离体心脏灌流系统技术参数(精)
心脏灌流实验报告结论
一、实验背景心脏灌流实验是一种生理学实验，旨在通过模拟心脏的血液循环过程，研究心脏的功能和血液动力学特性。
本实验采用离体心脏灌流的方法，通过观察不同条件下心脏的血流动力学变化，分析心脏的功能状态和影响因素。
二、实验目的1. 了解心脏灌流实验的基本原理和方法。
2. 观察心脏在不同灌流条件下的血流动力学变化。
3. 分析影响心脏功能的主要因素。
三、实验方法1. 实验材料：离体心脏、灌流装置、生理盐水、药物等。
2. 实验步骤：（1）将离体心脏置于灌流装置中，连接好各种管道。
（2）调整灌流装置，使心脏处于正常工作状态。
（3）观察心脏在不同灌流条件下的血流动力学变化。
（4）在实验过程中，加入不同药物，观察心脏对药物的反应。
四、实验结果1. 心脏在正常灌流条件下，表现出规律性的收缩和舒张，血流动力学指标稳定。
2. 在低灌流压力下，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
3. 在高灌流压力下，心脏收缩幅度增大，心率加快，心输出量增加。
4. 加入肾上腺素后，心脏收缩幅度增大，心率加快，心输出量增加。
5. 加入乙酰胆碱后，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
6. 加入乳酸后，心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低。
五、实验结论1. 心脏灌流实验是一种有效的生理学实验方法，可以模拟心脏的血液循环过程，研究心脏的功能和血液动力学特性。
2. 心脏的收缩和舒张是维持血液循环的关键，心脏功能与灌流压力、药物等因素密切相关。
3. 低灌流压力和乳酸等因素会导致心脏收缩幅度减小，心率减慢，心输出量降低，影响心脏功能。
4. 肾上腺素和乙酰胆碱等药物可以调节心脏功能，改变心脏的收缩幅度、心率和心输出量。
5. 心脏灌流实验为研究心脏疾病、药物作用等提供了重要手段。
六、实验讨论1. 本实验结果表明，心脏灌流实验可以有效地模拟心脏的血液循环过程，为研究心脏功能提供了重要手段。
2. 在实验过程中，应注意灌流压力、药物等因素对心脏功能的影响，以保证实验结果的准确性。
离题心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的基本操作方法。
2. 观察不同生理和化学因素对离体心脏活动的影响。
3. 了解心脏生理学中离子和体液调节在心脏功能中的作用。
二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于其内环境的稳定性。
离体心脏灌流实验通过在体外模拟心脏的生理环境，研究各种因素对心脏功能的影响。
实验中，离体心脏被置于特定的灌流液中，通过改变灌流液的成分，可以观察心脏的收缩、舒张以及心率等生理指标的变化。
三、实验材料1. 实验动物：青蛙或鱼类。
2. 实验器材：蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、生理盐水、NaCl、KCl、CaCl2、乳酸、肾上腺素、乙酰胆碱等。
3. 实验试剂：任氏液、生理盐水、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、3%乳酸、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 蛙心插管法：将青蛙双毁髓后背位置于蜡盘中，暴露心脏，并在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。
用蛙心夹固定心脏，将刺激电极插入心室。
2. 灌流液准备：将任氏液或生理盐水加热至37℃，保持恒温。
3. 灌流系统建立：将蛙心夹连接到张力传感器，通过支架固定。
将灌流液从灌流瓶经滴管缓慢滴入蛙心夹，通过张力传感器记录心脏的收缩和舒张。
4. 实验操作：a. 记录正常心脏灌流下的心率和收缩幅度。
b. 分别向灌流液中加入不同浓度的NaCl、KCl、CaCl2、乳酸、肾上腺素、乙酰胆碱等试剂，观察心脏活动的变化。
c. 重复上述步骤，观察不同因素对心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常心脏灌流：在正常灌流条件下，心脏呈现规律的节律性收缩，心率和收缩幅度稳定。
2. NaCl：低浓度NaCl对心脏活动影响较小，高浓度NaCl会导致心率减慢，收缩幅度降低。
3. KCl：低浓度KCl对心脏活动影响较小，高浓度KCl会导致心率加快，收缩幅度降低。
4. CaCl2：低浓度CaCl2对心脏活动影响较小，高浓度CaCl2会导致心率加快，收缩幅度增强。
蛙类离体心脏灌流实验
蛙类离体心脏灌流实验蛙类离体心脏灌流实验一、实验目的1、探究不同溶液对心肌特性的影响2、掌握离体心脏灌流的技术二、实验原理（一）两栖类动物无冠状循环两栖类动物无冠状循环，心肌直接从流经心腔的血流中获取营养。
即心室肌直接从心室腔中获得营养。
故用任氏液置换心室中的血液后，心室插管中的灌流液便成为心室肌的细胞外液。
（二）心肌对细胞外离子浓度和体液因素敏感（三）钾、钙和钠离子对心肌特性的影响由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关，因此，细胞外液中离子浓度升升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
（1）钾离子的影响K＋与静息电位的形成有关。
细胞外液K＋浓度[K＋]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾：[K＋]0轻度或中度增高时，膜内、外K＋浓度差减小，静息电位绝对值减小，与阈电位差距缩短，因此，兴奋性增高。
[K＋]0显著升高时，由于静息电位绝对值减小过多（膜内达-55mV 左右），Na＋通道失活，因而兴奋性降低甚至消失。
另外，还使0期去极化速度和幅度减小，传导性降低，导致兴奋传导减慢，甚至传导阻滞。
此外，[K＋]0增高还可提高膜对K＋的通透性，加速K＋外流，动作电位平台期缩短，因此，不应期缩短。
此外由于平台期缩短，减少了Ca2＋的内流，加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用，导致心肌收缩功能减弱；（2）钙离子的影响细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。
[Ca2＋]0增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2＋]0增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。
Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。
[Ca2＋]0降低时，所引起的变化与高钙时相反。
（3）钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na＋]0明显增高时，膜内外钠的浓度差梯度增大，因此，快反应细胞Na＋内流加快，0期去极速度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。
离体心脏灌流
测仪上的电极测定冠状静脉的 Po2, 并可结合灌流液的
Po2和冠状动脉流量计算心肌耗氧量； 经过两根固定在心脏表面的电极可记录心外膜心电图； 心脏内埋藏电极记录希氏束电图等。
Necly等的改进(1967)
在肺静脉或左心房内插入另一根导管，灌流液经 此导管进入左心房，并通过二尖瓣进入左心室，左 心室收缩时将灌流液通过主动脉泵出，该方法可改 变心脏的前后负荷，测定心输出量、压力－容积作 功关系等。
Bardenheuer等的改进(1983)
小球囊插入左心室，通过一个插管将球囊内的液体泵
负荷和后负荷。
注意事项
① 不能损伤或结扎静脉窦； ② 主动脉内的插管不要过深以免抵住主动脉瓣 ③ 两根插管有一定相对位置，插管前要考虑好方向， 插管后应避免血管扭曲，保证灌流畅通 ④ 避免气泡进人心脏。
哺乳类动物离体心脏灌流
——Langendorff 法
Langendorff首次描述了保持哺乳动物离体心
脏存活的方法，采用恒压或恒流方式，从主动脉
根部逆向用含氧灌流液灌流心脏，这种方式的逆
向灌注关闭了主动脉瓣，使得灌注液经冠状动脉
分布，并流入冠状窦和右心房。
实验方法
1.麻醉、取出心脏：在戊巴比妥钠麻醉和人工呼吸
的 情 况 下 迅 速 取 出 心 脏 ， 置 于 盛 满 37 ℃ 氧 饱 和 的
Ringer’s液的盘中，去除粘附的心包和肺组织，确定主 动脉的位置，并恰好在其分支下方切断。 2. 主动脉插管：将一个玻璃或塑料的插管插入主 动脉，注意插管不要过深以免损伤主动脉瓣，结扎固 定。
离体蛙心灌流(精)
离体蛙心灌流实验目的学习离体蛙心灌流的方法；观察钠、钾、钙三种离子对心脏活动的影响。
观察肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
实验器材动物：蟾蜍器材：斯氏蛙心套管、套管夹、常用手术器械、任氏液、张力换能器、蛙心夹、0.65%NaCl 溶液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:5000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液实验方法与步骤1、离体蛙心的制备：双毁髓→左主动脉结扎→左右两主动脉下方活结备用→剪口，插管（管内盛任氏液与肝素）→结扎备用线（套管＋左右主动脉）→剪断动脉→结扎并剪断静脉。
2、固定套管并用任氏液换洗血液；进入RM6240系统。
3、观察并记录正常心搏曲线；4、向套管内分别加入以下溶液（0.65%NaCl溶液2d 、5%NaCl溶液2d 、1%KCl溶液1-2d 、2%CaCl2溶液1d 、1:5000肾上腺素溶液1-2d 、1:10000乙酰胆碱溶液1-2d ），观察并记录曲线变化。
实验结果此图为蛙心正常心搏曲线此图为换入0.65% Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，Nacl可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度减小。
此图为加入5%Nacl溶液后蛙心收缩曲线的变化有波形图可知，向任氏液中加入5%Nacl之后心搏曲线的幅度大大降低。
此图为加入Kcl溶液后蛙心收缩曲线的变化KCl导致心脏肌细胞收缩能力减弱，心率减慢。
此图为加入Cacl2溶液后蛙心收缩曲线的变化可使心肌收缩能力增强，心率加快，导致心率曲线幅度由上图可知，CaCl2增加。
此图为加入肾上腺素后蛙心收缩曲线的变化由波形图可知，肾上腺素可使心肌收缩力增强，心率加快。
此图为加入乙酰胆碱后蛙心收缩曲线的变化由上图可知，乙酰胆碱可使心肌收缩能力减弱，心率减慢，导致心率曲线幅度降低。
实验结果分析离体蛙心仍可具有揭露性收缩，是因为作为蛙心正常起搏点的经脉都（其功能相当于人体心脏的窦房结）能产生自动节律，通过传导系统维持心脏的波动，心脏正常德节律性兴奋和收缩活动必须在适宜的礼花环境才能维持，一旦适宜的环境被干扰或破坏，心脏后东就会受到影响。
实验4-4 蛙类离体心脏灌流
实验4-4 蛙类离体心脏灌流引言离体心脏灌流实验是生理学中常用的方法之一。
不同种类的动物可以通过体表切口或开放胸骨来取出其心脏进行灌流。
而离体心脏灌流实验可以帮助研究者了解心脏的解剖学和生理学特征。
本实验将讲解如何进行蛙类离体心脏灌流实验。
实验器材和试剂1.蛙类（建议使用大型蛙类）。
2.离体心脏灌流系统，包括：- 离体心脏灌流装置（含灌流缓冲液、温度控制器等）。
- 稳压泵。
3.灌流缓冲液，常用的为Tyrode's盐溶液。
实验步骤1. 先将离体心脏灌流系统检查一遍，保证各项设备均运转正常。
2. 杀死一只蛙类，立即进行解剖，取出心脏，并将其迅速转移到灌流装置中。
在移植心脏时应注意不损伤其血管和肌肉组织。
在灌流系统中，除了心脏，不能有其他生物组织残留。
3. 确认灌流系统中的灌流缓冲液温度为20~25℃。
在开始灌流之前，要先排除灌流管路中的空气。
4. 打开灌流泵，根据所选择的灌流缓冲液flow rate控制注入速度，一般建议在3~8ml/min。
确保满足心脏需求的氧气和营养物质可以通过灌流液输送到心脏内部。
5. 注入灌流缓冲液的同时，对心脏进行观察，确认心脏速率、收缩波幅度等生理特征。
6. 加入适当的药物来研究心脏对药物的反应性。
此时应读取每个添加药物后的心脏特征和响应（如速率、波幅等）。
7. 在实验结束时，切断灌流管路和心脏连接，灌流系统中的灌流液应该被排除并清洁。
结果和分析离体心脏灌流实验可以观察心脏的生理学特征和对不同药物的反应，这有助于研究者了解心脏的生理学机制。
在进行本实验时，需要注意不仅仅是心脏的特征，还要关注灌流流量和药物导致的生理反应。
在实验的过程中，如果发现心脏节律不齐或收缩波幅度明显下降，这可能是灌流流量不足造成的。
而添加不同的药物，可以帮助研究者了解心脏的调控机制，同时也可以评估药物的疗效。
需要注意的是，不同种类的动物其心脏组织的特征也是不同的，因此需要根据具体的实验目的选择合适的动物进行实验。
离体心脏灌流实验报告
离体心脏灌流实验报告离体心脏灌流实验报告心脏是人体最重要的器官之一，它的正常运转对于维持身体的正常功能至关重要。
然而，心脏病是全球范围内的一大健康问题，每年造成数百万人死亡。
为了更好地研究心脏病的发病机制以及开发新的治疗方法，离体心脏灌流实验成为了一种重要的研究手段。
离体心脏灌流实验是指将动物或人体心脏取出后，通过人工装置对其进行血液灌流，模拟体内环境，以便研究心脏的生理和病理过程。
这种实验方法可以提供更加精确和可控的条件，避免了体内环境的干扰，从而更好地研究心脏的功能和疾病。
在离体心脏灌流实验中，首先需要将动物或人体心脏取出，并迅速将其连接到灌流装置上。
灌流装置通常由氧气供应系统、血液泵、温度控制系统等组成，以模拟体内环境。
通过调节血液流速、氧气浓度和温度等参数，可以控制心脏的工作状态，观察其生理反应。
通过离体心脏灌流实验，研究人员可以观察心脏在不同条件下的工作情况，如心脏收缩力、心脏节律等。
同时，还可以通过添加特定的药物或激素，研究其对心脏功能的影响。
这种实验方法可以提供更加直接和准确的数据，有助于深入了解心脏病的发病机制。
除了研究心脏的生理功能外，离体心脏灌流实验还可以用于研究心脏疾病的发展过程。
例如，通过给心脏注射特定的病原体或药物，可以模拟心脏病的发病过程，观察心脏在不同阶段的变化。
这种实验方法可以为心脏病的早期诊断和治疗提供重要的参考。
然而，离体心脏灌流实验也存在一些限制。
首先，由于实验条件的局限性，离体心脏灌流实验无法完全模拟人体内复杂的生理环境，因此得到的结果可能与实际情况存在一定的差异。
其次，由于需要使用动物或人体心脏进行实验，涉及到伦理和道德问题，需要严格遵守相关法律和伦理规定。
尽管存在一些限制，离体心脏灌流实验仍然是研究心脏病的重要手段之一。
通过这种实验方法，研究人员可以更加深入地了解心脏的生理和病理过程，为心脏病的预防和治疗提供重要的理论依据。
未来，随着技术的不断进步，离体心脏灌流实验将进一步发展，为心脏病研究带来更多的突破。
离体心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 熟悉离体心脏灌流技术的基本操作。
2. 观察和分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
3. 掌握记录和分析心脏功能指标的方法。
二、实验原理离体心脏灌流实验是生理学研究中常用的一种方法，通过将心脏从机体中取出，在体外模拟生理环境条件下进行灌流，观察和分析心脏功能的变化。
实验中，通过改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，可以研究不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、玻璃管、量筒、秒表等。
2. 实验仪器：显微镜、电子天平、恒温器、恒温水浴箱、高压消毒锅等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备（1）取一只青蛙，用蛙类手术器械进行解剖，暴露心脏。
（2）将心脏夹在蛙心夹上，用线固定在蛙板上。
（3）在心脏主动脉下方穿一线，结扎并留出一段备用。
（4）将心脏主动脉左支结扎，于动脉圆锥处剪一向心斜切口，插入灌流管。
2. 灌流实验（1）将灌流管一端插入恒温器中的任氏液中，另一端与心脏主动脉相连。
（2）调整恒温器，使任氏液温度保持恒定。
（3）开启灌流泵，使任氏液以恒定速度灌流心脏。
（4）观察心脏收缩情况，记录心率、收缩幅度等指标。
（5）依次改变灌流液的成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的变化。
3. 实验数据记录与分析（1）记录不同灌流条件下心脏的心率、收缩幅度等指标。
（2）分析不同生理、病理因素对离体心脏功能的影响。
（3）绘制心脏功能曲线，分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 灌流液中加入肾上腺素后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
2. 灌流液中加入乙酰胆碱后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
3. 降低灌流液温度后，离体心脏心率减慢，收缩幅度减弱。
4. 提高灌流液pH值后，离体心脏心率加快，收缩幅度增强。
六、实验结论1. 肾上腺素和乙酰胆碱对离体心脏功能具有调节作用，肾上腺素使心脏兴奋，乙酰胆碱使心脏抑制。
2. 温度和pH值对离体心脏功能有显著影响，低温和碱性环境有利于心脏功能的维持。
离体灌流功能介绍
离体灌流功能介绍
离体心脏灌流系统是配合做离体心脏灌流实验的一套系统。
离体心脏灌流实验将动物心脏取出，连接到特定的灌流装置，用灌流液灌注，排除了神经和体液的控制，配合特别分析软件记录心室内压、动脉血压和心电信号，自动分析各项生理参数，离体心脏灌流系统用于病理生理情况下的心功能与血流动力学改变等研究，在生理、病理生理以及药理学研究中已得到广泛地应用。
药物的心脏毒性是指药物作用于心脏后，引起的心脏生理功能异常或者损害的药效反应，如心肌损伤、心律失常、收缩或舒张功能异常，心肌肥厚和心力衰竭等。
近年来，随着新药研发量及上市药物量的不断增加，心脏毒性的不良反应报道也随之上升，因此药物的心脏安全性评价研究越来越受到重视。
Langendorff 离体心脏灌流技术是19世纪末Oskar Langendorff开发的一种实验方法，它凭借重复性高，稳定性强的特点成为心血管研究领域中使用最为广泛的实验模型之一。
该技术通过将导管插入心脏主动脉实现冠状动脉逆行灌注，可用于评估药物对心脏的直接影响或药物对于心肌损伤的保护作用。
因此，在药物前期研发阶段加强对心血管不良反应的研究，可以有效趋利避害，同时拓展药物的新用途。
离体心脏灌流
实验22 蛙类离体心脏灌流【目的要求】1．学习斯氏或八木氏离体蛙心灌流法。
2．观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。
【基本原理】心肌具有自动节律性收缩活动的特性，可用人工灌流的方法研究心脏活动的规律及其特点，还可通过改变灌流液的成分或加入某些药物来观察其对心脏活动的影响。
【动物与器材】蟾蜍或蛙、蛙心套管（斯氏套管或八木氏套管）、常用手术器械、蛙心夹、套管夹、记纹鼓及通用杠杆或记录仪与张力换能器、万能滑轮、多用仪或刺激器、蜡盘、滴管、培养皿或小烧杯、任氏液、5%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1∶100000肾上腺素溶液、1∶10000O0乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液。
【方法与步骤】1．离体蛙心的制备制备离体蛙心的方法有两种。
(1)斯氏蛙心插管法取一只蟾蜍或蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按实验19暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管（参见图4-1，4-2）。
在左主动脉下方穿一线，距动脉圆锥2-3mm处结扎。
再从左、右两主动脉下方穿一线，打一活结备用。
左手提起左主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在动脉圆锥前端，沿向心方向剪一斜口，然后将盛有少量任氏液（内加入一滴肝素抗凝）的斯氏蛙心套管由此开口处插入动脉圆锥（图4-8）。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后方及心尖方向推进。
经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入）。
不可插得过深，以免心壁堵住套管下口。
此时可见套管中液面随心脏搏动而上下移动，用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液，提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管扎紧（不得漏液），再将结线固定在套管的小玻璃钩上。
剪断结扎线上方的血管。
轻轻提起套管和心脏，在心脏下方绕一线，将左右肺静脉、前后腔静脉一起结扎，注意保留静脉窦与心脏的联系，切勿损伤静脉窦，于结扎线的外侧剪去所有牵连的组织，将心脏离体。
用任氏液反复冲洗心室内余血，使灌流液不再有血液。
心脏灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体心脏灌流技术的基本原理和方法。
2. 观察不同灌流液成分对离体心脏活动的影响。
3. 分析Na+、K+、Ca2+等离子及肾上腺素、乙酰胆碱等药物对心脏功能的作用。
二、实验原理离体心脏灌流实验是通过将离体心脏置于特定的灌流液中，模拟心脏在体内的生理环境，研究心脏生理功能的一种实验方法。
在实验过程中，通过改变灌流液的成分，可以观察心脏的收缩、舒张、心率、传导性等生理指标的变化，从而了解不同因素对心脏功能的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：青蛙、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器：手术显微镜、手术刀、镊子、剪刀、缝针、线、电子天平、量筒、移液器、秒表、温度计等。
四、实验方法与步骤1. 蛙心制备：- 取青蛙一只，用手术刀在颈部背侧切开皮肤，暴露心脏。
- 用镊子轻轻夹住心脏周围的组织，使其脱离周围组织。
- 将心脏置于蛙板上，用手术刀将心脏周围的血管和神经分离。
- 将心脏固定在蛙心夹上，连接张力传感器。
2. 灌流液准备：- 将任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等试剂按照实验要求配置好。
3. 实验操作：- 将蛙心置于任氏液中，调节温度至37℃。
- 用移液器将配置好的灌流液滴入蛙心，记录心脏的收缩、舒张、心率等生理指标。
- 依次更换灌流液，观察不同灌流液成分对心脏功能的影响。
- 记录实验数据，并进行统计分析。
4. 结果分析：- 分析不同灌流液成分对心脏收缩、舒张、心率等生理指标的影响。
- 分析Na+、K+、Ca2+等离子及肾上腺素、乙酰胆碱等药物对心脏功能的作用。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液对心脏功能的影响：- 心脏在正常灌流液中呈现规律性的收缩和舒张，心率稳定。
离体心脏灌流系统技术参数(精)
离体心脏灌流系统技术参数1、具备有温度控制系统的浴槽，可产生不同的控制环境（如一定的灌流压力、温度、酸碱度等）及各种因素（如营养物质、缺血、缺氧及药物等）。
2、离体心脏活动的各种信号（如心室压、心电图等）可用MP150多道生理信号分析系统或心功能分析系统自动采集、处理、分析。
3、该系统可进行离体心脏的正逆向灌流，可调恒流、恒压（恒压循环式和非循环式，恒流循环式和非循环式，Langendorff，工作心脏）等多种实验模式。
含所需支架、管路系统及开关、蠕动泵、控温水浴槽。
1）.温度范围：＋12oC～＋200 oC2）.温度稳定度：±0.01 oC3）.加热功率：1600 Watts4）.LED显示5）.用户选择显示精度范围0.01 oC～0.1 oC6）.用户可调节高低温度报警装置（可视的温度安全报警）7）.自动充液孔8）.泵流速：15L/min（最大）9）.泵压 0.5 bar（16＇head）（最大）10）.泵流量范围：6～600ml/min4、乳胶球囊0.03ML、0.05ML、0.10ML、0.20ML、0.27ML、0.35ML、0.49ML、0.70、ML、1.30ML各一包，每包十只。
5、柔性球囊导管两根。
6、配置模块能与MP150主机相连接，记录和分析的参数指标有：心电、心室内压、肌张力、温度、冠脉流量、刺激、呼吸频率和幅度。
7、有创血压换能器：测量范围：-50mmHg到+300mmHg过压：-400mmHg到+4000mmHg动态响应：100HZ8小时漂移：1mmHg8、肌张力换能器：量程：50克，噪声小于1mg磁滞：小于0.05%FSR非线性：小于0.025%FSR温度零点漂移：小于+/-0.03%FSR/˚C9、刺激输出模块：刺激输出电压：20V输出驱动电流：+/-100mA（50Ω）极性控制：手动或数控衰减控制范围：126dB最小单相脉宽：10μs最小双相脉宽：20μs任意波形分辨率：10μs10、刺激隔离适配器（电流和电压）：最大输出电压：200伏恒流电流：0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0,10.0, 20.0, 50.0 毫安脉冲宽度范围：50 µsec - 2 msec11、防水温度探头最大测量温度：60°C精度：0.2°C长度：3米12、呼吸放大器放大倍数：10, 20, 50, 100低通滤波：1 Hz, 10 Hz高通滤波：DC, 0.05 Hz, 0.5 Hz输出范围：±10 V噪音电压：0.2 µV (RMS)13、呼吸绑带可变电阻输出范围：50-125 Kohm电缆长度：3米离体心脏灌流系统配置明细表。
Langendorff 离体心脏灌流
Langendorff离体心脏灌流离体心脏系统的概念是由Oscar Langendorff在一个多世纪前提出的，现在作为一种非常有效的技术，在生理学和药理学的研究中广泛应用。
该技术使研究者在没有神经体液调节的条件下可以研究心脏的收缩功能、心率以及冠状动脉的特性等。
Langendorff标本通过心脏主动脉插管逆向灌注灌流液，由于灌流液压的作用，动脉瓣关闭，灌流液顺势流入冠状动脉，从而使心脏维持跳动数小时。
推荐硬件：Langendorff离体心脏灌流系统这是一套完整的系统，包含灌流装置、记录系统和所需的各种放大器、传感器以及附件。
特殊设计的灌流系统引入电子压力/流量反馈系统，按动一个按钮就可以在恒定流量或恒定压力模式之间进行轻松地切换，并且无需高架灌流容器来维持恒定的灌流压力。
推荐软件：LabChart Pro专业版血压分析软件模块：左心室发展压以及相关参数(LVP、dP/dt max、dP/dt min等)心电图分析软件模块：PQRST幅值和RR、PR、JT、QT等间期心率变异度(HRV)软件模块：绘制Poincaré Plot、Tachogram、Spectrum、Period Histogram和Delta NN Histogram量效关系分析软件模块：绘制量效曲线、计算EC50和Hill slopes论文摘要：Hypoxia and AMP independently regulate AMP-activated protein kinase activity in the heartM. Frederich, L. Zhang and J. A. Balschi, American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology, 2412-2421, 2005。
实验六 蛙类离体心脏灌流
五、注意事项
1. 向套管中加入药物之前，套管中应保留 少量的任氏液； 2．吸去的药液和清洗的任氏液应滴入废液 缸，切记不能污染新鲜的任氏液和其他 药液； 3. 实验记录要完整，即有头有尾，要记得 作标记。
六、结果和目标
观察并记录各灌流成分对心搏的影响。
七、思考题 1． 此实验说明心肌有哪些生理特性？ 2. 以本实验为例说明内环境相对恒定 的重要意义。
四、实验内容 （步骤）
看示范和录像） （一）离体蛙心的制备 （看示范和录像） （二）暴露心脏 （三）连接实验装置 （四）记录心搏曲线
（五）向套管内加2-6滴5%NaCl溶液，加液时 按一下“enter”键作标记记录的曲线出现变化 时，立即吸套管中的灌流液（作好冲洗标记）， 用新鲜任氏液清洗2-3次，待心搏恢复正常。 （2）向套管内加入1滴2%Cacl2溶液观察心搏 曲线的变化（方法同上）。 （3）向套管中加1-2滴1%Kcl溶液观察心转曲 线的变化（方法同上）。 （4）向套管中加入1-2液1:100,000肾上腺素 溶液，观察心搏曲线的变化（方法同上）。 （5）向套管中加入1-2滴1:1000,000乙酰胆碱 溶液，观察心搏曲线变化（方法同上）。
动物生理实验模块
实验六
蛙类离体心脏灌流
一、实验目的 1#43;、Ca2+、肾 上腺素、乙酰胆碱等对离体心 脏活动的影响。
二.原理
心肌具有自动节律性，可用人工灌流的方 法研究心脏活动的体液调节。
三、试剂与器材
蛙、微机、生物信号处理系统、解剖针、 手术剪、眼科剪、尖头手术镊、蛙心套 管、圆头手术镊、蛙板、张力换能器、 蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、长胶头 滴管、5%NaCl溶液、2%CaCl溶液， 1%Kcl溶液、1:100,000肾上腺素溶液、 1:1000,000乙酰胆碱溶液、烧杯
离体心脏灌流 - 成都泰盟软件有限公司
Tolerance to acute ischemia in adult male and female spontaneously hypertensive rats. Physiol Res. 2006 Jun 22; GENE EXPRESSION OF STRETCHACTIVATED CHANNELS AND MECHANOELECTRIC FEEDBACK IN THE HEART. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2006 Jul;33(7):642-648.
Isolated Working heart Perfusion apparatus
基础灌流液：K-H液 Nacl 118mM KCl 4.7mM KH2PO4 0.93mM NaHCO3 24mM 1.5mM se 10mM 加d.H2O至1000ml /pH7.4 在此基础上，可加白蛋白，氨基酸，去纤维蛋白 血，RBC…… 灌流液的气体：95%O2+5%CO2 1.5升/分（25ml/s） 灌流压力：80~100mmHg
Calcium measurements with a new highaffinity n.m.r. indicator in the isolated perfused heart Biochem. J. (1993) 293, 407-411
注意事项
1. 待灌流装置运转良好，灌流液充分氧合、37℃ 后，再开始准备取心脏。 2. 取心脏的过程要快捷、轻柔，尽可能长地保留升 主动脉。 3. 心脏取出后迅速置于冷仃跳液中，使心脏仃跳， 并轻压心脏排出心脏和冠脉中残留的血液。 4. 插管时保持主动脉始终在液面下，避免空气进入 主动脉。 5. 插管不宜太深，避免顶住冠脉入口，甚至进入左 心室。
大鼠离体心脏灌流技术
附录三 大鼠离体心脏灌流技术大鼠离体心脏灌流（Langendorff）是研究离体心脏在人工控制条件下，观察各种因素（药物、缺氧、离子等）对大鼠心脏活动（心脏的收缩功能、舒张功能、冠脉流量、心肌电活动等）的影响的一种可靠方法。
心脏从大鼠体内摘出之后，以一定压力、温度及充氧的生理溶液经主动脉根部流入进行灌流。
灌流液经冠状动脉口进入冠状血管营养心脏，维持心脏的节律活动。
灌流液经冠状血管进入右心房，然后由腔静脉口和肺动脉口流出，其流出量即为冠状血管的管流量。
离体心脏的节律性活动及心肌电活动变化可以通过记录系统进行记录和分析。
用Langendorff发灌流心脏，其节律性活动可维持较长的时间（一般可维持3~6h）。
仪器装置：仪器的核心部分是恒温、循环和浴槽三部分组成，一般进口这套设备需人民币十几万元。
我们教研室因经费十分紧张又急需这样的设备，针对这种情况，我们自行设计和制作出这套离体心脏灌流设备（见下图）。
经过反复的试验，验证了这套灌流装置无论在性能上、稳定性上都达到了要求，而且只用了二千元人民币。
循环装置恒温装置离体心脏及浴槽操作步骤1．摘取心脏先准备好手术器械（手术剪1把、无勾镊1把、眼科剪1把、眼科镊1把、止血钳2把、50ml烧杯1个、5ml和20ml注射器各1个、1号缝合线等）和充氧之冷台氏液（4℃左右）。
将大鼠麻醉或颈部脱臼后，打开胸腔充分暴露心脏，轻轻提起心脏并迅速摘取心脏。
手术过程中注意不要损伤心脏。
主动脉根部要保留0.5cm长以备插管用。
心脏摘取后立刻置于预先准备好的充氧冷台氏液中，用手指轻压心室将腔内的血液排出，防止血块形成。
心脏停跳后迅速剪去心脏周围的组织，操作中注意避免损伤静脉窦。
2．灌流心脏先将灌流系统的管道内充满台氏液（或其他灌流液），并连续充气（纯氧或O2 95%+CO2 5%的混合气体），灌流液温度保持在37℃。
将主动脉套进灌流管末端的动脉套管上并结扎固定好。
套管进入主动脉不易过深，以免损伤主动脉瓣或堵住冠状动脉开口处影响冠状血管的灌流。
离体心脏Langendorff灌流模型稳定性的探讨
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毒 ２１ 年 １ ０１ 月第 ３ 卷第 １ Ｉｔ ａｄ ｖｓ Ｄ ｓ ａ ｕｒ ０ １ Ｖ １ ３ ， ｏ １ ８ 期 ｎ Ｊ ｒｉ ａｃ ｉ Ｊ ｎ ａｙ １ ， ｏ ８ Ｎ Ｃ ｏ ， ２ ．
离体 心 脏 ａ ｇ ｎ ｏ ｆ 灌 流 模 型 稳 定 性 的 探 讨 Ｌ ｎ ｅ ｄ ｒｆ
随着人们 对心 血 管 系统 研 究 的不 断 深 入 ， 体 离 心脏灌 注模 型及 其 灌 注 效 果 得 到 了极 大 地 改 进 和 提高 。然而 ， 代 离 体 心脏 灌 注 模 型 的基 本 原 理 ， 现 仍 由 （ｓａ ａ ｇ ｎ ｏｆ 方法 的基础 上发展 而来 。 ）ｃｒＩ ｎ ｅ ｄ ｒｆ Ｌ ｎ ｅ ｄ ｒ 方 法通 过把 灌 注 管插 入 到 离 体 心 脏 的 ａｇ ｎｏｆ ｆ 升主动 脉 ， 将 灌 注 管 连 接 到 装 有 灌 注 液 的 装 置 再 上， 经过 预热 、 氧合 及 调 整灌 注 压 力后 ， 注 液 滴 入 灌 主动 脉 中， 于 主 动 脉瓣 处 于 关 闭 状 态 时 ， 注 液 在 灌 通过 主动脉 根 部 的冠 状 动 脉 开 口灌 注 冠 状 动 脉循
损伤、 心肌细 胞治疗 和 移 植 心脏 保 存 在 内 的众 多 研 究取 得 了重 大 突 破 。尽 管 离 体 心 脏 灌 注 模 型 有 其
自身 的局 限性 ， 此 方 法凭 借 较 高 的 可 重 复 性 、 但 良
好 的稳 定性 和相对 较 低 的技 术 要求 等优 点 ， 然 是 仍 现代 心血管 及 药 理 学 领 域 中最 为 广 泛 使 用 的研 究
在 获 取 离体 心 脏 后 ， 其 连 接 于 灌 注 装 置 并 通 过 逆 行 灌 注 的 方 法 对 离 体 心 脏 进 行 灌 注 ； 将
langendorff离体心脏灌流系统介绍
langendorff离体心脏灌流系统介绍
● 功能
配合完成离体心脏灌流实验。
将动物心脏取出，连接到特定的灌流装置，用灌流液灌注，排除了神经和体液的控制，配合特别分析软件记录心室内压、动脉血压和心电信号，自动分析各项生理参数，用于病理生理情况下的心功能与血流动力学改变等研究，在生理、病理生理以及药理学研究中已得到广泛地应用。
离体心脏灌流系统是针对当前医学院校及科研机构的药理实验自主研发的实验产品，分为A型和B型两种型号。
A型为标准型，具一道Langendorff灌流支路和一道工作心脏灌流支路，B型为双道Langendorff 灌流式，可同时做两路Langendorff 灌流实验。
● 参考使用方法
SD大鼠Langendorff离体心脏灌注模型：称重，腹腔注射10%水合氯醛（300mg/kg）麻醉，并注射肝素（1000U/kg）抗凝，将麻醉大鼠固定在鼠台上，刮掉胸前毛发；剑突下作切口，沿左右肋缘横向剪开腹前壁，再依次沿左右腋中线纵向剪开两胸侧壁，将胸壁翻至头侧，打开心包膜，暴露心脏；左手拇指和食指轻轻提起心脏，暴露心底血管，迅速将其剪断，取出的心脏立即放入4℃的KH灌流液中停搏；在液面下夹住主动脉断端，将套管插入主动脉，用缝线结扎固定，连接Langendorff离体心脏灌注装置，KH缓冲液经主动脉逆行灌注，恒温水箱维持体温在37℃，接测压气囊、电磁流量计和针状电极。
连接多导生理记录仪采集数据。
然后根据实验设计调节灌注液温度，添加实验试剂。
【CN209473460U】一种双通道单心脏的离体心脏灌流系统【专利】
地 ，涉及一种双通道单心脏的离体心脏灌流系 统 ，包括安装基板、保温罐、浴腔、肌张组件、针 头、两个溢流杯和两个蛇形加热器，两个溢流杯、 两个蛇形加热器、保温罐和浴腔沿竖直方向从上 而下依次排列设置在安装基板的一侧，肌张组件 设 置 在浴 腔的 外 侧 ，针 头 设 置 在 肌张 组 件的 下 方，每个蛇形加热器的底部和保温罐的顶部均设 有一个鲁尔三通 ，安装基板的 背 侧设有储液瓶 ， 每个溢流杯均通过一个药液泵连接至储液瓶，本 实 用新型公开的 一 种双通 道单心脏的 离体心脏 灌流系统 ，解决了个体性的差异引起数据的不确 定性及数据的可比性，同时参与该灌流系统只需 要一个心脏，并且更换药物后到达心脏的时间可 预见性。
( 19 )中华人民 共和国国家知识产权局
( 12 )实 用新型专利
(21)申请号 201920029914 .9 (22)申请日 2019 .01 .08 (73)专利权人 成都泰盟软件有限公司
地址 610000 四川省成都市高新区天府大 道中段1388号1幢1106号
(72)发明人 吴俊 (74)专利代理机构 成都金英专利代理事务所
权利要求书1页 说明书3页 附图4页
CN 209473460 U
CN 209473460 U
权 利 要 求 书
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1 .一种双通道单心脏的离体心脏灌流系统 ，其特征在于 ：包括安装基板（2）、保温罐 （5）、浴腔（6）、肌张组件（7）、针头、两个溢流杯（1）和两个蛇形加热器（4），安装基板（2）、浴 腔（6）、保温罐（5）和两个蛇形加热器（4）均呈竖直状态设置，两个蛇形加热器（4）处于同一 高度设置，两个溢流杯（1）处于同一高度设置，两个溢流杯（1）、两个蛇形加热器（4）、保温罐 （5）和浴腔（6）沿竖直方向从上而下依次排列设置在安装基板（2）的一侧，肌张组件（7）设置 在浴腔（6）的 外 侧 ，针头设置在肌张组件（7）的 下方 ，每个蛇形 加热器（4）的 底部 和保温罐 （5）的顶部均设有一个鲁尔三通，安装基板（2）的背侧设有储液瓶，每个溢流杯（1）均通过一 个药液泵连接至储液瓶，浴腔（6）设置在保温罐（5）的下方。
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离体心脏灌流系统技术参数
1、具备有温度控制系统的浴槽，可产生不同的控制环境（如一定的
灌流压力、温度、酸碱度等）及各种因素（如营养物质、缺血、缺氧及药物等）。
2、离体心脏活动的各种信号（如心室压、心电图等）可用MP150多
道生理信号分析系统或心功能分析系统自动采集、处理、分析。
3、该系统可进行离体心脏的正逆向灌流，可调恒流、恒压（恒压循
环式和非循环式，恒流循环式和非循环式，Langendorff，工作心脏）等多种实验模式。
含所需支架、管路系统及开关、蠕动泵、控温水浴槽。
1）.温度范围：＋12oC～＋200 oC
2）.温度稳定度：±0.01 oC
3）.加热功率：1600 Watts
4）.LED显示
5）.用户选择显示精度范围0.01 oC～0.1 oC
6）.用户可调节高低温度报警装置（可视的温度安全报警）
7）.自动充液孔
8）.泵流速：15L/min（最大）
9）.泵压 0.5 bar（16＇head）（最大）
10）.泵流量范围：6～600ml/min
4、乳胶球囊0.03ML、0.05ML、0.10ML、0.20ML、0.27ML、0.35ML、
0.49ML、0.70、ML、1.30ML各一包，每包十只。
5、柔性球囊导管两根。
6、配置模块能与MP150主机相连接，记录和分析的参数指标有：心
电、心室内压、肌张力、温度、冠脉流量、刺激、呼吸频率和幅度。
7、有创血压换能器：
测量范围：-50mmHg到+300mmHg
过压：-400mmHg到+4000mmHg
动态响应：100HZ
8小时漂移：1mmHg
8、肌张力换能器：
量程：50克，噪声小于1mg
磁滞：小于0.05%FSR
非线性：小于0.025%FSR
温度零点漂移：小于+/-0.03%FSR/˚C
9、刺激输出模块：
刺激输出电压：20V
输出驱动电流：+/-100mA（50Ω）
极性控制：手动或数控
衰减控制范围：126dB
最小单相脉宽：10μs
最小双相脉宽：20μs
任意波形分辨率：10μs
10、刺激隔离适配器（电流和电压）：
最大输出电压：200伏
恒流电流：0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0,
10.0, 20.0, 50.0 毫安
脉冲宽度范围：50 µsec - 2 msec
11、防水温度探头
最大测量温度：60°C
精度：0.2°C
长度：3米
12、呼吸放大器
放大倍数：10, 20, 50, 100
低通滤波：1 Hz, 10 Hz
高通滤波：DC, 0.05 Hz, 0.5 Hz
输出范围：±10 V
噪音电压：0.2 µV (RMS)
13、呼吸绑带
可变电阻输出范围：50-125 Kohm
电缆长度：3米
离体心脏灌流系统配置明细表。