常见病原微生物的检测PPT

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3.抵抗力
在自然界中抵抗力较强，在病畜的脏器和分泌物中，一 般能存活4个月左右，在食品中约能生存2个月。对低温 的抵抗力也强，对热和消毒剂抵抗力弱。对链霉素、氯 霉素和四环素等均敏感。
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二、致病性和免疫性
本菌侵入人体后，被吞噬细胞吞噬，由于本菌具有荚膜，能抵 抗吞噬细胞的吞噬消毁，并能在该细胞内增殖。反复出现菌血 症。由于内毒素的作用，病人出现发热、无力等中毒症状，血 流中细菌逐步消失，体温也逐渐消退。细菌在细胞内繁殖至一 定程度时，再次进入血流又出现菌血症，体温再次上升，反复 呈波浪热型。
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四、微生物学检验
本菌传染性大，要注意防止实验室污染。 （一）分离培养 急性期采集血液，慢性期采取骨髓，接种于双相肝浸液培养基
（一半斜面，一半液体）置37℃10%CO2环境中培养，每隔2 天检查一次，如无细菌生长则摇荡培养基，使液体浸过斜面 上，有细菌生长，可依鉴定项目确定是否为布氏杆菌。经一 月培养无细菌生长，可报告阴性。
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三、微生物学检查
1.采集皮肤炭疽的脓液、渗出物，肠炭疽的粪便以及病人的 的血液等送检，兽尸禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送检。
2.将标本直接涂片，沙黄荚膜染色镜检，观察形态及荚膜特 征，可以初步帮助诊断。
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3.确诊应进行血平板分离培养，37℃孵育12～15小时， 钩取可疑菌落，进行青霉素串珠试验，噬菌体裂解试 验，碳酸氢钠平板二氧化碳培养。荚膜肿胀试验和小 白鼠致病力试验等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
5.在普通肉汤培养18～24小时，管底有絮状沉淀生长， 无菌膜，菌液清亮。有毒株在碳酸氢钠平板， 20%CO2培养下，形成粘液状菌落（有荚膜），而无 毒株则为粗糙状。
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（三）抵抗力
繁殖体抵抗力不强，易被一般消毒剂杀灭，而芽胞抵抗力 强，在干燥的室温环境中可存活数十年，在皮毛中可存活 数年。牧场一旦被污染，芽胞可存活数年至数十年。煮沸 10分钟或干热140℃3小时可将芽胞杀死。炭疽芽胞对碘特 别敏感，对青霉素、链霉素、卡那霉素等高度敏感。
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第一节 布鲁氏杆菌（二）
一、生物学性状
1.形态染色 本菌属初次分离培养时多呈小球杆状，毒力菌株有荚膜，经
传代培养渐呈杆状，革兰氏染色阴性。 我国流行的是羊、牛、猪布氏杆菌
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2.培养特性 本菌为严格需氧菌； 牛布氏杆菌在初次分离时，需在5～10%CO2环境中才能生
长，最适温度37℃，最适的pH6.6～7.1，营养要求高，生 长时需硫胺素，烟草酸和生物素，泛酸钙等，实验室常用 肝浸液培养基或改良厚氏培养基。 此菌生缓慢，培养48小时后才出现透明的小菌落，鸡胚培 养也能生长。
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三、主要症状
人感染布氏杆菌表现乏力，全身软弱，食欲不振，失眠，咳 嗽，有白色痰，可听到肺部干鸣，多呈波浪热，也有稽留热、 不规则热或不发热。
盗汗或大汗，一个或多个关节发生无红肿热的疼痛，肌肉酸 痛，由于关节和肌肉疼痛难忍，即使不发烧也不能劳动，成为 能吃不能活懒汉，故该病又被称作"懒汉病"。
病灶发生在生殖器官，影响生育，严重者可引起死亡。
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3．肠炭疽， 由食入病兽肉制品所致，以全身中毒症 状为主，并有胃肠道溃疡、出血及毒血症，发病后2～ 3日内死亡。
上述疾病若引起败血症时，可继发“炭疽性脑膜炎”。 炭疽杆菌的致病性取决于荚膜和毒素的协同作用。
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（二）免疫性
注射炭疽外毒素中保护性抗原于机体，能形成抗毒素免疫， 对受染炭疽有保护作用。但单纯的荚膜抗体对机体没有保护 作用。病后可获较强的免疫力。
遗留问题
兔血浆制备:无菌采取兔心脏血,以1份灭菌的3.8%枸橼 酸钠液抗凝剂加4份兔血的比例充分混匀,离心,吸取上 清液即为原兔血浆,分装成1ml/支或0.5ml/支;
另用灭菌生理盐水稀释兔血浆,制成4倍稀释血浆(以下 简称为稀释兔血浆),分装同上,于-18℃以下冰冻保存,供 试验
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第一节 炭疽杆菌（一）
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四、特异防治
1.预防人类炭疽首先应防止家畜炭疽的发生。家畜炭疽 感染消灭后，人类的传染源也随之消灭。
2.目前我国使用的炭疽活疫菌，作皮上划痕接种，免疫 力可维护半年至一年。青霉素是治疗炭疽的首选药物， 对肠道及吸入性炭疽治疗困难，有条件的可用抗血清。
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五、检测方法
1.环状沉淀反应 2.噬菌体裂解实验 3.荚膜荧光抗体检测 4.质谱分析法
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（二）血清学检查 通常作凝集试验，判定凝集效价1：50可疑，1：100 以上为阳性。效价增高4倍以上时，更有诊断价值。
炭疽杆菌（Bacillus anthraci）属于需氧芽胞杆菌属，
能引起羊、牛、马等动物及人类的炭疽病。炭疽杆菌曾被帝国主 义作为致死战剂之一。
（一）生物学性状 1.菌体粗大，排列似竹节状，无鞭毛，无动力，革兰氏染色阳性，
本菌在氧气充足，温度适宜（25～30℃）的条件下易形成芽胞。
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2.在活体或未经解剖的尸体内，则不能形成芽胞。芽胞呈椭 圆形，位于菌体中央，其宽度小于菌体的宽度。 3.形成荚膜是毒性特征。 4.炭疽杆菌受低浓度青霉素作用，菌体可肿大形成园珠，称 为“串珠反应”。这也是炭疽杆菌特有的反应。
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二、致病性与免疫性
一）致病性 人类主要通过工农业生产而感染。机体抵抗力降低时，接
触污染物品可发生下列疾病： 1．皮肤炭疽，最常见，多发生于屠宰或毛刷工人及饲养
员。 2．纵隔障炭疽， 少见。由吸入病菌芽胞所致，多发生于
皮毛工人，病死率高。病初似感冒，进而出现严重的支气 管肺炎，可在2～3天内死于中毒性休克。
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（二）培养特性
1.本菌专性需氧或兼性厌氧，在普通培养基中易繁殖。 2.最适温度为37℃，最适pH为7.2～7.4 3.在琼脂平板培养24小时，粗糙菌落。菌落呈毛玻璃状，边缘
不整齐，呈卷发状，有一个或数个小尾突起，这是本菌向外伸 延繁殖所致。
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4.在5～10%绵羊血液琼脂平板上，菌落周围无明显的 溶血环，但培养较久后可出现轻度溶血。菌落有粘性， 用接种针钩取可拉成丝，称为“拉丝”现象。