用于防治水产养殖水霉病的组合物及其设备制作方法与制作流程

本技术提出了一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸，此外，本技术还提出了其制备方法。

本技术提出的技术方案原料安全、生态、水霉病防治效果良好，对水霉病治愈率90％以上，对鳃霉的治愈率60％以上，在较少的用料种类和较低的用料量下，取得了不错的防治效果，是一种目前为止防治水霉病的组合物，带来了良好的经济效益，同时，泼洒的成本约为0.3～0.4元/hm2，浸浴约0.5元/m3水体，成本比美婷要低，与孔雀石绿基本相当，可以为生产所接受。

权利要求书
1.一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，其特征在于，包括如下质量百分含量的组分：20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，包括如下质量百分含量的组分：
25％的苦参粉末，15％的五倍子粉末，20％的水杨酸，40％的硼酸。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述苦参粉末的大小为50～100目。

4.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述五倍子粉末的大小为50～100目。

5.一种用于防治水产养殖水霉病的组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
先将苦参和五倍子进行粉碎，过50～100目筛备用，然后按比例将苦参粉末、五倍子粉末、水杨酸以及硼酸混合均匀即可，其中水杨酸和硼酸达到工业级要求即可。

技术说明书
一种用于防治水产养殖水霉病的组合物及其制备方法
技术领域
本技术属于动物医药领域，特别涉及一种用于防治水产养殖水霉病的组合物及其制备方法。

背景技术
长期以来，水霉病的防治是水产养殖病害防治中最棘手的一个难题，养殖动物患了真菌性疾病很难治愈。

以往较为有效的防治药物为孔雀石绿，但自2002年起我国开始禁用孔雀石绿，导致水霉病的有效防治药物长期处于空白，从而使得在养殖生产上对该病的防治遇到了极大的困难，而孔雀石绿的屡禁不止也给水产食品安全带来了极大的隐患。

水霉病又称肤霉病、白毛病，属真菌性鱼病，一年四季都可发生，尤其是在早春和晚冬，水温15～20℃时发病最严重。

据统计，在118种生物源性疾病中，真菌性疾病占4.24％，其中主要是水霉病。

据报道青鱼、草鱼、鲢、鳙、花鲈、红点鲑、鲤、大银鱼、斑点叉尾鮰、大鲵、黄鳝、暗纹东方鲀、月鳢、鲑、黑鱼、中华绒螯蟹、中华鳖、牛蛙等大部分水产养殖动物都有可能发生水霉病。

水霉病主要症状是：病变部位长着大量白色的棉絮状菌丝，鱼体由于负担过重，游动失常，食欲减退，甚至会瘦弱而死。

由于霉菌侵入机体，产生大量蛋白酶，病变部位在酶的作用下，分解鱼体组织中的蛋白，使鱼体受到刺激，分泌大量粘液。

病鱼因此焦躁不安，食欲减退，最终死亡。

感染水霉菌的卵，内菌丝侵入卵膜，卵膜外丛生大量外菌丝，因此常被称为“卵丝病”。

而被寄生的卵因外菌丝呈放射球状，故又称为“太阳籽”。

该病的病原主要是水霉(Saprolegnia spp.)，它对环境有很强的适应能力。

水霉菌以孢子的形
式繁殖，在菌丝的末端形成孢子囊，释放产生具有双鞭毛的游动孢子，在水体中自由游动，传播速度迅速。

在环境条件不良的情况下，能产生厚垣孢子，大大提高其生存能力。

水霉菌分布于全世界，是淡水水域中常见的种类，国内外都很普遍。

早在1894年一些水生真菌就已被公布，例如，Leraonniere aquatica。

1942年Ingodian开始对真菌(被称为Ingodian真菌)进行了对比性研究，并在同年公布了16个种类。

此后，Ingodian真菌得到重视，至1997年累积记录达到约300种。

目前，水生动物水霉菌指的是卵菌纲水霉目水霉科(Saprolegniaceae)的一些种类，主要包括水霉属(Saprolegnia)、绵霉属(Achlya)、丝囊菌属(Aphanomyces)等。

但它们的种类不是很详细，主要由于真菌的分类鉴定比较难。

水霉菌是腐生性的，极易感染。

在换水或搬运时造成鱼体体表受伤，局部皮肤坏死。

活细胞因能分泌一种抗霉性的物质，一般不会感染水霉。

水霉病是淡水鱼类的常见病，以往的防治药物主要为孔雀石绿，但自禁用孔雀石绿以来，目前尚未找到既安全又理想的替代药物进行治疗。

对于水霉病的治疗处于摸索与探索阶段，主要的防治方法有以下几类：
1、抗生素
廖永岩等2001年研究了制霉菌素，达克宁，里劳素等抗真菌药一对远海梭子蟹离体卵孵化及幼体培育的影响。

袁万安等2004年研究了抗真菌药物对鱼类鳃霉病的防治效果。

用三种抗真菌药物霉病力克、酮康唑、硫酸铜对患有鳃霉病的鲤鱼进行浸泡治疗，每天早晚各一次，浸泡一周。

同时用间接免疫荧光法(IIF)观察霉菌孢子在鱼体上皮细胞(FEC)粘附情况，用电泳法分析霉菌孢子内的生化反应。

结果显示，用霉病力克处理组的效果最好，试验表明霉病力克具有抗鳃霉菌和抑制鳃霉菌孢子粘附的双重作用。

但是此类药物很多是人药或者畜禽用药，使用量大，成本高，残留量高，对环境有破坏作用，增加了养殖风险。

2、氧化剂、防腐剂
特种水产动物饲养中使用福尔马林治疗水霉病，但安全有效的药量难于掌握，容易产生药
害。

目前尚未找到既安全又理想的替代药物进行治疗。

张繁荣1999年以高锰酸钾和福尔马林溶液为试剂，进行了不同浓度和不同浸洗频率，防治大银鱼卵水霉病试验，高锰酸钾和福尔马林溶液对水霉发生有较强的抑制作用，随浓度升高，其抑制作用加强，但不能彻底根除水霉。

结果表明，浓度为15.0mg/L的高锰酸钾和浓度为200.0mg/L的福尔马林溶液对水霉病有很强的抑制作用，且对其出苗率没有显著影响。

高鹏等2007年分别使用高锰酸钾、三氯异氰尿酸(强氯精)、苯扎溴铵、甲醛、聚维酮碘、戊二醛等6种水产常用消毒剂，对水霉游动孢子及菌丝进行了体外作用效果试验。

结果表明：甲醛在浓度18.8mg/L以上时对水霉游动孢子有明显的抑制作用；当浓度在24mg/L浸泡2h以上时开始对水霉菌丝有杀灭效果。

其它5种消毒剂对水霉孢子的抑制浓度、对水霉菌丝的杀灭浓度远高于实际生产安全浓度。

张家松等2006年在发病鱼的池塘，用4％二硫氰基甲烷以每立方米养殖水体0.3～0.4mL，全池均匀泼洒，取得了很好的效果。

粘性鱼卵在池塘孵化时，用4％二硫氰基甲烷溶液以每立方米水体0.15～0.2mL的剂量浸洗消毒10～15min，连用2d，可减少水霉感染。

Marking等用过氧化氢(Hydrogen peroxide)500～1000ppm浸浴1h可治疗水霉病。

Rogers用过氧化氢(Hydrogen peroxide)1:4000(250ppm)浸浴1h或1：600、1:480(1600～2 000ppm)浸浴15min可治疗鲶鱼鱼卵的水霉病。

Piper等用与Rogers同样的方法治疗鲑鳟鱼鱼卵的水霉病。

但是这些方法不但杀灭不彻底，在浓度过低或者水体COD较高的情况下，易出现反复。

上海水产大学杨先乐教授开发的复方立达霉粉(美婷)，其主要成分的组成是纯天然的植物生长调节剂、用于食品防腐剂和用于日用化妆品的防霉、防腐剂的生化黄腐酸，具有增强机体免疫的功能，对人类是安全的。

经试验它不会对环境产生任何副面作用，一定程度上还可促进有益菌群和水体中的藻类、浮游生物的生长。

在使用成本方面，防治鱼类的水霉病，泼洒的成本约为0.4～0.47元/hm2，浸浴约0.7元/m3水体，与孔雀石绿基本相当，基本可以为生产所接受。

目前，“美婷”制剂已获得国家四类新兽药证书，并由长沙拜特生物科技研究所有限公司进行生产销售。

但随着2008年以来的生产性扩大试验，生产实际中反应已经出现耐药性。

3、重金属药物
刘杏忠等1998年研究了几种重金属离子(Hg2+，cd2+，Cu2+，Ni2+，Zn2+，Pb2+)对一些水霉生长和繁殖的毒性。

结果表明：重金属离子对水霉的产孢比对水霉本身的生长毒性
大，Hg2+和Cd2+对水霉的生长毒性最大，Ni2+和Cu2+次之，Zn2+和Ph2+最小，而对水霉产
孢毒性最大的是Cu2+，其次是Hg2+、Cd2+、Zn2+和Pb2+毒性最小。

不同菌的生长和繁殖对重金属离子的反应也有所差异。

但是重金属类在环境中蓄积比较大，影响水产品食品安全，目前该类方法已经逐渐被淘汰。

4、中草药及植物提取物
中草药(Chinese herb medicine)具有补充营养，提高机体的特异性和非特异性免疫力，抗菌及抑制病毒等方面的作用，在中国人类医疗中的应用具有悠久的历史。

中草药作为饲料添加剂在中国历史上也很早就有了记载。

采用中草药可以避免上述矛盾。

中草药抑制病原体的作用机理是干扰细胞的酶系统，阻挠其正常的新陈代谢，从而获得治疗效果。

如大黄可抑制粘细菌总脱氢酶的活性，切断其生物氧化过程。

因此，用中草药治疗，治病效果与抗生素相当，但毒副作用小，病原体不易对其产生耐药性。

中草药还有取材方便、价格低廉等优点，对水体的污染影响也小，是一种无残留、无毒性的绿色环保型鱼病防治药物。

余世望等研究发现丁香、花椒、高良姜对黑曲霉等真菌表现出较强抗菌作用。

赵纯森等从厚扑树的自然落叶中提取总酚化合物对供试禾谷镰抱霉(Fusarlum gramln)、立枯丝核菌(Rhizoctonia salan1)等10种真菌都有很强的抑制作用，水液提取物在2000mg/kg盆栽条件下可杀死土壤中棉立枯病菌。

王柄哲，侯金海2016年用地衣长松萝和皮果衣提取物抗鱼病真菌，创新性很高，但生产成本高，目前还没有推广使用。

我国《兽药地方标准升国家标准》(2006版)治疗水生动物水霉病的药为五倍子末(主要成分为五倍子)，使用浓度为0.1～0.2mg/L，全池泼洒。

经过十多年的使用，已经远远不能满足生产需求。

5、其他
对于水霉病的治疗，多年来国内外研究均无重大进展，近年来国内外学者致力于抗水霉新药物的研发，尝试从常用农作物抗真菌药物、植物提取活性物质、微生物次生代谢产物中筛选水霉拮抗药物，但目前仍未获得与孔雀石绿等效的药物。

杨绍斌等引进行了光合细菌在观赏鱼病防治中的应用，结果表明：光合细菌培养液对观赏鱼病害特别是水霉病防治效果显著。

宋学宏的研究结果表明，有益微生物EM(Effective icroorganism，EM)和重氢硫酸盐均可有效
地抑制黄颡鱼鱼卵孵化过程中水霉病的发生，提高鱼卵的受精率；而EM及重氢硫酸盐联合作用能有效地延长抑制水霉病发生的时间。

陈飘等2016年以黄颡鱼和湘云鲫粘性鱼卵致病水霉为受试菌，以珍珠健康养殖水体底泥为材料分离放线菌，分离的27株放线菌中筛选到3株水霉拮抗链霉菌QF1、DNC17、QHV2，连续传代与热稳定性实验表明QHV2菌株水霉拮抗活性物质的遗传稳定性和热稳定性均较好。

但在生产中此类技术尚未普及，其效果还有待于进一步观察。

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技术内容
本技术的目的在于提出一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，其疗效堪比孔雀石绿，是比较理想的水霉病防治办法。

此外，本技术还提出了上述组合物的制备方法。

为解决上述技术问题，本技术采用以下技术方案予以实现：
一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：
20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸。

作为优选地，上述用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：
25％的苦参粉末，15％的五倍子粉末，20％的水杨酸，40％的硼酸。

作为优选地，所述苦参粉末的大小为50～100目。

作为优选地，所述五倍子粉末的大小为50～100目。

一种用于防治水产养殖水霉病的组合物的制备方法，包括如下步骤：
先将苦参和五倍子进行粉碎，过50～100目筛备用，然后按比例将苦参粉末、五倍子粉末、水杨酸以及硼酸混合均匀即可，其中水杨酸和硼酸达到工业级要求即可。

本技术与现有技术相比具有的有益效果为：
1.原料安全、生态。

使用的是中药和食品生产中的防腐剂，简单易操作，生产过程中无污染；
2.水霉病防治效果良好。

对水霉病的治愈率90％以上，对鳃霉的治愈率60％以上；特别在春季鱼种疫苗注射后以及鱼苗长途运输时对水霉病有良好的预防作用，切切实实为渔民解决问题；
3.经济效益良好。

本技术用料种类少，用料量低，但是效果却可以媲美孔雀石绿，是一种目前为止防治水霉病的组合物；
4.成本相对较低。

使用本品，泼洒的成本约为0.3～0.4元/hm2，浸浴约0.5元/m3水体，成本比美婷要低，与孔雀石绿基本相当，可以为生产所接受。

具体实施方式
为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本技术，下面将对本技术作进一步的说明。

一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：
20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸。

上述用于防治水产养殖水霉病的组合物最优选的组分及含量为：
25％的苦参粉末，15％的五倍子粉末，20％的水杨酸，40％的硼酸。

上述所述苦参粉末和五倍子粉末的大小为50～100目。

上述组合物的制备步骤，先将苦参和五倍子进行粉碎，过50～100目筛备用，然后按比例将苦参粉末、五倍子粉末、水杨酸以及硼酸混合均匀即可，其中水杨酸和硼酸达到工业级要求即可。

产品使用时，采用全池泼洒的方式，养殖池每1m3水体用本品0.75～1g(每亩水体水深1米用本品500～750g)，先用4倍量热水(40℃以上90℃以下)全部化开，无结块，10分钟放凉，或加入凉水，全池泼洒。

连用3天。

网箱或者大水面，最好在料台附近挂袋滴加使用，剂量按鱼群体重的5％左右。

也可以集中在网箱中浸浴，效果更佳。

注意事项：
1.只限外用，严禁内服。

2.少数人接触皮肤可能对本品过敏，请勿入口，入眼，使用中会产生潮红、丘疹、瘙痒现象，不接触就会自愈。

使用实施例1
广州市荔湾区西朗某观赏鱼养殖场，小型水泥养殖池，主要繁育孔雀鱼、锦鲤和鹦鹉鱼。

2017年3月期间水温23℃，3号、5号养殖池的锦鲤和鹦鹉鱼出现水霉病，发病率大概有15-20％，每天有2-5尾死亡。

死亡鱼体表腐烂掉鳞，游动迟缓，吃料慢，部分鱼体表有白色絮状附着。

往年使用青霉素+盐+甲基蓝，就可以控制病情，但今年使用起来，甲基蓝的浓度增加，对鱼的毒性大，不敢再用，市场上的孔雀石绿在鱼内残留时间太长，且其具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，价格也高，还担心影响水源，因此咨询相关问题。

根据实际情况，以养殖池每1m3水体用本品0.75～1g(每亩水体水深1米用本品500～750g)的标准取药，先用药粉重量4倍量的热水(40℃以上90℃以下)将药粉全部化开，无结块，10分钟放凉，或加入凉水拌凉，全池泼洒。

使用了本方法，换水之后，当天鱼厌食，游泳活力基本恢复，第二天逐渐恢复摄食，第四天体表基本愈合。

本品对鱼的粘液刺激比较大，不能加量使用。

使用实例2：
山东济宁鱼台县鹿洼煤矿采煤塌陷区网箱养殖草鱼：2017年4月中下旬，草鱼鱼种在注射疫苗后15天暴发水霉病，主要症状为身体拖白毛，主要是尾部粘连絮状物和泥，体表溃烂出血，一旦网箱内出现发病，传播很快，感染40％左右的草鱼种，周围出现一个网箱死亡200-400斤鱼种。

根据实际情况，选用网箱集中浸浴的方式施药，先用药粉重量4倍量的热水(40℃以上90℃以下)将药物全部化开，放凉，网箱网衣拉起，集中鱼群后泼洒，使用剂量按照鱼群重量5％左右的标准施加，每天1次，按照使用量使用本品，连用2天后，第6天基本治愈。

而周围未施药的其他网箱出现大规模死亡的，损失惨重。

使用实例3：
山东济宁微山县鲁桥镇枣林村某户60亩水面池塘，养殖草鱼和鲫鱼混养：2017年5月下鱼苗时，鲫鱼鱼苗可能由于从江苏长途运输，部分鱼苗发生水霉，鱼体发黑游边，有白毛出现。

使用本品在料台附近泼洒，先用药粉重量4倍量的热水(40℃以上90℃以下)将药物全部化开，放凉，集中鱼群后泼洒，使用剂量按照鱼群的5％左右，每天1次，虽然投料比平常慢了约半个小时，但是用了两次之后，基本无死鱼。

因为大水面用药需要对鱼群集中，投料时就是很好的机会，因此大水面时需要先拉网集中鱼群，再进行投药操作。

以上所述仅为本技术的较佳实施例而已，并不用以限制本技术，凡在本技术的精神和原则之
内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。