2018高中生物选修1《微生物的培养与应用》课件

微生物的培养与应用
知识点一 1．培养基
微生物的实验室培养
2．无菌技术
3．大肠杆菌的纯化培养
知识点二
土壤中分解尿素的细菌的分离
知识点三
分解纤维素的微生物的分离
1．纤维素分解菌的筛选
2．实验流程
1．辨析平板划线操作的三个易错点
(1)灼烧接种环之后，要冷却后再进行取种，以免温度太高杀 死菌种。
是可以计数，可以观察 菌落特征 ；缺点是吸收量较少，平板 不干燥效果不好，容易蔓延。
(3)图 2 通过接种环在琼脂固体培养基表面 连续划线 的操 作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该方法 称为 平板划线法 。该方法适用于 好氧菌 ，优点是可以观 察菌落特征，对混合菌进行分离；缺点是不能计数。
(2)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (3)划线时用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。
2．明辨“对照组”与“重复组”
(1)两种对照组作用比较： ①判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基 同时进行培养。 ②判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设立牛肉膏蛋 白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行 对比得出结论。
(4)划线时最后一区不要与第一区相连。
(5)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
[题点全练]
1．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A。研究人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制 的培养基， 成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)。 实验的主要步骤如图所示，请分析回答下列问题：
5．请据纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图， 回答下列问题：
(1)获得图 A 效果和图 B 效果的接种方法分别 是 稀释涂布平板法 、平板划线法 。
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一
菌液浓度过高或划线时在划下一区域前 片， 最可能的原因是___________________________________
(2)重复组的设置及作用： 为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置 3 个平板作重复组，选择菌落数均在 30～300 且数目相差不大的 三个平板，用“平均值”代入计数公式计算菌落数。
培养基及微生物的纯化培养技术
[过程体验]
1．请根据某微生物培养基的配方表，回答下列问题
编号 成 含量
2．无菌技术的方法、类型及对象(连线)
3．观察甲、乙、丙、丁四幅图，请回答下列问题
(1)请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程： 丙→乙→甲→丁 。 (2)甲、乙、丙中的灭菌方法是 灼烧灭菌 。 (3)丁中的操作需要等待 平板冷却凝固 后才能进行。
4．图 1、图 2 是微生物纯化培养过程中的操作方法，据图回 答下列问题：
① (NH4)2SO4 0.4 g
② ③ ④ ⑤ KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
(1)此培养基按物理性质划分属于 液体 培养基，因为没有 凝固剂(如琼脂)；按功能划分属于选择 培养基，因为没有 碳源，只有 自养型 微生物才能生长(利用空气中的 CO2)。
(1)微生物纯化培养的原理是： 在培养基上将细菌 稀释或分散成单 个细胞，使其长成 单个 的菌落，即一个纯化的细菌菌落。 (2)图 1 菌液进行一系列的 梯度稀释 ，然后将不同稀释度的菌液 分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，该方法称为
稀释涂布平板 法。该方法适用于 厌氧菌和兼性厌氧菌 ，优点 _____________
目 的
杀死接种环上 原有的微生物
杀死上次划线后接种环上残留的菌 种，使下次划线的菌种直接来源于 上次划线的末端，使每次划线菌种 数目减少
杀死接种环上残存的 菌种，避免细菌污染 环境和感染操作者
(2)灼烧接种环后， 需待其冷却后才能伸入菌液， 以免温度太 高杀死菌种。
(3)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始， 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少， 最终得到由单 个细菌繁殖而来的菌落。
氮源 (2)此培养基含有的微生物的营养成分包括 水、无机盐 和_____
三类，若加入氨基酸，则它可充当的营养成分包括 碳源 、
氮源 和生长因子。 ______
(3) 若 要 观 察 微 生 物 的 菌 落 特 征 ， 培 养 基 中 应 添 加 的 成 分 是
凝固剂（琼脂） 。
(4)若用该培养基来分离尿素分解菌，应除去表中 ① 成分(填表 中序号)，加入 尿素 和不含氮元素的有机物。
应用范围
日常用品 不耐高温 的液体 用酒精擦拭 双手，用氯 气消毒水源 接种工具 玻璃器皿、金属工 具 培养基及容器
消 毒
2．平板划线操作的五大注意事项
(1)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行灼烧 灭菌， 划线操作结束时， 仍需灼烧接种环， 每次灼烧的目的如下表：
第一次操作 每次划线之前 划线结束
未将接种环灭菌 _______________。 采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区
域前先将接种环灭菌。
[系统认知]
1．消毒和灭菌比较
条件 结果 常用方法
煮沸消毒法 较为温和 的物理或 化学方法 仅杀死物体表面 巴氏消毒法 或内部的部分对 人体有害的微生 物 化学药剂 消毒法 灼烧灭菌法 灭 菌 强烈的 理化因素 杀死物体内外所 有的微生物，包 干热灭菌法 括芽孢和孢子 高压蒸汽灭菌法
筛选目的 (1)培养基中加入化合物 A 的目的是______________________ ， 菌 选择 培养基。 这种培养基属于________
(2)“ 目 的 菌 ” 生 长 所 需 的 氮 源 和 碳 源 来 自 培 养 基 中 的 化合物A ________________ 。 实验需要振荡培养， 由此推测“目的菌”的 异养需氧型 。 代谢类型是________________ (3) 在上 述实验操作过程中，获得 纯净 “ 目 的 菌 ” 的关 键是 防止外来杂菌污染 ___________________ 。 (4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过 程中所用的接种工具是________ 操作时采用________ 接种环 ， 灼烧 灭菌的方 法。 (5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉， 防止造成环境污染 。 这样做的目的是________________________________ (6)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用 10－4、 10－5、10－6 稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了 3 个培养 皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是 不接种的空白培养基 检验培养基制备过程中是否被 _____________ ，此对照实验的目的是________________ 。