生物素标记试剂盒使用说明书

EMSA探针生物素标记试剂盒

E. 用紫外交联仪(UV-light cross-linker)选择254nm紫外波长，120mJ/cm2，交联30-45秒。如果没有紫外交联仪可以使用
普通的手提式紫外灯(例如碧云天的手提紫外检测仪(EUV002))，距离膜5-10厘米左右照射1-5分钟。也可以使用超净
工作台内的紫外灯，距离膜5-10厘米左右照射1-10分钟。最佳的交联时间可以使用标准品自行摸索。
1ml 200µl
GS008-7 GS008-8
—
TE 退火缓冲液(10X)
说明书
15ml 150µl 1份
保存条件：
-20℃保存。
注意事项： ¾ 需自备用于检测探针标记效率的带正电荷尼龙膜或硝酸纤维素膜(NC膜)，以及用于生物素检测的相关试剂。带正电荷尼
龙膜(FFN12/FFN16) 和硝酸纤维素膜(FFN06/FFN09)可以向碧云天订购。相应的用于生物素检测的化学发光法EMSA试剂盒(GS009)也可以向碧云天订购。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
会出现标记效率大于100%的情况。
6. 生物素标记EMSA探针的制备：
A. 对于步骤3B标记好的单链DNA探针，把正义链和反义链等体积混合(不可根据标记效率调整摩尔比例)。对于最初使
用变性的双链EMSA探针进行探针标记的情况，直接进入下一步。
B. 加入退火缓冲液(10X)，使退火缓冲液的最终浓度为1X，混匀。例如待退火探针的体积为100微升，则加入11微升退
使用说明：
1. 准备工作： A. 取出TdT Buffer (5X)、Biotin-11-dUTP和Ultrapure water溶解，并置于冰浴上备用。 B. 取出待标记的单链EMSA探针，用水稀释至1µM，并置于冰浴上备用。如果待标记的EMSA探针为双链，95℃加热2 分钟，然后立即放置到冰水浴中，使双链的EMSA探针转变为单链的探针，然后同样用水稀释至总的单链DNA浓度为 1µM，即每条单链的浓度为0.5µM，相当于最初双链的EMSA探针浓度为0.5µM。

达优 ELISPOT 试剂盒 Mouse IFN-γ 说明书

Mouse IFN-γprecoated ELISPOT kit（strips）Cat#:2210005产品描述：深圳市达科为生物工程有限公司生产的达优®系列ELISPOT预包被试剂盒采用原装进口高亲和力高效价抗体对，经预包被PVDF板、低温干燥、真空密封包装等工艺流程制备。

成品PVDF板上预包被的抗体分布均匀、效价稳定，2-8ºC可存放12个月。

达优®系列预包被ELISPOT试剂盒使实验检测时间从3天缩短为2天，大幅度减少无菌操作的实验步骤，减轻实验者的劳动强度和减少污染的几率。

使得实验者能够轻松、高效地完成复杂的ELISPOT检测实验。

试剂盒提供的试剂、规格：名称规格×数量Biotinylated Antibody100μL×1支Streptavidin-HRP100μL×1支Dilution Buffer R(1×)10mL×2瓶Washing Buffer(50×)15mL×1瓶AEC Dilution10mL×1瓶AEC SolutionⅠ(20×)500μL×1支AEC SolutionⅡ(20×)500μL×1支AEC SolutionⅢ(200×)50μL×1支阳性刺激物50T预包被PVDF可拆板1块实验者自备的试剂与仪器：1.RPMI-1640基础培养基（需要添加双抗）2.无血清培养基（完全培养基，即用型），推荐使用达优@ELISPOT无血清培养基。

3.超净工作台4.CO2细胞培养箱5.微量移液器及配套Tip头6.8通道微量移液器7.0.5mL，1.5mL EP管8.酶联斑点分析仪检测操作：第一天：接种细胞，加入刺激物，培养（严格注意无菌操作）试剂配制1.阳性刺激物：现配现用。

2.无血清培养基：如果没有ELISPOT无血清培养基，可用含5-10%胎牛血清的RPMI-1640培养基代替。

碧云天生物技术 Beyotime Biotechnology 生物素标记EMSA探针说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站微信公众号生物素标记EMSA探针－β-Catenin/TCF (0.2μM)产品编号产品名称包装GS018B 生物素标记EMSA探针－β-Catenin/TCF (0.2µM) 200µl产品简介：生物素标记EMSA探针－β-Catenin/TCF是用于EMSA(也称gel shift)研究的生物素(Biotin)标记的β-Catenin/TCF consensus oligonucleotide。

这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的β-Catenin/TCF结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。

β-Catenin/TCF consensus oligo的序列如下：5'-CCC TTT GAT CTT ACC-3'3'-GGG AAA CTA GAA TGG-5'本生物素标记EMSA探针已经过纯化，可以直接用于EMSA结合反应。

本生物素标记EMSA探针可以和碧云天的化学发光法EMSA试剂盒(GS009)配套使用。

一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。

包装清单：产品编号产品名称包装GS018B 生物素标记EMSA探针－β-Catenin/TCF (0.2µM) 200µl—说明书1份保存条件：-20ºC保存，一年有效。

注意事项：避免加热到40ºC以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。

而单链无法用于EMSA研究。

对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考碧云天的化学发光法EMSA试剂盒(GS009)的使用说明。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

northern 说明书

中文使用说明书North2South 生物素标记和化学发光检测试剂盒目录号: 17175 （17075，37549，37555，89880）该试剂盒由探针标记，杂交洗膜和化学发光检测三部分组成17075（探针标记，纯化和定量）North2South™生物素随机引物Kit(该试剂盒含有足以完成10次标记反应的试剂，每次可合成至少1ug的生物素标记的探针)储存条件：所有试剂应该在无霜冷冻－20°冰箱保存探针标记：操作步骤：将20ul生物素标记的N4-dCTP与80ul的5XdNTP混合物充分混合备用（总量100ul）1.稀释约100ng线性探针模板至24ul于离心管中(模板DNA要定量和纯化)2.加入10ul随机引物（Heptanucleotide mix）于上述离心管中，煮沸变性5分钟，迅速在冰水混合物退火5分钟3.加入10ul N4-dCTP与5XdNTP的混合物，5ul 反应缓冲液，1ul Klenow酶片断，混匀4.37°孵育60分钟5.加入2ul EDTA以灭活Klenow酶活性探针纯化操作步骤：1.加入5ulNH4OAC于上述50ul反应离心管，吹打混匀2.加入110 ul 冰预冷的无水乙醇，充分混匀，冰或－70°放置15分钟3.12000rpm 4°离心15分钟4.观察沉淀情况，小心吸取出上清，风干沉淀5.用冰预冷的70％乙醇洗涤一次，12000rpm 4°离心15分钟，观察沉淀情况，小心吸取出上清，风干沉淀6.50ulTE或RNA酶free 的水溶解沉淀（－20℃或－70℃长期保存）探针定量（17075）操作步骤：1.500ul去离子水，260nm调零2.充分混匀2.5ul 探针和47.5ul 去离子水（即稀释20倍）分光光度计测定OD260值3.定量计算公式：1 OD260 dsDNA = 50 μg/ml；样品浓度（μg/ml）=OD值X50X稀释倍数;样品浓度μg/ul= OD260值X50X20/1000样品浓度ng/ul= OD260值X50X20（注：如果稀释20倍，实际测定的OD260值应该在0.02－0.05之间）Note:大多数情况下，由于各实验室用来测定核酸的仪器不同，检测灵敏度不同以及样品中的一些干扰物质，测出的OD值往往是0甚至是负值，如果出现这种情况，再进行核酸定量没有实际价值，因此，根据经验，保守估计，在每次至少合成1ug探针的前提下，在杂交时，探针的用量按照每ul含有20ng探针来使用，即每毫升杂交液加入变性的纯化过的探针1.5-2ul.杂交和洗膜储存条件：4℃点杂交；样品转膜（带正电尼龙膜）使用前将所有试剂放到室温下，保证所有buffer 溶解充分，没有颗粒。

TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)说明书

TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)产品编号产品名称包装 C1098TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(显色法)50次产品简介：碧云天生产的显色法TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。

对于待检测的细胞或组织样品，经过生物素标记和后续的DAB 显色等步骤，即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA 。

细胞凋亡时抽提DNA 进行电泳检测，可以发现180-200bp 的DNA ladder 。

基因组DNA 断裂时，暴露的3'-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP)，随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合，最后在HRP 的催化下通过DAB 显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。

本试剂盒有如下优点。

(1) 高灵敏度：背景染色极低，阳性染色强，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA 断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。

(2) 特异性好：TUNEL 检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。

(3) 快速：仅需约2-3个小时即可完成。

(4) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

(5) 实测效果好：参考图1。

图1. 本试剂盒的检测效果图。

A. HeLa 细胞未处理或用DNase I 室温孵育10分钟后的检测效果图。

生物素测试剂盒操作流程

维生素B7（生物素）检测试剂盒实验操作流程一、实验前准备工作1、灭菌（在做实验前，至少提前两个小时以上灭菌）如果有一次性无菌注射器则不需要灭菌注射器没有枪头盒时用其他器皿装枪头一起灭菌（如烧杯，灭菌时放入枪头后用报纸把烧杯口封起来），同时带两把小镊子，做实验时取枪头用。

2、配制溶液（1）准备10mlHCL溶液：1.0mol/l（2）配制氢氧化钠溶液：1mol/la）称取0.4 g 氢氧化钠b）用10 ml双蒸水或去离子水充分溶解注：用带橡胶塞的玻璃瓶储存。

3、实验过程中需要的其他设备及器材：无菌工作台酶标仪(540nm或630nm)37℃黑暗条件下的培养箱95℃水浴锅（实验前需要提前加热到95℃）振荡器pH测量仪或pH试纸双蒸水0.2um无菌滤膜酒精棉二、样品处理1、称取1g奶粉样品至一个50ml无菌试管中，加入40ml无菌水摇匀，用HCL或NaOH调整pH值到8.0 ＋/- 0.2，充分混匀；2、在95℃水浴中提取30分钟，期间所有样品试管需每隔5分钟振荡一次，并一直保持试管塞紧闭3、迅速冷却至室温（即把样品试管放进水里，保证试管塞紧闭）从下面这一步开始需要在无菌工作台进行4、分别取1ml样品用0.2um无菌滤膜过滤至1.5～2.0ml无菌试管中5、根据样品中生物素含量用试剂盒中提供的无菌水进一步稀释样品，稀释后的样品即可用于检测。

样品稀释倍数计算如下：例如：固体样品标注浓度为80ug/100g用该浓度除以标准2计算： 80 μg ÷ 0.24 μg ＝333→ 结果为稀释倍数大约为300→ 1 ：300 稀释稀释步骤：a) 1 ：9（100ul样品提取溶液＋ 900ul试剂盒中的无菌水），b) 1 ：9（100ul a液＋ 900ul试剂盒中的无菌水），c) 1 ：2（200ul b液＋ 400ul试剂盒中的无菌水）注：每一步稀释都需要充分混匀后再做下一步稀释，提取稀释液需立即使用。

化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒 D3308 说明书

化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒产品编号产品名称包装 D3308化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒1000cm 2产品简介：化学发光法生物素检测试剂盒(Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit)是一种通过Streptavidin-HRP 及后续的BeyoECL Moon 试剂来实现化学发光检测Biotin 标记核酸的检测试剂盒。

适用于Southern blot 、Northern blot 、ribonuclease protection assay (RPA)或EMSA 等实验中，采用生物素标记的DNA 或RNA 探针时的检测。

本试剂盒不适用于生物素标记蛋白的检测。

本试剂盒同时还提供了封闭液、洗涤液等检测时所需的配套试剂。

本试剂盒采用了高质量的Streptavidin-HRP Conjugate ，HRP 和Streptavidin 共价交联的比例大于3，这样比采用Streptavidin 和Biotin-HRP conjugate 两种试剂进行检测要更方便，并且灵敏度更高。

采用了非特异性结合比avidin 更低的strepatavidin ，使检测结果背景更低灵敏度更高。

本试剂盒没有提供生物素探针标记相关的试剂，生物素标记的DNA 探针或EMSA 探针的制备可以相应地使用碧云天生产的生物素3'末端DNA 标记试剂盒(D3106)或EMSA 探针生物素标记试剂盒(GS008)。

本试剂盒可以用于检测至少10块10×10cm 有生物素标记EMSA 探针的膜，即共1000cm 2。

包装清单：产品编号产品名称包装 D3308-1 BeyoECL Moon A 液 55ml D3308-2 BeyoECL Moon B 液 55ml D3308-3 Streptavidin-HRP Conjugate100µl D3308-4 封闭液 380ml D3308-5 洗涤液(5X)250ml D3308-6检测平衡液 250ml —说明书1份保存条件：D3308-3 Streptavidin-HRP Conjugate 在-20ºC 保存，其余可4ºC 保存。

试剂盒,人试剂盒,人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒使用说明书

人刀豆素A（ConA）ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆樊克生物供应使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本刀豆素A（ConA）含量。

试验原理：ConA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知ConA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将ConA和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中ConA的浓度呈比例关系。

刀豆素A试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,人elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗ConA抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

生物素标记蛋白操作方法

抗体生物素标记操作方法一般每个抗体可以标记3-5个生物素，标记时，生物素与抗体的比率受抗体浓度影响，对于10 mg/ml 的抗体溶液来说，生物素应超过蛋白12倍（摩尔数），对于2 mg/ml 的抗体溶液应超过20倍，生物素也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中。

蛋白样品不得含有叠氮钠、BSA、甘氨酸、Tris或其他任何有自由氨基的添加物。

一、试剂和器材：1、标记反应溶液：0.1M pH 7.2 PBS（0.15M sodium chloride）NaCl 8.77 g ；Na2HPO4·12H2O 32.3g ；NaH2PO4·2H2O 4.5g；加双蒸水 900mL左右，用HCl/NaOH 调pH至 7.2，最后定容为 1000mL2、 10mM NHS-dPEG4-Biotin配方：称取0.56mg NHS-dPEG4-Biotin（分子量为587），溶解于95 µl 超纯水中，临用前配置，不可储存，立刻使用。

NHS-PEG4-Biotin容易潮解，开瓶前平衡至室温。

也可以配置200 nmol/L 储备液：20mg NHS-dPEG4-Biotin溶解于170µl DMSO中，-20℃稳定几个月。

由于NHS-PEG4-Biotin昂贵，而且使用量少，不能保存，配制时，直接将NHS-PEG4-Biotin放入1.5ml EP管中，以实际称量的NHS-PEG4-Biotin按比率加入超纯水。

3、超滤管⑴、Millipore超滤管[0.5ml 10KD]:截留分子量10KD，残留体积200µl，蛋白回收率95%，7500×g（允许的最大离心力14000×g）离心10min。

⑵、Millipore超滤管[0.5ml 50KD]:截留分子量50KD，残留体积80µl，蛋白回收率94%，7500×g（允许的最大离心力14000×g）离心5 min。

Fortebio Octet BLI 蛋白生物素标记应用指南

蛋白的生物素标记操作指南（Octet分子互作仪器测定专用）概述链霉亲和素与生物素之间的相互作用是目前已知强度最高的非共价作用，并且二者的结合稳定性好，专一性强，不受试剂浓度，pH环境，抑或蛋白变性剂等有机溶剂影响。

因此，链霉亲和素与生物素快速，稳定和不可逆非共价的结合被广泛应用于研究生物分子间的相互作用。

Octet平台的链霉亲和素（SA/SAX/SSA）生物传感器已被开发用于蛋白定量和动力学，结合在SA//SAX/SSA传感器上的第一个蛋白质必须进行生物素化标记。

为方便利用Octet平台上的SA/SAX/SSA传感器进行动力学和定量分析，特制订本指南为利用生物素化试剂标记目标蛋白提供指导。

生物素试剂的选择Biotin为例。

生物素化试剂建议购买小包装，使用DMSO溶解配制成10 mM母液保存于-20℃备用。

产品货号：21312的NHS-PEG12-Biotin为例：10 mM母液的配制案例=（生物素化试剂质量1mg）÷（生物素分子量941 Da）×100=0.106 mL，1 mg生物素化试剂溶于0.106 mL DMSO中即为10 mM母液。

氨基偶联生物素化试剂反应示意图实验试剂和耗材1)缓冲液：DMSO，1×PBS，PBST（PBS+0.02% tween20）2)掌上离心机，一台3)生物素标记试剂EZ-Link NHS-PEG12-Biotin (Thermo，货号：21312) 1 mg，加入0.106 mL的DMSO配置成10 mM母液4)PD Min iTrap™ G-25 Desalting Column用于脱盐，蛋白样品体积0.1-0.5 mL，(GE, 货号：28-9180-07 )。

5)Zeba desalting spin columns脱盐柱：a)蛋白样品体积30-130 uL,使用0.5 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89882)b)蛋白样品体积200-700 uL,使用2 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89889)c)蛋白样品体积600-2000 uL,使用5 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89891)6)透析装置：Slide-A-Lyzer™ Dialysis Cassettes（Thermo，具体型号根据目标蛋白样品体积以及目标蛋白的分子量进行选择。

蛋白的生物素标记操作指南

蛋白的生物素标记操作指南（Octet分子互作仪器测定专用）概述链霉亲和素与生物素之间的相互作用是目前已知强度最高的非共价作用，并且二者的结合稳定性好，专一性强，不受试剂浓度，pH环境，抑或蛋白变性剂等有机溶剂影响。

因此，链霉亲和素与生物素快速，稳定和不可逆非共价的结合被广泛应用于研究生物分子间的相互作用。

Octet平台的链霉亲和素（SA/SAX/SSA）生物传感器已被开发用于蛋白定量和动力学，结合在SA//SAX/SSA传感器上的第一个蛋白质必须进行生物素化标记。

为方便利用Octet平台上的SA/SAX/SSA传感器进行动力学和定量分析，特制订本指南为利用生物素化试剂标记目标蛋白提供指导。

生物素试剂的选择Biotin为例。

生物素化试剂建议购买小包装，使用DMSO溶解配制成10 mM母液保存于-20℃备用。

产品货号：21312的NHS-PEG12-Biotin为例：10 mM母液的配制案例=（生物素化试剂质量1mg）÷（生物素分子量941 Da）×100=0.106 mL，1 mg生物素化试剂溶于0.106 mL DMSO中即为10 mM母液。

氨基偶联生物素化试剂反应示意图实验试剂和耗材1)缓冲液：DMSO，1×PBS，PBST（PBS+0.02% tween20）2)掌上离心机，一台3)生物素标记试剂EZ-Link NHS-PEG12-Biotin (Thermo，货号：21312) 1 mg，加入0.106 mL的DMSO配置成10 mM母液4)PD Min iTrap™ G-25 Desalting Column用于脱盐，蛋白样品体积0.1-0.5 mL，(GE, 货号：28-9180-07 )。

5)Zeba desalting spin columns脱盐柱：a)蛋白样品体积30-130 uL,使用0.5 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89882)b)蛋白样品体积200-700 uL,使用2 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89889)c)蛋白样品体积600-2000 uL,使用5 mL脱盐柱(Thermo, 货号：89891)6)透析装置：Slide-A-Lyzer™ Dialysis Cassettes（Thermo，具体型号根据目标蛋白样品体积以及目标蛋白的分子量进行选择。

Elabscience 水溶性生物素标记试剂盒使用说明书

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-LK-B007产品规格：1次标记/3次标记/10次标记Elabscience®水溶性生物素标记试剂盒使用说明书Water-soluble Biotin Labeling Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

产品介绍Elabscience®水溶性生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂，用于简单有效地对蛋白质、抗体和其他含有伯氨基(NH2-)分子进行生物素标记。

试剂盒内的生物素已经活化，可直接使用，每次可标记0.1-2 mg 抗体。

试剂盒中包含用于抗体标记脱盐的Filtration tube，不用透析，操作简便，熟练操作90 min可完成整个标记过程。

基本信息水溶性生物素(Sulfo-NHS-Biotin)结构式：分子量：443分子式：C14H18O8N3S2Na间隔臂长度：13.5 Å产品特点✓试剂全面: 本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。

✓快速: 整个过程仅需90 min。

✓方便: 通过Filtration tube 即可脱盐，无需透析或者凝胶过滤。

✓使用灵活: 既可用于微量标记又可大量标记，每次可标记0.1-2 mg抗体。

✓理想的标记效果: 已经优化确定了最适的标记比例，降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。

✓细胞标记: 本试剂盒提供的水溶性生物素可标记细胞表面蛋白，而不穿透细胞膜损伤细胞。

试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一年；溶解后的Sulfo-NHS-Biotin 能在2-8℃保存一周。

试验所需自备物品1.高精度移液器及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL2.37℃恒温箱3.离心机(离心力可到12,000×g)标记原理Sulfo-NHS-Biotin专一地与伯胺（N-末端及赖氨酸残基侧链）反应形成稳定的酰胺键：生物素标记中Sulfo-NHS-Biotin用量的计算：每个反应中生物素(Sulfo-NHS-Biotin)试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。

生物素测试剂盒操作流程

维生素B7（生物素）检测试剂盒实验操作流程一、实验前准备工作1、灭菌（在做实验前，至少提前两个小时以上灭菌）如果有一次性无菌注射器则不需要灭菌注射器没有枪头盒时用其他器皿装枪头一起灭菌（如烧杯，灭菌时放入枪头后用报纸把烧杯口封起来），同时带两把小镊子，做实验时取枪头用。

2、配制溶液（1）准备10mlHCL溶液：1.0mol/l（2）配制氢氧化钠溶液：1mol/la）称取0.4 g 氢氧化钠b）用10 ml双蒸水或去离子水充分溶解注：用带橡胶塞的玻璃瓶储存。

3、实验过程中需要的其他设备及器材：无菌工作台酶标仪(540nm或630nm)37℃黑暗条件下的培养箱95℃水浴锅（实验前需要提前加热到95℃）振荡器pH测量仪或pH试纸双蒸水0.2um无菌滤膜酒精棉二、样品处理1、称取1g奶粉样品至一个50ml无菌试管中，加入40ml无菌水摇匀，用HCL或NaOH调整pH值到8.0 ＋/- 0.2，充分混匀；2、在95℃水浴中提取30分钟，期间所有样品试管需每隔5分钟振荡一次，并一直保持试管塞紧闭3、迅速冷却至室温（即把样品试管放进水里，保证试管塞紧闭）从下面这一步开始需要在无菌工作台进行4、分别取1ml样品用0.2um无菌滤膜过滤至1.5～2.0ml无菌试管中5、根据样品中生物素含量用试剂盒中提供的无菌水进一步稀释样品，稀释后的样品即可用于检测。

样品稀释倍数计算如下：例如：固体样品标注浓度为80ug/100g用该浓度除以标准2计算： 80 μg ÷ 0.24 μg ＝333→ 结果为稀释倍数大约为300→ 1 ：300 稀释稀释步骤：a) 1 ：9（100ul样品提取溶液＋ 900ul试剂盒中的无菌水），b) 1 ：9（100ul a液＋ 900ul试剂盒中的无菌水），c) 1 ：2（200ul b液＋ 400ul试剂盒中的无菌水）注：每一步稀释都需要充分混匀后再做下一步稀释，提取稀释液需立即使用。

生物素标记试剂盒使用说明书

生物素标记试剂盒使用说明书货号: EBLK0002产品介绍：Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂，用于含有氨基（NH2-）抗体的标记。

生物素已经活化，可直接使用，每个试剂盒足以完成3次标记，每次可标记0.2-2mg。

试剂盒中包括6个用于抗体标记脱盐的Filtration tube，不用透析，操作简便，熟练操作90min可完成整个标记过程。

产品特点：试剂全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。

快速:整个过程仅需90min。

方便:通过Filtration tube即可脱盐，无需透析或者凝胶过滤。

使用灵活:既可用于微量标记又可大量标记，每次可标记0.2-2mg。

理想的标记效果:已经优化确定了最适的标记比例，降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。

产品组成：标记过程需要仪器：1. 10ul，50ul，200ul，1000ul可调高精度移液器2. 恒温箱（37℃）3. 离心机（离心力可达到12,000×g）储存条件：本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年生物素标记反应原理：NH2-Reactive Biotin专一地与伯胺反应（N-末端及赖氨酸残基侧链）形成稳定的酰胺键生物素标记NH2-Reactive Biotin使用量的计算：每个反应中生物素试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。

通过优化，我们确定了标记2mg/ml的抗体（IgG ，150KD），使用生物素和抗体的分子比为20:1能达到较理想的标记效果。

1、标记2mg/ml的抗体，使用生物素和抗体的分子比为20:1时，应加入生物素量的计算方法：ml蛋白×2mg蛋白ml蛋白×1mmolIgG150,000mgIgG×20mmol生物素mmol蛋白= mmol生物素2、对于10mmol的生物素溶液，应加入反应中该生物素体积的计算方法：mmol生物素×1,000,000μLL ×L10mmol= ul生物素计算示例：对于0.5ml 2mg/ml的IgG（分子量为150,000）溶液，需加入10mM的生物素溶液13.3ul。

pull-down试剂盒说明书翻译

Pierce生物素化蛋白互作Pull-Down试剂盒捕获纯化与生物素诱饵蛋白互作的蛋白Pierce生物素（酰化）蛋白互作Pull-Down试剂盒包含使用生物素标记蛋白捕获和纯化与与其互作蛋白的必要成分。

实验者须提供生物素化蛋白作为“诱饵”（见相关产品，生物素化蛋白试剂盒）和表达互作靶标推测蛋白（“猎物”）的细胞。

Pull-Down试剂盒提供剩余所有用品：细胞裂解缓冲液，微型离心机离心柱，链亲和素琼脂糖树脂，优化的结合、洗脱缓冲液及详细的操作步骤。

该试剂盒可使初学者掌握实验方法，而对于有经验的研究者更方便使用。

操作步骤简便易学（图1）。

图1. Thermo Scientific生物素化蛋白相互作用Pull-Down 试剂盒操作步骤概要."Pull-down"除了其抗体功能被一些其他亲和体系所取代外，是一种类似免疫沉淀法（IP）的小规模亲和纯化技术。

在这里，亲和体系是已知且特异的生物素-链亲和素的相互作用。

生物素化蛋白作为“诱饵”捕获推测的连接配体（即“猎物”）。

在一个典型的pull-down实验中，被固定的诱饵蛋白在细胞裂解液中孵育。

经过指定步骤的漂洗后，“反应物”被选择性洗脱以进行凝胶分析或Western印迹。

因为生物素-链亲素和的互作连接亲和度较高，一般情况下猎物蛋白被洗脱掉，而生物素化诱饵蛋白则仍保持固定在链亲和素琼脂糖树脂上，不被洗脱。

图1：图2. 生物素化的胰凝乳蛋白酶(baCT) 经过pull-down从哺乳动物细胞裂解液中捕获到的反应物牛胰胰蛋白酶抑制剂（BPTI）。

图像是用过Pull-Down试剂盒后的洗脱液和对照的Western印迹。

baCT“诱饵”固定连接在链亲和素琼脂糖树脂上。

BPTI“猎物”蛋白表达在哺乳动物细胞裂解液中。

在对BPTI进行洗脱前，baCT“诱饵”蛋白仍连接在树脂上。

经过4-20% Tris-Glycine SDS-PAGE。

转至硝化纤维膜后，样本被baCT诱饵蛋白探测到，再用Streptavidin-HRP (Product # 21124)探测，加入SuperSignal West Dura Chemiluminescent Substrate (Product # 34075)，将印迹暴露在CL-XPosure X-ray Film (Product # 34080)下。

人白介素6(IL-6)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

人白介素6（IL-6）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：15.6pg/ml-1000pg/ml最低检测限：3.9pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-6，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-6含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

概述白细胞介素或白介素（interleukin，IL）是一组细胞因子（分泌的信号分子）。

最早发现在白细胞中表达作为细胞间信号传递的手段。

实际上，白细胞介素可以由多种细胞产生。

免疫系统的功能，在很大程度上依赖于白细胞介素。

一些罕见的白细胞介素缺陷不足都常出现自身免疫性疾病或免疫缺陷。

IL-6是一种分子量为26ｋＤ的蛋白质，由184个氨基酸组成。

最初人们只发现其在白细胞中合成并在白细胞间发挥作用而命名。

随研究的不断进展，人们逐渐发现不仅激活的淋巴细胞、单核巨噬细胞可以合成和分泌IL-6，而且骨髓细胞和部分肿瘤细胞等也可以产生IL-6。

其作为一种机体在免疫应答中产生的重要介质,具有多种生物学活性。

IL-6是一种多效性细胞因子，能调节多种细胞功能，包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。

IL-6与多种肿瘤发生、发展关系密切，它通过干预细胞的黏附性和活动力、血栓形成、肿瘤特异性抗原的表达及肿瘤细胞的增殖,从而影响肿瘤的进展。

它还能调节多种细胞功能,包括细胞增殖、细胞分化、免疫防御机制及血细胞生成等。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-6抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-6抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

BiotinLabelingKit-NH2（1mg）技术手册

Biotin Labeling Kit - NH2(1 mg) 技术手册产品描述Biotin Labeling Kit - NH2主要用于制备生物素标记的蛋白质，用于酶免疫分析(EIA)。

NH2 -Reactive Biotin是试剂盒成分之一，它含有琥珀酰亚胺基(NHS)，能轻易地与蛋白质或其他分子的氨基反应。

该试剂盒中的过滤管可用于除去干扰标记反应的小分子。

整个标记过程十分简便。

只需将NH2 - Reactive Biotin加入到IgG溶液中，37 ℃培养10分钟即可。

过量的生物素分子能够使用过滤管将其除去。

该试剂盒中包含了标记所需的全部试剂，包括储存缓冲液。

试剂盒内含NH2 - Reactive Biotin ··········1管WS Buffer···············13 ml x 1Reaction Buffer············ 1.2 ml x 1Filtration Tube ·············1管15 ml Tube（用于平衡）········1管适用范围一个样品标记样品需求：分子量>50,000，具有反应性的氨基储存条件储存于0-5 ℃，未开封试剂在0-5 ℃能稳定保存6个月＊一旦密封铝箔袋打开，请确保使NH2 - Reactive Biotin保存在铝箔袋中，并在-20 ℃下紧闭袋口。

化学发光法EMSA检测试剂盒

化学发光法 EMSA 检测试剂盒Chemiluminescent EMSA Detection Kit说明书修订日期：说明书修订日期：2015.12.01 货号：KGS133 保存温度：-20℃ For Research Use Only一、产品简介本产品是一种通过 Streptavidin-HRP 及 ECL 检测试剂来实现化学发光检测 Biotin 标记的 EMSA 探针的检测试剂盒。

同时本试剂盒也提供 EMSA 检测所需的结合缓冲液和上样缓冲液，及一些关键的相关试剂，可以实现非同位素的 EMSA 检测。

本试剂盒采用了高质量的 Streptavidin-HRP Conjugate，HRP 和 Streptavidin 共价交联的比例大于 3，这样比采用 Streptavidin 和 Biotin-HRP conjugate 两种试剂进行检测要更方便，并且灵敏度更高。

本试剂盒采用了非特异性结合比 avidin 更低的 strepatavidin，使检测结果背景更低灵敏度更高。

EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X)中含有 poly(dI-dC)等有效成分。

其中 poly(dI-dC)的浓度经过优化，可以很好的消除蛋白和标记探针间的非特异性结合，同时又不会减弱目的转录因子和标记探针间的结合。

本试剂盒可以用于 20 个蛋白和探针的结合反应，并足够检测至少 2 块有生物素标记 EMSA 探针的膜。

二、组份列表产品组份 EMSA/Gel-Shift 结合缓冲液(5X) EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(无色，10X) EMSA/Gel-Shift 上样缓冲液(蓝色，10X) ECL Reagent A ECL Reagent B Streptavidin-HRP Conjugate 封闭液洗涤液(5X) 检测平衡液规格（规格（50T） 100µl 100µl 100µl 28ml 28ml 50µl 190ml 125ml 125ml 保存温度 -20℃ -20℃ -20℃ 4℃ 4℃ -20℃ 4℃ 4℃ 4℃注：如果长期不用，整个试剂盒可-20℃保存，-20℃可以保存更长时间。