(完整)2018一轮复习细胞工程专题

1、植物细胞全能性的必要条件？
离体、完全营养和激素、无菌条件和光照
2、脱分化的目的？ 表现出全能性
3、决定脱分化和再分化的关键因素是？
植物激素 生长素 细胞分裂素
4、整个过程严格无菌操作的原因是？
避免污染，因为一些微生物的代谢生长 比未分化的细胞快。
植物组织培养
外植体
离体的植物器官、组织或细胞
脱分化 (避光)
知识点二 动物细胞工程
P44
1、概念和应用： 就是从动物机体中取出相关组织，将它分
散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让 这些细胞生长和繁殖。
依据的原理：
细胞增殖
2.操作流程:
胰蛋白酶
细胞悬液 原代培养
胰蛋白酶
（1）. 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上
（单层）。要求：培养瓶或培养皿的内表面光 滑、无毒、易于贴附。 （2）. 接触抑制：
1.微型繁殖 (1)微型繁殖技术:用于快速繁殖优良品种的植物组织
培养技术.
2.作物脱毒 (1)材料:植物分生区（茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。 (2)脱毒苗:切取茎尖进行 组织培养 ，再生的植株就有
可能不带病毒，从而获得脱毒苗 （3）优点：使农作物不会或极少感染病毒，提高作物
的产量和品质。
植物细胞工程的实际应用 P39
最终发育成动物个体。 原理：动物细胞核的
全能性 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
胚胎细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复
核移植
全能性容易
体细胞核移植：
（难度高）
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.原理:动物细胞核的_全__能___性___。
2.供体和受体:
(1)供体细胞:一般选优良动物的传代_1_0_代__以内
(2)第二次筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用 相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细 胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产 生特定抗体的杂交瘤细胞。
脱④分化
再⑤分化
原理： 细胞膜的流动性 原理：植物细胞的全能性
(1)过程①为去除 细胞壁 获得具有活力的原生质体，常 用方法是酶解法，所用到的酶是 纤维素酶和果胶酶。 (2)过程②是原生质体的融合，人工诱导的物理方法包 离心、振动、电刺激等；化学方法一般用聚乙二醇作诱导剂。 (3)过程③是原生质体融合后再生出 细胞壁，这是原生质 体融合成功的标志,与过程③密切相关的具有单层膜结构 的细胞器为 高尔基体 ⑤涉及的分裂方式为 有丝分裂 。
抗 融合
体 技术
的
制 备 过 程
动物 细胞 培养 技术
：
诱导细胞融合
杂交细胞
筛选 （选择培养基）
杂交瘤细胞 特点：既能产生专一
细胞培养 筛选
抗体又能大量繁殖
（抗体检测）
特异性杂交瘤细胞
体外或体内 细胞培养
杂交瘤细胞系 提取 单克隆抗体
特点：特异性强灵 敏度高可大量制备
5、单克隆抗体的特点：
特异性强、灵敏度高、并可大量制备
愈伤组织 再分化 （光照）
关键词：
植物激素：
细外胞分植裂体素、、生脱长素分化、再 分化、愈伤组织
胚状体或丛芽 植物体
排列生疏长松素、和细胞分裂素用 高度量液的泡比化例对器官的发生 的薄起壁决细定胞作用。
团
植物组织培养的培养基 P36
• 无机营养成分：N、P、K等大量元素及 部分微量元素、水
• 有机营养成分：蔗糖、维生素和氨基酸 激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 琼脂：凝固剂
6、单克隆抗体的应用：
①最广泛的用途是作为体外诊断试剂：准确识别 各种抗原物质，并与特异性结合
优点：准确、高效、简易、快速
治疗疾病：主要用于癌症治疗
②用于
运载药物：制成“生物导弹”
易误提醒: （2）、混淆单克隆抗体制备中两次筛选的目的
(1)第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB 融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的 细胞。
5、突变体的利用（组培过程中细胞易突变） 6、生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生 物碱等.
二、植物体细胞杂交技术
P36
1、定义： 将不同种植物的体细胞，在 一定条件下融合成杂种细胞， 并把杂种细胞培育成新的植 物体的方法。
2、优势：（与有性杂交方法比较）
克服远缘杂交不亲和的障碍
3、植物体细胞杂交过程示意图
（2）、营养
保证细胞顺利的生长增殖
（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、维生素、 微量元素等、血清、血浆）
（3）、温度和PH
温度36.5+0.5度，pH7.2～7.4
（4）、气体环境
O2O和2—CO细2（胞9代5%谢空所气必和需5%；CCOO22—）维持培养液的PH
考点一 植物组织培养与动物细胞培养
(1)理论基础： 植物细胞的全能。性
植物细胞的全能性
1、定义： 生物体的细胞具有发育成完整个体的潜能的 特性。
2、原因：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特 有的全套 遗传物质 ，都有发育成为完整 个体所必需的 全部基因。
3、差异： （1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞 的全能性比生殖细胞的低。
四 制备单克隆抗体
1、常规抗体获得的方法及其特点
◆抗原侵入机体，引发体液免疫，B淋巴细胞受抗原 刺激后，可以产生抗体。 ◆每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 ◆ B淋巴细胞不能无限增殖
2、单克隆抗体制备的原理： 前提是：免疫的动物 ◆ 利用 B淋巴产细生胞特异性抗体的功能。 ◆ 利用 骨髓瘤无细限胞增殖的特性。 ◆ 利用 动物细胞技融术合将两种细胞融合获得
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时， 细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制。
动物细胞培养特点：贴壁生长、接触抑制
（3）、原代培养：动物组织消化后的初次 培养。
（4）、传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现 接触抑制后，需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶培养，让细胞继续增殖。
动物胚胎或幼 ：增殖能力强，代 龄动物组织块 谢旺盛，分化程
项目
植物组织培养
动物细胞培养
过程
结果 新的组织或植株个体， 新的细胞系或细胞株，不形
可以体现全能性
成个体，不体现全能性
项目
植物组织培养
动物细胞培养
目的
①植株快速繁殖 ②脱毒植株的培育 ③人工种子 ④生产药物、杀虫剂等 ⑤转基因植物的培育
①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学研究
4、大小 受精卵 ＞ 生殖细胞 ＞ 体细胞
(2)填写操作过程图：
外植体 ―①―→ A ――②→ B ―→ 植物体
图中①脱分化，②再分化，A 表示愈伤组织，B 表示胚状体或丛芽。
脱分化
让已经分化的细胞，经过诱导后，失 去其特有的结构和功能而转变成未分化 细胞的过程。
再分化
脱分化产生的愈伤组织继续进行培 养又可以重新分化成根或芽等器官，这 一过程称为植物细胞的再分化。
3.神奇的人工种子 (1)优点: 后代无性状分离 不受气候,季节和地域限制 (2)技术:植物组织培养. (3)结构:人工薄膜包装胚状体或不定芽或顶芽或腋芽.
人工种皮要求： 1、能透水、透气、含有各种营养成分。 2、含有农药、杀虫剂 3、含有生长调节剂 4、可添加有益菌，如根瘤菌。
4、单倍体育种 方法:花药离体培养
• PH值：5.0－6.0
植物组织培养条件：
离体，含有全部营养成分的培养基、 一定的温度、适合的PH、空气、无菌环 境、适时光照等。
植物组织培养的优点: P38 保持优良品种的遗传特性; 高效快速地实现种苗的大量繁殖。
应用： 试管苗的快速繁殖、作物脱毒、生 产人工种子
无性来自百度文库殖
植物细胞工程的实际应用
①两技术手段培养过程中细胞都进行有丝分裂，都是 相同点 无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂
②均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件
三维P227 易误提醒
二、动物体细胞核移植技术 课本P47
供体
1. 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移
受体
入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其
结
重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎 果
植物组织培养与动物细胞培养的异同
项目
植物组织培养
动物细胞培养
理论基础
植物细胞全能性
细胞增殖
培 养 基
类型 固体或半固体培养基
液体培养基
水、矿质元素、维生 葡萄糖、氨基酸、无
成分 素、蔗糖、氨基酸、 机盐、维生素、促生
琼脂、植物激素
长因子、动物血清等
取材
植物幼嫩部位或花药等
动物胚胎或出生不久的 幼龄动物的器官或组织
的细胞。 (2)受体细胞:去核的
减__数___第__二__次__分___裂__中__期__的__卵___母__细__胞。
3.过程:
细胞培养
去核
重组细胞 供体
三、动物细胞融合（细胞杂交）
1、概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个 细胞的过程。
2、结果：形成单核的杂交细胞
3、原理：细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激
细胞工程
指应用细胞生物学和 分子生物学的原理和方法， 应用的原理和方法
通过某种工程学手段，在 细胞整体水平或细胞器水
研究的水平
平上，按照人们的意愿来
改变细胞内的遗传物质或 获得细胞产品的一门综合
研究的目的
科学技术。根据操作对象
的不同，可分为植物细胞
工程和动物细胞工程两大 分类
领域。
知识点一 植物细胞工程 一．植物组织培养
4、诱导 因素
化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒
5、过程
P52
膜融合、质融合、核融合 通过有丝分裂进行核融合 动物细胞 融合成功 核融合 的标志：
6、意义：克服远缘杂交不亲和的障碍。
7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿 瘤和生物新品种培育等的重要手段
特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
度低，容易培养
或胶原蛋白酶： 分解组织间蛋白， 将组织分散成单个
P44
：1、保证细胞细所胞需要的营养供给
2、保证细胞内有害代谢产物的
及时贴排壁出生长
接触抑制
洗涤、稀释、分离
3、动物细胞培养条件
课本P46
离体培养的细胞对
微生物和有毒物质
（1）、无菌、无毒的环境
没有防御能力
（无菌处理、添加一定量的抗生素，定期更换培养 液）
杂交瘤细胞。 ◆ 利用 动物细胞技培术养大量培养杂交瘤细胞。
B淋巴细胞（浆细胞） 能产生抗体，但不 能无限增殖；
骨髓瘤细胞不 能产生抗体， 但能无限增殖。
融合形成的杂交瘤细胞 既能产生专一性抗体， 又能无限增殖
免细疫胞小融鼠合是随B机淋巴的细且胞融合率达不骨到髓10瘤0细% 胞
单
克 动物
隆 细胞