临床免疫学检验技术

临床免疫学检验技术名词解释、问答部分名词解释1.Antigen and antibody reaction(抗原抗体反应):是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。

它既可以发生在体内，也可以发生在体外。

2.Zone of equivalence(等价带)：抗原抗体反应曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范围，成为抗原抗体反应的等价带。

在此范围内，抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多。

3.McAb：monoclonal antibody：单克隆抗体：是指仅识别单一抗原表位的B杂交瘤细胞产生的同源抗体，具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。

4.PcAb：polyclonal antibody：多克隆抗体：含有多个抗原表位的抗原物质刺激机体免疫系统时，体内多个B细胞克隆可被活化，产生的抗体为多克隆抗体。

5.Genetic engineeling antibody:基因工程抗体:是指应用DNA重组及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体，主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。

6.Adjuvant：佐剂：是指先于抗原或与抗原一起注入机体，能够增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。

7.滴度(效价)：血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应，以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度。

8.凝集反应：是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成的凝集现象。

现也指颗粒性抗原或抗体与相应抗体或抗原的反应。

9.Precipitation：沉淀反应：是指可溶性的抗原和抗体特异性结合后，所形成的复合物以沉淀的形式出现。

10.Fluorescence dyked：荧光淬灭：指荧光分子在某些理化作用下，荧光分子的辐射能力受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。

11.Stokes位移:相同电子跃迁在吸收光谱和发射光谱（如荧光光谱）中最强波长间的差。

12.Blocking:封闭:是指在抗原或抗体包被ELISA板后，用1%-5%牛血清白蛋白或5%-20%小牛血清等在包被，以防止非特异性吸附。

13.Coating：包被：是指将抗原或抗体固相化的过程。

14.ELISA:是以酶作为指示物，以抗原抗体免疫反应为基础的固相吸附测定方法。

15.Chemiluminescence immunoassay，CLIA化学发光免疫技术: 化学发光免疫技术是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。

该方法不仅具有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性，而且还具有分离简便，可以实现自动化分析的特点。

16.Luminescence:发光: 是指分子或原子中的电子吸收能量后，由基态跃迁到激发态，然后回到基态，并释放光子的过程。

17.1avidin:亲和素:亲和素亦称抗生物素蛋白、卵白素，是从卵蛋白中提取的一种由4 个相同亚基组成的碱性糖蛋白，每个亲和素能结合4 个分子的生物素。

18.Gold labeled immunoassay：免疫金标记技术: 是指利用胶体金颗粒标记特异性蛋白，当这些标记物在相应的配体处于大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，从而进行定性或半定量检测。

19.Immunohistochemistry technique:免疫组化技术: 指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，借助可见的标记物，对相应抗原或抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检验方法。

20.PBMC（外周血单个核细胞）：主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验中最常用的细胞群，也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。

21.Hemolytic plaque assay：溶血空斑试验：一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。

即将抗体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中，抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合，在补体作用下形成溶血空斑，从而进行定量计数。

22.Flow cytometry，FCM：流式细胞): 指借助流式细胞仪，精确、快速地对生物细胞的理化特性和生物学特性进行多参数定量分析，并对特定细胞群体分选的新技术。

23.超敏反应：又称为变态反应，是指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。

24.Autoimmunity：自身免疫:机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象，为生理性免疫应答的一部分。

25.Antinuclear antibodies, ANA：抗核抗体：抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分（DNP、DNA、RNA等）作为靶抗原的自身抗体的总称。

26.Rheumatoid factor, RF：类风湿因子：自身免疫病人体内表达的抗自身变性IgG的IgM类抗体。

27.Monoclonal protein: M蛋白: 单克隆免疫球蛋白，是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白28.Cryoglobulin.CG:冷球蛋白: 一组低温下发生沉淀，加温后又复溶的Ig，是血清中的一种病理性成分。

（0-4℃时发生沉淀，在37℃又溶解）29.Bence-Jones protein:本-周蛋白: 尿中游离的免疫球蛋白轻链。

30.AIDS：获得性免疫缺陷综合症：由HIV感染引起，因CD4+T细胞质和量的缺失，导致细胞免疫功能严重缺陷，临床上以反复机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统退行性变为主要特征。

31.Immunoproliferative disease：免疫增殖病：是指免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生引起的疾病主要是指由于淋巴细胞异常增殖所引起的疾病。

32.Tumor marker：肿瘤标志物：是指在肿瘤发生和增值过程中，由肿瘤细胞生物合成、释放或机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质，这些物质可存在于肿瘤细胞和组织中，也可进入血液和其他液体。

33.宿主抗移植物反应(host versus graft reaction, HVGR)：宿主针对供体组织或细胞的HLA抗原产生的移植排斥反应。

34.移植物抗宿主反应(graft versus host reaction, GVHR)：一定条件下移植物中的过客（免疫）细胞针对受者产生的排斥反应。

问答题1．简述抗原抗体反应的原理。

抗原抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特异性是由抗原、抗体分子空间构型决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合。

2．简述抗原抗体反应的类型。

1)颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应2)可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应3)抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应4)细菌外毒素或病毒与相应的抗体结合所致的中和反应5)免疫标记的抗原抗体反应等3．叙述杂交瘤技术的基本原理。

杂交瘤细胞技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

这种杂交瘤细胞具有俩种亲本细胞的特性，即既能分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。

4．简述间接血凝试验的基本原理。

间接血凝试验是将可溶性抗原吸附于人的O型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象。

5．简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。

Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为二抗，连接与红细胞表面抗原结合的特异性抗体，可使红细胞凝集。

Coombs试验有俩种类型：1）直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。

2）间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。

6．简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。

基本原理：待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。

技术要点：将抗体和热融化琼脂混合，倾注成平板。

待凝固后在哪琼脂板上打孔，孔中加入已稀释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37℃温箱，24—48h后观察孔周围沉淀环。

量取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原浓度。

7．简述免疫固相电泳的原理及临床应用价值是什么？原理：先将血清蛋白质在琼脂凝胶介质上经区带电泳分离，再将固定剂和各类型免疫球蛋白及轻链抗血清加在凝胶表面的泳道上，经孵育后，固定剂和抗血清在凝胶内渗透并扩散，抗原抗体直接发生免疫沉淀反应，洗脱游离抗体，形成抗原抗体复合物保留在凝胶中。

经漂洗和染色，参考泳道和抗原抗体沉淀区带被着色，根据电泳移动距离分离单克隆组分，可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。

临床应用：目前广泛应用于迁移率相近的蛋白和M蛋白，免疫球蛋白轻链，尿液、脑脊液等中的微量蛋白，游离轻链，补体裂解物等的鉴定。

临床上最常用于M蛋白的简单。

8．荧光免疫试验的组成要素荧光物质、荧光显微镜、荧光素-抗体结合物9．免疫试验的类型和方法（不确定）类型：间接免疫荧光试验、流式免疫荧光试验、时间分辨荧光免疫试验、荧光偏振免疫试验方法：双抗体夹心法、固相抗体竞争法、固相抗原竞争法10．简述酶免疫技术的分类酶免疫技术按实际用途，分为酶免疫组化和酶免疫测定俩大类。

按抗原抗体反应后是否需要将结合的和游离的酶标记物分离，分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定，异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。

11．简述双抗体夹心法的原理连接于固相载体上的抗体和酶标记抗体，与待检测抗原上俩个不同的抗原决定基结合，形成固相抗原-抗体-酶标记复合物。

由于反应体系中固相抗体和酶标记抗体的量相对于待检抗原是过量的，因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。

测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量，即可确定待检抗原量。

12．简述ELISA的基本原理、方法类型及应用。

基本原理：抗原和抗体预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品（含待测抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原抗体复合物；用洗涤的方法将固相抗原抗体-酶复合物与其他成分分离，结合在固相载体上的酶量与标本中待测物质的量呈一定比例；加入酶反应底物后，底物被固相载体上的酶催化生成有色产物，产物的量与标本中待测物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。