呼吸道合胞病毒检测方法比较
不同呼吸道病原谱抗体IgM检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值比较
不同呼吸道病原谱抗体IgM检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值比较李民① 【摘要】 目的：比较不同呼吸道病原谱抗体免疫球蛋白M（IgM）检测方法在呼吸道感染诊断中的应用价值。
方法：选取2020年1月—2022年12月于济南市第三人民医院住院的明确诊断为呼吸道感染的500例患者作为研究对象，采集血清，分别用间接免疫荧光法（IFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）检测呼吸道合胞病毒-IgM抗体（RSV-IgM）、腺病毒-IgM 抗体（ADV-IgM）、甲型流感病毒-IgM抗体（IFZA-IgM）﹑乙型流感病毒-IgM抗体（IFZB-IgM）、副流感病毒-IgM抗体（HPIVs-IgM）、嗜肺军团菌-IgM抗体（LP-IgM）﹑肺炎衣原体-IgM抗体（CP-IgM）﹑肺炎支原体-IgM抗体（MP-IgM）。
以直接免疫荧光法（DFA）结果为金标准，比较IFA、ELISA检测上述指标的符合率，比较IFA和ELISA对不同标本采集时间病原体IgM抗体检测的符合率。
比较IFA和ELISA对不同疾病类型患者病原体IgM抗体检测的符合率。
结果：以DFA 结果为金标准，IFA检测CP-IgM、MP-IgM阳性符合率高于ELISA，差异有统计学意义（P<0.05）。
IFA、ELISA在7~14 d、15~21 d、>21 d的阳性符合率明显高于<7 d，差异有统计学意义（P<0.05）。
IFA检测支气管炎的阳性符合率高于咽峡炎，毛细支气管炎阳性符合率高于咽峡炎，差异有统计学意义（P<0.05）；ELISA检测支气管炎的阳性符合率高于肺炎、咽峡炎，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论：IFA与ELISA均可快速检测血清lgM抗体，明确感染源，对指导治疗有积极的意义，有较高的价值。
但检测结果受发病时间、疾病类型的影响，应引起重视。
【关键词】 抗体IgM 间接免疫荧光法 酶联免疫吸附法 呼吸道感染 价值 doi：10.14033/ki.cfmr.2023.32.019 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2023）32-0073-04 Comparison of the Application Value of Different Respiratory Pathogen Spectrum Antibody IgM Detection Methods in the Diagnosis of Respiratory Infection/LI Min. //Chinese and Foreign Medical Research, 2023, 21(32): 73-76 [Abstract] Objective: To compare the application value of different respiratory pathogen spectrum antibody immunoglobulin M (IgM) detection methods in the diagnosis of respiratory infections. Method: A total of 500 patients who were hospitalized at Jinan Third People's Hospital from January 2020 to December 2022 and were diagnosed with respiratory tract infections were selected as the research subjects. Serum samples were collected, indirect immunofluorescence assay (IFA) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were used to detect respiratory syncytial virus-IgM antibodies (RSV-IgM), adenovirus-IgM antibodies (ADV-IgM), influenza A virus-IgM antibodies (IFZA-IgM), influenza B virus-IgM antibodies (IFZB-IgM), parainfluenza virus-IgM antibodies (HPIVs-IgM), legionella pneumophila-IgM antibodies (LP-IgM), chlamydia pneumoniae-IgM antibodies (CP-IgM), and mycoplasma pneumoniae-IgM antibodies (MP-IgM). Using direct immunofluorescence assay (DFA) results as the gold standard, IFA and ELISA were used to compare the coincidence rates of the above indicators, and IFA and ELISA were used to compare the coincidence rates of pathogen IgM antibody detection in different specimen collection times. The coincidence rate of IFA and ELISA for detection of pathogen IgM antibody in patients with different disease types was compared. Result: Using DFA results as the gold standard, the positive coincidence rate of CP-IgM and MP-IgM detected by IFA were higher than those by ELISA, and the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of IFA and ELISA at 7-14 d, 15-21 d and >21 d were significantly higher than those at <7 d, and the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of IFA in detecting bronchitis was higher than that of angina, and the positive coincidence rate of bronchiolitis was higher than that of angina, the differences were statistically significant (P<0.05). The positive coincidence rate of ELISA for bronchitis was higher than that for pneumonia and angina, and the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion: Both IFA and ELISA can quickly detect serum lgM antibody and identify the source of infection, which has positive significance for guiding treatment and has high value. However, the test results are affected by the time of onset and the type of disease, and should be paid attention to. [Key words] Antibody IgM Indirect immunofluorescence Enzyme-linked immunosorbent assay Respiratory tract infection Value First-author's address: Jinan Third People's Hospital, Jinan 250132, China①济南市第三人民医院 山东 济南 250132- 73 - 病原体引起的呼吸道感染是呼吸内科的常见病，不同病原体引起呼吸道感染可引起不同的临床症状，也可引起相同的症状，而同种病原体也可引起不同的呼吸道感染症状，所以快速诊断感染病原体对个体化治疗具有积极的指导意义[1]。
呼吸道感染的病原体检测与筛查方法
呼吸道感染的病原体检测与筛查方法呼吸道感染是指引起鼻咽、喉、气管和肺部炎症的疾病。
病原体多样化，包括病毒、细菌和真菌等。
为了准确诊断和及时采取治疗措施，呼吸道感染的病原体检测与筛查方法至关重要。
本文将介绍几种常用的呼吸道感染的病原体检测与筛查方法。
一、病毒核酸检测法病毒是引起呼吸道感染的主要病原体之一。
核酸检测法可通过提取样本中的病毒核酸，并采用PCR技术进行扩增和分析，从而确定感染的病毒类型。
这种方法检测速度快、敏感性高，能够精确识别呼吸道病毒感染，例如流感病毒、冠状病毒等。
此外，核酸检测法还有助于判断病毒的基因型和耐药性，为治疗提供依据。
二、细菌培养法细菌感染是呼吸道感染的另一个主要原因。
细菌培养法是通过将样本分离培养于不同培养基中，培养出细菌菌落，并通过形态学和生理学特征进行鉴定。
这种方法适用于检测多种呼吸道细菌感染，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。
细菌培养法虽然耗时较长，但结果准确可靠，可用于指导临床合理使用抗生素。
三、快速免疫学检测法快速免疫学检测法是通过检测呼吸道感染病人体液中的特定抗体或抗原，来确定病原体的存在。
这种方法操作简单、迅速，结果可在数分钟内得出。
对于流行病学调查和大规模筛查非常有用。
例如，利用快速免疫学检测法可以检测出呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒等病原体。
四、荧光定量PCR法荧光定量PCR法是在常规PCR技术的基础上发展起来的一种高通量方法。
它采用特定的引物和探针结合荧光信号的定量分析，可同时检测多种呼吸道病原体。
这种方法的优势在于高通量、高效率和高灵敏度，提高了检测效率和准确性，对于大规模筛查和快速诊断非常有意义。
五、新型检测方法的研发随着科学技术的不断进步，新型的呼吸道感染病原体检测方法也在不断研发中。
例如，基因芯片技术可以同时检测数百种病原体，为快速诊断提供有力的支持。
此外，基于质谱技术的代谢组学分析和微生物组学研究也在广泛应用于呼吸道感染的病原体检测与筛查领域。
总结起来，呼吸道感染的病原体检测与筛查方法是非常重要的临床实践，有助于准确诊断、采取针对性的治疗措施，并对疫情的控制和预防起到关键作用。
两种快速检测呼吸道合胞病毒抗原的方法比较
供可靠 的诊断依据 。 目前 ， 床 上检 测 Ｒ Ｖ 的方 法 很 多 ， 直 接 荧 临 Ｓ 有
光免疫 法 （ ｉｃ ｍ ｎｆｏｅｅ ｓａ， Ｆ ） 间接 荧 Ｄｒ ｔｍ ｕｏｕｒ ｅａ ｙＤ Ａ 、 ｅ ｉ ｌ ｓ ｓ 光免 疫 法 、 联 酶 标 免 疫 法 、 ＬＳ 病 毒 分 离 、 Ｔ 桥 Ｅ ＩＡ、 Ｒ－ Ｐ Ｒ及核 酸杂 交 法 等 。但 均 需 要 特 殊 的仪 器设 备 ， Ｃ 且 出结果 相对 较慢 。本研 究是 用一 种免疫 层 析分 析
技术 （ｍ ｕ ｏｈｏ ａ ｇ ｐ ｉ ａｓｙ ＩＡ） 检 测 Ｒ Ｖ Ｉｍ ｎｅｒｍ ｔ ｒ ｈｃ ｓａ ，Ｃ 来 ｏａ Ｓ
抗原 ， 将此种 新方 法与 临床 常 用 的 Ｄ Ａ法 进行 比 并 Ｆ 较 分析 ， 从而找 出一种 快 速 、 确 、 便 的检 测方 法 。 准 方
１ 资 料 与方法
无 菌 操 作 取 约 １ｍ 转 运 培 养 物 于 ｌ
次性 试 管 中 ， 心 １ ｉ（８０转 ／ ｉ）弃 上 清 ， 离 ０ｍｎ １０ ｍｎ ，
管 口用 滤 纸 吸 干 。加 Ｐ Ｓ３至 ４滴 ， 散 管 底 ， Ｂ 打 加 Ｐ Ｓ至 ４Ｈｌ离 心 １ ｌ （８０转 ／ ｉ）弃 上 清 ， Ｂ ｌ ， ０Ⅱｎ １０ ｉ ｍｎ ， 管 口用滤 纸 吸干 。再 加 １ Ｐ Ｓ 打散 细胞 ， 吸头滴 滴 Ｂ， 用 加 在玻 片孔 内 ， 显微 镜观察 上皮 ， 用 细胞 少 的情况 要 注明 。待 片子 自然 干燥 后 将 片 子放 入 平 皿 ， 丙酮 用 浸没 片子 ， ２Ｃ一８Ｃ，０ｍｎ固定 。将 玻 片 晾干 ， 放 ￣ ￣ １ ｉ 放 ２Ｃ一８Ｃ ￣ ￣保存 待 染色 。染 色 时 ， 先将 片 子 放置 室 温 ， 加 染 液 １滴 ， 湿 盒 ３￣ 浴 ， 持 ３ ｉ。 滴 放 ７Ｃ温 保 ０ｍｎ Ｐ Ｓ冲洗后 ， 用 Ｐ Ｓ泡 １ ｉ。用 Ｐ Ｓ冲洗 几 次 Ｂ 再 Ｂ ０ｍｎ Ｂ 后吹 干片 子 。滴 封 固剂 盖 片 。用荧 光显 微 镜 观察 。 结果 判读 ： 细胞 浆呈苹 果绿 色荧 光 即为 阳性 细胞 ； 而
胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析
胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析伊洁;肖艳;刘亚昆;徐英春【摘要】Objective To investigate the sensitivity and specificity of colloidal gold immunochromatography assay in rapid detection of respiratory syncytial virus (RSV)antigen.Methods A total of 197 nasal-pharyngeal swabs (NPs)or nasal-pharyngeal aspirates (NPAs ) obtained from patients were tested by RSV assay kits, i. e., colloidal gold immunochromatography assay.The results determined by reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)were taken as pared to the results of RT-PCR,the sensitivity of the kit was different when testing different types of specimens or specimensobtained from patients of different ages.Results A total of 95 (48.2%)samples were positive for RSV tested by RT-PCR.The sensitivity and specificity of colloidal gold immunochromatography assay were 34.7% and 100%, respectively compared with RT-PCR results.The positive rate of the assay was higher in testing NPAs than NPs (36.2% vs 8.6%,P < 0.01 ), which was the same in the sensitivity (22.1% vs 12.6%). The positive rate of colloidal gold year old,RT-PCR method should be used for RSV detection in clinical practice to avoid missed diagnosis.%目的：分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒（RSV）抗原快速检测的灵敏度和特异度。
呼吸道合胞病感染的临床诊治指南
呼吸道合胞病感染的临床诊治指南呼吸道合胞病感染，又称为RSV感染，是一种常见的呼吸道疾病，主要由呼吸道合胞病病毒（RSV）引起。
该病毒主要感染婴幼儿和老年人，并可导致严重的呼吸道症状。
为了有效地诊断和治疗呼吸道合胞病感染，制定一份合理的临床诊治指南至关重要。
一、临床表现呼吸道合胞病感染的临床表现多样，常见症状包括咳嗽、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、发热等。
儿童常伴有食欲不振、哭闹、疲乏、呼吸急促等症状。
老年人可能出现咳出带黏液的咳痰、呼吸困难等严重症状。
对于出现呼吸道感染症状的患者，应高度怀疑呼吸道合胞病感染。
二、实验室检查在临床诊断中，实验室检查起着重要的作用。
对于可疑的呼吸道合胞病感染患者，可以通过咽拭子或鼻拭子来采集样本，使用融合抑制试验（Fusion Inhibition Test）或免疫荧光抗体染色试验（Immunofluorescence Assay）来检测RSV的抗原。
此外，也可以通过核酸检测方法，如PCR（聚合酶链反应）来检测RSV的核酸。
三、诊断标准呼吸道合胞病感染的诊断需符合以下标准：临床症状典型、病毒学检查阳性、排除其他呼吸道病原体感染。
在进行临床诊断时，需要综合考虑患者的临床表现、实验室检查结果以及流行病学资料。
四、治疗原则针对呼吸道合胞病感染，治疗的原则主要包括对症治疗和预防措施。
1. 对症治疗：a. 对于轻型病例，一般无需特殊治疗，休息、饮食调理、多喝水等措施即可缓解症状。
b. 对于中重型病例，可使用抗病毒药物治疗，如瑞德西韦，对症状有明显改善作用。
同时，应密切观察患者的呼吸情况，如有持续呼吸困难或氧合不足等严重症状，需及时给予氧疗、呼吸支持等治疗。
2. 预防措施：a. 对于免疫力低下的患者，如婴幼儿、老年人和慢性病患者，应加强个人卫生习惯，勤洗手、避免接触病毒源等。
b. 对于家庭中有感染者的家庭成员，应注意隔离措施，保持室内空气流通，使用口罩等。
c. 对于医疗保健工作者，应加强自身防护，戴口罩、手套等，避免交叉感染。
2020版：儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(全文)
2020版：儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识(全文)和流行概况呼吸道合胞病毒是全球范围内最常见的儿童急性下呼吸道感染病原，尤其对五岁以下的儿童造成严重威胁。
早产儿、患有先天性心脏病或原发免疫缺陷的婴幼儿更容易受到感染，病情也更加严重。
然而，目前还没有RSV疫苗或有效的抗病毒药物用于治疗该病毒感染。
唯一可用于预防RSV感染的人源化特异性抗体帕利珠单抗尚未引进国内临床应用。
因此，我们需要进一步规范儿童RSV感染的诊断、治疗及预防。
2儿童RSV感染的病理生理特点及致病机制2.1病理生理特点RSV感染主要侵犯呼吸道上皮细胞，引起炎症反应和细胞死亡。
这些病理生理特点可能导致上呼吸道感染、下呼吸道感染、肺炎等严重疾病。
2.2致病机制RSV感染的致病机制包括直接细胞毒性和免疫反应。
RSV感染会激活宿主细胞的免疫系统，导致炎症反应和细胞损伤。
此外，RSV感染还可以干扰宿主免疫系统的正常功能，进一步加重病情。
3儿童RSV感染的诊断标准3.1临床表现儿童RSV感染的临床表现包括上呼吸道感染、下呼吸道感染、肺炎等症状。
常见的症状包括发热、咳嗽、喘息、呼吸急促等。
3.2实验室检查实验室检查可以帮助诊断儿童RSV感染，包括鼻咽拭子或喉拭子的RSV抗原检测、呼吸道分泌物的病毒核酸检测等。
4儿童RSV感染的治疗方法目前，尚无特效的抗病毒药物用于治疗儿童RSV感染。
临床上采用对症治疗和支持治疗的方法，包括保持水分平衡、氧疗、支气管扩张剂等。
5儿童RSV感染的预防措施5.1个体预防个体预防措施包括避免接触已感染的人、勤洗手、保持室内通风等。
5.2集体预防集体预防措施包括加强儿童疫苗接种、加强儿童医疗机构的感染控制措施等。
帕利珠单抗是一种有效的预防RSV感染的方法，但目前尚未引进国内临床应用。
RSV是最常见的婴幼儿ALRTI病原，其感染率随年龄增长而上升。
根据血清流行病学调查，人群抗RSVIgG抗体阳性率从1到6个月龄为71%，随后逐渐上升，在6到12个月龄、1到3岁、3到6岁和6岁以上分别为84%、89%、96%和98%，20岁以上则达到100%。
如何区分呼吸道合胞病毒和流感
呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，简称RSV）和流感（Influenza）都是常见的呼吸道感染病原体，它们在症状、传播途径和预防措施等方面有一定的相似性。
然而，它们之间还是存在一些区别的。
本文将从以下几个方面对呼吸道合胞病毒和流感进行区分：1. 病原体特点呼吸道合胞病毒是一种属于副黏液病毒科的单链负链RNA病毒，其特点是在电镜下观察到的病毒颗粒呈圆形或椭圆形，表面有类似皇冠状的突起。
呼吸道合胞病毒主要通过飞沫、密切接触和空气气溶胶传播。
流感是由A、B、C三种流感病毒引起的急性呼吸道传染病，其中A型和B型流感病毒对人类健康影响较大。
流感病毒也是单链负链RNA病毒，但其形态与呼吸道合胞病毒有所不同，流感病毒颗粒呈球形或六角形，表面有类似刺突的结构。
流感病毒主要通过飞沫、空气气溶胶和直接接触传播。
2. 症状特点呼吸道合胞病毒感染的症状主要包括咳嗽、喘息、鼻塞、流涕、发热等，病程一般为1-3周。
婴幼儿感染后可能出现呼吸急促、喂养困难等症状，严重时可能导致肺炎、支气管炎等并发症。
流感的症状与呼吸道合胞病毒感染相似，但通常更为严重。
流感的典型症状包括高热、寒战、咳嗽、喉咙痛、鼻塞、流涕、肌肉疼痛、头痛等。
部分患者可能出现恶心、呕吐和腹泻等消化道症状。
流感病程通常为1-2周，但部分患者可能出现并发症，如肺炎、心肌炎等。
3. 易感人群呼吸道合胞病毒感染主要发生在婴幼儿和儿童中，尤其是6个月以下的婴儿。
老年人和免疫功能低下的人群也容易感染呼吸道合胞病毒。
流感对各年龄段人群普遍易感，但儿童、老年人和免疫功能低下的人群感染后病情较重，并发症风险较高。
此外，孕妇感染流感后可能对胎儿造成不良影响。
4. 预防措施针对呼吸道合胞病毒和流感的预防措施主要包括疫苗接种、保持良好的个人卫生习惯和加强免疫力。
对于婴幼儿和高风险人群，建议接种相应的疫苗以降低感染风险。
此外，保持室内空气流通、勤洗手、避免拥挤的公共场所等也有助于降低感染风险。
呼吸道病毒九联检技术讲解
样本结果判断
阴性结果：可观察到军团菌、肺炎衣原体 和立克次体无荧光，支原体、腺病毒、甲 型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副 流感病毒的细胞呈现红色。
临床灵敏度和特异性
病原体 嗜肺军团菌 肺炎支原体 Q热立克次体 肺炎衣原体 腺病毒 呼吸道合胞病毒 甲型流感病毒 乙型流感病毒 副流感病毒
对比方法 IFA ELISA IFA IFA ELISA ELISA ELISA ELISA ELISA
呼吸道病毒九联检技术
九项呼吸道感染病原体IgM抗体
采用间接免疫荧光法（IFA） 同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体
的IgM抗体 用于呼吸道感染疾病的辅助诊断。
可检的病原体包括： 嗜肺军团菌血清1型、 肺炎支原体、 Q热立克次体、 肺炎衣原体、 腺病毒、 呼吸道合胞病毒、 甲型流感病毒、 乙型流感病毒 副流感病毒1、2和3型。
结果判断
有效性判断 每一次试验都应设立阳性和阴性对照，以确认试验和试
剂盒的有效性。观察到的荧光模式应为： 阳性对照：腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流
感病毒对阳性质控的1-15%细胞出现苹果绿细胞核、胞 浆或胞膜荧光（在副流感病毒和呼吸道合胞病毒中能同 时观察到着色的合胞）；军团菌、衣原体或立克次体中 所有的细菌呈现出苹果绿荧光；支原体对阳性质控在细 胞外围呈现苹果绿色荧光。 阴性对照：军团菌、肺炎衣原体和立克次体无荧光，支 原体、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒 和副流感病毒的细胞呈现红色。
样本数量 82 62 74 61 74 97 46 40 36
阳性符合率 94.4% 96.8% 100.0% 100.0% 85.7% 93.8% 94.1% 100.0% 100.0%
呼吸道病原体抗原七项的检测及临床意义
检验医学资讯(201403)“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义一、呼吸道病毒简介呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。
据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。
常见的呼吸道病毒包括：A型流感病毒（甲型流感病毒）、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。
流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒图1 各种病毒在电子显微镜下的形态二、呼吸道病毒临床诊断现有的主要方法：1、抗原检测；2、抗体检测；3、病毒分离培养；4、分子生物学方法等。
现将上述检测方法的优劣小结于表1。
目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。
表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较检测方法优点缺点病毒分离培养特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致假阴性。
抗原检测酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应间接免疫荧光法简便、快速有非特异性反应需要使用荧光显微镜直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高且可用于疾病的早期诊断需要使用荧光显微镜抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵三、呼吸道病原体抗原的优越性1、从理论上讲，只要有病毒感染，通过抗原检测都能鉴定出，而抗体检测却要在人体产生免疫应答以后才能进行鉴定。
2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间，而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童，特别是3岁以下的小孩，其产生抗体往往需要更久，且抗体产生的水平也较低。
若检测的是IgG，则不能很好地区分既往感染和急性感染。
因此，抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势（详见表2）。
表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较病原体抗体IgM检测病原体抗原检测检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出临床意义回顾性诊断，适用于疾病后期的诊断，多用于循证医学可用于疾病早期诊断对患者的治疗有重要指导意义检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒将多种抗体进行组合，能更好地应对变异的病毒检测方法一般使用酶联免疫（ELISA）或者间接免疫荧光法，有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法，几乎没有非特异性反应四、为什么要早期全面检测？1、病毒治疗针对性强2、病毒治疗有时效性3、避免抗生素的滥用五、项目开展的价值和社会效益分析本项目可用于呼吸道病原学的研究；提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平；还可用于呼吸道传染病流行的监控等。
呼吸道合胞病毒的检测方法
呼吸道合胞病毒的检测方法曾军荣【摘要】@@ 呼吸道合胞病毒(RSV)是引起冬春季婴幼儿下呼吸道感染最常见、最重要的病原体之一,约50%的婴儿肺炎和90%的婴儿支气管炎均是因感染RSV 所致;最新的研究发现免疫功能缺陷的成年人及老年人也是RSV的易感人群[1-2].目前尚无有效的RSV疫苗面世.因此,快速、准确的RSV检测技术不仅对监测与控制RSV流行具有十分重要的意义,而且能为临床早期诊断提供可靠的实验室依据,也是合理选择治疗方案的基础[3].了解呼吸道合胞病毒检测手段和开展快速病毒检测,已成为当务之急.本文就RSV的检测方法作一简要综述.【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2011(008)011【总页数】4页(P1348-1350,1385)【关键词】呼吸道合胞病毒;呼吸道感染;检测方法【作者】曾军荣【作者单位】广东省从化市中心医院检验科,510900【正文语种】中文呼吸道合胞病毒(RSV)是引起冬春季婴幼儿下呼吸道感染最常见、最重要的病原体之一，约50%的婴儿肺炎和90%的婴儿支气管炎均是因感染RSV所致;最新的研究发现免疫功能缺陷的成年人及老年人也是RSV的易感人群[1-2]。
目前尚无有效的RSV疫苗面世。
因此，快速、准确的RSV检测技术不仅对监测与控制RSV流行具有十分重要的意义，而且能为临床早期诊断提供可靠的实验室依据，也是合理选择治疗方案的基础[3]。
了解呼吸道合胞病毒检测手段和开展快速病毒检测，已成为当务之急。
本文就RSV的检测方法作一简要综述。
1 呼吸道合胞病毒的检测方法[4-11]检测呼吸道合胞病毒感染，目前国内外多采用病毒分离培养法、间接免疫荧光法(IF)、直接免疫荧光法、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法(APAAP)、生物素-链霉亲和素-过氧化物酶法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、病毒快速检测法、分子生物学法，如多重逆转录聚合酶链反应(mRT-PCR)、巢式PCR及核酸杂交、多重实时PCR、基因芯片技术、悬浮阵列技术等多种检测手段。
七项呼吸道病毒综合检测 项目简介
七项呼吸道病毒综合检测项目简介七项呼吸道病毒综合检测采用抗原检测方法，能覆盖常见的大多数呼吸道病毒，包括：A型（甲型）流感，B型（乙型）流感，呼吸道合胞病毒，腺病毒，副流感病毒1、2和3型，共七种呼吸道疾病相关病毒。
使用国外先进的直接免疫荧光法，灵敏度最低可以检测1.0PFC的病毒量，而且和多种病毒、细胞及细菌均无交叉反应。
临床意义
适检症状
学龄儿童高热，鼻炎，咽炎，细支气管炎，肺炎等呼吸道感染；成年人持续性高烧不退，不明原因发热，急性呼吸道感染等。
标本采集要求
1.拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入（不要向鼻腔伸入），伸入距离为从耳垂部到鼻尖长
度的一半，一般针对两周岁以下儿童，伸入距离约为拭子绒毛头的长度两倍。
2.拭子伸入后要轻轻捻动拭子转圈
3.取样后在一小时之内洗脱到生理盐水管中
4.4、2-8℃保存运输。
临床项目收费标准。
呼吸道合胞诊断标准
呼吸道合胞诊断标准呼吸道合胞（respiratory syncytial virus，简称RSV）感染是婴幼儿时期常见的病毒性感染之一。
本文将介绍呼吸道合胞的病原学特征、感染机制以及目前广泛应用的合胞诊断标准。
一、呼吸道合胞的病原学特征呼吸道合胞属于单股正链RNA病毒，属于轮状病毒科。
该病毒具有较强的传染性，在冬季和春季流行最为严重。
主要通过飞沫传播，也可通过间接接触传播，如被污染的手、衣物等。
婴幼儿是主要的感染人群，特别是6个月以下的婴儿，其抵抗力较差，易受到感染。
二、呼吸道合胞的感染机制呼吸道合胞感染的主要靶器官为上呼吸道，包括鼻腔、喉咙、支气管和肺部。
RSV感染的初期病理变化是感染细胞的嵌合形成合胞，形成巨细胞。
合胞内含有病毒包膜和核酸，通过小梁体连接，形成具有多核的异核细胞。
这种合胞结构有助于病毒扩散和蔓延，并导致病毒对宿主免疫系统的逃逸，从而引起炎症反应和机体病理损害。
三、呼吸道合胞的临床表现呼吸道合胞感染主要表现为上呼吸道症状，如鼻塞、流涕、咳嗽、咳痰等。
部分患者可能出现发热、咽痛、食欲不振和体重下降等症状。
对于婴幼儿来说，呼吸道合胞感染还可能引起腹泻、呼吸急促以及吸气性鸣叫音等。
四、呼吸道合胞的诊断标准呼吸道合胞的诊断主要依据临床表现、病毒学检测和影像学表现等。
以下为常用的RSV合胞诊断标准：1. 临床表现：对于存在上呼吸道症状的患者，特别是婴幼儿，应高度怀疑呼吸道合胞感染。
主要表现为鼻塞、流涕、咳嗽等症状，常伴有发热。
2. 病毒学检测：目前，常用的病毒学检测方法包括鼻咽拭子或鼻腔吸取标本中的RSV RNA检测、免疫荧光染色和RSV抗体滴度测定等。
这些检测方法可以明确病毒感染的存在并确定其类型。
3. 影像学表现：胸部X线检查可以帮助判断呼吸道合胞感染的病情。
受感染的患者往往出现肺部浸润、间质性病变和肺泡腔积液等改变。
综上所述，呼吸道合胞感染是一种常见的病毒感染，在婴幼儿中流行较为严重。
牛呼吸道综合征多重PCR检测方法的建立及牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定
牛呼吸道综合征多重PCR检测方法的建立及牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定牛呼吸道综合征多重PCR检测方法的建立及牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定引言：牛呼吸道综合征（bovine respiratory disease，BRD）是一种常见的牛群传染病，对牛群健康和养殖业造成了严重的经济损失。
其中，牛呼吸道合胞体病毒（bovine respiratory syncytial virus，BRSV）是导致牛呼吸道综合征的重要病原体之一。
因此，建立一种准确、快速的多重PCR检测方法，并对BRSV进行分离鉴定，对疾病的预防和控制具有重要意义。
方法：1. 样品采集和处理：从临床疑似感染的牛群中采集呼吸道分泌物样品，并使用生理盐水或PBS溶解样品。
2. RNA/DNA提取：采用商业化的RNA/DNA提取试剂盒进行样品中RNA或DNA的提取，并按照说明书进行操作。
3. 多重PCR试剂的设计和制备：根据BRSV的特异性基因序列，设计引物和探针，通过合成化学方法制备多重PCR试剂。
4. PCR反应条件的优化：确定最佳的PCR反应体系、引物和模板浓度，并优化反应条件（温度、时间）以提高PCR的灵敏度和特异性。
5. PCR扩增：将提取的RNA/DNA样品作为PCR反应的模板进行扩增，使用PCR扩增仪进行PCR反应，最终获得扩增产物。
6. 凝胶电泳和分析：将PCR扩增产物进行凝胶电泳分析，通过比较产物的大小和阳性对照，判断样品中是否存在目标基因。
7. BRSV的分离鉴定：对PCR阳性样本进行病毒分离，通过对病毒感染细胞的观察，确认是否存在BRSV病毒。
结果：1. 多重PCR方法的建立：通过反复优化和验证，确定了一套高度特异性和敏感性的多重PCR方法，可以同时检测多种BRD相关病原体，包括BRSV。
2. PCR阳性样本的分离鉴定：将PCR阳性样本接种于感受器官良好的细胞系中，观察细胞是否形成合胞体，通过电镜观察和免疫荧光染色，最终成功分离鉴定了BRSV。
呼吸道合胞病毒核酸分型检测性能验证
呼吸道合胞病毒核酸分型检测性能验证作者：俞敏来源：《科学大众》2020年第05期摘要：呼吸道合胞病毒核酸分型检测已经成为患儿诊断、治疗及预后情况的重要检测手段。
在文章中，将采用实验分析的方法，对呼吸道合胞病毒核酸分型检测性能进行评估，希望能为指导临床工作提供一定的支持。
关键词：呼吸道合胞病毒;核酸分型检测;性能验证呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus Pneumonia，RSV）是儿童呼吸道感染的主要病原体，可引起间质性肺炎及毛细支气管炎。
患儿发病后临床常表现为轻度的中耳炎或者上呼吸道感染，随着病情的发展，可演变为下呼吸道感染等，严重的会危及患儿生命，因此需要寻找一种能够有效诊断呼吸道合胞病毒的方法，保证患儿能够得到及时的诊断和治疗。
1 ; ;性能验证实验1.1 ;实验材料选择以某医院于2018年4月份提供的咽拭子样本为研究对象，样本在经过免疫荧光法抗原分型检测后，发现抗原检测为阳性的样本数为20份，抗原检测为阴性的样本数为20份，其中呼吸道合胞病毒感染患者在经过抗病毒治疗有效后，检测结果为阴性的患者无病毒感染症状。
1.2 ;实验方法1.2.1 ;符合率验证向咽拭子标本中添加500 μL生理盐水进行涡旋洗脱，相关试剂为上海之江生物科技有限公司生产的全自动核酸提取仪及其配套试剂盒，按照操作说明书进行操作。
使用RSV分型核酸检测试剂盒以及荧光定量聚合酶链反应仪测量核酸，其中的基本操作程序均按照说明书进行。
从患者的咽拭子中提取核酸，检测核酸AB分型以及阴阳分型的情况，记录检测结果;扩增产物送至生物医药科技有关公司做高通量测量。
测量结果与美国国立生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）标准序列进行对比，根据对比结果判断是否满足呼吸道合胞病毒分型标准。
在得到测量试剂盒的测试结果与测序结果后，判断精准度，记录测量结果的符合率。
儿童七种呼吸道病毒检测结果分析
儿童七种呼吸道病毒检测结果分析引言呼吸道病毒感染是儿童常见的疾病，它们常导致儿童出现咳嗽、打喷嚏、流鼻涕等症状。
临床上，七种呼吸道病毒（RSV、流感病毒、腺病毒、鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和人类鼻病毒）是最常见的病原体。
通过对呼吸道病毒进行检测，可以帮助医生准确判断病原体，合理选择药物治疗，减少儿童的病情并发症。
本文将对儿童七种呼吸道病毒检测结果进行分析，以帮助家长了解不同病毒感染的特点和处理方法。
一、RSV（呼吸道合胞病毒）RSV是引起小儿支气管炎、肺炎和气道高反应性疾病的常见病原体。
婴幼儿是RSV感染的高危人群，临床表现为发热、咳嗽、呼吸困难等症状。
对于RSV感染，主要的治疗方法是对症支持治疗，同时注意保持呼吸道通畅。
在病毒排泄期间，婴幼儿应该避免接触其他感染者，以减少病毒传播。
二、流感病毒流感病毒是一种季节性的呼吸道病毒，主要通过飞沫传播。
流感病毒感染后的临床症状包括突然发热、头痛、肌肉酸痛、咳嗽等。
对于确诊的流感病毒感染，可以使用抗病毒药物进行治疗，以减少病毒复制和减轻症状。
流感病毒疫苗对儿童也是一种有效的预防方式，建议适龄儿童接种疫苗。
三、腺病毒腺病毒感染主要引起上呼吸道感染和结膜炎等疾病，临床表现包括咳嗽、鼻塞、咽痛、结膜充血等。
腺病毒感染的治疗主要是对症治疗，包括使用退烧药、保持呼吸道通畅等。
腺病毒感染后容易引起二次感染，儿童在康复期间需注意避免接触其他呼吸道感染源。
四、鼻病毒鼻病毒感染是引起感冒的重要病原体之一，主要表现为咽痛、打喷嚏、流鼻涕等症状。
鼻病毒感染通常需要进行对症治疗，包括休息、多喝水、适当使用抗病毒药物等。
鼻病毒感染后容易引起继发性细菌感染，因此需要定期复查病情，及时处理并发症。
五、副流感病毒副流感病毒感染的临床表现与常规流感相似，症状包括咳嗽、喉咙痛、发热等。
对于副流感病毒感染的治疗主要是对症治疗和预防继发感染。
由于副流感病毒的传播途径与流感病毒相似，预防措施也类似于流感，建议儿童接种对应的疫苗以预防其感染。
呼吸道合胞病毒和腺病毒的检测与分型
呼吸道合胞病毒和腺病毒检测与分型首都儿科研究所 邓洁大家好！下面我跟大家交流一下呼吸道合胞病毒和腺病毒的检测与分型方法。
呼吸道合胞病毒是属于副粘液病毒科的一种RNA病毒。
它是造成世界范围内婴幼儿下呼吸道病毒性感染最常见的原因之一，特别是2 — 6个月的小婴儿在感染呼吸道合胞病毒以后常常可以发生严重的毛细支气管炎和肺炎。
另外呢它还是引起老年人慢性支气管炎加重以及免疫损伤患儿下呼吸道感染的重要病原。
呼吸道合胞病毒最早是在1956年在伴有感冒症状的猩猩体内分离到的。
在1957年又从患有下呼吸道疾病婴儿的鼻咽分泌物中分离到，由于它在细胞中可以引起细胞融合病变，所以呢就根据它在组织培养中的细胞病变特征呢命名为呼吸道合胞病毒。
呼吸道合胞病毒呢它是由包裹负链RNA的核衣壳和包膜组成，其RNA全长为15225个核苷酸，编码10个蛋白。
其中呢G蛋白和F蛋白呢是位于病毒颗粒的表面，是呼吸道合胞病毒的主要糖蛋白。
呼吸道合胞病毒的抗原变异，在70年代应用动物高价免疫血清的交叉中和试验即证明呼吸道合胞病毒毒株之间存在着细微的差异。
在80年代随着特异的呼吸道合胞病毒单克隆抗体的应用，发现呢在G蛋白、F 蛋白、P蛋白以及N蛋白等蛋白上存在着抗原的变异性。
呼吸道合胞病毒亚型有什么差异呢？我们说呼吸道合胞病毒分为两个亚型A和B，它们的主要区别呢，主要是在于G、F、N、P蛋白上的抗原组成不同，其中G蛋白的可变性最高。
A和B亚型G蛋白之间仅存在5%的抗原相关性，而F蛋白则接近50%。
在氨基酸水平上，A和B亚型G蛋白只有53%的同源性，而F蛋白则为89%。
那么呼吸道合胞病毒亚型与反复感染有什么关系呢？我们说由于G蛋白是激发机体产生保护性抗体最主要的病毒抗原之一，而不同亚型呼吸道合胞病毒G蛋白激发机体产生的保护性抗体呢，不能有效地提供亚型间的交叉保护作用。
所以亚型的存在呢可能是同呼吸道合胞病毒的反复感染有关。
那么呼吸道合胞病毒A、B亚型的致病性又有哪些区别呢？这都是一些文献的报道，有一些文献报道呢，说A亚型呼吸道合胞病毒呢具有较强的致病性。
环介导恒温扩增技术用于呼吸道合胞病毒的检测
环介导恒温扩增技术用于呼吸道合胞病毒的检测摘要】目的采用环介导恒温扩增技术建立快速检测儿童呼吸道合胞病毒的方法。
方法收集福建省立医院2011—2012年儿科疑似急性呼吸道感染患儿的呼吸道分泌物标本137份，同时采用环介导恒温扩增技术(LAMP)和荧光定量PCR技术检测儿童呼吸道分泌物中呼吸道合胞病毒特异性RNA，分析两者的灵敏性和特异性。
结果 LAMP法在恒温条件下进行，特异性好，其灵敏度和可靠性与荧光定量PCR方法相当。
结论 LAMP方法具有灵敏度高、特异性强等优点，仅需简易设备就能快速、高效、简便地对病原微生物进行鉴定，是一种快速检测呼吸道合胞病毒的新方法。
【关键词】呼吸道合胞病毒环介导恒温扩增技术(LAMP) 基因检测【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）18-0233-02人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus，hRSV)是引起婴幼儿冬春季下呼吸道感染最常见、最重要的病原体之一[1]。
环介导恒温扩增[2](LAMP)技术具有高效、简便等特点。
为此本文采用LAMP技术对疑似呼吸道感染的患儿鼻咽分泌物中的呼吸道合胞病毒进行检测，并与荧光定量PCR技术检测结果比较，探讨其临床应用价值。
1 材料和方法1.1 材料：(1)生物试剂：Bst DNA聚合酶为新英格兰biolabs公司产品，pMD19-T载体和MiniBEST Viral RNA提取试剂盒购自宝生物公司。
ScriptMAX TM Thermo T7试剂盒由上海硕盟生物科技有限公司提供。
LAMP引物由宝生物公司合成。
RSV荧光定量PCR试剂盒由达安基因股份有限公司出品。
(2)鼻咽分泌物样本：收集2011—2012年福建省立医院儿科(住院及门诊)疑似急性呼吸道感染患儿的呼吸道分泌物标本137份，患儿(年龄30d-14周岁)。
鼻咽分泌物标本采集按[3]方法取得。
普通小鼠和裸小鼠呼吸道合胞病毒( RSV)感染模型比较
存在的问题：目前虽然已有许多抗RSV制剂和疫苗的研究,但尚无安全有效的防治方法，RSV感染具体发病机制也不够清楚，其发病机制和抗RSV制剂的研究需要建立理想的动物模型,但目前已建立的系列感染模型均不够满意。
扩大繁殖生产方法：交通信号灯方法
裸小鼠育种繁殖:
繁殖方法：近交繁殖（同源导入近交）
初始动物的选择：挑选一对或几对具有育种目标要求的性状的全同胞兄妹
性别鉴定：
1、雄鼠的生殖器距肛门较远
2、雄鼠的生殖器较雌鼠大
3、雌鼠乳头较雄鼠明显
发情鉴定：动情期小鼠外阴部肿胀红润，抚摸其身体出现脊柱前凹、抬臀等行为现象
二实验设计方案一实验设计目标比较研究balbc小鼠和裸小鼠呼吸道合胞病毒rsv感染模型的特点以建立理想动物模型二实验设计1设计概述选用balbc鼠和裸小鼠作为实验动物感染rsv后不同时间空斑形成实验检测肺组织病毒滴度计数支气管肺泡灌洗液白细胞总数和分类情况免疫荧光和免疫组化检测rsv抗原光镜和电镜检查肺组织病理学改变实验技术方法1随机抽样
2、实验专业设计
实验动物：选用BALB/c鼠和裸小鼠作为实验动物。
1271- 1275.
[3] Meissner HC, RennelsMB, PickeringLK, et al.Risk of severe respiratory
syncytial virus disease, identification of high risk infants and recommendations
PCR-荧光探针法检测呼吸道合胞病毒在临床中的意义的开题报告
PCR-荧光探针法检测呼吸道合胞病毒在临床中的意义的开题报告1. 研究背景和意义呼吸道合胞病毒(RSV)是一种导致婴幼儿呼吸道感染的常见病原体，也是成年人和老年人引起呼吸道疾病的重要原因。
RSV感染可以引起轻度到严重的症状，包括感冒、支气管炎、肺炎等，甚至可能危及生命。
目前，诊断RSV感染主要依靠临床症状、病史和实验室检测手段。
其中，PCR-荧光探针法是一种敏感、特异、快速的检测方法，已被广泛应用于RSV感染的诊断。
本研究旨在探讨PCR-荧光探针法检测RSV在临床中的意义，为RSV 感染的诊断和治疗提供依据，以促进临床实践的规范化。
2. 研究内容和方法本研究将采用PCR-荧光探针法检测60例临床病例中的RSV感染情况，并与传统诊断方法进行对比。
同时，将分析PCR-荧光探针法检测的敏感性、特异性和准确度，并评估其在临床实践中的应用价值。
研究方法包括：（1）收集临床病例和相关实验室检测数据，明确诊断RSV感染的标准。
（2）采用PCR-荧光探针法分别对临床样本进行检测，包括鼻咽拭子、咽后拭子等。
（3）将PCR-荧光探针法检测结果和传统方法进行对比，统计分析敏感性、特异性和准确度等指标。
（4）评估PCR-荧光探针法在RSV感染的临床应用价值。
3. 预期结果和意义预计通过PCR-荧光探针法检测，可有效地检测到RSV感染，且具有高度的敏感性和特异性。
与传统方法相比，PCR-荧光探针法检测的准确度更高，能够提高RSV感染的诊断水平，并对临床治疗方案的制定和病情的监测提供依据。
通过本研究，能够更加深入地了解PCR-荧光探针法检测RSV感染的意义和价值，为临床医生提供重要的实验室参考，加强RSV感染的预防和治疗工作，提高患者的治疗效果和生活质量。