分光光度法双波长

§2.2 双波长和三波长分光光度法

2和K1分别为在λ2和 λ1处的放大系数；组分A和B 在λ2和 λ1处的吸光度分别为
A B A B A 、 A 和 A 、 A 2 1 1，则 2
S＝K2 A2＋K2 A2－K1 A1－K1 A1
调节仪器中的信号放大器，使干扰组分B在波长λ2 和λ1处的信号相等，由此得系数倍率K为：
第二节双波长和三波长分光光度法一．双波长分光光度法的原理
双波长分光光度法是在传统的单波长分光度法的基础上发展起来的。单波长分光光度法要求式样本身透明，不能有混浊，如果是试样溶液在测量过程中逐渐产生浑浊便无法正确测定。对于吸收峰相互重叠的组分或背景很深的试样分析，也很难得到准确的结果。双波长分光光度法的建立，在一定程度上克服了单波长法的局限性，扩展了分光光度法的应用范围，在选择性、灵敏度和测量精密度等方面都比单波长法有进一步的改善和提高。
二．三波长分光光度法的原理和应用
1．基本原理
如图所示，在任一吸收曲线上，可以在任意选择的三个波长处测量吸光度。根据三角形和三角形相似，可推导出在上述三个波长处测量的吸收度具有下列函数关系：三波长法原理图
式中，m和n分别表示(2 -1)和(3 -2)的数值。1、2和3 分别为待测物在三波长处的摩尔吸光系数；C为待测物的摩尔浓度；b为光程。方程中的系数可预先求得，A值与待测物浓度成正比，因而可通过曲线求出样品中待测组分的含量。从上图可知，如选择的三个波长相应于吸收曲线上三点处于一条直线上，则测得的A值为零。因此，当干扰组分的吸收光谱为一直线（如浑浊产生的干扰），则在任选的三个波长处测定，测得的值与干扰物浓度无关，如果干扰物为一吸收曲线，只要在曲线上找到处在一条直线上的三点，在此三点相应的波长处测定，由于干扰物在此三波长处的值为零，故测得的只与待测组分的浓度有关。

双波长分光光度法测药品含量偏低的原因

双波长分光光度法是一种常用的药品含量测定方法，其原理是利用物质在不同波长下吸光度的差异来测定样品的含量。

然而在实际的药品生产和质量控制过程中，有时会出现药品含量偏低的情况，而双波长分光光度法测得的结果也会出现偏差。

那么，造成药品含量偏低的原因是什么呢？1. 药品成分不均匀药品在生产过程中，可能会出现成分不均匀的情况。

这可能是由于原料混合不均匀、加工过程中受热不均、或者贮存条件不当等因素导致的。

当药品成分不均匀时，使用双波长分光光度法测定含量就会出现偏低的情况。

2. 良品率不足在药品生产过程中，如果生产线上的设备不稳定或者操作不当，很可能会导致药品的良品率不足。

这样一来，部分药品的含量就会偏低，从而影响到双波长分光光度法的测定结果。

3. 样品制备不当样品的制备过程也是影响双波长分光光度法测定结果的关键因素之一。

如果样品制备不当，比如溶解不彻底、稀释比例错误等，都有可能导致测定结果偏低。

4. 仪器故障双波长分光光度法依赖于专用的分光光度计来进行测定，而仪器的精准度和稳定性直接影响着测定结果的准确性。

如果仪器发生故障或者未经过定期校准，就有可能导致测定结果偏低。

5. 操作不当操作人员的技术水平和操作规范也会对双波长分光光度法的测定结果产生影响。

样品的操作过程中如果没有按照要求操作，或者操作人员缺乏相关经验和训练，都有可能导致测定结果出现偏差。

导致药品含量偏低的原因包括药品成分不均匀、良品率不足、样品制备不当、仪器故障以及操作不当等多个方面。

在实际生产中，为了确保药品含量的准确性，需要从原料采购、生产工艺、仪器选择和操作规范等多个环节进行全面的管理和控制，以确保药品含量测定结果的准确性和可靠性。

在实际的药品生产过程中，药品含量偏低可能会给企业带来不小的损失，因为药品的含量不足会直接影响其疗效和安全性，甚至可能引发法律纠纷和产品召回。

对于药品含量偏低的原因以及如何预防和解决这一问题，企业必须高度重视，并加以有效管理。

双波长分光光度法同时测定溶液中的硝酸根和碘离子

双波长分光光度法同时测定溶液中的硝酸根和碘离子张慧芳;郭探;李权;叶秀深;吴志坚【摘要】食品和环境样品中往往同时含有硝酸根和碘离子,用紫外分光光度法直接测定硝酸根或碘离子时,二者相互干扰.为此建立了主、次波长分别为220.0、231.5 nm的等吸收点双波长紫外分光光度法测定溶液中的硝酸根和共存的碘离子.当溶液中硝酸根的浓度范围在0～0.12 mmol/L,碘离子的浓度在0～0.10 mmol/L时,主、次波长下的吸光度差值A220-231.5与溶液中硝酸根的浓度CNO3-呈良好线性关系,线性方程为A220-231.5=2.9958 CNO3-+0.0016(R2=0.99994)；其中A220( NO3-)=3.6099 CNO3-+0.0084(R2=0.99994),利用吸光度的加和性:A220 (I-)=A220-A220 (NO3-)=10.7394 CI-+0.0029(R2=0.99994),间接得到碘离子含量CI-.硝酸根和碘离子的平均相对标准偏差分别为0.6％、0.2％,回收率分别为99.5％～102％、99.9％～100％.方法简便快捷,可用于溶液中微量硝酸根和碘离子的同时测定.【期刊名称】《中国无机分析化学》【年(卷),期】2011(001)004【总页数】5页(P24-28)【关键词】硝酸根;碘离子;双波长分光光度法【作者】张慧芳;郭探;李权;叶秀深;吴志坚【作者单位】中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院研究生院,北京100049;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院研究生院,北京100049;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008【正文语种】中文【中图分类】O657.32;TH744.12+21 引言工业废水、农田排水的不合理排放以及化肥使用量的不断增加，致使大量硝酸盐进入地下水［1－4］，也导致很多蔬菜中的硝酸盐含量超标［5］。

双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量

双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量目的建立双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量的测定方法。

方法样品操作及测定方法同重复性试验，平行操作5批样品，另按照中和滴定法测定，比较两种测定方法测定所得样品的百分标示量。

结果双波长法：99.2%，97.9%，98.5%，96.5%，98.2%；中和法：100.8%，98.7%，99.8%，97.1%，99.4%。

乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。

乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。

结论采用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，操作简单，所用试剂方便易得，通过两种试验方法的比较，效果较满意。

标签：双波长分光光度法；爱索尔感冒片；乙酰水杨酸；含量爱索尔感冒片是乙酰水杨酸和盐酸吗啉胍的复方制剂，原质量标准采用中和滴定法测定乙酰水杨酸含量，且操作繁琐，本文改用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，取得较满意的效果。

1 仪器与试药岛津UV-2100型紫外分光光度计；乙酰水杨酸对照品、盐酸吗啉胍对照品（符合中国药典2005年版规定）；乙醇为分析纯；爱索尔感冒片为市售品。

2 实验条件的选择精密称取乙酰水杨酸对照品适量，用乙醇配制成10ug/ml的溶液，按处方量配制盐酸吗啉胍溶液及辅料溶液，在200nm～300nm的波长范围内绘制吸收曲线。

结果表明：乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm 的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。

乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。

3 标准曲线的制备精密称取乙酰水杨酸约25mg和盐酸吗啉胍10mg，同置50ml量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度摇匀。

双波长双指示剂动力学分光光度法测定钴

ห้องสมุดไป่ตู้
２实验
２．１主要仪器与试剂
７２２Ｓ型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；ＦＡ２００４型电子天平（上海良平仪器仪表有限公
司）；ＨＨ一６数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）．钴（ＩＩ）标准溶液：称取０．０１３１５ｇ无水硫酸钴于１０００ｍＬ容量瓶中配制成含钴５．００×１０一ｇ／ｍＬ储备
收稿日期：２０１３—０１一ｌ２
作者简介：邵
鑫（１９８６一），女，安徽淮北人，硕士生，研究方向：动力学光度分析．通讯作者：张振新（１９６２一），女，河北文安人，教授
第１期
邵鑫等：双波长双指示剂动力学分光光度法测定钴
建立了动力学分光光度法测量痕量钴的新方法．在最大吸收峰波长５３０ｎｍ和５９０ｒｉｍ处，钴离子在（０．２５～４．０） ×
１０ｇ／２５ｍＬ范围内与 △ Ａ呈线性关系，其线性回归方程为ＺｌＡ＝０．０９３７３＋０．４１２６Ｃｃ。（），相关系数Ｒ＝０．９９６８，检
第３４卷第１期
２０１３年３月
淮北师范大学学报（自然科学版）
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕａｉｂｅｉＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）

双波长分光光度法的基本原理及应用

双波长分光光度法的基本原理及应用应用分光光度法对共存组分进行不分离定量测定时，通常采用的方法有双波长法，三波长法，导数光谱法、差谱分析法及多组分分析法等方法，其快速，简便的优点使这些方法在实用分析中得到越来越广泛的应用。

其中以双波长法的应用为最多，该法的准确度和精密度要高于其它方法，是对共存组分不分离定量测定的有效方法之一。

实用中的双波长法主要采用等吸收波长法和系数倍增法两种分析方法，下面就其基本原理和应用作以介绍：一、等吸收波长法1、基本原理图1是同一组分三个不同浓度供试液的吸收光谱图，经典分光光度法的定量测定通常是在被测组分的最大吸收波长处进行测定，根据兰伯一比耳定律，其吸光度值与被测组分的浓度C成正比，即：依（3）式测定被测组分a，则可完全消除b组分的干扰，达到共存组分不分离进行定量测定的目的。

2、影响因素（1）测定波长和组合波长的选择应使被测组分的△A值尽可能大，以增加测定的灵敏度和精确度。

（2）测定波长和组合波长应尽可能选择在光谱曲线斜率变化较小的波长处，以减小波长变化对测定结果的影响。

（3）干扰组分等吸收波长（组合波长）的选择必须精确，只有其△A值等于零时才能完全消除干扰，否则会引入测定误差。

为此，在实用分析中，都是先配制一个干扰组分b的供试液，在仪器上准确找出等吸收波长，然后再对样品进行测定。

3 应用实例等吸收波长法的一个典型应用实例为收载于《中华人民共和国药典》中的抗菌消炎药复方磺胺甲噁唑片的含量测定。

复方磺胺甲噁唑片中含有磺胺甲噁唑（SMZ）和甲氧苄（TMP）两个成分，其吸收光谱见图3。

当测定SMZ时，选择其最大吸收波长257nm为测定波长，可以在干扰组分TMP的光谱曲线上304nm附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰；当测定TMP时，选择239nm为测定波长，可以在干扰组分SMZ的光谱曲线上295nm附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰，分别对SMZ和TMP进行含量测定。

双波长分光光度法消除浊度对水中色度测定影响的研究

７２
．
第２２卷，第４期２１３年７月
化学分析计量
ＣＨＥＭＩＣＡＬＡＮＡＬｙＳＩＳＡＮＤＭＥＴＥＲＡＧＥ
ＶＯ１．２２．Ｎｏ．４Ｊｕ１．２０１３
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－６１４５．２０１３．０４．０２１
ｄｅｖｉａｔｉｏｎ．Ｃｈｒｏｍｉｕｍ— ｃｏｂａｌｔｃｏｌｏｒ－ｃｏｄｅａｓａｓｔａｎｄａｒｄｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｄｕａｌｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙｏｆ３５０ａｎｄ５４０ａｍｗｅｒｅ
消除人为误差，还可提高分析结果的准确度。关键词色度；浊度；分光光度法
中图分类号：０６５７．３２
文献标识码：Ａ
文章编号：１００８－－６１４５（２０１３）０４－００７２－０４
ｓｅｔｕｐ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｃｏｌｏｒｉｔｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｈａｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙ（Ｆ２＞０．９９９），ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎ

双波长分光光度法同时测定电镀液中铜和铁

ａｄｔａｆｔｅｃｐｒｗａ５．％～１ｎｈｔｏｈｏｐｅｓ９３２０５．２％．０
ＫｅｗｒｓＳｅｔｐｏｏｔ；ｃｐｅ；ｉｎ一５Ｂ一一ｙｉｙｚ一－ｉｈｌｎｐｅｏ５Ｂ — ｙｏｄ：ｐｃ０ｈｔｒｒｍｅｙｏｐｒｒ；２（一ｒｐｒｌｏ）５ｄｅｙａｏｈｎｌ（一ｒｏ２ｄａｔｍｉ
等工艺均有影响 ¨ 。铁离子是镀液中最常见的杂Ｊ
质，各种镀液的性能都有不良影响。铁杂质的测对定可以为排除电镀故障提供重要依据。电镀液中铜和铁的允许含量随镀种不同而异。例如，镀镍液中的铜和铁的允许范围为几十ｍ／，ｇＬ而镀铬液中
Ｂ・ＡＡ）ａｓｄａｈｏｇｎｃａｅｔＴｉｎＸ１０（Ｐａｌｂｌｅ．ＢｘｅｉｅｔｔｅｐｒＰＤＰｗｓｅｓｒｍｏｅｉｇｎ，ｒｏ一０Ｏ）ｓｓｕｉｚｒｙｅｐｒｎｓ， — ｕｃｔａｏｉｍｈ０
ｔｕｎｅｐｒｍｅｔｌｃｎｔｏｒｏｆｒｅｉｒｘｅｉｎａｏｄｉｎｓｗｅｅｃｎｍｄ，ｉｃｕｉｇｔｅｂｓｍｏｎｆｒａｅｔｈｅｓａｉｉｆｓｓｍｉｉｎｌｄｎｈｅｔａｕｔｏｅｇｎ，ｔｔｂｌｙｏｙ－ｔ
１１５％，铜的回收率为９．２～１５０％。０．３５３％０．２
关键词：分光光度法；；；一５溴一一铜铁２（一２吡啶偶氮）５二乙氨基酚；一一电镀液

双波长紫外分光光度法

将样品在276nm和322nm波长处的得的吸收度计算得的ΔA，代入标准曲线，求得样品中阿司匹林的浓度。
②样品测定：取阿司匹林肠溶片20片，精密称定，研细。精密称取约相当于阿司匹林50mg置于50mL容量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解并定容，摇匀，滤过。精密量取续滤液2mL置25mL容量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀。分别在276nm、322nm波长处测定吸收度，用回归方程计算阿司匹林的含量。
含量计算
阿司匹林制剂在体外的含量测定
——双波长紫பைடு நூலகம்分光光度法
原料
阿司匹林肠溶片
原理
采用双波长紫外分光法（测定波长为276nm和322nm），测定了阿司匹林肠溶片的含量，可消除附加产物水杨酸的干扰。
方法
①标准曲线的绘制：精密称取阿司匹林对照品适量，加乙醇溶解使成 1000μg/mL的溶液。精密吸取1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分置于 25mL容量瓶中，加乙醇至刻度，分别制成40，60，80，100和 120μg/mL的对照品溶液，以乙醇为空白，分别在276nm、322nm波；长处测定吸收度，以浓度C和ΔA进行线性回归得出方程式。

多波长系数法计算分光光度法与双波长法_三波长法等经典方法的异同

在 1、2, n( n\ 2) n 个波长处测定待测组分与干扰组分的吸光度值, 令 v A = K1A 1 + K2 A2 + , + K nA n= E K iA i
……………………………………………………… ( 1) A i 为波长 i处的吸收度, K i 为对应于 A i 的倍率系数。对于干扰组分, 根据线性相关原理, 必然有不全为零的 K 1、K2 , K n 使下式成立, v A干 = K1A干1 + K2A干2 + , + KnA干n = E K iA干i = 0 ……… ( 2) 对于待测组分, 由于待测组分与干扰组分吸收光谱不完全重叠, 必然存在 v A测 = K1 A测1 + K2 A测2 + , + K nA测n = E K iA测i = b ( bX 0) …………………………………………………… ( 3) 一旦该 K 1、K2, K n 值确定, 根据 L am bert- Bee r定律和吸收
2003, 39 ( 2) : 9 ~ 12.
多波长系数法计算分光光度法与双波长法、三波长法等经典方法的异同
张学惠 1, 巫巧鹤 2, 李枝端2 ( 11福建省古田药品检验所古田 352200; 21福建省宁德人民医院宁德 352100)
摘要: 目的与方法比较多波长系数法计算分光光度法与双波长法、三波长法等经典方法的异同, 为计算分光光度法方法的选用提供参考。结果与结论多波长系数法涵盖了双波长法、三波长法等经典方法, 双波长法、三波长法等经典方法是有着特定限制条件, 从而有着特定抗吸收干扰、抗测定误差干扰优点的特殊多波长系数法。多波长系数法只要用之得当, 就是一种应用广泛, 方法灵活, 抗吸收干扰与抗测定误差干扰能力强的优良的计算分光光度法。由于波长位置与数量的选择更为灵活, 其优越性将大大超过现有的经典方法, 值得推广应用。关键词: 多波长系数分光光度法; 双波长法; 三波长法中图分类号: R 92712 文献标识码: A 文章编号: 1006-3765( 2007 ) 012-0116-02

双波长分光光度法

双波长分光光度法建立在Lambert—beer定律基础上的单波长分光光度分析技术，应用极为广泛，但由于单波长法存在混浊试样对光的散射和比色杯背景吸收等难以克服的缺点，它在高精度测量中的应用受到一定的限制。

为了解决浑浊试样对分光光度测定的干扰问题，美国的B.Chance于1951年制成了用振动镜使两束不同波长的单色光交替通过待测溶液的双波长分光光度计（Double Wavelength Spectrophotometer）,从而奠定了双波长分光光度法的基础。

随着科学技术的发展，双波长分光光度分析技术已日臻完善，与先进的后分光技术相结合，在生化自动化分析中得到了广泛的应用并显示出了光明的发展前景。

1 双波长分光光度法的原理双波长分光光度法是在传统分光光度法的基础上发展起来的，它的理论基础是差吸光度和等吸收波长。

它与传统分光光度法的不同之处，在于它采用了两个不同的波长即测量波长（又叫主波长λp,Primary Wavelength）和参比波长（又叫次波长λs, SecondWavelength）同时测定一个样品溶液[1,2]，以克服单波长测定的缺点，提高了测定结果的精密度和准确度。

早期的双波长分光光度计在测定时，两束不同波长的单色光经斩光器（Chopper，一种用于双波长分光光度计中使光束按一定周期反射，遮断或通过的装置）处理后，以一定的时间间隔交替照射[1]比色杯，经待测溶液吸收后，再照到光电管上，产生两个不同的吸光度，再将这两个吸光度相减，就得到了差吸光度ΔA。

根据Lamber—Beer定律, 得：Aλp=ελpLC+Ap (1)A λs=ελsLC+As (2)式中Aλp 、 A λs—分别为待测溶液在主波长和次波长处的吸光度，ελp 、ελs—分别为待测溶液在主波长和次波长处的摩尔吸光系数L—光径C—待测溶液的浓度Ap 、As—分别为待测溶液在主波长和次波长处的散射或背景吸收当λp 、λs相差不太大时，由同一待测溶液产生的光散射吸光度和背景吸光度大致相等，即Ap＝A s，将（1）式－（2）式得：Aλp－A λs＝ΔA＝（ελp－ελs）LC （3）对于同一待测溶液来说，ελp－ελs是一常数K，在光径L不变的情况下，（3）式可简化为：ΔA＝KC （4）（4）式说明，待测溶液在λp与λs两个波长处测定的差吸光度ΔA与试样中待测物质的浓度C成正比。

双波长和三波长分光光度法

一. 基本原理
A lc
dA cl d d d
d n A cl d n
dn
dn
从上式可以看出各阶导数始终和试液浓度C呈直线关系，这是导数分光光度定量分析的基础。
a: 吸收光谱; b-d: 一至四阶导数光谱
描述导数曲线的方程式可由朗伯-比尔耳定律推出。
式（1）中I0，I分别为入射光强度和透射光强度，为摩尔吸光系数，为吸收池厚度，C为待测组分浓度。假定入射光强度在整个波段范围内保持定值，对式（1）作一次微分处理得到一阶导数方程，
光器使两单色光以一定的时间间隔交替通过同一吸收池，并被
光电倍增管交替接收，测得吸光度差A。当光强度为Io的两
单色光λ1和 λ2交替通过同一吸收池时，根据比耳定律，对λ1
波长：
A 1
lg
IO I 11
1bc As1
双波长分光光度计光路示意图
1. 光源，2、3 . 两个单色器，4 . 斩光器，5 . 样品池，6 . 光电倍增管。
在实际工作中，三波长法中的波长选择和计算比单波长法麻烦而费时，但测定的准确度、精密度比解联立方程组分析混合组分的方法高。随着计算机技术的普及，用电子计算机控制的分光光度计的广泛应用，已设计出三波长法的专用计算程序，岛津UV-240、UV-260型双光束紫外-可见分光光度计就是具有这种功能的仪器。可对样品溶液中待测组分的三波长自动测定并进行结果计算，操作简便快速。
S K2 A2 K1 A1
式中，K2和K1分别为在λ2和 λ1处的放大系数；组分A和B 在λ2和 λ1处的吸光度分别为
AA 2
、AB2
和AA1、AB1，则
S＝K
2
AA2＋K
2
AB2－K1

双波长分光光度法测定药液中微量铁含量

双波长分光光度法测定药液中微量铁含量邱小香【摘要】The paper discussed the method for the determination of trace iron content of iron in oral solution by dual wavelength spectrophotometry. Based on the experiment of Fe2+,Fe3+and 1,10-phenanthroline forming colorful complexes they have different absorption levels at the wavelengths of 420 nm and 525 nm,and the contents of their absorption and the extents of Fe2 + and Fe3 + showed a linear relationship. Accordingly,under the optimized experimental conditions,the Lambert-Bill’s l aw was used to calculate the Fe2+,Fe3+content in ironoral liquid. This method has good reproducibility and high accuracy.%探索了双波长分光光度法测定含铁口服液中微量铁含量的方法。

实验基于Fe2+和Fe3+与1，10-邻菲罗啉形成有色络合物，在波长420 nm和525 nm处均有不同程度的吸收，且其吸收的程度与Fe2+和Fe3+的含量呈一定的线性关系，据此，在优化实验条件下，运用朗伯-比尔定律计算含铁口服液中的Fe2+、Fe3+的含量。

该方法重现性好、准确度高。

【期刊名称】《河南科学》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】4页(P191-194)【关键词】双波长分光光度;含铁口服液;1,10-邻菲罗啉;铁离子【作者】邱小香【作者单位】渭南师范学院化学与生命科学学院，陕西渭南 714099; 陕西省多河流湿地生态环境重点实验室，陕西渭南 714099【正文语种】中文【中图分类】O657.32测定铁含量的一般方法有EDTA滴定法［1］、原子吸收光谱法［2］等.EDTA滴定法由于其他元素的影响导致准确度不高；原子吸收光谱法所用仪器昂贵，很难普及.鉴于此，寻找一种快速、准确、简单的铁离子检测方法有着重要的意义.利用双波长分光光度法测定含铁口服液中的铁离子，当用1，10-邻菲罗啉作显色剂，与亚铁离子生成稳定的橘红色络合物，与三价铁离子可生成浅黄色的络合物［3］.基于其吸光度值（A）与铁离子浓度之间的线性关系，利用紫外-可见分光光度法建立测定样品中铁离子的含量.实验对反应时间、1，10-邻菲罗啉的用量及pH等条件进行了优化.在最佳实验条件下，含铁标准溶液与吸光度值呈现良好的线性关系，据此，成功测定了市售药液中微量铁的含量.该方法具有成本低、操作简单、灵敏度高等特点.1.1 主要仪器、材料与试剂UV-2000/2010紫外-可见分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司）；电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）.硫酸亚铁铵（FeSO4（NH4）2SO4·6H2O）：配制为2.286 mg/mL的Fe2+的标准溶液；硫酸铁铵（NH4Fe（SO4）2· 12H2O）：配制为2.076 mg/mL的Fe3+的标准溶液；钙铁锌蓝瓶口服液：三九集团昆明白马制药有限公司；冰乙酸（CH3COOH）；氢氧化钠（NaOH）；乙酸钠（CH3COONa）；1，10-邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）；浓硫酸（H2SO4）；实验所用试剂均为分析纯，所用的水都是二次蒸馏水.1.2 实验原理及方法1.2.1 实验原理本实验基于硫酸亚铁铵，硫酸铁铵与1，10-邻菲罗啉生成有色络合物.有色络合物在400～600 nm处有明显的吸收，在波长420 nm和525 nm处标准溶液的浓度和吸光度值呈良好的线性关系.根据Fe2+和Fe3+的浓度与吸光度值的线性关系及未知浓度含铁口服液的吸光度值，计算出含铁口服液具体的铁含量.根据朗伯-比尔定律：A=εbc可知联立方程（1）、（2）即可求得试样中所含铁离子的总量.1.2.2 实验方法用移液管准确移取硫酸亚铁铵标准溶液2.50 mL于25 mL具塞比色管中，加入0.12%的邻菲罗啉溶液1.00 mL，用HAC-NaAC缓冲溶液和氢氧化钠溶液调节pH至4～5，稀释至刻度，摇匀在分光光度计上测定.按同法配制硫酸铁铵标准溶液，在分光光度计上测定.取含铁口服液，测定其在420 nm和525nm处的吸光度值，计算其含铁总量.2.1 吸收光谱的绘制和吸收点的确定从图1可以看出，在一定实验条件下，Fe3+与Fe2+的标准溶液与邻菲罗啉反应生成有色络合物在400～600 nm可见光区均有一定吸收［4］.分别取它的一个等吸收点420 nm和Fe2+络合物的最高吸收点525 nm处为测量吸收点，结果如图1.2.2 反应条件的优化2.2.1 pH优化实验确定硫酸亚铁铵标准溶液、硫酸铁铵标准溶液、1，10-邻菲罗啉的量、反应时间等条件，改变反应酸碱环境［5］.取8支具塞比色管，加入2.50 mL硫酸亚铁铵标准溶液，1.00 mL邻菲罗啉溶液，振荡.用硫酸，乙酸-乙酸钠，NaOH溶液调节8支比色管中溶液的pH值分别为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0.用二次蒸馏水定容，摇匀.反应40 min后在光度计上测量其在420nm和525 nm处的光度值.硫酸铁铵溶液的测定如上法，实验结果如图2、图3.由图2、图3可知，在其他条件不变的情况下，当溶液pH=4～5时，420 nm，525 nm处ΔA值最大，故pH值调节为4～5.2.2.2 显色剂用量的选择固定标准溶液的浓度、反应时间、pH等，改变显色剂［6］的用量.6支具塞比色管各取2.50 mL硫酸亚铁铵标准液，依次加入1，10-邻菲罗啉0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 mL，用乙酸-乙酸钠缓冲溶液和NaOH调节pH=4～5，定容，摇匀.反应40 min后在光度计上测量其在420 nm 和525 nm处的光度值.硫酸铁铵溶液的测定如上法，实验结果如图4、图5.图4、图5可知，固定其他条件，当1，10-邻菲罗啉加入量为1.00 mL左右时，Fe2+和Fe3+溶液吸光度值趋于稳定，为了减少误差，同时保证结果灵敏度，节约试剂.故实验选择显色剂加入量1.00 mL为最佳实验条件. 2.2.3 显色时间的选择实验固定标准溶液浓度，显色剂，pH等量，改变反应所用的时间.取8支具塞比色管，各取2.50 mL硫酸亚铁铵标准溶液，加入1.00 mL 1，10-邻菲罗啉显色剂，用乙酸-乙酸钠缓冲溶液和NaOH调节pH=4～5，定容，摇匀.让其分别反应10、20、30、35、40、50、60、70 min，然后在分光光度计上测量其在420 nm和525 nm处的光度值.用上述方法测定硫酸铁铵标准溶液的吸光度值.由实验可知，0～40 min内，吸光度值迅速下降，40 min以后光度值基本保持不变，证明反应基本趋于稳定.同法，确定其他条件不变，硫酸亚铁铵与显色剂在0～30 min内吸光度值迅速下降，30～50 min下降速度有所减缓，当反应时间为50 min时，硫酸铁铵溶液吸光度值趋于稳定，为了获得较大的吸光度值从而提高实验的准确度和灵敏度，实验选择50 min作为最佳实验条件.2.3 标准曲线的绘制按照上述实验方法，在最优的实验条件下，在确定显色剂、pH、反应时间等量的条件下，改变标准溶液的浓度［7］.分别取硫酸亚铁铵标准溶液0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00、3.50、4.00 mL于具塞比色管中，加入1.00 mL 1，10-邻菲罗啉显色剂，调节溶液pH=4～5，定容，待其反应50 min后，应用上述建立的紫外可见分光光度法测定其吸光度值.利用吸光度值和标准溶液浓度的关系作图.硫酸亚铁铵标准溶液浓度在0.50～4.00 mL范围内与A值呈现较好的线性关系.硫酸铁铵标准溶液方法同上，实验结果如图6、图7.2.4 样品的测定取3支具塞比色管，各准确移取钙铁锌蓝瓶口服液样品2.50 mL，加入邻菲罗啉显色剂1.00 mL，调节溶液pH=4～5，用二次蒸馏水定容，待其反应50 min后，用分光光度计测定其在420 nm、525 nm处的光度值.3组实验为平行试验，取平均值.根据标准曲线和上述联立公式（1）、（2）得出样品中铁的总含量［8］（表1）.根据公式计算得：c（Fe2+）=1.296 mg/mL，c（Fe3+）=0.252 mg/mL.该补铁口服液含铁总量为1.548 mg/mL，与标示的含铁量1.600 mg/mL基本符合.同时，实验的相对标准偏差均较小，说明实验精确度比较高.2.5 加标回收实验取3支具塞比色管，加入1.00 mL硫酸亚铁铵标液，和1.00 mL硫酸铁铵标液，然后分别加入钙铁锌蓝瓶口服液样品1.00、2.00、3.00 mL.加入邻菲罗啉显色剂1.00 mL，调节pH=4～5，定容.反应50 min后，分别测量其在420 nm和525 nm处的吸光度值.根据公式计算其含铁总量从而得出回收率（表2）.结果表明：实验回收率为94.80%～98.93%.实验根据Fe2+、Fe3+与1，10-邻菲罗啉反应生成有色络合物，该络合物在波长420 nm和525 nm处有较大的吸光度，建立了双波长分光光度法测量含铁物质中铁总含量的方法.与其他方法比较，本法所用试剂廉价、操作简单.【相关文献】［1］刘梦琴，李又红，冯泳兰，等.亚硫酸钠-硫酸铈滴定法测铁及小型化实验探讨［J］.大学化学，2006，21（5）：37-39.［2］王建军，李世强，王向丽，等.火焰原子吸收法测定液氨中的铁［J］.化学分析计量，2005，14（1）：56-58.［3］常西亮，赵金安.双波长分光光度法测定自来水中Fe2+和Fe3+的含量［J］.山西化工，2003，23（3）：27-28.［4］姚文红，徐香.双波长分光光度法测定牛奶中的钙［J］.化学分析计量，2012，21（4）：71-73.［5］徐红纳，王英滨.双波长分光光度法同时测定水样中的Cr（Ⅲ）和Cr（Ⅵ）［J］.分析实验室，2008，27（5）：34-37.［6］李天增，杨铭枢，王成元，等.两次双波长分光光度法同时测定原油中的镍和钒［J］.化学分析计量，2006，15（4）：40-42.［7］黄亚光，黄永娥，王焕章，等.双波长分光光度法测定呈味核苷酸二钠混合物含量［J］.食品与发酵工业，2014，30（7）：108-111.［8］陈亚红，田丰收，马青青，等.双波长分光光度法测定废水中痕量铬（Ⅵ）［J］.冶金分析，2009，29（1）：67-69.。

双波长叠加分光光度法测定水中微量氰化物

ｓ＝．１Ｘ１／ｔｌｃ。若以ｚ４６０Ｌ（ｏ・ｍ）ｏＳ，．２计，Ａ＝００其
检出浓度为００３ｇｍ。．０／Ｌ
２７呈色稳定性．
Ｃ与异烟酸一硫代巴比妥酸首先形成红色染Ｎ一料，后逐渐变成蓝色，在５５ｎ处的吸光度然其２ｍ
在实验条件下，Ｎ一异烟酸 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ硫代巴比妥酸Ｃ与
收稿日期：０１０ —７２１ —４０
溶液２３Ｌ搅拌，８～０ｍ，使其溶解后用纯水定容至
吴佑琼：波长叠加分光光度法测定水中微量氰化物双
６１
形成红一蓝色染料，该染料分别在５０— ３ｍ和２５０ｎ６２ｎ４ｍ处各有一个吸收峰，应试剂空白的最大吸相收波长位于５０ｎ处，图１３ｍ见。
馏出液至５．Ｌ，次分取５０ｍ００ｍ每．Ｌ按１２１操．（）作测定吸光度，以标准曲线法进行氰化物定量，并与异烟酸一巴比妥酸光度法测定结果进行比
对。
氰化物标准溶液：．０ｍｇｍ（确浓度用银０１／Ｌ准盐法标定）临用时用００ｏ／，．５ｍＬＬ的ＮＯ稀释成ａＨ
１０ｒ（０ｎ此溶液ｐＬＨ值近中性）；
氯胺Ｔ溶液：００ｇＬ用时现配；１．／，ＮＯａＨ溶液：．０００ｏ０５、．５ｍｗＬ；

双波长分光光度

双波长分光光度
双波长分光光度法是一种用于测定物质浓度的光谱分析方法。

它利用两个不同波长的单色光交替照射同一吸收池的溶液，然后通过检测器和电子控制系统计算出这两个波长下吸收度的差值△A，与被测定物质的浓度成正比。

双波长分光光度法的关键在于正确选择两个波长，以确保被测组分的吸光度足够大，同时干扰组分和背景在两个波长下的吸光度相同（DA=0）。

通常，将长波长λ1选在待测组分的最大吸收波长处，而短波长λ2选在干扰组分等吸收波长处。

该方法的特点是消除了干扰组分对测定结果的影响，提高了测定的准确度和灵敏度，因此在生物、医学、环境监测、食品分析等领域得到了广泛应用。

双波长分光光度法的基本原理及应用(精)

双波长分光光度法的基本原理及应用应用分光光度法对共存组分进行不分离定量测定时,通常采用的方法有双波长法,三波长法,导数光谱法、差谱分析法及多组分分析法等方法,其快速,简便的优点使这些方法在实用分析中得到越来越广泛的应用。

其中以双波长法的应用为最多,该法的准确度和精密度要高于其它方法,是对共存组分不分离定量测定的有效方法之一。

实用中的双波长法主要采用等吸收波长法和系数倍增法两种分析方法,下面就其基本原理和应用作以介绍:一、等吸收波长法1、基本原理图 1是同一组分三个不同浓度供试液的吸收光谱图,经典分光光度法的定量测定通常是在被测组分的最大吸收波长处进行测定,根据兰伯一比耳定律,其吸光度值与被测组分的浓度 C 成正比,即:依(3式测定被测组分 a ,则可完全消除 b 组分的干扰,达到共存组分不分离进行定量测定的目的。

2、影响因素(1测定波长和组合波长的选择应使被测组分的△A 值尽可能大,以增加测定的灵敏度和精确度。

(2测定波长和组合波长应尽可能选择在光谱曲线斜率变化较小的波长处,以减小波长变化对测定结果的影响。

(3干扰组分等吸收波长(组合波长的选择必须精确,只有其△A 值等于零时才能完全消除干扰,否则会引入测定误差。

为此,在实用分析中,都是先配制一个干扰组分b 的供试液,在仪器上准确找出等吸收波长 ,然后再对样品进行测定。

3 应用实例等吸收波长法的一个典型应用实例为收载于《中华人民共和国药典》中的抗菌消炎药复方磺胺甲噁唑片的含量测定。

复方磺胺甲噁唑片中含有磺胺甲噁唑(SMZ 和甲氧苄(TMP 两个成分,其吸收光谱见图 3。

当测定 SMZ 时,选择其最大吸收波长 257nm 为测定波长,可以在干扰组分 TMP 的光谱曲线上 304nm 附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰;当测定 TMP 时,选择 239nm 为测定波长,可以在干扰组分 SMZ 的光谱曲线上 295nm 附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰,分别对 SMZ 和 TMP 进行含量测定。

【免费下载】实验九双波长分光光度法测定复方制剂含量

[含量测定] 精密量取本品注射液 1mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL，摇匀，精密量取此液 2mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL，摇匀，即得供试液。另精密称取安替比林对照品约 0.08g，用 0.1mol/L 盐酸溶解并稀释至 100mL，摇匀，精密量取此液 1mL，用 0.1mol/L 盐酸稀释至 100mL。摇匀，即得对照液（约为 8μg/mL）。
实验器材：
试药：磺胺嘧啶对照品，甲氧苄啶对照品，复方磺胺嘧啶片，安替比林对照品，安痛定注射液。
仪器：紫外分光光度仪，石英比色皿，100mL 容量瓶，移液管。
实验内容与方法：
（一）复方磺胺嘧啶片（Compound Sulfadiazine Tablets）本品每片中含磺胺嘧啶（C10H10N4O2S）应为 0.360~0.440g；含甲氧苄啶（C14H18N4O3）应为 45.0~55.0mg。 [处方]

对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料电试力卷保相护互装作置用调与试相技互术关，系电，力根保通据护过生高管产中线工资敷艺料设高试技中卷术资配，料置不试技仅卷术可要是以求指解，机决对组吊电在顶气进层设行配备继置进电不行保规空护范载高与中带资负料荷试下卷高总问中体题资配，料置而试时且卷，可调需保控要障试在各验最类；大管对限路设度习备内题进来到行确位调保。整机在使组管其高路在中敷正资设常料过工试程况卷中下安，与全要过，加度并强工且看作尽护下可关都能于可地管以缩路正小高常故中工障资作高料；中试对资卷于料连继试接电卷管保破口护坏处进范理行围高整，中核或资对者料定对试值某卷，些弯审异扁核常度与高固校中定对资盒图料位纸试置，.卷编保工写护况复层进杂防行设腐自备跨动与接处装地理置线，高弯尤中曲其资半要料径避试标免卷高错调等误试，高方要中案求资，技料编术试5写交卷、重底保电要。护气设管装设备线置备4高敷动调、中设作试电资技，高气料术并中课3试中且资件、卷包拒料中管试含绝试调路验线动卷试敷方槽作技设案、，术技以管来术及架避系等免统多不启项必动方要方式高案，中；为资对解料整决试套高卷启中突动语然过文停程电机中气。高课因中件此资中，料管电试壁力卷薄高电、中气接资设口料备不试进严卷行等保调问护试题装工，置作合调并理试且利技进用术行管，过线要关敷求运设电行技力高术保中。护资线装料缆置试敷做卷设到技原准术则确指：灵导在活。分。对线对于盒于调处差试，动过当保程不护中同装高电置中压高资回中料路资试交料卷叉试技时卷术，调问应试题采技，用术作金是为属指调隔发试板电人进机员行一，隔变需开压要处器在理组事；在前同发掌一生握线内图槽部纸内故资，障料强时、电，设回需备路要制须进造同行厂时外家切部出断电具习源高题高中电中资源资料，料试线试卷缆卷试敷切验设除报完从告毕而与，采相要用关进高技行中术检资资查料料和试，检卷并测主且处要了理保解。护现装场置设。备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。

双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中两组分的含量

空白溶剂；甲氧苄啶的测定波长为２３９ｎｍ，参比波长为２９３ｎｌｎ，以盐酸一氯化钾溶液作为ＴＭＰ的空白溶剂。结果
磺胺甲嗯唑浓度在２—１０・ＩＩｌｌＩ１之间，甲氧苄啶浓度在０．２～１．０Ｉ，ｔｇ・ｍｌ－１之间，符合比尔定律，浓度与吸收
ＷＡＮＧＬｅ — ｔｉｎｇＧＵＯ
— ｑｉｎＬＩＫｅ
（ＴａｉｓｈａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｔａｉａｎ２７１０１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｉｔｖｅ：Ａｄｕａｌｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘａｚｏｌｅａｎｄｔｒｉｍｅｔｈｏｐｉｆｍｉｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｕｌｆａｍｅｔｈｏｘ —
２７１０１６）（泰山医学院药学院，山东泰安
摘要：目的建立复方磺胺甲嗯唑片中磺胺甲嗯唑和甲氧苄啶含量测定的双波长分光光度法。方法采用双波长分光光度法测定。磺胺甲嗯唑的测定波长为２５７ｎｍ，参比波长为３０５ｎｉｎ，以０．４％氢氧化钠溶液作为ＳＭＺ的
中图分类号：Ｒ９１７文献标识码：Ａ文章编号：１００４－７１１５（２０１６）１２ — １３３６－０４ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－７１１５．２０１６．１２．００７

双波长分光光度法的两个条件

双波长分光光度法的两个条件
嘿，大家好呀！今天咱就来聊聊双波长分光光度法的两个条件，这可是有点小门道哦！
第一个条件呢，就像是找对了舞伴。

你想想，跳舞得找个和自己节奏合拍的人吧，这双波长分光光度法也一样，得有两个合适的波长来搭配，才能跳出完美的“舞蹈”。

如果波长没选对，那就好比找了个乱踩脚的舞伴，那可就乱套啦，啥数据都别想测准咯！所以呀，选对波长这一步可不能马虎，得精挑细选，就像选对象似的，得找到那个最适合的。

再来说说第二个条件，这就像是炒菜得掌握好火候。

火候大了，菜就糊了；火候小了，菜又不熟。

这双波长分光光度法的第二个条件也是这样，得恰到好处。

这个条件就是要控制好各种实验因素，比如温度呀、浓度呀等等。

要是没控制好，那结果可能就像炒糊的菜一样，没法看啦！只有把这些因素都拿捏得稳稳的，才能得出准确又可靠的数据，就像做出一道美味的佳肴一样。

哎呀，要满足这两个条件可不容易呢，就像走钢丝一样，得小心翼翼的。

但一旦掌握好了，那可就厉害啦，能发挥出巨大的作用。

就好像一个武林高手，掌握了一门绝世武功，在分析化学的江湖里就能横着走啦！哈哈，开个小玩笑。

总之呢，双波长分光光度法的这两个条件就像是一对好兄弟，相互配合，缺一不可。

只有它们齐心协力，才能让这个方法发挥出最大的威力。

咱搞科研的呀，就得认真对待这两个条件，可不能马虎哟！
好啦，说了这么多，希望大家都能记住这两个重要的条件。

就像记住生活中的小诀窍一样，让我们在科研的道路上走得更稳、更远。

下次再遇到双波长分光光度法，咱就不会抓瞎啦，而是能信心满满地应对，是不是呀？哈哈！就说到这儿啦，拜拜咯！。