现代分子生物学重点【分子生物学重点】
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现代分子生物学重点【分子生物学重点】
名词解释1.Molecularbiology:在分子水平上研究生命现象的科学。通过研究生物大分子的结构、功能和生物合成等方面来阐明各
种生命现象的本质,其主要研究领域包括蛋白质体系、蛋白质-核酸
体系(中心是分子遗传学)和蛋白质-脂质体系(即生物膜)。
2.DenaturationofproteinandDNA:蛋白质变性(proteindenaturation)指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其
特定的空间构象被改变,从而导致其理化性质的改变和生物活性的
丧失,这种现象称为蛋白质变性。
3.DNA变性(DNAdenaturation)又称DNA融化(DNAmelting),是DNA双螺旋解开成为两条单股长链的过程。在过程中,使两股长
链上的碱基相连的氢键会断裂。DNA的变性可以是温度升高而产生
的作用,也可能是其他化学物质如尿素的诱导。视DNA解开的融化
温度(Tm)是依DNA链的长度,以及特定核苷酸序列的组成形式而定。
3.Southernblotting:Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定
序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切
酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转
移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再
与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,
从而检测特定DNA分子的含量。
4.Genecloning:基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组DNA,然
后送入受体生物中去表达,从而产生遗传物质和状态的转移和重新
组合。因此基因克隆技术又称为分子克隆、基因的无性繁殖、基因
操作、重组DNA技术以及基因工程等。
5.Nicktranslation:缺口翻译法或切口平移法是实验室最常用的一种脱氧核糖核酸探针标记法。利用E.coliDNA多聚酶I的多种酶
促活性将标记的dNTP掺入到新合成的DNA链中从而形成高比活性的均匀标记的DNA探针。线状、超螺旋及带缺口的环状双链DNA均可作为缺口平移法的模版。
6.YACVector:酵母人工染色体载体是利用酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的染色体的复制元件构建的载体,其工作环境也是在酿酒酵母中。YAC载体的复制元件是其核心组成成分,其在酵母中复制的必需元件包括复制起点序列即自主复制序列(ARS)、用于有丝分裂和减数分裂功能的着丝粒(CEN)和两个端粒(TEL)。
7.cDNAlibrary:cDNA文库。以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA 文库。
8.MultiplecistronmRNA:多顺反子mRNA。在原核细胞中,通常是几种不同的mRNA连在一起,相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开,这种mRNA叫做多顺反子mRNA。这样的一条mRNA 链含有指导合成几种蛋白质的信息。
9.Ubiquitinandubiqutination:泛素(ubiquitin)是一种存在于大多数真核细胞中的小蛋白。它的主要功能是标记需要分解掉的蛋白质,使其被水解。当附有泛素的蛋白质移动到桶状的蛋白酶的时候,蛋白酶就会将该蛋白质水解。泛素也可以标记跨膜蛋白,如受体,将其从细胞膜上除去。泛素76个氨基酸组成,分子量大约8500道尔顿。它在真核生物中具有高度保留性,人类和酵母的泛素有96%的相似性。
泛素化(ubiqutination)是对特异的靶蛋白进行泛素修饰的过程。一些特殊的酶将细胞内的蛋白分类,从中选出靶蛋白分子。泛素化修饰涉及泛素激活酶E1、泛素结合酶E2和泛素连接酶E3的一系列反应。
10.DNAladder:DNA梯状。细胞调亡时DNA在核小体间断裂(DNAfragmentation)形成一些DNA片断提取后由一些特殊质粒被特定内切酶消化在凝胶电泳上产生n条带的核酸片段组成由于成梯状故称之为DNALadder。其形成与细胞调亡密不可分同时也是判断细胞调亡的重要标准。
11.Co-translationtranslocation:共翻译转移。多肽转移类型之一,首先是在游离的核糖体上合成一段信号肽,指导核糖体结合到粗面内质网膜上,然后肽链边合成边进入内质网腔,经初步加工修饰后,部分多肽以裹泡形式被运送至高尔基体,经进一步加工和修饰后备运送至质膜,溶酶体或被分泌到胞外。
12.GroupⅠTransmembranceprotein:Ⅰ型跨膜蛋白。
能选择性地使非自由扩散的小分子物质透过质膜。
13.NLSandNES:核定位序列(Nuclearlocalizationsignal)是蛋白质的一个结构域,通常为一短的氨基酸序列,它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。
核输出信号(nuclearexpotr-signal,NES)。作为核内物质输出细胞核的信号,帮助核内的某些分子迅速通过核孔进入细胞质。另外,有些蛋白并非是核内常驻“人口”,通常要往返于核质和胞质之间,这些穿梭蛋白既有NLS又有NES。
14.RNPs:核糖核蛋白(Ribonucleoprotein)是指包含有RNA的核蛋白,即将核酸和蛋白质结合在一起的一种形式。核糖核蛋白包括核糖体、端粒酶以及小核RNP(snRNP)。
15.RNASplicing:RNA剪接(RNAsplicing),从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子,并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。
16.RibozymeⅠ:核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA分子。核酶又称核酸类酶、酶RNA、类酶RNA。
17.AlternativeprocessingofRNA18.RNAediting:RNA编辑(RNAediting).RNA编辑是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。