乳与乳制品微生物检验方法双歧杆菌的检验
乳与乳制品检验方法汇编
乳与乳制品检验方法汇编1.物理性质检验：-外观检验：观察乳与乳制品的外观，如颜色、气味、质地等，以判断是否符合标准要求。
-pH值测定：通过测定乳与乳制品中的酸碱度，了解其酸度和稳定性。
-脂肪含量测定：采用脂肪测定仪器，测定乳和乳制品中的脂肪含量，以评估其营养价值。
2.化学成分检验：- 蛋白质含量测定：使用含氮柱的色谱仪或Kjeldahl法，测定乳制品中的蛋白质含量。
-脂肪酸组成分析：使用气相色谱仪，分析乳与乳制品中脂肪酸的种类和含量。
-糖含量测定：采用光度计、高效液相色谱仪等方法，测定乳与乳制品中的糖含量。
3.微生物检验：-总菌落计数：采用平板计数法，将样品接种在培养基上，通过菌落的形成计数，评估样品的微生物质量。
-大肠菌群检验：采用MPN法、膜过滤法等，检测样品中的大肠菌群数量，判断是否符合卫生标准。
-酸奶发酵能力检验：将酸奶样品接种在特定的培养基中，观察培养过程中是否产生酸味和凝结物。
4.成分添加物检验：-防腐剂检测：采用色谱仪等仪器，分析乳与乳制品中的防腐剂种类和含量，判断是否符合标准。
-添加剂检测：例如甜味剂、食用色素等，使用色谱仪等仪器，测定其含量，确保在安全范围内使用。
5.食品安全检验：-重金属检测：使用原子吸收光谱仪等仪器，测定乳与乳制品中的重金属含量，以评估样品的安全性。
-农药残留检测：采用气相色谱仪、液相色谱仪等仪器，测定样品中的农药残留量。
-食品添加剂检测：例如苯甲酸钠、亚硝酸盐等，采用色谱仪等仪器，测定其含量，确保在安全使用范围内。
综上所述，乳与乳制品的检验方法包括物理性质检验、化学成分检验、微生物检验、成分添加物检验以及食品安全检验等多个方面的内容。
通过这些检验方法的应用，可以保证乳与乳制品的安全和质量，确保消费者的健康。
而为了确保检验的准确性和公正性，相关的检验机构和实验室需要制定相应的检验标准和操作规范，并进行检验结果的合格判定。
乳与乳制品微生物检验方法
乳与乳制品微生物检验方法菌落总数的测定1、术语菌落是指在因体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计的相同的细茵集合而成。
茵落总数是指食品检样经处理后，在一定条件下培养后（如营养成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1ml（g）检样中所生长的细菌菌落的总数。
本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
所以厌氧或微需氧茵、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有的生长条件不能满足其生理要求，故难以生长。
因此菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
2、设备和材料2.1培养箱：36±1℃2.2冰箱：0～4℃2.3恒温水浴：46±1℃2.4天平2.5电炉2.6吸管2.7广口瓶或三角瓶：容量为500ml2.8玻璃珠：直径50mm2.9平皿：直径约90 mm2.10试管2.11放大镜2.12菌落计数器2.13酒精灯2.14均质器或乳钵2.15试管架2.16灭菌刀或剪子2.17灭菌镊子3 培养基和试剂3.1营养琼脂培养基：按GB4789.28中4.7规定或按购买的商用培养基配方配制。
3.2生理盐水3.3 75%乙酵溶液4 检验程序菌落总数的检验程序如下：5 操作步骤5.1检样稀释及培养5.1.1以无菌操作将检样25g（或ml）剪碎放于装有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭玻璃瓶内，（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～10000r/min 的速度处理1min，做成1：10的均匀稀释液。
5.1.2用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液）振摇试管，混合均匀，做成1：100的稀释液。
乳与乳制品微生物检验方法
乳与乳制品微生物检验方法1.菌群总数测定方法：菌群总数测定方法是衡量乳制品中微生物质量的基础方法之一、目前常用的菌群总数测定方法有总计数平板法、液体培养法和荧光素酶法。
总计数平板法是将样品分别接种在琼脂平板上，通过平板上菌落的形成来计数。
液体培养法是将样品接种在适当的培养基中，通过测量培养液的浑浊度或菌液悬浮液中的细菌数量来计数。
荧光素酶法是通过加入荧光素酶底物，菌落会释放出荧光，通过测量荧光强度来计数。
这些方法可以快速、准确地测定样品中菌落总数，从而确定乳制品的微生物质量。
2.根据德国奶酪乳制品行业协会VDF指南的要求，共有500多种病原菌可以检测，包括沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及其他致病菌。
这些方法多是PCR技术、荧光定量PCR技术等。
以沙门氏菌检测为例，主要有传统培养法、分子生物学培养法、酶免的葡萄糖酸盐液体培养基、黄金标准法等多种方法。
其中，PCR技术可以通过扩增沙门氏菌的DNA序列，快速、准确地检测样品中的沙门氏菌。
3.酸奶产品中乳酸菌数量的测定：乳酸菌是酸奶中的一类重要菌群，其数量多少直接影响酸奶的质量。
常用的测定乳酸菌数量的方法有直接显微法、涂布法、测定菌落数量法等。
直接显微法是将样品显微镜下直接观察和计数乳酸菌的数量。
涂布法是将样品涂于适当的培养基上，通过菌落的形成来计数。
菌落数量法是将样品稀释后均匀涂布在琼脂平板上，通过菌落的形成来计数。
这些方法可以可靠地测定乳酸菌的数量，从而评估酸奶的质量。
4.冷藏和储存条件检验方法：乳制品的储存条件对其微生物质量有着至关重要的影响。
常用的储存条件检验方法包括温度检测、湿度检测、pH值检测等。
温度检测可以通过温度计或温度记录器来测量乳制品的储存温度，确保其符合相关标准。
湿度、pH值等的检测可以通过仪器设备进行测量和监控。
这些方法能够及时发现和纠正乳制品储存条件的问题，保证乳制品的微生物质量稳定。
总结起来，乳与乳制品微生物检验方法包括菌群总数测定方法、病原菌检测方法、乳酸菌数量测定方法和储存条件检验方法等。
双歧杆菌检验(食品微生物学检验)
食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验1范围本标准规定了双歧杆菌(B i f i d o b a c t e r i u m)的鉴定及计数方法㊂本标准适用于双歧杆菌纯菌菌种的鉴定及计数㊂本标准适用于食品中仅含有单一双歧杆菌的菌种鉴定㊂本标准适用于食品中仅含有双歧杆菌属的计数,即食品中可包含一个或多个不同的双歧杆菌菌种㊂2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1恒温培养箱:36ħʃ1ħ㊂2.2冰箱:2ħ~5ħ㊂2.3天平:感量0.01g㊂2.4无菌试管:18mmˑ180mm㊁15mmˑ100mm㊂2.5无菌吸管:1m L(具0.01m L刻度)㊁10m L(具0.1m L刻度)或微量移液器(200μL~1000μL)及配套吸头㊂2.6无菌培养皿:直径90mm㊂3培养基和试剂3.1双歧杆菌培养基:见A.1㊂3.2 P Y G培养基:见A.2㊂3.3 M R S培养基:见A.3㊂3.4甲醇:分析纯㊂3.5三氯甲烷:分析纯㊂3.6硫酸:分析纯㊂3.7冰乙酸:分析纯㊂3.8乳酸:分析纯㊂4检验程序双歧杆菌的检验程序见图1㊂图1双歧杆菌的检验程序5操作步骤5.1无菌要求全部操作过程均应遵循无菌操作程序㊂5.2双歧杆菌的鉴定5.2.1纯菌菌种5.2.1.1样品处理:半固体或液体菌种直接接种在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板㊂固体菌种或真空冷冻干燥菌种,可先加适量灭菌生理盐水或其他适宜稀释液,溶解菌粉㊂5.2.1.2接种:接种于双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板㊂36ħʃ1ħ厌氧培养48hʃ2h,可延长至72hʃ2h㊂5.2.2食品样品5.2.2.1样品处理:取样25.0g(m L),置于装有225.0m L生理盐水的灭菌锥形瓶或均质袋内,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1ʒ10的样品匀液㊂冷冻样品可先使其在2ħ~5ħ条件下解冻,时间不超过18h;也可在温度不超过45ħ的条件解冻,时间不超过15m i n㊂5.2.2.2接种或涂布:将上述样品匀液接种在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板,或取0.1m L适当稀释度的样品匀液均匀涂布在双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板㊂36ħʃ1ħ厌氧培养48hʃ2h,可延长至72hʃ2h㊂5.2.2.3纯培养:挑取3个或以上的单个菌落接种于双歧杆菌琼脂平板或M R S琼脂平板㊂36ħʃ1ħ厌氧培养48hʃ2h,可延长至72hʃ2h㊂5.2.3菌种鉴定5.2.3.1涂片镜检:挑取双歧杆菌平板或M R S平板上生长的双歧杆菌单个菌落进行染色㊂双歧杆菌为革兰氏染色阳性,呈短杆状㊁纤细杆状或球形,可形成各种分支或分叉等多形态,不抗酸,无芽孢,无动力㊂5.2.3.2生化鉴定:挑取双歧杆菌平板或M R S平板上生长的双歧杆菌单个菌落,进行生化反应检测㊂过氧化氢酶试验为阴性㊂双歧杆菌的主要生化反应见表1㊂可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统㊂表1双歧杆菌菌种主要生化反应编号项目两歧双歧杆菌(B.b i f i d u m)婴儿双歧杆菌(B.i n f a n t i s)长双歧杆菌(B.l o n g u m)青春双歧杆菌(B.a d o l e s c e n t i s)动物双歧杆菌(B.a n i m a l i s)短双歧杆菌(B.b r e v e)1L-阿拉伯糖--+++-2D-核糖-+++++ 3D-木糖-++d++ 4L-木糖------5阿东醇------6D-半乳糖d+++d+ 7D-葡萄糖++++++ 8D-果糖d++d d+ 9D-甘露糖-++---10L-山梨糖------表1(续)编号项目两歧双歧杆菌(B.b i f i d u m)婴儿双歧杆菌(B.i n f a n t i s)长双歧杆菌(B.l o n g u m)青春双歧杆菌(B.a d o l e s c e n t i s)动物双歧杆菌(B.a n i m a l i s)短双歧杆菌(B.b r e v e)11L-鼠李糖------12卫矛醇------13肌醇-----+ 14甘露醇----a--a 15山梨醇----a--a 16α-甲基-D-葡萄糖甙--+---17N-乙酰-葡萄糖胺-----+ 18苦杏仁甙(扁桃甙)---++-19七叶灵--+++-20水杨甙(柳醇)-+-++-21D-纤维二糖-+-d--22D-麦芽糖-+++++ 23D-乳糖++++++ 24D-蜜二糖-+++++ 25D-蔗糖-+++++ 26D-海藻糖(覃糖)------27菊糖(菊根粉)--a--a--a 28D-松三糖--++--29D-棉籽糖-+++++ 30淀粉---+--31肝糖(糖原)------32龙胆二糖-+-+++ 33葡萄糖酸钠---+--注:+表示90%以上菌株阳性;-表示90%以上菌株阴性;d表示11%~89%以上菌株阳性;a表示某些菌株阳性㊂5.2.3.3有机酸测定:测定双歧杆菌的有机酸代谢产物(可选项),见附录B㊂5.3双歧杆菌的计数5.3.1纯菌菌种5.3.1.1固体和半固体样品的制备:以无菌操作称取2.0g样品,置于盛有198.0m L稀释液的无菌均质杯内,8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或置于盛有198.0m L稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1ʒ100的样品匀液㊂5.3.1.2液体样品的制备:以无菌操作量取1.0m L样品,置于9.0m L稀释液中,混匀,制成1ʒ10的样品匀液㊂5.3.2食品样品5.3.2.1样品处理:取样25.0g(m L),置于装有225.0m L生理盐水的灭菌锥形瓶或均质袋内,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n,制成1ʒ10的样品匀液㊂冷冻样品可先使其在2ħ~5ħ条件下解冻,时间不超过18h;也可在温度不超过45ħ的条件解冻,时间不超过15m i n㊂5.3.3系列稀释及培养用1m L无菌吸管或微量移液器,制备10倍系列稀释样品匀液,于8000r/m i n~10000r/m i n均质1m i n~2m i n,或用拍击式均质器拍打1m i n~2m i n㊂每递增稀释一次,即换用1次1m L灭菌吸管或吸头㊂根据对样品浓度的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液,在进行10倍递增稀释时,吸取1.0m L样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿㊂同时,分别吸取1.0m L空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照㊂及时将15m L~20m L冷却至46ħ的双歧杆菌琼脂培养基或MR S琼脂培养基(可放置于46ħʃ1ħ恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀㊂从样品稀释到平板倾注要求在15m i n内完成㊂待琼脂凝固后,将平板翻转,36ħʃ1ħ厌氧培养48hʃ2h,可延长至72hʃ2h㊂培养后计数平板上的所有菌落数㊂5.3.4菌落计数5.3.4.1可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量㊂菌落计数以菌落形成单位(c o l o n y-f o r m i n g u n i t s,C F U)表示㊂5.3.4.2选取菌落数在30C F U~300C F U之间㊁无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数㊂低于30C F U 的平板记录具体菌落数,大于300C F U的可记录为多不可计㊂每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数㊂5.3.4.3其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数㊂5.3.4.4当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数㊂5.3.5结果的表述5.3.5.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克或每毫升中菌落总数结果㊂5.3.5.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算:N= C(n1+0.1n2)d (1)式中:N 样品中菌落数;C 平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;n1 第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;n2 第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;d 稀释因子(第一稀释度)㊂5.3.5.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300C F U,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算㊂5.3.5.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30C F U,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算㊂5.3.5.5若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算㊂5.3.5.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30C F U~300C F U之间,其中一部分小于30C F U或大于300C F U时,则以最接近30C F U或300C F U的平均菌落数乘以稀释倍数计算㊂5.3.6菌落数的报告5.3.6.1菌落数小于100C F U时,按 四舍五入 原则修约,以整数报告㊂5.3.6.2菌落数大于或等于100C F U时,第3位数字采用 四舍五入 原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数;也可用10的指数形式来表示,按 四舍五入 原则修约后,采用两位有效数字㊂5.3.6.3称重取样以C F U/g为单位报告,体积取样以C F U/m L为单位报告㊂5.4结果与报告根据5.2.3.1㊁5.2.3.2,5.2.3.3结果,报告双歧杆菌属的种名㊂根据5.3.6菌落计数结果出具报告,报告单位以C F U/g(m L)表示㊂附录A培养基和试剂A.1双歧杆菌琼脂培养基A.1.1成分蛋白胨15.0g酵母浸膏2.0g葡萄糖20.0g可溶性淀粉0.5g氯化钠5.0g西红柿浸出液400.0m L吐温801.0m L肝粉0.3g琼脂粉20.0g加蒸馏水至1000.0m LA.1.2制法A.1.2.1半胱氨酸盐溶液的配制:称取半胱氨酸0.5g,加入1.0m L盐酸,使半胱氨酸全部溶解,配制成半胱氨酸盐溶液㊂A.1.2.2西红柿浸出液的制备:将新鲜的西红柿洗净后称重切碎,加等量的蒸馏水在100ħ水浴中加热,搅拌90m i n,然后用纱布过滤,校正p H7.0ʃ0.1,将浸出液分装后,121ħ高压灭菌15m i n~ 20m i n㊂A.1.2.3制法:将A.1.1所有成分加入蒸馏水中,加热溶解,然后加入半胱氨酸盐溶液,校正p H至6.8ʃ0.1㊂分装后121ħ高压灭菌15m i n~20m i n㊂A.2P Y G液体培养基A.2.1成分蛋白胨10.0g葡萄糖2.5g酵母粉5.0g半胱氨酸-H C l 0.25g盐溶液20.0m L维生素K1溶液0.5m L氯化血红素溶液5m g/m L2.5m L加蒸馏水至500.0m LA.2.2制法A.2.2.1盐溶液的配制:称取无水氯化钙0.2g,硫酸镁0.2g,磷酸氢二钾1.0g,磷酸二氢钾1.0g,碳酸。
酸奶中双歧杆菌的筛选与鉴定
酸奶中双歧杆菌的筛选与鉴定酸奶是一种发酵乳制品，以牛乳、羊乳、山羊乳、豆奶等为原料，经过发酵后变为酸性、具有特有酸味和香气的乳制品。
随着人们对健康生活的关注，酸奶受到人们的喜爱，而其中含有的双歧杆菌是其重要的功能成分之一。
双歧杆菌，属于革兰氏阳性杆菌，是一种重要的益生菌。
它们生长迅速，能够在胃酸环境下存活，到达肠道后对人体产生很多积极的效果。
双歧杆菌可以帮助人体消化，增加营养吸收；它还能增强人体免疫力，预防感染和疾病；另外，双歧杆菌还能调节肠道菌群平衡，改善肠道环境，预防便秘、腹泻等肠道问题。
因此，添加双歧杆菌是酸奶中非常重要的步骤。
那么，酸奶中的双歧杆菌是如何进行筛选和鉴定的呢？这里将简单介绍一下其中的方法和过程。
一、中国歧杆菌的种类首先，中国双歧杆菌较多，常见的有以下几种：1.乳双歧杆菌：以乳酸、醋酸和乳酸果糖酸为主要代谢产物，广泛存在于各种乳制品中。
2.双歧杆菌：以乳酸和乳酸果糖酸为主要代谢产物，广泛存在于人和动物的肠道中。
3.长双歧杆菌：以醋酸和乳酸为主要代谢产物，广泛存在于各种恶臭物质中。
4.短双歧杆菌：以醋酸为主要代谢产物，广泛存在于酒类和果汁中。
二、酸奶中双歧杆菌的筛选和鉴定方法酸奶中添加双歧杆菌需要进行精确的筛选和鉴定，主要有下面三个步骤：1.菌株的分离和筛选首先需要从自然环境或人体中分离双歧杆菌，并进行菌株的筛选。
这个过程需要注意环境的卫生和材料的消毒。
对于得到的菌株，需要通过形态特征、培养习性、生理生化特性和基因分析等方法来鉴定。
这样才能确认菌株的分类和科学名称。
2.双歧杆菌鉴定方法为了准确鉴定双歧杆菌并确保其有益健康，可以使用各种鉴定方法：(1)气质分析法可测定菌株的气体代谢，从而确定双歧杆菌属。
(2)糖代谢分析法可通过菌株的糖代谢情况，推测双歧杆菌的种类。
(3)检测菌株对抗菌物质的抵抗力双歧杆菌有一定的抗微生物物质能力，可通过这项指标来确认双歧杆菌的分泌物。
(4)基因分析法通过PCR技术，可以扩增双歧杆菌的16S rRNA基因，并进行序列比对，以确定双歧杆菌类群。
乳与乳制品检验方法
乳与乳制品检验方法乳与乳制品是我们日常生活中常见的食品，它们不仅有着丰富的营养成分，还可以提供给我们美味可口的口感。
考虑到人们的健康安全，在生产和流通环节中，对乳与乳制品进行检验是非常必要的。
本文将对乳与乳制品的常见检验方法进行介绍。
一、蛋白质的检验方法1、比色法比色法是一种常用的、简单易行的蛋白质检验方法。
其中，菜豆蛋白质比色法是最常使用的一种。
首先将一定数量的样品与一定量的酸混合，然后加入菜豆蛋白质，通过比色仪检测样品中蛋白质的含量。
2、氮测定法氮测定法是经典的蛋白质检验方法。
氮元素（N）是蛋白质的组成部分，因此通过检测氮元素的含量可以间接推算出样品中蛋白质的含量。
这种方法需要使用到氮测定仪，操作较为复杂。
二、质量指标的检验方法1、pH值的检测方法pH值是反映液体酸碱性质的指标，其值越低，表示样品越酸性。
对于乳制品而言，其pH值的检测非常重要。
在生产过程中，pH值对乳酸菌发酵、凝固和质地等因素都有影响。
pH值的测定可以通过电极法或者试纸法进行。
2、干物质和水分含量的检测方法乳与乳制品干物质的含量与其保质期密切相关。
干物质含量的测定方法通常采用称重干燥法或计算法。
水分含量的测定方法则一般采用蒸发法、干燥法、重量法等。
三、微生物的检验方法微生物检验是对乳与乳制品质量的重要保障。
常用的微生物检验方法包括菌落计数法、生化试验法和PCR方法等。
1、菌落计数法菌落计数法是肉眼能够看到细菌的繁殖形成的菌落，以此计算出1毫升或1克样品中的细菌数。
此方法通常采用PCA法，即普通葡萄糖琼脂培养基法。
2、生化试验法生化试验法是基于细菌对生物化学物质的特异性反应而开发的一种检测方法。
它可以检测细菌是否存在，甚至还可以确定细菌属、种等信息。
3、PCR方法PCR方法可以在很短的时间内，检测出样品中存在的微生物DNA，从而确定其存在种类。
此方法的优点是快速、准确，但其缺点是需要专业操作和特殊设备。
四、化学成分检验方法1、脂肪含量的检测方法脂肪含量的检测方法通常采用脂肪提取法和滴定法。
乳与乳制品检验方法
乳与乳制品检验方法一、物理性状检验物理性状检验是乳与乳制品检验的基础工作，可以通过观察、测量和比较来评价其外观、形态、颜色、气味、储存稳定性等特点。
以下是一些常见的物理性状检验方法：1.外观检验：观察乳与乳制品的外观是否正常，包括颜色、透明度、嗅味等。
2.乳脂球径检验：通过显微镜观察乳脂球的大小和形态，判断其质量是否符合标准。
3.色泽检验：使用色差仪测量样品的色泽数值，与标准色差进行比较，判断其色泽是否正常。
4.水分检验：通过烘干法、溶胀法等方法测定样品的水分含量，判断其是否符合标准要求。
二、营养成分检验营养成分检验是评价乳与乳制品营养价值的重要方法，常见的检测项目包括脂肪、蛋白质、糖类、维生素、矿物质等。
以下是一些常见的营养成分检验方法：1.脂肪含量检验：采用脂肪提取法和重量差法测定样品中脂肪的含量。
2.蛋白质含量检验：采用凝固法、比色法、电泳法等方法测定样品中蛋白质的含量。
3.糖类含量检验：采用酶法、高效液相色谱法等方法测定样品中糖类的含量。
4.维生素含量检验：采用高效液相色谱法、滴定法等方法测定样品中维生素的含量。
5.矿物质含量检验：采用原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法等方法测定样品中矿物质的含量。
三、微生物检验微生物检验是评价乳与乳制品卫生指标的重要方法，常见的检测项目包括总菌落数、大肠菌群、沙门氏菌等。
以下是一些常见的微生物检验方法：1.总菌落数检验：采用平板计数法和膜过滤法测定样品中微生物总数。
2.大肠菌群检验：采用培养基培养法测定样品中大肠菌群的数量。
3.沙门氏菌检验：采用培养基培养法和PCR法测定样品中沙门氏菌的存在与否。
四、化学成分检验化学成分检验是评价乳与乳制品的质量指标的关键方法，常见的检测项目包括酸度、pH值、残留农药、添加剂、重金属等。
以下是一些常见的化学成分检验方法：1.酸度检验：采用酸碱滴定法和酸度计测定样品的酸度。
2.pH值检验：采用pH计测定样品的pH值。
乳与乳制品检验方法
乳与乳制品检验方法乳与乳制品作为人们日常生活中必不可少的食品之一，其安全性与质量是备受关注的问题。
为了确保乳制品的质量与安全，需要进行检验。
本文将介绍乳与乳制品检验方法的原理、步骤与应用。
一、牛乳成分检验方法1、脂肪检测（1）巴氏脱脂法巴氏脱脂法是常用的乳脂肪含量检验方法之一。
其原理是通过巴氏杀菌，将原乳中脂肪以及非脂肪物质分离开来。
检测时需要采用定量比色法，将样品与标准溶液进行比色，然后根据检测结果计算脂肪含量。
（2）熔融点法熔融点法是利用脂肪的熔点差异进行检验。
将不同脂肪含量的样品进行熔融，然后比较不同样品的熔融点，根据其熔融点来计算脂肪含量。
2、蛋白质检测（1）总蛋白定量法总蛋白定量法是采用双缩脲定量法或比色法来测定牛乳中总蛋白的含量。
将不同浓度的样品与双缩脲溶液进行混合后加热，然后通过比色法或分光光度法来检测蛋白质含量。
（2）酪蛋白定量法酪蛋白定量法是通过测定乳中酪蛋白的含量来进行蛋白检验的。
该方法常用的有：酸碱滴定法、免疫电泳法和比色法等。
3、水分检测（1）重量法重量法是通过称重的方法检测牛乳中的水分含量。
将样品放入烘箱中进行脱水，然后再称重，根据称重前后的变化量计算出水分含量。
（2）干燥法干燥法是通过样品在加热条件下失去水分来计算水分含量的方法。
将样品放入干燥器中干燥，然后再以称重法来计算水分含量。
4、盐分检测（1）氯化钠标准溶液法氯化钠标准溶液法是测定盐分含量的方法之一。
将样品与氯化钠标准溶液混合，通过比色法检测，根据测定结果来计算盐分含量。
（2）电导法电导法是通过检测样品电导率来测定盐分含量的方法。
将样品与纯水混合后测定其电导率，根据电导率的变化来计算样品中的盐分含量。
二、乳制品检验方法1、奶粉检验方法（1）水分检测用电子天平将样品加热至某温度，称称样品的质量，然后将样品放入烘箱中进行脱水处理，再次称重，根据称重的变化量算出样品中的水分含量。
（2）蛋白质检测通过采用Kjeldahl法来测定奶粉中的蛋白质含量。
能力验证乳粉样品中双歧杆菌计数培养基的选择探究
1.4 分析方法 实验结果采用重复性限、再现性限 [14] 进行分析。重复
作者简介：劳嘉倩（1990—），女，汉族，广东佛山人，本科，助理工程师。研究方向：食品微生物检测技术。 通 信 作 者： 蒋 佳 希（1992—）， 女， 汉 族， 广 东 广 州 人， 本 科， 助 理 工 程 师。 研 究 方 向： 食 品 微 生 物 检 测 技 术。 E-mail:364558774@。
随 着 食 品 行 业 的 快 速 发 展， 消 费 者 对 食 品 的 安 全 性 和质量要求越来越高，我国食品微生物标准《食品安全国 家标准 婴儿配方食品》（GB 10765—2010）和《食品安全 国家标准 较大婴儿和幼儿配方食品》（GB 10767—2010） 中明确规定添加活性菌种的产品其活性益生菌的数量要≥ 106 CFU/mL，但要准确测定食品中双歧杆菌的含量，通常 受测试环境、样品保存条件、样品均匀性、稀释体积、取 样体积、培养时间、培养温度、观察计数等多方面因素的影 响 [4-8]。因此，科学、准确地测定产品中双歧杆菌等益生菌 的数量十分关键。
关键词：能力验证；双歧杆菌；培养基
双歧杆菌（Bifidobacterium）是一类严格厌氧的革兰氏阳 性杆菌，广泛存在于人和动物体内，具有抗菌、抗感染、 免疫调节、降低胆固醇、抗肿瘤等多种生理功能 [1-4]，是人 体内重要的益生菌。目前，双歧杆菌在医学、功能性食品、 保健食品等方面有较深入的研究，被广泛应用于各种乳制 品中。
操作者进行的 2 次独立试验结果取以 10 为底的对数后，绝对 值差值不大于 0.45（即再现性限，r=0.45）。 2 结果与分析
样品使用 BBL 培养基和 MRS 培养基经（36±1）℃厌氧 培养 48 h 后，双歧杆菌数计数结果及计算见表 1。
食品卫生微生物学检验乳与乳制品检验
食品卫生微生物学检验乳与乳制品检验1、范围本标准规定了乳与乳制品检验的基本要求和检验方法。
本标准适用于鲜乳及其制品（菌落总数检验不适于酸乳）的检验。
2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
3设备和材料3.1现场采样用品3.1.1采样箱3.1.2搅拌棒。
3.1.3勺子。
3.1.4灭菌带塞广口瓶。
3.1.5灭菌塑料袋．3.1.6温度计。
3.1.7 75％酒精棉球。
3.1.8编号用蜡笔和纸。
3.2实验室检验用品见GB/T4789.2、GB/T4789.3、GB/T4789.4、GB/T4789.5、GB/T4789.10、GB/T4789.15、GB/T16347。
4、培养基和试荆见GB/T4789.2、GB/T4789.3、GB/T4789.4、GB/T4789.5、GB/T4789.10、GB/T4789.15、GB/T16347。
5、操作步骤5.1样品的采取和送检5.1.1大型包装的鲜乳：用灭菌吸管取样，采样时应注意代表性。
采样数量按GB／丁4789.1，放人灭菌容器内，及时送检．在气温较高或路途较远的情况下样品应进行冷藏，不得使用任何防腐剂。
5.1.2定型包装的乳品：采取整件包装。
采样时注意包装的完整。
各种定型包装的乳与乳制品的每件样品量按GB/T4789.1要求。
5.2检样的处理5.2.1鲜奶、酸奶：塑料或纸盒（袋）装，用75％酒精棉球消毒盒盖或袋口；玻璃瓶装酸奶以无菌手续去掉瓶口的纸罩纸盖，瓶口经火焰消毒，用无菌手续吸取25oL检样，放人装有225mL灭菌生理盐水的锥形瓶内，振摇均匀（酸乳如有水分析出千表层，应先去除）。
5.2.2炼乳：将瓶或罐先用温水洗净表面，再用点燃的酒精棉球消毒瓶或罐的上部，然后用灭菌的开罐器打开罐或瓶，以无菌手续称取259(mL）检样，放人装有225mL灭菌生理盐水的锥形瓶内，振摇均匀。
双歧杆菌的计数检验方法——指导
本指导方法介绍了科汉森双歧杆菌BB-12使用的培养基及计数方法。
本方法适用于发酵乳中单株BB-12或混合菌株中BB-12的计数。
本方法基于国际标准草案ISO/WD…I IDF 220 建立，特别适用于BB-12双歧杆菌。
检测发酵乳制品中的微生物，样品准备、稀释以及平板培养可以与P-9指导方法结合使用。
双歧杆菌 单一菌株培养基 MRS 琼脂培养基，每升培养基中添加5 ml 盐酸半胱氨酸储备溶液*技术 倾注平板厌氧培养，37℃（99℉），3天双歧杆菌 在AB ，BC ，BY ，ABC ，ABT ，ABY ，BCT 中，或与中温菌混合。
培养基 MRS 琼脂培养基，每升培养基中添加5 ml 盐酸半胱氨酸储备溶液，2.5 ml Mupirocin 储备溶液。
技术 倾注平板厌氧培养，37℃（99℉），3天注释 所有菌落均计为双歧杆菌Mupirocine 抑制大多数乳酸菌通常，我们始终建议使用显微镜镜检几个菌落，以确认是正确的菌株。
缩写词缩写词：：A：嗜酸乳杆菌B：双歧杆菌C：类干酪乳杆菌类干酪亚种T：嗜热链球菌Y：由保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌组成的酸奶菌种。
准备培养基及储备溶液准备MRS 琼脂培养基琼脂培养基：：溶解70g MRS 琼脂粉（ Difico 288210 ）到1000ml 蒸馏水中，加热至沸腾并不断搅拌直至完全溶解。
分装培养基至瓶中，用121℃（250℉），15 min 高压杀菌。
高压杀菌后pH 值：6.5+/-0.2，25℃.准备好的MRS琼脂培养基可以在5+/-3℃的黑暗条件下储藏三个月。
倾注好的培养基平板可以在5+/-3℃的黑暗条件下储藏10天。
准备盐酸半胱氨酸储备溶液准备盐酸半胱氨酸储备溶液：：盐酸半胱氨酸 10g Merck No 2839蒸馏水 100 ml高压杀菌釜灭菌溶液储藏在室温条件下。
货架期最长2个月，如果有沉淀发生，则弃掉溶液。
准备Mupirocin 储备溶液储备溶液：：Li-Mupirocin 100 mg ( , art.no: EPM3806000) 蒸馏水 10 ml过滤除菌（0.45μm）如果溶液不能立即用完，建议将溶液分装到灭菌冷冻管中，冻藏在-20℃。
简述乳品中微生物检测技术
简述乳品中微生物检测技术乳品行业是关系到人类健康的敏感行业，乳品在人类的膳食结构中占有十分重要的地位。
除了营养知识和营养意识等因素外，乳品质量安全是人们关注的焦点。
而频频爆发的乳品安全事件已经把乳品质量安全提到了一个空前的高度，在众多乳制品质量安全的相关检测项目中，微生物含量检测也备受关注。
因此建立和完善乳品微生物检测技术和检测体系迫在眉睫。
本文对目前具有良好发展空间的乳品微生物检测技术进行了综述，旨在为我国乳品微生物的快速鉴定及检测提供一些参考。
1 国内外乳品微生物检测项目根据自身发展及安全需求，国内外对乳品中的微生物检测项目进行了规定。
作为世界最大的乳品生产国之一的新西兰，乳品微生物的检测项目主要有：30 ℃需氧微生物、霉菌和酵母菌、大肠菌群、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、凝固酶阳性葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、弯曲杆菌、产气夹膜梭菌和乳酸菌。
我国乳品微生物检测项目主要有：计算平皿细菌总数、乳制品要求检测菌落总数、大肠菌群、致病菌、酵母和霉菌。
2 乳品微生物检测技术2.1 改进微生物培养法改进微生物培养法就是对传统微生物检测方法的改进。
绝大多数企业和质检部门常用的微生物学检测方法有：标准平板计数法（SPC）和显微镜直接观察法（DMC），但这 2 种方法对有些细菌无法做出正确鉴定。
这种传统方法主要是通过提高操作效率和细胞计数进行改进，从而达到快速检测的目的，如皿膜系统、疏水网格滤膜法、螺旋板系统等。
其中疏水网膜法（HGMF）是对常规平皿画线法的改进，可用于酵母菌、霉菌的计数，沙门氏菌、大肠杆菌（大肠菌群）的检测，被广泛应用于生乳、巴氏杀菌乳的质量管理中。
2.2 免疫学方法2.2.1 免疫荧光反应该法由Nerurkar 等人于1984 年建立，可用来检测沙门氏菌、葡萄球菌毒素、E.ColiO157、李斯特菌、和单核细胞增生李斯特氏菌等；1958 年Riggs等人合成了性能较为优良的异硫氰酸荧光素；Marshall 等人又对荧光抗体标记的方法进行了改进；1994 年我国科学家孙洋等人成功利用此法对沙门氏菌进行了检测，从而使免疫荧光技术得到了较为广泛的应用。
63食品微生物学检验 乳与乳制品检验
中华人民共和国国家标准GB 4789.18—2010食品安全国家标准食品微生物学检验 乳与乳制品检验National food safety standardFood microbiological examination: Milk and milk products中华人民共和国卫生部发布前言本标准代替GB/T 4789.18-2003《食品卫生微生物学检验乳与乳制品检验》。
本标准与GB/T 4789.18-2003相比，主要变化如下：——修改了标准的中英文名称；——修改了“范围”和“规范性引用文件”；——修改了采样方案和各类乳制品的处理方法。
本标准所代替的历次版本发布情况为：——GB 4789.18-1984、GB 4789.18-1994、GB/T 4789.18-2003。
食品安全国家标准食品微生物学检验 乳与乳制品检验1 范围本标准适用于乳与乳制品的微生物学检验。
2 规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
3 设备和材料3.1 采样工具采样工具应使用不锈钢或其他强度适当的材料，表面光滑，无缝隙，边角圆润。
采样工具应清洗和灭菌，使用前保持干燥。
采样工具包括搅拌器具、采样勺、匙、切割丝、刀具（小刀或抹刀）、采样钻等。
3.2 样品容器样品容器的材料（如玻璃、不锈钢、塑料等）和结构应能充分保证样品的原有状态。
容器和盖子应清洁、无菌、干燥。
样品容器应有足够的体积，使样品可在测试前充分混匀。
样品容器包括采样袋、采样管、采样瓶等。
3.3 其他用品包括温度计、铝箔、封口膜、记号笔、采样登记表等。
3.4 实验室检验用品3.4.1 常规检验用品按GB 4789.1执行。
3.4.2 微生物指标菌检验分别按GB 4789.2、GB 4789.3、GB 4789.15执行。
乳与乳制品微生物检验方法双歧杆菌的检验
乳与乳制品微生物检验方法双歧杆菌的检验YLNB 3.7 1、引用依据：GB/T4789.34-20032、术语和定义双歧杆菌：一群能分解葡萄糖，产生大量乙酸和乳酸，厌氧，不耐酸，不形成芽孢，不运动，细胞呈现多样形态的革兰氏阳性杆菌。
3、仪器及器材3.1培养箱：36±1℃；3.2 恒温水浴：46±1℃；3.3显微镜；3.4厌氧培养箱；3.5离心机；3.6 天平；3.7电炉；3.8吸管；3.9 广口瓶或三角瓶：容量为500ml；3.10 平皿：直径约90mm；3.11 试管；3.12 酒精灯；3.13 灭菌刀或剪子；3.14 灭菌镊子。
4、培养基和试剂4.1 生理盐水；4.2 75%乙醇溶液；4.3 TPY 琼脂培养基；4.4 BL 琼脂培养基；4.5 BBL 琼脂培养基；4.6双歧杆菌生化用基础培养基；4.7 PYG 液体培养基；4.8革兰氏染色液；4.9灭菌液体石蜡。
5. 检验程序36±1℃ 72h±3h37℃ 72 h测定乙酸、乳酸生化培养观察10天接受PYG 厌氧培养分纯厌氧培养选择2—3个适当稀释度，各取0.1mL 分别涂布于BL,BBL,TPY 培养基25g （mL ）检样加225mL 灭菌生理盐水，做成几个适当倍数的稀释液菌中鉴定报菌落计数报告革兰氏染色，过氧化氢酶试验6、方法6.1以无菌操作将充分混匀的检样25g（ml）放入含有225ml 灭菌生理盐水的灭菌锥形瓶内做成1：10的均匀稀释液。
6.2 用1 ml灭菌吸管吸取1：10稀释液 1 ml，沿管壁徐徐注入含有9 ml灭菌生理盐水的试管内，振摇混匀，作成1：100的稀释液。
6.3 另取1 ml灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
6.4选取2个～3个以上适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，各取0.1ml分别加入计数培养基平皿，均匀涂布，每个稀释度作两个平皿。
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乳与乳制品微生物检验方法双歧杆菌的检验
YLNB 3.7 1、引用依据：GB/T4789.34-2003
2、术语和定义
双歧杆菌：一群能分解葡萄糖，产生大量乙酸和乳酸，厌氧，不耐酸，不形成芽孢，不运动，细胞呈现多样形态的革兰氏阳性杆菌。
3、仪器及器材
3.1培养箱：36±1℃；
3.2 恒温水浴：46±1℃；
3.3显微镜；
3.4厌氧培养箱；
3.5离心机；
3.6 天平；
3.7电炉；
3.8吸管；
3.9 广口瓶或三角瓶：容量为500ml；
3.10 平皿：直径约90mm；
3.11 试管；
3.12 酒精灯；
3.13 灭菌刀或剪子；
3.14 灭菌镊子。
4、培养基和试剂
4.1 生理盐水；
4.2 75%乙醇溶液；
4.3 TPY 琼脂培养基；
4.4 BL 琼脂培养基；
4.5 BBL 琼脂培养基；
4.6双歧杆菌生化用基础培养基 ；
4.7 PYG 液体培养基；
4.8革兰氏染色液；
4.9灭菌液体石蜡。
5. 检验程序
36±1℃ 72h ±3h
37℃ 72 h
测定乙酸、乳酸 生化培养观察10天
接受PYG 厌氧培养 分纯 厌氧培养 选择2—3个适当稀释度，各取0.1mL 分别涂布于BL,BBL,TPY 培养基 25g （mL ）检样加225mL 灭菌生理盐水，做成几个适当倍数的稀释液 菌中鉴定报
菌落计数报告 革兰氏染色，过氧化氢酶试验
6、方法
6.1以无菌操作将充分混匀的检样25g（ml）放入含有225ml 灭菌生理盐水的灭菌锥形瓶内做成1：10的均匀稀释液。
6.2 用1 ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1 ml，沿管壁徐徐注入含有9 ml灭菌生理盐水的试管内，振摇混匀，作成1：100的稀释液。
6.3 另取1 ml灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
6.4选取2个～3个以上适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，各取0.1ml分别加入计数培养基平皿，均匀涂布，每个稀释度作两个平皿。
最好同时选用2种～3种培养基（BL、BBL、TPY培养基），同时作灭菌生理盐水空白对照。
6.5待琼脂表面干后，翻转平皿，放置厌氧罐内，操作全过程须在20min内完成。
6.6将厌氧罐置36℃±1℃温箱内培养培养72h±3h，观察双歧杆菌菌落特征见表1。
选择菌落数在30～300之间的平板对可疑菌落进行计数，随机挑取五个可疑菌落进行革兰氏染色，显微镜检查和过氧化氢酶试验。
过氧化氢酶阴性，革兰氏染色阳性，无芽孢，着色不均匀，出现“Y”或“V”型的分叉状、或棒状等多形态的杆菌可定为双歧杆菌。
表1 双歧杆菌在不同培养基上菌落生化形态特征
培养基双歧杆菌特征
BL培养基为黄色菌落中等大小，表面光亮，边缘整齐呈瓷白色、奶油色，质地柔软、细腻
BBL培养基为黄色菌落中等大小，表面光滑、凸起，边缘整齐呈奶油色，质地柔软、细腻
TPY培养基为黄色菌落表面光滑，凸起，边缘整齐呈奶油色、瓷白色，质地柔软、细腻
6.7菌落计数：根据证实为双歧杆菌的菌落数，计算出平皿内的双歧杆菌数，然后乘以样品的稀释倍数，得每毫升样品中双歧杆菌数。
取三种培养基中计数最高的为最终结果。
例如，检样1×104倍的稀释液在BBL琼脂平板上，生成的可疑菌落为35个，取5个鉴定，证实为双歧杆菌的是4个，则1ml样品中双歧杆菌数为：
10×35×4/5×104 =2.8×106
7、双歧杆菌菌种鉴定
具体操作请参照对应的生化鉴定试剂盒的说明书。