金线莲总生物碱的提取及含量测定
中国兰科植物新记录种——安南金线兰及其金线莲苷含量测定
接收日期：2023-09-06 接受日期：2023-09-18基金项目：国家自然科学基金项目(82174081)；福建省科技厅高校产学合作项目(2020Y4015) *通信作者。
E-mail:*************;*******************中国兰科植物新记录种——安南金线兰及其金线莲苷含量测定韩 玉1，陈慧玲1，王硕硕1，梁秀婷1，吴锦忠1，吴岩斌1*，郑承剑2*(1. 福建中医药大学药学院，福建 福州350122；2. 海军军医大学药学院中药鉴定学教研室，上海 200433)摘 要：报道中国兰科金线兰属植物一新记录种——安南金线兰Anoectochilus annamensis Lindl.，描述其主要形态特征并提供彩色图片，凭证标本保存于福建中医药大学中药资源标本馆。
该种植株形态与丽蕾金线兰Anoectochilus lylei Rolfe ex Downie 较相似，但唇瓣中部两侧各有2～5条长短不等的短流苏，金线莲苷含量高于goodyeroside A 的含量，可明显区别于丽蕾金线兰。
关键词：安南金线兰；兰科；新记录种；金线莲苷；goodyeroside A Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2023.05.010中图分类号：Q947.5 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2023)05-0448-05Anoectochilus annamensis , a New Record of Orchidaceae from China and ItsKinsenoside Content DeterminationHAN Yu 1, CHEN Hui-ling 1, WANG Shuo-shuo 1, LIANG Xiu-ting 1, WU Jin-zhong 1, WU Yan-bin 1*,ZHENG Cheng-jian 2*(1. College of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, Fujian China; 2. Department of Chinese MedicineAuthentication, School of Pharmacy, Naval Medical University, Shanghai 200433, China)Abstract: Anoectochilus annamensis Lindl. was reported a new record from China. Its morphological characteristics and color pictures were provided. The voucher specimens were deposited in herbarium of College of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine. The morphology of A. annamensis is similar to that of A. lylei , but there are 2–5 short tassels of varying lengths on each side of the middle lip. The content of kinsenoside in A. annamensis is higher than that of goodyeroside A, which can be clearly distinguished from A. lylei .Key words: Anoectochilus annamensis ; Orchidaceae; new record; kinsenoside; goodyeroside A金线兰属Anoectochilus Blume 属于兰科Orchidodeae 头骨兰族Cranichideae 斑叶兰亚族Goodyerinae [1]，全世界有40余种，主要分布于印度和喜马拉雅东部、东亚、东南亚至澳大利亚以及西南太平洋岛屿等地区[2—3]。
金线莲文献综述
摘要：金线莲属于珍稀药用植物，具有清热凉血、除湿解毒、滋阴降火、消炎止痛等功效。
金线莲主要含有黄酮、糖类、挥发油、生物碱、有机酸、氨基酸、甾体等；金线莲及其提取物的药理作用主要表现为降血糖、降血压、抗病毒、抗氧化等作用以及其它药理药效不断被发现，文章主要综述了金线莲的化学成分及药理作用，论述了金线莲组织培养研究进展。
关键词：金线莲活性成分药理作用组织培养金线莲是地生型兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus) 花叶开唇兰( Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.，A. roxburghii )的干燥全草，是多年生珍稀中草药，属珍稀药用植物,其名繁多,如金线兰、金线虎头蕉、金蚕、树草莲、金钱子草等[1-2]。
在我国广西、广东、海南、贵州、四川、云南等省都有分布。
金线莲是我国传统珍贵药材,具有清热凉血、除湿解毒、滋阴降火、消炎止痛等功效,现代临床药理学研究表明,其可用于治疗肺结核、咳嗽、风湿性关节炎、跌打损伤、慢性胃炎、肝炎、肾炎、膀胱炎等症[3-5]。
随着深入的研究，金线莲的优良品质日益突出，受到世人的青睐，具有广阔的开发利用前景。
近年来，人们对金线莲进行长期采挖导致其种质资源稀缺，已濒临灭绝。
利用植物组织培养技术可以实现金线莲的大规模工厂化生产，以满足人们的药用及观赏需求[6] 。
1．金线莲的活性成分金线莲金线莲主要含有黄酮、挥发油、生物碱、糖类、有机酸、氨基酸、甾体等。
1．1黄酮类关璟等[8]利用硅胶柱色谱、凝胶I H 和反相高效液相制备等方法进行分离纯化，使用快原子轰击质谱、核磁共振等现代波谱技术确定其结构。
从福建产金线莲95%乙醇渗漉提取物正丁醇部分得到5个黄酮苷类化合物分, 其结构为: 槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D -芸香糖苷、异鼠李素-3, 4′-O-β-D -二葡萄糖苷、异鼠李素-3, 7-O –β-D -二葡萄糖苷、异鼠李素-7-O –β-D -二葡萄糖苷。
金线莲化学成分研究进展_王晋成
2 多糖及糖苷
糖是多羟基 （ 2 个或以上） 的醛类 （ Alde－ hyde） 或酮类 （ Ketone） 化合物，按糖基的数量 分为单糖、双糖和多糖，多糖是由醛糖或酮糖通过 脱水形成糖苷键，并以糖苷键先行或者分枝连接而 成的链状聚合物，是构成生命活动的四大基本物质 之一 [30]。糖苷是糖与其他分子缩合形成的含糖衍 生物，包括糖的残基和配基 （非糖部分） 两部分， 中间的连接键称为糖苷键。金线莲苷是开唇兰属植 物研究最多的成分之一，也是本属植物已知的主要 活性成分 。 [31]
陈晓兰等采用苯酚-硫酸法测定了金线莲不同 部位的多糖含量，研究表明金线莲多糖含量在 0.85%～6.40%，且根茎部含量高于叶中含量 [32]。赖 应辉等检测出多糖、低聚糖和还原糖的含量分别为 13.326%、11.243%和 9.739% 。 [33]
日本学者 Aiko Ito 等从 A. koshunensis （恒春金 线兰 ）中分离得到了脂肪族糖苷 nicoloside（3-吡啶 甲 醇 苷 ，β -d -glucopyranosyl -3 -pyridinemethanol）和 kinsenoside [ 3 - ( R) -3 -β -d -glucopyranosyloxybu －
研究者们首先开展了金线莲总黄酮含量的测 定。吴水华 [13] 和罗明可 [14] 等采用荧光光度法测 定了福建野生和组培金线莲中总黄酮的含量分别为
金线莲总生物碱的提取及含量测定
第17卷第4期化 学 研 究Vol.17 No.4 2006年12月CHE M I CAL RESE ARCH Dec.2006金线莲总生物碱的提取及含量测定钟添华1,黄丽英1,王 勇2(1.福建医科大学药学院,福建福州350004; 2.福建省药物检验所,福建福州350004)摘 要:建立了金线莲总生物碱的提取和测定方法.将金线莲全草粉末用pH=2的水溶液提取,以阳离子交换树脂吸附后,经酸化,用氯仿/甲醇(体积比2∶1)对其进行索氏提取,蒸发有机溶剂.冷冻干燥即得金线莲总生物碱.以盐酸麻黄碱为对照品,酸性染料比色法测定总生物碱,折算为盐酸麻黄碱获得总生物碱含量.测得金线莲总生物碱含量是0.0794%,线性回归方程A=0.0092C-0.0016(r=0.9999),回收率103.13%.本提取及含量测定方法操作简单,总生物碱的提取率较高.关键词:金线莲;总生物碱;提取分离;酸性染料;比色法中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1008-1011(2006)04-0068-03Extracti on and Deter m i n ati on of the Alkaloi ds i nAnoectoch ilus F or m osanusZ HONG Tian2hua1,HUANG L i2ying1,WANG Yong2(1.Phar m acy College of Fujian M edical U niversity,Fuzhou350004,Fujian,China;2.Fujian Insititute for D rug Control,Fuzhou350004,Fujian,China)Abstract:Devel oped a method t o extract and deter m ine the t otal alkal oids fr om anoectochilus for m osa2nus.Herbs of anoectochilus for m osanus were leached by acidified water,and the t otal alkal oids in theleached s oluti on were abs orbed by cati onic exchange resin,then the resin was acidified and extractedwith a m ixed organic s olvent in a Soxhlet extract or.The t otal alkal oids were tested at412n m with thes pectr oscopy by acid dye.The calibrati on curves of alkal oids were linear(r=0.9999).The recoverywas perfect(103.13%).Mostly,the content of the t otal alkal oids in the herb is0.0794%.Themethod f or extracti on and deter m inati on is si m p le,quick with high recovery.Keywords:anoectochilus for m osanus;t otal alkal oids;extracti on;acid dye;col ori m etric method 金线莲系兰科(O rch idaceae)开唇兰属(A noectoch ilus)多年生草本植物,该属植物已发现35种,在我国约有20种[1].本属的部分种全草民间作药用,其中具有神奇功效、享有“药王”、“金草”、“乌人参”的珍稀草药金线莲备受人们的关注[2],特别在福建和台湾民间,广泛用于治疗肝炎、肾炎、肺炎、小儿惊风高热、糖尿病、高血压、肿瘤、风湿病等[3],还兼治小儿发育不良及毒蛇咬伤[4].据报道,金线莲中含有糖苷类化合物、有机酸、甾体化合物、黄酮类化合物、糖类化合物、生物碱[5-10]等.作者主要研究了金线莲中总生物碱的提取及测定.1 实验部分1.1 仪器与试剂DJ210A型倾倒式粉碎机(上海淀久中药机械制造有限公司),UV2752PC型紫外分光光度计(上海光谱收稿日期:2006-08-02.作者简介:钟添华(1980-),男,硕士,主要从事天然药物有效成分的提取及结构鉴定工作,EΟmail:zth2321980@. 第4期钟添华等:金线莲总生物碱的提取及含量测定69仪器有限公司),K Q2250D型医用数控超声清洗器,RE252AA型旋转蒸发仪,F D21冷冻干燥机(北京博医康技术公司).盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:71429903,供含量测定);0.1%溴麝香草酚蓝乙醇溶液;柠檬酸2柠檬酸钠缓冲液(pH5.4);聚苯乙烯磺酸氢型离子交换树脂(型号:001×7型,北京化工厂);金线莲干燥全草(购自福建省同春药业有限公司,产地广西.经福建省药检所中药室游勇基主任药师鉴定).以上试剂除专门提到外,均为分析醇,实验用水为二次蒸馏水.1.2 实验方法1.2.1 树脂的预处理将新的树脂加适量的丙酮在索氏提取器中抽提2h,除去有机物,将树脂取出晾干,蒸馏水湿法装柱.柱子先用3%盐酸淋洗,除去Fe3+,铁氰化钾检查不变色后,用3%氢氧化钠淋洗,使树脂转化为钠型,蒸馏水冲洗到弱碱性,用稀盐酸冲洗到pH约为3,使之转化为H型,最后用蒸馏水冲洗到中性,且Ag NO检验无3AgCl为止,准备上样.1.2.2 金线莲总生物碱的提取将金线莲全草粉末300g(过80目筛)放入下口瓶中;用pH2的盐酸浸泡72h,并加入少许氯仿防止溶液发霉变质;再将下口瓶超声1h,取出,于离心机中离心30m in,转速3500r・m in-1,抽滤,收集滤液备用.将滤液流经处理好的阳离子交换树脂,调节流速使生物碱完全吸附到树脂上,尔后流速控制在约0.5mL・m in-1.可以观察到当含有生物碱的滤液通过层析柱时,一条棕黑色的色带自上而下缓缓向下移动.取上述滤渣再浸提72h,进行下一次渗漉,操作同上,用碘化铋钾检测直至渗漉液中检测不出生物碱为止.当层析柱中大部分树脂吸附了生物碱后,用水洗树脂至中性,将柱中吸附有生物碱的树脂全部倒出,在70-80℃的水浴中烘烤随时观察,避免树脂烤焦,烘干后的树脂拌入2mol・L-1的盐酸适量,搅拌均匀.放置4h后将树脂用滤纸包好放入索氏提取器中,先用氯仿/甲醇(2∶1)浸泡过夜,然后进行回流提取12h.当提取液接近无色时,可适量滴加几滴浓盐酸,再回流提取,如此重复5次,当提取液中检测不出生物碱时,旋转蒸发溶剂冷冻干燥得粗总生物碱3.3234g.1.2.3 生物碱检定取2mL浓缩液置于离心管中,同时取一等重蒸馏水作空白放入离心机中离心5m in,转速9000r・m in-1,取上层清液,均加碘化铋钾试剂同上离心5m in,发现样品管中有棕黑色沉淀生成,而空白管没有沉淀.可证实提取物为生物碱成分.1.2.4 标准曲线精密称取盐酸麻黄碱对照品0.0134g,置于100mL容量瓶中,加水定容至刻度,得含盐酸麻黄碱浓度为134mg・L-1的对照品溶液.精密量取盐酸麻黄碱对照品标准溶液1,2,3,4,5mL置于干燥的分液漏斗中,分别补水至5mL,再精确加入5mL pH5.4柠檬酸2柠檬酸钠缓冲液,1mL0.1%溴麝香草酚蓝溶液,氯仿10mL,振摇混匀待用.精确量取1mL于10mL容量瓶中用氯仿定容至刻度,摇匀.另取5mL二次纯化水,同法操作,作为空白对照液,在412n m进行测定,以取样量为横坐标,吸收值为纵坐标,得回归方程A= 0.0092C-0.0016,r=0.9999(n=5).结果表明,盐酸麻黄碱在16-80μg・mL-1范围内线性良好.2 结果与讨论2.1 金线莲总生物碱的含量测定[10]取金线莲总生物碱0.0276g用氯仿溶解并定容到100mL备用.精确移取适量的待测液于分液漏斗中,实验方法同1.2.4测其吸光值,5次测定平均值为0.0794%,RS D为0.12%.2.2 加样回收实验精密称取金线莲总生物碱16.5mg,准确加入浓度为134mg・L-1的盐酸麻黄碱对照品溶液4mL.按照1.2.4项制备供试液和空白对照液,在最大吸收波长处测定样品,其结果见表1,平均回收率为103.13%, RS D为0.2687%.2.3 讨论生物碱作为中草药有效成分之一是近年来研究的热点.传统的生物碱提取分离方法有溶剂法,离子交 化 学 研 究2006年70换树脂法等.我们平行比较了0.1%盐酸传统的溶剂提取方法以及本文采用的阳离子交换树脂法.提取率分别为:0.1%盐酸为0.00148%,阳离子交换树脂法为0.0794%.结果表明,阳离子交换树脂上吸附生物碱用混合溶剂索氏提取生物碱稳定,且提取效率高,操作简单,溶剂用量少,证明是一种高效的总生物碱提取方法.表1加样回收实验一览表Table1 The results of the recovery test(n=5)编号样品中总生物碱量/mg加入标品盐酸麻黄碱量/mg测得量/mg回收率/%RS D/%116.60.53617.1103.01216.70.53617.2102.99316.50.53617.0103.030.2687416.60.53617.1103.01516.60.53617.2103.61 金线莲与盐酸麻黄碱紫外扫描图谱在412nm处均有较大吸收,且T LC法样品在412n m处展距与标准品相符.由于总生物碱中各种生物碱紫外吸收具有加和性,故本法采用将经阳离子交换树脂吸附,索氏提取后的金线莲粗总生物碱含量折算为盐酸麻黄碱的含量,对金线莲总生物碱含量进行测定.总生物碱的含量测定方法众多,如紫外分光光度法、紫外薄层层析法、重量法、滴定法和酸性染料比色法等.本文采用酸性染料比色法.该法灵敏度高,准确性好,操作简便,克服了重量法和滴定法均需多次萃取易造成误差而导致重现性差的不足.台湾学者陈春雄等[8]从本属不同种的台湾金线莲中提取出生物碱,其主要成分是异亮石松碱(is oselag2 ine),动物实验结果表明,其有强烈的镇痛作用.通过对金线莲总生物碱的提取及含量测定,进一步了解其活性,可为日后对其进行结构改造以获得有效的镇痛剂提供依据.参考文献:[1]中国科学院中国植物志编委.中国植物志(第17卷)[M].北京:科学出版社,2000.204.[2]唐明仪,王建勤.对《中药大辞典》载虎头蕉物种的探讨[J].海峡药学,1995,7(2):76-79.[3]Shyur L F,Chen C H,Loa C P,et al.I nducti on of apop t osis in MCF27hu man breast cancer cells by phyt ochem icals fr om anoec2tochilus for m osanus[J].B io m ed Sci,2004,11:928∃939.[4]Shyur L F,Chen C H,Yang N S,et al.U se of anoectochilus for m osanus p lant extracts and their derived fracti ons herbal medi2cines or nutraceutical supp le ments for che mop reventi on or treat m ent of hu man 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生物碱类药物含量测定方法
生物碱类药物含量测定方法
生物碱是一类具有生物活性的碱性化合物，在自然界中广泛存在，尤其在植物和微生物中含量丰富。
生物碱的含量测定方法有多种，常用的方法包括比色法、紫外-可见分光光度法、荧光法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。
1.比色法：该方法是通过生物碱与特定的显色剂发生化学反应，
生成有色离子或分子，根据颜色的深浅程度进行含量测定的方
法。
例如，苦参碱可以通过与溴甲酚绿显色剂发生反应来进行
含量测定。
2.紫外-可见分光光度法：该方法是通过测量生物碱溶液在紫外和
可见光区的吸收光谱，进而计算其含量的方法。
例如，盐酸吗
啡碱可以在254nm波长处进行含量测定。
3.荧光法：该方法是利用生物碱分子在特定波长激发下发出的荧
光强度来计算其含量的方法。
例如，荧光素钠在紫外光激发下
可以发出绿色荧光，可以用于含量测定。
4.薄层色谱法：该方法是利用生物碱在不同极性溶剂中的分配系
数差异，将样品溶液展开在薄层板上，然后用显色剂显色，根
据斑点面积或荧光强度来计算生物碱的含量。
5.高效液相色谱法：该方法是利用高效液相色谱仪对生物碱进行
分离和检测，然后根据峰面积或峰高来计算生物碱的含量。
该
方法具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点，是生物碱
含量测定的常用方法之一。
一种金线莲苷的提取方法[发明专利]
![一种金线莲苷的提取方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/4a5091e4c0c708a1284ac850ad02de80d4d8063b.png)
(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201510511016.3(22)申请日 2015.08.19C07H 17/04(2006.01)C07H 1/08(2006.01)(71)申请人福建金草生物集团股份有限公司地址361000 福建省厦门市翔安区海翔大道海鸣路506-508号(72)发明人单世斌 吴立荣 庄娜丽(74)专利代理机构厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218代理人黄典湘(54)发明名称一种金线莲苷的提取方法(57)摘要本发明公开了一种金线莲苷的提取方法。
步骤为：将金线莲先用30-60℃石油醚索提2h后，再用甲醇索提2h ；液相色谱金线莲苷峰面积1208-1432；获得金线莲苷提取液；将获得的提取液浓缩至干，再加入蒸馏水，静置后除去水不溶物，得到处理的甲醇提取液；再使用D101大孔吸附树脂柱对处理的甲醇提取液进行粗分离；接着用加压硅胶色谱柱对金线莲苷粗提取物进行细分处理；最后使用D101大孔吸附树脂柱进行纯化得到金线莲纯化物。
所得利用核磁共振碳谱、氢谱以及质谱来确定此化合物为金线莲苷，并通过高效液相色谱确定其纯度为98.2％。
本发明方法提取工艺简单、分离时间短、分离效果好，获得的金线莲苷纯度高。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书6页 附图5页CN 105037462 A 2015.11.11C N 105037462A1.一种金线莲苷的提取方法，其特征在于，步骤为，提取：先用30-60℃石油醚索提2h后，再用甲醇索提2h；液相色谱金线莲苷峰面积1208-1432；获得金线莲苷提取液；浓缩：将获得的提取液浓缩至干，再加入蒸馏水，静置后除去水不溶物，得到处理的甲醇提取液；粗分:使用D101大孔吸附树脂柱对处理的甲醇提取液进行分离；细分：使用加压硅胶色谱柱对金线莲苷粗提取物进行细分处理；纯化：再次使用D101大孔吸附树脂柱进行纯化得到金线莲纯化物。
金线莲及其提取物降血糖实验研究
文章编号:1000-2235(2000)04-0350-04金线莲及其提取物降血糖实验研究陈 卓 黄自强摘要: 目的 确定金线莲降血糖的有效成分,并对其降血糖机理进行初步探讨。
方法 昆明种小鼠100只,分成10组(n =10),分别用金线莲水煎剂、石油醚提取物、丙酮提取物及以上溶剂提取后的水提物(310和610g kg )、格列本脲(50m g kg )和等体积生理盐水(011m l 10g 体重)灌胃,测定各组正常小鼠的血糖水平及以葡萄糖(4g kg )、四氧嘧啶(100m g kg )所致小鼠高血糖模型的血糖水平,并对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠进行胰腺的病理切片检查。
结果 310g kg 和610g kg 的金线莲及其水提物灌胃对葡萄糖、四氧嘧啶引起的小鼠高血糖均有抑制作用(P <0101或P <01001),对正常小鼠的血糖亦有降低作用(P <01001),其降糖效应明显优于石油醚提取物和丙酮提取物。
结论 金线莲降血糖的有效成分主要为水溶性物质,降血糖的主要途径不是通过减弱四氧嘧啶对胰岛细胞的损伤或改善受损伤细胞的途径。
关键词: 金线莲;提取物;降血糖;四氧嘧啶;小鼠中图分类号: R 282.71;R 972.6 文献标识码: A收稿日期:2000-06-20作者单位:福建医科大学药学系药理教研室,福州 350004作者简介:陈 卓(1970～),女,讲师,医学硕士. 金线莲(H erba A noectoch ili )为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰(A noectoch ilus rox bu rg h ii (W all .)L indl.)的干燥全草,具有清热凉血、祛风利湿、强心利尿、固肾平肝等功效,主治肾炎、膀胱炎、肺炎、高血压、风湿病、小儿急惊风等症[1]。
据报道单味金线莲全草可治疗糖尿病[2],笔者在前期实验中也证实了金线莲的降血糖作用[3],为进一步探寻其发挥降血糖作用的主要活性成分,对金线莲的不同提取物进行降血糖筛选实验,分别用全方水煎剂、石油醚提取物、丙酮提取物及以上溶剂提取后的水提物进行小鼠降血糖作用的药理研究。
金线莲繁殖技术及其营养成分测定
金线莲繁殖技术及其营养成分测定为快速繁殖金线莲及探究不同移栽时间对金线莲营养成分的影响,本文将江西铜鼓野生金线莲引种至温室栽培,并对其进行授粉及种子活性检测实验,以获取本研究所需的实验材料;以金线莲种子为材料,以酶浓度、处理时间和温度为3因素设计正交实验,研究了蜗牛酶处理对种子萌发的影响;以从金线莲根部分离出来的内生菌为材料,研究了其与种子共生培养对种子萌发和生长的影响;分别以NAA、6-BA、S-3307和TDZ、6-BA、NAA为三因子对原球茎增殖和分化进行了试验;以茎段和顶芽为材料,分别以TDZ与NAA和6-BA与NAA不同浓度及配比,进行丛生芽诱导试验;以NAA和活性炭不同浓度及配比进行了生根试验;以发酵后的牛粪、松树皮和木屑为基质,进行了试管苗移栽试验;以野生金线莲、组培苗和移栽2、4、6个月的苗为材料,分别采用苯酚硫酸法、三氯化铝显色分光法、氨基酸自动分析仪法以及ICP-AES法,对多糖、黄酮、氨基酸以及微量元素进行测定。
结果表明:1、开花第1 d的授粉率比第2、3d的要高,异花授粉率比自花的要高,故开花后的第1d进行异花授粉效果最好,授粉率达83.61%,种子的活力达98.72%;此外,种子的活力随贮藏时间的延长而降低,故种子随采随播效果最好。
蜗牛酶处理种子以3 mg/mL蜗牛酶在30℃条件下处理40 min组合效果最好,种子的萌发率可达80.03%,但根据极差分析得出最佳的处理组合应为:2 mg/mL 蜗牛酶在30℃条件下处理40 min;酶浓度对萌发率影响极显著,处理时间影响显著。
2、最佳的增殖培养基为MS+0.5 mg/L S-3307+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,增殖系数为6.17,S-3307、6-BA对原球茎增殖具有极显著作用,NAA具有显著作用;最佳的分化培养基为MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L6-BA+0.60mg/L NAA,分化率为83.3%,TDZ、NAA对原球茎分化作用显著;最佳的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+0.05%Ac,生根率为96.5%;木屑和牛粪混合基质适合金线莲种苗的移栽,当木屑:牛粪=2:1时,金线莲成活率和单株净增重均最好,分别为91%和0.26 g,树皮和牛粪混合基质不适合金线莲移栽;林下栽培成活率较高,为82%,但生长较慢。
高效液相色谱法检测金线莲中核苷类成分
２０１９Oc
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obe
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Vo
l５３No５
JFu
i
an MedUn
i
v
j
３０９
高效液相色谱法检测金线莲中核苷类成分
吴萍萍,黄丽英
摘要: 目的 对不同产地、不同种类、不同生长方式的金线莲中的核苷及碱基类成分进行分析. 方法
对金线莲提取物采 用 HPLC
ＧUV 法 进 行 含 量 测 定,采 用 LC
A~L:为金线莲不同样本编号 ．
１．
１．２ 试 剂 胞 嘧 啶 核 苷 (
９９％ ,Lo
t＃
L１０４)、腺 嘌 呤
(
９９％ ,Lo
t＃ C１７２７００２)、次 黄 嘌 呤 (
９９％ ,Lo
t＃
H１６０３０６１)、胸腺嘧啶(
９８％ ,
Lo
肝炎、高血压病、肿 瘤、肾 炎、糖 尿 病、小 儿 惊 风 高 热
等症 [１Ｇ３].近年来的研究表明,金线莲中含有多种化
学成分,如黄酮类、核苷类、多糖类、生物碱、氨基酸、
酯类、甾醇、三萜 类、微 量 元 素 等 物 质 [４Ｇ７],但 迄 今 为
止,关于金线莲中核苷类成分的研究较少.
核苷 类 化 合 物 作 为 中 药 材 中 的 基 础 类 物 质 之
ＧMS 法 进 行 鉴 别. 色 谱 条 件 是 采 用 Ag
i
l
en
tTC
ＧC１８
(
２５０mm×４．６mm,
５μm)作为 色 谱 柱;甲 醇 (
B)－０．
０５％ 乙 酸 铵 水 溶 液 (A)为 流 动 相 梯 度 洗 脱 条 件;流 速 为
０．
８mL/mi
金线莲有效成分分析及生理活性研究
金线莲有效成分分析及生理活性研究金线莲含有生物碱、氨基酸、糖类、皂昔、街体、挥发油等成，具有保肝、抗HBV、降压、强心、降血糖、镇痛、抗炎等药理活性。
研究表明，金线莲的氨基酸组成成分、含量及抗衰老活性的微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。
柯伙钊等利用色谱联用技术（GC-MS）对台湾组培金线莲中挥发油的化学成分进行测定，其中乙醚萃取的挥发油中分离出42种成分，鉴定出39种组分，占挥发油总量的98.479%，主要成分为烷烃类化合物；正己烷萃取的挥发油中分离出24种成分，鉴定出23种组分，占挥发油总量的99.147%，主要成分为:2-甲氧基-3-烯丙基苯酚、亚油酸、棕桐酸和亚麻酸甲醋等。
胡国海等利用干法灰化处理样品，用火焰原子吸收光谱连续测定人工种植金线莲中Zn、Mn、Cu、Fe、Ni、Co、Cr、Cd、Pb 9种微量元素的含量并将其与野生金线莲比较，野生的与人工种植的比较，Fe,Mn,Zn,Co,Cu元素均比人工种植的高；而Cr元素含量人工种植的比野生的高，有害元素在人工种植和野生中的含量都很低或未检出。
近年来，对金线莲内生真菌化学成分及生理活性研究已成为热点。
谭小明等以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌为实验菌株，用琼脂块法和纸片扩散法对分离的真菌进行了抑菌实验，从广西野生金线莲植物中共分离到23株内生真菌，其中有6株真菌对至少1种实验菌株有抗菌活性，占总分离菌株的26.0%，表明广西野生金线莲内生真菌中存在着丰富的抗菌天然活性物质，这可为寻找新型抗菌物质提供资源。
目前我国对金线莲的研究主要集中在资源普查、生物学形态特征考察、栽培等方面，对金线莲的化学成分及药效活性作用机制的深度研究并不多。
采用现代生物技术通过组织培养加速开发金线莲，以缓解民间珍惜药用植物资源的日趋枯竭，但为更好的体现金线莲的药用价值，还要重视对金线莲药效活性机制的研究，这对发掘民间传统中草药具有深远的意义。
肇庆学院生命科学学院生物实验技能决赛实验设计书——珍稀药用植物金线莲质量测定的初步研究
肇庆学院生命科学学院生物实验技能决赛实验设计书珍稀药用植物金线莲质量测定的初步研究摘要：以金线莲为试验材料, 通过测重法测定生物量与含水量、蒽酮比色法测定可溶性总糖的含量，对评价其质量做初步探讨，同时为金线莲进一步研究与开发提供一定参考意义。
关键词：金线莲 生物量 含水量 可溶性糖 测定金线莲［Anoectochilus roxburghii (wall.) Lindl ］为兰科开唇兰属（Anoectochilus ）多年生草本植物，又名花叶开唇兰、金线兰，是我国传统珍贵药材，素有“药王”、“金草”、“神药”和“乌人参”等美称[1]。
据研究报道，金线莲中氨基酸组成、成分含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参[2]，且富含有多糖、强心苷类、有机酸、甾体化合物、黄酮类化合物、生物碱等[3-5]等多种成分，广泛应用于风湿性关节炎、高血压、糖尿病、肾病和尿血等症状的治疗，以及病后体虚恢复等方面，被称为“药中之王”[3,4]。
此外，金线莲还是的一种室内观叶珍品。
目前，金线莲的质量标准尚未被制定，较统一的意见为市售金线莲鲜品、干品多糖均不低于15%（以干基计），黄酮均不低于0.8%（以干基计），干品另外要求水分小于12%[11]。
可见，金线莲质量（生物量、含水量及糖的含量等）的测定对金线莲进一步研究有着重要意义。
图1 金线连1实验仪器2实验材料及试剂（试剂浓度等在第一栏注明）3实验目的本实验旨在对金线莲的质量进行测定，通过实验掌握植物生物量与含水量的测定方法[6]，理解并掌握蒽酮法测定可溶性总糖含量的原理与方法[7-8]，为进一步研究做好铺垫。
4实验原理4.1 生物量与含水量的测定狭义的生物量是用生物的重量表示，可以是鲜重或干重。
考虑到金线莲作为中药材即可鲜草出售，又可干草出售，故此，既测其鲜重，又测干重。
利用水遇热蒸发的原理，加热使植株内的水分蒸发，测出干重，即又可测含水量[6]。
4.2 可溶性糖的测定可溶性糖在浓硫酸作用下，脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色衍生物，在620 nm处有最大吸收峰。
高效液相色谱法测定金莲花中的生物碱
目前 ，金莲 花总 生物 碱的提 取 分离 仍 然沿 用传 统 的 有 机溶 剂 提取 法 ，即采 用 非极 性 有 机溶 剂 （ 氯 如 仿 、乙醚等 ）萃 取［．但 是 采用此 法 耗时长 ，难 于处理 ，成 本高 ，环境 污染严 重． 大孔 吸附树脂 分离技 术 ３ ］
Ｋｅ ｒ ： ｓ ｌｄ ｐｈ ｓ ｘ ｒ ｃ ｉ ｎ；ｈｉ ｈ ｐｅ ｆ ｒ ｎ ｅ ｌｑ ｉ ｈ ｏ ｔ ｇｒ ｐ ｙ ｗｏ ｄｓ ｏ ｉ — ａ ｅ ｅ ｔ ａ ｔｏ ｇ ｒｏ ｍａ ｃ ｉ ｕ ｄ ｃ ｒ ｍａ ｏ ａ ｈｙ；Ｔｒ ｌｉ ； Ａｌ ａ ｏ ｄ ｏ ｌｕｓ ｋ ｌｉ
金 莲 花为 毛莨科 金莲 花属 （ ｒｌｉｓ ） 物 ，系多年 生 草本 植 物ｎ ，在世 界 上共 有 约 ２ Ｔ ｏｌ ｕ Ｌ． 植 ］ Ｏ多个 品种 ， 其 中有 ｌ ４种产 于 中国 ，以 河北 、山西 、内蒙 古 产 量 最 多．金 莲 花 的 主要 有 效 化学 成 分 是 总黄 酮 、有 机 酸 、生物碱 类． 生物 碱有 降压 、消 炎 、抗 肿瘤 等功效 ［ ． ２ ］
小 ． 结 论 用 活 性 炭 去 除 色 素 会 降低 组 分 的含 量 ． 活 性 炭 在 吸 附 色 素 的 同 时 吸 附 生 物碱 类物 质 ．
关键词 ：固相萃取 ；高效液相色谱 ；金莲花 ；生物碱
中 圈 分 类 号 ：Ｏ ６ ７ ７ ５ ． ２ 文 献 标识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１７ —４２ （０ ８ １０ ４—３ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ３１９ ２ ０ ）０ —０ ３０
ｔ ． Ｒｅ ｕ ｔ Ｔｈ ｒ ｒ ｏ ｒ ａ ｋ ｌ ｉ ｓ ｉ ｒ ｌ ｕ ｎ ｌ ｈ ｉ ｅ ｅ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ｉ ｎ ｔｍｅ ｕ ｉ ｇ ｍｅ ｈ ｎ ｌ ｓ ｙ ｓ ｌｓ ｅ ｅ ｗｅ ｅ ｆ ｕ ｌ ａ ｏ ｄ ｎ ｔ ａ ｌ ｓａ ｄ ｓｉ ｔｄ ｆ ｒ ｎ ｅ ｉ ｅ ｅ ｔ ｉ ｓｎ ｔ ａ ｏ ｉ ｇ ｆ ｏ ａ ｍｏ ｉ ｈ ｓ ．Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ ｂｌ ｐ ａｅ ｅ ｎ ｌ ｓｏ Ｕ ｓｎ ｃ ｉ ｅ ｃ ｒ ｏ ｏ ｄ ｐ ｉ ｅ ｐ ｇ ｅ ｔ ｗｉ ｏ ｒ ｔ ｅ ａ ｋ ｌ ｉ ｏ ｔ ｎ ．Ａｎ ｉ ｇ ａ ｔｖ ａ ｂ ｎ ｔ ｅ ｒｖ ｉ ｍ ｎ ｌ ｌ ｗｅ ｈ ｌ ａ ｏ ｄ ｃ ｎ ｅ ｔ ｌ ｄ ａ ｔ ｅ ｃ ｒ ｏ ａ ｄ ｏ ｂ ｂ ｔ ｉ ｍ ｅ ｔａ ｄ ａ ｋ ｌ ｉ ． ｃ ｉ ａ ｂ ｎ ｃ ｎ ａ ｓ ｒ ｏ ｈ ｐ ｇ ｎ ｎ ｌ ａ ｏ ｄ ｖ
一种从金线莲提取液中分离金线莲总生物碱的方法[发明专利]
![一种从金线莲提取液中分离金线莲总生物碱的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/d740dc80a98271fe900ef936.png)
专利名称：一种从金线莲提取液中分离金线莲总生物碱的方法专利类型：发明专利
发明人：刘婷婷
申请号：CN202011605778.7
申请日：20201230
公开号：CN112587618A
公开日：
20210402
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种从中药金线莲提取液中分离金线莲总生物碱的方法，这种方法包括以下步骤：1)选取新鲜的金线莲，将选取的金线莲进行水洗并晾干至叶片萎谢；将晾干后的金线莲在真空环境下微波干燥；将经过微波干燥后的金线莲进行粉碎，将粉碎后的金线莲加入蒸馏水，对物质进行分离提纯，得到提纯液体；将得到的提纯液体进行超声波提取，得到金线莲提取液；2)将步骤1)得到的金线莲提取液进行减压浓缩，得到浓缩金线莲提取液；通过本发明从金线莲提取液中分离金线莲总生物碱的方法得到的总生物碱纯度达90％以上，大大提高了利用度，保证了总生物碱纯度。
申请人：联和东浩(厦门)药业有限公司
地址：361101 福建省厦门市翔安区马巷镇海鸣路506-3号南楼301室
国籍：CN
代理机构：深圳中创智财知识产权代理有限公司
代理人：陈慧
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中药制剂中总生物碱含量测定方法
中药制剂中总生物碱含量测定方法
总生物碱是指在中药中存在的所有生物碱成分的总和，是中药质量控制的一个重要指标。
本文介绍中药制剂中总生物碱含量的测定方法。
1. 实验仪器和试剂
（1）仪器：紫外可见分光光度计、电磁炉、恒温水浴器、滤膜器、电子天平等。
（2）试剂：苯酚酞指示剂、硫酸、磷酸、氢氧化钠、甲醇、乙醇、乙酸。
2. 样品制备
将样品粉末加入乙醇中，搅拌均匀，静置过夜，过滤，取过滤液，以甲醇稀释到适当浓度。
3. 建立标准曲线
（1）取各种浓度的对照品，稀释后以甲醇为溶剂，测量其吸光度。
（2）绘制标准曲线，以吸光度为横坐标，生物碱含量为纵坐标，进行线性回归分析。
4. 样品测定
（1）取适量样品，稀释后以甲醇为溶剂，测量其吸光度。
（2）根据标准曲线，计算出样品中总生物碱的含量。
5. 结果计算
样品中总生物碱含量的计算公式为：总生物碱含量（mg/g）=（样
品吸光度-空白吸光度）/标准曲线斜率×稀释倍数×样品量（g）。
6. 结论
本方法简便、可靠，适用于中药制剂中总生物碱含量的测定。
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第17卷第4期化 学 研 究V o.l 17 N o .42006年12月CHE M I CAL RESEARC H D ec .2006金线莲总生物碱的提取及含量测定钟添华1,黄丽英1,王 勇2(1.福建医科大学药学院,福建福州350004; 2.福建省药物检验所,福建福州350004)收稿日期:2006-08-02.作者简介:钟添华(1980-),男,硕士,主要从事天然药物有效成分的提取及结构鉴定工作,E O m ai:l zt h23-1980@163.co m.摘 要:建立了金线莲总生物碱的提取和测定方法.将金线莲全草粉末用p H =2的水溶液提取,以阳离子交换树脂吸附后,经酸化,用氯仿/甲醇(体积比2B 1)对其进行索氏提取,蒸发有机溶剂.冷冻干燥即得金线莲总生物碱.以盐酸麻黄碱为对照品,酸性染料比色法测定总生物碱,折算为盐酸麻黄碱获得总生物碱含量.测得金线莲总生物碱含量是0.0794%,线性回归方程A =0.0092C -0.0016(r =0.9999),回收率103.13%.本提取及含量测定方法操作简单,总生物碱的提取率较高.关键词:金线莲;总生物碱;提取分离;酸性染料;比色法中图分类号:R 284.2文献标识码:A 文章编号:1008-1011(2006)04-0068-03Extraction and Deter m i nation of t he A l kaloi ds i nAnoectochil us For mosanusZ HONG T i a n-hua 1,HUANG L-i y i n g 1,WANG Y ong 2(1.P har m ac y C oll ege of Fujian M e d ic a l Un i versit y,Fuzh ou 350004,Fujian,Ch i na;2.F ujian Insitit u te for D rug Control ,Fuzhou 350004,Fujian,Ch i na )Abstract :Developed a m ethod to extract and deter m ine the to tal alkaloids fro m anoectoch ilus for m osa -nus .H erbs of anoectochilus for m osanus w ere leached by aci d ifi e d w ater ,and the total alka l o ids i n t h eleached so l u ti o n w ere absorbed by cation i c exchange resi n ,then t h e resi n w as acidified and extractedw ith a m i x ed organ ic so lvent i n a Soxh let extractor .The tota l a l k alo i d s w ere tested at 412n m w ith t h espectroscopy by acid dye .The cali b rati o n cur ves of alka l o ids w ere li n ear(r =0.9999).The recoveryw as perfect(103.13%).M ostly ,the content o f the to tal alka loids i n the herb is 0.0794%.Them et h od for ex traction and de ter m inati o n is si m ple ,qu ick w it h h i g h recovery .Keywords :anoectochilus for m osanus ;to ta l a l k alo i d s ;extracti o n ;acid dye ;co l o ri m etric m ethod金线莲系兰科(Orchi d aceae)开唇兰属(Anoectochil u s )多年生草本植物,该属植物已发现35种,在我国约有20种[1].本属的部分种全草民间作药用,其中具有神奇功效、享有/药王0、/金草0、/乌人参0的珍稀草药金线莲备受人们的关注[2],特别在福建和台湾民间,广泛用于治疗肝炎、肾炎、肺炎、小儿惊风高热、糖尿病、高血压、肿瘤、风湿病等[3],还兼治小儿发育不良及毒蛇咬伤[4].据报道,金线莲中含有糖苷类化合物、有机酸、甾体化合物、黄酮类化合物、糖类化合物、生物碱[5-10]等.作者主要研究了金线莲中总生物碱的提取及测定.1 实验部分1.1 仪器与试剂DJ -10A 型倾倒式粉碎机(上海淀久中药机械制造有限公司),UV-752PC 型紫外分光光度计(上海光谱第4期钟添华等:金线莲总生物碱的提取及含量测定69仪器有限公司),KQ-250D型医用数控超声清洗器,RE-52AA型旋转蒸发仪,FD-1冷冻干燥机(北京博医康技术公司).盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:714-9903,供含量测定);0.1%溴麝香草酚蓝乙醇溶液;柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH5.4);聚苯乙烯磺酸氢型离子交换树脂(型号:001@7型,北京化工厂);金线莲干燥全草(购自福建省同春药业有限公司,产地广西.经福建省药检所中药室游勇基主任药师鉴定).以上试剂除专门提到外,均为分析醇,实验用水为二次蒸馏水.1.2实验方法1.2.1树脂的预处理将新的树脂加适量的丙酮在索氏提取器中抽提2h,除去有机物,将树脂取出晾干,蒸馏水湿法装柱.柱子先用3%盐酸淋洗,除去Fe3+,铁氰化钾检查不变色后,用3%氢氧化钠淋洗,使树脂转化为钠型,蒸馏水冲洗到弱碱性,用稀盐酸冲洗到p H约为3,使之转化为H型,最后用蒸馏水冲洗到中性,且Ag NO3检验无AgC l为止,准备上样.1.2.2金线莲总生物碱的提取将金线莲全草粉末300g(过80目筛)放入下口瓶中;用pH2的盐酸浸泡72h,并加入少许氯仿防止溶液发霉变质;再将下口瓶超声1h,取出,于离心机中离心30m in,转速3500r#m i n-1,抽滤,收集滤液备用.将滤液流经处理好的阳离子交换树脂,调节流速使生物碱完全吸附到树脂上,尔后流速控制在约0.5mL# m in-1.可以观察到当含有生物碱的滤液通过层析柱时,一条棕黑色的色带自上而下缓缓向下移动.取上述滤渣再浸提72h,进行下一次渗漉,操作同上,用碘化铋钾检测直至渗漉液中检测不出生物碱为止.当层析柱中大部分树脂吸附了生物碱后,用水洗树脂至中性,将柱中吸附有生物碱的树脂全部倒出,在70-80e的水浴中烘烤随时观察,避免树脂烤焦,烘干后的树脂拌入2m o l#L-1的盐酸适量,搅拌均匀.放置4h后将树脂用滤纸包好放入索氏提取器中,先用氯仿/甲醇(2B1)浸泡过夜,然后进行回流提取12h.当提取液接近无色时,可适量滴加几滴浓盐酸,再回流提取,如此重复5次,当提取液中检测不出生物碱时,旋转蒸发溶剂冷冻干燥得粗总生物碱3.3234g.1.2.3生物碱检定取2mL浓缩液置于离心管中,同时取一等重蒸馏水作空白放入离心机中离心5m in,转速9000r# m in-1,取上层清液,均加碘化铋钾试剂同上离心5m i n,发现样品管中有棕黑色沉淀生成,而空白管没有沉淀.可证实提取物为生物碱成分.1.2.4标准曲线精密称取盐酸麻黄碱对照品0.0134g,置于100m L容量瓶中,加水定容至刻度,得含盐酸麻黄碱浓度为134m g#L-1的对照品溶液.精密量取盐酸麻黄碱对照品标准溶液1,2,3,4,5mL置于干燥的分液漏斗中,分别补水至5m L,再精确加入5mL p H5.4柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,1mL0.1%溴麝香草酚蓝溶液,氯仿10mL,振摇混匀待用.精确量取1mL于10mL容量瓶中用氯仿定容至刻度,摇匀.另取5mL二次纯化水,同法操作,作为空白对照液,在412nm进行测定,以取样量为横坐标,吸收值为纵坐标,得回归方程A= 0.0092C-0.0016,r=0.9999(n=5).结果表明,盐酸麻黄碱在16-80L g#m L-1范围内线性良好. 2结果与讨论2.1金线莲总生物碱的含量测定[10]取金线莲总生物碱0.0276g用氯仿溶解并定容到100mL备用.精确移取适量的待测液于分液漏斗中,实验方法同1.2.4测其吸光值,5次测定平均值为0.0794%,RSD为0.12%.2.2加样回收实验精密称取金线莲总生物碱16.5m g,准确加入浓度为134m g#L-1的盐酸麻黄碱对照品溶液4mL.按照1.2.4项制备供试液和空白对照液,在最大吸收波长处测定样品,其结果见表1,平均回收率为103.13%, RSD为0.2687%.2.3讨论生物碱作为中草药有效成分之一是近年来研究的热点.传统的生物碱提取分离方法有溶剂法,离子交70化学研究2006年换树脂法等.我们平行比较了0.1%盐酸传统的溶剂提取方法以及本文采用的阳离子交换树脂法.提取率分别为:0.1%盐酸为0.00148%,阳离子交换树脂法为0.0794%.结果表明,阳离子交换树脂上吸附生物碱用混合溶剂索氏提取生物碱稳定,且提取效率高,操作简单,溶剂用量少,证明是一种高效的总生物碱提取方法.表1加样回收实验一览表T able1T he results of t he recovery test(n=5)编号样品中总生物碱量/m g加入标品盐酸麻黄碱量/mg测得量/mg回收率/%RSD/%116.60.53617.1103.01216.70.53617.2102.99316.50.53617.0103.030.2687416.60.53617.1103.01516.60.53617.2103.61金线莲与盐酸麻黄碱紫外扫描图谱在412n m处均有较大吸收,且TLC法样品在412nm处展距与标准品相符.由于总生物碱中各种生物碱紫外吸收具有加和性,故本法采用将经阳离子交换树脂吸附,索氏提取后的金线莲粗总生物碱含量折算为盐酸麻黄碱的含量,对金线莲总生物碱含量进行测定.总生物碱的含量测定方法众多,如紫外分光光度法、紫外薄层层析法、重量法、滴定法和酸性染料比色法等.本文采用酸性染料比色法.该法灵敏度高,准确性好,操作简便,克服了重量法和滴定法均需多次萃取易造成误差而导致重现性差的不足.台湾学者陈春雄等[8]从本属不同种的台湾金线莲中提取出生物碱,其主要成分是异亮石松碱(isoselag-i n e),动物实验结果表明,其有强烈的镇痛作用.通过对金线莲总生物碱的提取及含量测定,进一步了解其活性,可为日后对其进行结构改造以获得有效的镇痛剂提供依据.参考文献:[1]中国科学院中国植物志编委.中国植物志(第17卷)[M].北京:科学出版社,2000.204.[2]唐明仪,王建勤.对5中药大辞典6载虎头蕉物种的探讨[J].海峡药学,1995,7(2):76-79.[3]Shyur L 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