β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒使用说明

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烟曲霉β-1,3-葡聚糖合成酶在分子调控及真菌感染中的作用

烟曲霉β-1,3-葡聚糖合成酶在分子调控及真菌感染中的作用张曦;韩黎【摘要】As a major pathogenic fungus,Aspergillus fumigatus is able to cause the invasive pulmonary aspergilosis with high mortality,or chronic infection and allergic disease.β-1,3-glucan is not only the back-bone of cell wall of A.fumigatus,but also an essential immunogenic factor.β-1,3-glucan synthase is composed of a catalytic subunit,Fks and regulatory subunit,Rho1.Rho1 can bind to Fks and regulate the synthesis of β-1,3-glucan through the transformation and modification of its active state.It also may affect cellular translocation and function of Fks by controlling the actin cytoskeleton rearrangement.%烟曲霉是最为常见的重要病原真菌之一,可引起侵袭性曲霉病、变应性支气管肺曲霉病、曲霉肿以及严重过敏性哮喘等多种疾病,病死率高.β-1,3-葡聚糖是烟曲霉细胞壁的主要骨架成份,也是重要免疫原性因子,由β-1,3-葡聚糖合成酶催化生成,该酶主要由催化亚基Fks蛋白和调节亚基Rho1蛋白组成,Rho1可利用自身活性状态转化和修饰调控β-1,3-葡聚糖的合成,也可能通过控制肌动蛋白骨架重排影响Fks胞内转位和功能.该文对β-1,3-葡聚糖的合成的分子调控机制与烟曲霉及其他病原真菌感染进行综述.【期刊名称】《中国真菌学杂志》【年(卷),期】2017(012)005【总页数】4页(P309-311,317)【关键词】烟曲霉;β-1,3-葡聚糖;天然免疫应答;Rho蛋白【作者】张曦;韩黎【作者单位】中国人民解放军疾病预防控制所医院感染监控中心,北京100071;中国人民解放军疾病预防控制所医院感染监控中心,北京100071【正文语种】中文【中图分类】R379.6烟曲霉是最为常见的重要病原真菌之一，可引起侵袭性曲霉病、变应性支气管肺曲霉病、曲霉肿以及严重过敏性哮喘等多种疾病，每年患病人群约千万，其中侵袭性曲霉感染，严重破坏肺组织，病情进展迅速，目前缺乏有效治疗策略，病死率高(可高达90%)[1]。

葡聚糖内-1,3-β-葡糖苷酶

葡聚糖内-1,3-β-葡糖苷酶
葡聚糖内-1,3-β-葡糖苷酶（β-1,3-glucanase），是一种能够水解β-1,3-葡聚糖的酶类物质。

葡聚糖是一种多糖，也是真菌和一些细菌细胞壁中的主要成分之一。

葡聚糖内
-1,3-β-葡糖苷酶能够水解葡聚糖，使其变成较小的碎片，便于细胞摄取和利用。

葡聚糖内-1,3-β-葡糖苷酶在植物和微生物中广泛存在，并具有广泛的生物学功能。

在植物中，它参与了细胞壁的代谢、成熟和分解作用，维持了植物细胞的正常生理功能。

在微生物中，它参与了真菌和细菌的细胞壁的形成和分解，维持微生物的生存和繁殖。

总之，葡聚糖内-1,3-β-葡糖苷酶是一种重要的酶类物质，具有广泛的生物学功能和应用价值。

它在农业、食品加工和医药等领域的应用前景广阔，具有非常重要的研究和应用价值。

β-葡聚糖酶对β-1,3-葡聚糖的最佳酶解条件

β-葡聚糖酶对β-1,3-葡聚糖的最佳酶解条件张岩;高世勇;季宇彬【摘要】This paper studied on enzymolysis of β - 1,3 - glucan in the optimum of enzyme condition by β - glucanase. Effects of substrate concentration, enzyme amount, reaction temperature and reaction pH on yield of reducing sugar content were studied. On this basis, orthogonal were designed to investigate the enzymatic hydrolysis of time. The results showed that the optimum substrate was 1.4 mg/mL, enzymatic hydrolysis was 14 mg/mL, and temperature was 55 ℃, pH 5.5 for 10 mi nutes. In the condition, a maximum of reducing sugar hydrolysates yield was 95.30% .%研究β-葡聚糖酶对β-1,3-葡聚糖酶解的最佳条件.采用DNS显色法分别测定底物质量浓度、酶质量浓度、酶解的温度、pH值对酶解产物还原性糖质量分数的影响；在单因素基础上做正交优化试验,再对酶解时间进行考察.结果表明,最佳酶解条件为糖质量浓度1.4 mg/mL,酶质量浓度14 mg/mL,温度55℃,反应pH值为5.5,反应时间10 min,在此条件下酶解产物还原性糖质量分数最大,为95.30％.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2011(027)005【总页数】5页(P654-658)【关键词】β-葡聚糖酶;β-1,3-葡聚糖;酶解作用【作者】张岩;高世勇;季宇彬【作者单位】哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076【正文语种】中文【中图分类】R284酵母β－1，3－葡聚糖是一种抗细菌、抗真菌、增强免疫活力、毒副作用低、生物活性强的高效生物应答物［1］，而且β－1，3－葡聚糖在医学上还可用于预防和治疗癌症、免疫缺陷等疾病［2］.多糖发挥生物活性的首要条件是将多糖溶于水中，但酵母β－1，3－葡聚糖水溶性又很低;100～200 ku分子量的高分子多糖表现出较强的生物活性，但其水溶性均比较差，而可溶性多糖如能基本保留大分子的生物活性，那么分子质量大都大于10 ku［3］.分子质量的大小和水溶性的强弱对抗肿瘤活性的表达都有一定的影响［4］.β－1，3－葡聚糖经酶水解后可改善其水溶性，提高其利用率.因为β－1，3－葡聚糖经酶水解后多聚糖苷键断裂，葡聚糖降解为还原糖或寡糖，其分子质量减小，聚合度降低，从而提高其水溶性［5］.β－葡聚糖酶含外切β－1，3－葡聚糖酶和内切β－1，3－葡聚糖酶，它们都可以将β－1，3－葡聚糖水解，从而使分子质量降低.酶的活性又受多种因素的影响，如酶质量浓度、底物质量浓度、温度、pH值.为使酶发挥最大活性，就要先了解β－葡聚糖酶的最佳酶解条件.因此本文从β－1，3－葡聚糖被降解为还原糖的得率大小观察β－葡聚糖酶的最佳酶解条件.1 材料与仪器1.1 药品β－1，3－葡聚糖(宜兴市德圣化工有限公司);β－葡聚糖酶(由湖州礼来生物技术有限公司).1.2 试剂酒石酸钾钠(哈尔滨市化工试剂厂);3，5－二硝基水杨酸(天津市光复精细化工研究所);氢氧化钠(天津市大陆化学试剂厂);苯酚(天津市光复精细化工研究所);无水亚硫酸钠(哈尔滨市化工试剂厂);醋酸钠(天津市百世化工有限公司);醋酸(天津市耀华化学试剂有限公司);无水葡萄糖(上海化学试剂采财供应端经销).1.3 仪器分析天平(奥豪斯国际贸易有限公司);S－25 pH计(上海雷磁仪器厂);752型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);W201数控恒温水浴锅(上海申胜生物技术有限公司);DK2电热恒温振荡水槽(上海恒科技有限公司).1.4 试剂的配置1.4.1 DNS 溶液的配置称取酒石酸钾钠182.0 g，溶于500mL的单蒸水中(不断的搅动并加热，温度不超过50℃)，按顺序加入 3，5－二硝基水杨酸 6.3 g，262mL 2 mol/L的氢氧化钠溶液，水浴溶解.再加入苯酚5.0 g和无水亚硫酸钠5.0 g，充分搅拌溶解，冷却后用水定溶至1000mL.储存于棕色瓶并放置冰箱中，7 d后方可使用.1.4.2 醋酸－醋酸钠缓冲溶液取醋酸钠54.6mg，加1 mol/L醋酸溶液20mL溶解后，加水定容至500mL，即pH值为6.0.利用pH计的数值大小来相应的加醋酸钠或醋酸溶液，达到所需pH 值.2 实验方法2.1 葡萄糖标准曲线的绘制精密称取105℃下恒重的无水葡萄糖标准品0.1000 g溶于100mL蒸馏水，配置成1mg/mL的葡萄糖溶液.准备20mL试管30支，做3个平行，编号1、2、3、4、5、6、7、8、9、10.分别吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mL，加入试管中，用单蒸水补加到1.0mL.然后加入2mL DNS溶液，震荡混匀于沸水中煮5min，冷却后加入9mL蒸馏水稀释混匀，用空白调零点，于540 nm处测定吸光度值，记录OD540，绘制出标准曲线(以葡萄糖质量浓度为横坐标，以OD540为纵坐标)［6］.2.2 酶活力测定加入0.5mL β－1，3－葡聚糖溶液，50 ℃预热10min，加入0.1mL β－葡聚糖酶溶液，并在空白样补加灭活的酶0.1mL，补加单蒸水0.4mL，混匀后反应10min加入2mL DNS溶液，煮沸5min.在540 nm下测定OD值［6］.(酶活单位定义在上述测定条件下，每分钟从底物溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位，简称U).稀释后的酶液OD540在0.2～0.5之间为宜.2.3 糖质量浓度对酶活性的影响向各个试管中依次加入 0.2、0.8、1.4、1.6、1.8、2、2.4、3、3.6、4mg/mL 糖溶液 0.5mL，预热到50℃，加稀释后的酶液0.1mL，pH值为中性的缓冲液0.4mL(三个平行组)，50℃水浴10min，用DNS中止反应，煮沸5min;做空白对照，取灭活的酶 0.1mL、加单蒸水 0.5mL、缓冲溶液 0.4mL.冷却后加9mL单蒸水，在540 nm下，测还原性糖质量浓度.2.4 酶质量浓度对酶活性的影响取一定质量浓度的糖溶液0.5mL，预热到50℃，向各个试管中依次加入 0.5、1、6、10、14、18、20、25、30mg/mL 酶液 0.1mL，pH 值为中性的缓冲液0.4mL(三个平行组)，50℃水浴10min，用DNS中止反应，煮沸5min;做空白对照，取糖溶液0.5mL、加单蒸水0.1mL 和缓冲溶液0.4mL.冷却后加9mL单蒸水，在540 nm下，测还原性糖质量浓度.2.5 温度对酶活性的影响取稀释后的酶液0.1mL，预热到50℃，加入一定质量浓度的糖溶液0.5mL，加pH为中性的缓冲液0.4mL(三个平行组)，分别在 30、35、40、45、50、55、60、65、70、75 ℃下水浴10min，用 DNS 中止反应，煮沸5min;做空白对照，取灭活的酶0.1mL、糖溶液0.5mL 和缓冲溶液 0.4mL.冷却后加9mL单蒸水，在540 nm下，测还原性糖质量浓度.2.6 pH值对酶活性的影响取稀释后的酶液0.1mL，预热到50℃，加入一定质量浓度的糖溶液0.5mL，向各个试管中依次加入 pH 值为 3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5缓冲液0.4mL(三个平行组)，50℃水浴10min，用DNS中止反应，煮沸5min;做空白对照，取灭活的酶 0.1mL、糖溶液0.5mL 和单蒸水 0.4mL.冷却后加9mL单蒸水，在540 nm下，测还原性糖质量分数.2.7 时间对酶活性的影响取一定质量浓度的酶和糖溶液在固定温度下反应 1、5、10、20、30、40、50、60、90、120、150、180min(3个平行组)在540 nm下的OD值，测还原性糖质量浓度.3 实验结果3.1 葡萄糖标准曲线的绘制见表1.表1 葡萄糖标准曲线表编号葡萄糖/mL 水/mL 葡萄糖质量(浓度/mg·mL－1)A 10 1.0 0 02 0.1 0.9 0.1 0.1413 0.2 0.8 0.2 0.2494 0.3 0.7 0.3 0.3605 0.4 0.6 0.4 0.4786 0.5 0.5 0.5 0.6037 0.6 0.4 0.6 0.7408 0.7 0.3 0.7 0.8599 0.8 0.2 0.80.96910 0.9 0.1 0.9 1.094以吸光度为纵坐标，葡萄糖质量浓度为横坐标，得到葡萄糖标准曲线，如图1所示，经回归处理得到线性方程 y=1.2095x+0.005(r=0.9995)线性范围:0 ～0.9mg/mL.图1 葡萄糖标准曲线3.2 底物中糖质量浓度对酶解产物还原性糖得率的影响在β－葡聚糖酶的作用下，β－1，3－葡聚糖糖苷键断裂，降解为寡糖或还原性糖.从图2中得出，最适底物质量浓度范围为1.4～1.8mg/mL，此时还原性糖质量分数较高;最适的底物质量浓度为1.6mg/mL，此时还原性糖质量分数达到最大.最初随底物质量分数增加，还原性糖质量分数增加;增加到一定程度，随底物质量浓度继续增加，曲线又呈下降趋势.曲线下降主要是因为底物质量浓度增大的同时，反应体系的黏度也在增大，阻碍了底物与酶的接触;或者是酶量一定时，底物达到饱和.图2 糖质量浓度对酶解产物还原性糖得率的影响3.3 酶质量浓度对酶解产物还原性糖得率的影响从图3中得出，最适酶质量浓度范围为6～14mg/mL，此时还原性糖的质量分数呈增加趋势并且逐渐减小;但当酶质量浓度为10mg/mL时，还原性糖质量分数增加幅度最小，并逐渐趋于平衡.主要因为开始酶质量浓度小，底物没有完全降解，而增加到一定程度时底物经酶作用趋于完全降解.图3 酶质量浓度对酶解产物还原性糖得率的影响3.4 温度对酶解产物还原性糖得率的影响图4 温度对酶解产物还原性糖得率的影响从图4中得出，最适温度范围为45～55℃时，还原性糖质量分数较高;最适的温度为50℃，此时还原性糖质量分数达到最大.最初随温度增加，还原性糖质量分数增大，说明酶活增大;温度增加到一定温度，超过酶的活性范围时，对酶有破坏作用，还原性糖质量分数降低，酶活减小.3.5 pH值对酶解产物还原性糖质量分数的影响从图5中得出，最适pH范围为5～6时，还原性糖质量分数较高;最适pH值为5.5时，还原性糖质量分数最大.其下降的趋势主要由于pH值超过酶活性范围时，pH改变了酶的空间结构，从而使酶活性降低.图5 pH值对酶解产物还原性糖质量分数的影响3.6 β－葡聚糖酶酶解的条件优化为了使反应条件达到最佳，得到最大的还原性糖质量分数，在以上单因素的基础上，以底物中糖质量浓度、酶质量浓度、温度、pH值为试验因素，进行四因素三水平的正交试验，表2为正交试验结果及分析，表3为方差分析结果.表2 正交试验结果及分析表3 方差分析结果来源自由度偏差平方和均方 F值 Pr＞F A 13455.093455.091829.04 ＜0.0001 B 1 44.39 44.39 23.05 0.0003 C 1 23.83 23.83 12.61 0.0032 D 1 6.83 6.83 3.61 0.0781误差14 26.45 1.89从表2、3中可以看出，底物中糖质量浓度的各水平间的差异极显著，酶质量浓度和温度各水平间的差异显著，而相对来说温度次之，pH值影响最小.综合各因素对还原性糖质量分数的影响，最优组合为A1B3C3D2，即反应体系中糖质量浓度为1.4mg/mL，酶质量浓度为14mg/mL，反应温度为55℃，反应pH值为5.5，还原性糖质量分数为95.30%.3.7 酶解时间对酶解产物还原性糖得率的影响在糖质量浓度为1.4mg/mL，酶质量浓度为14mg/mL，反应温度为55℃，反应pH值为5.5的条件下，研究不同水解时间对还原性糖质量分数的影响，如图6所示.反应时间对酶活力有一定的影响，反应时间为1min时，由于时间太短，底物与酶没有充分接触，还原性糖质量分数较小;随着时间的增加还原性糖质量分数增加;反应时间从10min开始，还原性糖质量分数趋于平衡，随着时间的延长，还原性糖质量分数逐渐趋于平衡.图6 酶解时间对还原性糖质量分数的影响4 讨论β－葡聚糖酶(β－glucanase)是一类水解酶，包含了所有能分解β－糖苷键连接的葡萄糖聚合物的酶系.β－葡聚糖酶主要来源于微生物和植物，但人和动物体内缺乏［7］.其不但降低底物的聚合度，而且不改变糖的天然结构，不会影响或降低其生物活性［8］.由于作用方式不同，β－葡聚糖酶可分成外切和内切，如外切β－1，3－葡聚糖酶、外切β－1，4－葡聚糖酶、内切β－1，3－葡聚糖酶、内切β－1，4－葡聚糖酶［9］.β－葡聚糖酶［10］由于可以降解β－葡聚糖分子中的β－1，4和β－1，3糖苷键，使其降解为小分子量片段，失去黏性和亲水性，使单胃动物肠道中内容物的特性、肠道微生物的作用环境、消化酶的活性等发生变化，而利于营养物质在动物体内的消化和吸收，加快生长性能以及粮食的转化率.目前β－葡聚糖酶在各领域发挥着巨大的作用，如饲料、纺织、造纸、食品、日化等［11］.酶是由细胞产生的具有催化能力的蛋白质.酶反应的优点是不改变其结构，反应条件温和，对生物活性影响小，无毒副作用，应用广泛.其又具有显著的特点，如高度专一性、较高催化效率以及可调控的酶活性等［12］.但酶法降解对试验的条件要求比较高，为了使酶发挥更大的作用，就要先确定底物质量浓度、最适温度、pH值、酶质量浓度、最适时间等条件［13］.我国有十分丰富的酵母资源，年产万吨的酵母泥，我国对其没有很好的重视和利用，而作为廉价饲料或作为废物丢弃，既造成资源浪费又造成环境污染［14］.对酵母废泥充分开发利用，使其中较丰富的β－1，3－葡聚糖被充分利用，如β－1，3－葡聚糖被降解后产生的寡糖不论从溶解性还是生物活性角度比较均优于多糖，利用酶将β－1，3－葡聚糖降解为寡糖，可以开发出价值较高的寡糖产品［15］，提高β－1，3－葡聚糖的利用率，而且有极大的经济效益.β－葡聚糖酶对β－1，3－葡聚糖的降解作用，酶的活性受多种因素的影响.本文从底物质量浓度、酶质量浓度、最适温度以及pH值为单因素对酶解后的产物中还原性糖得率的影响，得出最适条件.在此基础上进行四因素三水平的正交试验，优化酶解条件，以期得到得率最大的还原性葡聚糖.最佳条件确立后，进而研究酶解时间.实验结果表明，β－1，3－葡聚糖质量浓度为1.4mg/mL，β－葡聚糖酶质量浓度为 14mg/mL，反应温度为55℃，反应pH值为5.5，反应10min，还原性糖得率最大，为95.30%.本文的研究内容为提高β－1，3－葡聚糖的利用价值提供了依据.参考文献:［1］KOGAN G.(1→3，1→6)－β－D－Glucans of yeasts and fungi and their biological activity［J］.Studies in Natural Products Chemistry，2000，23:107－152.［2］郭晓，高克祥，印敬明，等.螺旋毛壳ND35β－1，3－葡聚糖酶的诱导、性质及其抑菌作用［J］.植物病理学报，2005，35(6):493－503.［3］段会轲.水溶性酵母β－1，3－葡聚糖的酶法制备及其抗肿瘤活性研究［D］.武汉:华中农业大学，2007.［4］陈春锋，杨晓彤.药用真菌β－(1→3)－D－葡聚糖构效关系及检测方法研究进展［J］.微生物学通报，2006，33(5):150－151.［5］韩晶，李宝坤，李开雄，等.β－葡聚糖酶的特性与应用研究［J］.中国酿造，2008(17):4－7.［6］杨贵明，蒋爱华，薛秋生.用DNS光度法测定还原糖的条件研究［J］.安徽农业科学，2006，34(14):3246.［7］熊涛，徐立荣，曾哲灵.β－葡聚糖酶的研究进展［J］.四川食品与发酵，2006(6):1－4.［8］王云川，殷蔚申.β－1，3－葡聚糖酶的研究和应用［J］.微生物学通报，1998，25(2):74－76.［9］邹东恢，江洁.β－葡聚糖酶的开发与应用研究［J］.农产品加工学报，2005，(8):7－9.［10］OFFICER D I.Effect of multi－ enzyme supplements on the growth performance of piglets during the pre and postweaning periods［J］.Animal Feed Sci.Technol.，1995，55:55－65.［11］邓旭，程志敬，卢英华.生物合成法生产β－葡聚糖酶［J］.生物技术，2006，16(6):92.［12］于敬，周晶.生物酶解技术在中药提取中的应用［J］.现代药物与临床，2010，25(5):340－343.［13］张道义，贾志宏，付明哲，等.中药活性成分及药理作用研究新方法［J］.动物医学进展，2008，29(12):89－93.［14］黄国宏，李科德，曾庆孝.酵母β－1，3－葡聚糖研究进展［J］.酿酒科技，2006(12):1000－103.［15］刘长江，金桥，宋月，等.产β－1，3－葡聚糖酶海洋细菌的筛选及其酶学性质研究［J］.水产科学，2010，29(12):703－706.。

烟草β-1,3-葡聚糖酶的特性和结构分析

烟草β-1,3-葡聚糖酶的特性和结构分析刘彪;杨柳;罗万麟;赵爽;殷雪艳【摘要】[目的]对烟草β-1,3-葡聚糖酶的特性和结构进行分析.[方法]以烟草为材料,采用PROTSCALE、TargetP 1.1、NPSA-PRABI和SWISS-MODEL工具分别测定烟草葡聚糖酶的疏/亲水性、亚细胞定位、二级结构和三级结构.[结果]NtBG1属于亲水性蛋白,NtBGl-1和NtBGl-2的疏/亲水性较为相似,N端和中部区域的疏水性较强,NtBGl-3以N端的疏水性较强;NtBG1均含有信号肽,且其切割位点分别位于第21、32和29位氨基酸处,NtBGl-1和NtBGl-2定位于液泡,NtBGl-3定位于细胞外;NtBG1的二级结构均以α-螺旋比例最大,依次为36.21％、35.14％、35.28％,三级结构呈现“C”型.[结论]该研究可为有效发挥烟草葡聚糖酶的功能特性奠定基础.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2018(046)018【总页数】4页(P76-78,94)【关键词】烟草;β-1,3-葡聚糖酶;结构;特性【作者】刘彪;杨柳;罗万麟;赵爽;殷雪艳【作者单位】凉山州烟草公司,四川西昌615000;凉山州烟草公司,四川西昌615000;凉山州烟草公司,四川西昌615000;凉山州烟草公司,四川西昌615000;凉山州烟草公司,四川西昌615000【正文语种】中文【中图分类】S572β-1，3-葡聚糖酶具有两种重要的功能[1]，一种为降解植物细胞壁，促使植物体软化[2]，另一种为病原微生物入侵时，体内葡聚糖酶的含量和活性增加，从而抵抗真菌和细菌的入侵[3-5]。

植物葡聚糖酶的含量和活性增加，不仅可以依靠外来微生物的入侵，还可以通过外源植物激素，如水杨酸和乙烯等[6-8]，进而增加植物的抗性。

研究表明，根据植物葡聚糖酶的定位和功能特性，葡聚糖酶被划分为四类：碱性葡聚糖酶(定位于液泡)、酸性葡聚糖酶(定位于胞间隙)、胞外诱导型和胞外非诱导型葡聚糖酶[9]，碱性葡聚糖酶具有破坏并降解病原菌细胞壁的作用[10]，而酸性葡聚糖酶无抑制病菌的活性[11]。

真菌β-1,3-葡聚糖合酶——一种抗真菌药物的靶标

关键词：真菌细胞壁：Ｂ１３一，一葡聚糖合酶；ＦＫＳ基因；抗真菌药物靶标
中图分类号：Ｑ３９６
随着医药的发展．尤其是广谱抗生素、类固
醇药、治疗肿瘤的细胞毒素药物以及器官移植中免疫抑制剂等的使用．严重威胁生命的真菌感染呈增长趋势．但是目前防治真菌的药物却很少．且副作用大．疗效差．因此急需寻找新的抗真菌药物由于３１３葡聚糖是真菌细胞壁特有的必－，一
真菌ｐ１３葡聚糖合酶—— 一种抗真菌药物的靶标一，一
陈婕崔志峰
（浙江工业大学生物与环境工程学院，杭州３０３１０２）
摘要：真菌Ｂ１３葡聚糖合酶（一，一ｌａｙｔａｅＳ是由催化亚基和调节亚基组成的酶复合体。在酿酒一，一ｐ１３ｇｕｎｓｎｓ，Ｇ）ｃｈ酵母中ＧＳ的催化亚基是由２个序列高度相似的基因ＦＳＫ１和ＦＳＫ２编码的．在其他酵母中也存在多个与酿酒酵母ＦＳ相似的基因．而在大多数丝状真菌中只存在１个ＦＳ基因。文中主要介绍酿酒酵母和其他重要真菌中ＫＫ
Ｂｌ一聚糖合酶的晶体结构至今仍未解决［。 —，葡３１＿
酿酒酵母（ａｃａｏｙｅｅｅｉａ１的Ｂｌ一Ｓｃｈｒｍｃｓｃｒｖｉ中ｓｅ — ，葡３聚糖合酶是目前研究得最清楚的．编码该酶催化亚基的有２个序列高度相似的基因ｆＫ１和ＳＦＦＳ）ＫＫ２．ＦＳ的名称来自于对免疫抑制剂Ｆ５６Ｋ０

β-1,3-葡聚糖及酶的应用

β-1，3-葡聚糖和酶的应用Wuhuan120130178摘要：β-1，3-葡聚糖是由β-1，3-葡萄糖苷键聚合而成的高分子化合物，具有三股(超)螺旋结构，使其具有较强的生物活性。

β-1，3-葡聚糖是源于天然的原料，无毒性、无刺激性。

若将改产品应用于保健用品领域，未来市场前景将十分广阔。

β-1，3-葡聚糖酶可以将β-1，3-葡聚糖随机分解成为糊精或寡聚糖化合物的水解酶，在植物的发育和抗病中起到了很重要的作用，另外还可以很好的应用于食品、酿造、饲料和日化等工业方面，具有非常大的经济价值。

本文主要从β-1，3-葡聚糖和酶的生物结构特性出发，研究其作用机理和应用领域，以及β-1，3-葡聚糖和酶的发展前景。

关键词：β-1，3-葡聚糖；酶；机理；应用1.引言β-1，3-葡聚糖(glucan)是一类广泛存在于微生物（细菌、真菌、藻类、地衣）、植物乃至动物体内的大分子多糖，在酵母等真菌细胞壁中的质量分数较高可达20%~25%细胞干质量，其中85%左右为β-1，3-葡聚糖[1]。

β-1，3-葡聚糖具有能增强免疫调节、抗肿瘤调节血糖平衡和降低胆固醇、促进肠道益生菌增殖，预防肠癌、改善皮肤外观和祛除皱纹等生物活性，是一种良好的生物效应调节剂。

已获准上市的有香菇多糖(lentinan)、裂桐菌多搪(schizo-phyllan)等，对肿瘤、感染等疾病具有重要的治疗作用。

β-1，3-葡聚糖酶是一种可以将β-1，3-葡聚糖催化为葡萄糖等小分子化合物的水解酶，β-1，3-葡聚糖酶参与植物的多种生长发育过程，在植物抗病过程中扮演着重要角色β-1，3-葡聚糖酶可直接攻击真菌菌丝上的葡聚糖，抑制真菌的生长[2]。

此外，β-1，3-葡聚糖酶还可应用啤酒工业中，使啤酒和葡萄酒的澄清，在畜禽生产的饲料中增加禽畜的采食量等方面，具有极高的应用价值。

随着生物技术的迅猛发展。

具有生防价值的β-1，3-葡聚糖酶以及其转基因的研究也受到了广泛的重视并取得了较大的进展。

β-1,3-葡聚糖酶(BG2)基因遗传转化玉米自交系的研究的开题报告

β-1,3-葡聚糖酶(BG2)基因遗传转化玉米自交系的研究的开题报告背景：β-1,3-葡聚糖酶(BG2)是一种参与植物细胞壁降解的酶，能够分解植物细胞壁中的β-1,3-葡聚糖。

在玉米生长发育过程中，BG2的功能对于维持玉米植株的健康生长至关重要。

因此，为了进一步研究BG2基因在玉米中的作用机制，提高玉米抗逆能力和产量，需要进行玉米BG2基因的遗传转化。

目的：本研究旨在通过基因遗传转化技术将BG2基因成功导入玉米的自交系中，获得表达BG2基因的玉米自交系，进一步研究该基因在玉米中的功能和作用机制。

方法：1. 构建BG2基因的遗传转化载体，包含玉米BG2基因、启动子和选择标记基因。

2. 将构建好的载体导入Agrobacterium tumefaciens中，利用其转化性质实现玉米的遗传转化。

3. 利用PCR和Southern blotting等技术对转化后的玉米自交系进行鉴定和筛选。

4. 对获得的表达BG2基因的玉米自交系进行生理生化、表型和抗性性等方面的研究和比较分析。

预期结果：1. 成功构建玉米BG2基因遗传转化载体。

2. 成功将BG2基因导入玉米自交系中，获得表达BG2基因的玉米自交系。

3. 筛选出符合预期的转化玉米自交系，确定其稳定性。

4. 对表达BG2基因的玉米自交系进行各方面的比较分析，联系玉米BG2基因的生理生化、表型和抗性性等方面的研究，揭示其作用机制。

结论：本研究通过基因遗传转化技术成功导入BG2基因到玉米自交系中，获得表达该基因的玉米自交系，为探究BG2基因在玉米中的功能和作用机制提供了重要实验基础，并为进一步提高玉米产量和抗逆能力提供了重要思路和借鉴。

β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾血细胞的免疫刺激作用

β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾血细胞的免疫刺激作用近年来，越来越多的研究表明，β-1,3-葡聚糖能够增强动物的免疫系统功能，从而提高其抵抗力和免疫力。

红螯螯虾是一种重要的经济水产动物，在养殖过程中常常遇到各种疾病，因此研究β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾免疫系统的影响具有重要的理论价值和应用前景。

一、β-1,3-葡聚糖的来源和性质β-1,3-葡聚糖是一种天然多糖，广泛存在于真菌、海藻、酵母等生物体内，也存在于虾、蟹等甲壳动物的外壳中。

β-1,3-葡聚糖的分子量较大，通常在10万到100万之间，具有极强的稳定性和可溶性。

在红螯螯虾免疫刺激方面的研究中，主要是通过测定血细胞总数、巨噬细胞吞噬率、溶菌酶活性、抗氧化酶活性等指标来评价β-1,3-葡聚糖的免疫刺激作用。

研究发现，给予红螯螯虾口服β-1,3-葡聚糖后，可显著增加其血细胞总数和溶菌酶活性，表明β-1,3-葡聚糖能够增强红螯螯虾的免疫功能。

同时，β-1,3-葡聚糖还能够显著提高红螯螯虾抗氧化酶活性，降低其氧自由基水平，说明β-1,3-葡聚糖具有一定的抗氧化作用。

巨噬细胞是哺乳动物和无脊椎动物免疫系统中的一个重要组成部分，具有吞噬和消化病原微生物的能力。

研究表明，β-1,3-葡聚糖能够刺激红螯螯虾巨噬细胞的吞噬能力和溶酶体的生成，从而增强其病原微生物的清除能力。

同时，β-1,3-葡聚糖还能够诱导红螯螯虾巨噬细胞分泌多种免疫相关蛋白质，如溶菌酶、凝集素、前胸腺激素等，进一步增强其免疫活性。

（三）、β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾的抗病能力的影响研究表明，给予红螯螯虾口服β-1,3-葡聚糖后，其对多种病原微生物的抗性均得到了提高，如对白霉菌、链球菌、大肠杆菌等的抗性均有所增强。

同时，β-1,3-葡聚糖还能够通过加强红螯螯虾的免疫系统功能，提高其对养殖环境中的各类应激因素的抵抗能力，如对水温、盐度、pH值等的变化均有一定的缓冲作用。

虽然β-1,3-葡聚糖对红螯螯虾免疫系统功能的影响已经得到了初步的认识，但目前仍有许多问题需要进一步研究和探讨。

β-1,3-葡聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的表达与性质

β-1,3-葡聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的表达与性质张佳妮;徐岩;喻晓蔚【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2022(41)2【摘要】藤黄节杆菌(Athrobacter luteu)β-1,3-葡聚糖酶(βglⅠ)能够特异性的作用于β-葡聚糖中的β-1,3-糖苷键,在酵母裂解活性上具有突出优势,但是βglⅠ在生产上存在表达低、生产成本高的问题。

作者利用无缝克隆技术构建表达载体,实现了βglⅠ在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,并通过比较不同Tat类型和Sec类型信号肽、RBS、5′UTR等表达元件来提高βglⅠ的胞外产量。

结果表明,信号肽SPLipA 使得βglⅠ表达水平提高了0.4倍,在此信号肽基础上继续比较各RBS和5′UTR序列,其中cry3A 5′UTR使βglⅠ产量高出出发菌株1.2倍。

此外,利用Ni2+亲和层析柱纯化βglⅠ并对其酶学性质进行研究,结果表明该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0,在0~45℃、pH 4.0~9.0的范围内稳定性较好,比活为973U/mg。

【总页数】8页(P29-36)【作者】张佳妮;徐岩;喻晓蔚【作者单位】江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院【正文语种】中文【中图分类】Q814.4【相关文献】1.枯草芽孢杆菌C36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达2.长野芽孢杆菌普鲁兰酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及酶学性质研究3.内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及其酶学性质研究4.枯草芽孢杆菌壳聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质5.脂肪酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达及表达产物性质的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及非生物胁迫下的表达研究

拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及非生物胁迫下的表达研究赵娟;兰海燕【摘要】[Objective]To analyze the expression of BC1 in different tissues under various abiotic stresses in A. thaliana, [Method]Vigorous growth A. thaliana plants were treated with cold (4℃) , heat (37℃) , salt (200 mmol/L NaCI) and drought (21.5％ PEC which is isosmotic to 200 mmol/L NaCl solution) stresses, the expression levels of BG1 in different tissues (leaf, bolting, flower, silique) were detected by semi - quantitative RT - PCR method, and 28S rRNA was used as intemal reference. [ Result] Results showed that : ( 1) In unstressed plants, the expression levels of BG1 in different tissues were diverse, which were high in flower and silique, while low in leaf and bolting . (2) Stresses changed the expression pattems in different tissues . In leaves , the expression levels of BC1 were reduced under various treatments except for salt stress; in boltings , which were decreased except for cold stress; in flowers, the expression was significantly stimulated under NaCl treatment, while PEG and heat stresses reduced its expression level. The expression levels of BG1 in siliques under PEC stresses increased slightly, only at 37 ℃ treatment and salt stress showed a slight decrease. [ Conclusion]In unstressed plants, the expression levels of BC1 in different tissues were different, and under stressed condition, the expression pattern changed in some extent .%[目的]研究拟南芥β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1)在不同组织及胁迫条件下的表达规律.[方法]研究以拟南芥为材料,以28S rRNA为内参,利用半定量RT-PCR法研究了低温(4℃)、高温(37℃)、NaCl胁迫(200 mmol/L)和与之等渗的PEG(21.5%)干旱胁迫处理在不同组织(叶、薹、花、果)ep BGl的表达情况.[结果](1)正常植株中,BG1在不同组织的表达量不同:花、果>叶>薹.(2)胁迫处理对BGI的表达量有影响.在叶中,盐胁迫不影响其表达,其他处理都使其表达量减少;在薹中,除低温处理使其表达量明显增加,其他情况的表达都减少,37℃和干旱胁迫后几乎不表达;在花中,NaCl胁迫处理后表达量明显增加,PEG处理及高温胁迫后表达量下降;在果实中,BGI在PEG胁迫后表达量稍有增加,而37℃和盐胁迫表达稍有下降.[结论]在正常植株中,BG1的表达具有差异性;BG1对各种胁迫处理的响应不同.【期刊名称】《新疆农业科学》【年(卷),期】2011(048)004【总页数】7页(P712-718)【关键词】拟南芥;β-1,3-葡聚糖酶基因(BG1);半定量RT-PCR;非生物胁迫【作者】赵娟;兰海燕【作者单位】新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源与基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源与基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046【正文语种】中文【中图分类】S188+.20 引言【研究意义】β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase)又称昆仑多糖酶或胼胝质酶,是动植物中一种重要的水解酶。

β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒说明书

货号：QS2611 规格：50管/24样β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-glucanase，β-1,3-GA）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：β-1,3-GA(EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。

在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。

测定原理：β-1,3-GA水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存；粗酶液提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。

12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至550nm，蒸馏水调零。

A，第1页，共2页如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定（计算公式乘以相应稀释倍数），ΔA=A测定-A 对照。

每个测定管需设一个对照管。

β-1,3-GA活性计算：1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0958x -0.0192；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

茶树β-1,3葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的优化表达

茶树β-1,3葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的优化表达
高轩;江昌俊;朱林;余梅;叶爱华;邓威威
【期刊名称】《安徽农业大学学报》
【年(卷),期】2007(34)4
【摘要】从茶树中获得β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-glu)基因cDNA,
发现其中存在着一些序列,它们与核糖体竞争性地结合pET32 a载体上的RBS位点,造成该基因cDNA在原核生物中很难表达。

作者对其中的两处基因序列进行了突变,通过设计PCR引物,利用密码子的简并性,保证了突变后蛋白质的一级结构不变。

使葡聚糖酶基因在大肠杆菌中明显表达。

通过SDS-PAGE分析,证明表达产物分子量约75.8 kD,与预计大小一致,并通过水杨酸法对其进行酶活测定,证明其有活性。

【总页数】4页(P543-546)
【关键词】茶树;β-1;3葡聚糖酶;原核表达
【作者】高轩;江昌俊;朱林;余梅;叶爱华;邓威威
【作者单位】安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】S571.1;Q786
【相关文献】
1.重组大肠杆菌产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的培养基优化 [J], 陈亚兰;黄伟强;周晓波;
凌雪萍;卢英华
2.葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达优化 [J], 谢凤珍;华承伟;陈晓静
3.藤黄节杆菌β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的克隆及表达 [J], 薛伟;罗晖;常雁红;苏厚波;孙远兴
4.葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达优化 [J], 谢凤珍;华承伟;陈晓静
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毛竹β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及序列分析(英文)

毛竹β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及序列分析(英文)张艳;高健;徐有明【期刊名称】《分子植物育种》【年(卷),期】2010(8)3【摘要】β-1,3-葡聚糖酶是一种植物病程相关蛋白,在植物抵御病害中有重要作用。

本研究以毛竹为实验材料,利用RACE技术,克隆毛竹β-1,3-葡聚糖酶基因的外显子序列,并在β-1,3-葡聚糖酶基因的编码区两端设计引物,以毛竹基因组DNA为模版扩增该基因的内含子序列。

序列结果表明,该基因全长1693bp,包含两个外显子和一个内含子,命名为PheGLU(GenBank登录号GU238236)。

该基因包含1个996bp的开放阅读框,编码332个氨基酸,相对分子质量为3.541×104Da,其等电点pI为6.389,是一个酸性蛋白且分泌到胞外;其中,该蛋白的二级结构中包含35.15%的α-螺旋,21.82%的β-转角,43.03%的延伸链和无规则卷曲等;三级结构同源建模预测显示,它与大麦β-1,3-葡聚糖酶(PDB number:1ghsA)具有80.4%的同源性;聚类分析显示,该基因序列与已报道的其它植物具有较的高氨基酸序列同源性。

本研究为进一步鉴定毛竹β-1,3-葡聚糖酶基因的抗真菌病害能力奠定了基础。

【总页数】9页(P533-541)【关键词】毛竹;β-1,3-葡聚糖酶基因;基因克隆;序列分析;表达载体【作者】张艳;高健;徐有明【作者单位】国际竹藤网络中心,国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室;华中农业大学园艺与林学院【正文语种】中文【中图分类】S565.4【相关文献】1.葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆、序列分析及表达 [J], 王西成;吴伟民;巫建华;赵密珍;王壮伟;钱亚明;解振强2.β1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与序列分析 [J], 孙军涛;王洪新;吕文平;马朝阳;戴易兴;姚红3.指天蕉β-1,3-葡聚糖酶基因全长cDNA的克隆及序列分析 [J], 翟国会;阮小蕾;吴丽婷;谭小勇;李华平4.紫花苜蓿β-1,3-葡聚糖酶基因同源克隆与序列变异分析 [J], 高建明;桂枝;卢树昌5.地衣芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆及序列分析 [J], 山其木格;王炜;杨红兰;胡爽;包慧芳;朱静因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

青稞中β-1,3-葡聚糖酶的纯化及其抗血清的制备

青稞中β-1,3-葡聚糖酶的纯化及其抗血清的制备
黎柳君;魏慧敏;吴守锋;郭军伟;杜林方
【期刊名称】《植物生理学通讯》
【年(卷),期】2006(42)3
【摘要】萌发的青稞种子经醋酸钠缓冲液抽提,50%￣85%硫酸铵分级沉淀,DEAE-Cellulose52、CM-SepharoseFastFlow离子交换层析和SephadexG-75分子筛层析,得到具活性的β-1,3-葡聚糖酶。

SDS-PAGE检测显示分子量27kDa左右的主带(95%)。

将纯化的β-1,3-葡聚糖酶对新西兰兔进行免疫制备抗血清,双向免疫扩散测定效价为1:64。

免疫印迹分析表明纯化的β-1,3-葡聚糖酶免疫杂交带亦在27kDa处。

【总页数】3页(P499-501)
【关键词】β-1,3-葡聚糖酶;青稞;纯化;抗血清;免疫印迹
【作者】黎柳君;魏慧敏;吴守锋;郭军伟;杜林方
【作者单位】四川大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q554.9;S641.2
【相关文献】
1.定量薄层层析法用于内切β-1,3-葡聚糖酶筛选纯化过程中酶活力测定 [J], 李晶;朱莉;詹晓北;徐敏;郑志永
2.胶体金标记小麦与白粉病菌中β-1,3-葡聚糖酶底物的制备及定位 [J], 芦光新
3.青稞中β-1,3葡聚糖酶的纯化及部分性质研究 [J], 丁平;杜林方;张年辉
4.泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化、性质及其用于制备β-葡寡糖 [J], 陈子贤;刘学强;张彬;闫巧娟;江正强
5.青稞β-1,3-葡聚糖酶Ⅱ基因启动子的克隆分析及表达载体的构建 [J], 曾宇;苗琛;唐琳;徐莺;王胜华;陈放
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酵母β-1,3-葡聚糖的酶法增溶及产物分析

酵母β-1,3-葡聚糖的酶法增溶及产物分析段会轲;熊善柏;刘海梅【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2008(029)001【摘要】本实验以酵母β-1,3-葡聚糖为原料,利用木霉菌株LE02产β-1,3-葡聚糖酶对其进行酶解增溶,并对酶解产物组分进行了分析,以得到最大量的可溶性多糖.结果表明,最佳酶解条件为55℃、pH4.5、底物浓度20%、酶用量4U/ml,酶解时间2h,可溶性多糖得率达到52%;不同水解时间酶解产物经Sephadex G-100凝胶过滤均可得到组分Ⅰ(大分子量多糖)、组分Ⅱ(寡聚糖)和组分Ⅲ(小分子量低聚糖和单糖)三个组分,随着水解时间延长组分Ⅰ比例下降、而组分Ⅲ的比例迅速上升.凝胶渗透色谱(GPC)测定水解2h酶解产物的分子量分布,其中分子量大于30kD组分占总糖的比例为66.2%.【总页数】5页(P185-189)【作者】段会轲;熊善柏;刘海梅【作者单位】华中农业大学食品科学技术学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北,武汉,430070【正文语种】中文【中图分类】Q814【相关文献】1.响应曲面法优化酵母β-葡聚糖酶解工艺及产物分析 [J], 范红梅;汪建明;刘力2.酶-碱法提取酵母β-1,3-葡聚糖的研究 [J], 黄国宏3.钙对苹果果实过氧化物酶、β-1,3-葡聚糖合成酶和β-1,3-葡聚糖分解酶活性的影响 [J], 陈见晖;周卫4.超声-酶-碱法提取啤酒废酵母β-1,3-葡聚糖的研究 [J], 马森;卢家炯;高俊永;初兰娜;杜林繁5.自溶-酶-碱法提取啤酒酵母中β-1,3-葡聚糖的工艺研究 [J], 唐治玉;王淮;熊善柏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。