中药指纹图谱

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中药指纹图谱的原理与应用

气相色谱(GC)以气体为流动相，对于含挥发性成分中药的鉴别具有一定优势。由于裂解气相色谱具有操作简便、样品无须化学前处理、提供信息量大等优点而格外引人注目。该方法将样品故人裂解器内，在一定的条件下将样品加热使其瞬间裂解，生成可挥发性的小分子物质，立即被载气带人气相色谱系统的分析柱上，分离后得到具有指纹性质的裂解气相色谱图。如果将气相色谱与质谱、傅立叶变换红外光谱联用，则不但可以知道不同中药中挥发性成分的差别，而且可以对这些成分进行鉴定。
高速逆流色谱指纹图谱(HSCCC fingerprintspectrum，即调整逆流色谱法) HSCCC利用动态液-液分配原理分离样品，其分离度和重现性与HPLC类似，但样品前处理简单。具体地说它是一种基于液-液多级逆流萃取建立的色谱体系，以轻巧的聚四氟乙烯螺旋管作分离柱，
在行星式运动中连续地完成整个分配、传递、分离过
中药指纹图谱，即中药身份证，主要指中药化学指纹图谱，实际上是一种保证中药质量的措施，是指对某种中药材或中成药等运用现代分离分析科学的手段，得到能够标示该中药的色谱或光谱的图谱，最终用来对中药质量评价的科学性方式。它有两个显著特点，一是通过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪或产地。二是通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保产品质量的相对一致。
对这种中药材的分子遗传标记的研究，找到具有该种高度特异性
的片段，便可以此为基础，制备出对该种高度特异性的寡核苷酸探针，再经分子杂交进行指纹分析，即可达到鉴别目的。DNA指纹图具有高度的个体特异性。DNA指纹图谱技术包括AP-PCR(arb itrary primer PCR，任意引物聚合酶链式反应)和RAPD(随机扩增多态性DNA，randomly amplified polymorphic DNA)两种指纹图谱技术。RFLP (限制性[内切酶]片段长度多态性，restriction fragment length polymorphism)是最常用的构建DNA指纹图的方法，但该法费时费力，使应用受到限制。随机扩增多态DNA(RAPD)标记，可以在特异DNA序列尚不清楚的情况下，检测DNA的多态性，这是

第五章指纹图谱

S1 S2 S3 S4 S5 对照指纹图谱
1.000 0.997 0.995 0.995 0.997 0.998
0.997 1.000 0.998 0.997 0.996 0.999
0.995 0.998 1.000 0.998 0.991 0.999
0.995 0.997 0.998 1.000 0.990 0.999
♦ 液相色谱 ● 色谱柱：比较试验加以选择
流动相：至少用三种不同组成比较
流动相 1
流动相 2
流动相 3
适宜的柱温和检测波长
15 203
20
210
25
236
30
254
35
365
五、方法学验证
1. 稳定性试验
供试品溶液的稳定性
表3 川芎指纹图谱稳定性试验相似度计算结果（n=5）
对照指纹图谱 S1 S2 S3 S4 S5
红外光谱图
小蓟丁酮提取物的红外指纹图谱
• 中国药典规定：小蓟在开花时采。 • 根据1384cm-1处吸收峰的有无，可以鉴别其采集时间是否正确。
质谱（ＭＳ）
• 按照带电粒子的质荷比（ｍ／ｚ）和其相对丰度大小排列组成图谱。 • 中药特征提取物置质谱仪中进行轰击裂解为不同的碎片，获得提取物中化学成分的 MS图，不同中药由于所含化学成分的种类及组成比例的不同，所得质谱图中分子离子峰和碎片离子峰亦不一致。
HPCE, CE/MS 光谱技术 UV IR
波谱技术 MS NMR X-射线衍射法分子生物学技术
薄层色谱
●可在同板同时分析多达18个样品， ●展距局限在 10cm~20cm ，‘柱效’ 时效高相对较低，对复杂组分 ●所用的是正相展开剂，其组成变不提高分离度则难以提化灵活，可适应多种成分的分离取指纹特征的药材受到限制。 ●离线操作，即可直观比较图谱，又可扫描得到轮廓图和处理数据 ●开放系统，对环境温度、相对湿度要求较高 ●占机时间短

中药指纹图谱共有峰的自动识别

收稿日期:2008204216 修回日期:2008206215基金项目:国家自然科学基金(No.20775028)3通讯联系人:曹玉华,女,教授,研究方向为中药分析.第25卷第1期Vol.25　No.1分析科学学报J OU RNAL OF ANAL YTICAL SCIENCE 2009年2月Feb.2009文章编号:100626144(2009)0120041206中药指纹图谱共有峰的自动识别冯启余,曹玉华3,龚立冬(江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214122)摘　要:依托时间匹配、光谱信息辅助,利用自编的VB 程序,建立并比较了时间匹配和时间匹配参考光谱信息两种识别中药指纹图谱共有峰的方法,并成功地应用于肉苁蓉的高效液相色谱2二极管阵列检测器(HPL C 2DAD )法指纹图谱的建立。

结果表明,只需要人为设置色谱峰大小下限、保留值相对误差上限和最大吸收波长差值上限三个参数,VB 程序编制的指纹分析系统就能快速对所有样本进行共有峰识别和模糊数学处理,实现了无人工干预下的中药指纹图谱共有峰的自动识别,指纹图谱的建立过程客观,并且节省大量时间,其中参考光谱法识别结果更准确。

关键词:中药指纹图谱;共有峰识别;肉苁蓉;高效液相色谱2二极管阵列检测器中图分类号:O657.7+2 文献标识码:A中药是中华民族的瑰宝,现代化是中药走向世界、实现国际化的前提,其制剂的质量水平控制是现代化的中心环节[1]。

以指纹图谱[2,3]规范中药制剂的质量,被评价为中药质量控制的里程碑[4-6]。

国家食品药品监督管理局2002年发布了《中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行)》[7]。

色谱法是研究指纹图谱的首选方法,高效液相色谱(H PL C )因具有灵敏、重现、适用对象广泛、分离效率高等特点而被广泛应用[8]。

峰匹配是指纹分析的关键,保留时间或相对保留值常常作为色谱指纹图谱的共有峰识别标准[9]。

但是,由于中药体系的复杂性和HPL C 仪器系统的微小波动,同一组分在各色谱图中的保留时间不尽相同。

(word完整版)中药指纹图谱综述

中药指纹图谱摘要：实现中药现代化首先要解决的是中药的现代化质量标准问题，其关键就要建立合乎现代科学要求的“中药指纹图谱”.正如国家药品监督管理局任德权副局长指出,“中药指纹图谱的建立已是牵动行业全面进步的关键技术，其应用研究,对保证中成药功效，提高中药工业整体水平,带动中药产业现代化，推进中药走向世界,具有非常重要的意义。

"关键词：中药指纹图谱、测定、DNA、化学特征中药指纹图谱借用DNA指纹图谱发展而来，广义的中药指纹图谱包括中药材DNA 指纹图谱和中药材化学（成分）指纹图谱，狭义的中药指纹图谱仅指后者，是表达中药代谢产物化学特征的指纹图,包括光谱、波谱和色谱指纹图。

色谱指纹图谱发展最早，也是迄今为止最为重要的指纹图谱。

按谢培山先生的定义〔,中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。

整体性和模糊性是它的基本属性。

色谱指纹图谱应满足专一性（或称唯一性)、重现性和实用性的技术要求[1］。

中药生产的原材料,因土壤、气候等环境因素及采收加工的不同,实际使用时不能保证药材质量的稳定,经加工提取得到的中间体,每个批次在成分含量、成分组成及各成分比例方面都不能保持一致［2].因此对中药原材料、中间体及成方制剂的质量控制在中药的应用上占据着很主要的位置。

中药指纹图谱借用了法医学上指纹鉴定的概念,对中药的化学信息以现代分析技术给予表征并加以描述，全面反映中药内在化学成分的种类与数量，对判断中药真伪优劣，控制中药原材料、中间体及成品的质量，减少批间差异,并最终控制成品的质量起到了极其重要的作用。

国家食品药品监督管理局在《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》中对原料药(中药材）指纹图谱的定义是：“中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后,采用一定的分析手段，得到的能够标示该药材特性的共有峰的图谱”；中药注射液指纹图谱的定义是：“中药注射剂指纹图谱系指中药注射剂经适当处理后,采用一定的分析手段，得到的能够标示该注射剂特性的共有峰的图谱”。

中药指纹图谱概述

中药指纹图谱概述中国科学院兰州分院甘肃省天然药物重点实验室邸多隆中药与化学药品的根本区别在于，存在于中药中的任何一种活性成分均不能反映中医用药所体现的整体疗效。

运用先进的现代分析分离手段，将复杂的天然产物分析的越细，目标越缩小，可能离中药整体疗效的距离越远。

中医药理论和实践的非线性特点要求综合评价中药的质量。

中药的化学分析由分解、微观分析向宏观、综合分析发展将成为必然的趋势，色谱指纹图谱分析是对中药及其制剂进行宏观分析的可行手段。

在充分利用现代分离分析仪器对复杂的中药多组分体系进行分离检测和表征的同时，结合化学计量学和计算机技术，最大限度地从中抽取不同特性样本中的化学信息，以整体的、宏观的、模糊的概念表达中药的特性，是指纹图谱独具有的优势。

实现中药现代化首先要解决的问题是中药的现代化标准，即中药可控、可量化的问题，解决这一问题的有效手段便是建立中药的指纹图谱。

一、指纹图谱的涵义广义的指纹图谱包括DNA指纹图谱、波谱指纹图谱和色谱指纹图谱。

常见的指纹图谱主要指波谱或色谱指纹图谱：即采用一定的方法（如HPLC，GC，TLC，HPLC-MS，GC-MS，FTIR，X-ray，UV等），建立特定对象如中药材、提取物、饮片、中药注射液等的有特征性的相对稳定的图谱，所得到的图谱可以作为鉴别和质量控制的参照依据。

这种指纹图谱强调的是“共有特征性”，属狭义的指纹图谱范畴，也属化学指纹图谱，是研究的主要对象。

二、中药指纹图谱的提出中药学是一门历史悠久的传统学科，中药是几千年来我国人民赖以防病治病的重要药物。

随着应用面的日益扩大，许多药材已面临供不应求的状况。

面对这种情况，中药市场出现了混乱，混淆品种、伪劣药材以及人为掺杂时有出现。

如平贝充川贝，棉花根充黄芪，海马中灌水泥、石灰，金银花中掺盐等等，不一而足。

因此，如何区分真伪优劣，保证药品质量已成燃眉之急。

在中药分析和研究中发现，植物药是多种化学成分的混合体，其活性成分大部分都是生物体内次生代谢产物，少数为初生代谢产物，药材本身就有它内在的不稳定性，再加上现阶段的中药农业基本不规范现状，如种植粗放，品种资源、栽培地域以及收获时节混乱，农药和化肥残留等问题的普遍存在，造成中药材生产、质量的波动性较大，难以保证中药质量稳定、疗效可靠。

中药色谱指纹图谱组分保留时间漂移的校准

中药色谱指纹图谱组分保留时间漂移的校准李博岩1　梁逸曾31　胡　芸1　谢培山2　俞汝勤3　李发美4　孙　沂41(中南大学中药现代化研究中心,长沙410083)　2(广州药品检验所,广州510160)3(湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室,长沙410082) 4(沈阳药科大学,沈阳110015)摘　要　基于光谱相关色谱方法判断复杂中药色谱指纹图谱的组分相关性,实现同一中药样本在不同实验条件下所得的色谱指纹图谱的相同组分的色谱保留时间漂移的局部最小二乘校正,为合理评价指纹图谱的品质提供较为实用的工具。

关键词　中药色谱指纹图谱,色谱峰簇,相关系数,联用色谱,局部最小二乘,光谱相关色谱2002211213收稿;2003210208接受本文系国家自然科学基金重点资助项目(No.20175036,No.20235020)1　引言作为中药的一种质量控制模式,色谱指纹图谱可标识中药的化学特征,最大限度展示中药的整体内在品质。

通过比较色谱指纹图谱的相似程度,判断中药材或制剂真伪、考察其稳定性和一致性1,2,并为进一步研究药物的有效成分和药效作用奠定基础。

针对中药色谱指纹图谱中主要特征成分出现的保留时间的偏移问题,在光谱相关色谱3的基础上,提出局部最小二乘校正方法,以实现同一中药样本在不同实验条件下所得的色谱指纹图谱的仪器系统误差的校准,为客观评价图谱的品质及合理建立特征指纹图谱提供理论方法。

2　理论部分假定某一中药样本在不同实验条件下所得的两个色谱指纹图谱分别为矢量x 1与x 2,对应的色谱流出时间记作矢量t 1与t 2,两个图谱的第i -1个与第i 个相同组分的保留时间分别记为t 1,i -1与t 2,i -1和t 1,i 与t 2,i 。

t 1,i -1与t 1,i 区间的指纹图谱记作色谱峰簇x i1,其对应的色谱流出时间矢量记作t i1,t 2,i -1与t 2,i 区间的指纹图谱记作x i2,对应的色谱流出时间矢量记作t i2,i =1,…,q ,q 为x 1与x 2的最大相同组分数(参见图1)。

中药指纹图谱(课件)

分离效果好
GC利用气体作为流动相，能够实现中药中挥发性成分的快速、有效分离。
分析速度快
GC分析周期短，适用于中药中大量样品的快速分析。
灵敏度高
GC检测器灵敏度高，能够检测到中药中微量的挥发性成分。
薄层色谱法（TLC）
操作简便
TLC操作简便易行，无需特殊设备，适用于中药指纹图谱的初步分析。
分离效果好
感谢您的观看
THANKS
1 2 3
色谱柱选择
根据中药样品的成分特点，选择合适的色谱柱类型及规格，确保各成分在色谱柱上得到良好的分离。
流动相选择
根据样品的溶解性和色谱柱的特性，选择合适的流动相组成及比例，以获得良好的色谱峰形和分离效果。
色谱条件优化
通过调整流动相的流速、柱温等色谱条件，进一步优化色谱分离效果，提高指纹图谱的准确性和稳定性。
03
常见中药指纹图谱类型及特点
高效液相色谱法（HPLC）
分离效能高
重复性好
HPLC采用高效微粒固定相，能够实现中药复杂体系中各组分的有效分离。
HPLC方法稳定可靠，重复性好，能够满足中药指纹图谱的批量化分析需求。
灵敏度高
采用高灵敏度的检测器，能够检测到中药中微量甚至痕量的有效成分。
气相色谱法（GC）
指导工艺改进
根据生产工艺稳定性评价结果，可以指导工艺改进和优化，提高生产效率和产品质量。
05
中药指纹图谱在真伪鉴别中应用
伪品识别与防范策略
伪品定义及危害
阐述伪品概念，分析伪品对中药市场及患者用药安全造成的严重影响。
常见伪品类型
列举常见的中药伪品，如以次充好、掺杂使假、品种混淆等。

中药指纹图谱

现阶段色谱指纹图谱的Байду номын сангаас用
• 在新药研究开发过程中，指纹图谱作用如下：在新药研究开发过程中，指纹图谱作用如下：原料药材的筛选指导生产工艺的研究：考察原料、半成品、指导生产工艺的研究：考察原料、半成品、原料成品的质量相关性相关性、成品的质量相关性、均一性和稳定性
现阶段色谱指纹图谱的作用
指纹图谱的产生
• 中国年代开始研究化学计量学、模式识别中国80年代开始研究化学计量学、年代开始研究化学计量学等 • 微量元素分析 • 80～90年代首先在薄层色谱扫描图中研究多～年代首先在薄层色谱扫描图中研究多个斑点、斑点大小应用于药材、个斑点、斑点大小应用于药材、中成药分析
指纹图谱的产生
指纹图谱的方法学验证
• 目的：证明采用的方法能保证指纹图目的：谱的整体特征，谱的整体特征，适用于中药指纹图谱检测的要求
指纹图谱的方法学验证
• （一）专属性：建立的中药指纹图谱能够表专属性：达该品种的特征，即具唯一性。达该品种的特征，即具唯一性。 • 专属性试验：如有同属近缘品种应进行比较专属性试验：试验和观察，找出相互之间的区别。试验和观察，找出相互之间的区别。 • 并分别进行试剂、辅料、药材（或原料）空并分别进行试剂、辅料、药材（或原料）白试验，证明指纹图谱没有干扰，白试验，证明指纹图谱没有干扰，如某些辅料或溶剂等成分无法除去，料或溶剂等成分无法除去，在指纹图谱中应予以标明。予以标明。
• 半成品（中间体）指纹图谱的建立
优化和细化生产工艺的各技术环节和参数, 优化和细化生产工艺的各技术环节和参数, 对固定工艺条件加以说明供试品溶液制备合理应建立中间体与药材、中间体与成品具直应建立中间体与药材、中间体与成品具直接相关的色谱指纹图谱接相关的色谱指纹图谱

中药指纹图谱相似度评价方法的比较

中药指纹图谱相似度评价方法的比较一、本文概述中药指纹图谱作为一种全面、综合地反映中药内在质量的技术手段，已经在中药质量控制、真伪鉴别以及新药研发等领域得到了广泛应用。

指纹图谱相似度评价则是评估中药指纹图谱质量、稳定性的重要指标，其评价方法的优劣直接关系到中药质量评价的准确性。

本文旨在对现有的中药指纹图谱相似度评价方法进行比较分析，探讨各种方法的优缺点，以期为提高中药质量控制水平提供理论支持和实践指导。

本文将首先介绍中药指纹图谱相似度评价的基本概念和研究意义，然后重点阐述几种常用的相似度评价方法，包括夹角余弦法、相关系数法、谱峰匹配法等。

在此基础上，本文将通过对比分析这些方法的计算原理、适用范围、优缺点等方面，为读者提供一个全面、深入的相似度评价方法比较视角。

本文将展望中药指纹图谱相似度评价方法的未来发展趋势，以期为推动中药现代化、国际化进程提供有益参考。

二、中药指纹图谱相似度评价方法概述中药指纹图谱相似度评价是中药质量控制领域的一个重要研究方向，旨在通过科学、客观的方法来评估中药的内在质量。

随着现代分析技术的不断发展，越来越多的相似度评价方法被应用于中药指纹图谱的研究中。

这些方法大致可以分为以下几类：谱图直观比较法：这是最简单直接的相似度评价方法，通过直接观察指纹图谱的峰形、峰位和峰强度等信息，对中药样品进行直观的比较和判断。

这种方法简单易行，但主观性较强，容易受到观察者的经验和技能影响。

相似度计算法：这类方法通过数学公式或算法，对中药指纹图谱进行量化分析，从而得出样品间的相似度。

常用的相似度计算法包括相关系数法、夹角余弦法、欧氏距离法等。

这些方法具有客观性强、结果可重复等优点，但也需要选择合适的计算参数和阈值。

模式识别法：模式识别技术，如人工神经网络、聚类分析、主成分分析等，也被广泛应用于中药指纹图谱的相似度评价中。

这些方法能够通过学习和训练，自动识别指纹图谱中的特征信息，并对中药样品进行分类和识别。

指纹图谱

气相色谱：通常使用毛细管柱，要注明色谱柱类型、长度、内径、老化条件、载气、流速、柱温、柱头压力、进样方式、进样口温度、检测器等。
＊选择试验方法及试验条件须根据供试品的特点和需要设计合适的试验方案，在保证专属性、重现性的前提下，宜选择简单、实用、便于实施的方法和试验条件。
＊色谱中的参照峰由于作用不同于含量测定，提高其分离度应以不牺牲色谱泊整体特征为前提，所以不应孤立地苛求分离度必需达到含量测定的要求。
中药材指纹图谱质量控制及仪器方法
江苏省中医药研究院钱大玮段金廒
一、中药材指纹图谱的基本含义
定义：中药材指纹图谱是指某种(或某产地）中药材中所共有的，具有特征性的某类或几类成分的色谱或光谱的图谱。
特点：(1)通过指纹图谱的特征性,能有效鉴别样品的真伪；
(2)通过指纹图谱主要特征峰的面积和比例的制定，能有效控制样品质量，保证样品质量的相对稳定。
2 应用实例
图9 黄连TLC指纹图谱
（六）高效毛细管电泳（HPCE）指纹图谱
1. 仪器简介
仪器装置通常包括高压电源、进样系统、毛细管柱、检测器和记录系统5部分,其中毛细管柱是分离的核心部分。
2. 应用实例
图 10 天麻及其伪品HPCE图 a天麻水提液 b天花粉水提液 c黄精水提液 d 商陆水提液e大九股牛水提液
（九）质谱（ MS）指纹图谱
将中药提取液置质谱仪中进行电子轰击电离，可获得提取液中化学成分的MS图，不同中药提取液所含成分不同，所得质谱图显示的分子离子峰及进一步的裂解碎片峰亦不一致，可资鉴别。但质谱法对提取液中主要成分的含量要求较高，实验费用亦较大，能否作为常用的检测方法尚待继续探索。
版一部119页红花项下的各项规定。

第三部分-中药指纹图谱研究关键技术及规范

3 参照物
3．1参照物的选择
指纹图谱的参照物质一般选取容易获取的一个以上注射剂中的主要活性成分或指标成分，主要用于考察指纹图谱的稳定程度和重现性，并有助于色谱的辨认。在与临床药效未能取得确切关联的情形下，参照物(复方注射剂应首选君药的活性成分或指标成分) 起着辨认和评价色谱指纹图谱特征的指引作用，它并不等同于含量测定的对照品。指纹图谱一般色谱比较复杂，内标物不易选择，也不易插入，指纹图谱不是含量测定，故内标物的作用也不等同于含量测定的内标物，因此应慎重考虑选用内标物质的必要性和可能性。参照物应说明名称、来源和纯度。如无参照物，可选择指纹图谱中的稳定的色谱峰作为参照峰，说明其色谱行为和有关数据，并应尽可能阐明其化学结构及化学名称。如情况需要，且有可能，也可考虑选择适当的内标物插入色谱中。
② 称样

应按照常规要求，将选取的样品适当粉碎后混合均匀，再从中称取试验所需的数量，一般称取供试品与选取样品的比例为1：10，即如称取1g供试品，应在混合均匀的10g选取的样品中称取。因为指纹图谱需要提供量化的信息，称取供试品的精度一般要求取3位有效数字。
③ 制备
药材指纹图谱的主要目的，一是考察药材本身的质量情况，二是以药材的指纹图谱为参比，提取物及制剂的指纹图谱与之比较，以考察制剂与原药材的相关性。药材供试品溶液的制备，可选用适宜的溶剂和提取方法，定量操作进行，尽量使药材中的成分较多地在色谱图中反映出来，并达到较好的分离。最终制备的供试品溶液还应能适应色谱实验的需要，如液相色谱的供试品溶液宜用色谱流动相或色谱洗脱强度较弱的溶剂；气相色谱的供试品可采用水蒸气蒸馏法、顶空进样法或固相微萃取法，供试品如需使用溶剂，应用低极性低沸点的溶剂。

中药技术现代化技术-指纹图谱

02
发展新型检测技术和仪器
研发更精确、更灵敏的检测方法和仪器，满足指纹图谱需求。
03
强化传统理念与现代技术融合
在传承中药理念的基础上，运用现代技术手段，推动中药指纹图谱的发
展。
未来发展趋势预测
技术不断创新
随着科技的进步，中药指纹图谱技术将不断创新，提高准确性和可靠性。
应用范围扩大
中药指纹图谱将逐渐应用于更多领域，如药品质量控制、新药研发等。
指导。
中药生产过程监控
指纹图谱技术可以实时监控中药生产过程中的关键环节，确保生产过程的稳定性和可控性。
通过对生产过程中指纹图谱的变化分析，可以及时发现生产过程中的异常情况，避免生产事故的发生。
指纹图谱技术还可以应用于中药生产过程的优化和改进，提高生产效率和产品质量。
中药疗效评价与机理研究
的快速筛选和鉴定。
03 中药指纹图谱建立方法与流程
样品选择与制备
01
选择具有代表性的中药样品，确保其能够反映该中药的整体质量特性。
02
对样品进行适当的制备处理，如粉碎、提取、浓缩等，以获得符合指纹图谱分析要求的样品。
数据采集与处理
采用高效、灵敏的现代分析仪器，如色谱仪、光谱仪等，对中药样品进行全面的化学成分分析。
面临挑战
技术标准化难度大
中药成分复杂，不同药材、不同批次间存在差异，制定统一标准面临挑战。
检测方法与仪器限制
现有检测方法和仪器精度、灵敏度等方面可能无法满足指纹图谱要求。
传统理念与现代技术融合
如何将传统中药理念与现代技术相结合，是中药指纹图谱面临的重要问题。
解决方案探讨
01
加强标准化建设

中药指纹图谱操作技巧指南

中药指纹图谱操作指南说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。

本指南未能概括的内容，通过实践可自行补充调整，但申报资料或复核资料中须有相应的说明和申述。

指南中的"色谱指纹图谱"指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。

光谱指纹图谱将另行规定。

一、供试品收集供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代谢产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。

收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。

(一) 原料药材：在药材的化学成分与中医临床疗效的之间的关联尚未能阐明的现阶段，基本上是在承认其传统的功能主治及临床验证的基础上进行指纹图谱的实验研究。

原料药材的指纹图谱主要是反映其自然状态的内在质量情况，研究其指纹图谱是以此作为选择原药材投料或混批提取的依据，同时作为研究注射剂成品指纹图谱相关性的基础。

由于自然条件的变化，药材个体之间指纹图谱的差异是正常的，在品种鉴定无误的基础上，力争药材有较为固定和稳定的来源，个体之间的指纹图谱主要特征大致相似即可，使成品指纹图谱特征的稳定有起码的保证。

药材的"批" 不是工业生产的"批"，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。

由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。

供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，内容包括：药材名称供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。

收集时间（购买时间）及收集人货源情况调查（货源是否充足和稳定）基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。

中药指纹图谱研究

11(5.80)，12(7.28)。 • 峰面积比值：S: 7: ＝(1.000): (0.236～0.394) • 部分共有峰的峰形描述：
（二）起草说明
• 目的在于说明制定指纹图谱检测标准中各个项
目的理由，规定各项目指标的依据、技术条件
和注意事项等。
• 既要有理论解释，又要有实践工作的总结及试验数据。
二．中药材指纹图谱研究的一般方法
• 主要介绍与中药（新药）注射剂指纹图谱技术申报要求有关的研究内容
样品收集
• 为了确保指纹谱的系统性，必须进行具有广泛代表性的样品收集，尤其是不同产地、不同采收期及加工方式的样品的收集，只有保证了样品的代表性，才能保证建立的指纹谱的有效性。
（一）指纹图谱的检测标准
1）通过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪或产地； 2）通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保样品质量的相对稳定。
2．中药材指纹图谱的定义：
• 中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。 • 如果原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。
（三）中药指纹图谱建立的意义与原则
• 建立于中药成分的系统研究结果之上的指纹图谱，是现阶段可以全面的反映中药的内在质量的一个有效手段。世界公认，中药化学成分的多样性与复杂性是发挥其疗效的物质基础，同时也是质量评价的重点与难点。 • 中药药效的发挥，不能为一个或一种化学成分所体现，那么，建立全面反映所含成分的指纹图谱，有效地体现中药成分的复杂性，从而更好地评价中药的质量，中药指纹图谱必将成为中药质量评价的发展趋势。

中药指纹图谱

Gas Chromatography
capillary electrophoresis
中药指纹图谱
薄层色谱（TLC） • 定义 • 原理 • 特点
中药指纹图谱
色谱法的基本原理
利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。
中药指纹图谱
2020/11/7
中药指纹图谱
目录
• 定义 • 研究意义 • 分析技术
• 数据分析 • 应用 • 前景
中药指纹图谱
定义
中药指纹图谱是指运用现代分析手段对中药多维化学及其相关生物信息以图形（图像）的方式进行表征并加以描述。分为三种：色谱指纹图谱，波谱指纹图谱，生物指纹图谱
中药指纹图谱
中药指纹图谱
液相色谱仪工作流程图
中药指纹图谱
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ测器
• 功能将被分析组在柱流出液中浓度的变化转
化为光学或电学信号； • 分类
①紫外吸收检测器 ②紫外一可见分光光度检测器 ③示差折光化学检测器 ④二极管阵列紫外检测器 ⑤荧光检测器 ⑥电化学检测器
中药指纹图谱
工作特点
优点:高压、高效、高灵敏度、分析速度快，
中药指纹图谱
工作特点
气相色谱法是一种在有机化学中对易挥发而不发生分解的化合物进行分离与分析的色谱技术。
气相色谱的典型用途包括测试某一特定化合物的纯度与对混合物中的各组分进行分离，同时测定各组分的相对含量。在微型化学实验中，气相色谱可以用于从混合物中制备纯品。
中药指纹图谱
毛细管电泳（CE）
研究意义
作为有着悠久文明史的中药，其安全性、有效性早已经过历史的验证。但中药的均一稳定性——即质量可控的问题则是制约中药发展，走向国际市场的瓶颈问题。