3种排龈线不同时间浸提液的细胞毒性研究
浸出毒性实验
浸出毒性实验一实验目的1．了解市政污泥脱水泥饼处理工艺及浸出毒性的实验方法。
2．掌握泥饼中重金属的固化机理。
二实验原理污泥中含有大量的重金属，包括生物毒性显著的Cr、Cd、Pb、Hg以及类金属As，以及具有毒性的重金属Zn、Cu、Co、Ni、Sn、V等。
其中Cr、Cd、Pb、Cu、Hg、As、Be、Ni、Tl被列入“中国环境优先污染物黑名单”。
它们会对人体和环境造成严重危害。
表1-1列出了污泥中重金属的来源及危害。
表1 污泥中重金属的来源及对人体的危害种类来源对人体的危害Cr含铬矿石加工、重金属表面处理、皮革、印刷、耐火材料等六价铬有强氧化作用，会引发慢性中毒三价铬毒性小，但更易被吸收和蓄积Cd 电镀、颜料、塑料、合金、电池业等刺激呼吸道，损伤肾脏，能长期潜伏Pb 蓄电池、冶金、机械、涂料、电镀等“三致”，积累性伤害，有机铅毒性更大Zn 有色金属冶炼等急性中毒为主，血压升高、气促、休克等Cu 有色金属冶炼、能源、化工等急性胃肠炎，发热、高烧，特别是硫酸铜Ni 镍矿开采冶炼等致癌，致敏，羧基镍毒性特别大Hg 工业汞原料、含汞农药等急性为肾脏损伤，慢性为肺炎、呼吸衰竭As 印刷合金、电镀废水等心血管、神经、呼吸等多种急慢性损伤城市污泥产量巨大，同时重金属在不同性质污泥中的成分、含量、形态分布不同，因此采用固化/稳定化方法处理污泥中的重金属是一种更为经济有效的方法[26]。
固化(Solidfication)是指添加固化剂于废弃物中，使其变为不可流动性或形成固体的过程，而不管废弃物与固化剂间是否产生化学结合[19]。
稳定化(Stabilization)是指将有害污染物转变成低溶解性、低毒性及低移动性的物质，以减少有害物潜力的技术。
实际工程中经常将重金属的固化/稳定化（Solidification/Stabilization，简称为S/S）结合起来使用。
目前常见的污泥固化技术主要包括：水泥固化、石灰固化、塑性材料固化、熔融固化、自胶结固化和大型包胶固化等。
实验二十七固体废物浸出毒性实验
实验二十七固体废物浸出毒性实验1、实验目的和要求掌握固体废物中有害物质的浸出方法2、原理固体废物收到水的冲淋、浸泡，其中有害成分将会转移到水相而污染地表水、地下水，导致二次污染。
浸出实验采用规定办法浸出水溶液，然后分析浸出液的有害成分。
我国规定分析的项目有汞、镉、砷、铅、铜、锌、镍、锑、铍、氟化物、氰化物、硫化物、硝基苯类化合物等。
3、仪器和材料2L具盖广口聚乙烯瓶或玻璃瓶水平往复振荡器 0.45um滤膜（水性）原子吸收分光光度计或电感耦合等粒子发射光谱仪或气相色谱等4、步骤（1）称取试样称取100g固体，置于浸出容积为2L的具盖广口聚乙烯瓶或玻璃瓶中，加水1L。
（2）振荡摇匀将瓶子垂直固定在水平往复振荡器上，调节振荡频率为（110±10）次/min，振幅40mm 在室温下振荡8h，静止16h。
（3）过滤通过0.45um滤膜（水性）过滤，滤液按各分析项目进行保护，于合适条件下贮存备用。
每种样品做两个平行浸出实验，每瓶浸出液对预测项目平行测定两次，取算术平均值报告结果。
报告中还应包括被测样品的名称、来源、采集时间、样品的粒度级分配情况、实验过程的异常情况、浸出液的PH值、颜色、乳化和相分层情况。
对于汗水污泥样品，其绿叶也必须同时加以分析并报告结果，说明实验过程的环境温度和波动范围、条件改变及其原因。
5、结果判定根据检测项目的要求，参照相关分析方法进行分析测定污染物的浓度，以浓度值是否超过允许值来判断其毒害性。
6、注意事项需要考虑浸出液与进出容器的相容性，在某些情况下，可用类似形状与容器的玻璃瓶代替聚乙烯瓶。
7、思考题何谓浸出毒性？。
细胞毒性实验总结
细胞毒性实验总结一、抗HBV药物细胞毒性实验背景知识 (1)二、细胞毒性实验方案的确立 (3)三、细胞毒性实验方法稳定后的部分数据 (4)四、细胞毒性实验质量评价指标 (5)五、细胞毒性实验SOP (6)（一）目的 (6)（二）适用范围 (6)（三）责任人 (6)（四）规程 (6)1. 试验准备 (7)2. 试验操作 (8)3．数据处理和分析 (8)六、总结 (9)一、抗HBV药物细胞毒性实验背景知识细胞毒性是化学物质（药物）作用于细胞基本结构和/或生理过程，如细胞膜或细胞骨架结构，细胞的新陈代谢过程，细胞组分或产物的合成、降解或释放，离子调控及细胞分裂等过程，导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱，所引发的不良反应。
按作用机制可分3种类型：①基本细胞毒性，涉及一种或多种上述结构或功能的改变，作用于所有类型的细胞；②选择细胞毒性，存在于某些分化细胞上，主要通过化学物质的生物转化，与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发；③细胞特殊功能毒性，对细胞结构和功能损伤轻微，但对整个机体损伤非常严重。
类似毒性作用可通过细胞因子、激素和递质的合成、释放、结合和降解影响细胞与细胞间的交流或特殊的转运过程而实现。
毒性作用也可能来自化学物质对细胞外过程的干扰，任何一种非动物检测系统对多种因素都应加以考虑。
1983年Ekwall提出“基本细胞功能”的概念，即多数化学物质毒性作用是对细胞功能的非特异性损伤，却可引起器官功能的特异性改变甚至机体死亡。
有研究显示化学物质体外细胞毒性与其引起的动物死亡率及人体死亡的血药浓度之间都存在良好的相关性。
化学物质产生的损伤和死亡，最终可表现为细胞水平上的改变，由此推测体外细胞毒性可以预测体内急性毒性。
体外方法有助于预测化学物质急性暴露引发的全身和局部影响，并评估体内毒性浓度。
目前较为理想的抗HBV药物有拉米夫定（3TC）、恩替卡韦（ETV）等。
3TC是核苷左旋对呋体，早期用于艾滋病的治疗。
临床常用排龈药物毒性比较
而 ０ １ 肾 上 腺 素 组 并 未 升 高 并 能 持 续 维 持 ２ ．％ Ｏ
牙龈的出血和组织液 的渗 出， 使术野 清晰、 印模 准 确， 有利 于 固定 义齿 修复 的成功 ， 临床 上常用 排龈 但
速心率 ， 高心肌 的兴奋 性 。 由于心肌 收缩性 增加 ， 提 心 率加快 ， 心输 出量 增 加 。 肾上腺 素 又 能 舒 张冠 故
状 血管 ， 改善 心肌 的 血 液供 应 ， 作 用 迅 速 ， 一个 且 是 强 效 的心脏 兴 奋 药 。其 不 利 的 一 面 是 加 快 心 肌 代 谢， 使心 肌氧耗 量增 加 ， 加上 心 肌 兴 奋性 提 高 ， 如剂 量 大或静 脉 注 射 快 ， 引 起 心 律 失 常 ， 现 期 前 收 可 出 缩， 甚至 引起 心室纤 颤 。在 皮 下 注射 治 疗 量 （． ０５～ １ｍ ） ｇ 或低 浓度 （０ｌ ／ ｉ） 脉 滴 注时 ， １ ， ｍｎ 静 ａ ｇ 由于 心脏
排龈效 果 最 好 并 且 不 会 引 起 系 统 性 损 害。 Ｐ ｌ ｏｔ ａ
等 也认为如果病人牙龈 组织健康、 血压 正常 ， 在 排 龈 的过程 中避 免 牙 周组 织 的损 伤 ， 么使 用 含 肾 那
上 腺 素溶液 的排 龈 线排 龈 是 安 全 的 。Ｂｄｒ ａｅ 等 的 临床研 究表 明 即使 对 高血压 患者 使用 含 肾上 腺 素溶 液 的排 龈线进 行排 龈 引起 系统性 损害 的几率 也非 常 小 。Ｆｚｋｓ ａｅａ 等 将 氯化 铝 、 硫酸铁 和 肾上 腺 素溶 液 抑制 牙龈 微循 环充 血 的效果 ６ ０ ５６ ３
临床常用排龈药物毒性比较排龈药
临床常用排龈药物毒性比较【关键词】固定义齿；排龈药物；牙周组织在现代口腔固定义齿修复过程中，在相当多的情况下需要将修复体边缘设计于龈缘以下，如前牙美观需求、冠短为增加固位而延长修复体、牙体存在龈下龋坏等，制备龈下肩台时常会伤及牙龈造成组织液渗出增多及牙龈出血，排龈药物的使用控制了牙龈的出血和组织液的渗出，使术野清晰、印模准确，有利于固定义齿修复的成功，但临床上常用排龈药物溶液的pH值多在3〜8之间，其较强的酸性作用对牙体及牙周组织都有潜在的危害。
动物与人的研究表明所有的排龈药物都可以对牙龈上皮产生暂时性的损伤，有的药物甚至可以损伤结合上皮及其下方的结缔组织[1]，造成牙龈萎缩、附着丧失、牙龈变色等，使修复体龈边缘外露继而形成微渗漏及继发龋影响了固定修复体的美观及使用寿命本文就各种排龈药物对牙周组织的影响做一综述。
1 盐酸肾上腺素溶液肾上腺素作用机制：肾上腺素能激动a和p两类受体，产生较强的a型和P型作用。
血管肾上腺素主要作用于小动脉及毛细血管前括约肌，因为这些小血管壁的肾上腺素受体密度高，而静脉和大动脉的肾上腺素受体密度低，故作用较弱。
此外，体内各部位血管的肾上腺素受体的种类和密度各不相同，所以肾上腺素对各部位血管的效应也不一致，以皮肤黏膜血管收缩为最强烈；骨骼肌血管的P 2受体占优势，故呈舒张作用。
作用于心肌、传导系统和窦房结的为P 1受体，能加强心肌收缩性，加速传导，加速心率，提高心肌的兴奋性由于心肌收缩性增加，心率加快，故心输出量增加。
肾上腺素又能舒张冠状血管，改善心肌的血液供应，且作用迅速，是一个强效的心脏兴奋药。
其不利的一面是加快心肌代谢，使心肌氧耗量增加，加上心肌兴奋性提高，如剂量大或静脉注射快，可引起心律失常，出现期前收缩，甚至引起心室纤颤。
在皮下注射治疗量（0.5〜1 mg)或低浓度（10 |J g/rain)静脉滴注时，由于心脏兴奋，心输出量增加，故收缩压升高，此外还能提高机体代谢。
细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结
细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结实验原理：Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。
其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。
生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。
因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
一、用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。
二、优点：1.使用方便，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；K-8法能快速检测；K-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；K-8法的重复性优于MTT 法，MTT 实验生成的formazan 不是水溶性的，需要使用DMSO 等有机溶剂溶解；5.而本方法产生的formazan 是水溶性的，不仅省去了溶解步骤，更因此而减少了该操作步骤带来的误差；K-8法对细胞毒性小，可以多次测定选取最佳测定时间，与MTT 方法相比线性范围更宽，灵敏度更高；K-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。
三、所需设备及仪器：1. 10ul，100-200ul及多通道移液器2. 酶标仪（带有450nm滤光片）3. 96孔培养板4. 二氧化碳培养箱四、方法及步骤：实验一：细胞增殖分析1、制备细胞悬液：细胞计数。
2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数（约1-2×104），每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做4-6个重复。
3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。
4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议将枪头浸入培养液中加入且在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。
细胞毒性实验步骤-3
细胞毒性实验步骤一、样品准备准备规则尺寸样品，平行样≥3个。
所有样品采用75%酒精杀菌消毒how？，烘干后紫外照射how long？，灭菌处理。
二、浸提液制备样品灭菌后按照1.25cm2/mL（1cm2/mL、3cm2/mL）比例加入含10%小牛血清和100U/ml 双抗（青霉素和链霉素）的DMEM，置于37℃，5%CO2培养箱内培养24h（72h）得到浸提液，0.22μm微孔滤膜除菌后备用。
三、实验分组样品浸提液为实验组，阳性对照组为10%的DMSO（二甲基亚砜），阴性（空白）对照组为含10%小牛血清和100U/mL双抗的DMEM。
实验组共3（6）个点，分别为24h（72h）浸提液各培养1、3、5天。
四、L929细胞浓度选择及细胞计数选择生长状态良好的细胞用PBS冲洗三次，2.5g/L胰蛋白酶消化后离心，制备不同浓度的细胞悬液（1×103/mL、1×104/mL、2×104/ mL、3×104/ mL、1×105/ mL）。
细胞计数：将细胞悬液滴在细胞计数板上，盖上盖玻片（从一头压到另一头，防止气泡产生），在显微镜下计数，数计数板上四个角上四个区域所含细胞总数X，细胞浓度为X/4×104 /ml。
五、细胞形态观察和细胞毒性测定将配好浓度的细胞悬液加入3块96孔板，3块培养板分别编号1天、3天、5天，每孔100μL（根据实验组计算好加入量，每种金属浸提液对应8-16孔细胞悬液），37℃ , 5 % CO2条件下培养24h，待细胞贴壁生长后弃去原培养液，PBS冲洗3遍后分别加入实验组24h、（72h）浸提液、阳性对照组10%的DMSO、阴性对照组含10%胎牛血清和100U/ml双抗的DMEM,，每孔100μL继续培养。
1、3、5天各取一块培养板在倒置显微镜下观察细胞形态并照相。
每孔加入10μL MTT后继续培养4h，小心抽出每孔内浸提液，每孔加入150 μL DMSO. 水平振荡器（脱色摇床）振荡培养板10min，570nm波长下用自动酶标检测仪上测定各孔OD值。
细胞毒性试验培训班用讲义
细胞毒性试验的目的和意 义
（一）目的：评价医疗器械和材料致细胞毒性反 应的潜在性，并预测最终生物体应用时的组织 细胞反应。通过体外细胞培养技术，可检测供 试品接触细胞后细胞发生生长抑制、功能改变、 溶解、死亡或其它毒性反应。 （二）意义：可在短期内较经济、简便地筛选出 批量供试品的细胞毒性，它为体内法（动物试 验）的进行与否提供了先决条件，对新型医疗 器械和生物材料的研制和应用提供了重要保证。
有几类细胞毒性试验方法？
GB/T 16886.5－2003/ISO 109935:1999中推荐了三类细胞毒性试验： 1）浸提液试验 2）直接接触试验 3）间接接触试验（包括琼脂扩散试 验、滤膜扩散试验）
常用的细胞毒性试验方法
• 1）浸提液试验（四唑盐（MTT）比色法 或MTT法）：哺乳动物胞的线粒体酶可将 黄绿色的MTT降解形成蓝紫色的物质，用 二甲基亚砜（DMSO）将其溶解成溶液， 用酶标仪测定其浓度，从而定量测定细胞 的存活比例。该试验用于细胞毒性细定量 评价。对该试验有干扰的供试品不适于本 试验。 2）间接接触试验：琼脂扩散法或琼脂覆
试验步骤:MTT法
e) 每个培养间期后,每孔加入MTT溶液20µl，置 含5％二氧化碳的二氧化碳培养, 在37℃±2℃ 温度下培养5小时。 f) 弃去孔内液体，每孔分别加入200µl DMSO， 将培养板放置10分钟，水平振摇使孔内溶液颜 色均匀。 g) 用酶标仪测定吸光度，可采用双波长测定， 选用的波长可为570nm和630nm。
试验材料：耗材
培养瓶、培养板、吸管、冻存管、离心管、 滤器等。 与供试品接触的所有器具置压力蒸汽灭菌 器内 121℃灭菌 20分钟。
试验材料：试剂
培养基（MEM、DMEM、IMEM、 RPMI1640等）、血清（小牛血清、新生牛血 清、胎牛血清、马血清等）、消化液、L-谷氨 酰胺、抗生素液、NaHCO3 溶液、二甲基亚砜、 平衡盐溶液。 含血清或不含血清培养基应符合选定细胞系的 生长要求。 注: 培养基中允许含有对试验无不利影响的抗 生素。
浸出毒性实验
浸出毒性实验一实验目的1．了解市政污泥脱水泥饼处理工艺及浸出毒性的实验方法。
2．掌握泥饼中重金属的固化机理。
二实验原理污泥中含有大量的重金属，包括生物毒性显著的Cr、Cd、Pb、Hg以及类金属As，以及具有毒性的重金属Zn、Cu、Co、Ni、Sn、V等。
其中Cr、Cd、Pb、Cu、Hg、As、Be、Ni、Tl被列入“中国环境优先污染物黑名单”。
它们会对人体和环境造成严重危害。
表1-1列出了污泥中重金属的来源及危害。
表1 污泥中重金属的来源及对人体的危害种类来源对人体的危害Cr含铬矿石加工、重金属表面处理、皮革、印刷、耐火材料等六价铬有强氧化作用，会引发慢性中毒三价铬毒性小，但更易被吸收和蓄积Cd 电镀、颜料、塑料、合金、电池业等刺激呼吸道，损伤肾脏，能长期潜伏Pb 蓄电池、冶金、机械、涂料、电镀等“三致”，积累性伤害，有机铅毒性更大Zn 有色金属冶炼等急性中毒为主，血压升高、气促、休克等Cu 有色金属冶炼、能源、化工等急性胃肠炎，发热、高烧，特别是硫酸铜Ni 镍矿开采冶炼等致癌，致敏，羧基镍毒性特别大Hg 工业汞原料、含汞农药等急性为肾脏损伤，慢性为肺炎、呼吸衰竭As 印刷合金、电镀废水等心血管、神经、呼吸等多种急慢性损伤城市污泥产量巨大，同时重金属在不同性质污泥中的成分、含量、形态分布不同，因此采用固化/稳定化方法处理污泥中的重金属是一种更为经济有效的方法[26]。
固化(Solidfication)是指添加固化剂于废弃物中，使其变为不可流动性或形成固体的过程，而不管废弃物与固化剂间是否产生化学结合[19]。
稳定化(Stabilization)是指将有害污染物转变成低溶解性、低毒性及低移动性的物质，以减少有害物潜力的技术。
实际工程中经常将重金属的固化/稳定化（Solidification/Stabilization，简称为S/S）结合起来使用。
目前常见的污泥固化技术主要包括：水泥固化、石灰固化、塑性材料固化、熔融固化、自胶结固化和大型包胶固化等。
浸出毒性鉴别标准
浸出毒性鉴别标准浸出毒性鉴别是指通过化学方法将样品中的有毒物质溶解出来，以便进行毒性鉴别和分析的一种常用方法。
在实际工作中，正确的浸出毒性鉴别标准对于保障实验结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将从浸出毒性鉴别的基本原理、实验步骤和注意事项等方面进行详细介绍。
首先，浸出毒性鉴别的基本原理是利用适当的溶剂将样品中的有毒物质溶解出来，然后通过适当的检测方法对其进行分析和鉴别。
在进行浸出毒性鉴别实验时，首先需要选择合适的溶剂，通常情况下，酸性溶剂适用于浸出金属离子，而碱性溶剂适用于浸出非金属离子。
在选择溶剂时，需要考虑到其溶解度、稳定性和对环境的影响等因素。
其次，进行浸出毒性鉴别实验的步骤包括样品的制备、溶剂的选择、浸出过程、溶液的处理和分析等环节。
在样品制备过程中，需要注意保持样品的完整性和代表性，避免因为样品制备不当而导致实验结果的误差。
在浸出过程中，需要控制好浸出时间和温度，避免因为操作不当而导致有毒物质的损失或溶剂的挥发。
在溶液处理和分析过程中，需要严格按照实验方法进行操作，确保实验结果的准确性和可靠性。
此外，在进行浸出毒性鉴别实验时，还需要注意一些实验中常见的问题和注意事项。
例如，实验操作过程中需要佩戴个人防护装备，避免有毒物质对人体造成伤害；实验设备和仪器需要经过严格的清洁和消毒处理，避免实验结果受到外界污染；实验废液需要按照规定的程序进行处理，避免对环境造成污染。
综上所述，浸出毒性鉴别标准是保障实验结果准确性和可靠性的重要环节。
正确的浸出毒性鉴别标准需要基于科学的原理和严格的实验操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
在进行浸出毒性鉴别实验时，需要严格按照标准程序进行操作，避免因为操作不当而导致实验结果的误差。
希望本文的介绍能够对浸出毒性鉴别实验有所帮助，提高实验工作的质量和效率。
工业固体废物浸出毒性及生物毒性试验 李江师哥文件
模拟酸雨对工业固体废物浸出毒性及生物毒性的影响1、实验目的和意义随着工业的不断兴起、发展，工业固体废物也随之而产生，大量堆存的工业固体废物给环境已造成了不可忽视的污染问题，对于如何科学管理和处置工业固体废物，以减轻对环境的影响成为研究的热点。
随意丢弃的工业固体废物在大气降雨的淋溶浸泡作用下，产生的淋滤液和浸泡液如不加以处理势必会影响周围的水环境和土壤。
由于贵州的能源结构以煤炭为主，煤的大量开采和燃烧，引发了酸雨天气的发生，同时贵州不同地区间的能源结构差异，又造成了不同程度的酸雨天气。
酸性环境有利于固体废物中污染物质的释放，尤以有毒有害的重金属为主，不同pH的酸雨在淋溶浸泡工业固体废物过程中，影响固体废物中污染物的释放量，从而影响着工业固体废物造成对环境的污染程度。
在研究贵州酸雨气候资料的基础上，找出贵州酸雨的pH值梯度，通过理化分析、浸出毒性试验、生物毒性试验，来研究模拟贵州不同pH值的酸雨对工业固体废物的浸出毒性及生物毒性的影响，从而为工业固体废物的科学管理提供理论依据。
2、实验方法1.HJ/T 20——1998 工业固体废物采样制样技术规范2.GB 5086.2——1997 固体废物浸出毒性浸出方法水平振荡法3.GB 5085.3——2007 危险废物鉴别标准浸出毒性鉴别4.HJ/T 298——2007 危险废物鉴别技术规范5.GB/T 13266——1991 水质物质对溞类(大型溞)急性毒性测定方法3、实验原理通过室内振荡试验，来模拟自然降雨对工业固体废物的淋溶浸泡作用，在对其振荡夜进行理化分析的基础上，进行浸出毒性鉴别和生物急性毒性试验，以研究模拟振荡夜进入水环境后对水生生物的生物毒害作用，从而对人体健康评价提供基础研究。
4、实验仪器4.1采样及前处理仪器(1) 铲子 1把；(2) 采样袋若干；(3) 样品袋若干；(4) 鄂式破碎机 1台（见附图1）；(5) 样品粉碎机 1台（见附图2）；(6) 水平振荡器 1台（见附图3）；(6) 100目及2mm分筛各1套。
生物学评价之细胞毒性试验
生物学评价之细胞毒性试验1范围细胞毒性试验是利用细胞体外培养方法来评价医疗器械或其浸提液可滤出成分中急性细胞毒性的潜在性。
2 试验项目选择（推荐）根据GB/T16886.5-1997标准中有关细胞毒性试验的要求，现推荐下面任何一种细胞毒性试验方法评价医疗器械的细胞毒性，即琼脂覆盖法，分子滤过法，生长抑制法。
3 试验条件（1）细胞株可以使用已建立的细胞株，目前我国使用较多的是L-929（小鼠结缔组织成纤维细胞）和V-79（中国地鼠肺成纤维细胞）。
（2）培养基培养基及其血清浓度的含量应能适合所选择细胞株的生长，满足细胞生长的需要。
培养基内含抗生素的量应不引起细胞毒性，以免影响材料的评价，含血清和谷氨酰胺的培养基在2~8℃贮存不能超过一周，只含谷氨酰胺不含血清的培养基在2~8℃贮存不能超过一个月，培养基的pH值在7.2~7.4之间，所有培养用液都应是无菌的。
（3）样品的制备•试验样品的制备。
试验样品应选择材料本身或其浸提液进行。
试验材料应用最终产品。
制备材料浸提液的条件往往是夸大临床应用的条件来评价样品潜在的细胞毒性，但不能引起样品严重的变化（如溶解或其化学结构改变），浸提液应在制备后的24h内使用；固体材料应至少有一个平面使其利于在细胞层或琼脂层相接触，各种试验样品在试验时均应经无菌处理。
•阴性对照。
应是已知无细胞毒性的物质。
对于合成高分子材料，高密度聚乙烯较为适宜，牙科材料则可用氧化铝陶瓷作为阴性对照。
•阳性对照。
是已知的有一定细胞毒性的物质。
推荐含锡的聚氯乙烯作为固体材料或浸提液的阳性对照。
稀释苯酚亦可作为浸提液的阳性对照。
4 试验方法1)琼脂覆盖法•目的：本试验是为了评价医疗器械科浸提成分的急性细胞毒性。
•范围：本试验方法适用于固体（粉末，纤维状，金属），液体等试验材料。
•试验样品的制备。
试验样品：将试验样品制成100mm2的圆形，要求边缘光滑整齐。
液体材料用0.1mL的样品吸收在同面积的无菌滤纸片或纤维素上。
三种排龈线对牙龈上皮细胞的毒性研究
结 果显示 ， 实验组切 口长度短 于对 照组 ， 术 中出血量少于对照组 ， 术后恢复时间
２ ． １ 两组切 口长度 、手术时间 、出血量及术后恢 复时间 比较 比较两组手术 时间 ， 差异无统计学 意义 （ Ｐ ＞ ０ ． ０ ５ ） ； 实验组 切口长度 为 （ ２ ． ４ ９± ０ ． ３ ２ ） ｅ ｍ， 术 中 出血量为 （ ２ ５ ５ ． ３ ２ ± １ ６ ． ２ ３ ） ｍ ｌ ， 术后恢 复时间为 （ ２ ． ５ ６ ±１ ． ２ ３ ） ｄ ， 与对照组相 比， 差异有统计学意义 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５） 。详见表 ｌ 。 表 １ 两组切 口长度 、手术时间 、出血量及术后恢复时间 比较 （ ±ｓ ）
三种排龈线对牙龈上皮细胞 的毒性研究
倪 莹 １ 邱 振伟 ２ 孙 霞３ 刘 健４
ｆ ｌ 潍坊护理职业学院 口腔教研室 山东省 （ ２ 潍坊市益都中心医院 泌尿外科）
ｆ ３潍 坊市 益都 中心 医院 口腔 科） ｆ ４山东 日照市 中医院 口腔科
２ ６ １ ０ ０ ０ ）
２ ７ ６ ８ ０ ０ ）
摘要 ：背景 ：近年来 ，国内外学者研究热点主要集 中在排龈药物的排龈效果 ，以及排龈药物对牙龈成纤维细胞毒性 的研 究，而对 牙龈上 皮细胞的毒性研 究较 少 目 的 ：评价三种排龈线对人 牙龈上皮细胞的毒性作用 ，为指导临床选择理想的排 龈线提供理论依 据。方法：三种排龈 线 （ 含 肾土腺素排龈线 、含硫酸铝排龈线 、不舍 药 排龈线 ） 浸透在含 １ ０ ％胎牛血清的 Ｄ ＭＥ Ｍ中 ２ ４小时 ，分别作用于体外培养的牙龈上皮细胞 ，阴性 对照组 为含 １ ０ ％胎牛血清的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ， Ｍ Ｔ Ｔ比色测 定细胞增殖 。结 果与结论 ： ＭＴ ｒ结果显示， 硫酸铝排 龈线和不合 药排 龈线浸提 液与对照组 比较无显著差异（ Ｐ＞ ０ ． ５） ０ ， 肾上腺 素排龈线浸提液与对照组 比较差异有显著性意义（ Ｐ ＜０ ． ０ ５ ） 。 由此得 出肾上腺素排龈线毒性最大 ，不舍药排龈线也具有一定的细胞毒性。
细胞毒实验
要对结果进行分析，写出影响结果的因素，及 注意事项。
SI
50 40 30 20 10
0 100:1
Excel 作 图
NK杀伤实验
50:1 E：T
25:1
检测方法
1.1.1 alamarBlue一步荧光测定法 alamarBlue为活细胞代谢指示剂，易溶于水，进入细胞后经线粒体
酶促还原产生荧光及颜色变化，可用以定量。本法与51Cr释放法纺织 厂较有以下特点：①特异性相当但灵敏度更高，重复性好，组内及组 间差异很小。②使用方便，无需预先标记靶细胞及离心和洗涤步骤， 适用于大批量样品的高准确性自动测定。③alamarBlue的使用浓度不 影响细胞正常代谢及基因表达，可在无菌条件下测定后继续培养扩增 细胞，有利于对培养细胞的连续监测及深入研究。④还可测定淋巴细 胞增殖或化学物质的细胞毒性及细胞凋亡。⑤多种粘附或非粘附细胞 系、细菌、真菌等可用作靶细胞，所需效应细胞数较少（3×105/孔 即可）。⑥含胎牛血清（FCS）及酚红的培养液也不干扰测定结果
抗原与抗体结合
+ 补体
台盼蓝染液
抗体依赖性细胞介导细胞毒实验 （ADCC）：
抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用是指表达IgGFc受体的 NK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等，通过与已结合在病毒感 染细胞和肿瘤细胞等靶细胞表面的IgG抗体的Fc段结合，而杀 伤这些靶细胞的作用，是不同效应细胞群介导的杀伤性效应机 制之一。
细胞毒性实验
细胞毒性实验细胞毒性实验是一种常见的生物学实验方法，用于评估各种物质对细胞的毒性和影响。
通过细胞毒性实验可以研究药物的安全性、环境污染物的危害性以及化学物质的毒理学特性。
本文将介绍细胞毒性实验的基本原理、常用方法以及结果的解读。
基本原理细胞毒性实验基于细胞生物学的基本原理，利用细胞在体外的培养条件下对外界刺激的反应来评估物质的毒性。
在细胞毒性实验中，通常选用肿瘤细胞株或非肿瘤细胞株作为实验对象，通过给细胞暴露于不同浓度的待测物质，观察其对细胞形态、生长、代谢等方面的影响，从而判断其毒性程度。
常用方法MTT法MTT法是一种常用的细胞毒性实验方法，通过将细胞与MTT染料反应产生紫色的甲苯胺酚盐，用来反映细胞的代谢活性，从而评估细胞的存活率。
该方法操作简单、灵敏度高，常用于筛选化合物的毒性作用。
LDH释放法LDH释放法是测定细胞膜通透性的一种方法，通过测定培养基中LDH的释放量来评估细胞的损伤程度。
在细胞受到毒性物质的作用后，细胞膜破裂导致LDH的释放，因此LDH释放量的增加可以反映细胞膜的破损情况。
结果解读在细胞毒性实验中，通常会得到一系列不同浓度下的实验数据，如细胞存活率、LDH释放量等。
通过对这些数据进行统计分析和比较，可以得出物质对细胞毒性的评估结果。
一般情况下，细胞存活率越低，LDH释放量越高，说明物质对细胞的毒性越大。
细胞毒性实验是评估化合物毒性的重要手段，通过该实验可以为药物研发、环境保护和毒理学研究提供重要参考。
科学家们不断改进细胞毒性实验的方法，提高其准确性和灵敏度，希望能够为人类健康和环境保护作出更大的贡献。
浸有不同药物的排龈线对牙龈止血效果的临床观察
浸有不同药物的排龈线对牙龈止血效果的临床观察
魏平杰
【期刊名称】《中国处方药》
【年(卷),期】2022(20)11
【摘要】目的探讨氨基己酸注射液对牙龈的止血效果,为临床排龈止血药物的应用提供参考。
方法选择行前牙全瓷冠修复患者的150颗患牙为研究对象,随机分成A、B、C三组,分别使用浸有0.1%盐酸肾上腺素注射液、10%氨基己酸注射液、0.9%生理盐水的排龈线进行排龈处理。
排龈10 min后,口腔数字化扫描预备体制取光
学印模,查看预备体肩台清晰程度。
取出排龈线后在放大镜下观察龈沟出血情况,以
评价不同止血药物的排龈止血效果。
结果与B组、C组相比,A组排龈止血效果更
优(P<0.05),和C组相比,A组、B组印模满意度更佳(P<0.05)。
结论氨基己酸注射液对龈沟出血有止血效果,但效果不如肾上腺素注射液理想。
【总页数】3页(P111-113)
【作者】魏平杰
【作者单位】新疆医科大学第七附属医院口腔科
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.不同排龈药物的排龈效果观察
2.含不同药物排龈线引起牙龈炎症的比较研究
3.含不同排龈药物排龈线排龈效果的比较研究
4.3种排龈线不同时间浸提液的细胞毒性研究
5.不同排龈药物对牙龈炎患者的影响及排龈效果对比探讨
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灵芝浸提液的遗传毒性研究
灵芝浸提液的遗传毒性研究
孟国良
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】1997(019)004
【摘要】灵芝(Ganoderma lucidum)提取物对神经衰弱、失眠、冠心病、心绞痛、慢性支气管炎、病毒性肝炎等有显著疗效,并有强烈抑制肿瘤、增强人体免疫、防
衰老等功效。
目前多用其子实体制成水煎剂、酊剂、糖浆、口服液、片、丸、胶囊以及补酒和饮料用于临床、保健和日常生活。
有关灵芝的生理毒性研究,报道较多,
而灵芝对哺乳动物,尤其是对人体是否有遗传毒性,尚未见报道。
为此,我们对市售灵芝进行了成年小鼠、胎鼠及其孕鼠的微核试验。
【总页数】1页(P7)
【作者】孟国良
【作者单位】河南郑州牧业工程高等专科学校
【正文语种】中文
【中图分类】R285.6
【相关文献】
1.可降解聚乙醇酸纤维材料浸提液的遗传毒性研究 [J], 韩倩倩;黄薇;宋谊萍;王召旭;李彦红;王春仁;黄清泉
2.五味子水浸提液对SD大鼠胚胎和胎仔的发育毒性研究 [J], 张旻;刘晓萌;宋捷;胡燕萍;王秀文;李波
3.3种排龈线不同时间浸提液的细胞毒性研究 [J], 倪莹;邱振伟;孙霞;杨敏;杨美静
4.无瓣海桑果叶及其浸提液的生物急性毒性研究 [J], 朱宏伟;郑松发;彭辉武;武锋
5.灵芝水浸提液超滤条件的研究 [J], 魏雪生;张志军;李淑芳;杨丽维;王昌禄
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排龈药物对体外培养人牙龈成纤维细胞的毒性比较
排龈药物对体外培养人牙龈成纤维细胞的毒性比较刘健;张晓明;郝鹏杰;惠敏;于焕英【期刊名称】《华西口腔医学杂志》【年(卷),期】2009(27)2【摘要】目的评价6种常用的排龈药物对人牙龈成纤维细胞(HGF)毒性作用的大小,以指导临床选择最佳排龈药物.方法将6种不同体积分数的排龈药物(20%硫酸铝、5%硫酸铝、15.5%硫酸铁、13.3%硫酸铁、0.1%盐酸肾上腺素、0.01%盐酸肾上腺素)分别作用于体外培养的JHGF,MTT比色法测定细胞的损伤与增殖,透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果所有实验药物均能引起细胞的直接损伤与增殖抑制,细胞毒性由小到大分别是0.01%盐酸肾上腺素、0.1%盐酸肾上腺素、5%硫酸铝、20%硫酸铝、硫酸铁,2种体积分数的硫酸铁毒性比较差异无统计学意义(P>0.01).透射电镜显示2种体积分数的盐酸肾上腺素及5%硫酸铝可引起细胞器数最减少,线粒体及内质网肿胀;20%硫酸铝造成细胞水肿明显,细胞核和染色质分布不均匀;硫酸铁可导致细胞变性.结论 0.01%盐酸肾上腺素细胞毒性作用最小,硫酸铁毒性最大.【总页数】4页(P202-205)【作者】刘健;张晓明;郝鹏杰;惠敏;于焕英【作者单位】滨州医学院,口腔学院,山东,滨州,256603;滨州医学院,口腔学院,山东,滨州,256603;烟台市口腔医院,口腔修复科,山东,烟台,264001;滨州医学院,口腔学院,山东,滨州,256603;滨州医学院,口腔学院,山东,滨州,256603【正文语种】中文【中图分类】R780.2【相关文献】1.含不同排龈药物排龈线排龈效果的比较研究 [J], 孙学武;孙桂兰;肖丽静2.排龈时间与药物对牙龈成纤维细胞的毒性比较研究 [J], 张晓明;惠敏;刘健3.临床常用排龈药物毒性比较 [J], 刘健;张晓明4.三种排龈线对体外培养人牙龈成纤维细胞毒性的比较 [J], 倪莹;张晓明;惠敏;刘健5.三种排龈线对体外培养人牙龈成纤维细胞毒性的比较 [J], 倪莹;张晓明;惠敏;刘健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
排龈药物对牙周组织的影响
排龈药物对牙周组织的影响倪莹【摘要】@@ 目前口腔固定义齿修复过程中,排龈已成为获取准确清晰印模的必要条件.在排龈的过程中不仅要注重排龈材料的排龈效果,更应关注排龈材料的生物相容性.常用的排龈方法有:机械法、化学法、外科法、联合法等[1].机械化学法是临床上最为常用的排龈方法,它是使用不同类型的排龈线如编织状排龈线、双股搓捻排龈线等,经过浸泡不同类型的排龈药物制成,既对牙龈进行机械分离又可控制牙龈出血和组织液渗出,目前对该方法的研究主要是排龈药物对牙周组织的影响.【期刊名称】《滨州医学院学报》【年(卷),期】2012(035)002【总页数】3页(P137-139)【关键词】排龈药物;牙龈成纤维细胞;牙周组织;细胞毒性【作者】倪莹【作者单位】滨州医学院口腔学院口腔修复学教研室,滨州,256603【正文语种】中文【中图分类】R783目前口腔固定义齿修复过程中，排龈已成为获取准确清晰印模的必要条件。
在排龈的过程中不仅要注重排龈材料的排龈效果，更应关注排龈材料的生物相容性。
常用的排龈方法有:机械法、化学法、外科法、联合法等［1］。
机械化学法是临床上最为常用的排龈方法，它是使用不同类型的排龈线如编织状排龈线、双股搓捻排龈线等，经过浸泡不同类型的排龈药物制成，既对牙龈进行机械分离又可控制牙龈出血和组织液渗出，目前对该方法的研究主要是排龈药物对牙周组织的影响。
1 排龈术的临床应用排龈术在临床上主要用于四种情况:一是预备肩台前排龈;二是取模前排龈;三是粘结前排龈;四是牙龈缘处龋坏修复前排龈。
预备肩台前排龈可以减少在预备龈下肩台时对邻近软组织的损伤及出血，为龈下牙体预备提供良好的空间和视野，由于游离龈组织被压缩或水平向移位，减少手术切割器械对牙龈沟内上皮及结合上皮的损伤。
取模前排龈能够准确、清晰地暴露牙体预备后牙颈部软、硬组织的界限，为制作代型及精确修复提供条件。
粘结前排龈有利于提高粘结效果，去除多余的粘结剂，预防边缘微渗漏及牙龈炎的发生［2］。
几种儿童牙膏体外细胞毒性研究
几种儿童牙膏体外细胞毒性研究朱洲海;刘凤至;黄海涛;张涛;米其利;管莹;夭建华【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2015(045)005【摘要】使用体外培养的人口腔黏膜成纤维细胞,通过MTT法,测定了几种市售普通儿童牙膏和可吞咽儿童牙膏浸提液的细胞相对增殖率(RGR),并进行细胞毒性分级,同时与成人牙膏的细胞毒性进行比较,从而反映这些牙膏对口腔黏膜的影响.结果表明:可吞咽儿童牙膏和普通儿童牙膏的细胞毒性相对较小;成人牙膏细胞毒性较大,与儿童牙膏比较细胞相对增殖率有显著性差异(P＜0.05),可能会对儿童的口腔黏膜造成刺激.【总页数】3页(P282-284)【作者】朱洲海;刘凤至;黄海涛;张涛;米其利;管莹;夭建华【作者单位】云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明 650106;云南中医学院,云南昆明 650500;云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,云南昆明 650106【正文语种】中文【中图分类】TQ658.4+1【相关文献】1.几种牙膏对早期釉质龋再矿化效果的体外研究 [J], 黄雅静;李月恒;黄锐;钱英子;段艳霞;周智2.3种无氟儿童牙膏对乳牙早期釉质龋再矿化作用的体外研究 [J], 陈俊宇;杜倩;刘琰;陆跃智;李晓箐3.斑蝥酸钠对人正常肝细胞LO2的体外细胞毒性研究 [J], 严晓莺;陈巨鹏;徐德国;赵凤鸣;许冬青;周韬;王明艳4.脱细胞兔髓核支架的形态学及体外细胞毒性研究 [J], 曹纬;吕海;周初松5.钒对睾丸支持细胞／生精细胞的体外毒性研究 [J], 李宏霞;杨在昌;等因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。