示差法
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进一步
设待测溶液的浓度为Cx,标准溶液为Cs(Cs〈 Cx), 则有: △A=Ax-As=Ɛb(Cx-Cs)=Ɛb△c 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的 吸光度之差。示差法测得的吸光度与△c呈线性关系。由 标准曲线上查的相应的值,则待测溶液的Cx: Cx=Cs+△C
示差法标尺扩展原理:
普通法:Cs的透射比Ts=10%;Cx的透射比Tx=4% 示差法:Cs做参比,调Ts=100% 标尺扩展为10倍 则:Cx的Tx=40%
要求:
示差法要求仪器光源强度要足够 大,仪器检测要足够灵敏。因为只 有这样的仪器才能将标准参比溶液 调到T%为100%,否则调不到。
示差法
722型可见分光光度计
——高含量组分的测定
微生物11301班 七组
了解:
普通分光光度计一般只适于测定微量组 分。然而,当待测组分含量较高时,其将产 生较大的误差。
思考:ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ用什么方法才适合于高含量组 分的测量计算?
示差法
示差法又称为示差分光光度法。它与一般 分光光度法区别仅仅在于它采用一个已知浓度 作参比溶液,才大大提高了测定的准确度,使 其用于测定过高含量的组分,所以将这种吸光 度测量方法来扩大测量范围并提高灵敏度和准 确度的方法称之为示差法。
为什么示差分光光度法可以提高测 定的准确度?
吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定,当待 测定组分浓度过高或过低,亦即吸光度测量值过大或 过小时,即使没有偏离朗伯--比尔定律现象。也会有很 大的测量误差,导致准确度大为降低,采用示差法可 克服这一缺点。 示差法和一般的光度法不同之处在 于,示差法不是以空白溶液(不含待测组分的溶液) 作为参比溶液,而是采用比待测溶液浓度稍低的标准 溶液作为参比溶液,然后测量待测溶液的吸光度,从 而测出待测液的浓度,从而大大提高测定结果的准确 度。