蛋白质组学期末复习题
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蛋白质组学相关试题及答案
解释
1. Proteome(蛋白质组):由一个细胞或者组织的基因组所表达的全部相应的蛋白质,称为蛋白质组。
2. Proteomics(蛋白质组学):指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新兴学科,即研究细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同,对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能.
3. Mass Spectrometer(质谱仪):质谱仪是一个用来测量单个分子质量的仪器,但实际上质谱仪提供的是分子的质量与电荷比(m/z or m/e)。分离和检测不同同位素的仪器。即根据带电粒子在电磁场中能够偏转的原理,按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器。质谱仪最重要的应用是分离同位素并测定它们的原子质量及相对丰度。
4. Proteome sample holographic preparation(蛋白组样品的全息制备):(1)keep protein information
(2)adapted to separation and identification methods
(3)different samples,different extraction.
蛋白质样品制备是蛋白质组研究的第一步,也是最关键的一步。因为这一步会影响蛋白质产量、生物学活性、结构完整性。因此要用最小的力量使细胞达到最大破坏程度同时保持蛋白质的完整性。原则是,保持蛋白质的所有信息;选择合适的分离和鉴定方法;对于不同的样品要用不同的提取方法。
5. Post translational modification(蛋白质翻译后修饰)
肽链合成的结束,并不一定意味着具有正常生理功能的蛋白质分子已经生成。已知很多蛋白质在肽链合成后还需经过一定的加工(processing)或修饰,由几条肽链构成的蛋白质和带有辅基的蛋白质,其各个亚单位必须互相聚合才能成为完整的蛋白质分子。
6. De novo sequencing(从头测序)
从头测序为蛋白质组研究提供了一种不用借助于任何蛋白质序列数据库信息,直接解读串联质谱数据的方法。其基本算法主要由4个部分组成:质谱图的构建、
离子类型的确定、测序算法以及打分算法。
7. Tandem mass spectrometry(串联质谱)
串联质谱法是指用质谱作质量分离的质谱方法。它还有几种名称,如质谱-质谱法、多级质谱法、二维质谱法和序贯质谱法。
作用:1、诱导第一级质谱产生的分子离子裂解,有利于研究子离子和母离子的关系,进而给出该分子离子的结构信息。
2、从干扰严重的质谱中抽取有用数据,大大提高质谱检测的选择性,从而能够测定混合物中的痕量物质。 s
8.Peptide mass fingerprint(肽指纹谱)
peptide molecular weight肽指纹图谱,PMF,peptide mapping fingerprint,蛋白酶解后产生多个肽片断,然后利用质谱(通常用MALDI-TOF)测量这些肽段的分子量,然后上网进行蛋白谱库搜索,以确认此蛋白是何种蛋白,此为PMF。这些肽段就像蛋白的指纹一样,有了这些肽段,就可以确认蛋白了。
9. Collision-induced dissociation(CID)(碰撞诱导解离):
离子经过电喷雾源在进入质量检测器前,施加一定的电压,使离子的运动速度大大提高,当离子与中性分子撞击时,发生如下反应:A++N→(A+)*→B++C++D+ 10. Peptide sequence tag 肽序列标签:将蛋白质进行酶切降解做电喷雾质谱产生包括多电荷峰在内的肽质量指纹谱,选择有一定丰度的双电荷峰经气体碰撞活化池碰撞后产生碎片,其中包含着结构信息,由这些信息可以推出蛋白质的某一肽段的部分氨基酸序列测定出的部分氨基酸序列和其序列两段的质量称为肽序列标签。
11. Phage display technology(噬菌体展示技术):
To allow the presentation of large peptideand protein libraries on the surface of filamentous phage,which leads to the selection of peptides and proteins。噬菌体展示技术是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术,他以改构的噬菌体为载体,把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区,使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面,进而通过亲和富集法表达有特异肽或蛋白质的噬菌体
12. Two-dimensional Gel Electrophoresis双向凝胶电泳(2-DE):
即双向凝胶电泳(2-DE),该技术是根据蛋白质的等电点和分子量的差异,连续进行垂直方向的两次电泳而将待测蛋白质进行分离。第一向为等电聚焦(IEF)电泳,其基本原理是利用蛋白质分子的等电点的不同进行蛋白质的分离。第二向为十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE),其基本原理是利用蛋白质分子量大小的不同进行蛋白质分离,从而把复杂蛋白质混合物在二维平面上分开。该技术是目前蛋白质组学研究中分辨率最高,信息量最大的分离技术,是比较蛋白质组学研究中也是不可取少的手段。
13. Structural biology(结构生物学):is a branch of molecular biology, biochemistry, and biophysics concerned with the molecular structure of biological macromolecules, especially proteins and nucleic acids, how they acquire the structures they have, and how alterations in their structures affect their function. 以生物大分子的特定空间结构及结构的特定运动与其生物学功能的关系为基础,阐明生命现象的学科。研究特殊分子的性质以及分子间的相互作用,如膜蛋白的拓扑学、蛋白质的二级结构中残基的接近和移动以及蛋白质的三级折叠等。
14. Protein-protein interaction(蛋白质互作):(1)Proteins might interact for a long time to form part of a protein complex(2)a protein may be carrying another protein (3)a protein may interact briefly with another protein just to modify it 蛋白质之间的相互作用。蛋白质之间的相互作用是蛋白质发挥调节作用的重要方式。
15. Yeast Two-Hybrid Assays(酵母双杂交分析):a molecular biology technique used to discover protein-protein interactions by testing for physical interactions (such as binding) between two proteins 酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。主要有二类载体: a 含DNA -binding domain的载体; b 含DNA-activating domain 的载体。上述二类载体在构建融合基因时,测试蛋白基因与结构域基因必须在阅读框内融合。融合基因在报告株中表达,其表达产物只有定位于核内才能驱动报告基因的转录。