酶工程试卷3

一名词解释

1抗体酶：是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶

2酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。

3模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。

4底物抑制：在酶促反应中，高底物浓度使反应速度降低的现象。

5稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH

6产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。

7凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。

8固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶

9非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学

10液体发酵法：以液体培养基为原料进行微生物的繁殖和产酶的方法，根据通风方法不同又分为液体表层发酵法和液体深层发酵法。

二填空题(每空1分,共计30分)

1.Km值增加，其抑制剂属于(竞争性)抑制剂，Km不变，其抑制剂属于(非竞争性)抑制剂，Km减小，其抑制剂属于(反竞争性)抑制剂。

2.菌种培养一般采用的方法有(固体液体)培养法。

3.菌种的优劣是影响产酶发酵的主要因素，除此之外发酵条件对菌种产酶也有很大的影响，发酵条件一般包括(温度pH 通风量（或氧气）搅拌泡沫湿度)等。

4.打破酶合成调节机制限制的方有(控制条件遗传控制其它方法)。

5.酶生物合成的模式分是(同步合成型延续合成型中期合成型滞后合成型)。

6.根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有(热变性法酸碱变性法表面变性法)

7. 通常酶的固定化方法有(吸附法共价键结合法交联法包埋法)。

8. 酶分子的体外改造包括酶的(表面修饰内部修饰)。

9.酶与抗体的重要区别在于酶能够结合并稳定化学反应的(过渡态)，从而降低了底物分子的(能障)，而抗体结合的抗原只是一个(基)态分子，所以没有催化能力

三问答题(每题10分,共计40分)

1.在生产实践中，对产酶菌有何要求？

一般必须符合下列条件

a)不应当是致病菌，在系统发育上最好是与病原菌无关

b)能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高

c)菌种不易变异退化，不易感染噬菌体

d)最好选用产胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高

e)在食品和医药工业上应用，安全问题更显得重要。

2.对酶进行化学修饰时，应考虑哪些因素？

（1）被修饰酶的性质，包括酶的稳定性，酶活性中心的状况，侧链基团的性质及反应性（2）修饰反应的条件，包括PH与离子强度，修饰反应时间和温度，反应体系中酶与修饰剂的比例等

3.列出用共价结合法对酶进行固定化时酶蛋白上可和载体结合的功能团

（1）酶蛋白N端的α氨基或赖氨酸的∑氨基2分

（2）酶蛋白C端的羧基及天冬氨酸的β羧基或谷氨酸的γ羧基2分

（3）半胱氨酸的巯基1分

（1）丝氨酸骆氨酸苏氨酸上的羟基2分

（2）苯丙氨酸和骆氨酸上的苯环1分

（3）组氨酸上的咪唑基1分

色氨酸上的吲哚基1分

4.某酶的初提取液经过一次纯化后，经测定得到下列数据，试计算比活力，回收率及纯化

倍数。

体积（ml）活力单位（u/ml）蛋白氮（mg/ml）

初提取液120 200 2.5

硫酸铵沉淀 5 810 1.5

（1）起始总活力：200⨯120＝24000（单位）1分

（2）起始比活力：200÷2.5＝80（单位/毫克蛋白氮）1分

（3）纯化后总活力810⨯5＝4050（单位）2

（4）纯化后比活力810÷1.5＝540（单位/毫克蛋白氮）2分

（5）产率（百分产量）：4050÷24000＝17％2分

（6）纯化倍数：540÷80=6.75 2分

酶工程资料

一名词解释

1．酶的转换数：酶的转换数Kp。又称为摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数。

2．酶的催化周期：酶进行一次催化所用的时间。

3．固定化酶的比活力：指每克干固定化酶所具有的6活力单位数，它是酶制剂纯度的一个指标。

4．抗体酶：又称催化行抗体。是一类具有生物催化功能的抗体分子。抗体是由抗原诱导产生的抗原特异结构免疫球蛋白，要使机体具有生物催化功能，只要在抗体的可变区赋予酶的催化特性，以及酶的高效催化能力。是通过人工设计采用现代生物技术而获得的一类新的生物催化剂，有些是自然界原本不存在的。

5．端粒酶：是一种核酸核蛋白，包含蛋白质和RNA两种基本成分。其RNA组分包含有构建端粒的重复序列的核苷酸摸板序列，在合成端粒的过程中，端粒酶以其本身的RNA 组分为摸板把端粒的重复序列加到染色体DNA的末端上，使端粒延长。

6．核酶：核酸类酶。为一类具有生物催化功能的核糖核酸分子。它可以催化本身RNA 剪切或剪接作用，还可以催化其他RNA，DNA多糖，酯类等分子进行反应。

7．KS分段盐析：指在一定温度和PH值条件下，通过改变离子强度使不同的酶和蛋白质分离的方法。

8．B分段盐析：指在盐和离子强度条件下，通过改变温度和PH使不同的酶或蛋白质分离的方法。

9．凝胶层析：又称凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。是以各种多孔凝胶作为固定相，利用流动相中各组分相对分子质量不同达到物质分离的一种层析技术。

10．亲和层析：利用生物分子与配基间所具有的专一而不可逆的亲和力使生物分子分离纯化的方法。

11．等电聚焦电泳：又称等电点聚焦或电聚焦。指在电泳系统中，加进两性电解质载体。当接通直流电时，两性电解质载体即形成一个由阳极到阴极连续增高的PH梯度，当酶或其他两性电解质进入这个体系时，不同的两性电解质即移到与其等电点相当的PH位置上，从而使不同等电点的物质得以分离，这种电泳技术叫做等电聚焦电泳。

12．超临界流体：当压力和温度到达某一特定数值时，液体和气体物理特性就会趋于相同，该数值称为超临界点。当压力和温度超过其超临界点时，两相变为一相，处于这一状态的流体称为超临界流体。

13．反胶束：反胶束又称反胶团，指在大量与水不相混溶的有机溶剂中，含有少量的水溶液，加入表面活性剂后形成的水包油的微小液滴。

14．胶束体系：胶束又称为正胶束或胶束团，是在大量水溶液中含有少量与水不相混溶的有机溶剂，加入表面活性剂后形成的水包油的微小液滴。

15．水活度：指体系中水的逸度与纯水逸度之比。

16．梯度凝胶电泳：采用由上而下浓度逐渐升高，孔径逐渐减小的梯度凝胶进行电泳。梯度凝胶用梯度混合装置制成，主要用于测定球蛋白类组分的分子质量。

17．双水相萃取：利用溶质在两个互不相溶的水相中溶解不同而达到分离的技术。

18．固定化酶：指固定在一定载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶固定化酶，即保持了酶的催化特性，又克服了游离酶的不足之处，具有增加稳定性可反复或连续使用及易于和反应产物分开等显著优点。

19．分子印记技术：是模拟抗体，抗原相互作用的一种人工生物模拟技术，是制备对某一化合物具有特异性聚合物过程。

20．密度梯度离心：是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的物质分离的一种区带分离方法。

二．问答题

1．什么叫分解代谢物的阻遏作用？举例说明其对酶的生物合成过程影响机理，发酵产酶中应如何降解之？