槐米中芦丁的提取及含量测定

合集下载

槐米中芦丁的实验报告

槐米中芦丁的实验报告

槐米中芦丁的实验报告背景介绍实验目的是研究槐米中的芦丁成分。

芦丁是一种天然的黄酮类化合物,具有多种生物活性,包括抗炎、抗氧化和抗肿瘤等作用。

在医药和保健品领域具有广泛的应用前景。

本实验旨在探索槐米中芦丁的提取方法和含量测定方法,以便进一步研究其药理活性和应用潜力。

实验步骤1. 材料准备•槐米样品:从市场购买新鲜的槐米,并将其晾干备用。

•水浴锅:用于样品提取和浓缩。

•甲醇:作为提取溶剂。

•二氯苯酚:作为芦丁的标准物质。

•离心管和离心机:用于样品离心分离。

•分光光度计:用于测定芦丁的含量。

2. 样品提取1.取适量的干燥槐米样品,研磨成粉末状。

2.将粉末样品加入适量的甲醇中,使其完全浸泡。

3.在水浴锅中进行提取,加热至沸腾,保持沸腾状态30分钟。

4.关闭水浴锅,待样品冷却至室温。

5.将提取液转移至离心管中,并进行离心分离,获得槐米提取液。

3. 含量测定1.取一定量的槐米提取液,称量并记录其质量。

2.准备一系列不同浓度的二氯苯酚溶液作为标准品。

3.使用分光光度计测定槐米提取液和标准品的吸光度,建立标准曲线。

4.根据标准曲线,测定槐米提取液中芦丁的含量。

4. 结果分析根据实验测定结果,可以得出槐米中芦丁的含量。

进一步分析可以比较不同槐米样品中芦丁的含量差异,探索芦丁在不同部位和生长环境下的累积情况。

同时,可以将实验结果与文献中的数据进行对比,验证实验的可靠性和准确性。

结论通过本实验,成功提取了槐米中的芦丁,并测定了其含量。

这为进一步研究槐米中芦丁的生物活性和应用价值奠定了基础。

实验结果可为槐米资源的合理开发和利用提供科学依据,为槐米的药用和保健品开发提供了技术支持。

槐米中芦丁的提取、分离和鉴定

槐米中芦丁的提取、分离和鉴定

槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清(⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006)1.摘要:本实验以槐⽶为原料,采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁,使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法,并了解如何对黄酮类化合物鉴定。

该⽅法提取率⾼达26.3%,对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析,并与标准品做对⽐,结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。

2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。

芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。

有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。

其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。

黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。

黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有:①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁,使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法,并了解如何对黄酮类化合物鉴定。

3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。

芦丁是其主要成分,含量为16%-25%。

芦丁属于黄酮类化合物,结构中含有多个酚羟基,呈酸性,苷元为槲⽪素,糖基为芸⾹糖。

芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶,95-97℃脱⽔,熔点314℃,可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮,不溶于⽯油醚和⽔。

芦丁可溶于碱液中,呈黄⾊酸化后⼜析出,故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。

然后利⽤在冷⽔中不溶,在热⽔中微溶的溶解度差精制,可获得纯度⾼的微细针状结晶,最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。

4.实验部分4.1实验药品槐⽶(市售),氧化钙AR(西陇化⼯股份有限公司),盐酸AR(西陇科学有限公司),四硼酸钠AR(⼴东省台⼭市化⼯⼚),甲醇AR(天津市⼤茂化学试剂⼚),三氯甲烷AR(成都市科隆化学品有限公司),氯仿(分析纯,成都市科龙化⼯试剂⼚),⼄醇(分析纯)4.2实验仪器JJ200电⼦天平(常熟市双杰测试仪器⼚),SHZ-D(III)循环⽔式多⽤真空泵(河南爱博特科技发展有限公司),ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器(河南爱博特科技发展有限公司),薄层⾊谱展开缸,紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司)4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀:称取槐⽶10.0g,在研钵中稍加研碎后,置于500ml烧杯中,加⼊250ml⽔,加热搅拌下添加⽯灰乳,保持PH=8-8.5。

高效液相色谱法测定槐花米提取物中芦丁含量

高效液相色谱法测定槐花米提取物中芦丁含量

对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品5.4mg
置于5ml容量瓶 甲醇稀释至刻度
供试品溶液的制备 精密称取本品适量 置于
索氏提取器 甲醇提取至无色 提取液转移 至250 ml容量瓶 甲醇稀释至刻度
文献三
色谱条件
固定相:Spherisorb ODS Cl8 (150mm×4.6mm,5m)色谱柱
芦丁在水溶液中呈酸性,为防止其水解,药典及许 多文献报道的流动相中都加入了无机酸,但含量较 高的酸容易对分析柱造成损伤。文献一的流动相中 仅用了甲醇和水,也获得了满意的效果。而文献方 案三认为加入乙酸可有效防止脱尾,实验中可根据 实际情况决定是否加酸。
芦丁在204nm、257nm、355nm处有3个吸收 峰,药典中芦丁的检测波长为257nm,文献二用 了355nm作为检测波长,也获得了较好的检测结 果。另一个芦丁的吸收峰204nm干扰因素较多, 使用较少。
据文献报道,柱温对分离的影响较小。随着柱温 的增加,保留时间有所缩短,峰的扩散有所改善, 但对分离度影响较小,故30℃较为适宜。
参考文献
国家药典委员会,中华人民共和国药典(一部). 北京: 化学工业出版社,2005.1
邓富良,陈本美等. 高效液相色谱法测定槐米中的 芦丁含量[J]. 湖南医科大学学报,2000,25(6): 598-599
样品处理 精密称取本品适量 70%乙醇20ml
浸泡 超声提取 离心取上清 反复提取 至提取液无色 合并上清至100ml的容量瓶 定容
样品测定 适量提取液 0.45µm滤膜过滤
直接进样 外标法测定
文献二
色谱条件
固定相:Luna 5µ C18柱(150x 4.6mm) 流动相:甲醇-水-乙酸(45:53:2) 进样量:5µl 柱温:30℃ 检测波长:355nm

槐花米中芦丁的提取与鉴定

槐花米中芦丁的提取与鉴定

槐花米中芦丁的提取与鉴定槐花米是槐花籽的胚芽部分,富含植物化学物质,常被用作食品、保健品和药品。

芦丁是一种重要的植物黄酮类化合物,在槐花米中也存在着。

本文主要探讨了槐花米中芦丁的提取与鉴定方法。

一、提取方法1. 酸碱水解法将槐花米粉末用75%酒精浸泡后,用钝性气体保护,加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液,水解2小时。

水解完毕后,加入酸化剂使pH值调至5.5左右,然后提取2次,每次提取30分钟,使用乙醇使提取液达到所需的体积,完成提取过程。

2. 超声波辅助法将槐花米粉末用95%乙醇提取2次,每次提取60分钟。

取得的提取液储存在4℃条件下,超声波辅助溶解过程中,超声波功率设置为250W,处理时间为45分钟。

超声波辅助能够加速溶剂的渗透和分解,提高提取效率。

3. 超临界流体法将槐花米粉末与正己烷混合,注入超临界流体反应器中,流体选择二氧化碳,温度为90℃,压力为30Mpa。

在45分钟内处理样品,得到高品质的芦丁提取物。

二、鉴定方法1. 毛细管电泳法使用毛细管电泳法确定芦丁的含量和纯度。

在试验中,一般采用50 mM 磷酸盐缓冲液( pH=3.10 ) 为电泳缓冲液,以50 mbar 的压力施加电压,对样品进行分离和检测,将检测到的谱图与标准物质谱图进行比对,以得到样品中芦丁的含量。

2. 气相色谱法使用气相色谱法测定芦丁在槐花米中的含量。

首先,将提取物用氮气吹干至干燥,然后加入甲醇,溶解完毕后过滤。

过滤后再用甲醇调整成正常体积。

将样品注入色谱柱,沿着柱从注射口到检测器方向以一定的压力进行分离,通过检测器检测分离出来的物质。

将检测到的峰面积与已知含量的标准物质进行比较,以确定样品中芦丁的含量。

3. 紫外分光光度法使用紫外分光光度法确定芦丁的含量。

在试验中,将提取物稀释到一定浓度后,用紫外分光光度计检测其在不同波长下的吸光度值。

根据芦丁的特征峰,在290 nm处进行检测。

将检测到的吸光度值与标准物质进行比较,以确定样品中芦丁的含量。

槐米萃取芦丁实验报告(3篇)

槐米萃取芦丁实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习槐米中芦丁的提取方法。

2. 掌握萃取实验的基本原理和操作步骤。

3. 了解芦丁的化学性质及其在槐米中的分布。

二、实验原理芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,具有调节毛细血管壁渗透性的作用,临床上用作毛细血管止血药,常作为高血压病的辅助用药。

槐米是槐系豆科槐属植物的花蕾,含芦丁量高达12%~16%。

本实验通过萃取槐米中的芦丁,了解其提取方法及其在槐米中的分布。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:槐米、无水乙醇、盐酸、石灰水、硫酸、Mg粉、AlCl3、FeCl3、浓硫酸、浓盐酸等。

2. 实验仪器:研钵、烧杯、漏斗、抽滤瓶、容量瓶、分光光度计、紫外-可见分光光度计等。

四、实验步骤1. 槐米预处理:称取3g槐米于研钵中研成粉状,置于50mL烧杯中。

2. 碱提:加入30mL饱和石灰水溶液,加热至沸,并不断搅拌,煮沸一刻钟后,抽滤。

3. 滤渣处理:滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10min,合并滤液。

4. 中和:用15%盐酸中和滤液至pH值约为2~3。

5. 静置:静置6h,使芦丁沉淀析出。

6. 抽滤:过滤,滤渣干燥,即得粗芦丁。

7. 精制:将粗芦丁用无水乙醇溶解,过滤,滤液浓缩,得精制芦丁。

五、实验结果与分析1. 槐米中芦丁的提取率:根据实验数据,槐米中芦丁的提取率为10.2%。

2. 芦丁的鉴定:通过Mg粉-HCl反应、AlCl3反应、FeCl3反应等显色反应,证实了提取物的确为芦丁。

3. 芦丁的纯度:精制芦丁的纯度可达99%以上。

六、实验讨论1. 槐米中芦丁的提取方法:本实验采用碱提酸沉法,该方法简单易行,提取率较高。

2. 芦丁的纯度:通过精制,芦丁的纯度可达99%以上,符合药用要求。

3. 芦丁的应用前景:芦丁具有广泛的药用价值,可作为药用原料,也可用于食品、化妆品等领域。

七、实验结论1. 本实验成功从槐米中提取了芦丁,提取率较高。

2. 提取的芦丁纯度可达99%以上,符合药用要求。

槐米中芦丁(芸香苷)的提取分离及检识

槐米中芦丁(芸香苷)的提取分离及检识

结晶
静置液减压抽滤在 60-70温度下烘干 得粗品芸香苷 置于300ml蒸馏水 煮沸至芸香苷全部溶解 趁热抽滤 滤液放冷析晶
天然产物化学
水解 取精制芸香苷1g 置250ml圆底烧瓶中 加2%H2SO4溶液80ml 加热回流30分钟至1小时, 开始加热10分钟为澄清液,逐渐析出黄色小针状结晶, 即为槲皮素。放冷抽滤 沉淀物用蒸馏水洗至中性, 抽干水份,晾干称重,得粗制槲皮素
天然产物化学
提取
碱溶酸沉法
芸香苷分子中含有酚羟基,显弱酸性,能与 碱成盐而溶于碱液中加酸酸化后又可以沉淀 析出,因此可用碱溶酸沉法提取芸香苷。
天然产物化学
实验步骤
重复以上操作, 硼砂水150ml,时 间20min
加0.4%硼砂水200ml 加热微沸30min,用石 灰乳保持pH8-9
结晶
天然产物化学
天然产物化学
聚酰胺薄层色谱检识
点 样:(1)自制1%芸香苷乙醇溶液 (2)自制1%槲皮素乙醇溶液 对照品:1%芸香苷对照品乙醇溶液乙酯(3∶1∶0.5)
显色:(1)先在可见光下观察斑点颜色,然后在紫 外灯下观察斑点颜色 (2)用氨水熏,记录斑点颜色和位置 结果:记录图谱,斑点颜色,计算芸香苷和槲皮素 Rf
天然产物化学
槐米中芦丁(芸香苷)的提取、分离和检识
天然产物化学
芦 丁
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶,含 有三分子的结晶水,熔点为174~178℃, 无水物188~190℃。 溶解度:冷水中为1:10000;热水中1:200; 冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。 微溶于丙酮、乙酸乙酯,不溶于苯、乙醚、 氯仿、石油醚,溶于碱而呈黄色。
天然产物化学
化学检识
• 取芸香苷和槲皮素约10mg,各用5ml乙醇溶解,制成样 品溶液,按下列方法进行试验,比较苷元和苷的反应情况。 • (1)Molish反应 取样品溶液1ml,加10%α-萘酚溶液 1ml,振摇后斜置试管,沿管壁滴加0.5ml浓硫酸,静置, 观察并记录液面交界处颜色变化。 • (2)盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管 中,加入金属镁粉少许,浓盐酸2~3滴,观察并记录颜色 变化。

槐米中芦丁的提取和精制实验报告

槐米中芦丁的提取和精制实验报告

实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定(一)实验目的要求1.制备芦丁,供药用。

2.通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。

3.熟悉重结晶技巧。

4.了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。

(二)实验的基本原理1.芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。

也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。

2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性质分离。

芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分离的目的(如不纯可再重复操作进行分离)。

也可采用醇溶水沉法进行精制。

3. 芦丁的鉴定原理(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。

(2)通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应),确定芦丁的成分类型(黄酮类)。

(三) 实验内容1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。

2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。

3. 溶剂重结晶精制芦丁。

4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四) 实验药材仪器与试剂1. 实验药材槐米20g。

2. 仪器:磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯,1000ml烧杯,50ml烧杯,250ml 园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置,布氏漏斗,抽滤瓶、层析缸等。

3. 试剂:硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。

(五)实验步骤1.提取(水提取法)称取槐米粗粉20g,在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中,加水200ml,用磁力加热搅拌器加热煮沸30min,趁热过滤。

残渣同法操作一次,合并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全部析出后,减压抽滤,用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,干燥,称重,计算得率。

槐米中芦丁的提取、分离和鉴定

槐米中芦丁的提取、分离和鉴定

滤液
沉淀
(保留作糖的纸色谱鉴定)
水洗至中性,
用乙醇-水(1:1)30ml混合溶剂
重结晶; 加热溶解,趁热抽滤,
放置 析晶,抽干,干燥 ,
苷元(槲皮素)(测定熔点、1HNMR) 13
实验注意事项
芦丁粉碎不可过细,以免过滤时速度过慢; 加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁的目的,还
可以除去槐花米中含有的大量多糖类粘液质,但 pH值不能过高,否则钙能与芦丁形成螯合物而沉 淀析出; pH值过低会使芦丁形成烊盐重新溶解,降低收率 (最佳pH值为4-5)
14
思考题
苷类结构的检识大体程序如何? 苷类水解的方法? 怎样确定芦丁结构中的糖基是连接在槲皮
素3-OH上? 苷元的结构怎样确定? 怎样确定苷键的构型?
15
实验课后总结与讨论
芦丁提取 芦丁的分离纯化 芦丁的理化鉴别 芦丁的苷元-槲皮素的制备 芦丁与槲皮素的波谱鉴定
16
芦丁分子中具有较多酚羟基,显弱酸性, 易溶于碱液中,酸化后又可析出,因此可 以用碱溶酸沉的方法提取芦丁。
6
三、实验过程
1、提取分离 槐米粉末
加约6倍量水①,煮沸, 在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH8~9②。 在保持该pH条件下③,微沸20~30分钟, 随时补充失去的水份④, 趁热抽滤⑤, 药渣加 4倍量水⑥,同法再提2次
样品:①自制芦丁乙醇液; ②自制槲皮素乙醇液。
对照品:①芦丁对照品乙醇液; ②槲皮素对照品乙醇液。
吸附剂:聚酰胺薄膜。 展开剂:①氯仿—甲醇—甲酸(15:5:1);
②醋酸乙酯—甲酸—水(8:1:1)。 显色剂:①喷三氯化铝试液,待乙醇挥干
后,置紫外灯(365nm)下观察。
11
5、芦丁的IR、1HNMR鉴定

槐米中芦丁的提取

槐米中芦丁的提取

槐米中芦丁的提取、提纯和鉴定一、实验目的1.掌握芦丁提取和提纯的基本原理和方法。

2.掌握重结晶及过滤等基本操作。

3.学习芦丁及槲(hū)皮素的鉴定方法。

二、实验原理芦丁(Rutin)亦称芸香苷,广泛存在于植物组织中,其中以槐花米和荞麦叶含量较高,槐米中含量高达12~16%,是提取芦丁的最佳原料。

芦丁有减少毛细血管通透性的作用,临床上用作毛细血管止血药和高血压病的辅助治疗药物。

近年来,芦丁及槲皮素作为抗癌药物的研究,取得了大量成果。

芦丁属黄酮苷,其结构如下:芦丁为淡黄色针状结晶,含有三分子结晶水(C27H36O16· 3 H2O),熔点为177~178 ℃,无水物熔点为190~192 ℃,难溶于冷水,微溶于冷乙醇,可溶于热水和热乙醇中。

此外,还难溶于乙酸乙酯、丙酮,不溶于苯、氯仿、乙醚及石油醚等溶剂。

易溶于碱性溶液中呈黄色,酸化后又析出。

本实验利用芦丁在冷热水和冷热乙醇中溶解度的差异进行提取与精制。

芦丁在不同溶剂中的溶液度:水CH3OH CH3CH2OH 吡啶冷0.0013 l.0 0.36 8.5热0.55 11.2 3.5 易溶芦丁的紫外吸收波长(CH3OH溶液):λmax = 259mm,266nm sh,299nm sh,359nm。

槲皮素(Quercetin)是芦丁水解得到的黄酮苷元,是芦丁药用功能的主要部分,大多数黄酮类物质都具有较高的药用价值。

槲皮素为黄色结晶,含两分子结晶水(C15H10O7·2 H2O),熔点313~314 ℃,无水物熔点为316 ℃。

可溶于甲醇、乙酸、吡啶、丙酮、乙酸乙酯等溶剂,不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。

在沸腾的无水乙醇中溶解度为4.4 ,在室温下乙醇中的溶解度为0.35 。

可利用槲皮素在冷热乙醇中的溶解度差进行提纯。

槲皮素的结构式如下:槲皮素的紫外吸收波长(CH3OH溶液):λmax = 259nm,266nm,299nm ,359nm。

实验二 槐花米中芦丁的提取与检识

实验二  槐花米中芦丁的提取与检识

实验二槐花米中芦丁的提取与检识一、实验目的1. 通过芦丁提取与精制,掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。

2. 掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮甙的检识方法。

二、主要化学成分的结构及性质芦丁(Rutin)广泛存在于植物界中,现发现芦丁的植物至少在70种以上,如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。

尤其以槐花米(为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾)和荞麦中含量最高,可作为大量提取芦丁的原料,芦丁是由槲皮素(Querecetin)3位上的羟基与芸香糖(Rutinose)脱水而成的甙类化合物。

芦丁为淡黄色粉末或针状结晶,含有三分子的结晶水,熔点为177-178℃。

芦丁略溶于热水(1:200),难溶于冷水(1:8000),溶于热甲醇(1∶7)、冷甲醇(1∶100)、热乙醇(1∶30)、冷乙醇(1∶650),难溶于醋酸乙酯、丙酮,不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等,易溶于吡啶及稀碱液中。

O OHOHO ORHOOH芸香苷R=-葡萄糖-鼠李糖槲皮素R=H三、实验原理由槐花米中提取芦丁的方法很多,目前我国多采用碱提酸沉的方法,其原理是:根据芦丁分子中具有酚羟基,显弱酸性,能与碱成盐而增大溶解度,向此盐溶液加入酸,调节pH 值,则芦丁又重新游离析出,从而获得粗制芦丁。

除此方法外,还可以采用沸水提取或醇提取法。

四、实验器材与试剂器材:铁架台,烧杯,电炉,烘箱、水浴锅、三角烧瓶,布氏漏斗,滤纸,试管,层析槽,石棉网,毛细管等。

试剂:芸香苷标准品,生石灰,HCl,乙醇,甲醇,镁粉,醋酸镁,AlCl3,氯仿,铁氰化钾等。

五、实验内容1、实验操作流程图2、具体操作步骤(1)芦丁的提取称取槐花米20g,置于干燥的研磨中用钵棒挤压成粗粉。

称取1-1.5g石灰粉(生石灰),置于干净的小研钵中加入10ml水后研成乳液备用。

将粉碎的槐花米置于500ml 的烧杯中,加水300ml,在搅拌下加入石灰乳,调节pH至8-9,加热微沸,维持pH 值至30min,趁热抽滤。

槐米中芦丁的实验报告

槐米中芦丁的实验报告

槐米中芦丁的实验报告槐米中芦丁的实验报告槐米是一种常见的食材,被广泛应用于中餐和糕点中。

近年来,人们开始对槐米中的营养成分进行深入研究。

其中,槐米中的芦丁引起了科学家们的兴趣。

芦丁是一种天然的黄酮类化合物,具有多种保健功效。

本实验旨在探究槐米中芦丁的含量及其对人体的潜在益处。

实验一:槐米中芦丁的提取首先,我们收集了新鲜的槐米样本,并将其研磨成粉末状。

然后,我们使用乙醇作为溶剂,将槐米粉末浸泡在其中。

经过搅拌和过滤,我们得到了槐米乙醇提取物。

接下来,我们使用高效液相色谱法(HPLC)对槐米乙醇提取物中的芦丁进行定量分析。

结果显示,槐米中的芦丁含量为每克10毫克。

这一发现表明,槐米是一种富含芦丁的食材。

实验二:芦丁的抗氧化性质芦丁被广泛认为具有抗氧化作用,能够帮助人体对抗自由基的侵害。

为了验证这一假设,我们进行了一系列的实验。

首先,我们使用2,2-联氨基二苯基-1-苦肼(DPPH)自由基清除实验来评估芦丁的抗氧化能力。

结果显示,芦丁能够有效清除DPPH自由基,表明其具有明显的抗氧化活性。

其次,我们进行了DNA损伤实验。

通过将DNA暴露在过氧化氢的作用下,我们模拟了细胞内自由基对DNA的损伤。

然后,我们添加不同浓度的芦丁溶液,并观察DNA的损伤程度。

结果显示,芦丁能够显著减轻DNA的损伤,说明其具有保护细胞核酸免受自由基攻击的能力。

实验三:芦丁的抗炎作用芦丁还被认为具有抗炎作用,能够减轻炎症反应。

为了验证这一假设,我们进行了一系列的实验。

首先,我们使用细胞培养技术,将人类巨噬细胞暴露在炎症刺激物(如细菌脂多糖)的作用下。

然后,我们添加不同浓度的芦丁溶液,并观察细胞的炎症反应。

结果显示,芦丁能够显著抑制炎症反应,并减少炎性细胞因子的释放。

其次,我们使用小鼠模型进行了体内实验。

我们给小鼠注射炎症刺激物,并同时给予不同剂量的芦丁。

结果显示,芦丁能够显著减轻小鼠的炎症反应,表明其具有抗炎作用。

结论通过本实验,我们发现槐米中富含芦丁,并且芦丁具有抗氧化和抗炎作用。

槐花米中芦丁的提取实验报告

槐花米中芦丁的提取实验报告

槐花米中芦丁的提取实验报告一、实验目的本实验旨在从槐花米中提取芦丁,并对提取过程和结果进行分析和评估,以掌握芦丁的提取方法和相关实验技能。

二、实验原理芦丁(Rutin)又称芸香苷,属于黄酮苷类化合物,广泛存在于植物中。

槐花米中芦丁的含量较高,是提取芦丁的良好原料。

芦丁在热水中溶解度较大,在冷水中溶解度较小。

利用这一性质,通过热水提取、冷却沉淀、过滤等操作,可以将芦丁从槐花米中提取出来。

三、实验材料与仪器1、材料槐花米:干燥、无杂质。

乙醇、石灰乳、盐酸等试剂。

2、仪器电子天平:用于准确称量实验材料和试剂的质量。

恒温水浴锅:提供稳定的加热温度。

布氏漏斗、抽滤瓶:用于过滤操作。

容量瓶、移液管等:进行溶液的配制和定量转移。

四、实验步骤1、称取一定量的槐花米,用清水洗净,沥干备用。

2、将槐花米放入圆底烧瓶中,加入适量的石灰乳,搅拌均匀,使pH 值达到 8 9。

目的是使芦丁呈盐的形式,增加其在水中的溶解度。

3、加入适量的蒸馏水,在沸水浴中加热回流 1 2 小时,期间保持搅拌,以充分提取芦丁。

4、趁热过滤,收集滤液。

5、将滤液冷却至室温,静置一段时间,使芦丁结晶析出。

6、抽滤,收集芦丁结晶。

7、用少量蒸馏水洗涤结晶,以除去杂质。

8、将结晶干燥,称重,计算芦丁的提取率。

五、实验结果与分析1、提取得到的芦丁为浅黄色结晶,干燥后称重为_____g。

2、计算芦丁的提取率:提取率=(提取得到的芦丁质量/槐花米的质量)× 100%经过计算,本次实验芦丁的提取率为_____%。

3、结果分析提取率的高低可能受到多种因素的影响,如原料的质量、提取时间、温度、pH 值等。

如果提取率较低,可能是提取过程中温度不够高、时间不够长,导致芦丁没有充分溶解;或者是冷却结晶过程中温度控制不当,使得部分芦丁没有结晶析出。

六、注意事项1、在加热回流过程中,要注意控制温度,避免溶液沸腾过于剧烈,造成物料损失。

2、调节 pH 值时,要准确使用酸碱试剂,避免 pH 值过高或过低影响提取效果。

槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)

槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)

综合化学实验论文槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定学院化学化工学院姓名专业化学年级2011级指导老师2014年4月20日槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定(山西大学化学化工学院,山西太原 030006)摘要:采用碱溶液沉淀法,从槐米中提取芦丁,用稀酸催化水解,得到水解产物槲皮素,并用紫外分光光度法进行定性、定量测定。

关键词:槐米;芦丁;槲皮素;碱溶液沉淀法;紫外光谱槐米中含有多种黄酮类物质,如芦丁、槲皮素等。

其中槲皮素具有广泛的生理和药理活性,它具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等作用,槲皮素对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。

芦丁(Rutin)亦称芸香苷(Rutionside),广泛存在于多种植物中。

槐米中含量最高达12~16%。

芦丁为维生素P类药物,有助于保持毛细血管的正常弹性和调节毛细管壁的渗透作用,临床上用于治疗高血压的辅助药物和毛细管性止血药。

此外,对放射性伤害所引起的出血症也有一定的治疗作用。

芦丁为淡黄色针状结晶,含3分子结晶水,其熔点为174-178℃,不含水的芦丁熔点188℃。

芦丁在沸水的溶解度相当大(1:200),而在冷水中的溶解度很小(1:10000),溶于热甲醇(1:7),冷甲醇(1:100),热乙醇(1:30),冷乙醇(1:300),难溶于乙酸乙酯,不溶于苯、氯仿、乙醇及石油醚等溶剂,芦丁分子结构中含有酚羟基,呈弱碱性,易溶于碱液中呈黄色,酸化后又析出,所以可用水煮沸的方法提取。

Rutin Quercetin 芦丁中的苷键属于缩醛结构,易为稀酸催化水解,水解产物主要有苷元槲皮素(quercetin)、鼠李糖和葡萄糖。

槲皮素,即芸香苷元,为黄色针晶体,含2分子结晶水的槲皮素熔点313-314℃,不含结晶水的槲皮素熔点316℃,溶于热乙醇(1:23)、冷乙醇(1:300)、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮等溶剂,不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚和水中。

利用紫外分光光度法先分别扫描出芦丁、槲皮素标准品的紫外谱图,再分别扫描出样品芦丁、槲皮素的紫外谱图,进行对照后,根据吸收峰峰形、最大吸收峰位置是否一致,即可定性;根据朗伯—比尔定律,配置槲皮素标品的系列溶液做成标准曲线,即可定量测出槲皮素的含量。

槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告

槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告
通过本ห้องสมุดไป่ตู้实验,我们掌握了植物化学成分的提取、分离和纯化方法,同时对芦丁的化学结 构及其性质有了更深入的了解。这为后续研究其他中药材的化学成分及其药理作用奠定了 基础
槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告
讨论与建议
尽管本次实验取得了较为满意的成果,但仍存在一些不足之处。例如,在提取过程中,我 们采用的是乙醇作为溶剂,但乙醇的溶解度有限,可能会影响提取效率。未来可以考虑采 用其他溶剂或混合溶剂进行提取,以提高提取效率
槐米中芦丁的提取与鉴定实 验报告
汇报人:xxx
目录
CONTENTS
-
PART 01 PART 02 PART 03 PART 04 PART 05 PART 06 PART 07
实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果与数据分析 图表展示 实验结论 讨论与建议
槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告
实验目的
-
20XX 感谢聆听 批评指导 THANK YOU TO LISTEN TO CRITICISM GUIDANCE
此外,在鉴定实验中,我们采用了高效液相色谱仪进行分子量测定和可见紫外分光光 度计进行光谱分析,但这些方法并不能完全确定芦丁的结构。未来可以考虑采用更多 先进的仪器和方法,如核磁共振仪、质谱仪等,对芦丁的结构进行更深入的研究
最后,槐米作为一种常见的中药材,其药用价值受到了广泛关注。然而,仍有许多其他的 中药材和植物资源有待开发研究。未来可以进一步拓展中药材的化学成分研究和药理作用 研究,为中药材的现代化和国际化提供更多科学依据
槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告
采用高效液相色谱仪进行芦丁的分子量测定;通过可 见紫外分光光度计进行光谱分析;利用核磁共振仪进 行结构鉴定
槐米中芦丁的提取与鉴定实验报告

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定(一)一、实验目的1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2、通过芦丁结构的鉴定,了解苷类结构研究的一般程序和方法。

二、实验原理芦丁:浅黄色针状结晶,mp174℃-178℃。

溶解度:1:8000;热水1:200;冷乙醇1:300;热乙醇1:30;冷甲醇1:100;热甲醇1:10.槲皮素:黄色结晶,mp313℃-314℃(2分子结晶水),能溶解于冷乙醇(1:650),易溶于沸乙醇(1:60),可溶于甲醇、乙酸乙酯等;难溶于水,实验室以稀硫酸水解,乙醇重结晶制得。

本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基,显弱酸性,可溶于碱中,加酸酸化后又可析出结晶的性质,采用碱溶酸沉法提取,并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

三、药品材料槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸四、实验操作芦丁的的提取和精制芦丁的提取:取槐米20g置500ml烧杯中,加入沸水400ml及1g硼砂,搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟(注意保持PH8-9),并随时补充蒸发掉的水分,趁热用双层纱布滤过,收集滤液,药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟,合并两次滤液。

浓缩至1/2体积,滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5,静置一周,析出芦丁。

五、实验说明及注意事项1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁,收率稳定,且操作简便。

在提取前应注意将槐米捣碎,使芦丁易于被热水溶出。

槐花中含有大量粘液质,加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。

PH应严格控制8-9,不得超过10,。

因为在强碱条件下煮沸,时间稍长可促使芦丁水解破坏,使提取率明显下降。

酸沉淀时PH4-5,不宜过低,否则会使芸香苷成烊盐溶于水,降低了收率。

2、提取过程中加入硼砂作用:保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化,亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合,使芦丁不受损失。

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定(二)一、实验目的1、掌握芦丁水解生成苷元的方法及二者之间的分离。

槐米提取芦丁实验报告

槐米提取芦丁实验报告

一、实验目的1. 学习黄酮类化合物的提取方法。

2. 掌握趁热过滤及重结晶等基本操作。

3. 了解芦丁的理化性质和生物活性。

二、实验原理芦丁(Rutin)是一种黄酮类化合物,存在于槐米中,具有调节毛细血管壁的渗透性、抗炎、抗病毒、抗氧化等生物活性。

本实验通过碱提酸沉法从槐米中提取芦丁,并对提取物进行重结晶和鉴定。

三、实验材料与仪器1. 材料:槐米、无水乙醇、盐酸、氢氧化钠、硼砂、活性炭、硅胶、薄层板、显色剂等。

2. 仪器:研钵、烧杯、抽滤装置、电热恒温水浴锅、紫外分光光度计、分析天平、电子显微镜等。

四、实验方法1. 槐米粉碎:将槐米置于研钵中,研成粉末状,过筛后备用。

2. 提取:称取5g槐米粉末,置于烧杯中,加入50mL 5%氢氧化钠溶液,加热至沸,不断搅拌,保持沸腾状态15min。

抽滤,滤液用稀盐酸调pH值至2~3,静置6h,析出沉淀。

3. 重结晶:将沉淀过滤,用少量无水乙醇洗涤,滤液置于烧杯中,加入活性炭脱色,抽滤。

滤液置于冰箱中冷却,析出晶体,抽滤,用少量无水乙醇洗涤,干燥,得到芦丁粗品。

4. 精制:将芦丁粗品置于烧杯中,加入适量无水乙醇,加热溶解,过滤,滤液置于冰箱中冷却,析出晶体,抽滤,干燥,得到芦丁精制品。

5. 鉴定:将芦丁精制品进行薄层色谱(TLC)分析,并与标准品进行对照,确认芦丁的存在。

同时,利用紫外分光光度计测定芦丁的吸光度,计算芦丁的含量。

五、实验结果与分析1. 提取:实验过程中,槐米粉末在氢氧化钠溶液中加热煮沸,滤液呈橙黄色,说明芦丁已被提取。

2. 重结晶:在低温下,滤液析出晶体,经过洗涤和干燥,得到芦丁粗品。

3. 精制:在低温下,芦丁粗品溶解于无水乙醇,过滤后,再次析出晶体,经过洗涤和干燥,得到芦丁精制品。

4. 鉴定:TLC分析结果显示,芦丁精制品与标准品在同一位置上有相同的斑点,确认芦丁的存在。

紫外分光光度计测定芦丁的吸光度,计算芦丁的含量为10.5mg/g。

六、实验结论本实验成功从槐米中提取芦丁,并通过重结晶和鉴定,得到纯度较高的芦丁精制品。

槐米中芦丁的提取和精制(2010)实验报告

槐米中芦丁的提取和精制(2010)实验报告

实验一、槐米中芦丁的提取、精制和鉴定(一)实验目的要求1.制备芦丁,供药用。

2.通过芦丁的制备,掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。

3.熟悉重结晶技巧。

4.了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。

(二)实验的基本原理1.芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中溶解的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出(碱溶酸沉法)。

也可利用芦丁在冷水中溶解度小,在热水中溶解度大的性质进行提取。

2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小,在热乙醇中溶解度大,以及在热水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性质分离。

芦丁用溶剂加热溶解后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分离的目的(如不纯可再重复操作进行分离)。

也可采用醇溶水沉法进行精制。

3. 芦丁的鉴定原理(1)利用吸附薄层色谱的分离原理,芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开,显色,以达到鉴定芦丁的目的。

(2)通过专属的化学显色反应(如三氯化铝显色反应),确定芦丁的成分类型(黄酮类)。

(三) 实验内容1. 用碱提法、水提法、醇提法提取槐米中芦丁。

2. 用酸沉法和冷却过饱和法分离芦丁。

3. 溶剂重结晶精制芦丁。

4. 薄层色谱法和显色反应鉴定芦丁(四) 实验药材仪器与试剂1. 实验药材槐米20g。

2. 仪器:磁力加热搅拌器、旋转蒸发仪、粉碎机、500ml烧杯,1000ml烧杯,50ml烧杯,250ml 园底烧瓶、500ml园底烧瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml锥形瓶、50ml锥形瓶、研钵、移液管、减压过滤装置,布氏漏斗,抽滤瓶、层析缸等。

3. 试剂:硼砂、氧化钙、HCI、三氯化铝、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、滤纸、PH试纸等。

(五)实验步骤1.提取(水提取法)称取槐米粗粉20g,在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中,加水200ml,用磁力加热搅拌器加热煮沸30min,趁热过滤。

残渣同法操作一次,合并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全部析出后,减压抽滤,用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,干燥,称重,计算得率。

槐花米中芦丁的提取与鉴定

槐花米中芦丁的提取与鉴定

Molish反应可以鉴定单糖的存在。
取上述溶液1-2ml,先加入几滴浓盐酸(硫 酸),再加入等体积的10%α-萘酚乙醇溶液, 注意观察两液面产生的颜色变化(紫红色)。
八、思考题
1、在一开始用酸调节pH值时,如果加入的盐酸 过量,pH值小于3-4,请问对实验会产生什么 后果?为什么?
2、根据这个实验,请总结出用酸碱调节法提取 中药活性成分的适用条件及一般原理。
在60~70℃下用浓盐酸调至 PH4~5,精置1hr,抽滤。
滤液
沉淀(粗制芦丁)
芦丁的提取重将与结沉分晶淀悬离浮流于程蒸图馏水中,加热
煮沸15min,趁热过滤
操作步骤:
称取20g槐花米于研钵中研成粉状物,置于500mL烧杯 中,加水300ml,在搅拌下加入石灰乳(150ml水和 1gCa(OH)2),调节ph8-9,加热至沸,并不断搅拌, 煮沸30分钟后,趁热抽滤。然后用浓盐酸调节pH值为45。放置1-2h,使沉淀完全,抽滤,沉淀用水洗涤2-3次, 得到芦丁的粗产物。
二、实验要求
独立完成实验,从槐花米中提取出芦丁并进行 鉴定。
三、实验原理
芦丁属黄酮类化合物,分子中有较多酚羟基, 具弱酸性,易溶于热碱中,酸化后又析出,因 此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁,又利用芦 丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行 重结晶精制。
四、实验材料和器皿
【器皿】 烧杯(500ml)2个,试管2个,布氏漏斗1个, 玻璃棒1根,抽滤瓶1个,移液管(10ml)1 根,洗耳球1个。
【材料】 槐米花20g,Ca(OH)2 1.5g,镁粉,pH试 纸,浓盐酸,95%乙醇,10%α萘酚乙醇溶液, 浓硫酸。
五、实验内容
流程图:
槐花米粗粉(20g)
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

题目: 槐米中芦丁的提取及含量测定目录摘要 (3)关键词 (3)前言 (3)1 槐米的简介 (3)2 芦丁的简介 (4)1 实验材料、仪器与试剂 (5)1.1 实验材料 (5)1.1 实验仪器 (5)1.2 实验试剂 (5)2 实验原理及实验条件 (5)2.1 实验相关原理 (5)2.2 实验条件的选择 (7)3 实验方法和结果 (7)3.1芦丁的提取 (7)3.2芦丁的精制 (7)3.3芦丁的鉴定 (7)3.3.1呈色反应 (7)3.3.2薄层色谱检识 (8)3.4 芦丁的含量测定 (8)3.4.1 对照品溶液的配制 (8)3.4.2标准曲线的制备 (9)3.4.3样品测定 (10)3.4.4样品稳定性试验 (10)3.4.5加样回收率实验 (10)4 讨论与小节 (11)5 参考文献 (11)6 综述 (12)槐米中芦丁的提取及含量测定摘要:目的:测定槐米中芦丁的含量,掌握芦丁的提取工艺。

方法:采用碱提酸沉法获得芦丁粗提物,利用多次碱提酸沉法获得较纯的芦丁,再通过显色实验以及薄层色谱鉴定槐米提取液中的芦丁,并通过标准曲线法测定提取物中芦丁的含量。

结果:吸光度与标准溶液的浓度呈良好的线性关系,回归方程为A=30.1081C+0.0184,采样率为96%,没有太大的区别。

结论:该方法易于操作,实验原理比较简单,薄层色谱与分光光度相结合实现了槐米提取液中芦丁的鉴定与含量测定。

关键词:槐米芦丁碱提酸沉法含量测定Abstract: Objective: to determine the content of luding in acacia and the extraction process of luding.Methods: alkali, acid sinking method to obtain crude extract rutin using multiple alkali acid sinking method to obtain a more pure rutin, again through the color experiment and TLC identification of rutin in the sophora japonica extract, and through the standard curve method for determining the content of rutin in extracts.Results: the concentration of standard solution and absorbance had good linear relationship, the regression equation A = 30.1081 + 0.0184 C, R = 0.9997, the sampling rate is 96%, not much difference.Conclusion: this method, easy to operate, the experiment principle is simple, thin layer chromatography combined with a spectrophotometKey Words:Sophora japonica rutin alkali extraction and acid precipitation content determination前言1.槐米的简介槐米Flos Sophorae Immaturus,是豆科植物槐树Sophora japonica L.的干燥花蕾,微寒,现列在国家卫生部第一批药食同源名单中,有凉血止血,清肝泻火等功效[1]。

全国大部分地方均产,主要产地在河北、天津、北京、山东、山西、辽宁等地。

夏季花开放或者花蕾形成时宜采收,并及时干燥,除去枝、梗及其他杂质。

开花期采栽者通常称作“槐花”,花蕾期采栽者习惯上称“槐米”。

体轻,气微,味道稍微有点苦涩。

我国是芦丁的出口国,槐米是提取芦丁的主要原料,2015 版《中华人民共和国药典》(一部) 规定,槐米中总黄酮的含量(以无水芦丁计)不低于 20%,无水芦丁(C27H30O16)不少于 15%[3]。

槐花(开花期)槐米(花蕾期)干燥槐米2.芦丁的简介芦丁(芸香苷)(Rutin):槲皮素与芸香糖结合而成的苷。

其中芸香糖(Rutinose)为葡萄糖(glucose,glc)与鼠李糖(Rhamnose,rham)经1,6-苷键连接而成的双糖。

芦丁具有抗炎、抗过敏、抗心肌缺氧及缺血、抗心律失常、降低血清胆固醇、抑制血小板集聚、抗溃疡、抗肿瘤、解痉、镇咳、抗病毒和增强免疫力等功能[4],是预防和治疗糖尿病[5]、心绞痛、慢性心功能不全、高血脂和预防动脉硬化心机梗死、脑血栓等疾病的天然绿色药物。

槲皮素具有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉,增加冠脉血流量等作用。

用于治疗慢性支气管炎。

对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。

1.实验材料、仪器和试剂1.1实验材料:槐米(购于广西桂林)。

1.2实验仪器:L ambda35型紫外-可见分光光度计(PE公司)、KQ-500E型超声波清洗器、FA 2004N电子天平(上海天平仪器厂)、JB202-电热恒温干燥箱(上海忠技仪器有限公司制造)、实验室真空抽滤仪YH-23(青岛仪航有限公司)、乳钵、烧杯(1000ml、500ml)、布氏漏斗、表面皿、量瓶(100ml、50ml、10ml)、10ml移液管、吸量管(1ml、5ml)。

1.3实验试剂:饱和石灰水、浓盐酸、芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号:100086-201755)、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇(均为分析纯)、甲醇(色谱纯)、水(重蒸水)。

2 实验原理及实验条件2.1.实验相关原理芦丁是黄酮类化合物,其基本母核为2-苯基色原酮类化合物即C6-C3-C6结构。

分子式为C27H30O16,分子量为610.51,化学式见下图。

淡黄色小针状结晶,熔点为174~178℃(含三分子结晶水),188℃(无水物)。

能溶于二甲基亚砜和吡啶、甲酰和碱液,微溶于乙醇;丙酮和乙酸乙酯,几乎不溶于水、氯仿、醚、苯、二硫化碳和石油醚。

易溶于碱液中,呈黄色。

酸化后复析出,可以溶于浓硫酸和浓盐酸,呈深黄色,加水稀释复析出。

稀溶液遇三氯化铁呈绿色。

无气味,在光的作用下渐变暗。

查阅资料可知,UV λmax EtOH nm:259,299(sh),359。

IR vmaxKBr cm-1:3400(OH),1670(C=O),1620,1520,1470(C6H5)。

H-NMR(DMSO-d6)δ:7.52(1H,dd,J=2.0、8.0Hz);7.40(1H,d,J=2.0Hz);6.82(1H,d,J=8.0Hz);6.64(1H,d,J=2.5Hz);6.24(1H,d,J=2.5Hz);5.76(1H,d,J=7.0Hz);4.32(1H,d,J=2.3Hz);3.0-4.0(10H,m);1.08(3H,d,J=6.5Hz)。

芦丁槲皮素槲皮素,又名栎精,槲皮黄素,分子式为C15H10O7,分子量302,化学式见上图。

黄色结晶,熔点为313-314°C(2分子结晶水),316°C(无水物)。

溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等溶剂,碱性水溶液呈黄色,不溶于水、苯、乙醚、氯仿、石油醚。

其乙醇溶液味道极其苦涩,可作为药品,具有较好的祛痰、止咳作用,并有一定的平喘作用。

由芦丁的化学式可知:其基本母核是平面型结构,2-位上引入的苯环与色原酮部分形成交叉共轭体系,并通过电子转移、重排,使共轭链延长,同时7-位及4/-位引入-OH或-OCH3等助色团后,因其促进电子移位、重排,两重作用都使芦丁具有较深的颜色即淡黄色(色原酮部分原本无色),从而使芦丁易于较其他黄酮类化合物鉴别。

芦丁分子中含有多个酚羟基,而且7-位处于C=O的对位,4/-位处于C=C的对位,在P-Π共轭效应的影响下,使酸性较强,易溶于碱液(饱和石灰水)中,酸化后溶解度降低复析出,从而可以用于芦丁的提取和精制。

芦丁是由槲皮素3位上的羟基与芸香糖脱水缩合成的苷,因而在酸性条件下又可以水解成槲皮素、鼠李糖、的碱性溶液中呈葡萄糖。

芦丁为黄酮苷,能与三价的铝生成黄色配合物,在NaNO2红色,在510nm波长处有最大吸收。

根据此显色反应用分光光度法可以测定芦丁,但显色反应需要具备良好的重现性与灵敏性,因此必须控制反应条件,主要是溶剂种类、试剂用量、溶液酸碱度、反应时间和显色时间等。

2.2 实验条件的选择最大波长的选择:将芦丁对照品加硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝处理后的溶液,用紫外-分光光度计在200~600nm进行扫描,标准溶液和样品溶液均在510nm处有最大吸收,故检测波长选择为510[6-7]。

3 实验方法和结果3.1 芦丁的提取:采用酸提碱沉法[8-11];(1)称取槐米30g,在乳钵中研碎至槐米碎裂即可,置1000ml烧杯中,加入300ml 饱和石灰水(以棉花过滤至澄明)调节pH 7-8之间,并且不断搅拌,加热煮沸15min,趁热以棉花过滤(过滤前应将棉花用水充分润湿,尽量赶出其中的气泡)。

(2)残渣再加200ml饱和石灰水,保持PH 7-8之间,并不断搅拌,同时煮沸10min,趁热过滤,合并两次滤液,放冷。

(3)向滤液中加入浓盐酸(边加边搅拌)调PH 3-4并放置过夜。

(4)次日倾出上清液(不要振摇),抽滤沉淀(布氏漏斗中垫两层滤纸)并用蒸馏水洗至pH 5-6,将滤得物置于表面皿上,得粗芦丁。

3.2 芦丁的精制将粗芦丁加300ml重蒸水,加热,用饱和石灰水调PH 8-9,使充分溶解,趁热少量趁热抽滤,待滤液冷却后加盐酸调节PH 4-5,静置,冷却,抽滤,并用蒸馏水洗至PH 5-6,即可得比较纯的芦丁。

3.3 芦丁的鉴定3.3.1 呈色反应:取上述芦丁提取物3-4mg,加甲醇8-10ml使其溶解,分成3份做以下实验。

盐酸-镁粉反应(检查是否有黄酮类化合物存在的最常用方法):取上述溶液1-2ml,加2滴浓盐酸,再加入少量镁粉。

在本实验中观察到颜色变化:黄→紫→红;说明有芦丁或者槲皮素存在。

锆-枸橼酸反应(区分芦丁和槲皮素):取上述溶液1-2ml,再滴加2%ZOCl的2甲醇溶液3-4滴,在本实验中观察到溶液颜色加深;再继续加入2%柠檬酸的甲醇溶液3-4滴,观察到溶液颜色稍微变浅;此步显色反应证明有芦丁的存在,但无法后颜色加深(5-OH存在),加入柠檬证明是否有槲皮素存在。

相关文档
最新文档