植物生理学实验
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一.植物组织水势的测定(小液流法)
【器材与试剂】
1.实验仪器试管,移液管,长弯针头,直径0.5cm打孔器,镊子。
2.实验试剂 1.00mol/L蔗糖溶液(342.3g/L),10%甲烯蓝(用水配制)。
3.实验材料菠菜叶片
【实验步骤】
1.用1mol/L蔗糖母液配制一系列不同浓度的蔗糖溶液(0.2,0.3,0.4,0.5,
0.8mol/L)各10mL,注入5支编号号的试管中,各管都加上塞子,按标
号顺序在试管架上排成一列,作为对照组。
将原液稀释10倍配10mL
吸原液 2 mL 3 mL 4 mL 5 mL 8 mL
加水 8 mL 7 mL 6 mL 5 mL 2 mL
2.另取5支试管或青霉素小瓶,对应于对照组各管编号,作为试验组。然后
从对照组的各管中分别取4mL溶液移入相同编号的试验组试管或青霉素小瓶中,并都加上塞子。
3.菠菜洗净,用打孔器在叶片中部靠近主脉附近打取页原片,随机取样,向
试验组的每一试管或青霉素小瓶中放入相等数目(10片)的叶圆片,加塞,放置30min,每十分钟摇动一次,每次30秒钟。
4.用点样针头蘸一下10%甲烯蓝溶液(如有条件的话,用微量移液器吸取1
μL)加入每一试管或青霉素小瓶中,。震荡,此时溶液呈蓝色。
5.用5支自制长弯针头,从试验组的各管中一次吸取着色的液体少许,吸取
溶液量应相等,赶走溶液中气泡,如针头有液珠必须擦干,然后伸入对照组同样浓度溶液的中部,缓慢从针头尖端横向放出一滴蓝色溶液,轻轻取
出滴管。
6.观察蓝色液滴的移动方向,如果蓝色液滴向上移动,说明比重小,原组织
细胞失水,溶液从叶片细胞中吸出水分而被冲淡,密度比原来小了外液失
水变浓,比重大;如果液滴向下移动,则说明叶片细胞从溶液中吸了水,溶液密度变大,外液失水变稀,比重小;如果液滴不动,则说明叶片与溶
液的水分交换平衡,即叶片的水势与此种浓度的溶液的渗透式相等。
7.记录液温。色滴不动的相应温度。
8.书写实验报告。
1Pa=1牛顿·米-2(N·m-2)
1MPa=106帕(Pa)=10巴(bar)
1bar=105Pa
1bar=0.987大气压
1大气压=1.013 bar
1MPa=9.87大气压(atm)
1 bar=0.1 MPa
1 MPa=103KPa
衬质是Ψm是细胞的胶体物质、纤维素、毛细管
溶质势Ψs或称渗透势(Ψπ)均为负值
压力势Ψp细胞对原生质产生的压力一般为正
P=iCRT(以bar表示) P为渗透压
Ψs=-P Ψs=-iCRT R:表示气体常数0.083L·bar/M -Ψ:绝对温度 273℃+t
i:解离常数(蔗糖为1)
R=8.3144×107尔格(克分子·度)
=0.8205大气压·升(克分子·度)
=1.987卡(克分子·度)
=8484克·米(千克分子·度)
R=0.082大气压·升(克分子·度)
P=iCRT
=1×0.3×0.082×(273+19)
=0.3×0.082×292
=7.1832大气压
1Pa=7.1832×1.013(bar)×105(Pa)
=727658.16
1Mpa=0.72765816
7.1832÷9.87=0.7277811(MPa)
P=-RtiC
即:0.083 bar×(273℃+19℃)×1×0.3 =0.083×292×0.3
=0.72708(bar)
因为1 bar=105Pa
Pa=1 bar/105=0.72708×105=72708
MPa=106Pa=72708÷106=0.72708
P=-0.72708MPa
二.钾离子对气孔开度的影响
【实验原理】
保卫细胞的渗透系统可由钾离子所调节,无论是环式或非环式光合磷酸化,都可以形成ATP。ATP不断供给保卫细胞原生质膜上的钾-氢离子交换泵做功,支持保卫细胞逆着离子浓度差而从周围表皮细胞吸收钾离子,降低保卫细胞透势从而使气孔张开。
钾离子泵学说认为:
光照下由光合作用启动钾离子进入保卫细胞,保卫细胞的水势降低,便从邻近细胞吸水膨胀。由于保卫细胞的特殊结构使气孔张开,黑暗中光合作用停止,钾离子从保卫细胞中渗出,保卫细胞的水势上升,水向外流,保卫细胞收缩,使气孔关闭,即钾离子进入或输出保卫细胞是气孔开放或关闭的原因。
气孔的分布:
植物体上部叶的气孔较下部的多,叶尖端和中脉部分的气孔较叶基部和叶缘的多。一般下表皮较多,旱金莲,苹果限于下表皮;莲,睡莲仅限于上表皮。
【器材与试剂】
1.实验仪器人工气候箱,显微镜,目镜测微尺,烧杯,镊子,载玻片,
盖玻片。
2.实验试剂 0.05mol/L KNO
3(秤取5.06g KNO
3
,加蒸馏水溶解,稀释成
1000mL),0.05mol/L NaNO
3(秤取4.25g NaNO
3
,加蒸馏水溶解,稀释
成1000mL),1×10-3mol/L ATP二钠盐母液(秤取27.6mg ATP,加蒸馏水溶解,稀释成50mL,用上述母液再配制1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液),1×10-13mol/L ATP+0.05mol/L KNO
3
(秤取5.06g硝酸钾加水溶解后,加入1mL 1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液,再稀释成1000mL),1
×10-13mol/L ATP+0.05mol/L NaNO
3(秤取4.25g NaNO
3
加水溶解后,加
入1mL 1×10-10mol/L ATP二钠盐溶液,再稀释成1000mL)。
3.实验材料盆栽紫鸭趾草于室温暗培养48h后镜检,如绝大多数气孔处
于关闭状态时,即可用于实验。