精制蟒蛇油抗炎抗过敏止痒作用的实验研究

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新中医 2010 年 12 月 第 42 卷第 12 期
JOURNAL OF NEW CHINESE MEDICINE
December 2010 Vol.42 No.12
·119·
精制蟒蛇油抗炎抗过敏止痒作用的实验研究
黄国鑫,任薇,武文,苏冀彦,赖正权,易宇阳,苏子仁
广州中医药大学新药开发研究中心,广东 广州 510006
量组与阳性对照组比较,差异均无显著性意义 ( P > 0. 05 ) ,提 示蟒蛇油抑制皮肤血管通透性的效果与阳性药效果相当。
表 1 蟒蛇油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 ( x ± s)
组 别 n 给药剂量 ( mL / kg ) 耳肿胀度 ( mg ) 抑制率 ( % )
正常对照组 12

1. 10 ± 0. 12
[ 收稿日期 ] 2010 - 08 - 22 [ 作者简介 ] 黄国鑫 ( 1985 - ) ,男,硕士研究生,研究方向: 中药新药研究与开发。 [ 通讯作者 ] 苏子仁 ( 1964 - ) ,男,研究员,研究方向: 中药新药研究与开发。
·120·
新中医 2010 年 12 月 第 42 卷第 12 期
[关键词 ] 蟒蛇油; 抗炎; 抗过敏; 止痒; 动物实验; 小鼠 [ 中图分类号 ] R285. 5 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号 ] 0256 - 7415 ( 2010 ) 12 - 0119 - 03
蟒蛇油为蟒科动物蟒蛇的脂肪经炼制提取而成。 《本草纲 目拾遗》里又叫蟒油, 《调疾饮食辨》里称蚺蛇油。蟒蛇油味 甘,性平。祛风,解毒,清热润肤。主治风毒癞疾,漏疮,冻 疮,烫火伤,皮肤皲裂。蛇油的应用在我国历史悠久,中医常 用它治疗冻疮、皲裂、湿疹、烫伤等皮肤疾患。近年来有文献 报道蛇油具有抗炎、止痛、加速皮肤的新陈代谢、增强细胞活 力等功能 [1 ] 。因此,本研究从抗炎、抗过敏、止痒等几个方面 对蟒蛇油进行药理实验研究。 1 材料与方法 1. 1 材料 1. 1. 1 动物 昆明小鼠,体重 ( 20 ± 2 ) g,SPF 级,由广州中 医药大学实验动物中心提供。 1. 1. 2 药品 精制蟒蛇油,由广州中医药大学新药开发研究 中心提供; 复方醋酸地塞米松乳膏 ( 皮炎平 )由三九医药股份有 限公司生产,批号: 0911251s; 二甲苯由广东光华化学厂有限 公司生产,批号: 20090721; 组胺由国药集团化学试剂有限公 司生产,批号: F20090423; 2,4 - 二硝基氯苯 ( DNCB ) 由天津 市光复精细化工研究所生产,批号: 20070713; 4 - 氨基吡啶 ( 4 - AP ) 由 sigma 公司生产; 生理盐水由佛山双鹤药业有限责 任公司生产,批号: 0909204D。 1. 2 方法 1. 2. 1 抗炎实验 健康昆明种小鼠 72 只,雌雄各半,体重 18 ~ 22g,随机分为精制蟒蛇油高剂量组 ( 10mL / kg ) 、精制蟒 蛇油中剂量组 ( 5mL / kg ) 、精制蟒蛇油低剂量组 ( 2. 5mL / kg ) 、 模型对照组、正常对照组、复方醋酸地塞米松乳膏 ( 皮炎平 )阳 性对照组 ( 0. 5g / kg ) ,每组 12 只。高、中、低剂量组、阳性
2. 3 蟒蛇油对 DNCB 诱导的小鼠 DTH 的影响 见表 3。模型 对照组与正常对照组比较,差异有显著性或非常显著性意义 ( P < 0. 05, P < 0. 01 ) ,说明造模成功; 蟒蛇油高剂量组、中 剂量组与模型对照组比较,差异有显著性或非常显著性意义 ( P < 0. 05, P < 0. 01 ) ,且与正常对照组比较,差异均无显著 性意义 ( P > 0. 05 ) ,说明蟒蛇油对 DNCB 所致小鼠皮肤 DTH 引起的耳廓肿胀有显著的对抗作用,能使其恢复到正常水 平。给药组的胸腺指数和脾脏指数与正常对照组比较,差异 均无显著性意义 ( P > 0. 05 ) ,说明蟒蛇油对机体免疫系统无 不良影响。
表 3 蟒蛇油对 DNCB 诱导的小鼠 DTH 的影响 ( x ± s )
组 别 n 给药剂量 (mL / kg) 耳肿胀度 (mg) 胸腺指数 (mg /10g) 脾脏指数 (mg /10g)
正常对照组 12

0. 61 ± 0. 16 ② 21. 30 ± 9. 02 ② 35. 90 ± 7. 56 ①
组和模型组小鼠分别在右耳前后两面涂二甲苯致炎 ( 0. 02mL / 只 ),正常对照组在右耳前后两面涂相同剂量蒸馏水,致炎 0. 5、1、2 小时后分别用相应剂量的药物在右耳涂药,正常对 照组和模型对照组同时涂蒸馏水 ( 5mL / kg ) 。4 小时后将小鼠 颈椎脱臼处死,剪下双耳,用 8mm 打孔器分别在左右耳相同 部位打下圆耳片,在分析天平称重,以两耳片重量差为炎症肿 胀度,计算肿胀抑制率。抑制率% = ( 对照组 - 给药组 ) / 对照 组 × 100% 。 1. 2. 2 组胺致小鼠皮肤血管渗透性实验 健康昆明种小鼠 72 只,雌雄各半,体重 18 ~ 22g,随机分为精制蟒蛇油高剂量 组 ( 10mL / kg ) 、精制蟒蛇油中剂量组 ( 5mL / kg ) 、精制蟒蛇油 低剂量组 ( 2. 5mL / kg ) 、模型对照组、正常对照组、复方醋酸 地塞米松乳膏 ( 皮炎平 ) 阳性对照组 ( 0. 5g / kg ) ,每组 12 只。 用 8% 硫化钠酒精溶液法 [2 ]背部脱毛 ( 2cm × 3cm ) ,将受试药涂 布于背部脱毛区,连续给药 7 天,模型对照组和正常对照组同 时涂布相同剂量蒸馏水。末次涂药 1 小时后于背部脱毛区皮下 注 射 0. 1% 组 胺 ( 生 理 盐 水 配 制 ) 0. 05mL / 只 , 同 时 静 脉 注 射 0. 5% 伊文思兰生理盐水 10mL / kg,正常对照组注射相同剂量 生理盐水。30 分钟后处死动物,剪下蓝斑皮肤,剪碎后用 ( 1∶ 1 ) 丙酮生理盐水 8mL 浸泡 24 小时,离心取上清液,在 610nm 测定光密度,从而确定染料渗出量。通过对局部炎症部位渗出 液中伊文思蓝的含量来判断药物对组胺所致的皮肤血管渗透性 的变化程度。 1. 2. 3 抗过敏实验 健康昆明种小鼠 72 只,雌雄各半,体 重 18 ~ 22g,随机分为精制蟒蛇油高剂量组 ( 10mL / kg ) 、精制 蟒蛇油中剂量组 (5mL / kg) 、精制蟒蛇油低剂量组 (2. 5mL / kg ) 、

模型对பைடு நூலகம்组 12

2. 77 ± 0. 21 ①

阳性对照组 12
0. 5g / kg
0. 77 ± 0. 80 ②
72
高剂量组 12
10mL / kg
0. 81 ± 0. 22 ②
71
中剂量组 12
5mL / kg
0. 88 ± 0. 64 ②
68
低剂量组 12
2. 5mL / kg 0. 93 ± 0. 36 ②
JOURNAL OF NEW CHINESE MEDICINE
December 2010 Vol.42 No.12
模型对照组、正常对照组、复方醋酸地塞米松乳膏 ( 皮炎平 )阳 性对照组 ( 0. 5g / kg ) ,每组 12 只。用 8% 硫化钠酒精溶液法背 部、腹部脱毛 ( 2cm × 3cm ) ,24 小时后用 5% DNCB ( 0. 05mL / 只 ) 涂布于小鼠脱毛后的腹部皮肤致敏,次日强化 1 次,正常 对照组涂布相同剂量蒸馏水。致敏前 1 天开始皮肤涂布给药, 每天 1 次,连续给药 7 天,模型对照组和正常对照组涂布蒸馏 水 ( 5mL / kg ) 。 末 次 给 药 40 分 钟 后 , 用 1% DNCB 丙 酮 液 ( 0. 02mL / 只 ) 涂右耳激发过敏反应,正常对照组涂布相同剂量 蒸馏水,24 小时后,颈椎脱臼处死小鼠,剪下双耳,用 8mm 打孔器分别在左右耳相同部位打下圆耳片,在分析天平称重, 以两耳片重量差为肿胀度,作为迟发性超敏反应 ( DTH ) 强度指 标。剖取胸腺、脾脏称重,计算胸腺、脾脏的肿胀指数。 1. 2. 4 止痒实验 [4 ~ 5] 健康昆明种小鼠 72 只,雌雄各半, 体重 18 ~ 22g。随机分为精制蟒蛇油高剂量租 ( 10mL / kg ) 、精 制蟒蛇油中剂量租 ( 5mL / kg ) 、精制蟒蛇油低剂量组 ( 2. 5mL / kg ) 、模型对照组、正常对照组、复方醋酸地塞米松乳膏 ( 皮炎 平 ) 阳性对照组 ( 0. 5g / kg ) ,每组 12 只。用 8% 硫化钠酒精溶 液脱毛法背部脱毛 ( 2cm × 3cm ) ,将受试药涂布于脱毛区皮肤 上,每天 1 次,连续给药 7 天,模型对照组和正常对照组涂布 蒸馏水 ( 5mL / kg ) 。末次给药 40 分钟后颈背部皮下注射 4 - AP ( 生理盐水配成 0. 02% ) 溶液 0. 01mL / g,正常对照组注射生理 盐水。记录各组在 10 分钟内的舔体次数 ( 以连续舔体至出现短 暂停顿,作舔体 1 次计算 )。 1. 3 统计学方法 采用 SPSS13. 0 统计软件进行统计描述, 所得数据用 ( x ± s) 表示,组间差异用 t 检验分析; 多个样本 均数的比较采 用单因素方 差分析 ( One - Way ANOVA ) ,当总 体 方 差 齐 时 选 择 LSD 法 分 析 ; 当 方 差 不 齐 时 选 择 Dunnet C 法分析。 2 结果 2. 1 蟒蛇油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 见表 1。造模 后模型对照组耳肿胀度增大,与正常对照组比较,差异有非常 显著性意义 ( P < 0. 01 ) ,说明造模成功。各给药组小鼠耳肿胀 度与模型对照组比较,差异均有非常显著性意义 ( P < 0. 01 ) ; 且与正常对照组比较,差异均无显著性意义 ( P > 0. 05 ) ,说明 蟒蛇油对二甲苯所致小鼠的耳廓肿胀有显著的抑制作用,并 能使其恢复到正常水平。各给药组与阳性对照组比较,差异 均无显著性意义 ( P > 0. 05 ) ,提示蟒蛇油抗炎效果与阳性药 效果相当。 2. 2 蟒蛇油对组胺致小鼠皮肤血管扩张的影响 见表 2。造 模后模型对照组与正常对照组比较,差异有非常显著性意义 ( P < 0. 01 ) ,说明造模成功; 高剂量组与模型对照组比较,差 异有非常显著性意义 ( P < 0. 01 ) ; 中剂量组与模型对照组比 较,差异有显著性意义 ( P < 0. 05 ) ; 且与正常对照组比较,差 异无显著性意义 ( P > 0. 05 ) ,说明蟒蛇油高、中剂量能够对抗 组胺所致小鼠皮肤血管扩张,使其恢复到正常水平; 高、中剂
12
0. 5g / kg
0. 038 ± 0. 022 ①
高剂量组
12
10mL / kg
0. 041 ± 0. 018 ②
中剂量组
12
5mL / kg
0. 046 ± 0. 022 ①
低剂量组
12
2. 5mL / kg 0. 054 ± 0. 007
与模型对照组比较,① P < 0. 05,② P < 0. 01
66
与正常对照组比较,① P < 0. 01; 与模型对照组比较,
② P < 0. 01
表 2 蟒蛇油对组胺致小鼠皮肤血管扩张的影响 ( x ± s)
组别 正常对照组
n
给药剂量 ( mL / kg )
λ610nm
12

0. 035 ± 0. 018 ②
模型对照组
12

0. 062 ± 0. 018
阳性对照组
[ 摘要 ] 目的: 研究蟒蛇油抗炎、抗过敏、止痒的作用。方法: 用二甲苯致小鼠耳肿胀法和组胺致小鼠皮肤 毛细血管扩张法观察其抗炎作用; 用 2,4 - 二硝基氯苯 ( DNCB ) 诱导小鼠迟发性超敏反应 ( DTH ) 观察其抗过敏 作用; 用 4 - 氨基吡啶 ( 4 - AP ) 诱导小鼠皮肤过敏性瘙痒观察其止痒作用。结果: 蟒蛇油能显著对抗二甲苯所 致小鼠耳肿胀和抑制组胺所致小鼠皮肤毛细血管扩张,同时降低 DNCB 诱导的小鼠过敏反应,并且能明显减少 4 - AP 诱导的瘙痒反应的舔体次数。结论: 蟒蛇油有显著的抗炎、抗过敏、止痒作用。
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