医学细胞生物学-实验3 血涂片的制作和血细胞的观察-计数(1)
实验报告 血涂片的制备
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液细胞的形态和数量。
通过制备血涂片，我们可以了解疾病的诊断和治疗过程中的重要信息。
本实验报告将介绍血涂片的制备过程和相关技术。
一、材料与设备：1. 血液样本：采集自健康人士或实验动物。
2. 血涂片玻片：具有一定的光学透明度和平整度。
3. 血涂片刮板：用于制备血涂片的工具。
4. 血涂片染色剂：如吉姆萨染色剂。
二、实验步骤：1. 准备工作：清洁实验台面，并确保材料和设备的无菌状态。
2. 血液采集：使用无菌针头采集血液样本，将血液缓慢抽入无菌注射器中。
3. 制备血涂片：a. 取一片无菌血涂片玻片，用无菌棉球蘸取适量的酒精擦拭玻片表面，使其干燥。
b. 用无菌血涂片刮板，将血液样本滴于血涂片玻片的一端。
c. 快速而均匀地将刮板从滴液处向另一端刮过，使血液在玻片上均匀分布。
d. 在刮板刮过的血液上方，迅速将另一片无菌玻片平放在上方，使血液与玻片接触。
e. 缓慢而均匀地将上方的玻片向下滑动，使血液在两片玻片之间形成薄膜。
f. 将制备好的血涂片放置在通风干燥的地方，待其完全干燥。
三、血涂片染色：1. 准备工作：将吉姆萨染色剂按照说明书的要求稀释至适当浓度。
2. 染色过程：a. 将制备好的血涂片放入染色盒中，使其与染色剂接触。
b. 根据需要，将血涂片浸泡在染色剂中的时间可调整为几分钟至几十分钟。
c. 取出血涂片，用清水轻轻冲洗，直至水清。
d. 将血涂片放置在通风处晾干。
四、结果与讨论：通过制备和染色的血涂片，我们可以观察到不同类型的血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
通过观察它们的数量、形状和结构，我们可以判断出是否存在异常情况，如贫血、感染或血液疾病等。
血涂片的制备和染色技术在临床诊断和科学研究中具有广泛的应用。
结论：通过本实验报告，我们了解了血涂片的制备过程和相关技术。
制备血涂片的步骤包括血液采集、血涂片制备和血涂片染色。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
（1）嗜酸性白细胞：数量较少，但在血涂片中可以找到。
生理学：血涂片的制作与血细胞的观察
红细胞 有粒白细胞
血细胞 白细胞
血液
血小板
无粒白细胞
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞
淋巴细胞 单核细胞
血浆
血清 纤维蛋白原等大分子蛋白
一、红细胞
(Erythrocyte, Red blood cell, ＲＢＣ）：
1. 数量(正常值)
男性:(4.Biblioteka - 5.5)×1012／Ｌ 女性:(３.5 - 5.0)×1012／Ｌ
2、红细胞叠连（rouleaux formation）:许多红细 胞能较快地互相以凹面相贴，形成一叠红细胞， 称为红细胞叠连。
3、红细胞叠连形成的快慢主 要决定于血浆的性质。血浆中白
蛋白增多可使红细胞沉降减慢；而 球蛋白与纤维蛋白原增多时，红细 胞沉降加速
4、意义。
f:渗透脆性（osmotic fragility）：
实验一血涂片的制作 与血细胞的观察
滨州医学院 血液系统功能与疾病基础
杨东霞
Make new friends...結交新朋友 Rediscover old ones... 發掘老朋友的新鮮 Tell them that you love them…讓他們知道你愛他們… And when you love them...以及想到他們時
e:红细胞膜：半透膜，
ＡＢＯ血型抗原
f:悬浮稳定性（suspension stability）：
1、红细胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate，ESR）:红细胞在一小时内下沉的距离来表 示红细胞沉降的速度。简称血沉
正常男性的红细胞沉降率第一小时不超过3mm，女性不 超过10mm
Feel it deeply 是何等的真切
实验报告 血涂片的制备
实验报告血涂片的制备实验报告：血涂片的制备引言：血涂片是一种常见的实验技术，用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞形态。
本实验旨在探究血涂片的制备方法和技巧，以及观察和分析血涂片的步骤和注意事项。
材料与方法：1. 血液样本：采集新鲜的静脉血，使用无抗凝剂的试管收集。
2. 血涂片材料：玻璃片、洗净的玻璃滴管、无纺布、无纺布夹子、显微镜玻璃片、显微镜盖玻璃片。
3. 实验仪器：显微镜、离心机。
步骤：1. 准备工作：将玻璃片和显微镜玻璃片用去离子水和无纺布擦拭干净，保证表面无杂质。
2. 血液制备：使用无纺布夹子固定玻璃片，用洗净的玻璃滴管将血液滴在玻璃片上。
滴管与玻璃片的接触角度应适中，以保证血液均匀地分布在玻璃片上。
3. 血涂片制备：用另一块玻璃片将血液滴在玻璃片上的血液涂抹均匀，使血细胞分散均匀并形成单层。
4. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，或使用离心机低速离心，去除多余的液体。
5. 固定处理：将干燥的血涂片固定在95%乙醇中，浸泡2-3分钟，以保持细胞形态。
6. 染色处理：将固定的血涂片浸泡在Wright染料溶液中，浸泡时间根据染料浓度和需要的染色效果而定。
7. 清洗处理：用去离子水将染色过的血涂片洗净，去除多余的染料。
8. 干燥处理：将血涂片放置在通风处晾干，确保完全干燥。
9. 封片处理：将干燥的血涂片放在显微镜盖玻璃片上，用透明胶带固定。
结果与讨论：制备完毕的血涂片可用于显微镜观察。
通过血涂片，我们可以观察到血液中的各种细胞，如红细胞、白细胞和血小板，并且可以分析它们的数量、形态和结构。
在制备血涂片的过程中，有几个关键的步骤需要特别注意。
首先，血液的滴取和涂抹要均匀、细致，以避免细胞聚集和不均匀分布。
其次，血涂片在制备过程中要保持湿润，避免细胞干燥和变形。
此外，染色过程中的浸泡时间和染料浓度要控制好，以保证染色效果的准确性和清晰度。
血涂片的制备是一项基础实验技术，广泛应用于医学、生物学和病理学等领域。
实验血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察引言：血涂片是一种常用的实验方法，用于观察和检测血液中的血细胞。
通过制作血涂片，我们可以观察和检测血液中的红细胞、白细胞和血小板等血细胞的数量和形态，从而对患者的健康状况进行初步评估。
实验目的：1.了解血液中的血细胞的数量和形态；2.掌握制作血涂片的基本技巧；3.学会使用显微镜观察血涂片。
实验原理：血涂片的制作过程主要包括血涂滴片、血涂片制作和染色观察三个步骤。
首先，我们需要小心地在玻片上滴一滴新鲜的血液，然后以恰当的角度将另一块玻片贴在上面，使血液平均分布。
接下来，我们放在通风处晾干血涂片，然后进行染色处理。
常用的染色剂包括湿润的染色染,经乙醇递增染,增百倍的苏丹三合一染色等。
实验材料：1.新鲜血液样品；2.玻片；3.显微镜；4.染色剂。
实验步骤：1.准备血涂片：a.将一块玻片清洁干燥；b.使用干净的无菌注射器抽取新鲜的血液；c.将血液滴在玻片上；d.用另一块玻片贴在上面，使血液平均分布；e.将制作好的血涂片放在通风处晾干。
2.染色处理：a.将晾干的血涂片浸泡在染色剂中，约1-2分钟；b.将染色好的血涂片用去离子水清洗干净，直至水清澈；c.将清洗干净的血涂片用纸巾吸干水分；d.放干的血涂片在染色片佐剂中保持10-15分钟。
3.观察血涂片：a.将制备好的血涂片放在显微镜平台上；b.用低倍镜首先寻找一个合适的视野；c.逐步将镜头调整到高倍，同时调整焦距，观察血细胞的形态和数量；d.记录所观察到的血细胞的形态和数量。
实验结果：在观察血涂片时，我们可以看到红细胞呈圆形、扁平形且呈淡红色，白细胞常常是圆形细胞，比红细胞大很多，并可根据细胞核和细胞质颜色的不同分为不同的类型（如淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等）。
此外，我们还可以观察到血小板的数量和形态，以及其他一些异常细胞的出现。
实验结论：通过实验我们可以得出以下结论：1.血涂片是观察和检测血液中血细胞数量和形态的常用方法；2.血涂片的制作过程相对简单，但需要小心操作，以避免样本污染；3.显微镜是观察血涂片的重要工具，需要合理调整焦距和放大倍数，以获得清晰的观察结果；4.通过观察血涂片，我们可以初步了解患者的健康状况，识别一些血液疾病或其他异常情况。
医学细胞生物学-实验3 血涂片的制作和血细胞的观察-计数(1)
影响计数结果，需用滤纸片把多余的溶液吸出，以深槽内没有溶液为 宜。 – 如滴入溶液过少，经多次充液，易造成气泡，应洗净计数室，干燥后 重做。 – 红细胞和白细胞的计数，各使用一计数室。 • 血液稀释液滴入计数室后，须静置2-3min，然后在低倍显微镜下计数。
结果显示
(1) 红细胞 数量最多，体积小而圆、均匀分布，呈红色的圆 盘状，边缘厚，着色较深，中央薄，着色较浅，无细胞核、 细胞器，胞质内充满血红蛋白。
(2) 白细胞 白细胞数量较红细胞数量少，但胞体积大， 细胞核明显，极易与红细胞区别开。
• 嗜中性粒细胞 是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数5070%。体积比红细胞大，主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小， 分布均匀，着淡紫红色。胞核着深紫红色，一般分3—5叶，叶 间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关，如核为 杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。
2．血细胞计数
（3）计算
• 细胞数 ＝计数板相应方格内细胞总数×稀释倍数×1/计数室总体积
• 白细胞数 ＝4 个大方格内数得白细胞总数 ×20 倍 ×1/ 1×1×0.1×4 mm3， 即乘以50，即得每mm3血内的白细胞总数
• 红细胞数 ＝中央大方格中的5个中方格内数得的红细胞总数×200倍× 1/ 0.2×0.2×0.1×5 mm3 ， 即乘以10，000，即得每mm3血内红细胞总数
采血前用70％酒精 棉球消毒指腹
采血
推片：挤出血滴置于载玻片的右侧
再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血滴的前缘， 先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开 成线状。
两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将载玻片向 前匀速推进，即涂成血液薄膜。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40o角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
（1）嗜酸性白细胞：数量较少，但在血涂片中可以找到。
血涂片的制作和
ABO血型分类
ABO血型正反定型结果
（一）ABO血型鉴定
2．血型鉴定方法
• • • 标记凹载玻片：左上角写A，右上角写B。 分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右 端。 采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用2支毛细滴管吸取 血液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使 标准血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！） 手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置 室温下5min后观察结果。 肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多 为凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。 进一步在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察到红细胞凝集成 团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离 状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。
常分两叶，着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗 粒，色鲜红或桔红。
• 嗜碱性粒细胞
数量很少，约占1%以下。在一般血涂片上不易
找到，体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着许多大小不一 的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶，也染成紫色，但 染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形状不清。
• 淋巴细胞 数量较多，约占20%-40%，可见中、小型，淋巴细 胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据 整个细胞，染成深蓝紫色。胞质极少，仅在核的一侧出现一线 状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大，胞质较小 淋巴细胞的稍多，着色较浅。核圆形或卵圆形，位于细胞中部， 也染成深蓝紫色。 • 单核细胞 数量少，约占2%-8%，是细胞中体积最大的一种， 胞核呈肾形、马蹄形，常在细胞一侧，着色比淋巴细胞浅。 • 血小板 为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅蓝色，中 央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于红细胞之间。高倍 镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒，在油镜下才能看到颗粒周 围的浅色胞质部分。
实验血涂片的制作与血细胞的观察修订版
实验血涂片的制作与血细胞的观察修订版IBMT standardization office【IBMT5AB-IBMT08-IBMT2C-ZZT18】实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40o角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察教学文案
实验血涂片的制作与血细胞的观察实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察教学文案
实验血涂片的制作与血细胞的观察实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
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二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
（1）嗜酸性白细胞：数量较少，但在血涂片中可以找到。
实验血涂片的制作与血细胞的观察
实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
（1）嗜酸性白细胞：数量较少，但在血涂片中可以找到。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察教学文案
实验血涂片的制作与血细胞的观察实验血涂片的制作与血细胞的观察一、引言血涂片显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对各种血液病的诊断有很大价值，但血涂片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论，因此，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40º角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
实验 血涂片的制作与血细胞的观察
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二、实验目的掌握血涂片的制作，观察血细胞的形态及在不同环境下的反应。
三、实验器材与试剂器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、盖玻片等。
试剂：瑞氏染液、0.9%Nacl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1、消毒与采血先按摩采血部位（人的指腹），使血流通畅，采血前用70%酒精消毒人的指腹，干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出（第一滴血不要）。
取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处，注意手指持载玻片的边缘，不触电及表面，也不能使载玻片接触取血部位的皮肤。
2、推片取一块边缘光滑的载玻片做推片。
将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40o角，向另一端平稳地推出（图1）。
涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。
图1 推片示意图3、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。
再将瑞氏染色液（伊红-亚甲基蓝）滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染30秒。
加等量蒸馏水与染色液混合后再染5分钟。
最后用蒸馏水把染色液洗掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。
4、封片经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶封片保存。
五、结果观察显微镜下观察血涂片结果如图2所示。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
1、红细胞：小而圆，没有细胞核，血涂片中最多，常被染成淡红色，细胞的边缘厚，中间薄，使细胞边缘的颜色比中间的深。
2、白细胞：分为有粒白细胞和无粒白细胞，有粒白细胞包括嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞和嗜中性白细胞；无粒白细胞包括淋巴细胞和单核细胞。
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嗜酸性粒细胞 比中性粒细胞略大，数量少，约占7%以下。核常分两 叶，着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗粒，色鲜红或 桔红。
嗜碱性粒细胞 数量很少，约占1%以下。在一般血涂片 上不易找到，体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着 许多大小不一的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分 叶，也染成紫色，但染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形 状不清。
实验三 血涂片的制作和 血细胞的观察、计数
实验报告书写要求
正确的书写实验名称 •一、实验目的 •二、实验原理 •三、实验用品（仪器、试剂及材料） •四、实验内容与方法 •五、实验结果（作图、测量结果、计算等） •六、讨论 •七、思考题
实验目的
• 掌握血涂片的制作方法，了解各种血细 胞的结构特点
• 掌握人体微量采血和用血细胞计数板进 行细胞直接镜检计数的方法
• 淋巴细胞 数量较多，约占20%-40%，可见中、小型，淋巴细 胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据 整个细胞，染成深蓝紫色。胞质极少，仅在核的一侧出现一 线状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大，胞质 较小淋巴细胞的稍多，着色较浅。核圆形或卵圆形，位于细
胞中部，也染成深蓝紫色。
（二）血细胞计数
1．血细胞计数板的构造
• 4条直槽，内侧两槽中间有 一条横槽把中部隔成二长方 形的平台。
• 平台玻璃板平面低0.1mm。
• 平台中心部分各以3mm长， 3mm宽精确划分为9个大方 格，称为计数室，每个大方 格面积为1mm3，体积为 0.1mm3
• 四角的大方格，又各分为16个中 方格，适用于白细胞计数。
Hale Waihona Puke 采血前用70％酒精 棉球消毒指腹
采血
推片：挤出血滴置于载玻片的右侧
再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血滴的前缘， 先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开 成线状。
两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将载玻片向 前匀速推进，即涂成血液薄膜。
30~45°
染色
• 浓染：待涂片在空气中完全 干燥后，滴加数滴Wright’s 染液盖满血膜为止，染色 3～5 min。
2．血细胞计数
（2）计数
• 计数白细胞时，数四角4个大方格的白细胞总数
• 计数红细胞时，数中央大方格的四角的4个中方格和中央的 一个中方格（共5个中方格）的红细胞总数
– 计数时应循一定的路径，对横跨刻度上的血细胞，依照“数上不数 下，数左不数右”的原则进行计数。
– 计数白细胞时，如发现各大格的白细胞数目相差8个以上；计数红细 胞时，如各中方格的红细胞数目相差20个以上，表示血细胞分布不 均匀，必须把稀释液摇匀后重新计数。
• 1. 观察血涂片并绘图记录血细胞形态。 • 2. 将血细胞计数实验结果填入下表：
思考题
• 结合自己的实验过程，分析影响血细胞 计数准确性的因素。
• 中央的大方格则由双线划分为25 个中方格，每个中方格面积为 0.04mm3，体积为0.004mm3。
• 每个中方格又各分成16个小方格 ，适用于红细胞计数。
• 计数时应循一定的路径，对横跨 刻度上的血细胞，依照“数上不 数下，数左不数右”的原则进行 计数。
2．血细胞计数
（1）兔血稀释
• 1.5 ml 塑料离心管：0.38ml白细胞稀释液放入小试管内 + 0.02 ml 兔血 • 5 ml塑料离心管：3.98ml红细胞稀释液＋ 0.02 ml 兔血 • 血液应加入试管底部，滴入计数室前试管摇振1-2min。 • 将盖玻片放在计数板正中，吸取摇匀的稀释血液，将一小滴血液滴在盖玻
1．血涂片的制作 • 用酒精棉球擦拭消毒指尖，用采血针刺破指尖，从采血
针眼处挤出绿豆大小血滴，用清洁玻片面的一端轻轻接 触血滴，使血滴附于玻片面上。 • 以左手拿该片的两端，迅速用右手拿住另一载玻片的一 端，在左手载玻片上由前向后接触血滴，使两载玻片约 成45°角，轻轻移动，使血滴成一直线，然后由前向后推 为一均匀的薄片。 • 涂片在空气中干燥后滴加瑞氏染色液，使涂片被染色液 覆盖。染3-5分钟后，再加等量的蒸馏水于染色液上，使 其与染液均匀混合，静置10～15 min。用蒸馏水迅速冲洗， 吸水纸吸干，镜检。
片边缘的玻片上，使稀释血液借毛细管现象而自动流入计数室内。 – 如滴入过多，溢出并流入两侧深槽内，使盖玻片浮起，体积改变，会
影响计数结果，需用滤纸片把多余的溶液吸出，以深槽内没有溶液为 宜。 – 如滴入溶液过少，经多次充液，易造成气泡，应洗净计数室，干燥后 重做。 – 红细胞和白细胞的计数，各使用一计数室。 • 血液稀释液滴入计数室后，须静置2-3min，然后在低倍显微镜下计数。
2．血细胞计数
（3）计算
• 细胞数 ＝计数板相应方格内细胞总数×稀释倍数×1/计数室总体积
• 白细胞数 ＝4 个大方格内数得白细胞总数 ×20 倍 ×1/ 1×1×0.1×4 mm3， 即乘以50，即得每mm3血内的白细胞总数
• 红细胞数 ＝中央大方格中的5个中方格内数得的红细胞总数×200倍× 1/ 0.2×0.2×0.1×5 mm3 ， 即乘以10，000，即得每mm3血内红细胞总数
• 按目前临床上血细胞计数采用的通用单位，将以上所获每毫 升血液中所含血细胞数量换算为各血细胞在每升血液中的数 量
2．血细胞计数
（4）清洗血细胞计数板
盖玻片及计数板用过之后，必须立即 用水冲洗，但不可用硬物刷洗。计数板晾 干或吹风机吹干后，应镜检计数室是否干 净，如不干净必须重复洗至干净为止。
实验报告结果部分：
• 淡染：然后滴加等量蒸馏水， 使其与染液均匀混合，静置 10～15 min。用蒸馏水冲去 染液，吸水纸吸干，镜检。
（一）血涂片的制作和血细胞的观察
2．血细胞观察 制作良好的血涂片厚薄适宜，血膜分
布均匀，呈粉红色。选一厚薄适宜部位置 显微镜下观察。先用低倍镜观察全片，了 解涂片染色、细胞分布情况，再用高倍镜 观察 。
实验用品
（一）试剂： (1) 红细胞稀释液（生理盐水） (2) 白细胞稀释液（冰醋酸2mL、蒸馏水97mL、龙胆紫1mL） (3)瑞氏（Wright）染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于 60mL甲醇。
（二）器材 生物显微镜、采血针、血细胞计数板
（三）实验材料 人血及兔血
实验内容与方法
（一）血涂片的制作和血细胞的观察
结果显示
(1) 红细胞 数量最多，体积小而圆、均匀分布，呈红色的圆 盘状，边缘厚，着色较深，中央薄，着色较浅，无细胞核、 细胞器，胞质内充满血红蛋白。
(2) 白细胞 白细胞数量较红细胞数量少，但胞体积大， 细胞核明显，极易与红细胞区别开。
• 嗜中性粒细胞 是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数5070%。体积比红细胞大，主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小， 分布均匀，着淡紫红色。胞核着深紫红色，一般分3—5叶，叶 间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关，如核为 杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。
单核细胞 数量少，约占2%-8%，是细胞中体积最 大的一种，胞核呈肾形、马蹄形，常在细胞一侧， 着色比淋巴细胞浅。
血小板 为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅 蓝色，中央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于 红细胞之间。高倍镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒， 在油镜下才能看到颗粒周围的浅色胞质部分。