中药质量标准制定的新方法精品PPT课件

6 特征指纹图谱各色谱峰面积比值范围的确定 根据10个以上产地不同的合格样品(或同一
产地不同等级的样品)的分析结果，制定特征 色谱峰的峰面积比值范围。
7. 原料药与注射剂指纹图谱之间相关性的研究
为了确保制备工艺的科学性和稳定性，应根原 料药和注射剂的指纹图谱，研究二者之间的相关 性。可采用加入某种原料药的供试品或制备某一 原料药的阴性样品的方法，研究二者之间的相关 性。
中药生物指纹图谱包括中药材DNA指纹 图谱和研究中的中药基因组学指纹图谱、中 药蛋白组学指纹图谱。
(二）中药指纹图谱按测定手段分类 2. 中药生物指纹图谱
中药基因组学图谱和中药蛋白组学指纹 图谱系指用中药制剂作用于某特定细胞或动 物后，引起的基因和蛋白的复杂的变化情况， 这两种指纹图谱可称为生物活性指纹图谱。
四、 研究实例
决明子HPLC指纹图谱的研究
1. 仪器条件 色谱柱: SunfireTM C18柱(4. 6
mm×150 mm，5μm)；流动相:乙腈-0. 1%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速: 0. 8 mL/min，检测波长: 280 nm；柱温： 30℃。梯度洗脱条件见表1。
1. 仪器条件
2. 供试品溶液的制备
二. 中药指纹图谱的分类
(二）中药指纹图谱按测定手段分类 1. 中药化学（成分）指纹图谱 2. 中药生物指纹图谱。
(二）中药指纹图谱按测定手段分类 1）中药化学（成分）指纹图谱定义
中药化学（成分）指纹图谱系指采用 光谱、色谱和其他分析方法建立的用以 表征中药化学成分的特征的指纹图谱。
(二）中药指纹图谱按测定手段分类
三.高效液相色谱法制定中药特征指纹图谱 的方法与技术要求
（一）用HPLC法建立特征指纹图谱的 方法学考察
1 样品处理方法考察 1）样品提取方法、提取溶剂、纯化方法等 考察。应选择提取率高、操作简便的提取、 纯化方法。 2）考察10份以上同一批号的样品，要求10 份样品的指纹图谱完全一致，特征色谱峰面 的RSD%不得大于5%。
3 特征指纹图谱的精密度考察
将同一份样品，连续进样5次，所得特 征指纹图谱的各色谱峰的峰面积的 RSD% 不得大于 5%，各色谱峰的相对 保留时间应在平均保留时间± 1 min内。
5 特征指纹图谱的稳定性考察
取同一份样品,分别在0，1，2，4，8， 12，24，36，48小时测定，以特征指纹 图谱峰面积和相对保留间为指标，考察 样品的稳定性。
（三） 中药指纹图谱的定义
• 中药指纹图谱：是指中药经过适当的处 理后，采用一定的分析手段，得到的能 够标示该中药特性的共有峰的图谱。
二. 中药指纹图谱的分类
(一）.中药指纹图谱按应用对象分类: 1. 中药材(原料药材)指纹图谱。 2. 中药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指 纹图谱。 3. 中药制剂指纹图谱。
• 2. 无论是中药材，还是复方制剂，从现 代科学观点来看，均是复杂体系。
• 3. 对于复杂体系必须采用多种高新科技 来表征其不同的特性。
（二）. 中药指纹图谱提出的背景
• 4. 现行的中药质量标准中列入了显微鉴 别、理化鉴别、含量测定等多种方 法，尚且不足。
• 5. 国际上目前较通用指纹图谱法。
8 确证特征色谱峰的化合物结构
采用色谱方法分离特征性成分，采用UV、 IR、NMR、MS等光谱、波谱方法鉴定化 合物的结构，提高指纹图谱的可信度。
9 对药材基源的要求 对于多来源的中药材品种，由于不同
品种的药材，其所含的成分和杂质有一定 的区别，在目前中药成分尚不十分明确的 状况下，建议中药注射剂所用的药材固定 一个品种，确保中药注射剂的稳定性安全 性。-------GAP
（一）用HPLC法建立特征指纹图谱的 方法学考察
2 特征指纹图谱确定 1)确定特征指纹图谱必须具有充分的代 表性和特异性，至少对10个产地以上不 同等级的样品进行分析，或对同一产地 不同规格的10批以上的样品进行考察。
（一）用HPLC法建立特征指纹图谱的 方法学考察
2 特征指纹图谱确定
2) 对10批以上的样品进行考察，从中归纳 出各批合格样品所共有的、峰面积相对稳定 的色谱峰作为指纹峰。所选取色谱峰的组合 必须具备特异性，对于原药材多来源的品种， 必须考察种间的特异性。
1. 中药化学（成分）指纹图谱
2）中药化学（成分）指纹图谱制定技术
光谱最常用的是红外光谱（ IR ）。 色谱最常用的是薄层色谱（TLC）、气相色谱 ( GC )、高效液相色谱( HPLC )和毛细管电泳 ( CE )。 其他方法包括波谱和联用技术。 中药化学指纹图谱首推色谱方法和联用技术。
3）几种色谱指纹图谱方法的优缺点
TLC 法简便易行，但提供信息量有限， 很难反映几十种、上百种化学成分组成的 复杂体系。
GC 法适用于挥发性化学成分。
3）几种色谱指纹图谱方法的优缺点
HPLC 适用于非挥发性成分，中药中大 部分化学成分均可用HPLC法得出良好的指 纹图谱。
CE 适用于大部分化学成分，特别是生 物大分子——肽和蛋白的分离，但其重现性 有待提高。
• 取决明子药材粉末(20目) 0. 5 g，精密 称定，置锥形瓶中，加甲醇 50 mL，称 重，回流处理 60 min，放冷，称重，用 甲醇补足减失的重量，摇匀，0. 45μm微 孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
3）几种色谱指纹图谱方法的优缺点
联用技术是最有效的建立指纹图谱的方法， 如GC/MS，HPLC/MS，HPLC/MS/MS等可大 量提供各种信息，符合解决中药复杂体系的要 求，但仪器价格昂贵。不易推广使用。
总之，目前使用最多的中药化学指纹图谱 是用HPLC方法。
(二）中药指纹图谱按测定手段分类 2. 中药生物指纹图谱
中药质量标准制定的新方法 中药的指纹图谱控制技术
中药的指纹图谱控制技术
一、概述 二、中药指纹图谱的分类及研究思路 三、高效液相色谱法制定中药特征指纹 图谱的方法与技术要求 四、应用示例
一、概述 （一）. 问题
• 双黄连注射液事件
（二）. 中药指纹图谱提出的背景
• 1. 中药材和中药复方制剂能发挥治疗效 果的物质基础是其化学成分。