天然药物化学成分分离技术研究

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天然药物化学成分的提取分离与鉴定

分离原理
相似相溶原理
根据物质之间的相似性质进行溶解和分离。
酸碱反应
利用酸碱反应的性质进行分离。
分子间作用力
利用分子间的相互作用力，如范德华力、氢键等实现分离。
离子交换
利用离子交换剂与溶液中的离子进行交换，从而实现分离。
分离流程
提取
将天然药物原料破碎、浸泡、回流提取，得到提取液。
浓缩
将提取液进行浓缩，减少体积，便于后续处理。
超声波提取法
利用超声波的振动和空化作用，加速目标成分的溶解和扩散，提高提取效率。
微波提取法
利用微波的能量使目标成分与溶剂分子相互作用，促进其溶解和扩散。
超临界流体萃取法
利用超临界流体作为萃取剂，具有高渗透能力和良好的溶解性能，适用于提取脂溶性和热敏性成分。
提取原理
相似相溶原理
根据物质之间的相似相溶原理，选择与目标成分极性相近的
溶剂中的溶解度差异，将目标成分从一种溶剂转移到另一种溶剂的过程。
沉淀法
通过加入沉淀剂使目标成分或杂质沉淀，从而实现分离的方法。
结晶法
通过降温或蒸发溶剂使溶液达到饱和状态，然后缓慢降温使目标成分结晶析出的方法。
吸附法
利用吸附剂的吸附作用将目标成分从溶液中分离出来的方法。
05
天然药物化学成分提取分离与鉴定的
挑战与展望
技术挑战
提取分离难度大
天然药物中化学成分复杂，有效成分含量低，提取分离难度较大。
鉴定技术要求高
天然药物化学成分的鉴定需要高精度的分析仪器和专业的鉴定技术，对实验条件和操作要求较高。
杂质干扰
天然药物中常含有大量杂质，对有效成分的提取分离和鉴定造成干扰，影响实验结果。

天然药物化学第二章天然药物成分提取分离及结构鉴定方法

天然药物化学第二章天然药物成分提取分离及结构鉴定方法天然药物成分提取、分离及结构鉴定方法是研究天然药物化学的重要环节。

本文介绍了几种常见的方法，包括传统的提取和分离方法以及现代的结构鉴定方法。

首先是天然药物成分的提取方法。

传统的提取方法主要包括研磨法、浸泡法、渗漏法、浸渍法、热水浸提法等。

这些方法在药材的初步处理阶段起着重要作用，能够将有效成分从药材中充分提取出来。

现代化学技术的发展使得提取方法更加多样化，比如超声波提取、微波提取、超临界流体提取等，这些方法能够提高提取效率和提取速度。

接下来是天然药物成分的分离方法。

传统的分离方法主要包括溶剂沉淀法、蒸馏法、萃取法等。

这些方法常用于将药材提取液中的目标成分与杂质分离开来。

现代的分离方法有色谱技术。

色谱技术包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）、薄层色谱（TLC）等，这些方法能够更加精确地分离和纯化目标成分。

此外，还有一些电泳方法如毛细管电泳、凝胶电泳等，能够对天然药物成分进行分离和鉴定。

最后是天然药物成分的结构鉴定方法。

结构鉴定方法主要包括光谱学和质谱学。

光谱学包括红外光谱（IR）、紫外光谱（UV）、核磁共振（NMR）等，这些方法能够提供分子结构和功能基团的信息。

质谱学通常用于研究分子的质量和质量分布，并且能够确定分子的分子式和分子量。

此外，还有一些其他的结构鉴定方法，如X射线衍射（XRD）、电子显微镜（SEM）等，这些方法能够提供分子的晶体结构和形貌信息。

综上所述，天然药物成分提取、分离及结构鉴定方法涉及到多个技术领域，传统的方法已经得到了很大的发展，同时现代化学技术的进步也为药物化学的研究提供了更多的选择。

可以预见，随着技术的进一步发展，天然药物的研究将会越来越深入，为人类健康做出更大的贡献。

天然药物化学成分分离方法研究_摘要_

近年来天药物化学成分的结构测试技术得到了突飞猛进的发展,以超导二维核磁共振波谱为代表的新技术的应用使中药和天然药物化学成分的结构测定工作变得简单方便。

但是中药和天然药物复杂体系的分离技术进展相对缓慢,天然药物单体化合物的系统分离技术已成为天然药物研究的瓶颈。

故对天然药物快速高效分离技术开展研究,努力实现天然药物化学成分分离的合理化、高效化和集成化将大大加快天然药物研究的步伐,有力地推动中药和天然药物新药的研究开发和中药现代化的进程。

针对天然药物活性物质分离技术的现状,通过拓展新的分离思路,根据各类天然药物成分类型的特点和性质,选择合适的分离材料和方法,并使用色谱联用技术和质谱导向的中压液相色谱、制备型高效液相色谱和高速逆流色谱的分离、在线检测系统,形成适合各类药效物质的快速分离和结构鉴定的新技术和新方法。

1　根据化合物的结构特点,选择合的分离材料,实现选择性分离例:大叶石头花中皂苷成分的分离。

2　高速逆流色谱技术(H SCCC)针对不同类型天然药物成分的分离例:前胡(香豆素),淫羊藿(黄酮),何首乌(蒽醌或酚苷),紫甘薯(花色苷),挥发油(香菜)。

3　各种色谱技术配合使用实现天然药物成分的高效分离例:南沙参(HSCCC 2P HPL C ),大叶石头花(HSCCC 2ESLD 2P HPL C )。

4　色谱2质谱联用技术实现天然药物成分的快速分离和新结构发现HSCCC 2MS 运用于前胡中,M PL C 2MS 运用于芦笋中,HSCCC 、HPL C 、L C 2MS 联合使用发现前胡中的新的微量成分。

天然药物分离实验报告

实验名称：天然药物化学成分的提取与分离实验日期：2023年10月15日实验地点：化学实验室实验目的：1. 学习并掌握天然药物化学成分的提取与分离方法。

2. 提高对天然药物化学成分理化性质的认识。

3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析和处理能力。

实验原理：天然药物化学成分提取与分离实验主要依据相似相溶原理和分子极性差异。

通过选择合适的溶剂和分离技术，将天然药物中的有效成分提取出来，并进一步纯化。

实验材料：1. 植物药材：丹参2. 溶剂：甲醇、水、氯仿、乙酸乙酯3. 分离工具：漏斗、滤纸、烧杯、锥形瓶、旋转蒸发仪、硅胶柱4. 其他：NaOH、Na2CO3、NaHCO3、氨水、硅胶薄层板、紫外灯实验步骤：1. 药材处理：将丹参药材粉碎，过筛，取适量药材置于烧杯中。

2. 溶剂提取：1. 将药材与甲醇以1:10的比例混合，超声提取30分钟。

2. 过滤，收集滤液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。

3. 将浓缩液依次用氯仿、乙酸乙酯萃取，收集各萃取液。

3. 硅胶柱层析：1. 将硅胶柱预处理，依次加入氯仿、乙酸乙酯，调节流速。

2. 将萃取液上柱，待液面降至硅胶层表面时，用氯仿-乙酸乙酯梯度洗脱。

3. 收集各洗脱液，旋转蒸发仪浓缩至一定体积。

4. 薄层色谱鉴定：1. 将各浓缩液点样于硅胶薄层板上，用氯仿-乙酸乙酯为展开剂进行展开。

2. 显色后，紫外灯下观察斑点，记录Rf值。

5. 含量测定：1. 根据薄层色谱斑点Rf值，确定各成分的纯度。

2. 采用高效液相色谱法测定各成分含量。

实验结果：1. 通过溶剂提取，从丹参药材中成功提取出多种化学成分。

2. 通过硅胶柱层析，将提取的化学成分进一步分离。

3. 薄层色谱鉴定结果显示，分离得到的化学成分主要为丹参酮类化合物。

4. 高效液相色谱法测定结果显示，各成分含量较高，纯度较高。

实验结论：1. 该实验成功提取和分离了丹参中的有效成分，为天然药物的开发和应用提供了实验依据。

2. 通过实验，掌握了天然药物化学成分的提取与分离方法，提高了实验操作技能。

天然药物化学 _提取分离鉴定的方法和技术

快
更快
晶体小宜吸附杂质
注意点：水为溶剂易变质，必要时加防腐剂。
渗漉法
动态浸提法粉碎
浸润装筒
排气
浸渍
渗漉
提取范围：有效成分对热不稳定且易分解的成分如甘草，稀氨水渗漉液，提取甘草酸铵盐。优点：由于有较大的浓度差，提取效率较高。缺点：溶剂用量大，且耗时多。
煎煮法
溶剂：水
提取范围：对含挥发油及遇热不稳定的的成分不适合使用；含多糖类，因煎提液粘稠，难以过滤，不常用。如：甘草煎煮，甘草酸单钾盐。优点：操作简便易行，提取效率比冷浸高缺点：水溶性杂质较多，水提液易发霉变质。
• 最粗粉，指能全部通过一号筛，但混有能通过三号筛不超过20%的粉末。 • 粗粉，指能全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过 40% • 中粉，指能全部通过四号筛，但混有能通过五号筛不超过 60% • 细粉，指能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于 95% • 最细粉，指能全部通过六号筛，并含能通过七号筛不少于 95% • 极细粉，指能全部通过八号筛，并含能通过九号筛不少于 • 95% • 的粉末。
使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。
分配：成分以不同程度溶解于两相溶剂中的过程。分配系数K=Cu/CL：当分配达到动态平衡时，成分在两相溶剂中的浓度比。
• A、B两种物质用三氯甲烷及水萃取， Ka=10，Kb=0.1， • 一次萃取后 • 90%的A在水中 • 90%的B在三氯甲烷中
• 铅盐法曾被应用于分离具有酸性和中性的成分，目前已较少用。 • 在中性醋酸铅沉淀部分可得到含羧基及邻二酚羟基的成分，如有机酸、粘液质、鞣质、某些黄酮等。碱式醋酸铅沉淀部分得到只有一个酚羟基的成分以及中性皂苷等。经碱或醋酸铅沉淀后的水或醇液中有中性成分。因铅对人有害，生产中最好不用此法。

天然药物有效成分提取分离技术（研）.

天然药物有效成分提取分离技术（研）.天然药物有效成分提取分离技术中草药以植物药为主，⽽植物都是由复杂的化学成分所组成。

其中主要有纤维素、叶绿素、单糖、低聚糖和淀粉、蛋⽩质和酶、油脂和蜡、树脂、树胶、鞣质及⽆机盐等。

其中，许多物质对植物机体⽣命活动来说不可缺少，称为⼀次代谢产物。

⼀般认为它们在药⽤上是⽆效成分或杂质。

⽽另外⼀些化学成分如：⽣物碱、黄酮、蒽醌、⾹⾖素、⽊脂素、有机酸、氨基酸、萜类、苷类等对维持植物⽣命活动来说不起重要作⽤，称为⼆次代谢产物，这些物质在植物体内虽含量很少，多则百之⼏，少则百万分之⼏，甚⾄更少。

但它们往往具有较强的⽣理活性，其中有些已应⽤于临床，我们称之为有效成分。

当然有效成分与⽆效成分的划分是相对的，如天花粉的引产有效成分是蛋⽩质，⾹茹中的多糖对实验动物肿瘤有显著的抑制作⽤。

在进⾏中草药成分提取前，应注意对所⽤材料的原植物品种的鉴定并留样备查。

同时要系统查阅⽂献，以充分了解，利⽤前⼈的经验。

中草药有效成分的提取分离⼀般有下⾯两种情况：第⼀、从植物中提取已知的有效成分或已知的化学结构类型者。

如从⽢草中提取⽢草酸、⿇黄中提取⿇黄素；三棵针中提取黄连素等(提取有效成分)。

或从植物中提取某类成分如总⽣物碱、总酸性成分。

如从银杏叶中提取总黄酮；从⼤黄中提取总蒽醌(提取有效部位)。

⼯作程序⽐较简单。

⼀般先查阅有关资料，特别是⼯业⽣产的⽅法，搜集⽐较该种或该类成分的各种提取⽅法，再根据具体条件加以选⽤。

(注意先重复该⽅法，得到产品后，再结合⽣产实际，不断改进⼯艺，达到⼤⽣产要求)。

第⼆、从中草药中寻找未知有效成分或有效部位时，情况⽐较复杂。

只能根据预先确定的⽬标，在临床或药理试验配合下，经不同溶剂提取，以确定有效部位。

然后再逐步划分，追踪有效成分最集中的部位，最后分得有效成分。

⼀、中草药有效成分的提取对中草药化学成分的提取，通常是利⽤适当的溶剂或适当的⽅法将植物中的化学成分从植物中抽提出来。

1天然药物化学-第二节提取分离方法

1. 透析法：
小分子物质（无机盐、氨基酸等）在溶液中可通过半透膜，而大分子物质如多糖、蛋白不能通过半透膜的性质达到分离的方法。
2.超滤法：
一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。
3.超速离心法：
利用溶质在超速离心作用下具有不同的沉降性或浮游性而分离。
4.凝胶过滤法：(也称分子筛过滤法、凝胶渗透色谱法)
利用凝胶的三维网状结构的分子筛滤过作用使分子大小不同的物质得以分离。
凝胶是由胶体粒子构成的立体网状结构。网眼里吸满水后凝胶膨胀呈柔软而富于弹性的半固体状态。人工合成的凝胶网眼较均匀地分布在凝胶颗粒上有如筛眼，小于筛眼的物质分子均可通过，大于筛眼的物质分子则不能，故称为“分子筛”。
如：三七的水提液中加硫酸镁→三七皂甙乙↓ 三颗针中提取小檗碱→氯化钠或硫酸铵盐析。
二、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离
主要分离方法
1.简单的液-液萃取法
2.逆流分溶法（CCD）
相当于多次萃取。
利用此原理制成了连续、自动的逆流分溶仪。
该仪器可使两种性质相似、即使分溶常数很接近的化合物，经过一定次数振摇、转移的操作，亦可达到分离的目的。
3.纸色谱法（PC）
用纸为载体，在纸上均匀地吸附着液体固定相（如水、甲酰胺或其他），用与固定液不互溶的溶剂作流动相。将试样滴在纸一端在展开罐中展开，由于各组分在纸上移动的距离不同，最终形成互相分离的斑点，实现定性、定量分析的色谱法。
4.液-液分配柱色谱法（LLC）
固定相和流动相均为液体，
氯仿或醋酸乙酯→游离生物碱、有机酸及黄酮、香豆素的苷元

天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法

天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法天然药物是指从动植物、矿物等自然产物中提取的具有药用价值的物质。

它们广泛存在于自然界中，具有活性成分丰富、毒性小、作用稳定等特点，因此受到了广泛的研究和应用。

在天然药物化学成分的提取、分离和鉴定过程中，色谱法是一种非常重要的方法。

色谱法运用了物质在固相（吸附、分配、离子交换）和液相（逆相、大小分、离子对）不同相上的分配行为，通过样品分子在固定相与移动相之间的差异与相互作用，实现目标物质的分离和鉴定。

常用的色谱法主要有层析色谱、气相色谱和液相色谱。

层析色谱是天然药物化学成分分离方法中最常用的一种。

它利用固体材料（如硅胶、氧化铝、活性炭等）作为分离介质，将样品分子按照一定的物理化学性质（如极性、分子量、酸碱性等）进行分离。

常用的层析色谱技术有薄层层析、柱层析和高效液相层析等。

气相色谱法（GC）是一种高效的物质分离和鉴定方法，常用于分析挥发性和蒸气压较高的物质。

在气相色谱中，样品被蒸发并转化为气相，然后通过固定相的柱子，利用挥发物在固定相和流动相间的分配行为进行分离和鉴定。

液相色谱法（LC）是一种常用的分离和鉴定方法，常用于分析溶解性较好的天然药物成分。

在液相色谱中，样品被溶解在流动相中，通过样品分子与固相的相互作用，实现各种化合物的分离和鉴定。

除了色谱法，还可以结合其他技术对天然药物成分进行分离和鉴定。

例如，质谱法结合色谱法可以对样品进行结构分析；核磁共振技术可以用于大分子的鉴定和结构分析；红外光谱和紫外光谱等光谱学方法可以进行成分的快速鉴定等。

总之，色谱法是天然药物化学成分提取、分离和鉴定的一种重要方法，通过对样品分子在不同相上的分离行为进行分析，实现对天然药物活性成分的鉴定和分离。

此外，还可以结合其他技术方法，如质谱法、核磁共振技术、光谱学等，对天然药物成分进行全面的分析和鉴定。

天然药物化学：03-天然药物的提取分离方法

❖ 这些段可以是明显的、客观上相对独立的部分，如液-液萃取中的两相，也可以是从色谱柱中依次流出的分段洗脱物
❖ 对于任何粗提取物进行最初分段时，建议不要分得过细，以避免目标成分过于分散并造成每段中浓度过低难以检测
❖ 实际工作中常将粗提取物分离成几个相对较粗的大段，然后迅速集中精力于那些含有目标成分的段
❖ 对于较细致的分段分离，通常采用在线检测技术，如紫外检测器指导分段操作，也可以采用现代制备或半制备高效液相色谱技术
三、分离纯化
事先了解或掌握存在于粗提取物或分段中的目标化合物的性质，有助于确定分离步骤
物质性质包括溶解性（疏水性或亲水性）、酸碱性、带电性质、稳定性和分子大小
天然药物分离的色谱技术可以大致分为两类
4. 加压溶剂提取法
加压溶剂提取法，也称“加速溶剂提取法” 采用比其他提取方法更高的温度，这就需要高压使溶剂在高温下保持液态。高温和高压提高了溶剂渗透进入样品的能力，改善了代谢物的溶解能力，加快了提取速度、提高了提取率。
此外，低溶剂消耗使加压溶剂提取法成为比常规方法更经济且环境友好的替代方法。
决于溶质的极性、沸点、分子量。 ①对亲脂性、低沸点成分溶解能力强，如挥发油、烃类、醚类、
酯类等。 ②成分极性基团（如OH、COOH）越多，越难提取。如糖类、
氨基酸的萃取压力要4×104Pa以上。 ③成分分子量越大，越难提取。
2. 超声波协助溶剂提取法 (ultrasonic assisted extraction,UAE)
③热效应,是指超声波在传播过程中，声能可以不断被介质所吸收，吸收的能量几乎全部转变为热能，从而导致介质本身和待萃取成分温度升高，增大了有效成分的溶解度。
这种吸收声能引起生物体组织内部温度的升高是瞬时的，因此可使被提取成分的生物活性保持不变。

天然药物化学成分一般分离方法

两相溶剂萃取法
是往提取液中加入一种与其互不相溶的溶剂配成两相溶剂系统，利用混合物中各种成分分配系数的差异而将所需成分萃取出来的分离方法。
分离的难易可用分离因子β值来表示。一般来说，当β≥100，若想达到基本分离只需作一次简单萃取；当100≥β＞10，则需萃取10～12次才能达到分离；当β≈1时，即表示KA≈KB，两种成分性质非常相近，无法利用此法达到分离目的。
2．常用溶剂：常用的溶剂有水、冰醋酸、甲醇、乙醇、丙
酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等；若在一般溶剂中不易形成结晶的成分，还可
选用二氧六环、二甲基亚砜、乙腈、甲酰胺、二甲基甲酰胺等不常用的溶剂。
结晶溶剂的选择
选择合适的溶剂是结晶法的关键。
3．混合溶剂：一般常用的混合溶剂有乙醇-水、醋酸-水、丙酮-水、
混合物中各种成分在同一两相溶剂系统中分别有各自不同的分配系数，若各种成分的分配系数差异越大，则分离效果越好。
两相溶剂萃取法的基本原理
【相关链接】
1．什么是分配系数？在一定的温度和压力下，某物质溶解在两相互
不相溶的溶剂中，当达到动态平衡时，根据分配定律，该物质在两相溶剂中的浓度之比为一常数，称为分配系数（K），可以下式表示：
两相溶剂萃取法
操作步骤
1．简单萃取法
小量萃取一般在分液漏斗中进行。 ➢ 检查无漏水 ➢ 装入待萃取物和溶剂 ➢ 振摇 ➢ 排气 ➢ 重复数次 ➢ 静置 ➢ 分离
两相溶剂萃取法
1．简单萃取法
注意： ➢ 水提液的浓度控制在相对密度1.1～1.2之间 ➢ 分配系数差异较大的成分的分离，一般萃取3～4次即可完
学会系统溶剂萃取法、透析法、分馏法的操作技术
本章内容
概述基本知识分离技术本章小结

天然药物化学成分提取分离鉴定方法与技术色谱法

详细描述
气相色谱-质谱联用法通过气相色谱将混合物中的各组分分离，然后将分离后的组分引入质谱仪中进行检测和鉴定。该方法可用于分析挥发性成分、脂肪酸、酯类等复杂天然药物化学成分。
04 色谱法在天然药物化学成分提取分离中的应用
柱色谱法
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离。
应用
常用于分离和纯化天然药物中的脂溶性成分，如生物碱、黄酮类
化合物等。
步骤
装柱、上样、洗脱、收集、检测。
薄层色谱法在天然药物化学成分分离中的应用
原理
利用不同物质在固定相和流动相之间的吸附和分配行为差异进行分离。
应用
常用于分离和鉴定天然药物中的水溶性成分，如多糖、氨基酸等。
步骤
制备薄层板、点样、展开、显色、扫描和鉴定。
感谢您的观看
指纹图谱技术有助于评估天然药物的质量稳定性，发现可能的掺杂物或假冒伪劣产品，提高产品的可追溯性和安全性。
多指标质量控制
多指标质量控制是指同时考虑多个指标来评估天然药物的质量，包括化学成分的含量、纯度、稳定性等。
通过多指标质量控制，可以更全面地评估天然药物的质量，确保产品的质量和疗效的稳定性。
详细描述
高效液相色谱法采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器，实现了快速、高效的分离和检测。该方法可用于分离和鉴定各种类型的天然药物化学成分，如挥发油、黄酮类、生物碱类等。
气相色谱-质谱联用法
总结词
气相色谱-质谱联用法是一种将气相色谱的高分离效能与质谱的高鉴别能力相结合的方法，适用于复杂天然药物化学成分的分离和鉴定。
原理
利用溶剂将天然药物中的有效成分溶解出来，达到提取目的。
操作方法

天然药物化学成分的提取分离与鉴定

应用：广泛应用于天然药物、食品、化妆品等领域的化学成分提取
原理：利用微波的热效应和生物效应，使天然药物中的化学成分快速提取出来
缺点：设备成本高，对某些成分的提取效果不佳
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优点：提取速度快，效率高，能耗低，操作简便
应用：广泛应用于天然药物化学成分的提取，如中药、天然植物提取等
基因工程技术简介：通过基因编辑、重组等技术，对生物体进行改造，以获得具有特定功能的生物产品。
基因工程技术在天然药物化学成分研究中的应用：通过基因工程技术，可以改造生物体，使其产生具有特定功能的天然药物化学成分。
基因工程技术在天然药物化学成分研究中的挑战：如何保证基因工程技术的安全性和稳定性，以及如何解决基因工程技术在天然药物化学成分研究中的伦理问题。
原理：利用超临界流体的物理性质进行萃取
优点：高效、环保、无污染
应用：广泛应用于天然药物化学成分的提取
注意事项：选择合适的超临界流体和萃取条件
天然药物化学成分的分离
原理：利用药物化学成分与溶剂之间的溶解度差异进行分离操作步骤：溶解、过滤、洗涤、干燥、称重适用范围：适用于溶解度较低的药物化学成分
步骤：选择合适的溶剂、加热、过滤、浓缩、结晶
优点：操作简单、成本低、提取效率高
缺点：可能存在溶剂残留、提取物纯度不高等问题
原理：利用超声波的空化作用，使细胞破裂，释放出其中的化学成分
优点：提取效率高，时间短，操作简便
缺点：可能会破坏某些热敏性成分，需要控制好超声波的强度和时间
蛋白质组学技术在药物化学成分鉴定中的应用：通过蛋白质组学技术，可以鉴定药物中的化学成分，从而确定药物的化学结构

天然药物化学成分的分离

天然药物的提取液是诸多成分的混合体，需进一步的别离和纯化，才能得到有效成分或所需成分〔单体〕。
两相溶剂萃取法
沉淀法
常用分离方法
结晶法与重结晶盐析法
透析法
1
一、两相溶剂萃取法(液-液萃取法)
2
一、两相溶剂萃取法(液-液萃取法)
萃取剂被萃取液
+ A化合物B化源自物A化合物 B化合物B化合物 + A化合物
11
参加试剂
过滤
提取液
沉淀
降低溶解度
或发生沉淀反响
〔一〕乙醇沉淀法
〔二〕酸碱沉淀法
〔三〕利用沉淀试剂进行别离
产物
12
一
通过改变溶剂极性而改变成分溶解度的方法
水提液+乙醇含醇量>80%
极性改变
蛋白质、淀粉、树胶、粘液质（亲水性成分）
醇提液+ 水
加入数倍量水叶绿素、树脂极性改变（亲脂性成分）
重结晶：将含有较多杂质的粗结晶进一步用溶剂处理，得到较纯的结晶状物质的过程。
19
混合物〔固态〕加热溶解
饱和溶液
趁热过滤
沉淀
〔不溶性杂质〕
热溶液
有效成分
有效成分
结晶低温过滤析出结晶
母液
低温放置〔或蒸发出局部溶剂后低温放置〕
20
1.选择适宜的溶剂。 ①不与欲结晶成分发生化学反响。 ②对欲结晶成分热时溶解度大，冷时溶解度小。
13
二
通过改变溶剂pH值改变成分的存在状态
①碱提酸沉法：
酸性成分〔游离〕
+ 碱性试剂
成盐溶解
提取液
加酸
酸性成分〔游离〕
如：酚酸类、羧酸类〔黄酮类、蒽醌类、酸性皂苷〕内酯化合物——遇碱加热开环羧酸

天然药物化学成分提取分离方法

• 天然药物中的化学成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为水、亲水性有机溶剂和亲脂性有机溶剂。一些常见溶剂的脂性的强弱顺序如下：
• 石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水 • 天然药物化学成分可通过结构估计它们的极性。
4
㈠溶剂提取法
• 甙类的分子中结合有糖分子，羟基数目多，能表现强亲水性，而甙元则属于亲脂性化合物，而生物碱盐，能够离子化，加大了极性，就变成了亲水性化合物。鞣质是多羟基衍生物，列为亲水性化合物。油脂、挥发油、蜡、脂溶性色素都是强亲脂性成分。
18
(4) 结晶纯度的判定
• 结晶的纯度可由化合物的晶形、色泽、熔点和熔距、薄层色谱或纸色谱等作初步鉴定。
• 一个单体纯化合物一般都有一定的熔点和较小的熔距，同时在薄层色谱或纸色谱中经数种不同展开剂系统检定，也为一个斑点者，一般可以认为是一个单体化合物。
19
⑹ 结晶纯度的判定
• 注意，有的化合物在一般层析条件下，虽然只呈现一个斑点，但并不一定是单体成分。例如鹿含草中主成分为高熊果甙、异高熊果甙极难用一般方法分离，经反复结晶后，在纸层及聚酞胺薄层上都只有一个斑点，易误认为单一成分，但测其熔点在115～125℃，熔距很长。经制备其甲醚后，再经纸层层析检定，可以出现两个斑点，异高熊果甙的比移值大于高熊果甙。
12
1、利用温度不同引起溶解度的改变
• 结晶法是选用合适的溶剂，将混合物加热溶解，形成有效成分的饱和溶液，趁热过滤除去不溶的杂质，滤液低温放置或蒸去部分溶剂后再低温放置，使有效成分大部分析出结晶，由于初析出的结晶总会带一些杂质，因此需要通过反复结晶即所谓重结晶的方法，才能得到高纯度的晶体。

天然药物化学成分提取分离鉴定方法和技术色谱法

在选用吸附剂或支持剂时，一般是根据被分离物质旳化学性质来选用。当不了解被分离物质旳化学性质时，能够先选用最常用旳硅胶或氧化铝，假如分离效果不好，可再改用其他旳吸附剂或支持剂。
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常用旳硅胶吸附剂
粒径：200-300目种类：硅胶G——硅胶+粘合剂煅石膏
硅胶GF254——具有荧光物质硅胶H ——不含粘合剂煅石膏硅胶HF254 ——具有荧光物质
检验
表面光滑平整，均匀，无杂质
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操作技术—活化
涂布后旳薄层先在室温下阴干，至完全干透后，
在使用前置合适温度烘烤一定时间进行活化，然
后置干燥器中备用。
硅胶
105℃-110℃
30-60min
氧化铝 105℃-110℃
30min
裂开旳薄层板不能使用!
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操作技术——点样
▪ 配制样品旳溶剂具高度挥发性和尽量非极性，不然易使斑点扩展。
影响吸附强弱旳原因： 1、流动相：水＞甲醇或乙醇＞丙酮＞氯仿＞稀氨水＞甲酰胺; 2、分子构造：a、形成氢键数目多，吸附能力强。b、形成份子内氢键，吸附力减弱。 C、芳香化合物中，共轭双键多，吸附牢。
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课本第33页
形成氢键旳数目
化合物构造对聚酰胺吸附作用旳影响
成键基团位置
双键旳数目
分子内氢键
► 多数采用直线形上行展开，薄层板水平角度以75 为最佳。
展开剂要接触到吸附剂下沿，但切勿接触到样点（0.5cm左右高度）。
盖上盖子，展开。
观察展开情况。
取出薄层板 29
预饱和中
展开中
预防边沿效应
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操作技术——显色
观察措施：日光、荧光、显色。
❖ 本身带有颜色

天然药物化学成分的常用分离纯化方法

第三章天然药物化学成分的常用分离纯化方法§1．概述一、研究分离纯化技术的重要性（一）制备工艺研究的重点原料经提取加工所得的提取物通常是一个成分复杂的混合物，只有经过进一步地分离纯化，才能得到纯度较高的化学成分。

提取检识除去部分或全部杂质提取物目标成分（杂质＋化学成分）（纯度提高）（二）检测分析研究的重点天然产物工作中，无论原料或终产品，经常会是混合物；这些含有杂质成分的样品，检测分析之前，一般都需要做前处理，以便除掉干扰分析的杂质，否则，检测分析工作常常难以进行。

要除掉待测样品中的杂质，同样需要分离纯化技术：待测样品供试样品检测分析分离纯化除掉干扰检测分析的杂质组分由上述可见，分离纯化同样也是检测分析的研究重点二、研究分离纯化方法的基本思路动、植物原料的提取物的化学组成经常是很复杂的，往往含有几十、几百甚至近千种成分（包括微量成分）。

要从众多成分中分离纯化某种化学成分，其难度可想而知，究竟应当如何着手呢？其实我们只要抓住一个重要的基本思路，就可以使许多看似困难的分离工作，变得比较容易，这个思路就是：寻找差异、利用差异决定分离难易的关键：不在于成分多少, 而在于差异大小。

只要存在显著差异，从上千种成分中分离出某种成分也未必困难；反之，如果差异微小，即便是两种成分的分离，也会相当棘手。

学习和研究分离纯化技术，重在把握思路，切忌生搬硬套，死记硬背，应当重视培养“善于寻找差异和利用差异”的良好习惯。

尽管天然产物中成分众多，然而只要细心研究，总能发现被分离成分之间的某些差异。

在分离纯化工作中可以利用的差异是很多的，其中最常利用的有四类差异：溶解度（或分配系数）、酸碱性（或解离度）、吸附性、分子量以下，我们便对此进行研究探讨。

前处理§2 利用溶解度（或分配系数）差异进行分离纯化的方法一、直接利用溶解度差异溶解度差异是分离纯化工作中经常考虑利用的重要差异类型。

（一）主要用途：用于分离溶解度不同的成分，通常也是极性不同的成分（溶解度与极性相关）。