安捷伦高效液相色谱1100工作站高级操作培训
安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训
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编辑一个完整的方法
使用 Edit Entire Method 编辑一个完整的方法
单击图标，也可以开始 编辑一个完整的方法。
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选择所要编辑的内容
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方法信息 (Method Information)
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泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
HPLC 1100 ChemStation 高级操作培训
HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 上午： 1 2 3 4 课程简介及相互介绍 化学工作站各个工作界面介绍 完整方法的编辑、修改、存储及运行 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
下午：1 数据分析参数设置 2 色谱图的优化处理 3 积分事件及手动积分的选择和应用 4 高级校正表的编辑和设置 第二天 上午：1 报告格式的选择及设定 2 光谱的提取、光谱库的建立及检索 3 色谱峰纯度检测 4 色谱条件的优化及色谱图的提取 下午：1 序列参数的设置以及统计功能的使用 2 批处理功能的设置及应用
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Sample Signal and Reference Signal:
设置样品吸收波长与参比波长遵从下列规则：
•样品吸收波长选择在样品的最大吸收波长，而且在此吸收波长下没有流动相吸收的 干扰。 •选择样品信号的谱带宽度应覆盖样品吸收谱带的半峰宽（假设样品吸收谱带为高斯 峰）。
•参比吸收谱带应选择在尽量靠近样品吸收谱带，而且在此区域没有或尽量低的吸收 强度。
安捷伦1100培训手册
No.24
第二章 HPLC 仪器工作原理
本章内容：
•往复活塞泵的结构及工作原理 •手动进样器（六通阀）结构及工作原理 •常见检测器检测原理
No.25
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
Gold Seal Sapphire Insert Ruby Ball Spring Insert
60℃
0
5 Time in Minutes
10
No.14
柱效
Detector Response Inject
低柱效
高柱效
Time
No.15
计算柱效
tR
Inject
W 1/2
W Time
B
N = 16
t R WB L N
2 = 5.54
t R W 1/2
2
HETP =
No.16
扩散
范德姆特方程 The Van Deemter Equation
150 4.0
100 3.0 2.0
50
1.0
10
No.6
高效液相色谱 (HPLC)
进样口 混合器 泵 色谱图 色谱柱
检测器
溶剂
No.7
液相色谱类型
Types of Compounds Separated Neutrals Weak Acids Weak Bases
Mode
Stationary Phase
No.31
Necessity for More than One Detector
Selectivity
Flecainide in Serum
Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定文件名，单击“OK”，此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新文件命名，单击“OK”。
Agilent 1100 HPLC高效液相操作简要 Operational Guide
Agilent 1100 HPLC高效液相色谱仪操作简要!准备"如果配有柱塞清洗装置，确认柱塞清洗（Sealwash）管路充满10％的异丙醇。
"避免使用腐蚀性的流动相与溶剂；过滤流动相；使用高纯水；使用的流动相要互溶。
"过滤流动相，如果没有脱气机还需要对流动相进行脱气。
"过滤样品溶液!开机"打开计算机，进入windows操作系统"运行Bootp（如果是Windows 2000, Bootp将自动运行），注意：在工作站工作过程中，不能关闭Bootp。
"打开1100系统各模块的电源"待Bootp识别硬件地址后（可以看着是仪器的自检，此过程约需20秒），运行Chemstation的instrument 1 online。
!分析"建立用于样品分析的Method，请参照现场培训手册。
1．从快捷工具栏中选中Method and Runcontrol或从菜单View中选中Method and Run Control。
2．从method菜单中选New Method。
3．从method菜单中选edit entire method。
4．按提示编辑适合分析你所分析样品的方法。
5．最后通过method菜单选择save method as保存方法。
"通过Method对样品进行分析，请参照培训手册#对于单个样品1．在Method and Runcontrol视图下，调用或建立一个适合所分析样品的方法。
2．在RunControl菜单下点Sample Info，在Sample Info表单里填上所分析样品的信息。
3．在快捷工具栏中选单个样品进样的图标。
4．按start开始一个分析。
5．停止分析，可以是根据方法的设定的时间自动停止分析，也可以通过点stop停止分析。
#对于多个样品建立序列1．在Method and Runcontrol视图下，从sequence菜单下点new sequence 建立一个新的序列。
Agilent 1100高效液相色谱仪标准操作规程
1 目的规范Agilent 1100高效液相色谱仪的操作程序。
2 范围适用于Agilent 1100高效液相色谱仪的使用。
3 责任仪器负责人负责本规程的实施。
4 内容4.1系统组成Agilent 1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等部件组成。
4.2开机前准备4.2.1根据实验要求配制流动相，经0.45μm滤膜过滤，超声3～5min。
4.2.2配制对照品溶液和样品溶液（也可在平衡系统时配制），经0.22μm微孔滤膜过滤。
4.3开机4.3.1打开计算机，进入Windows系统。
打开各模块电源（不分先后），待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标进入在线工作站。
4.3.2轻轻旋开purge阀，点击泵图标，单击“设置泵”选项，设流速：5ml/min，单击“确认”；单击“控制”选项，选中“启动”，单击“确认”，则系统开始purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续purge，直到所有待用通道无气泡为止。
4.3.4排气完毕后，单击“控制”选项，选中“关闭”，单击OK，再轻轻旋紧purge 阀。
单击“设置泵”选项，设流速：1.0ml/min（方法所需流速），单击确认。
4.3.5单击泵下面的溶剂瓶图标，点击“溶剂瓶填充量”选项输入溶剂的实际体积和瓶体积，也可输入停泵的体积，单击确认。
4.4数据采集方法编辑4.4.1从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击确认，进入“方法注释”中加入方法的信息（如：方法的用途等），单击确认。
4.4.2进入泵参数设定，设定“流速”、“流动相”、“运行时间”、“压力上限”等参数，按方法需求编辑梯度洗脱程序，单击确认。
4.4.3进入自动进样器参数设定，选择“洗针进样”，输入进样量、清洗瓶位置（100号位）4.4.4进入DAD检测器参数设置。
样品吸收波长按方法要求设定，可选择多波长。
安捷伦HPLC1100培训资源1Overview
安捷伦HPLC1100培训 资源1Overview
2020/8/8
优化流路减小死体积 流路自上而下
溶剂柜 脱气机
泵
自动进样器 柱温箱
检测器
手执控制器
每个部件接通电源后 LED灯显示绿色
6种LED仪器状态：
关机 power off 准备进样 power on 没准备好Not Ready 运行Run 故障Error 驻留Resident
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
280（220） 285
在使用紫外检测器时，所 用波长与所用溶剂的截止 波长接近（或低于截止波 长）时，容易产生噪音干 扰，从而影响检测结果。
所以在使用紫外检测器时 ，所用波长应至少比所用 溶剂的截止波长大20nm以 上。
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的 最大吸收峰的强度和位置。
进入Windows系统后Bootp Server自动运行，电击将 Bootp Server窗口最大化， 开启仪器电源后上面会出现 七行通讯信息记录，表明工 作站通讯成功，可以进入 Agilent化学工作站。
注意：不能关闭Bootp Server窗口，只能最小化， 否则将影响工作站通讯。
生色团 羰基（酮） 羰基醛 羧基 酰胺 次乙基 亚次乙基 睛 硝基
分子式 RR‘C=O RHC=O RCOOH RCONH2 RCH=CHR RC=CR RC=N RNO2
实例 丙酮 乙醛 醋酸 乙酰胺 乙烯 乙炔 乙睛 硝基甲烷
最大吸收波长（nm） 271 293 271 208 193 173 <160 271
Blink
黑Black 黑Black 黄Yellow 绿Green 红Red 黄闪烁Yellow
GAgilent 1100制备液相现场培训教材
Agilent 1100 LC制备液相 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部 一、 培训目的： ● 基本了解１１００ＬＣ硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定，学会数据采集，数据分析的基本操作。
二、 培训准备： １、仪器设备： Ａｇｉｌｅｎｔ １１００制备液相 ● Ｇ１３６１Ａ ：（单元泵）；Ｇ１３９１Ａ（梯度泵）。
● Ｇ１３１３Ａ（自动进样器）。
● Ｇ１３１６Ａ（柱温箱）。
● Ｇ１３１５Ａ／Ｂ （ＤＡＤ／ＭＷＤ检测器）。
● Ｇ１３６４Ａ／Ｂ／Ｃ／Ｄ（馏份收集器）。
● 色谱柱： ２、溶剂准备： ● 色谱级纯或优级纯乙腈（ＡＣＮ）或甲醇。
● 二次蒸馏水 第 2 页基本操作步骤： （一）、开机： １、打开计算机，进入Ｗｉｎｄｏｗｓ ＮＴ （或Ｗｉｎｄｏｗｓ ２０００）画面，并运行Ｂｏｏｔｐ Ｓｅｒｖｅｒ程序。
２、打开 １１００ ＬＣ 各模块电源。
３、待各模块自检完成后，双击Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ １ Ｏｎｌｉｎｅ图标，化学工作站自动与１１００ＬＣ通讯，进入的工作站画面如下所示。
４、从“Ｖｉｅｗ”菜单中选择“Ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ Ｒｕｎ ｃｏｎｔｒｏｌ”画面， 单击”Ｖｉｅｗ”菜单中的“Ｓｈｏｗ Ｔｏｐ Ｔｏｏｌｂａｒ”，“Ｓｈｏｗ ｓｔａｔｕｓ ｔｏｏｌｂａｒ”，“Ｓｙｓｔｅｍ ｄｉａｇｒａｍ”，”Ｓａｍｐｌｉｎｇ ｄｉａｇｒａｍ”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
５、把流动相放入溶剂瓶中。
６、打开Ｐｕｒｇｅ阀。
（工作站软件上打开Ｐｕｒｇｅ阀） ７、单击Ｐｕｍｐ图标，出现参数设定菜单，单击Ｓｅｔｕｐ ｐｕｍｐ选项，进入泵编辑画面。
８ 、设Ｆｌｏｗ：５ｍｌ／ｍｉｎ，单击ＯＫ。
９、单击Ｐｕｍｐ图标，出现参数设定菜单，单击Ｐｕｍｐ ｃｏｎｔｒｏｌ选项，选中Ｏｎ，单击ＯＫ，则系统开始Ｐｕｒｇｅ，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续Ｐｕｒｇｅ，直到所有要用通道无气泡为止。
AgilentHPLC1100ChemStation高级操作培训(安捷伦科技公司)
2020年9月25日
授课教师 纪学海
2005-3-212020/9/25
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HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 第二天
上午： 1 课程简介及相互介绍 2 化学工作站各个工作界面介绍 3 完整方法的编辑、修改、存储及运行 4 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
进样和运行位置
2005-3-212020/9/25
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标准自动进样器的程序进样
2005-3-212020/9/25
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Wellplate自动进样器参数
2005-3-212020/9/25
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柱温箱参数设置
控温范围：低于室温10℃～80℃ 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次 数
从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
2005-3-212020/9/25
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第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 的所有参数。
•方法文件名：xxx.m。
•方法的组成： 方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
2005-3-212020/9/25
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化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
安捷伦HPLC1100培训资源3_Runcontrol
输入(shūrù)发射波
长 输入激发波长
波长编程表
18
共二十七页
Author：Tianyou Yue
输入控制温度
柱温箱
画面(huàmiàn)6：恒
温柱箱参数设置
温度编程表
控温范围：低于室温10℃～80℃
两个(liǎnɡ ɡè)单独的加热区。
安装切换阀可以进行柱切换。
可以容纳30 cm长色谱柱。
柱子的内径（5um填料） 4.6 3.0 2.1 1.0
流速（ml/min） 1-2
0.4-0.8 0.2-0.4 0.05-0.09
设置柱子流速时，要注意观察系统压力，一般来 说在满足分析的前提下使系统维持比较低的压力 对仪器(yíqì)是非常有好处的。
10
共二十七页
Author：Tianyou Yue
2
共二十七页
Author：Tianyou Yue
面对(miàn duì)工作站，我该怎么办 ？
What should I do？
3
共二十七页
Author：Tianyou Yue
如何运行(yùnxíng)样品
4
共二十七页
Author：Tianyou Yue
调用(diàoyòng)方法
在Method中点击(diǎn jī)Load
选择所要编辑(biānjí)的内容
画面1:方法(fāngfǎ)组成
方法信息
仪器控制与数据采集
数据分析 运行时间表
共二十七页
在你想要的部分前选中,否则方法里将不 包括该部分的内容。比如本方法不包括 数据分析的内容。
7
Author：Tianyou Yue
方法(fāngfǎ)信息 (Method Information)
Agilent1100色谱工作站操作培训课件 共42页
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
手动进样器
样品定量管
前视图
后视图
流路连接
安捷伦广州培训中心 于保生
样品回路 废液
排空管 样品回路 到色谱柱 来自泵出口
20.07.2019
自动进样器
步骤1
步骤2
步骤3
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
混合器 泵
HPLC 结构框图
打开View 菜单下的Online Signal 窗口，单击Change 键，选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、 Y轴范围，观测色谱基线；
基线稳定后可以进样分析（经验上，基线波动1~2m AU（常规分析）或~0.5mAU（痕量分析）就可算 是基线稳定。）
填写Sample Information
Holographic Grating
安捷伦广州培训中心 于保生
20.07.2019
单元泵工作原理
单元泵工作原理
Outlet Ball Valve
Damper Purge valve
Active Inlet Valve
Seal
Piston
Ball Screw Drive
Authoring Division Name File Name Security Notice (if required)
7.6
7.8
8.0
8.2
8.4
Time (min)
Purity Match 999
Purity Match 764
200
Wavelength (nm)
400
200
Wavelength (nm)
安捷伦液相高级操作培训课件
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
2005-3-212020/3/28
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文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
2005-3-212020/3/28
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
第一章 化学工作站各个工作界面介绍
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
2005-3-212020/3/28
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2005-3-212020/3/28
安捷伦高效液相1100中文教程
安捷伦1100中文教程★huyuchem(金币+1):鼓励一、培训目的：● 基本了解1100LC硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、培训准备：1、仪器设备：Agilent 1100LC● G1310A 单元泵)；G1312A(二元泵)；G1311A(四元泵)。
● G1313A（自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1314A（VWD检测器）。
● G1362A（示差检测器）。
● G1315A/B (DAD检测器)。
● G1321A (FLD检测器)。
● 色谱柱: Zorbax eclipse XDB C8,150mm×4.6mm i.d。
2、溶剂准备：● 色谱级纯或优级纯乙腈（ACN）或甲醇。
● 二次蒸馏水基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online图标，化学工作站自动与1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
7、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Setup pump选项，进入泵编辑画面。
8 、设Flow：5ml/min，单击OK。
9、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100 高效液相色谱仪操作规程1. 仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100 高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及工作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations进入Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成：最上方为命令栏，依次为File,Run Con trol,I nstrume nt等；命令栏下方为快捷操作图标，由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等；左边为样品信息栏；中部为工作站各部件的工作流程示意图，依次为进样器一输液泵一柱温箱一检测器一数据处理一报告；中下部为动态监测信号；右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2. 色谱条件的设定（色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等，单击一下，即可显示该参数的设置页面，键入设定值后，单击“0K，即完成。
2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下，选择“LoadMethod ”或直接单击快捷键操作的“LoadMethod ”图标，选定文件名，单击“0K,此时，工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改，则可同2.1项下，在色谱工作参数中作修改；亦可在命令栏“Method T，选择“Edit Entire Method ”，在每个页面中键入设定值，单击“OK。
即完成。
2.3编辑新文件先在命令栏“ Method下，选择“ NewMethod”之后再在命令栏“ Method下，选择“Edit Entire Method，在每个页面中键入设定值，完成后，Save Method ”先在命令栏“Method下选择“Save Metho*给新文件命名，单击“OK。
Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程
使用梯度比例时的注意事项
当盐溶液与有机溶剂溶液混合时盐溶液能与有 机溶剂溶液完全混溶而不会出现沉淀。
由于在比例阀的混合点重力作用使盐颗粒沉淀 下来通常阀A接水相/盐溶液D接有机溶剂此法 连接可有效使盐回落到盐溶液中并被溶解若颠 倒过来盐可能落在有机溶剂中出现问题
当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时推荐将缓冲盐 通道接在A通道上有机溶剂通道直接接在A通 道的上方D通道上定期用水冲洗所有的通道以 除去阀口上可能出现的盐沉淀
Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程
溶剂架 在线脱气
Purge阀
溶剂瓶 泵
自动进样器
柱温箱 检测器
仪器各组件
泵 ：四元泵、二元泵 在线脱气器 进样器：自动进样器及手动进样器 柱温箱 检测器： DAD检测器、UV检测器
Agilent1100在线脱气机
Agilent1100在线脱气机工作原 理
在Method Comments 中加入方法的信息如方 法的用途等
泵参数设定
在Flow 处输入流量, 在Solvent A、B、C、D 处输入比例，也可Insert一 行”Timetable” ,编辑梯度，在Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高 压。单击Ok进入下一画面
standardinjection只能输入进样体积injectionneedlewash可以输入进样体积和洗瓶位臵此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针useinjectorprogram可以点击edit点击ok进入下一画面22232425在wavelength下方的空白处输入所需的检测波长如254nm在peakwidthresponsetime下方点击下拉式三角框选择合适的响应时间如01min2s在timetable中可以insert一行输入随时间切换的波长点击ok进入下一画面2627样品带宽bw一般选择最大吸收值一半处的整个宽度参比波长一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域参比带宽bw至少要与样品信号的带宽相等许多情况下用100nm作为缺省值peakwidthresponsetime其值尽可能接近选中所用的灯点击ok进入下一画面2829单击method菜单选中savemethod单击ok30选择已有方法
Agilent1100色谱工作站操作培训课件 PPT资料共42页
安捷伦广州培训中心 于保生
14.11.2019
一、标样 1
C标 A标
RF
二、样品
1′
A样
外标法
∵ CRF A ∴ ES样 T R D FA 样
ES样 TRD F A 样 k
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14.11.2019
一、标样
1 ISTD
二、样品
C标 C标内 A标 A标内 RF标 RF标内
平均/取代 平均/取代
平均/取代 平均/取代
平均/取代 平均/取代
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14.11.2019
5、校正设置（Calibration Setting）
样品单位 Amount units
校正曲线 Calibration Curve
类型Type 原点Origin 权重Weight
6、设定报告格式
工作站 系统初始化：（主要目的：排除系统中的气泡）；
打开Purge 阀； 加大泵流量并开启泵，快速冲洗实验所用的各个通道，至无气泡从废液管排出，（eg. 设A通道100%，5mL/min，冲洗A通道至无气泡
排出；再分别依次冲洗所需其余通道B、C、D等）； 降低流量及溶剂比例成实验初始条件，并单击OK确认执行；（eg. 实验二的条件Flow: 1.0mL/min，A：20% (H2O), B: 80% (MeOH)； 关闭Purge阀，完成系统初始化。
后运行 时间表
压力限
Posttime Timetable PressureLimits
大于溶剂的截止波长20nm以上 ≥Slit 尽量靠近样品的最大吸收
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安捷伦高效液相色谱1100工作站高级操作培训
Slide 54
自动积分
•检查开始和结束区域，确定噪音。 •赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. •对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 •设置Area Reject为0。 •执行测试性积分，有可能重复几次。 •基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 •优化Slope Sensitivity和Height Reject。 •从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。
Slide 17
标准自动进样器参数
Slide 18
标准进样过程原理示意图
Metering device
Sampling unit
6-port valve To waste
From pump To column
准备位置
抓取样品瓶 吸取样品 进样和运行位置
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标准自动进样器的程序进样
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谱图处理工具
谱图处理工具
Add Annotation Draw Line in Window Move Annotation Delete Annotation
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第四章 积分优化
本章内容：
•如何执行积分 •自动积分 •如何建立积分事件表 •如何使用积分事件表 •手动积分
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进样后，流动相流经流通池，给出 色谱基线信号时，点击More VWD 菜单中的Blank Scan，扫描空白流动 相的吸收光谱，如下图所示。
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可变波长检测器VWD的停泵扫描功能
扫描所得的流动相吸收光谱
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在线信号显示
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查看Logbook
从View菜单选择Logbook，单击Current Logbook 显示当前Logbook内容。
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第二章 方法编辑、保存
•方法的概念：方法是一个参数集，它包括分析一个样品所需要 的所有参数。
•方法文件名：xxx.m。 •方法的组成：
单击本图标可以 保存方法，务必 注意不要发生方 法覆盖、丢失
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标准自动进样器参数
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标准进样过程原理示意图
Metering device
Sampling unit
6-port valve To waste
From pump To column
准备位置
抓取样品瓶 吸取样品 进样和运行位置
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标准自动进样器的程序进样
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第一章 化学工作站各个工作界面介绍
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
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化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
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Sample Signal and Reference Signal:
设置样品吸收波长与参比波长遵从下列规则：
•样品吸收波长选择在样品的最大吸收波长，而且在此吸收波长下没有流动相吸收的 干扰。 •选择样品信号的谱带宽度应覆盖样品吸收谱带的半峰宽（假设样品吸收谱带为高斯 峰）。 •参比吸收谱带应选择在尽量靠近样品吸收谱带，而且在此区域没有或尽量低的吸收 强度。 •参比峰谱带宽度要大于或等于样品谱带宽度。 注意：增加样品谱带宽度，会降低样品的吸收强度，但会降低噪音。
Wellplate自动进样器参数
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柱温箱参数设置
控温范围：低于室温10℃～80℃ 两个单独的加热区 安装切换阀可以进行柱切换 可以容纳30 cm长色谱柱 安装柱识别可以自动记录进样次 数
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DAD检测器参数设置
可以选择存储 5 个信号 信号波长范围 191 - 949 nm 可变狭缝： 1, 2, 4, 8, 16 nm 可以时间编程 可以保存数张或所有光谱
单击图标，也可以开始 编辑一个完整的方法。
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选择所要编辑的内容
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方法信息 (Method Information)
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泵的操作参数
包括：流量(Flow)，流动相组成(Solvents)，停止采集时间(Stop Time)，后运 行时间(Post Time)，梯度编程(Timetable)，压力限制设定(Pressure Limits)等
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DAD参数优化
Step and Slit:
Agilent 1100 DAD 狭缝宽度可以程序变化，变化步径1，2，4，8，16nm。如果样 品浓度较高，而需要精细的光谱结构，建议使用1或2nm的狭缝宽度。如果样品浓 度较稀，建议使用8或16nm宽度狭缝。采集样品的谱带宽度至少要与狭缝宽度一 样。
选择合适的参比吸收波长可以减小梯度洗脱过程中的基线漂移。
Peak Supression（峰抑制）:
DAD检测器一个非常有趣的功能是进行峰抑制。例如有两个样品没有分开，共同洗 脱出来，可以设置某一个样品的等吸收波长为参比波长，则被设为参比峰的样品被 抑制，而另一个样品峰被分离。不过，此样品峰的吸收强度要损失10％～30％。
上午：1 报告格式的选择及设定 2 光谱的提取、光谱库的建立及检索 3 色谱峰纯度检测 4 色谱条件的优化及色谱图的提取
下午：1 序列参数的设置以及统计功能的使用 2 批处理功能的设置及应用
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
HPLC 1100 ChemStation 高级操作培训
HPLC 1100 Advance操作培训日程安排
第一天 第二天
上午： 1 课程简介及相互介绍 2 化学工作站各个工作界面介绍 3 完整方法的编辑、修改、存储及运行 4 HPLC 1100 仪器配置及参数设置
下午：1 数据分析参数设置 2 色谱图的优化处理 3 积分事件及手动积分的选择和应用 4 高级校正表的编辑和设置
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化学工作站Scheduler的使用
使用时要注意保存，否则工作 站不予以执行。
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化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示学工作站执行 Command的结果
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
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VWD检测器参数设置
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运行时间表(Run Time Checklist)
选择在方法中要执行的项目 可以选择保存GLP数据 可以将方法和数据保存在一起
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存储方法
从Method菜单选择Save Method / Save Method as或从存贮方法 工具图标存贮方法。
方法信息(Method information) 仪器参数及采集参数(Instrument/Acquisition) 数据分析参数(Data Analysis) 运行时间表(Run Time Checklist)
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编辑一个完整的方法
使用 Edit Entire Method 编辑一个完整的方法
Peak Width:
增加响应时间（峰宽）可以增加组成色谱信号中每个数据点的采集次数。因为检 测器的噪音与采集次数平方根成反比，所以增加响应时间可以降低噪音。但增加 响应时间（峰宽）会降低定量分析的重复性。一般对于精确的定量分析，一个色 谱峰要求采集20个数据点。设置峰宽的经验：设置峰宽等于实际色谱峰的最窄峰 宽。