酒精-福尔马林-甘油固定液
常用固定液的配制
![常用固定液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/2bde403f9b6648d7c1c7466c.png)
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为。
1h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至12~24h数小时,最长可固定中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。
常用固定液配制
![常用固定液配制](https://img.taocdn.com/s3/m/20967eee551810a6f5248699.png)
1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 冰醋酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+ 冰醋酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
福尔马林固定液(10%)
![福尔马林固定液(10%)](https://img.taocdn.com/s3/m/5a26b5d57c1cfad6195fa7f4.png)
仅供科研版本号:170316福尔马林固定液(10%)【产品组成】【保存条件】室温,避光,24个月【产品概述】固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
福尔马林固定液(10%)主要由甲醛、去离子水组成,该固定液适合于绝大多数组织的固定。
【使用方法】1、按实验具体要求操作。
一般标本固定时间控制在1~4h/mm,大标本应适当延长固定时间。
2、固定好的组织,可在福尔马林固定液(10%)或70%乙醇中长期保存。
【注意事项】1、福尔马林固定液(10%)有一定刺激性和腐蚀性,请在通风较好的环境下操作,避免吸入。
2、固定液pH最好接近用中性,pH范围6~8。
3、组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
4、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
5、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
6、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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常用固定液的性质、用途
![常用固定液的性质、用途](https://img.taocdn.com/s3/m/eeb2ba5ff01dc281e53af07f.png)
常用固定液的性质、用途和配置1.单一固定液的性质和用途(1)乙醇(C2H5OH)(ethylalcohol):又名酒精,可沉淀白蛋白、球蛋白、核蛋白,后者易溶于水,所以经酒精固定的标本对细胞核染色不良。
酒精可溶解脂肪、类脂体,所以不能用酒精固定脂肪。
酒精可沉淀肝糖,但仍可溶解于水,因此肝糖经酒精固定后不能在低于70%酒精中保存。
单独固定使用酒精的浓度应为95—100%。
无水酒精渗透力较差,并且能使组织收缩,在与醋酸、氯仿混合使用时,可增强它们的穿透力。
酒精除固定作用外,还具有硬化和脱水的作用,固定后的组织可保存于70%酒精中,所以酒精在制片过程中用途很大。
无水乙醇容易挥发,又容易吸收空气中的水分,所以瓶盖必须塞紧,为了吸去其中水分,最好在无水乙醇瓶内放入少量无水硫酸铜粉末。
酒精是一种还原剂,不能与重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合使用。
(2)甲醛(HCHO)(formeldehyde):是一种气体,溶于水成为甲醛水溶液或称福尔马林,一般使用浓度为10%福尔马林(formalin)液,其配法是取市售的甲醛液10ml 与90ml 蒸馏水混合即可,实际上其含量只有4%甲醛。
这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
甲醛不能沉淀白蛋白及核蛋白,但能与蛋白质化合。
它是一种应用广泛,使用简单的固定液,具有穿透力强、固定均匀、组织收缩小、硬度适当,适用于一般器官组织的固定及保存。
尤其对脂肪、神经组织固定效果较好。
更适于病理组织的制片及大体积标本的保存,一般组织需固定24 小时以上,固定后的组织可移入50%酒精中逐步脱水。
甲醛是一种强还原剂,不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合,因极易被氧化为甲酸。
在配混合固定液时,如海利氏液等需临用前再加入,24 小时后失效。
甲醛由于长期贮存,特别是低温气候,容易产生多聚甲醛,即溶液中的白色沉淀,在高温下又成为甲醛。
不纯的甲醛易产生甲酸,使溶液变为酸性,影响核的染色。
所以在备用的福尔马林中加入小量的醋酸钙、碳酸镁或大理石作为中和剂。
固定液配制
![固定液配制](https://img.taocdn.com/s3/m/b109152abd64783e09122bab.png)
固定液配制
固定液配制
1. F.A.A固定液又称标准固定液,万能固定液.适用于一般根,茎,叶,花药,子房组织切片.在植物形态解剖研究上应用极广,此固定液最大优点是兼有保存剂作用,但对染色体的观察效果较差.
配方:福尔马林(38%甲醛)5 ml: 冰醋酸5ml:70%酒精90 ml
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩;还可加入5 ml甘油(丙三醇)以防蒸发和材料变硬.
2. F.P.A固定液配制时用正丙酸代替冰醋酸,三种成分的比例同上液.效果比F.A.A好.
3. 卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.
配方:无水酒精3份:冰醋酸1份。
组织固定液的类型
![组织固定液的类型](https://img.taocdn.com/s3/m/634e32344b7302768e9951e79b89680203d86ba3.png)
组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多,主要包括以下几种:
1.福尔马林固定液:福尔马林是一种广泛使用的固定剂,可以固定细胞和组织的结构,同时起到杀菌的作用。
2.酒精固定液:酒精固定液是一种常用的组织固定液。
酒精具有良好的杀菌作用,可以使组织保持良好的形态结构。
3.缓冲福尔马林固定液:缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂,使其pH值接近细胞内液,更适合某些特定的实验和研究。
4.寡聚肽固定液:寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液,可以保持细胞和组织的蛋白质结构。
5.甲醛固定液:甲醛是一种常用的固定剂,可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。
它有很好的杀菌作用,并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。
以上是几种常见的组织固定液类型,不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围,根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。
植物固定液和保存液介绍
![植物固定液和保存液介绍](https://img.taocdn.com/s3/m/3577ef2d590216fc700abb68a98271fe900eaf5f.png)
固定液和保存液用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等,能保存组织内细胞的形态、结构及其组成,尽量使它近于生活状态。
固定液一般有防腐和保存的作用,分为单纯固定液和混合固定液。
单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等,前两种固定液是中学生物实验室常用的。
单纯固定液的优点是简便,缺点是有一定的局限性,不易达到理想的固定要求。
混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成,使各自的优缺点相互补充,成为较完美的固定液。
这种固定液的制备虽比较麻烦,但是效果比较好。
常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液、包因氏固定液等。
常用的保存液大致跟固定液相同,主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。
有时按特殊保存的需要,再保存液中增加某些药品(如原生标本的保存液)。
1、福尔马林福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强,所以防腐性强,渗透力大,固定得快。
永福尔马林固定精细的解剖标本时,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。
固定液常用的浓度是5~10%(根据材料的大小、性质和数量而定)。
保存液常用的浓度是5~10%。
用福尔马林作保存液,效果好且价格低廉。
在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将37~40%的甲醛作为整个溶质来配。
例如配制5%福尔马林是取市售37~40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。
实际上甲醛含量只有1.9~2%,这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
注意事项:(1)福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸,可适量的加入碳酸钙或碳酸镁等碱性物质进行中和。
(2)福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低,并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛,使浸液变浊,影响观察。
所以,根据一定保存期的情况,可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液,以防标本变坏。
其中如有白色沉淀物,加热后可使它溶解。
(3)市售的福尔马林液常带有酸性,能腐蚀石灰质,因此,最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。
常用的组织固定液及配制
![常用的组织固定液及配制](https://img.taocdn.com/s3/m/fa369b8eb90d6c85ec3ac6e2.png)
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1 甲醛(formaldehyde )是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%〜40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin )。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10 %福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2P04?H2O 4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4 13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbai wrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24 小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定的时间不宜太长,以24 小时以内为宜,适用于免疫组织化学染色。
几种细胞固定方法选择最佳固定液标准是:(1)最好地保持细胞和组织的形态结构;(2)最大限度地保存抗原的免疫活性。
常用固定液的配制
![常用固定液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/8afa9cf6910ef12d2af9e784.png)
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
固定液主要成分
![固定液主要成分](https://img.taocdn.com/s3/m/5aacdabeaff8941ea76e58fafab069dc502247a0.png)
固定液主要成分
固定液的种类很多,根据配制成分可分为简单型与混合型。
1. 切片标本以一种化学药品配制的固定液叫做简单固定液。
常用的简单固定液有:酒精(乙醇)、福尔马林(甲醛)和醋酸。
其中,酒精穿透力强,固定时间常在1小时以内,高浓度酒精有使材料收缩的作用。
福尔马林固定液一般不单独作固定,而与其他液体混合使用。
醋酸以与水和酒精配成各种比例的溶液,所用浓度为0.2~5%,也常与其他固定剂配合使用。
醋酸穿透性很强,单独使用,有使原生质膨胀的作用,故常与酒精,甲醛等合用,醋酸为固定染色体的优良固定液,因此固定染色体的固定液中,几乎都含有醋酸。
2. 手术标本固定液成分包括:缓冲剂、醛固定剂。
此外,还有一种特殊类型的固定液叫做卡诺氏液,又名卡诺氏固定液,是1886年由比利时细胞学家让·巴蒂斯特·卡诺伊发明的一种固定液。
它是一种由乙醇和乙酸(也可以加入三氯甲烷,即氯仿)配制而成的非水相固定剂,需现配现用。
卡诺氏液主要适用于一般植物组织和细胞的固定,也可以用于手术切除角化囊肿后的局部治疗。
如需了解更多关于固定液的成分,建议咨询专业化学家或查阅化学书籍。
常用固定液的配制
![常用固定液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/482870bd0242a8956bece44f.png)
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
常用的组织固定液及配制
![常用的组织固定液及配制](https://img.taocdn.com/s3/m/24f8f808b6360b4c2e3f5727a5e9856a56122675.png)
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formal dehyd e)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formal in)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
常用固定液的配制
![常用固定液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/0deb230ccc17552707220818.png)
钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。
配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中,用纱布封口,自然氧化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。
13.席夫试剂(Schiff’s regent)将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右,加入1g偏亚硫酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。
次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,即可使用。
若染色较深,可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。
此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多色反应。
10%标本福尔马林固定液成分
![10%标本福尔马林固定液成分](https://img.taocdn.com/s3/m/1b80b06eec630b1c59eef8c75fbfc77da26997fe.png)
10%标本福尔马林固定液成分
摘要:
一、福尔马林固定液的作用
二、福尔马林固定液的成分
三、福尔马林固定液在标本制作中的应用
四、福尔马林固定液的注意事项
正文:
福尔马林固定液是一种广泛应用于医学、生物学等领域的固定剂,它能够有效地杀死细菌、真菌等微生物,固定细胞、组织等生物材料,使其保持原有的形态和结构,便于后续的观察和研究。
福尔马林固定液的主要成分是福尔马林,其化学名为甲醛,通常浓度为30%~50%。
福尔马林固定液的成分除了福尔马林外,还包含一些辅助成分,如甲醇、乙醇、丙酮等,这些辅助成分可以增强福尔马林的固定效果,提高固定液的稳定性和溶解力。
在实际应用中,福尔马林固定液的配方会根据不同的固定对象和用途进行调整。
福尔马林固定液在标本制作中的应用非常广泛,如在病理学中,福尔马林固定液常用于固定组织和细胞切片,以便于光学显微镜下的观察;在细胞生物学中,福尔马林固定液可用于固定细胞,以便于荧光显微镜下的观察;在遗传学中,福尔马林固定液可用于固定染色体,以便于显微镜下的观察。
常用固定液的配制
![常用固定液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/83827e6471fe910ef02df8d4.png)
常用固定液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
固定液的种类和功能
![固定液的种类和功能](https://img.taocdn.com/s3/m/4175e67cf6ec4afe04a1b0717fd5360cba1a8db3.png)
固定液的种类和功能1.单纯固定液(1)4%中性福尔马林固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是,中性福尔马林是以pH7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%福尔马林固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。
福尔马林(40%)100ml无水磷酸氢二钠6.5g磷酸二氢钠4.0g蒸馏水900ml(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性福尔马林,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多聚福尔马林:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液(1)乙醇一福尔马林(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
福尔马林(40%)100ml95%乙醇900ml(2)B5(醋酸钠一升汞一福尔马林)固定液:多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠1.25g升汞6.0g蒸馏水90ml使用前加入福尔马林10ml(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60ml氯仿30ml冰醋酸10ml(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。
升汞5.0g重铬酸钾2.5g硫酸钠1.0g蒸馏水(加至)100ml。
酒精-福尔马林-甘油固定液
![酒精-福尔马林-甘油固定液](https://img.taocdn.com/s3/m/65a0b836453610661ed9f49e.png)
北京雷根生物技术有限公司
酒精-福尔马林-甘油固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液主要由乙醇、福尔马林、甘油组成,该固定液属于脱水-交联固定剂,在辨认特定抗体的免疫组化反应中能产生极好的结果,尤其适用于长期保存材料。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般标本固定时间控制1~4h/mm ,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
1、 Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 固定液的容量应足够。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 24个月有效。
编号 名称 DF0172 Storage 酒精-福尔马林-甘油固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。
昆虫标本浸渍液调制法
![昆虫标本浸渍液调制法](https://img.taocdn.com/s3/m/41906d295627a5e9856a561252d380eb629423a3.png)
昆虫标本浸渍液调制法:
(包括一些幼虫色素保存液,酒精浸液每人调制一份,其余的供作参考用。
)
一般浸渍幼小昆虫、成虫或昆虫的卵、幼虫、蛹的液体,多用具有防腐性和固定虫体组织能力的化学药品制成,常用的保存液有下面几种:
1、酒精保存液
用酒精加水稀释成含有75%的浓度,用以浸渍小型昆虫标本(保存液可略加上0.5~1.0的甘油,能使体壁保持柔软状态。
)
2、福尔马林保存液
福尔马林(含甲醇40%)1份
蒸馏水17-19份
或者用福尔马林液用水稀释成含甲醛2-5%的水液都行,此液较经济,但缺点是气味恶劣。
3、醋酸、福尔马林、酒精混合液(亦称卡氏液,固定及保存均可)
酒精(95%)17份
福尔马林(40%)6份
冰醋酸2份
蒸馏水28份
这液对微小昆虫,长期似不甚佳,但作固定好。
4、幼虫保存液(也可保存幼虫体黄色的色素)
白糖5克
福尔马林(40%)40ml
冰醋酸50ml
甘油100ml
蒸馏水1000ml
5、幼虫绿色色素保存液
将硫酸铜10克溶于100毫升水中,煮沸后,投入幼虫,煮的时间视虫体大小而定,刚入时,幼虫绿色有退色变黄现象,但不久即恢复原色彩,后即用清水洗涤而浸于40%福尔马林液中。
6、幼虫红色色素保存液
福尔马林(40%)40.00
冰醋酸40.00
甘油200.00
蒸馏水500.00
先用10%SuSO4溶液浸渍24小时后,再用清水浸5小时,然后再浸此液体。
保存液在指头瓶管中的量,一般装至全管2/3为宜,一管之内放标本不要过多,但也不要让标本露液面然后塞紧木塞,用腊水棉胶或火封口,便长期保存。
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酒精-福尔马林-甘油固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液主要由乙醇、福尔马林、甘油组成,该固定液属于脱水-交联固定剂,在辨认特定抗体的免疫组化反应中能产生极好的结果。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
一般标本固定时间控制1~4h/mm ,大多数控制在4~24h ,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
1、 Leagene 酒精-福尔马林-甘油固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
编号 名称 DF0172 Storage 酒精-福尔马林-甘油固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。