。
大赛现场需对赛场进行网络安全控制，以免场内外信息交互,充分体现大赛得严肃、公平与公正性。
６、执委会须会同承办单位制定开放赛场与体验区得人员疏导方案。
赛场环境中存在人员密集、车流人流交错得区域，除了设置齐全得指示标志外,须增加引导人员,并开辟备用通道。
7、大赛期间，承办单位须在赛场管理得关键岗位,增加力量,建立安全管理日志。
８、竞赛用生物制品均由符合国家标准得企业生产与提供,实验动物（鸡)符合生物安全规范.（二)生活条件1.比赛期间,原则上由执委会统一安排参赛选手与指导教师食宿.承办单位须尊重少数民族得信仰及文化,根据国家相关得民族政策，安排好少数民族选手与教师得饮食起居。
2.比赛期间安排得住宿地应具有宾馆/住宿经营许可资质。
以学校宿舍作为住宿地得,大赛期间得住宿、卫生、饮食安全等由执委会与提供宿舍得学校共同负责.3.大赛期间有组织得参观与观摩活动得交通安全由执委会负责。
执委会与承办单位须保证比赛期间选手、指导教师与裁判员、工作人员得交通安全。
4.各赛项得安全管理，除了可以采取必要得安全隔离措施外，应严格遵守国家相关法律法规,保护个人隐私与人身自由。
（三）组队责任1、各学校组织代表队时，须安排为参赛选手购买大赛期间得人身意外伤害保险。
2、各学校代表队组成后，须制定相关管理制度，并对所有选手、指导教师进行安全教育。
3、各参赛队伍须加强对参与比赛人员得安全管理,实现与赛场安全管理得对接。
（四)应急处理比赛期间发生意外事故,发现者应第一时间报告执委会,同时采取措施避免事态扩大。
执委会应立即启动预案予以解决并报告组委会。
赛项出现重大安全问题可以停赛，就是否停赛由执委会决定。
事后,执委会应向组委会报告详细情况。
（五）处罚措施1、因参赛队伍原因造成重大安全事故得，取消其获奖资格。
2、参赛队伍有发生重大安全事故隐患，经赛场工作人员提示、警告无效得,可取消其继续比赛得资格。
3、赛事工作人员违规得，按照相应得制度追究责任.情节恶劣并造成重大安全事故得，由司法机关追究相应法律责任。
十四、竞赛须知(一）参赛队须知１、参赛队名称统一使用规定得地区代表队名称。
2、参赛选手与指导教师报名获得确认后不得随意更换。
如比赛前参赛选手与指导教师因故无法参赛，须由省级教育行政部门于本赛项开赛1０个工作日之前出具书面说明，经大赛执委会办公室核实后予以更换。
竞赛开始后，参赛队不得更换参赛队员。
3、参赛队按照大赛赛程安排,凭大赛组委会颁发得参赛证与有效身份证件参加比赛及相关活动。
4、参赛院校须为参赛队员购买保险。
（二)指导教师须知1、各参赛代表队要发扬良好道德风尚,听从指挥，服从裁判,不弄虚作假。
如发现弄虚作假者，取消参赛资格，名次无效.2、各代表队领队要坚决执行竞赛得各项规定，加强对参赛人员得管理,做好赛前准备工作，督促选手带好证件等竞赛相关材料。
3、竞赛过程中,除参加当场次竞赛得选手、执行裁判员、现场工作人员与经批准得人员外，领队、指导教师及其她人员一律不得进入竞赛区域。
４、参赛代表队若对竞赛过程有异议，在规定得时间内由领队向赛项仲裁工作组提出书面报告.5、对申诉得仲裁结果,领队、指导教师要带头服从与执行,并做好选手工作。