分子生物学问答题
分子生物学-21
分子生物学-21(总分:100.00,做题时间:90分钟)一、问答题(总题数:20,分数:100.00)1.AUG既可以作为起始密码子,也可以作为肽链延伸过程中编码甲硫氨酸的密码子,那么原核生物和真核生物分别依靠什么机制识别作为起始密码子的AUG?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:原核生物起始密码子的识别主要依赖于mRNA 5"端的SD序列与16SrRNA 3"端的反SD序列之间的互补配对。
mRNA上位于SD序列下游的第一个AUG用作起始密码子。
真核生物依赖40S小亚基在帽子结合蛋白引导下结合到mRNA的5"端,并沿着mRNA从5"端向3"端扫描,以遇到的第一个AUG作为起始密码子。
2.真核生物编码蛋白质的结构基因的主要结构是什么?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:由转录调节区域和转录单位构成,其中转录调节区域主要包括启动子、增强子,有时有沉默子;转录单位主要包括5"端非翻译区、外显子、内含子、3"端非翻译区。
3.氨酰-tRNA合成分为两步反应,列出反应式。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:反应式见下图。
4.原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段?简述各阶段的主要事件。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:分为起始、延伸、终止三个阶段。
分子生物学问答题1
1↓参与复制所需要的酶和蛋白因子有哪些。
2↓(1) RNA 指导的DNA 聚合酶活性; (2) DNA 指导的DNA 聚合酶活性; (3)RNase H 的活性是指它能够从5→'3'和3→'5'两个方向水解DNA-RNA 杂合分子中的RNA 。
↓转录与复制的区别。
(1)转录只合成与模板互补的单链(不对称转录)。
(2)转录得到的链是由NTP 组成的,而不是dNTP 。
(3)RNA 聚合酶不需要引物,可以从头起始转录。
(4)RNA 产物不与模板保持互补状态。
相反,RNA 聚合酶在NTP 添加处的几个核苷酸之后,便将正在延长的链从模板上置换下来。
这一置换对于同步进行的翻译至关重要,同时也使得一个基因可以同时转录成多条RNA 。
(5)转录的精确度(10-4)不如复制(10-7),因为它缺乏广泛的校正机制。
↓简述转录延长特点。
① 核心酶负责RNA 链延长反应;② RNA 链从5'-端向3' -端延长,新的核苷酸都是加到3'-OH 上; ③ 对DNA 模板链的阅读方向是3'-端向5'-端,合成的RNA 链与之呈反向互补,即酶是沿着模板链的3'向5'方向或沿着编码链的5'向3'方向前进的;④ 合成区域存在着动态变化的8 bp 的RNA-DNA 杂合双链;⑤ 模板DNA 的双螺旋结构随着核心酶的移动发生解链和再复合的动态变化。
↓简述细菌的转录终止机制称为终止子(terminator )的序列引发RNA 聚合酶从DNA 上脱离并释放已合成的RNA 链。
细菌有两种类型的终止子。
Rho 非依赖型终止子或称固有终止子,通过其转录产物形成的发夹结构而终止转录。
Rho 依赖型终止子需要一个称为Rho 的蛋白质来诱发终止反应。
↓逆转录酶和逆转录过程;逆转录酶:能催化以RNA 模板合成双链DNA 的酶,全称依赖RNA 的DNA 聚合酶; 逆转录过程:分三步:首先是逆转录酶以病毒基因组RNA 为模板,催化d NTP 聚合生成DNA 互补链,产物是RNA/DNA 杂化双链;然后,杂化双链中的RNA 被逆转录酶中有RNase 活性的组分水解,被感染细胞内的Rnase H(H=Hybrid )也可水解RNA 链。
分子生物学问答题
1.什么是转座? 转座因子在一个DNA分子内部或者两个DNA之间不同位置间的移动。
2.病毒基因组有哪些特点?答:不同病毒基因组大小相差较大;不同病毒基因组可以是不同结构的核酸;除逆转录病毒外,为单倍体基因组;病毒基因组有的是连续的,有的分节段;有的基因有内含子;病毒基因组大部分为编码序列;功能相关基因转录为多顺反子mRNA有基因重叠现象。
3.原核生物基因组有哪些特点?答:基因组由一条环状双链DNA组成;只有一个复制起始点;大多数结构基因组成操纵子结构;结构基因无重叠现象;无内含子,转录后不需要剪接;基因组中编码区大于非编码区;重复基因少,结构基因一般为单拷贝;有编码同工酶的等基因;基因组中存在可移动的DNA序列;非编码区主要是调控序列。
4.真核生物基因组有哪些特点?答:每一种真核生物都有一定的染色体数目;远大于原核基因组,结构复杂,基因数庞大;真核生物基因转录为单顺反子;有大量重复序列;真核基因为断裂基因;非编码序列多于编码序列;功能相关基因构成各种基因家族。
5.基因重叠有什么意义?答:利用有限的核酸储存更多的遗传信息,提高自身在进化过程中的适应能力。
6.质粒有哪些特性?答:在宿主细胞内可自主复制;细胞分裂时恒定地传给子代;所携带的遗传信息能赋予宿主特定的遗传性状;质粒可以转移.7.什么是顺式作用元件? 答:基因中能影响基因表达,但不编码RNA和蛋白质的DNA序列.顺式作用元件主要包括启动子、增强子、负调控元件等。
8.简述原核基因表达的特点。
答:(1)只有一种RNA聚合酶。
(2)原核生物的基因表达以操纵子为基本单位。
(3)转录和翻译是偶联进行的。
(4)mRNA:翻译起始部位有特殊的碱基序列-SD序列。
(5)原核生物基因表达的调控主要在转录水平,即对RNA合成的调控.9.简述σ因子在原核基因表达调控中的意义.答:(1)6因子含有识别启动区的结构域调控RNA聚合酶与.DNA结合,确保RNA聚合酶与特异启动区而不是其他位点的稳定结合(2)6因子使得RNA聚合酶选择一套特定启动区起始转录。
分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案(整理版)
一、选择题
1.DNA双螺旋结构是由哪两种碱基之间的氢键支撑的? A. 腺嘌呤和胸腺嘧啶
B. 腺嘌呤和鳌酷嘧啶
C. 胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
D. 腺嘌呤和胸腺嘧啶、胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
2.在RNA转录中,哪种RNA是由RNA聚合酶合成的? A. mRNA
B. rRNA
C. tRNA
D. snRNA
3.下列哪个过程不属于DNA复制中的信息单向传递过程? A. 串联扭曲
B. 连续DNA合成
C. 不连续DNA合成
D. 缺氧齿合
二、填空题
1.DNA双螺旋结构中,两根链之间的碱基互为__________。
2.在生物细胞中,DNA的复制是由__________完成的。
3.参与DNA复制的酶包括DNA__________酶、DNA__________酶和
DNA__________酶。
三、简答题
1.请简要说明DNA双螺旋结构的特点和形成方式。
2.什么是DNA复制?简要描述DNA复制的过程。
四、解答题
1.请根据你的理解,解释DNA复制的半保留复制特点。
2.试分析DNA复制过程中可能出现的错误及其纠正机制。
以上为分子生物学试题及答案的整理版,希望能对您的学习有所帮助。
分子生物学基础测试题
分子生物学基础测试题一、选择题(每题共10分,共10题)1. DNA的主要功能是什么?A. 负责细胞的合成B. 存储遗传信息C. 调控细胞代谢D. 维持细胞结构2. 下列哪个是真核生物细胞中的主要遗传物质?A. RNAB. DNAC. 脂质D. 蛋白质3. 核糖体的主要功能是什么?A. DNA复制B. RNA转录C. 氨基酸合成D. 蛋白质翻译4. 在DNA序列“ATCGGCTA”中,与A相对应的碱基是什么?A. TB. GC. CD. A5. RNA转录是指什么过程?A. DNA复制B. RNA合成C. DNA修复D. RNA降解6. 酶是什么?A. DNAB. RNAC. 蛋白质D. 糖类7. DNA双链的两条链是怎么连在一起的?A. 磷酸二酯键B. 碳酰胺键C. 氢键D. 立体键8. RNA的主要功能是什么?A. 调控基因表达B. 氨基酸合成C. 细胞呼吸D. 维持细胞结构9. 双链DNA的两条链是什么关系?A. 平行B. 反平行C. 单链D. 无关10. PCR反应是用来进行什么?A. DNA复制B. RNA转录C. 蛋白质合成D. 病毒检测二、简答题(每题共20分,共5题)1. 请简述DNA复制的过程。
2. 简述RNA转录的过程。
3. 什么是重复序列?请举一个例子说明。
4. 请解释基因突变的概念,并举例说明。
5. 简述PCR反应的原理和应用。
三、论述题(共60分,共2题)1. 细胞中的DNA需要进行复制和修复,这些过程对细胞的生存和发展至关重要。
请论述DNA复制和修复的重要性以及它们在维持细胞功能中的作用。
2. 遗传信息的传递在生物界中起着重要的作用。
请论述RNA在遗传信息传递中的功能以及其与DNA和蛋白质之间的关系。
四、实验设计题(共40分)请设计一个实验,探究表观遗传调控对基因表达的影响。
详细描述实验步骤、所需材料和预期结果,并解释你的实验设计能帮助我们更好地理解分子生物学中的表观遗传现象。
分生问答题
分子生物学问答题1、简述DNA双螺旋结构模型的主要特征。
答: DNA双螺旋结构是核酸的二级结构。
双螺旋的骨架由糖和磷酸基构成,两股链之间的碱基互补配对,携带遗传信息,DNA半保留复制的基础,结构要点:a.DNA是一反向平行的互补双链结构:①亲水的脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外侧,而碱基位于内侧②碱基之间以氢键相结合,A与T配对,形成两个氢键,G与C配对,形成三个氢键③碱基平面与线性分子结构的长轴相垂直,自上而下一条链走向5’-3’,另一条链3’-5’b.DNA是右手螺旋结构:①每旋转一周包含了10个碱基对,每个碱基的旋转角度为36度。
②螺距为3.54nm,每个碱基平面之间的距离为0.34nm,螺旋直径为2.37nm。
③DNA双螺旋分子存在一个大沟和一个小沟。
c.DNA双螺旋结构稳定的维系:横向靠互补碱基的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持,尤以后者为重要。
2、简述tRNA的二级结构特点及其在蛋白质合成中的作用。
答:tRNA二级结构是三叶草型结构。
1)、二氢尿嘧啶环:环中含有稀有碱基DHU,此环与氨基酰tRNA合成酶的特异性辨认有关。
2)、反密码环:上有反密码子,不同的tRNA,构成反密码子的核苷酸序列不同,它可辨认mRNA上的密码子,使氨基酸正确入位。
3)、额外环:含稀有碱基较多,不同的tRNA,此环上组成具有较大差异。
4)、TψC环:环中含胸腺,假尿嘧啶和胞苷,此环上具有与核糖体表面特异位点连接的部位。
5)、氨基酸臂:3’端为CCA-OH,是携带氨基酸的部位作用:tRNA是运载体,携带特定氨基酸,借反密码子与mRNA的密码碱基互补,从而将所带的氨基酸送到肽链的一定位置上,因此tRNA在翻译过程中起结合体作用。
3、简述mRNA的结构特点及其在蛋白质合成中的作用。
答:1)、帽子结构:mRNA的5’端以7甲基鸟嘌呤三磷酸腺苷为分子的起始结构。
作用:在mRNA作为模板翻译中:①促进核糖体与mRNA的结合,加速翻译起始速度②增强mRNA稳定性2)、polyA尾:mRNA3’端有长短不一的polyA结构,由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成作用:因为在基因中没有找到与它相适应的结构,因此认为是mRNA生成后加进去的,随着mRNA存在时间延长,polyA 尾巴逐渐缩短,认为3’末端可能与mRNA从核内向胞质的转位及mRNA的稳定性有关。
分子生物学问答题
答:RNA编辑是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息的改变,因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。(介导RNA编辑的机制有两种:位点特异性脱氨基作用和引导RNA指导的尿嘧啶插入或删除)
答:pribnow box是原核生物中中央大约位于转录起始位点上游10bp处的TATA区,所以又称作-10区。它的保守序列是TATAAT。
13、简述mRNA常以多顺反子的形式存在。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在;2,原核生物mRNA的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟的mRNA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作;3,原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时。真核生物mRNA的半寿期较长,如胚胎中的mRNA可达数日;4,原核与真核生物mRNA的结构特点也不同,原核生物的mRNA的5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短的poly A结构。
分子生物学问答题
1、请定义DNA重组技术和基因工程技术
答:DNA重组技术:目的是将不同的DNA片段(如某个基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状。基因工程技术:是除了包含DNA重组技术外还包括其他可能是生物细胞基因结构得到改造的体系,基因工程是指技术重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。
答:1,DNA的一级结构,就是指4种核苷酸的连接及排列顺序,表示了该DNA分子的化学成分;2,DNA的二级结构是指两条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构;3,DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。
分子生物学-11
分子生物学-11(总分:100.01,做题时间:90分钟)一、问答题(总题数:20,分数:100.00)1.简述增强子的作用特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:①增强子可以发挥远程作用(1~4kb),增强同一条DNA链上基因转录效率;②增强子作用与其序列的正反方向无关,在基因的上游或下游都能起作用;③增强子对启动子没有严格的专一性,同一增强子可以影响不同类型启动子的转录;④增强子一般具有组织或细胞特异性。
2.什么是沉默子,简述其用特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:沉默子是一种抑制基因表达的顺式作用元件。
沉默子可以远程调控基因的转录作用,且无位置和方向依赖性,具有组织特异性。
沉默子可能引起染色质弯曲缠绕,产生异染色质结构,导致基因处于失活状态。
3.真核生物mRNA仅是细胞总RNA的一小部分(质量的3%)左右,解释可能的原因。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:总RNA中还包含大量的rRNA和tRNA,rRNA是核糖体的重要组成部分,一系列的tRNA是翻译必不可少的分子群。
另外,mRNA半衰期只有1~24小时。
因此mRNA的量比其他RNA的量要少。
4.为什么rRNA和tRNA分子比mRNA更稳定?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:mRNA以单链形式存在于细胞中,能被特异的单链RNA酶识别并降解。
分子生物学问答题
分⼦⽣物学问答题问答题第⼆章⼀、⽤于基因重组的载体需要具有哪些条件?1)具有⾃主复制能⼒,保证重组DNA分⼦可以在宿主细胞内得到扩增2)具有较多的拷贝数,易与宿主细胞的染⾊体DNA分开,便于分离提纯3)分⼦质量相对较⼩,易与操作,并能够容纳较⼤分⼦质量的⽬的基因4)具多个单⼀限制性内切酶位点,便于⽬的基因克隆5)有⼀个或多个筛选标记(如对抗⽣素的抗性、营养缺陷型或显⾊表型反应等)6)具有较⾼的遗传稳定性⼆、限制性内切酶主要分为⼏个类型?各有什么特点?限制性内切酶主要分为三种类型,即Ⅰ型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶。
Ⅰ型和Ⅲ型酶⼀般都是⼤的、多亚基的蛋⽩质复合物,同时具有内切酶活性和甲基化酶活性。
均需ATP ⽔解供能。
Ⅰ型酶能够识别特异的核苷酸序列,但是切割位点是随机的,Ⅲ型限制酶从距离识别位点⼀侧约25bq处单链切割DNA分⼦。
识别序列是⾮对称的,现在已知的酶数量相当少。
Ⅰ型和Ⅲ型酶在DNA重组技术中⽤处不⼤。
Ⅱ型限制性核酸内切酶只有⼀种多肽,通常以同源⼆聚体形式存在,核酸内切酶活性和甲基化作⽤活性是分开的。
⽆需ATP⽔解供能,仅需Mg2﹢参与。
具有序列特异性,可对靶DNA进⾏精确切割,在DNA 重组技术中有特别⼴泛的⽤途。
三、影响限制性内切酶作⽤的因素有哪些?DNA第底物的纯度、DNA的甲基化程度、DNA分⼦的结构、酶切反应的温度、酶切反应的时间、酶切反应的缓冲体系等四、DNA连接酶主要有哪些应⽤?1)作为DNA重组技术的重要⼯具酶,催化两个具有黏性末端或平末端的DNA⽚段5’-P和3’-OH之间形成磷酸⼆酯键,组成新的重组DNA分⼦。
2)在DNA复制中发挥接合缺⼝的作⽤,这种单链缺⼝是由复制叉上的不连续性所产⽣3)在DNA损伤修复、遗传重组、及DNA链的剪接中起缝合缺⼝的作⽤五、反转录病毒载体有哪些优点?1)具有⼴泛的哺乳动物细胞宿主2)可主动感染分裂细胞3)感染细胞后,病毒基因组反转录⽣成双链DNA,可整合到宿主染⾊体中,与染⾊体同时复制,持续表达外源基因4)基因组⾃⾝含有完整⾼效的调控元件六、腺病毒载体有哪些优点?1)可插⼊⼤⽚段外源基因,可达35kb2)宿主范围⼴,尤其⼈类是腺病毒的⾃然宿主3)不仅可感染分裂期细胞,也可感染⾮分裂细胞4)病毒滴度⾼,可达10^9-10^11pfu/ml5)可原位感染组织,如肺等6)重组载体进⼊细胞后并不整合到宿主染⾊体DNA上,⽽是游离于染⾊体外瞬时表达,安全性好七、腺病毒载体有哪些不⾜?①病毒基因组较⼤,构建载体较复杂②⼏乎可感染所有细胞,缺乏特异性③载体不发⽣整合,导致⽬的基因只能短暂表达,因此需要重复应⽤,可能诱发机体的免疫反应第三章①化学合成法已知⽬的基因的核苷酸序列,或根据基因产物的氨基酸序列推导出其核苷酸序列,可利⽤全⾃动DNA合成仪化学合成该⽬的基因。
(完整版)分子生物学名词解释及问答题
名词解释操纵子:是原核生物基因的一个基本转录单位,由编码序列及上游的调控序列组成。
编码序列通常包括几个功能相关的结构基因,调控序列有启动序列(启动子)、操纵序列(操纵基因)及其他调节序列构成。
顺式作用元件:是真核基因变大调控转录过程的特殊DNA序列,于转录因子结合而起作用,通常包括启动子、增强子、沉默子等。
反式作用元件:与其他基因的顺式作用元件结合,调节基因转录活性的蛋白质因子,根据功能不同分为基因转录因子和特异性转录因子。
启动子:位于结构基因上游、与RNA聚合酶识别、结合的特异DNA序列,与基因转录起始有关。
同源重组:是指发生在同源序列见得重组,它通过链的断裂和再连接,在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链的交换。
又称基因重组。
DNA克隆:指在体外对DNA分子按照既定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入适当细胞内,使其在细胞扩增和繁殖,从而获得该DNA分子大量拷贝的过程称为分子克隆,又叫基因克隆或重组DNA技术。
基因工程:在体外将目的基因和载体DNA按照既定的目的基因进行人工重组,并将重组体导入宿主细胞,经过无性繁殖和表达得到所需核酸、蛋白质、生物新品种。
包括转基因动物、植物、基因工程生产药物、基因诊断和基因治疗等。
限制性核酸内切酶:指一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶,绝大多数是从原核细胞中提取的,可分为三类,其中Ⅱ型是分子克隆中最常用的工具酶。
pBR322:是研究最早、最清楚的质粒,其全部顺序为4363bp,含有一个复制原点、一个Amp r 和Tet r标记,有限制酶酶切位点,可供外源性基因插入,利用这种遗传标记,有利于筛选出重组转化菌。
gDNA文库:即基因组DNA文库,是指存在于转化菌内、由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
它涵盖了基因组全部基因信息。
cDNA文库:是细胞总mRNA的克隆,文库只包含表达蛋白质或多肽的基因。
感受态细胞:用适当的理化方法处理受体菌后,使宿主细胞处于最适摄取和容忍重组体的状态,此时的宿主细胞即称为感受态细胞。
分子生物学问答题.docx
1什么是中心法则?答:是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程,以及遗传信息从DNA 传递给DNA的复制过程。
这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。
在某些病毒中的RNA自我复制和在某些病毒中能以RNA 为模板逆转录成DNA的过程是对中心法则的补充2什么是分子生物学?答:广义一一在分子水平研究生命的现象与规律的学科。
狭义——核酸化学(DNA, RNA)在分子水平上研究生命现象的科学。
研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质3试举出20世纪三例分子生物学发展中的重大发现答:1950 Chargaff 提出Chargaff 法则:A+G=T+C1953Waston&Crick提出:DNA双螺旋模型1954Crick提出:中心法则1958 Meselson等提出:DNA的半保留复制1961 Brener等提出三联体密码假说1961 Jacob&Monod提出操纵子模型1972 Berg第一次实现体外DNA的重组第二章1、简述DNA复制的基本法则及复制过程中涉及的酶和蛋白质(以E・coli为例)。
答:1)O1DNA的半保留复制:DNA复制是产生的新链中一条单链来自母链(模板链),另一条是新合成的(新生链有一半的母链被保留下来)即半保留复制;O2DNA复制的半不连续性:DNA复制时其中一条单链(3' —5')先复制,是连续的,即先导链,另一条链的复制滞后一步且是先合成一段段的冈崎片段,通过连接酶形成完整子代单链。
2)酶和蛋白质:DNApol 包括DNApolL DNApolIL DNApolIII 三类Topi,解旋酶、SSB、RNA 聚合酶、引发酶、DNA连接酶。
2、基因有哪些存在形式、真核生物DNA序列有哪些种类?答:1)割裂基因,重叠基因,跳跃基因,假基因,重组基因等;2)高度重复序列,屮度重复序列,单拷贝序列。
分子生物学问答题
分子生物学问答题1、什么是端粒?端粒的结构?端粒的主要功能是什么?端粒是如何合成?端粒是一种短串联重复序列,人端粒新生链(后随链)重复单位是CCCTAA,模板链重复单位是TTAGGG。
复制后端粒的后随链模板长出,所以形成3’端突出结构。
其主要功能是:①保护染色体完整性。
②细胞分裂计时器。
③端粒的长度反应端粒酶活性。
端粒合成分为三步:①端粒酶结合于端粒后随链模板的3’端,以端粒酶RNA为模板,催化合成端粒后随链模板的一个重复单位。
②端粒酶前移一个重复单位。
③重复合成、前移。
端粒合成到一定长度之后,端粒酶脱离,端粒后随链模板末端可能回折,引导合成新生链填补短缺,由DNA聚合酶催化。
2、单基因遗传病有哪些类型?DNA损伤的类型有哪些?细胞内DNA修复的类型有哪些?详细阐述大肠杆菌中的核苷酸切除修复机制的修复过程?单基因遗传病一共分为五类。
①常染色体显性遗传病②常染色体隐性遗传病③X连锁显性遗传病④X连锁隐形遗传病⑤Y连锁遗传病DNA损伤类型一共分为六种。
①错配②插入与缺失③重排④共价交联⑤碱基丢失⑥主链断裂DNA修复从大类上分为五种:(1)错配修复(2)直接修复(3)切除修复(4)重组修复(5)易错修复切除修复又分为:①核苷酸切除修复②碱基切除修复大肠杆菌核苷酸切除修复机制:① UvrA2B2扫描损伤位点,UvrA脱离,UvrB募集UvrC水解损伤位点两侧特定的磷酸二酯键,形成两个切口。
② UvrD(MutU,又称DNA解旋酶Ⅱ)协助释放损伤片段,形成缺口。
③ DNA聚合酶Ⅰ以互补链为模板,催化合成DNA片段,填补缺口,由DNA连接酶连接切口。
分子生物学重要问答题练习
分子生物学重要问答题练习1.细胞学说的内容有哪些?①一切动植物都由细胞发育而来,即生物是由细胞和细胞产物所组成。
②所有细胞在结构和组成上基本相似。
③生物体是通过其细胞的活动反映其功能的。
④新细胞由已存在的细胞分裂而来;⑤生物的疾病是因为其细胞机能失常导致的。
2.早期主要有哪些试验证实了DNA是遗传物质?1944,Avery 肺炎球菌转化小鼠试验;1952,Hershey噬菌体侵染细菌实验。
4.通常所说的分子生物学的三条基本原则是什么?举例说明之。
①构成生物体的各类有机大分子的单体在不同的生物中都是相同的。
②生物体内一切有机大分子的建成都遵循共同的规则。
③某一生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。
5.现代分子生物学的主要研究领域有哪些?列举不少于三条。
①DNA重组技术②基因表达调控研究③生物大分子的结构和功能④基因组、功能基因组与生物信息学研究6.简述DNA的化学组成。
DNA由单体核苷酸首尾相接,以3′,5′-磷酸二酯键链接而成。
每个核苷酸由脱氧核苷和磷酸组成,而脱氧核苷由脱氧核糖和碱基A TCG组成。
7.染色体具有哪些作为遗传物质载体的特征?DNA分子结构应具有多样性和相对稳定性并能准确地自我复制。
8.列表对比原核细胞和真核细胞的异同。
造成两者基因表达极大差异的主要是哪些方面?造成两者基因表达极大差异的主要是细胞基本生活方式的不同。
原核生物一般为单细胞生物,对营养状况和环境因素反应迅速,以转录调节为主。
真核生物以多细胞生物为主,以激素调节和发育调节为主要手段,有严格的时空限制,调节范围宽广。
9.分析染色体的化学组成。
真核生物的染色体由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA组成10.简要回答原核生物DNA的主要特征。
原核生物中一般只有一条染色体,且大都带有单拷贝基因,只有很少基因以多拷贝形式存在;整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成;几乎每个基因序列都与它编码的蛋白质序列呈线性对应状态11.什麽是核小体?简述其形成过程。
分子生物学分章复习题
一、问答题1、分子生物学研究内容有哪些?●生物大分子,即DNA、RNA、蛋白质、多糖等;●DNA的结构与功能;●RNA在蛋白质合成中的作用;●蛋白质的结构与与功能;●遗传密码及基因表达调控的本质。
分子生物学第二章一、名词解释1、C值(C value):一种生物单倍体基因组DNA的总量;2、半保留留复制:每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新成的,所以这种复制方式被称为DNA的半保留留复制。
3、复制子:生物体内能独立复制的单位称为复制子,即从复制起始点到终止点的区域称为复制子。
一个复制子只含一个复制起始点。
4、复制叉:复制时,复制起点呈现叉子的形式,被称作复制叉;5、前导链DNA:它的DNA合成是以5—3方向的,随着亲代双链DNA的解开而连续进行复制。
6、后随链DNA:它的DNA合成过程中,一段亲本DNA单链首先暴露出来,然后以与复制叉移动相反的方向按照5—3方向合成一系列冈崎片段,再把它们连接成完整的后随链。
7、冈崎片段:后随链DNA合成不是连续的,而是一段一段的,把这些片段称为冈崎片段。
8、转座子(transposon,Tn):是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位(可以位因子)9、插入序列(IS因子)很小DNA片段(约1 kb),末端具有倒置重复序列,转座时往往复制宿主靶位点一小段DNA,形成位于IS序列两端的正向重复区,它不含有任何宿主基因。
是细菌染色体或质粒DNA正常组成部分。
10、SNP(single nucleotide polymorphism):是指基因组DNA序列中由于单个核苷酸(A,T,C和G)的突变而引起的多态性。
11、单倍型:位于染色体上某一区域的一组相关联的SNP等位位点被称作单倍型,相邻SNPs的等位位点倾向于以一个整体遗传给后代。
二、填空题1.染色体包括(DNA)和(蛋白质)两大部分。
2、真核把染色体上的蛋白质主要包括(组蛋白)和(非组蛋白)。
分子生物学问答题
1.DNA是遗传物质的两个重要试验的主要步骤?答:(1)Griffith及Avery细菌发生遗传转化试验证明了DNA是病毒的遗传物质,其具体步骤为:首先用活S型肺炎链球菌感染小鼠,小鼠死亡,而活R型感染,小鼠不死接着用灭活的S型和R型感染小鼠,结果都不致死;但是用灭活的S型和活R型混合感染小鼠,小鼠死亡,解剖小鼠发现有活的S型致病菌,分离死S型细菌各组分与活R型混合感染小鼠,发现只有S型DNA能使R型细菌发生转化,获得致病力,此实验证明DNA就是遗传物质。
(2)Hershey用噬菌体感染细菌的试验证明DNA是细菌的遗传物质。
其具体步骤为:在含有放射性标记的35S和32P的氨基酸或核苷酸培养液中培养噬菌体,获得含放射性标记的噬菌体,用这些放射性噬菌体感染无放射性大肠杆菌,经过1-2次传代后,子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质,但还有30%的32P标记说明在传代过程中发挥作用的是DNA而不是蛋白质。
2、简述中心法则的主要内容?(1) DNA序列是遗传信息的贮存者,通过自主复制得到永存;(2) DNA通过转录生成RNA;(3) 含遗传信息的mRNA通过翻译生成蛋白质来控制生命现象;(4) 同时某些RNA可以通过逆转录将遗传信息传到DNA;(5) 某些RNA自身还可进行复制使其遗传信息得以永存。
1、原核和真核生物在基因组DNA结构上有哪些差异?原核:(1)基因组较小,环状双螺旋DNA与DNA结合蛋白结合成带有单拷贝基因的单染色体(2结构简练几乎全部由功能基因和调控序列组成,几乎每个基因序列都与其所编码的蛋白质呈4)有些原核生物基因组内存在基因重叠现象,但编码序列一般不重叠。
(5)基因是连续的,没有内含子。
真核:(1)线性DNA与组蛋白结合形成染色体形式一般有多条。
(2)数量庞大含有大量重复序列(3)基因组中多数为非编码序列(4含有割裂基因(5具有多态性(6转录产物为单顺反子(5)具有端粒结构2、作为遗传物质应该具备哪些特性?为什么说DNA适合作为遗传物质?遗传物质特性:贮存并表达遗传信息,能把信息传递给子代,物理和化学性质稳定,具有遗传变化的能力DNA特性:各异的碱基序列储存大量的遗传信息,DNA的复制是其表达和传递遗传信息的基础,通过磷酸二酯键相连,形成双螺旋结构,生理状态下物理、化学性质稳定,有突变和修复能力,可稳定遗传是生物进化的基础。
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、选择题1. DNA双链的稳定性主要来源于:A. 磷酸基团之间的氢键B. DNA链内的共价键C. DNA链之间的磷酸二丁基酰连接D. DNA链之间的三硝基氢键答案:A2. 下列哪项不是DNA复制的关键酶?A. DNA聚合酶B. DNA解旋酶C. DNA连接酶D. DNA剪切酶答案:D3. 在转录过程中,RNA合成起始的位置是:A. 终止密码子B. 起始密码子C. RNA聚合酶启动位点D. 五端顺C答案:C4. 基因突变是指:A. DNA链断裂B. DNA链连接错位C. DNA序列发生改变D. DNA碱基替换答案:C5. 下列哪个细胞器参与了蛋白质翻译的过程?A. 叶绿体B. 线粒体C. 核糖体D. 溶酶体答案:C二、填空题1. 基因是指能反映生物形态、结构和功能遗传单位的______。
答案:DNA分子2. RNA合成过程中,RNA聚合酶在DNA模板链上合成RNA链时,拷贝的原则是按照______原则进行的。
答案:互补3. ______是指对编码区域的DNA序列进行翻译,合成蛋白质的过程。
答案:转录4. 在DNA中,磷酸基团与五碳糖以______键连接。
答案:磷酸二酯5. 翻译过程中,起始密码子是指编码蛋白质的______。
答案:氨基酸三、简答题1. 请简述DNA复制的过程。
答:DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA分子进行复制的过程。
复制过程中,DNA双链首先被解旋酶解开,形成两个单链模板。
随后,DNA聚合酶以5'-3'方向合成新的DNA链,根据模板链上的碱基,选择适配的互补碱基进行配对,形成新的DNA双链。
最终,电子酶将DNA链的磷酸二酯键连接,完成两条新的DNA分子的合成。
2. 请解释转录和翻译的过程及其在细胞生物学中的重要性。
答:转录是指DNA分子上编码区域的信息被转录成RNA分子的过程。
在转录过程中,RNA聚合酶以DNA作为模板,合成RNA链,根据DNA上的碱基,选择互补的核苷酸进行配对。
分子生物学-10
分子生物学-10(总分:100.00,做题时间:90分钟)一、问答题(总题数:20,分数:100.00)1.比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子和原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,并解释为什么原核生物的一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:原核生物RNA聚合酶所识别的启动子由上游增强元件、-35区、-10区以及转录起始位点构成;真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子由TATA盒、转录起始位点、TFIIB识别位点以及下游启动子元件构成。
由于原核生物的RNA聚合酶含有能特异性识别启动子的σ因子,所以不需要其他辅助蛋白就能识别不同的结构基因。
2.比较真核生物rRNA、mRNA以及tRNA合成的特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:核仁是28S rRNA、18S rRNA以及5.8S rRNA合成的场所,这三种rRNA共享一个启动子,由RNA聚合酶Ⅰ合成,45S rRNA是它们的共同前体,通过转录后加工产生各自成熟的终产物。
核质是mRNA和tRNA、5SrRNA合成的场所,分别由定位于细胞核质的RNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ合成,产生的前体均要经过转录后加工才能成为终产物。
3.简述真核生物rRNA基因(不含5S rRNA基因)和tRNA基因的转录起始机制。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:真核生物28S rRNA,18S rRNA以及5.8S rRNA基因由RNA聚合酶Ⅰ负责转录,首先组装因子UBF分别与上游控制元件UCE和核心启动子结合,随后招募定位因子SL1与启动子结合,SL1引导RNA pol Ⅰ正确定位到启动子上,起始转录。
分子生物学题库3
分⼦⽣物学题库3七、问答题1.阐述原核⽣物的转录终⽌。
(1)转录终⽌的两种主要的机制是什么?(2)描述翻译怎样能调节转录终⽌。
(3)为什么在细菌转录终⽌中很少涉及到Pho因⼦?(4)怎样能阻⽌转录的终⽌?2.复制 DNA的聚合酶(DNA依赖的 DNA聚合酶)也有校正功能,解释为什么RNA聚合酶没有这种功能。
3.讨论原核⽣物基因表达的聚合作⽤反应定向的重要性。
假如核糖体从3’端到5’端读它的模板 mRNA 的话,那么将会发⽣什么情况?4.概括细菌细胞的转录过程。
5. 概括典型原核⽣物启动⼦的结构和功能,并解释什么是保守序列。
6.转录如何在基因或基因组末端终⽌?7.(1)如何区分由启动⼦起始转录的RNA⽚段与5’端被加⼯过的RNA⽚段;(2)证明多肽是从氨基端到羧基端⽅向合成的。
8.⽐较E.coli rRNA和 tRNA的转录和加⼯。
9.区别可诱导和可阻遏的基因调控。
10.衰减作⽤如何调控E. coli中⾊氨酸操纵⼦的表达?11.⽐较并指出细菌和真核⽣物RNA 翻译机理的异同。
12.什么是摇摆假说?13.指出E.coli和真核⽣物翻译起始的不同。
14.S.N Cohen于1973年构建了三个重组体, pSC102, pSC105, pSC109请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么?15.基因克隆是如何使含有单个基因的DNA⽚段得到纯化的?16.什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modificaton system, R-M system)17.细菌的限制—修饰系统有什么意义?18.说明限制性切核酸酶的命名原则要点。
19.Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因⼯程中有什么作⽤?20.Ⅲ类限制酶有哪些特点?21.何谓限制性切核酸酶的切割频率?22.什么是限制性切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响?23.双酶消化法(double digests)绘制限制性切核酸酶酶谱的原理。
24.什么是 DNA多态性(DNA polymorphism)?25.限制性⽚段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)。
分子生物学习题与答案
分子生物学习题与答案1. DNA复制的过程中,以下哪些事件是正确的?•[ ] A. DNA链的两端向外延伸•[ ] B. DNA链的两端向内收缩•[ ] C. DNA链的两端同时向外延伸•[ ] D. DNA链的两端同时向内收缩答案: A. DNA链的两端向外延伸2. RNA与DNA的区别在于:•[ ] A. RNA具有三个碱基•[ ] B. RNA中的磷酸基不同•[ ] C. RNA中的核糖糖基与DNA中的脱氧核糖糖基不同•[ ] D. RNA中的碱基顺序不同答案: C. RNA中的核糖糖基与DNA中的脱氧核糖糖基不同3. DNA转录的过程中,以下哪些事件是正确的?•[ ] A. DNA链的两端同时向外延伸•[ ] B. RNA链的两端向外延伸•[ ] C. DNA链的两端向内收缩•[ ] D. RNA链的两端向内收缩答案: B. RNA链的两端向外延伸4. DNA修复的过程中,以下哪些事件是正确的?•[ ] A. DNA链的两端同时向外延伸•[ ] B. DNA链的两端向外延伸•[ ] C. DNA链的两端同时向内收缩•[ ] D. DNA链的两端向内收缩答案: B. DNA链的两端向外延伸5. 下列哪种方法可以对DNA重组进行研究?•[ ] A. 基因敲除•[ ] B. PCR•[ ] C. 克隆•[ ] D. 基因组重测序答案: C. 克隆6. PCR技术的原理是:•[ ] A. 核酸酶切割DNA•[ ] B. DNA链延伸合成•[ ] C. DNA链循环扩增•[ ] D. RNA链转录答案: C. DNA链循环扩增7. 下列哪个方法可以检测蛋白质与DNA的相互作用?•[ ] A. 免疫沉淀•[ ] B. 荧光染色•[ ] C. 聚合酶链反应•[ ] D. 凝胶电泳答案: A. 免疫沉淀8. 下列哪种技术可以用于分析DNA序列?•[ ] A. 聚合酶链反应•[ ] B. 凝胶电泳•[ ] C. 免疫沉淀•[ ] D. 计算机序列比对答案: D. 计算机序列比对9. 下列哪种方法可以研究基因表达?•[ ] A. PCR•[ ] B. 克隆•[ ] C. 蛋白质质谱•[ ] D. RNA测序答案: D. RNA测序10. 下列哪个事件可以引起DNA突变?•[ ] A. DNA复制过程中的氧化损伤•[ ] B. RNA转录过程中的氧化损伤•[ ] C. DNA修复过程中的氧化损伤•[ ] D. PCR反应过程中的氧化损伤答案: A. DNA复制过程中的氧化损伤11. 下列哪种方法可以用于检测基因表达水平的变化?•[ ] A. 免疫组织化学•[ ] B. PCR•[ ] C. 基因组重测序•[ ] D. RNA测序答案: D. RNA测序12. 下列哪个事件是形成表观遗传变异的原因?•[ ] A. DNA突变•[ ] B. RNA转录错误•[ ] C. 甲基化修饰•[ ] D. DNA复制错误答案: C. 甲基化修饰13. 编码DNA序列的片段称为:•[ ] A. 基因•[ ] B. 转录本•[ ] C. 外显子•[ ] D. 内含子答案: A. 基因14. 下列哪种方法可以用于检测DNA突变?•[ ] A. 免疫沉淀•[ ] B. 凝胶电泳•[ ] C. PCR•[ ] D. 聚合酶链反应答案: C. PCR15. 下列哪个事件是形成RNA剪接变异的原因?•[ ] A. DNA突变•[ ] B. RNA转录错误•[ ] C. 甲基化修饰•[ ] D. RNA剪接错误答案: D. RNA剪接错误16. 下列哪个事件可以影响蛋白质的结构和功能?•[ ] A. DNA突变•[ ] B. RNA转录错误•[ ] C. 蛋白质翻译错误•[ ] D. 蛋白质修饰答案: D. 蛋白质修饰17. 下列哪种方法可以用于检测蛋白质与蛋白质的相互作用?•[ ] A. 免疫组织化学•[ ] B. 荧光染色•[ ] C. 聚合酶链反应•[ ] D. 凝胶电泳答案: B. 荧光染色18. 下列哪种方法可以用于检测蛋白质表达水平的变化?•[ ] A. PCR•[ ] B. 免疫组织化学•[ ] C. 蛋白质质谱•[ ] D. RNA测序答案: C. 蛋白质质谱19. 下列哪种方法可以用于检测蛋白质突变?•[ ] A. 蛋白质质谱•[ ] B. 免疫沉淀•[ ] C. 蛋白质结晶•[ ] D. 凝胶电泳答案: A. 蛋白质质谱20. 下列哪个事件可以导致蛋白质降解?•[ ] A. DNA突变•[ ] B. RNA转录错误•[ ] C. 蛋白质磷酸化•[ ] D. 蛋白质降解酶作用答案: D. 蛋白质降解酶作用笔者:1500字已完成,希望对你有所帮助。
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1.什么是转座? 转座因子在一个DNA分子内部或者两个DNA之间不同位置间的移动。
2.病毒基因组有哪些特点?答:不同病毒基因组大小相差较大;不同病毒基因组可以是不同结构的核酸;除逆转录病毒外,为单倍体基因组;病毒基因组有的是连续的,有的分节段;有的基因有内含子;病毒基因组大部分为编码序列;功能相关基因转录为多顺反子mRNA有基因重叠现象。
3.原核生物基因组有哪些特点?答:基因组由一条环状双链DNA组成;只有一个复制起始点;大多数结构基因组成操纵子结构;结构基因无重叠现象;无内含子,转录后不需要剪接;基因组中编码区大于非编码区;重复基因少,结构基因一般为单拷贝;有编码同工酶的等基因;基因组中存在可移动的DNA序列;非编码区主要是调控序列。
4.真核生物基因组有哪些特点?答:每一种真核生物都有一定的染色体数目;远大于原核基因组,结构复杂,基因数庞大;真核生物基因转录为单顺反子;有大量重复序列;真核基因为断裂基因;非编码序列多于编码序列;功能相关基因构成各种基因家族。
5.基因重叠有什么意义?答:利用有限的核酸储存更多的遗传信息,提高自身在进化过程中的适应能力。
6.质粒有哪些特性? 答:在宿主细胞内可自主复制;细胞分裂时恒定地传给子代;所携带的遗传信息能赋予宿主特定的遗传性状;质粒可以转移。
7.什么是顺式作用元件? 答:基因中能影响基因表达,但不编码RNA和蛋白质的DNA序列。
顺式作用元件主要包括启动子、增强子、负调控元件等。
8.简述原核基因表达的特点。
答:(1)只有一种RNA聚合酶。
(2)原核生物的基因表达以操纵子为基本单位。
(3)转录和翻译是偶联进行的。
(4)mRNA:翻译起始部位有特殊的碱基序列-SD序列。
(5)原核生物基因表达的调控主要在转录水平,即对RNA合成的调控。
9.简述σ因子在原核基因表达调控中的意义。
答:(1)6因子含有识别启动区的结构域调控RNA聚合酶与.DNA结合,确保RNA聚合酶与特异启动区而不是其他位点的稳定结合(2)6因子使得RNA聚合酶选择一套特定启动区起始转录。
一旦一种6因子被另一种代替,即引起原来一套基因转录的关闭和新的一套基因转录的开届。
10.在有乳糖而无葡萄糖的条件下,乳糖操纵子是如何调控转录起始的?答:无葡萄糖时,cAMP处于高水平,与CAP形成cAMP-CAP 复合物并结合到启动子上游的CAP位点,乳糖存在阻遏蛋白不与操纵基因结合,cAMP-CAP复合物与lac操纵子的调控元件结合后,促进结构基因的转录。
11.简述乳糖操纵子的结构。
答:编码β-半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶和硫代半乳糖苷转乙酰基酶的基因Z、Y、A称为结构基因,结构基因加上调控元件:启动子P和操纵基因O及CAP结合位点,lac阻遏蛋白基因I,即构成乳糖操纵子。
12.原核生物可以通过哪几个层次的表达调控以适应环境的改变?答:(1)转录起始的调控:①6因子调控转录起始;②转录起始的负调控;③转录起始的正调控;④转录起始的复合调控。
(2)转录终止的调控:①依赖ρ因子的终止调控,通过ρ因子的作用使转录终止;②不依赖ρ因子的终止调控;③核糖体调控转录终止。
(3)翻译水平的调控:①反义RNA的调控作用;②RNA的稳定性;③蛋白质合成中的自身调控。
13.简述真核基因表达的特点答:(1)细胞的全能性:所谓全能性是指同一种生物的所有细胞都含有相同的基因组DNA。
(2)基因表达的时间性和空间性:高等生物的各种不同细胞具有相同的基因组,但在个体发育的不同阶段,基因表达的种类和数量是不同的,在不同组织和器官中,基因表达的种类和数量不同。
(3)转录和翻译分开进行:在核中转录生成mRNA穿过核膜至胞质指导蛋白质合成。
(4)初级转录产物要经过转录后加工修饰。
(5)不存在超基因式操纵子结构:真核生物基因转录产物为单顺反子,一条mRNA只翻译一种蛋白质。
(6)部分基因多拷贝。
14.真核生物基因组DNA水平的表达调控包括哪几种方式?答:(1)染色质的丢失;(2)基因扩增;(3)基因重排;(4)基因的甲基化修饰;(5)染色质结构对基因表达的调控作用。
15.列举几种真核基因的顺式作用元件答:(1)启动子:Hogness(TATA)盒,CAAT盒;(2)增强子:SV40病毒中,位于早期启动子5’上游约200 bp,内含2个72bp的重复序列,其核心序列为GGTGTGGA_AAG:(3)沉默子:SV40中的AG~ITiTIT序列为终止转录调控元件。
16.简述反式作用因子的基本结构特点。
答:一个完整的反式作用因子通常含有三个主要功能结构域,分别为DNA识别结合域、转录活化域和结合其他蛋白质的调节结构域。
这些结构域含有几十到几百个氨基酸残基。
不同的结构域有自己的特征性结构。
(1)DNA识别结合域:锌指结构、碱性亮氨酸拉链、同源结构域、螺旋-环-螺旋结构、碱性α螺旋。
(2)转录活化结构域:酸性α-螺旋、富含谷氨酰胺的结构域、富含脯氨酸结构域。
17.简述真核生物转录水平的调控机制。
答:主要通过反式作用因子与顺式作用元件和RNA聚合酶(RNA polymerase,RNA p01)的相互作用完成。
(1)顺式作用元件(cis—acting element)指某些能影响基因表达但不编码新的蛋白质和RNA的DNA序列,按照功能分为启动子、增强子、负调控元件(沉默子等)。
(2)反式作用因子(trans—acting factor)指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件8-12bp核心序列上,参与调控靶基因转录效率的一组蛋白质,也称序列特异性DNA结合蛋白(sequence specific DNA binding protein,SDBP),这是一类细胞核内蛋白质因子。
在结构上含有与DNA结合的结构域。
(3)反式作用因子的活性调节:①反式作用因子的活性调节:真核基因转录起始的调节,首先表现为反式作用因子的功能调节,即特定的反式作用因子被激活后,可以启动特定基因的转录。
反式作用因子的激活方式如下:表达式调节;共价修饰;配体结合;蛋白质与蛋白质相互作用②反式作用因子作用方式:成环;扭曲;滑动;Oozing③反式作用因子的组合式调控:基因表达的调控不是由单一的反式作用因子完成而是几种因子组合,发挥特定的作用。
18.简述基因表达调控的意义及基本调节层次。
答:(1)在同一机体的各种细胞中虽然含有相同的遗传信息即相同的结构基因,但它们并非在所有细胞中都同时表达,而必须根据机体的不同发育阶段、不同的组织细胞及不同的功能状态,选择性、程序性地表达特定数量的特定基因。
通常情况下,真核生物细胞只有2%~15%的基因处于有转录活性的状态。
为了适应环境的变化,生物体需要不断的调节和控制各种基因的表达。
(2)基因表达的调控是一个十分复杂的过程。
从DNA上的遗传信息到蛋白质功能发挥的整个过程中,存在着基因组、转录、转录后、翻译及翻译后多个水平的调控环节。
19.举例说明什么是管家基因及其基因表达特点。
答:(1)管家基因(house.keeping genes)是指所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是维持细胞基本生命活动所必需的。
如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。
(2)管家基因表达水平受环境因素影响较小,在个体各个生长阶段的大多数、或几乎全部组织中持续表达,或变化很小。
它的表达只受启动序列或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响,而不受基他机制调节a调控区多呈低甲基化。
20.简述真核生物在翻译水平上的调控。
答:(1)翻译起始的调控:①翻译起始因子的功能调控:eIF-2是蛋白质合成过程中重要的起始因子。
有些物质可以影响eIF-2的活性,调节蛋白质合成的速度。
培养的真核细胞处于营养不足(“饥饿”)时,elF-2失活,最终导致肽链合成起始效率降低。
②阻遏蛋白的调节作用:所有进入胞浆的mRNA分子并不是都可以立即与核糖体结合翻译成蛋白质。
由于存在一些特定的翻译抑制蛋白可以与一些mRN A的5’端结合,从而抑制了蛋白质翻译。
③5’AUG对翻译的调节作用..以真核mRNA为模板的翻译开始于最靠近其5’端的第一个AUG。
90%以上的真核mRNA符合第一AUG规律。
但在有些mRNA中,在起始密码子AUG的上游(5’端)非编码区有一个或数个AUG,称为5'AUG。
5'AUG的阅读框通常与正常编码区的阅读框不一致,不是正常的开放阅读框a如果从5'AUG开始翻译,很快就会遇到终止密码子。
因此,若从5’AUG开始翻译,就会翻译出无活性的短肽。
mRNA 5’端非编码区长度对翻译的影响:起始密码AUG上游非编码区的长度可以影响翻译水平。
当第一个AUG密码子离5’端帽子的位置太近时,不容易被40S亚基识别。
当第一个AUG密码子距5’端帽子结构的距离在12个核苷酸以内时,有一半以上的核糖体40S亚基会滑过第—个AUG。
当5’端非编码区的长度在17—80核苷酸之间时,体外翻译效率与其长度成正比。
所以,第一个AUG至5’端之间的长度同样影响翻译起始效率和翻译起始的准确性。
(2)mRNA稳定性调节:mRNA的稳定性是翻译水平调控的重要因素,是由于mRNA是翻译蛋白质的模板,其量的多少直接影响蛋白质合成的量。
mRNA半衰期越长,.翻译效率越高,在细胞内合成蛋白质的量愈多。
(3)小分子RNA对翻译的调控作用:如lin-4 RNA由lin-4基因编码,可阻抑l in-14蛋白质(一种核蛋白),从而调控生长发育的时间选择。
21.简述真核基因转录因子分类及功能。
答:(1)反式作用因子指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件8-12 bp核心序列上,参与调控靶基因转录效率的一组蛋白质,有时也称转录因子。
(2)目前发现的转录因子有近百种,根据其作用方式的不同分为三类:① 通用转录因子:系多数细胞普遍存在的一类转录因子,如TATA box结合因子TFⅡD、C-X:box结合因子SPl等;②组织特异性转录因子:在很大程度上,基因表达的组织特异性取决组织特异性转录因子的存在;③诱导性反式作用因子:这些反式作用因子的活性能被特异的诱导因子所诱导,这种活性的诱导可以是新蛋白的合成。
22.简述真核和原核基因表达调控共同的要素。
答:(1)DNA元件:具有调节功能的DNA序列原核:启动序列,操纵序列真核:顺式作用元件,启动子,增强子,抑制子 (2)调节蛋白:原核:阻遏蛋白:负性调节;激活蛋白:正性调节真核:转录因子——基本转录因子、激活因子、抑制因子(3) RNA聚合酶:RNA聚合酶主要是通过识别与结合启动子,参与基因转录起始调控23.说明阻遏蛋白在原核基因表达调控中的普遍意义。
答:阻遏蛋白通常是与基因操纵区结合,减弱或阻止其调控的基因转录,其介导的调控方式为负调控。