高分辨染色体制备与识别

合集下载

1200条带阶段的人类染色体高分辨带性模式图

图的发表为人类细胞遗传学工作者提供了应共以上时即认为该带纹在１２００条带已经再分。
同遵守的国际标准Ｍ，ＩＳＣＮ（１９８５）仅对其做了
（二）染色体相对宽度的测定
技术上的修改旧，没有提供更高分辨水平的资
在显微镜下用目镜测微尺测量１２００条带
料。迄今为止，除了Ｙｕｎｉｓ曾发表过１７００条阶段分裂相中两条１号染色体的长度和宽度，
共观察了１０名个体的２０个分裂相（其中有微小的浅带，故在模式图中未把这些带标在男性５名，女性５名，每名个体观察２个分裂最末端。这样做可能并非全部正确，尚有待于
相），其单倍体染色体组带纹数在１１８０－１２７０今后用高分辨Ｒ带或在更高分辨水平上予以探之间。８５０条带阶段染色体的带纹中有１８７条讨。
︐．Ｌ
弓︐ ︸Ｊ
ＩＳＣＮ：１９８１．ＢｉｒｔｈＤｅｆｅｃｔｓ：Ｏｒｉｇｉｎａｌａｒｔｉｃｌｅ
ｓｅｒｉｅｓＸＶＩＩ．ＮｅｗＹｏｒｋ．１９８１
ｒ．Ｌ
护Ｏ
ｌ口Ｊ
ＩＳＣＮ：１９８５．ＣｙｔｏｇｅｎｅｔＣｅｌｌＧｅｎｅｔ．，
ｌ．Ｌ
ｔ了 ︐．．Ｊ
Ｙｕａｉｓ，Ｊ．Ｊ．：１９８１．Ｈｕｍ，Ｇｅｎｅｔ．，５６：２９３－－２９８．
有可能也是这两个因素所引起。
的绘制并未以测量数据为基础。由于技术上的
（二）部分染色体末端带纹的划分
困难，我们在绘制１２０。条带阶段染色体模式图
在１２００条带阶段的Ｇ显带染色体标本中，时亦未进行逐带测量。模式图中带的位置和大
部分染色体的末端显示有一条浓染或浅染的深小都是在ＩＳＣＮ（１９８５）８５０条带模式图基础上
带阶段人类染色体高分辨带模式图外〔７〕，尚未取其平均值，然后计算出其长宽比值，再根据此

染色体G带制备详细流程及核型分析

染色体G带制备详细流程及核型分析（一）染色体的形态结构体细胞的染色体是46个，23个，其中22对是常染色体。

一对是性染色体。

男性一对XY。

女性为XX。

染色体的形态随着细胞周期的不同而有所改变，在光学显微镜下所看到的染色体是细胞分裂中期染色体（metaphase chromsome）。

每个染色体含有两条染色单体，呈赤道状彼此分离。

只有着丝粒处相连。

根据着丝粒的位置分为三种类型，中部着丝粒型，亚中部着丝粒和端着丝粒型（图21-1）。

图21-1 正常人体细胞的三种染色体1．中部着丝点染色体；2.近中部着丝点染色体；3.近端部着丝点染色体1.非显带染色体特征分为七组A组（1～3）：为最大的具中部着丝粒染色体，这组染色体相互间很易区别。

第1号和第2号染色体大小相似，唯第2号染色体为近中部着丝粒染色体。

第3号染色体较1、2号染色体小，为中部着丝粒染色体。

B组（4～5）：为大的具中部着丝粒染色体。

2对染色体之间在形态和长度上较难区别。

C组（6～12号和X）：为中等大小的具中部或近中部着丝粒染色体。

这组染色体较难区分，其中第6、7、11号和X染色体为中部着丝粒染色体，第8、9、10和12号染色体为近中部着丝粒染色体。

女性为2个X染色体。

男性只有1个X染色体。

D组（13～15号）：为中等大小的具近端着丝粒染色体。

在其短臂上有随体。

与他组染色体有明显区别。

但3对染色体之间较难区别。

E组（16～18号）：为小的具中部或近中部着丝粒染色体。

第16号染色体为中部着丝粒染色体，第17号和18号染色体为近中部着丝粒染色体。

不过，着丝粒位置第18号较第17号染色体更近端部。

F组（19～20号）：为更小的中部着丝粒染色体。

2对染色体之间，形态上很难区别。

G组（21～22号和Y）：为最小的近端着丝粒染色体。

第21号和22号染色体大小相似，且短臂上常连有随体。

Y染色体常比第21和22号染色体大、染色深。

且无随体。

Y染色体长臂2个染色单体比较靠拢，长臂末端也较模糊。

细胞遗传学实验教学大纲

细胞遗传学实验一、课程说明课程编号：280407Z11课程名称：细胞遗传学实验/ Cytogenetics Experiment课程类别：专业实践课学时/学分：28/1先修课程：组织胚胎学、细胞生物学、植物学、动物学适用专业：生物科学专业教材、教学参考书：1、《医学细胞生物学》（第2版），安威主编，北京大学医学出版社，20092、《精编人类遗传学实验指南》，N.C.德拉科波利主编，夏家辉主译，科学出版社，20093、《医学遗传学实验和学习指导》，金帆主编，浙江大学出版社，20054、产前诊断技术与服务规范，邬玲仟等主编5、《细胞遗传学实验指导》，龙志高、戴和平主编二、课程设置的目的意义细胞遗传学实验技术教学是细胞遗传学中的一个重要组成部分，通过实验操作和对实验结果的分析牢固地掌握和理解细胞及遗传学基本理论、基本知识，同时在实验过程中，也能培养学生的动手能力，提高分析问题、解决问题的能力，培养学生的创新能力。

要求学生实验中认真动手，善于观察、善于分析，写出详尽、规范的实验报告。

三、课程的基本要求知识：掌握遗传的细胞学基础，染色体畸变类型及机制，应用国际命名体制，外周血G显带技术和G显带染色体的分析等知识；熟悉细胞遗传学导论，C带和N带技术及染色体分析，了解高分辨染色体和姐妹染色单体交换等内容。

能力：使学生学会运用遗传学分析的基本方法和细胞遗传学的主要实验技术，加强实验技能操作，培养学生动手能力；通过实验教学，培养学生严谨的科学态度，使学生养成良好的实验工作习惯；能够独立进行实验操作，促进解决问题能力的提高。

素质：通过实验技能的训练，培养学生严肃认真，一丝不苟的科学态度，养成良好的科学习惯，提高学生科研的基本素质；使学生将所学细胞遗传学的理论知识应用于实践中，促进综合素质的提高。

四、教学内容、重点难点及教学设计注：实践包括实验、上机等五、实践教学内容和基本要求通过实验操作和对实验结果的分析牢固地掌握和理解细胞及遗传学基本理论、基本知识，同时在实验过程中，培养学生的动手能力，提高分析问题、解决问题的能力，培养学生的创新能力，学生在实验中认真动手，善于观察、善于分析，写出详尽、规范的实验报告。

染色体显带原理与技术

3 、氢氧化钡处理：将标本浸入 60-65℃的 5% （饱和）氢氧化钡液中， 10 秒至几分钟（随标本龄而变动，常规： 1-4 分钟； 1 月龄片： 8-16 分钟，最好设置梯度），碱性处理可能通过产生一个高水平的DNA变性，促进DNA溶解。
4、 2×SSC处理：在60-65℃的2×SSC液中处理90分钟时，用自来水冲洗干净， 2×SSC 温育可使 DNA 骨架断裂并使断片溶解。 5、染色：用蒸馏水配制5%Giemsa，染色5-10分钟，用自来水冲洗干净，室温下风干后即可镜检。
T带：是染色体端粒部位经丫啶橙染色后呈现的区带；
N带：Ag-As染色，主要染核仁组织者区域的酸性蛋白。
1975年建立了染色体高分辨显带技术。
几种显带的制作方法之间的关系
24hrs 时加入BrdU 68 hrs 时加入秋水仙素
人类外周血
植物血球凝集素 ( PHA）肝素、培养基、小牛血清
体外培养
巴黎会议（1971）对各条染色体的C带描述如下: 1号大，从着丝粒扩展到q。 2号小。 3-8号中等 9号大，从着丝粒扩展到q。 10号中等。 11号中等，但比10号或12号大些。 12号中等。 13号中等，有时分为二节。 14号-15号中等。 16号大，从着丝粒向q扩展。
17号中等。 18号中等，但比17号大些。 19-22号中等。 X 中等 Y在着丝粒处有一条非常窄的带；q的末端有一宽带。1，9，16号的C带和Yq上的宽阔的远侧带都有明显的形态变异及异态性。

3.G显带 3.1 取2.5％胰酶溶液0.5ml，加入50 ml生理盐水染色缸中（终浓度 0.025%），用 1N HCl或1N NaOH调节PH7.0左右，置 37OC预温。

染色体、阈值—高分辨比较基因组杂交技术的质控关键

染色体、阈值—高分辨比较基因组杂交技术的质控关键盛敏　朱海燕　朱相玉　李洁　胡娅莉（南京医科大学鼓楼临床医学院，江苏南京　２１０００８）【摘要】　目的　讨论高分辨比较基因组杂交（ｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｇｅｎｏｍｉｃｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＨＲＣＧＨ）技术中高分辨染色体玻片的质量以及不同阈值分析方法对ＨＲＣＧＨ技术的结果影响。

方法　以正常男性外周血为材料，制备高分辨染色体玻片，分析滴片方案、后固定、预变性等技术环节对染色体玻片质量的影响，从而确立ＨＲＣＧＨ的染色体玻片制备及挑选标准。

另以１０名正常男、女性外周血为材料，进行ＨＲＣＧＨ检测，杂交结果分别以固定阈值及动态参考阈值（ｄｙｎａｍｉｃｓｔａｎｄａｒｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｓ，ＤＳＲＩ）进行判定，讨论不同判定方法对ＨＲＣＧＨ检测结果的影响。

结果　实验证实，过火、后固定及预变性的实施有利于稳定制备高质量的染色体玻片。

另外１０名正常人标本的杂交结果，以固定阈值法分析的结果均与核型分析结果一致；以ＡＳＩ软件附带的ＤＳＲＩ法分析，９例结果与核型一致，１例女性结果出现假阳性，为４６，ＸＸ，ｄｕｐ（１５）（ｑ２．２～２．６）。

结论　高分辨染色体玻片的背景、染色体分散度、抗变性能力是ＨＲＣＧＨ实验成功的关键。

以固定阈值分析结果，不受人群差异限制，可在各实验室间广泛应用。

而以ＤＳＲＩ分析结果，则受人群差异限制，该ＤＳＲＩ数据必须来自本地正常人群。

【关键词】　高分辨比较基因组杂交；高分辨染色体玻片；固定阈值；动态阈值犆犺狉狅犿狅狊狅犿犲狊犪狀犱犐狀狋犲狉狏犪犾狊犜犺犲犙狌犪犾犻狋狔犆狅狀狋狉狅犾狅犳犎犚犆犌犎　犛犺犲狀犵犕犻狀，犎狌犢犪犾犻．（犜犺犲犇狉狌犿犜狅狑犲狉犆犾犻狀犻犮犪犾犕犲犱犻犮犪犾犆狅犾犾犲犵犲狅犳犖犪狀犼犻狀犵犕犲犱犻犮犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犑犻犪狀犵狊狌犖犪狀犼犻狀犵２１００２９，犆犺犻狀犪）【犃犫狊狋狉犪犮狋】　犗犫犼犲犮狋犻狏犲　ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｉｎｆｌｕｅｎｃｅｆａｃｔｏｒｏｆＨＲＣＧＨ：ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓａｎｄｉｎｔｅｒｖａｌｓ．犕犲狋犺狅犱狊　Ｕｓｅｎｏｒｍａｌｍａｌｅｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｔｏｍａｋｅｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ，ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｃｒｉｔｅｒｉｏｎｏｆｍａｋｉｎｇａｎｄｓｅｌｅｃｔｉｎｇｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｂｙａｎａｌｙｚｉｎｇｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｄｒｏｐｍｅｔｈｏｄ，ｐｏｓｔｆｉｘａｔｉｏｎａｎｄｐｒｅｄｅｎａｔｕｒｉｎｇ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｅｎＨＲＣＧＨｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｗｅｒｅｄｏｎｅａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｕｓｉｎｇｂｏｔｈｆｉｘｅｄｔｈｒｅｓｈｏｌｄａｎｄｄｙｎａｍｉｃｓｔａｎｄａｒｄｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｓ．犚犲狊狌犾狋狊　ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅＨＲＣＧＨｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｕｓｉｎｇｆｉｘｅｄｔｈｒｅｓｈｏｌｄｗｅｒｅｔｈｅｓａｍｅａｓｔｈｅｉｒｋａｒｙｏｔｙｐｅｒｅｓｕｌｔｓｗｈｉｌｅａｆａｌｓｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒｅｓｕｌｔ４６，ＸＸ，ｄｕｐ（１５）（ｑ２．２２．６）ｗａｓａｐｐｅａｒｅｄｕｓｉｎｇＤＳＲＩ．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀　ＴｈｅｂａｃｋｇｒｏｕｎｄａｎｄｔｈｅｓｐｒｅａｄｏｆｃｈｒｏｍｒｓｏｍｅｓａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｉｒａｎｔｉｄｅｎａｔｕｒｅｄａｂｉｌｉｔｙｗｅｒｅｔｈｅｋｅｙｐｏｉｎｔｓｏｆＨＲＣＧＨｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．ＵｎｌｉｋｅＤＳＲＩ，Ｆｉｘｅｄｔｈｒｅｓｈｏｌｄｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄｉｎａｌｌｌａｂｓｗｉｔｈｏｕｔｔｈｅｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｏｆｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．【犓犲狔狑狅狉犱狊】　ＨＲＣＧＨ；ｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ；ｆｉｘｅｄｔｈｒｅｓｈｏｌｄ；ＤＳＲＩ基金项目：江苏省社会发展项目（ＢＳ２００６０１２）；江苏省六大人才高峰课题；南京市卫生局重点项目（ｚｋｘ０６０１８）。

染色体的制备方法

染色体的制备方法
染色体的制备方法主要有以下几种：
1. 细胞培养法：通过细胞培养的方法，从活体或死体组织中获得细胞，然后使用染色体解链剂和有机溶剂处理细胞，使其逐渐膨胀、变形和破裂，最终释放出染色体。

2. 细胞分离法：通过细胞分离的方法，从组织或器官中获得单个细胞，然后使用低渗透压溶液处理细胞，使其逐渐肿胀、破裂，最终释放出染色体。

3. 放射线照射法：通过将细胞暴露在放射线（通常是X射线或γ射线）下，使染色体发生断裂和破裂，然后使用染色体解链剂溶解细胞核膜和蛋白质，最终得到染色体。

4. 高压法：通过将细胞置于高压环境中，如用注射器将细胞悬浮液喷射到高压室中，或使用高压装置将细胞悬浮液注入对高压有抵抗能力的微孔滤纸上，然后用染色体解链剂处理细胞，最终释放出染色体。

5. 集落法：将细菌或酵母等微生物的细胞培养在富含染色体的培养基上，然后使用染色体解链剂处理细胞，最终从细胞中释放出染色体。

这些方法各有优点和局限性，选择合适的染色体制备方法要根据研究目的和样本
的特点来确定。

高分辨染色体的识别

8号染色体着丝粒分化为p11.1和q11.1带。平头整齐而浓染的p23.2 深带是识别8号染色体短臂的一大特征。这也是它与7号和9号染色体短臂相区别的极重要的特征。短臂上有12.3、 21.2、22、23.2，4条明显的深带，长臂上各深带分布较均匀。
9号染色体着丝粒紧邻p12带。短臂中部可见21.1、23两条明显而浓染的深带。长臂可见分别由 21.11、21.13、 21.31、21.33，以及31.1、31.3、33.1、 33.3所组成的两个深带群。这也是它与8 号和10号染色体相鉴别的主要特征。
1号染色体 p12带浓染， q12带分化为12.1、12.3两条浓染的深带，着丝粒浓染。短臂远端分化出36.21、 36.23两条浓染的伸带。这是区别长短臂的主要特征，长臂近侧段可见由12.1、 12.3、21.21、21.23、 22.1、22.3、24.1、24.3所组成排列整齐的8条深带，其远侧段可见由31.1、31.3、 41、43所组成的3个明显的深带阶段。
3号染色体着丝粒分化为p11.1和 q11.1。在短臂上可见由14.1、 14.31、14.33，3条带和22.1、 22.3、24.1、24.3，4条带所组成的两个深带群，其间由淡染的21.1、 21.2和21.31、21.32、21.33所组成的节段相隔，它是区别长短臂的一个重要特征。长臂上有13.11、 13.13、13.31、13.33、21.2、 22.1、22.3、24、25.2、26.1、 26.31、26.33、27.2、28带共14 条较均匀分布的深带，其末端平头整齐并封底的29.2淡染深带也是区别3号染色体及其长短臂的一个可借鉴的特征。
11号染色体着丝粒分化为p11.1和q11 带。短臂上可见 11.12、12、14、 15.2、15.4、这5条分布均匀的深带，这是它与12号染色体相鉴别的重要特征。长臂中段有由13.4、 14.1、14.3、22.1、 22.3这5条带组成的深带群，末端有由 24.1、24.3所组成的深带节段。

高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培养课件

将胎儿细胞接种在培养基中，在适宜的温度和湿度条件下进
行培养。
染色体分析
经过一定时间的培养后，采用显微技术对胎儿细胞的染色体
进行分析。
羊水细胞培养的注意事项
适应症与禁忌症
羊水细胞培养适用于产前诊断，但存在一定的风险，需严格掌握适应症和禁忌症。
并发症
羊水穿刺可能导致感染、出血、流产等并发症，需严格消毒并确保操作规范。
。
感谢您的观看
THANKS
通过羊水细胞培养，可以了解胎儿的染色体数目和结构，预测是否存在遗传性疾病风险。
羊水细胞培养是产前诊断的重要手段之一，有助于优生优育。
羊水细胞培养的步骤
01
02
03
04
采集羊水
通常在妊娠16-20周进行羊水穿刺，抽取约20毫升羊水。
羊水处理
将羊水离心后去除上清液，收集沉淀的胎儿细胞。
细胞培养
高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培养课件
目录
CONTENTS
• 高分辨外周血染色体制备 • 羊水细胞培养 • 高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培
养的应用 • 高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培
养的挑战与展望
01 高分辨外周血染色体制备
染色体制备的基本原理
01
染色体是细胞核中的遗传物质，通过染色体制备可以将细胞中的染色体分离出来，以便进行遗传学分析和诊断。
结果解读
染色体分析结果较为复杂，需由专业医生进行解读，并提供遗传咨询。
03 高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培养的应用
在遗传学研究中的应用
遗传疾病研究
高分辨外周血染色体制备与羊水细胞培养技术可用于研究遗传性疾病的发病机制、基因突变类型和遗传模式，为遗传性疾病的预防和治疗提供科学依据。

高分辨染色体核型分析

高分辨染色体核型分析1. 概述染色体核型分析是一种用于评估染色体异常的常规检测方法。

传统的染色体核型分析使用低分辨率的染色体带图进行观察和分析，然而，这种方法并不适用于检测微小染色体异常或亚显性染色体异常。

因此，高分辨染色体核型分析应运而生。

高分辨染色体核型分析通过使用高分辨率的染色体技术，如单基因数组比较基因组杂交（aCGH）或单体型多倍体检测技术（SNP），能够提供更详细和准确的染色体分析结果。

2. 原理高分辨染色体核型分析主要基于DNA杂交技术。

首先，从被检样本中提取DNA，然后对DNA进行荧光标记。

接下来，将荧光标记的DNA与参考DNA进行杂交，通过比较信号强度的差异，可以确定样本DNA中存在的染色体异常。

最常用的高分辨染色体核型分析方法包括：2.1 单基因数组比较基因组杂交（aCGH）aCGH技术是一种常用的高分辨染色体核型分析方法。

该方法使用DNA微阵列，将被检样本DNA和参考DNA同时杂交，通过比较信号强度的差异，可以确定染色体异常的位置和类型。

aCGH技术可以检测到小至数千个碱基对的染色体缺失或重复。

2.2 单体型多倍体检测技术（SNP）SNP技术是一种基于单体型多倍性的高分辨染色体核型分析方法。

该方法通过检测DNA序列中的单核苷酸多态性位点，可以确定染色体异常的位置和类型。

相比于aCGH技术，SNP技术具有更高的分辨率和更广的适用范围。

3. 应用高分辨染色体核型分析主要用于以下方面：3.1 染色体异常的筛查和诊断高分辨染色体核型分析可以为临床诊断提供重要的信息。

对于染色体异常的筛查和诊断，该方法能够检测到包括染色体数目异常、染色体结构异常等各种类型的染色体异常。

3.2 遗传病的检测和咨询高分辨染色体核型分析对于遗传病的检测和咨询也具有重要的作用。

通过分析染色体核型，可以确定染色体异常在遗传病形成中的作用，为家族遗传病的风险评估和遗传咨询提供依据。

3.3 生殖医学的辅助诊断在生殖医学领域，高分辨染色体核型分析被广泛应用于试管婴儿（IVF）的前期检测和胚胎染色体筛查。

外周血高分辨染色体制备方法研究

卷第１５期
・１３・ｌ９
外周血高分辨染色体制备方法研究
冯治黄元河（色右江民族医学院遗传研究室广西百色５３０）百３００
【摘要】目的建立一种简易的人外周血高分辨染色体标本制备方法。方法将３外周血样本随机分为３０份
实验组染色体分散较好，Ｇ显带清晰。结论该法不需昂贵的试剂，操作简便易于掌握，能获得较多带纹清晰的高分辨染色体，
适合于临床检测应用。
【关键词】染色体
染色体显带高分辫带标本制备
Ｔｅｍｅｈｄｒｓａｃｒｔｅｐｅａａ０ｆｉｈ—ｒｓｌｔｎｐｒｐｅａｌｏｈｏｓｍｅＦＮｈ，ＡＧＹａｈｔｏｅｅｒｈｆｒｐｒ廿ｎｏｇｏｈｈｅｏｕｉｅｉｈｒｌｏｄｃｒｍｏｏ．ＥＧＺｉＨＵＮｕｎ—ｈ．Ｄｅａｔｅｔｆｏｂｅｐｒｎｏｍ
ｐｒｐｅａｌｏａｌｓｗｅａｏｙｄｖｄｅｎｏｔｒｅｇｏｐｆｔｎｎＧｒｕｅｉｈａｌｂｏｄｓｍｐｅｒｒｎｄｍｌｉｉｄｉｔｈｅｒｕｓｏ．ＩｏｐＡ．ａｒｕｉｅｍｅｈｄｗｓａｐｉｄｔｅｐｅａａｉｎｏｅｒ－ｒｅｅｏｔｎｔｏａｐｌｅｏｔｒｐｒｔｆＧｈｏｈｏｍｏｍｅｂｎｄｎ．ＩｏｐＢ，ａｓｎｈｏｉａｉｎｍｅｈｄｗｉｘｅｓｖｏｓａｉｇｎＧｒｕｙｃｒｎｚｔｔｏｔｅｃｓｉｅＴＤＲｓａｐｉｄｔｈｒｐｒｔｏｆｈｉｈ —ｒｓｌｔｏｈｏｓｍｅｏｈｗａｐｌｏｔｅｐａａｉｎｏｉｅｅｇｅｏｕｉｎｃｒｍｏｏ．ＧｒｕｓｔｘｅｉｎａｒｕｏｐＣｗａｈｅｅｐｒｍｅｔｌｇｏｐ，ｔｅｃｍｂｎｄｔｅｔｎｓｏｏ —ｔｍｐｒｔｒｈｃｎｏｃｎｅｔａｉｎｃｌｈｃｎｒｐｌｅｙｃｒ－ｈｏｉｅｒａｍｅｔｆｌｗｅｅａｕｅｓｏｋａｄｌｗｏｃｎｒｔｏｃｉｉｅｗｅａｐｉｄｓｎｈｏｅｏｎｕｌｏｄａｔｅｌ，ｔｅｔａａｄｈｄｇｎｐｒｘｄｒｐｌｅ．ｓｌＴｅｅｗｓｎｉｎｆａｔｄｆｅｅｃｎｃｌｄｖｓｏｎｅｅｏｓｙｔｅｌｈｃｌｗｉｓｈｎｓｅｍｙｒｅｅｏｉｅｗｅｅａｐｉｄＲｅｕｔｎｏｓｈｒａｏｓｇｉｃｎｉｒｎｅｉｅｌｉｉｉｎｉｄｘｂ－ｉ

医院细胞遗传室高分辨染色体的制备与识别作业指导书

医院细胞遗传室高分辨染色体的制备与识别作业指导书1目的为获得具有550条带及850条带以上的染色体分裂相，从而以此为依据进行人类染色体高分辨分析。

2实验方法手工显带法3实验原理正常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。

植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。

利用PHA这一特性，淋巴细胞经过含有PHA培养液培养，在体外便可获得丰富的生长活跃、含有丝分裂细胞的细胞群，当细胞增殖到一定数量时，加入5-氟尿嘧啶和尿嘧啶核苷从而阻断DNA的合成，将其同步在S期。

17个小时后加入胸腺嘧啶核苷（TDR）释放细胞，使细胞有丝分裂继续，进入分裂期后加入染色体缩短抑制剂溴乙锭（EB），并加入秋水仙胺破坏纺缍丝的形成，最终获得高分辨率染色体。

4性能特征经G显带处理后可见550-850条显带。

5仪器及耗材酒精灯，烧杯，天平，离心机，CO2培养箱，冰盒，载玻片，玻片盒，光学显微镜，灭菌注射器（5ml），离心管，无菌吸管，量筒，培养瓶，试剂瓶等。

6试剂5%的RPMI1640小牛血清培养基5ml；秋水仙素浓度：20μg/ml；低渗液：0.075mol/L的KCl溶液；卡诺固定液（甲醇:乙酸=3:1）；0.25% EDTA-trypsin；生理盐水；10-5M 5FU （五氟尿嘧啶) ；10-4M Uridine（尿嘧啶核苷）；1/15M KH2PO4；10-3M TDR（胸腺嘧啶）；1/15M Na2HPO4；1mg/ml EB （溴化乙锭）；2.5%胰酶；0.4%酚红。

7操作流程7.1细胞培养将0.25-0.3ml外周血入高分辨培养基；培养72小时后，加Frdu和尿嘧啶核苷各100µl；17小时后加TDR100µl；继续培养4小时加EB 50µl；45分钟后加秋水仙胺35µl10分钟后收获。

人类染色体标本制备及核型分析

人类染色体标本制备及核型分析引言：一、人类染色体标本制备步骤：1.收集样本：收集需要研究的人类标本，可以是血液、组织、胎儿细胞等。

2.细胞培养：将收集的样本进行细胞培养，通常采用体外培养的方式，如使用无菌培养皿和细胞培养基。

3.处理样本：细胞培养达到一定数量后，可以使用震荡器等设备将细胞从培养皿上剥离下来，制备成单细胞悬液。

4.固定细胞：将细胞悬液进行固定处理，一般使用醋酸乙酯等有机溶剂将细胞固定在载玻片上。

5.染色：染色是核型分析的关键步骤，可以使用吉姆萨染色法、G显带染色法等多种染色方法，使染色体可见并呈现出特定的形态和颜色。

6.干燥和贴片：将染色的载玻片进行干燥处理，然后使用透明胶带将玻片贴到载玻片上。

二、核型分析方法：1.显微镜观察法：使用光学显微镜对染色体进行观察和分析，直接通过目视的方式判断染色体的形态和数量。

2.数字图像分析法：使用计算机图像分析系统对染色体图像进行数字化处理，通过计算机算法分析染色体的长度、形态、染色体异常等指标。

3.荧光原位杂交法（FISH）：利用标记有特定荧光标记物的探针与染色体特定区域发生互补结合，从而通过荧光显微镜观察染色体的特定区域。

4.光学显微镜配合显影法：使用特定的显影剂，使染色的染色体呈现出明亮的色带，详细观察和分析色带的大小、位置及形态等。

三、核型分析的意义：1.遗传病诊断：染色体核型异常与一些遗传疾病有关，通过核型分析可以确定染色体异常和遗传病的关联。

2.胎儿异常筛查：通过对孕妇的羊水或绒毛进行染色体核型分析，可以早期发现胎儿的染色体异常，如唐氏综合征等。

3.种群遗传学研究：核型分析可以用于研究人类群体的遗传多样性和进化关系，了解不同人群间的遗传差异。

4.基因定位：核型分析可以帮助确定染色体上的基因位置，进而研究与之相关的遗传疾病或性状。

结论：人类染色体标本制备及核型分析是一项重要的遗传学研究手段，通过制备标本和观察分析染色体，可以了解人类的遗传信息和与染色体异常相关的疾病。

高分辨染色体制备及显带方法的改良效果分析

ｂｎｉｇｆｒｃｒｍｏｏｎｌｓ．ｓｌｓｅｃｒｍｏｏｓｗｒｏｇｒｔａｅｏｅａｔｒｔｅｔｄｂｏｃｉｉｅ，ｂｄｎｉｈｎｅａｄｎｈｏｓｍｅａａｙｉＲｅｕｔＴｈｏｓｍｅｅｅｌｎｅｎｂｆｒｆｒａｅｙｃｌｈｅｎｓａｉｇｗｔｃａｇｏｓｈｈｅｎｈｄ
体显带，各条带之问能明显区分，便于染色体核型分析。结论［关键词】染色体；显带；核型分析［中图分类号］ＲＭ［文献标识码】Ａ
染色体出现率明显增高，ＰＳ法进行染色体显带，用Ｂ操作简单，明显缩短显带时间ｏ可
Ｔｈｎｌｓｓｏｈｎｉｇｃｒｍｏｏｒｐｒｔｎａｄｂｎｉｇｒｓｌｅａａｙｉｆｃａｇｎｈｏｓｍｅｐｅａａｉｎａｄｎｅｕｔｏ
ＷＮＧＬ —ｂ，ＡＧＧｉｅＰＮｕ —ｙｇ（ｈｆｌｔｏｐｔｆｉｘｄａＵｉｒｔ，ｉｃｕｎ７００，ｈａＡｉｉＷＮｕ一，ＡＹｅ／．ＴｅＡｉａｅＨｓｉｌｎｉＭｅｉｎｖｓｙＹｎｈａ５０４Ｃｉ）ｎｎｉｄａｏＮｇａｃｌｅｉｎ
胞培养技术和显带方法的应用，仅可以根据带型不
鉴别每一条染色体，还能深入地研究染色体的形态、变异和畸变及其与表型或临床症状之间的关系。染
１１２设备与仪器：７Ｃ培养箱（ｈｌａ美．．３℃ ＯＳｅｌ，ｂ国）离心机（ＥＫＡ美国）超净工作台（南，ＢＣＭＮ，，济

高中生物染色体检验方法

高中生物染色体检验方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：高中生物染色体检验方法在生物学研究中，染色体是细胞核内的核糖核酸分子的一种。

它们携带着遗传信息，决定了生物体的性状和特征。

研究染色体结构和功能对于理解生物遗传学和进化过程至关重要。

在高中生物学课程中，染色体是一个重要的考察内容之一，而染色体检验方法也是学生们需要掌握的实验技能之一。

染色体检验方法是通过某些特定的技术手段对细胞进行染色，以观察和分析染色体的结构、数量和特征。

通过染色体检验，可以揭示细胞的生物学特征，如染色体的数量、形态和染色体的配对规律等。

目前常见的染色体检验方法包括核型分析、荧光原位杂交（FISH）法、G显带法等。

下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。

一、核型分析核型分析是通过染色体的形态特征来确定染色体的数量、型态和大小，是一种常用的染色体检验方法。

它通常用于观察染色体的结构和异常情况，以帮助医学诊断和遗传疾病的分析。

核型分析的步骤如下：1. 采集细胞样本。

可以采集血液、绒毛膜组织、尿液等含有细胞的样本。

2. 细胞培养。

将采集的细胞进行培养，促使细胞不断分裂，以增加染色体的数量，便于观察。

3. 细胞减数分裂。

使细胞进入减数分裂阶段，如卵母细胞进入卵泡期、精子形成等。

4. 细胞染色。

使用染色体染色剂（如吉姆萨染色剂）对细胞进行染色，以观察染色体的结构和数量。

5. 检查和分析。

通过显微镜观察细胞核型，并对染色体进行分析和计数，以确定染色体的数量和结构特征。

通过核型分析，可以帮助医学研究人员对遗传疾病的发病机理和遗传特征进行深入了解，并为个体的诊断和治疗提供重要参考。

二、荧光原位杂交（FISH）法荧光原位杂交（FISH）法是一种高灵敏度的染色体检验方法，可以用于检测染色体的特定序列和结构，是一种常用的遗传诊断技术。

FISH法的原理是利用带有荧光标记的核酸探针与目标染色体特异结合，从而在显微镜下显示出荧光信号。

FISH法的操作步骤如下：1. 制备探针。

高分辨染色体核型与ogm的区别

高分辨染色体核型与ogm的区别高分辨染色体核型与OGM（转基因有机体）在概念、应用、影响等方面都有着明显的区别。

下面我将对这两个概念进行详细解释并进行比较。

高分辨染色体核型是一种用于研究染色体结构和异常的技术。

它通过染色体显微镜观察染色体的形态、数量、结构和排列等特征，能够详细分析染色体组成，诊断和鉴定染色体疾病。

高分辨染色体核型技术主要包括G-显带染色和显带解析技术。

这种技术广泛应用于临床遗传学、肿瘤学和生殖医学等领域，是研究遗传和疾病的重要手段。

OGM则是指转基因有机体，是指通过基因工程技术改变的生物体。

转基因技术是现代生物技术的重要组成部分，通过向生物体导入外源基因（来自同一种或不同种）来改变其基因组。

OGM广泛应用于农业、医药、工业等领域，以提高农作物的产量和抗病性、生产药物、改善环境等。

从概念上来说，高分辨染色体核型与OGM是两个不同的概念。

高分辨染色体核型是一种技术，用于研究染色体的结构和异常，属于遗传学领域。

而OGM则是指通过基因工程技术改变生物体基因组的生物体，涉及到转基因技术和生物工程等领域。

在应用上，高分辨染色体核型主要应用于医学领域，以诊断染色体异常和遗传疾病。

而OGM则广泛应用于农业、医药和工业等领域，以改善生产效率、品质和环境适应力。

在影响上，高分辨染色体核型技术对于人类的遗传病诊断和研究起到了重要作用，能够帮助人们了解染色体结构和异常，为遗传疾病的治疗和预防提供依据。

而OGM技术则在农业上带来了重大的革命，提高了农作物的产量和抗病能力，缓解了粮食短缺问题，但也引发了一些争议，涉及到食品安全、环境风险等问题。

总体来说，高分辨染色体核型和OGM在概念、应用和影响等方面都存在明显的区别。

高分辨染色体核型是一种用于研究染色体结构和异常的技术，在医学领域起到了重要作用。

而OGM则是通过基因工程技术改变生物体基因组的生物体，广泛应用于农业、医药和工业等领域。

这两个概念涉及的领域不同，应用和影响也有所区别。

染色体制备的注意事项

染色体制备的注意事项染色体制备是一项复杂而繁琐的实验技术，需要一定的操作技巧和注意事项。

以下是一些染色体制备的注意事项：1.寻找合适的细胞：选择具有较高级别的染色体且细胞数量足够的细胞进行染色体制备。

一般可以选择进行活细胞的染色体制备，但也可以选择先进行固定再制备染色体。

2.适当的培养条件：细胞在制备过程中需要适当的培养条件，包括适宜的培养基、温度和气氛等。

细胞培养过程中应注意避免细菌和真菌污染。

3.合适的固定条件：染色体制备通常需要将细胞进行固定以保持染色体的形态结构。

固定条件需要根据不同类型的细胞和染色体特性进行优化。

一般来说，较长时间的固定和较强的固定剂浓度会更好地保持染色体的形态结构，但也要注意避免染色体过度固定导致结构变化。

4.适当的染色条件：选择合适的染色方法和染色剂进行染色。

常用的染色方法有- 日本染色法、Giemsa 染色法和DAPI 染色法等。

不同的染色方法和染色剂会影响染色体的可视性和形态结构。

5.适量的细胞：在制备染色体过程中，要尽量避免使用过多或过少的细胞。

使用过多的细胞会使染色体之间难以鉴别，而使用过少的细胞则会导致染色体数量不足。

6.适当的显微镜和成像系统：染色体制备完成后需要使用显微镜观察和拍摄。

适当的显微镜和成像系统可以提高染色体的可视性和分辨率。

7.安全操作：在染色体制备过程中，应注意安全操作，避免使用有毒物质或有害化学品。

同时要注意避免细胞和染色液的污染，以确保实验环境和个人安全。

综上所述，染色体制备过程需要合适的实验条件、注意细胞质量和数量以及注意安全操作。

只有严格遵守操作规程和注意事项，才能获得高质量的染色体制片。

染色体高分辨率分析

G-Scanning 培训资料
目录
1
人类染色体
2
染色体异常染色体病染色体检查 G-scanning检查
3
4
5
一、人类染色体
基因是以特定形式存在于每个有核细胞的棒状的染色体上染色体（chromosome）是遗传物质(基因)的载体。它由DNA和蛋白质等构成，具有储存和传递遗传信息的作用体细胞的染色体是46个，23对，其中22对是常染色体，一对是性染色体。男性一对XY，女性为XX 假设把一条染色体比作一本书，每个人都是携带46本书出生的，这 46本书中记录着一个人的全部遗传信息，其中23本是父亲给的，另外 23本是母亲给的。
主要症状
发病率
智力低下、发育迟缓、低血压、 1/5,000 痉挛、先天性心脏缺陷进行性肌营养不良，手脚畸形，步态异常心脏畸形、脸型畸形、腭裂 1/2,500 1/4,000
鱼鳞癣（ichthyosis ），智力低 1/2,000~6000(男) 下，意力缺乏多动症（ADHD）自闭，重复刻板行为，运动失调 1/85,000(女)
染色体结构异常（缺失或重复）引起的代表性染色体异常综合症
疾病名称
1p36单体综合症（1号染色体微缺失所引起）遗传性运动感觉性神经病（17号染色体微重复所引起）迪格奥尔格综合症（22号染色体微缺失所引起）类固醇硫酸酯酶缺乏症（X染色体微缺失所引起） Rett综合症（X染色体突变/微缺失）无精子症（Y染色体突变/微缺失）
遗传性运动感觉性神经病
无精子症
四、染色体检查
常用染色体病诊断方法
1、G显带染色体核型分析 2、高分辨染色体分析 3、其它带型分析 7、FISH SKY 4 5、染色体涂染 6、array-CGH 7、SKY