(完整版)PDA培养基的配方及配制方法

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PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法PDA(Potato Dextrose Agar)是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基,广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。

下面是PDA培养基的精确配制方法:原料准备:-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备:-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤:1.清洁工具:将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净,并用自来水冲洗干净。

2.马铃薯的制备:先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮,然后切成均匀的小块。

3.煮马铃薯:将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中,并加入足够的自来水,使其覆盖马铃薯。

然后将容器放入灭菌器或压力锅中,煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。

4.过滤溶液:将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来,以去除固体残渣。

5.加入琼脂:将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中,随后加入15克的琼脂。

将容器放入微波炉中,加热溶解至琼脂完全溶解为止。

6.加入葡萄糖:将20克葡萄糖加入琼脂溶液中,搅拌均匀。

7.均匀分配:将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。

每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整,一般为20-25毫升。

8.pH调节:使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。

PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值,则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节,直到达到理想的pH值。

9. 灭菌:将装有培养基的瓶或皿盖好,然后放入灭菌器或压力锅,进行高温高压灭菌。

通常在121℃下压力为15磅(或1.05kg/cm²)下灭菌20分钟。

10.存储:在灭菌后的培养基冷却到接近室温后,将其存储在冰箱中,以防止微生物生长。

注意事项:-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。

-在煮马铃薯时,要确保马铃薯块完全煮熟,以确保有效杀灭微生物。

-在加入琼脂和葡萄糖时,要确保琼脂完全溶解,葡萄糖均匀分散。

-在调节pH时要小心,因为pH调节对微生物的生长有重要影响。

pda培养基

pda培养基

pda培养基
PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的培养基,以马铃薯和葡萄糖为主要成分。

它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。

PDA培养基的配方如下:
- 马铃薯提取物:200 g/L
- 葡萄糖:20 g/L
- 洋葱提取液:1 g/L
- 干酪膜素:0.1 g/L
- 硫酸镁:0.5 g/L
- 琼脂:15 g/L
- 蒸馏水:1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下:
1. 将马铃薯洗净去皮,切成小块。

2. 将马铃薯块放入大容器中,加入适量的蒸馏水,煮沸1
小时,然后离心取得汁液。

3. 将马铃薯汁液过滤。

过滤液为马铃薯提取物。

4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖,搅拌溶解。

5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁,搅拌溶解。

6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起,调整pH值为5.6-6.2。

7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂,搅拌溶解。

8. 将培养基加热至沸腾,然后倒入培养瓶中。

9. 灭菌培养瓶,通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。

PDA培养基可以用于分离和培养真菌,如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。

它提供了合适的营养物质和适宜的条件,促进
真菌的生长和繁殖。

2。

PDA真菌培养基

PDA真菌培养基

PDA培养基编辑词条PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Mediu m),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

目录基本介绍配制方法展开编辑本段基本介绍PDA培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基,是分离菌物和细菌的常用培养基。

一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

按物理性状划分:固体培养基按培养基成分划分:半合成培养基编辑本段配制方法配方马铃薯300克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取300g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。

其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。

对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。

如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性干燥培养基的制造方法申请号/专利号:93104723本发明涉及用于培养真菌类微生物的马铃薯葡萄糖琼脂干燥培养基的制造方法。

马铃薯经匀浆、浸提、液化、糖化、胰酶消化、煮沸过滤、浓缩及喷雾干燥等生产工艺得到马铃薯营养提取粉,配以适量的葡萄糖和琼脂粉,就可制成PDA干燥培养基。

本发明从马铃薯中提取的营养物质数量是常规方法的5-7倍。

本发明生产的PDA干燥培养基具有使用方便、营养丰富、更宜于微生物生长发育、节省原料、便于贮运、适合工业化生产等优点。

培养基配方

培养基配方

培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。

115℃,20min 灭菌。

3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

pda培养基配方

pda培养基配方

PDA培养基配方及配制方法PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称。

宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

下面就详细介绍了pda培养基的配方及配制方法及步骤。

1.PDA培养基的配方:马铃薯200克葡萄糖20克琼脂20克蛋白胨5克磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克水1000ml PH自然。

2.PDA培养基的制作工艺流程:设计培养基配方→材料煮汁→补水→琼脂溶解→再次补水→药品溶解→调PH值→分装→灭菌→摆斜面3.PDA培养基的制作步骤a 材料煮汁:1000ml水置于锅中,待烧开后加入200克去皮、切片的马铃薯煮20到30分钟,至薯片软而不烂,用八层纱布过滤,取滤液。

b 琼脂溶解和补水:将马铃薯滤液重新加入到锅中,补水至1000ml,继续加热沸腾而后加入琼脂,继续文火煮沸至琼脂完全溶解,再次补水至1000ml。

c 药品溶解:在琼脂溶解后加入葡萄糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,蛋白胨5克。

4 分装:a.试管培养基的分装分装所用的容器事先一定要清洗干燥,新购的试管内一般都残留烧碱,应先用稀硫酸在烧杯中煮沸,然后用清水洗干净,口朝下晾干后备用。

不能现洗现用,以免因管壁附有水膜导致培养基在试管口滑动。

分装试管时尽量避免培养液黏附试管口,以免培养基粘附棉塞,增加污染几率。

试管装量:制斜面培养基一般为试管高度的1/4—1/3。

b.平板培养基的分装将配制好的培养基倒入三角瓶,(三角瓶也一定要清洗干净),体积不要超过三角瓶的1/3(否则加热时液体沸腾易把棉塞冲开)5 加棉塞:棉塞要用普通棉花制作,不能用脱脂棉。

棉塞的大小,松紧要适度,过松达不到滤菌的目的,过紧妨碍空气流通,松紧度以于抓棉塞整个试管提起为宜。

标准的棉塞应是塞头略大,不易变形,一般塞入试管口2—3厘米。

占塞总长的2/3—1/3裸露在试管口外,比管口略大。

三角瓶棉塞同样松紧适中,一般塞入三角瓶3~4cm.6 装锅灭菌:将塞好棉塞的试管或三角瓶装进置物桶内,桶未装满用空试管填满以免试管倾倒,即可放入手提式高压灭菌锅中,盖好报纸,防止灭菌时棉塞被冷凝水淋湿,扭紧锅盖,排净锅内冷空气,待温度升至122—124℃之间开始计时30min,灭菌结束。

PDA LB培养基

PDA LB培养基

PDA培养基马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基是分离菌物和细菌的常用培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),15磅蒸气(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。

PDA培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

小技巧:1、做PDA培养基用土豆应去皮,避免带入杂质,产生泡沫,影响通气。

PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

分装于试管按物理性状划分:固体培养基按培养基成分划分:半合成培养基配方马铃薯200克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。

其他事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。

对于要调节pH的培养基,一般用pH 试纸测定其pH。

如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.1g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。

(完整版)PDA培养基的配方及配制方法

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PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。

(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

PDA培养基的配方及配制方法

PDA培养基的配方及配制方法

PDA培养基的配方及配制方法
PDA(Potato Dextrose Agar)培养基是一种常用的微生物培养基,广泛用于真菌和霉菌的分离和培养。

它由马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂组成,营养丰富,pH较为中性,适合各种真菌和霉菌的生长。

以下是PDA 培养基的配方及配制方法。

配方:
1.马铃薯提取物:200克
2.葡萄糖:20克
3.琼脂:20克
4.蒸馏水:1000毫升
配制方法:
1.将200克马铃薯削皮并切成块。

2.将马铃薯块加入1000毫升蒸馏水中,煮沸30分钟。

3.将马铃薯块滤除,保留煮沸后的马铃薯水。

4.将200克煮沸后的马铃薯水搅拌均匀,加入20克葡萄糖和20克琼脂。

5.将培养基混合物加热至化解琼脂,并搅拌均匀。

6.将培养基装入培养瓶中。

7.用适当装置和工具对装有培养基的瓶子进行高压灭菌,常压培养2小时。

8.灭菌完成后,将培养基倒入培养皿中,密封。

以上是PDA培养基的配方及配制方法。

使用培养基时要注意,避免交叉污染和外界污染。

同时,根据需要可以调整配方中的成分浓度,以适应不同微生物的要求。

PDA培养基

PDA培养基

PDA培养基制作PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基) 马铃薯(去皮)200 g 、葡萄糖20 g、琼脂15~20g、蒸馏水1000 ml ,自然pH。

在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖,这样配制的培养基也称为PSA培养基。

(1) 称量称量去皮马铃薯200 g,葡萄糖20 g,琼脂15~20 g。

提示:琼脂加入的量取决于琼脂的质量,质量好的15 g就够了,质量差的应适当增加。

另外,在夏天气温较高时,适当增加用量。

(2) 将马铃薯切成小块,放入锅中,加水1000 ml,煮沸30 min。

用纱布滤去马铃薯残渣。

(3) 将马铃薯滤液放回锅中,加入琼脂,加热熔化。

提示:在琼脂熔化的过程中,需要用玻璃棒不断搅拌,并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。

(4) 加入葡萄糖葡萄糖溶解后,加入适量的水以补充加热过程中损失的水分,定容至1000 ml。

提示:通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度,如1 000 ml、2000 ml 等,在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。

(5) 分装根据不同的实验目的,可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。

分装试管,其量为管高的1/5,灭菌后制成斜面。

分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。

(6) 加塞在管口或瓶口塞上棉塞。

棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花,棉塞可过滤空气,防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发,故在植物病理学研究工作中普遍使用。

正确的棉塞是形状、划、、松紧与管口或瓶口完全适合,过紧时妨碍空气流通,操作不便;过松则达不到滤菌的目的,且棉塞过小往往容易掉进试管内。

正确的棉塞头较大,约有1/3在外,2/3在试管内。

分装过程中注意不要使培养基沾染在管(瓶)口上以免浸湿棉塞,引起污染。

(7) 包扎加塞后,将试管用线绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳扎好。

用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。

(8) 灭菌将上述培养基以0.1MPa,121℃,高压蒸气灭菌20 min。

培养基配方及配制方法

培养基配方及配制方法

培养基配方1 斜面菌种保存培养基1.1PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸0.5h,纱布过滤,滤液补足1000ml,再加15g葡萄糖和15-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。

1.2麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备:干麦芽首先进行粉碎(不能太粗,也不必太细。

太粗影响糖化效率,过细影响过滤速度),按麦芽重量的3~4倍加水,搅拌均匀后,37℃左右浸泡1小时,然后缓缓加温至55~63℃(在升温过程中应不断搅拌使温度均匀),保温4~6小时(用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时),糖化结束。

在糖化过程中,应每小时搅拌一次。

取过滤后的清液,加1.8%琼脂,分装试管,每试管约5-10ml (视试管大小而定),121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。

2 基菌落总数检测2.1平板计数琼脂培养基将胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g 加入蒸馏水1000ml中,煮沸溶解后,调pH,然后在121℃下灭菌15min,取出,稍微冷却后,带热倒入培养皿中。

3志贺氏菌检测3.1 GN增菌液成分:胰蛋白胨:20g,葡萄糖:1g,甘露醇:2g,柠檬酸钠:5g,去氧胆酸钠0.5g,磷酸二氢钾4g,磷酸氢二钾1.5g,氯化钠5g,蒸馏水1000ml。

pH7.0制法:将上述物品加入蒸馏水中,加热溶解煮沸,调pH为7.0,分装,在115℃高压灭菌15min。

3.2 HE琼脂成分:胨:12g,牛肉膏3g,乳糖12g,蔗糖12g,水杨素2g,胆碱20g,氯化钠5g,琼脂18~20g,蒸馏水1000ml0,0.4%溴麝香草酚蓝溶液16ml,Andrade指示剂20ml.,甲液20ml,乙液20ml。

pH7.5 制法:将上述前七种成分加入400ml蒸馏水中作为基础液,将琼脂加入到600ml蒸馏水中加热溶解,加入甲液乙液到基础液中,调pH,再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷却至50~55℃,倾注浇平板。

PDA培养基的配制方法和注意事项

PDA培养基的配制方法和注意事项

PDA培养基的配制方法和注意事项PDA(Potato Dextrose Agar)是一种常用的真菌培养基,适用于培养和生长多种真菌菌株。

下面将介绍PDA培养基的配制方法以及注意事项。

配制方法:1. 准备所需材料:马铃薯(200g)、葡萄糖(20g)、琼脂(15g)、蒸馏水(1000ml)。

2.将马铃薯洗净,并切成块状。

3.将切好的马铃薯放入一个大锅中,加入足够的蒸馏水,使其完全浸泡。

4.使用中小火煮沸约30分钟,直到马铃薯变得软烂。

5.用纱布过滤掉马铃薯块,收集到的液体称为马铃薯提取液。

6.将马铃薯提取液加热到煮沸,并添加葡萄糖,搅拌使其充分溶解。

7.加入琼脂,搅拌溶解。

8.继续加热并保持搅拌,直到琼脂完全溶解。

9.关火冷却到40-45°C,搅拌均匀。

10.倒入培养皿或试管中,使其充分凝固。

11.将培养基容器包装好,使用锡箔纸和胶带封口,避免杂菌污染。

12.PDA培养基可以根据需要分装成适当大小的琼脂平板或斜面管,以供后续使用。

注意事项:1.所有试剂和仪器应尽可能消毒和无菌处理,以确保制备的PDA培养基无菌。

2.马铃薯切成块状是为了加速煮沸的过程,但切的过小可能导致提取液中的杂质过多,影响培养基质量。

3.煮沸的时间不宜过短,马铃薯需要彻底煮熟才能提取足够的营养物质。

4.搅拌是为了使葡萄糖和琼脂均匀溶解,并避免极度热区出现。

5.琼脂的溶解需要一定的时间和温度,不可急于冷却和使用。

6.冷却到40-45°C是为了防止高温对培养基中微生物的损害,也是为了避免由于过度冷却导致琼脂凝固太快。

7.封装培养基容器是为了防止杂菌和空气中的孢子进入培养基,避免细菌和真菌污染。

8.在分装培养基前,应将工作台面和器皿用酒精消毒,防止培养基受到外界污染。

9.PDA培养基在20-25°C的常温下可保存2-4周,或在4°C冰箱中保存2-3个月。

保存时不可直接暴露在光线下,避免褪色和干燥。

pda培养基的配制方法流程

pda培养基的配制方法流程

p d a培养基的配制方法流程-标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)马铃薯(去皮)200g葡萄糖20g琼脂20g水1000mLpH值自然PDA培养基配制注意事项1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。

2.PDA培养基一般不需要调pH。

对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。

如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。

调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性。

15:49:27太珥日 2016-4-26 15:49:27PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它属于固体培养基、半合成培养基。

PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。

PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

实验一 PDA培养基配制

实验一 PDA培养基配制

实 验 一
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
1. PDA配方
马铃薯 200g 、葡萄糖( dextrose ) 或蔗糖20g、琼脂20g、H2O 1000mL、 pH 6.5。
2. 配制方法
马铃薯(去皮、去芽眼)→切成片(玉米大小) →称取200 g+1000 mL H2O→煮沸15 min →双层纱 布过滤→取滤液并补足1000 mL+琼脂→熔化+其它 营养物质→调节pH(用HCl或NaOH)→分装试管→
茶树菇 Agrocybe aegerita
担 子 菌 纲 食 用 菌
鸡腿菇
杏鲍菇:Pleurotu seryngii
别名:刺芹侧耳、雪茸。 杏鲍菇是一种营养十分丰富、味道鲜嫩的新 型品种,菌肉肥厚,质地脆嫩,具有杏仁香味。
杏鲍菇:Pleurotu seryngii
红菇:Russula lepida
香菇
担子菌纲食用菌
银耳(白木耳)
担子菌纲食用菌
黄 金 针 菇 白金针菇
担子菌纲食用菌
灵 芝
灵 芝
担子菌纲食用菌Biblioteka 猴头菇担子菌纲食用菌
黑木耳
担子菌纲食用菌
草菇(麻菇, 杆菇)
担子菌纲食用菌
竹 荪
担子菌纲食用菌
灰树花
是一种珍稀食药用菌, 口感脆嫩,味似鸡丝。
牛肝菌
茶树菇 Agrocybe aegerita
pdapda200gdextrose20g20g1000mlph65配制方法马铃薯去皮去芽眼切成片玉米大小称取200g1000mlo煮沸1520min双层纱布过滤取滤液并补足1000ml琼脂熔化其它营养物质调节ph用hcl或naoh分装试管塞上棉塞捆扎灭菌高压蒸气灭菌1530min制成斜面检查灭菌效果即2830培养23d1每人制5支试管斜面

PDA培养基的配制方法和注意事项

PDA培养基的配制方法和注意事项

PDA培养‎基的配制方‎法和注意事‎项PDA培养‎基是马铃薯‎葡萄糖琼脂‎培养基的简‎称,即Pota‎t o Dextr‎o se Agar (Mediu‎m),分别对应马‎铃薯、葡萄糖、琼脂的英文‎。

它属于固体‎培养基、半合成培养‎基。

PDA培养‎基宜于微生‎物生长发育‎、节省原料等‎优势,一般在培养‎酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌‎方面应用广‎泛。

PDA培养‎基的配制(1)称量和熬煮‎按培养基配‎方逐一称取‎去皮土豆。

土豆切成小‎块放入锅中‎,加水100‎0ml,在加热器上‎加热至沸腾‎,维持20-30min‎,用可用2层‎纱布趁热在‎量杯上过滤‎,滤渣弃取。

滤液补充水‎分到100‎0ml。

(2)加热溶解把滤液放入‎锅中,加入葡萄糖‎20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石‎棉网上,小火加热,并用玻棒不‎断搅拌,以防琼脂糊‎底或溢出,待琼脂完全‎溶解后,再补充水分‎至所需量。

(3)分装按实训要求‎,将配制的培‎养基分装入‎试管或50‎0ml三角‎瓶内。

分装时可用‎三角漏斗以‎免使培养基‎沾在管口或‎瓶口上造成‎污染。

分装量:固体培养基‎约为试管高‎度的1/5,灭菌后制成‎斜面,分装入三角‎瓶内以不超‎过其容积的‎一半为宜;半固体培养‎基以试管高‎度的1/3为宜,灭菌后垂直‎待凝。

(4)加棉塞培养基分装‎完毕后,在试管口或‎三角烧瓶口‎上塞上棉塞‎(或泡沫塑料‎塞或试管帽‎等),以阻止外界‎微生物进入‎培养基内造‎成污染,并保证有良‎好的通气性‎能。

(5)包扎加塞后,将全部试管‎用麻绳或橡‎皮筋捆好,再在棉塞外‎包一层牛皮‎纸,以防止灭菌‎时冷凝水润‎湿棉塞,其外再用一‎道线绳或橡‎皮筋扎好,用记号笔注‎明培养基名‎称、组别、配制日期。

PDA培养‎基配制注意‎事项1.培养基经灭‎菌后,必须放在3‎7C温箱培‎养24h,无菌生长者‎方可使用。

2.PDA培养‎基一般不需要‎调pH。

对于要调节‎p H的培养‎基,一般用pH‎试纸测定其‎p H。

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法一、目的要求1.学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2.学习并掌握棉塞的制作方法。

二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。

在自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加上实训和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,但不论是何种培养基,均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。

不同微生物对pH值要求不一样,所以配制培养基时,还应根据不同微生物对pH值的要求,将培养基调到合适的pH值范围。

三、实训材料和用具琼脂,可溶性淀粉,葡萄糖,10﹪NaOH,10﹪HCl,1mol/L NaOH,lmol/L HCl,KNO3,NaCl,K2HPO4·3H20,MgSO4·7H20,FeSO4·7H2O;试管,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,牛角匙,PH试纸,棉花,牛皮纸,记号笔,纱布,四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,水1000mL,pH值自然。

(1)称量和熬煮药品实际用量计算后,按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法一、目的要求1.学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2.学习并掌握棉塞的制作方法。

二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。

在自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加上实训和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,但不论是何种培养基,均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。

不同微生物对pH值要求不一样,所以配制培养基时,还应根据不同微生物对pH值的要求,将培养基调到合适的pH值范围。

三、实训材料和用具琼脂,可溶性淀粉,葡萄糖,10﹪NaOH,10﹪HCl,1mol/L NaOH,lmol/L HCl,KNO3,NaCl,K2HPO4·3H20,MgSO4·7H20,FeSO4·7H2O;试管,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,牛角匙,PH试纸,棉花,牛皮纸,记号笔,纱布,四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,水1000mL,pH值自然。

(1)称量和熬煮药品实际用量计算后,按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法一、目的要求1.学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2.学习并掌握棉塞的制作方法。

二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。

在自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加上实训和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,但不论是何种培养基,均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。

不同微生物对pH值要求不一样,所以配制培养基时,还应根据不同微生物对pH值的要求,将培养基调到合适的pH值范围。

三、实训材料和用具琼脂,可溶性淀粉,葡萄糖,10﹪NaOH,10﹪HCl,1mol/L NaOH,lmol/L HCl,KNO3,NaCl,K2HPO4·3H20,MgSO4·7H20,FeSO4·7H2O;试管,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,牛角匙,PH试纸,棉花,牛皮纸,记号笔,纱布,四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,水1000mL,pH值自然。

(1)称量和熬煮药品实际用量计算后,按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

PDA培养基的配制方法

PDA培养基的配制方法

P D A培养基的配制方法本页仅作为文档封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.MarchPDA培养基的配制方法一、目的要求1.学习并掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2.学习并掌握棉塞的制作方法。

二、培养基的配制原理培养基是人工配制的各种营养物质供微生物生长繁殖的基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。

在自然界中,微生物种类繁多,营养类型多样,加上实训和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,但不论是何种培养基,均应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐等。

不同微生物对pH值要求不一样,所以配制培养基时,还应根据不同微生物对pH值的要求,将培养基调到合适的pH值范围。

三、实训材料和用具琼脂,可溶性淀粉,葡萄糖, 10﹪NaOH,10﹪HCl,1mol/L NaOH,lmol /L HCl,KNO3,NaCl,K2HPO4·3H20,MgSO4·7H20,FeSO4·7H2O;试管,三角瓶,烧杯,量筒,玻璃棒,天平,牛角匙,PH试纸,棉花,牛皮纸,记号笔,纱布,四、操作方法与步骤(一) 培养基的配制PDA培养基的配制其配方如下:土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15~20g,水1000mL,pH值自然。

(1)称量和熬煮药品实际用量计算后,按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

PDA培养基的配制及试管斜面制作

PDA培养基的配制及试管斜面制作

PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA培养基的配制及试管斜面制作1.实验材料1.1试剂材料土豆,葡萄糖,琼脂,试管,试管架,天平,注射用硫酸链霉素,注射用青霉素钠,三角瓶,灭菌锅,电磁炉,超净工作台,烧杯,1mL移液器,培养皿1.2PDA培养基配方土豆(去皮)200g葡萄糖20g琼脂15-20g蒸馏水1000mLpH 自然2.实验方法与步骤2.1称量和熬煮将土豆去皮,按自己所需的量(例如配制1L)称取土豆,将土豆切成小块放入锅内,加入适量的蒸馏水,在电磁炉上加热至沸腾,30min后用4层纱布在大量杯上过滤,弃掉滤渣,滤液用蒸馏水补足1L。

2.2溶解用天平称取20g葡萄糖加入滤液中,用玻璃棒搅拌,使其完全溶解。

2.3分装称取8-10g琼脂,加入所用三角瓶中,然后将滤液分装到三角瓶中,每瓶500mL,用玻璃棒将琼脂搅匀。

2.4加棉塞培养基分装完毕后,在三角瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性。

2.5包扎加塞后,在棉塞外用两层报纸包裹,其外用橡皮筋包扎好,标记。

2.6灭菌将配制完成的培养基,包好的平板及其他所需用品一起放入灭菌锅灭菌(见灭菌锅使用方法)。

3.试管斜面制作方法与步骤3.1前两步同2.1,2.1步骤3.2加热溶解量取500mL滤液到1000mL的烧杯中,再加入8-10g的琼脂,用玻璃棒搅匀,放入微波炉缓慢加热溶解,加热其间注意不要让培养基溢出烧杯,不时用玻璃棒搅拌。

3.3分装等琼脂溶解后,将培养基分装到事先准备好的试管中。

分装量约占试管高度的1/4,管口尽量不要沾染培养基。

3.4加塞培养基分装完毕后,在试管口上塞上棉塞或橡胶塞,以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性。

3.5包扎加塞后,试管7-9支捆用橡皮筋捆好,在塞外用两层报纸包裹,其外用橡皮筋包扎好,标记。

3.6灭菌将包好的试管和其他所需灭菌物品一同放入灭菌锅灭菌。

3.7摆斜面灭菌完成后,将试管拿出,在超净工作台下摆成斜面,根据自己需要选择合适的倾斜度。

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PDA培养基的配方及配制方法
PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它属于固体培养基、半合成培养基。

PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛。

PDA培养基的配方
土豆 200g
葡萄糖 20g
琼脂 15~20g
水 1000mL
pH值自然
PDA培养基的配制
(1)称量和熬煮
按培养基配方逐一称取去皮土豆。

土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。

滤液补充水分到1000ml。

(2)加热溶解
把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。

(3)分装
按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。

分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

(4)加棉塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。

(5)包扎
加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

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