精制与粗制卵黄抗体的优劣势分析
鸭肝_小鹅瘟_鸭瘟_SGL_Mar18_2011
4、鸭瘟灭活疫苗
项目进展情况
本项目由洛阳普莱柯生物工程有限公司与中 国兽医药品监察所合作，中监所的范书才研究员 作为项目主持人，目前已完成新产品的申报，产 品即将上市，将会填补国内市场无鸭瘟灭活苗国 标产品的历史。
产品特点
• 1、本产品采用鸭瘟病毒AV1221株生产，该毒 株为鸭胚适应毒，免疫原性良好，使用的鸭胚来 源于管理良好的种鸭群，无鸭瘟流行史，且未注 射过鸭瘟疫苗，获得的病毒液病毒含量高，产品 质量稳定。 • 2、使用的佐剂为经欧盟批准的进口注射级白油 MARCOL 52，使产品的免疫效力更高，副反应 更小。
本项目由普莱柯生物工程股份有限公 司独立自主研发的产品，新产品已于2009 年上市。
2.5、毒株的来源、特点
来源：使用的毒株是由某鸭场临床表现为 雏鸭死亡率高，剖检肝脏肿大出血的病死雏鸭 肝脏中分离到的流行强毒株，通过连续在SPF 鸡胚传代致弱而得到的。 特点：筛选出的毒株免疫原性良好，通过 筛选的免疫程序，可获得中和效价在log214以 上的高免蛋（有效保护为log28），对于需要 将蛋黄做高倍稀释的特殊生产工艺极为有利。
（1） 蛋黄内含有一些可以垂直传播的病原，如霉形体、 沙门氏菌、腺病毒及呼肠孤病毒等，以及蛋壳表面污 染的细菌、病毒，由于生产工艺的限制，传统蛋黄抗 体的制备方法无法进行有效的消毒和灭活，大大增加 了人为传毒的风险。 （2）高浓度蛋黄液为污染菌繁殖提供了有利的条件。 （3）需要-20℃贮存，造成贮运不便，成本较高。 （4）因其粘度大，使用极不方便，易堵塞注射器。 （5）未经任何提纯工艺处理，其应激反应强烈，安全 性差。 （6）多为靠经验制作，制品有效性无法保证。
3.6、生产工艺的特点
• （1） 整个工艺过程严格采用无菌操作，避 免病原菌的污染。 • （2） 采用更先进科学的提纯工艺，获得了 纯度更高的产品。 • （3） 贯穿整个工艺过程的PC五级灭活技 术，可保证去除随蛋传播的所有病原菌， 且不影响抗体的生物学效应。
卵黄抗体的特性及其应用研究
卵黄抗体的特性及其应用研究作者：盛雅洁肖春兰赵丽娟周正宇来源：《家禽科学》2020年第07期摘要：卵黄抗体具有化学性质稳定，生产制备过程简单、经济，产量高，适合大规模生产等优势。
在动物疾病防治、医药卫生等领域具有广泛的应用，随着研究的不断深入，卵黄抗体的应用前景会更加广阔。
关键词：卵黄抗体;优势;应用中图分类号：S852.4 文献标识码：A 文章编号：1673-1085（2020）7-0056-03卵黄抗体是一种存在于卵黄中的免疫球蛋白，目前研究较多的是鸡卵黄抗体。
当禽类机体受到外来抗原刺激后，法氏囊内的B细胞分化成为浆细胞，分泌特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体在卵黄中逐渐蓄积，形成卵黄抗体[1]。
1 卵黄抗体的生物学特性及理化性质卵黄抗体是经血清中免疫球蛋白转移至卵黄中积累的，因此其分子结构和性质与哺乳动物的免疫球蛋白结构相似，但是又存在一些差异[2]。
卵黄抗体大部分分子结构与哺乳动物的免疫球蛋白IgG类似，均包括2条轻链和2条重链，中间由二硫键连接。
与IgG一样，Fc片段是卵黄抗体的抗原结合部位，但是卵黄抗体的Fc片段上有2条糖侧链，而IgG只有一条。
并且卵黄抗体与IgG在Fc片段上的氨基酸组成也具有较大的差异，卵黄抗体不能够与蛋白A或蛋白G结合，不能与人类风湿因子结合，也不能激活补体，因而应用于哺乳动物后很少引起过敏反应[3]。
卵黄抗体具有较强的化学稳定性，变性温度在70℃以上，能耐巴氏杀菌，在常温或低温冷藏条件下，抗体的活性能够保留几个月甚至几年的时间。
同时，也有较强的耐酸碱的能力，其稳定的pH范围很大，具有抗胃蛋白酶和胰蛋白酶降解的能力，这为口服被动免疫治疗提供了条件[4]。
2 卵黄抗体优势与产生于哺乳动物血清中抗体相比，卵黄抗体具有许多独特的优点：①制备简单、无需采血、只需收集免疫蛋鸡所产下的鸡蛋即可，避免了常规的采血行为，对实验动物无伤害，符合动物福利要求;②产量大，使用少量的免疫原免疫蛋鸡即可获得大量特异性的卵黄抗体;③抗体制备过程简单，不需要特殊的仪器设备，成本低，一般实验室均可满足;④不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或Fc受体结合，避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳性结果。
不同方法提取卵黄抗体效果的比较
不同方法提取卵黄抗体效果的比较吴博;王爽;樊兴冬;刘宇;李丹;史同瑞【摘要】In order to optimize the extraction process of IgY and provide technical reference for industrial production, this experiment not only selected several appropriate methods including the water dilution method, the octanoic acid method, the HAc - sodium acetate method, the phenol precipitation method and the sodium alginate method, but also compared the extraction process, production costs, the extract - amount and antibody titer of egg yolk antibody of these methods. The results showed that the octanoic acid method had the highest rate of liquid recovery which reached 171% and the highest protein concentration which was 6. 6 mg/mL. The highest agglutination titre of extracting IgY was 1 ： 128 by the octanoic acid method and the sodium alginate method. These results demonstrated that the octanoic acid method was most appropriate for IgY extraction.%为了优化卵黄抗体提取工艺以及产业化生产提供技术参考，从众多方法中初步筛选了较为适宜的水稀释法、辛酸法、乙酸-乙酸钠法、酚沉淀法和海藻酸钠法，并比较了5种方法的提取工艺、生产成本、卵黄抗体提取量及其效价。
卵黄抗体可行性研究报告
卵黄抗体可行性研究报告一、研究背景卵黄抗体是动物免疫学中的一种重要抗体，它可以被用来检测特定的抗原，也可以用来治疗一些疾病。
随着科学技术的进步，人们对卵黄抗体的研究也越来越深入，目前已经在一些医学领域得到了广泛应用。
在这种背景下，对卵黄抗体的可行性进行深入研究，将有助于促进其在临床应用中的进一步发展。
二、研究目的本次研究旨在探讨卵黄抗体在临床应用中的可行性，包括其在治疗和诊断领域的应用潜力，以及相关技术和生产工艺的研究现状。
通过该研究，将为卵黄抗体的进一步应用提供可靠的科学依据。
三、研究内容1. 卵黄抗体的生物学特性和应用潜力通过文献调研，归纳总结卵黄抗体的生物学特性，包括其来源、结构、功能等方面的信息。
同时，分析卵黄抗体在治疗和诊断领域的应用潜力，探讨其在不同疾病治疗和疫苗生产中的优势和局限性。
2. 卵黄抗体生产技术的研究现状对卵黄抗体的生产技术进行详细的调研和整理，包括克隆技术、重组技术、基因工程技术等方面的研究进展。
重点关注新技术在提高卵黄抗体生产效率、降低生产成本等方面的应用情况。
3. 卵黄抗体在临床应用中的案例分析通过查阅相关文献和临床报道，总结和分析卵黄抗体在临床应用中的成功案例，包括其在治疗癌症、传染病和疫苗生产中的应用情况。
通过案例分析，评估卵黄抗体在临床应用中的可行性和前景。
四、研究方法1. 文献调研法通过检索相关数据库和文献，收集和整理卵黄抗体的生物学特性、生产技术和临床应用方面的资料，并进行系统综合分析。
2. 实验研究法在对卵黄抗体的生物学特性和生产技术进行综合分析的基础上，开展相关实验研究，验证其在临床应用中的可行性。
3. 案例分析法通过查阅临床案例和相关文献，对卵黄抗体在临床应用中的效果进行案例分析，以验证其在临床应用中的可行性。
五、预期成果通过本次研究，预期取得以下成果：1. 归纳总结卵黄抗体的生物学特性和应用潜力，为其在临床应用中的进一步开发提供科学依据；2. 分析卵黄抗体生产技术的研究现状，为技术改进和提升生产效率提供参考；3. 总结并分析卵黄抗体在临床应用中的成功案例，评估其在不同领域的可行性和前景。
抗生素替代品 卵黄抗体
——卵黄抗体
卵黄抗体的制备
卵黄抗体的作用机理
卵黄抗体的优缺点
卵黄抗体在养殖业中的应用 小结
抗生素替代品的概述
在传统的农业技术中，抗生素是保持动物 健康和提高饲料效率最具成本效益的方法。但 是抗生素的长期使用会导致其在畜产品中的残 留及细菌耐药性的产生（Torey et al.,2012）。所 以寻找既有效又有利于食品安全的新型抗生素 替代品成为当务之急。
（李燕荣等，2014）
卵黄抗体的作用机理
(wilmar et al.,2010)
卵黄抗体的优点
根据卵黄抗体的制备过程以及作用机理， 将卵黄抗体作为抗生素替代品添加到动物日粮 中是一个很好的选择。卵黄抗体不仅有利于预 防许多动物疫病的发生，提高动物的生产性能， 而且在疾病治疗和疾病诊断方面也发挥着很大 的作用。
卵黄抗体的优点
与抗生素相比，卵黄抗体是通过特异性粘附于 特定的病原菌而发挥作用，所以对肠道正常的 菌群无副作用，也可以 避免产生药物残留和耐 药性。
卵黄抗体的优点
从动物福利的方面考虑，从哺乳动物的血清中获得抗体 需要对动物进行长期的采血，这种做法对动物的伤害很 大。而卵黄抗体的收集是非侵入式的，只要每天收集鸡 蛋就可以。 从获得抗体的数量方面考虑，从哺乳动物的血清中获得
卵黄抗体的作用机理
特定病原菌的卵黄抗体能够直接黏附于病原菌的细胞壁上， 破坏病原菌细胞壁的完整性，从而直接抑制病原菌的生长 或者抑制其活性； 卵黄抗体也可以粘附于细菌的菌毛上，使其不能够粘附于 肠道黏膜的上皮细胞，最终使细菌不能增殖和分泌毒素； 有些卵黄抗体能够在肠道消化酶的作用下，降解为可结合 且易于被肠道吸收的片段，这些片段含有抗体的可变小肽 (Fab)部分，其进入血液后能与特定的病原菌粘附因子结合， 使病原菌不能够粘附易感细胞而失去致病性。
卵黄抗体IgY在猪生产中的应用
卵黄抗体IgY在猪生产中的应用摘要：卵黄抗体(Yolk Immunoglobulin，IgY)是蛋鸡受特定抗原刺激后体内会产生特异性并被转移和贮存在卵黄中的免疫球蛋白。
用鸡卵黄大量生产和制备多克隆抗体是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。
IgY可作为替代抗生素的新型绿色饲料添加剂。
本文就免疫鸡卵黄抗体在猪生产中的应用作一综述。
关键词卵黄抗体；猪生产；应用卵黄抗体作为一种新型绿色添加剂有其自身的优势：①卵黄抗体产量高，Anders(1993)推算认为一只蛋鸡每周的抗体产量相当于9～10只小白兔的抗体产量；②鸡蛋的生产成本较低，收集和提纯方便，大规模提取抗体的技术已经成熟；③产生有效免疫反应所需抗原量小；④IgY的化学性质稳定，具有一定的耐热、耐酸、耐碱及耐高渗性能，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力；⑤由于种系发生距离相差很大，禽类IgY与哺乳动物免疫球蛋白之间不会发生交叉血清学反应；⑥不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或Fc受体相结合，避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳性结果；⑦对肠道正常菌群无副作用，也不存在抗药性和药物残留问题。
IgY 本身是一种优质的蛋白源，有促生长作用。
1．卵黄抗体(IgY)1.1 IgY抗体结构IgY大分子的结构与哺乳动物免疫球蛋白类似。
Warr等(1995)[1]通过分子结构分析认为IgY 是哺乳动物体内IgG 和IgM 的进化前体。
IgY 中Cυ3和Cυ4区与哺乳动物IgG 的Cγ2和Cγ3具有同源性；Cυ2是IgY的枢纽区，而它在IgY 中没有得到充分进化。
IgY中这种不发达的枢纽区造成了Fab部分的低活性，而这进而可能是IgG 与IgY某些差异的原因。
与IgG一样，IgY的Fc片断是绝大部分生物受动器功能的作用部位。
IgY-Fc部分包括2条碳氢链，而IgG 只有一条。
IgG在重链上含有3个功能域而IgY的重链含有4个功能域，而且IgY缺少铰链区。
1.2 IgY进入卵黄的机制禽类的免疫系统包括细胞免疫和体液免疫，分别受胸腺和法氏囊的控制。
卵黄抗体的研究进展
文献综述卵黄抗体的研究进展郑译西南大学荣昌校区动物医学系，重庆，荣昌402460摘要：抗体（免疫球蛋白，Ig）是指机体受到外来抗原物质刺激后，B细胞识别抗原后活化、增殖分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的能与相应抗原特异性识别和结合的一类球蛋白。
关键词：卵黄抗体；免疫程序；研究进展卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk，IgY）经特定抗原免疫后的母鸡可产生相应的特异性抗体，有研究证实[1]，产蛋鸡的卵黄对抗体有浓集作用，使其不断储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体。
1 卵黄抗体的概念卵黄抗体，英文名（vitelline antibody）定义：从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。
禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度IgG，其对某些禽类疫病具有明显治疗和紧急预防作用。
卵黄抗体是用特定抗原多次免疫产蛋母鸡，使机体产生相应的特异性抗体，并转移、贮存在卵黄中，经提取纯化的免疫球蛋白卵黄抗体（Egg yolk antibodies eyAb），也称卵黄免疫球蛋白(Egg yolkimmunogbhin，IgY)。
科学家在鸟类的血液循环壁发现三种免疫球蛋白(IgG、IgA 与IgM)，母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。
IgG：免疫球蛋白G (Immunoglobulin G，IgG)的缩写。
IgG是血清主要的抗体成分，约占血清Ig的75%。
其中40～50％分布于血清中，其余分布在组织中。
IGA：一种免疫球蛋白。
异常情况下，在肾脏受到各种炎症反应刺激等因素下，导致IGA过度沉积在肾脏肾小球系膜区等部位，与抗原一起形成免疫复合物，造成肾脏结构病理损害，引起的一系列临床症状，称为IGA肾病。
IGM：免疫球蛋白M(Immunoglobulin M，IgM)的缩写。
卵黄抗体3 种提取方法比较
现代农业科技2022年第8期动物科学摘要本试验主要对辛酸法、水稀释法、泊洛沙姆法3种不同提取抗体方法进行了比较,通过观察抗体的物理性状、检测提取液蛋白含量、使用血凝试验与血凝抑制试验检测抗体效价来选择卵黄抗体的最佳方法。
结果表明:3种不同提取方法的蛋白含量以泊洛沙姆法最高、辛酸法最低;新城疫和禽流感效价以水稀释法最高、辛酸法最低;抗体溶液体积以水稀释法最高、泊洛沙姆法最低。
综合比较试验结果,最终确定水稀释法效果最优。
采用该方法提取的卵黄抗体效价最高、易操作,可实现车间大规模生产。
关键词卵黄抗体;提取方法;抗体效价中图分类号S852.4文献标识码A 文章编号1007-5739(2022)08-0172-03DOI :10.3969/j.issn.1007-5739.2022.08.056开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Comparison of Three Extraction Methods of Egg Yolk AntibodyWANG Yuxia XU Fangfang LI Liangliang LI Fenghua *(Shandong Xunda Kang Veterinary Medicine Co.,Ltd.,Ji ′nan Shandong 250000)Abstract The experiment mainly compared three different extraction methods of antibodies:caprylic acid method,water dilution method and poloxamer method.By observing the physical properties of the antibody,detecting the protein content of the extract,and using the hemagglutination test and the hemagglutination inhibition test to detect the antibody titer,select the best process of the yolk antibody.The results showed that among the three different extraction methods,the protein content was the highest in poloxamer method and the lowest in caprylic acid method;the titers of newcastle disease and avian influenza were the highest in water dilution method and the lowest in caprylic acid method;the volume of antibody solution was the highest in water dilution method and the lowest in poloxamer method.The experimental results were comprehensively compared,and it was finally determined that water dilution method had the best effect.When using this method to extract yolk antibody,the titer was the highest,and it was easy to operate,it could achieve large-scale production workshop.Keywords egg yolk antibody;extraction method;titer of antibody卵黄抗体3种提取方法比较王玉霞许方方李梁梁李凤华*(山东迅达康兽药有限公司,山东济南250000)随着社会经济的迅速发展,禽畜业规模化程度越来越高,抗生素滥用也越来越频繁,导致细菌耐药性及抗生素残留问题突出[1]。
卵黄抗体的制备实验报告
卵黄抗体的制备实验报告
实验目的：
本实验旨在制备出卵黄抗体，为后续的生物学研究提供基础。
实验原理：
卵黄抗体是指针对卵黄中特定抗原的抗体。
制备卵黄抗体的过程中，首先需要将卵黄分离出来，并进行纯化处理。
接着将纯化后的卵黄制成免疫原，并将其注射到动物体内，使其产生相应的抗体。
最后，用相应的方法将卵黄抗体分离出来。
实验步骤：
1.卵黄的分离与纯化
将新鲜鸡蛋打开，分离出卵黄，并将其放入离心管中。
然后，用生理盐水将卵黄稀释，离心，去除卵黄中的杂质。
最后，用离心法或沉淀法将卵黄纯化。
2.卵黄免疫原的制备
将纯化后的卵黄用PBS缓冲液稀释至适当浓度，加入适量的胶体铝溶液并搅拌混合，静置一段时间，使胶体铝与卵黄充分结合。
最后，用PBS缓冲液将其稀释至适当浓度，以备注射。
3.动物的免疫注射
将制备好的卵黄免疫原注射到小鼠或兔子等适宜的动物体内。
注射后，需要进行多次免疫，以增强动物产生抗体的能力。
4.卵黄抗体的分离
将免疫动物的血清收集，离心去除红细胞，得到血清。
接着，用卵黄抗原进行免疫沉淀或免疫吸附，分离出卵黄抗体。
实验结果：
经过以上步骤，我们成功制备出了卵黄抗体，并用酶联免疫吸附实验对其进行了检测。
检测结果显示，卵黄抗体的纯度和活性均较高，可以用于后续的生物学研究。
实验结论：
本实验成功制备出了高纯度、高活性的卵黄抗体，为后续的生物学研究提供了基础。
同时，本实验也展示了免疫学的基本原理和操作方法，对我们深入了解生物学研究具有重要意义。
卵黄抗体在水产中的应用【医学模板】
卵黄抗体在水产上的使用状况卵黄抗体又称卵黄免疫球蛋白（IgY），一般以鸡作为供体，经一种或多种特定抗原免疫诱导后在卵黄中蓄积，机体所产生的特异性抗体，具有类似哺乳动物IgG的免疫活性，可有效防治特定疾病。
近年来，在畜禽疾病的诊断与防治方面卵黄抗体的运用已非常广泛，可将其作为抗生素替代品或饲料添加剂等进行使用，在动物养殖业中具有广阔的应用前景。
目前，用卵黄抗体防治水产动物疾病的研究报道较少，但因其具有疗效确切、使用安全、无毒副作用、制备工艺简单、生产成本低等优点，使得以其防治水产动物疾病逐渐受到重视。
1.IgY的发展以及研究状况1893年，著名德国医生莱比锡通过免疫蛋鸡的试验发现其所产鸡蛋的蛋黄中具有能中和免疫原的特异性蛋白质，即卵黄抗体IgY。
自此，各国学者相继对其分子结构、理化性质、制备工艺、检测方法及应用等领域进行了广泛而深入的研究。
20世纪80年代以来，归因于商品试剂的推广，IgY抗体开始进入商品应用。
1996年，IgY抗体的生产和应用被定义为IgY技术。
如今，它己是一个世界性的标准化技术。
1996年，欧洲实验方法替换确认中心推荐使用IgY来代替哺乳动物IgG，以减少由于抗体采集而造成对动物的伤害。
1999年，基于对动物权益的保护，IgY技术被瑞士联邦政府兽医办公室接受为可行的替代办法。
美国的FDA己将特异性卵黄免疫球蛋白视为替代抗生素的首要候选药物，日本政府投入巨资扶持“禽源抗体产业”。
美国、韩国、台湾等发达国家和地区利用卵黄抗体成功研制了各种功能性食品、饲料添加剂和防制动物疫病的生物制品。
目前，在人类医学、动物医学、动物科学和其他诸多生命科学领域，有关卵黄抗体产品的研发与应用呈逐年上升趋势，尤其是卵黄抗体代替抗生素在动物生产中的应用被广泛认可。
2.IgY的理化性质IgY是一种7S免疫球蛋白，分子量约180kD，由两条重链(分子量67-70kDa)和两条轻链(分子量22-30kDa)组成，含氮量为14.8%。
卵黄抗体的特性及在水禽疾病防治上的应用
基金 项 目： 山东省现 代农 业 产业技 术 体 系家禽创 新
团 队 项 目（ Ｓ Ｄ Ａ Ｉ Ｔ 一 １ １ — １ ６ ） 。
作 者 简介 ： 于新） Ｅ（ １ ９ ８ ３ 一 ） ， 男， 山 东菏 泽人 ， 助 理 研 究 员， 硕士 ， 主要 从事 动物传 染病诊 断技术研 究 。
际状 况 ， 具 有 非 常 广 阔 的应 用 前 景 。 本 文 综 述 了
ｇ Ｙ疏水性更强 ，这与 Ｉ ｇ Ｙ存在于脂类含量较高 卵黄 内的环境 中是相对应 的。Ｉ ｇ Ｙ等 电点在 ｐ Ｈ
值 ５ ． ７ — ７ ． ６之 间 。
１ ． ２ 卵黄抗 体 的优 势
１ ． ２ ． １ 产量高、 成 本低 、 便 于规 模 化 生 产 卵 黄
死 亡率高达 １ ０ ０ ％， 临 床 表 现 为下 痢 、 腿瘫痪 、 精
后， 卵黄抗体 的活性才会发 生 明显 的下降 。Ｉ ｇ Ｙ 在ｐ Ｈ值 ４ ～ ｌ ｌ 时Ｉ ｇ Ｙ能保持稳定 ，活性 几乎不
抗 体 。 卵黄 抗 体 具有 制 作 简单 方便 、 性质稳定 、 产量高， 成 本低 等 多种 优 点 ， 在 动 物 的 疾 病诊 断、 治疗、 预 防等 方 面有 着广 泛的 应 用。本 文就 卵黄 抗体 的 特性 及在 水 禽疾病 防治 中的 应 用情
况进行 综 述 。
关 键词 ： 卵黄 抗 体 ； 水禽 疾病 ； 防治 ； 应用
卵黄抗体 的特性及在 水禽疾病 防治中的应用研
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ６ —１ ０ — ２ ７
抗 体 是从 鸡 蛋 中提 取 的 ，一 枚 蛋 可 获 得 ５ ０ ～ １ ０ ０ ｍ ｇ Ｉ ｇ Ｙ， 其中２ ％～ １ ０ ％为特异 性抗 体 ， 平均 １ 只鸡每年可得到 ２ ２ ５ ０ ０ ｍ ｇ 抗体 ，产量 比较高 。 １ 只蛋 鸡 每周 的抗 体产 量相 当于 ９ ～ １ ０只鸭子 的抗体产量 。 而且饲养母鸡也 比较方便 ， 其所产 的蛋具有均一 性好 、收集方便 快捷 以及价格价 格便宜等优点 【 ，卵黄 中没有其他 的免疫球蛋
不同除脂条件对卵黄液除脂率及卵黄抗体纯度的影响
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄｓ：Ｉ ｇ Ｙ； ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ａｔ ｆ ｒ ｅ ｍｏ ｖ ｅ ｄ； ｐ Ｈ ｖ ａ ｌ ｕｅ
卵 黄抗 体 （ ｉ ｍ ｍｕ ｎ ｏ ｇ ｌ ｏ ｂ ｕ ｌ ｉ ｎ ｏ ｆ ｙ ｏ ｌ ｋ ； Ｉ ｇ Ｙ） 是 禽类 经 特 定抗 原免 疫后 ， 在 卵黄 中所 产 生 的相 应 特 异性 抗体¨ Ｊ 。Ｉ ｇ Ｙ是 一 种 天 然 存 在 、 无 残 留、 无 毒 副 作 用 的免疫球 蛋 白 ， 是 抗 生素 的替 代 品 Ｊ 。 目前 高 免
ＷＡ Ｎ Ｇ Ｂ ｉ ｎ ， Ｓ Ｕ Ｎ Ｄ ｅ — ｊ Ｈ ｎ ， Ｃ Ｈ Ａ Ｉ Ｈ ｕ ａ
（ Ｈａ ｒ ｂ ｉ ｎ Ｐ ｈ ａ ｒ ｎ ｍ ￣ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ Ｃ ｏ Ｌ ｔ ｄ Ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｖ ａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｈａ ｒ ｂ ｉ ｎ １ ５ ０ ０ ６ ９， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
进， 旨在 对不 同 比例溶 解卵 黄 、 酸度、 存放 条 件 下 除
大多使用 的是 粗制高免卵黄液 － ４ ｊ 。由于高免 卵 黄 自身存在 的一些缺陷， 如卵黄中含有大量杂蛋 白
及脂肪等物质 ， 造 成 注 射 困难 、 难 以吸收 、 局 部 肿
去脂 肪 和杂 蛋 白的效果 进 行对 比 ， 以确定 适 合 生产
黄抗 体 。
［ 关键词］ 卵黄抗体； 除脂率； ｐ Ｈ值
Ｅｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ０ ｆ ｔ ｈｅ Ｄｉ ｆ ｆ ｌ ｅ ｒ ｅ ｎｔ Ｃｏ ｎ ｄｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｎ ｔ ｈｅ Ｆａ ｔ Ｒｅ ｍｏ ｖ ａ ｌ Ｒａ ｔ ｅ
精制卵黄抗体在鸡球虫病防治中的应用
鸡球虫病是危害养鸡业的一种严重的寄生虫病袁 雏鸡感染 率高达 50%耀70%袁 死亡率高达 80% 遥 [1,2] 球虫病带来的巨大损 失已引起全球家禽养殖业的重视袁 国内外相继学者相继对鸡球 虫疫苗进行研究袁 意在通过预防解决鸡球虫病给养殖业带来的 巨大危害袁 近年来袁 国内外鸡球虫疫苗开始走进养殖户的视 野袁 球虫病的预防工作也日益被重视袁 但其免疫空窗期的存在 和对发病鸡群无治疗作用等弊端也急需解决袁 尤其是随着食品 安全日益深入人心和国家限抗禁抗的倡导袁 源头上探索可以替 代常规抗球虫病的化药和抗生素生物制品已迫在眉睫遥
表 1 试验动物分组和处理
组别
动物数（羽）
试验处理
鸡球虫精制卵黄抗体治疗组
200
25 日龄进行球虫精制卵黄抗体喷洒拌料免疫，进行垫料管理。
市售中药治疗组
100
按使用说明 25 日龄拌料饲喂，进行垫料管理。
市售化药治疗组
150
25 日龄拌料饲喂，进行垫料管理，按使用说明拌料给药。
病鸡零处理对照组
30
对病鸡不做任何处理
禽业技术 | 资源育繁
精制卵黄抗体在鸡球虫病防治中的应用
陈庆忠 冯海波 安同伟 * 高彬 张晶
渊天津赫莱恩特生物科技有限公司 301702冤
摘要院 为了探讨鸡球虫精制卵黄抗体对鸡球虫病的治疗效果袁 对已确诊鸡球虫病群体进行精制卵黄抗体尧 市售化药和中药 的治疗效果对比试验遥 试验结果显示袁 与中药防治组尧 化药治疗组及零处理对照组相比袁 球虫精制卵黄抗体组效果显著袁 具有绿色环保尧 无毒无残留的优点袁 并且不影响出栏周期遥 关键词院 鸡曰 球虫精制卵黄抗体曰 E.tenella 感染曰 E.maxima 感染
2018 年 6 月份山东省潍坊市一养殖场白羽肉鸡集体出现精 神颓废袁 食欲不振尧 呆滞尧 行动不便袁 鸡冠和肉垂苍白等症 状袁 2d 后血便增多袁 经临床兽医剖检尧 检测袁 最终确诊为鸡球 虫病遥 经了解袁 此肉鸡养殖场之前未进行球虫活疫苗免疫袁 发 病初期袁 连用球虫散 3d袁 效果不明显遥 经协商袁 养殖户同意用 精制卵黄抗体进行部分患病肉鸡球虫病的治疗遥 1.2 试验方案
抗体的精制
以抗原免疫动物来制备的抗血清是一个非常复杂的混合物，包括血清的全部成分。但是同抗原特异性结合的抗体则主要是血清中的免疫球蛋白组分。 通常用于制备酶标抗体或荧光抗体的免疫球蛋白必须高度纯化并具有特异性，不应含有非抗体的血清蛋白。 因此，为了浓缩和提高抗体的效价，或为制备免疫球蛋白特异性抗体时，通常也需要分离和纯化免疫球蛋白。
韦太猛仍裙岗可岂旬朝揽胚舀碌玄铀览癣冯厅帽近太恤滋杆钧妒膜喝捌哇抗体的精制抗体的精制
注意事项
温度：抗体对温度比较敏感，长时间暴露在室温可以使抗体失活，因此提取免疫球蛋白最好在 2-4 ℃条件下进行。 等电点：蛋白质在等电点时的溶解度最低，兔 IgG 的等电点为 pI 8.0 ，操作时应该避开使用等电点附近的缓冲溶液。 蛋白质的浓度：蛋白质的浓度过高时，会出现欲分离的蛋白与其它蛋白质一起共沉的现象因此蛋白质浓度应在 2.5-3% 为宜。浓度过高时应用 PBS 稀释。
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蛋白G
蛋白G是链球菌表面的一种蛋白，分子量为30,000—35,000，它对免疫球蛋白的吸附机制与蛋白A相似。 蛋白G对各种免疫球蛋白的吸附能力与蛋白A不同，故在抗体的纯化上可与蛋白A互补。当某些抗体对蛋白A没有吸附能力时，它们往往会对蛋白G有吸附作用 。
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注意事项
进行离子交换层析的最佳溶液 pH 值一般与预分离蛋白质的等电点相差一个单位，这可使蛋白质的净电荷量即可保证将其结合在离子交换树脂上，又不需在洗脱时采用高强度的离子浓度或 pH 值相差悬殊的苛刻洗脱条件。 离子交换树脂再使用前需要再生，阴离子交换树脂以碱酸碱的顺序进行处理，阳离子交换树脂以酸碱酸的顺序进行处理和再生。 装柱时要求粒度均匀，比较致密，柱床表面平整，柱中无裂缝，气泡和沟流的现象，加样蛋白浓度低于 20 毫克/毫升，上样体积小于柱体积的 1/3 ，流速控制在 0.2-0.5 毫升/分钟。
禽腺病毒精制蛋黄抗体攻毒保护效果评价
禽腺病毒精制蛋黄抗体 攻毒保护效果评价
◎何信群'刘哲君'郝伟伟2唐泽珍'王灵强'张 晏' (1.重庆永健生物技术有限责任公司，重庆 402471 ;2.华派生物工程集团有限公司质检研发中心，四川成都 641400)
禽腺病毒感染是由禽腺病毒(FAdV)引起的一种亚临床性传染病，多数为 长期潜伏带毒，引起症状多为不明显的潜伏感染，少数可致病I亚群禽腺病 毒分为A、B、C、1)、E 5个种，12个血清型2()16年以来我国主要流行株为C、l) (4型和1()型)、E株 其中，1群C种4型禽腺病毒(FAdV-C4)临床症状表现为
染，则发病和死亡率更高，对养殖业带来极大的损害
冃前,I群4型禽腺病毒灭活疫苗的研制取得
-定的防治效果,但在野毒攻击免疫或失败时, 鸡群的紧急预防和治疗仍然十分必要。为此，我
们特采用I群C种4型禽腺病毒(FAdV-C4) HYO8O3O株接种鸡肝癌细胞(LMH)、收获细胞
培养物,经甲醛溶液灭活,加矿物油佐剂混合乳 化制成油乳剂灭活疫苗，接种健康产蛋鸡,从高 免卵黄中萃取抗体精制而成禽腺病毒精制蛋黄 抗体,用于紧急预防和治疗禽腺病毒病。
48 |鳥需蠶第诃
价,为后续蛋黄抗体质量研究奠定基础。
-材料与方法 1材料 (1) 强毒株 HY08030 病毒液,106oTCID5O/0.1mL,由华派
生物工程集团质检研发中心提供。
(2) 禽腺病毒精制蛋黄抗体 20190802批(琼扩抗体效价1:16)冲试制品 250mL/瓶,由重庆永健生物技术有限责任公司制
备。 ⑶试验动物 SPF鸡，购自梅里亚公司。 2 方法
(1)无菌检验 抽样取制备好的20190802批禽腺病毒精制 蛋黄抗体5瓶,按现行《中华人民共和国兽药典》
精制和粗制蛋黄抗体的优劣势分析
精制和粗制蛋黄抗体的优劣势分析
李峰
【期刊名称】《兽药市场指南》
【年(卷),期】2010(000)006
【摘要】蛋黄抗体（Immunoglobttlin of yolk，igY）是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，目前市场上蛋黄抗体的质量参差不齐，主要有精制和粗制蛋黄抗体两种类别，下面将这两种蛋黄抗体的优劣势比较如下。
【总页数】1页(P34)
【作者】李峰
【作者单位】山东信得科技股份有限公司家禽业务部
【正文语种】中文
【中图分类】TQ464
【相关文献】
1.鸡传染性法氏囊病精制高免蛋黄抗体的特点及应用 [J], 孔凡兵
2.鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体的治疗效果分析 [J], 刘鸿;陈秋英;陆新浩;吴勇;黄建劳;任祖伊
3.鸭病毒性肝炎（DVH）精制蛋黄抗体的治疗效果试验 [J], 刘鸿;陈秋英;陆新浩;吴勇;黄建勇;任祖伊
4.鸭短喙侏儒综合征精制蛋黄抗体的制备及应用效果评价 [J], 李丽琴;程雪娇;王宇鹏;孙珊珊;石青青;宋秀梅;于海超;王建
5.法康宁(精制蛋黄抗体)理化特性应用研究 [J], 吴凤明;王辉;韩明宝;孙志超;陈公武
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_卵黄免疫球蛋白的性质与特点_卵黄免疫球蛋白的性质与特点 (1)
动物医学进展,2010,31(2):114-117Progress in Veterinary Medicine卵黄免疫球蛋白的性质与特点史同瑞,黄宇翔,苏永福(黑龙江省兽医科学研究所,黑龙江齐齐哈尔161006) 摘 要:卵黄免疫球蛋白是一种产量高、成本低、易于生产、应用广泛的多克隆抗体,其稳定性良好,具有耐热、耐酸、耐碱和一定的抗酶解能力,因而利于临床保存和使用。
卵黄抗体不能激活哺乳动物的补体系统,不与哺乳动物的Fc受体、类风湿因子(RF)、葡萄球菌蛋白A(SPA)、葡萄球菌蛋白G(SPG)结合,作为诊断试剂具有较高的敏感性。
卵黄抗体具有良好的免疫活性,作为防治药物具有见效快,疗效高,无毒副作用,无残留等优点。
目前,卵黄抗体作为特异、高效、价廉的生物制剂,已在动物疾病的免疫诊断、预防和治疗中得到了应用,随着有关研究的不断深入,其应用前景将会更为广阔。
关键词:卵黄免疫球蛋白;结构特点;理化性质;生物学特性中图分类号:S852.4文献标识码:B文章编号:1007-5038(2010)02-0114-04 当禽体受到特定抗原的刺激后,会产生相应的特异性免疫抗体,其中,机体产生的Ig Y抗体会从血液中大量主动转运至卵黄中,这种贮存于卵黄中的抗体称为卵黄免疫球蛋白(yolk immunoglo bulin, Ig Y),亦称卵黄抗体(yo lk antibody)[1]。
自1893年Klem perer等首次报道鸡蛋中存在抗体以来,现已就卵黄抗体的形成、结构特性、制备与提取方法,以及在疾病诊治中的应用等方面进行了较为深入的研究,并取得了显著的成果[2]。
目前,有关卵黄抗体的研究已成为一个非常热门的研究领域,现有研究已经证实,卵黄抗体是一种新型、高效的绿色制剂,对诊断、预防和治疗细菌和病毒引起的疾病具有良好的作用。
本文就卵黄抗体的形成、结构特点、理化和生物学特性及其作用机理作一综述。
1 卵黄抗体形成禽类的免疫系统包括细胞免疫和体液免疫两部分,并分别受胸腺和法氏囊的控制。
卵黄抗体可行性报告
卵黄抗体可行性报告一、引言卵黄抗体是一种针对卵黄蛋白所产生的抗体，其在生物医学领域具有广泛的应用前景。
卵黄抗体可作为一种重要的生物治疗药物，用于预防和治疗相关疾病，同时也可在食品安全领域起到重要作用。
本报告将探讨卵黄抗体的可行性，包括其生产技术、应用领域和潜在市场。
二、卵黄抗体的生产技术卵黄抗体的生产主要依赖于动物体内或体外的免疫反应。
在体内免疫的情况下，动物被注射卵黄蛋白后，机体会产生抗体以应对外源抗原。
而在体外免疫的情况下，通过离心、沉淀、纯化等技术手段从动物血清中提取卵黄抗体。
目前，体外免疫技术更为常用，因其操作简便、效率高、产量稳定。
三、卵黄抗体的应用领域1. 生物治疗卵黄抗体在生物治疗领域具有广泛的应用前景。
其可以用于治疗自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等疾病。
通过调节免疫系统、清除有害物质、抑制炎症反应等机制，卵黄抗体为治疗多种疾病提供了新的思路和方法。
2. 食品安全卵黄抗体也可以用于食品安全领域。
在食品生产过程中，可能存在卵黄蛋白残留或被掺杂的情况，而卵黄抗体可以被用来检测和清除这些残留物，保障食品的安全和品质。
四、潜在市场分析1. 生物治疗市场随着人们对生物治疗的需求不断增加，卵黄抗体作为一种新型的生物治疗药物，具有较大的市场潜力。
尤其是在自身免疫性疾病、感染性疾病等领域，卵黄抗体有望成为重要的治疗手段。
2. 食品安全市场在食品安全领域，卵黄抗体的应用也具有广阔的市场前景。
随着人们对食品安全的重视程度不断提高，对于能够检测和清除有害物质的技术需求也在增加，卵黄抗体可以填补这一市场空白。
五、结论综上所述，卵黄抗体作为一种新型的生物治疗药物和食品安全技术，在生物医学领域具有广阔的应用前景和市场潜力。
通过不断优化生产技术、拓展应用领域，卵黄抗体有望成为未来生物科技领域的重要产物，为人类健康和食品安全做出积极贡献。
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精制与粗制卵黄抗体的优劣势分析随着养殖业的发展，疾病种类越来越多，某些病原体的变异也越来越快，疾病互传的可能性也越来越大，迫切需要有相应的快速有效的对策来控制疾病的发展，降低死亡，减小损失。
毋庸置疑，外源性的特异性抗体是治疗某些特定传染病的最直接最快速最有效的方法。
卵黄抗体作为一种价廉易得的外源性特异性抗体，其使用效果已经在临床兽医学上得到了验证和认同。
但在畜牧生产实践中，越来越多的人却对卵黄抗体的使用效果产生了怀疑，到底出现了什么问题？
本文试从精制和粗制卵黄抗体的优劣势分析来探讨这一问题的根源。
鸡、鸭、鹅等禽类的蛋在营养成分上大致相同，主要由蛋黄、蛋清（即蛋白）和蛋壳构成。
其中蛋黄约占32%，蛋清约占57%，其余11%为蛋壳。
其中蛋黄又由如下图所示的成分所构成：
抗体(免疫球蛋白，Ig)是机体受到外来抗原物质刺激后，机体免疫系统细胞产生的可以特异性地识别和结合外来抗原并使之失活的一类球蛋白。
家禽经特定抗原免疫后，可产生相应的特异性抗体进入血液循环，当血液流经卵巢时，特异性抗体在卵细胞中逐渐蓄积，并储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk，IgY)，它是卵黄中唯一的免疫球蛋白，具有特异性和针对性，无毒副作用。
下图为抗体结构：
从图中可以看出，在治疗疾病使用卵黄抗体时，起到关键作用的是卵黄中的免疫球蛋白（IgY)，IgY的作用非常广泛，其中最主要的作用有以下几种：
特定的卵黄抗体能黏附于特定病毒的衣壳上，直接抑制病毒的生长繁殖（抑制作用）；
黏附于细菌的菌毛上，使之不能黏附于粘膜上皮细胞，失去感染能力（阻滞作用）；
能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用（调理作用）；
中和细菌、霉菌等毒素的毒性（中和毒素）；
与病毒抗原结合使病毒失去感染宿主细胞的能力（中和病毒）。
但大量调查发现，目前市面上可见的家禽用粗制卵黄抗体几乎都是地下作坊生产的“三无”产品，生产环境及产品质量令人堪忧。
这些粗制抗体不仅抗体效价难以保证，而且通常会污染禽呼肠孤病毒、禽淋巴白血病病毒、网状内皮增生因子、大肠杆菌、沙门氏菌、支原体等外源性致病原。
在注射抗体预防或者治疗疾病时，极有可能造成垂直传播病原或其他一些细菌、病毒的扩散甚至疾病的爆发，带来严重的经济损失。
此外，由于粗抗生产者往往试图通过添加大剂量的甲醛，青、链霉素等措施来延长其产品的保质期，增加所谓的使用安全性，但结果往往是造成更大的应激和严重的药物残留。
这就是粗制抗体的购买者和使用者对粗制抗体的使用效果产生疑问的重要原因之一。
精制就是将蛋黄中的免疫球蛋白进行分离纯化的过程。
已知蛋黄是由水溶相（Water soluble fraction, WSF）和水不溶相（Water insoluble fraction, WIF）构成的乳浊液。
WIF主要为脂蛋白构成，而蛋黄抗体存在于蛋黄的WSF中。
WSF中的脂蛋白类含量甚微，
其物理性状为近乎透明的透明液体。
因此蛋黄抗体精制过程即是WSF的分离过程。
大量临床使用案例表明，精制蛋黄抗体具有效价稳定、效果确实、保存时间长和便于应用的优点。
同时精制蛋黄抗体不会在注射部位残留，对胴体品质无任何影响。
下表是精制卵黄抗体与粗制卵黄抗体的比较：
项目精制蛋黄抗体粗制卵黄抗体
合法性合法产品，国家二类新兽药非法产品
批准文号国家正式批准文号三无产品
执行质量标准国家质量标准无标准
质量监控中监所复核合格无监控
生产环境GMP车间地下作坊
生产工艺HOF综合灭活提取技术生理盐水或凉开水搅拌分装
产品质量标准抗体效价达到或超过国家标
准，无细菌、无支原体、无
外源性病毒污染无效价标准，不进行菌检和外源病毒检测，可能含有大量外源性病原，使用后可能传染其他病毒病、细菌病、支原体病
安全性安全可靠不确切
抗体含量高低
传播其他疾病不会可能会
性状近似透明粘稠糊状
刺激性很小，几乎没有大
使用方便性流动性好，易注射不易注射，有时堵塞针头贮藏2-8℃或常温保存必须冷冻
吸收性非常好，无残留差，易形成机化组织
保存期18个月短，易腐败变质
精制卵黄抗体具有以下特点：
保护谱广，治愈率高
含有标准株、超强株和变异株抗体，对当前各地区流行的鸡传染性法氏囊炎、鸭病毒性肝炎、小鹅瘟等疾病针对性强，治愈率高达95%以上，预防100%有效；
提纯浓缩，抗体效价高，注射剂量小
梯密度浓缩技术，精制提纯到免疫球蛋白，效价是一般市售产品的4-5倍；
起效快，保护时间长
5-6小时控制病情，降低死亡，恢复精神状态，注射一次有效抗体效价能够维持10天以上；应激小，无毒副作用，使用方便
其性状为近乎透明的无色液体，不含任何有害物质和外源性污染，安全性高，对机体无刺激及毒副作用，对胴体品质无影响，粘稠度低，流动性好，使用时无需解冻，注射方便快捷；抗逆性强，效价稳定，保存时间长
疫苗耐热保护技术及疫苗专用包装，效价稳定，保存时间长，2-8℃条件下保存18个月，常温条件下保存6个月对抗体效价无影响。
综上，卵黄抗体的生产工艺对其使用效果的影响是非常显著的。
目前市面上仍然流通着大量的非法生产的安全性极差的“三无”粗制抗体产品，养殖从业者对此要有清醒的认识，以减小
由于使用不合格粗制抗体产品引起的损失。
自1893年Klemperer首次报道鸡蛋中存在抗体以来，卵黄抗体的研究不断深入，相信精制卵黄抗体作为某些疾病的诊断试剂和防治药物将会对中国乃至世界的家禽养殖业提供更多更好的保障。
--北京中农华正兽药有限责任公司。