高中生物选修一专题二
人教版高中生物选修一专题二知识点汇总
人教版高中生物选修一专题二知识点汇总专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养一、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
1、★种类：培养基按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。
区别：液体培养基中加入凝固剂琼脂制成琼脂固体培养基，是实验室最常用的培养基之一结果：微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
2、★化学成分：包括水、无机盐、碳源、氮源。
★培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养厌氧型微生物需要提供无氧条件，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，二、无菌技术1、研究和应用微生物的前提是防止杂菌入侵，获得纯净的微生物。
★获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
注意：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
①将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
①为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
①实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
★无菌技术目的：防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，有效避免操作者自身被微生物感染。
★2、消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）接种室、接种想或超净工作台使用前先用石炭酸或煤酚皂等消毒液消毒，再用紫外线照射三、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基★1、方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
（灭菌前调PH）①称量时，放在称量纸上称量；①熔化时，加入琼脂，补加蒸馏水至100ml；①灭菌前调PH；①待培养基冷却至50①左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
★2、倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。
①右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。
高中生物选修一资料专题2 专题整合提升
知识系统构建必背要语1.实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
2.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
3.稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比实际活菌数目低。
4.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。
5.鉴定分解尿素的细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，据是否变红进行判断。
6.纤维素酶的作用是：纤维素―――→C 1酶和C X酶纤维二糖―――→葡萄糖苷酶葡萄糖。
7.刚果红与纤维素形成红色复合物。
当纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
规律方法整合整合一常见的消毒灭菌方法比较例1下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是()A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案 C解析天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验操作者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源但不是唯一的碳源。
例2微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A.①B.②③C.③④D.③⑤答案 D解析无菌操作包括消毒和灭菌。
需进行消毒处理的有操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。
2019-2020学年高中生物人教版选修1配套习题：专题2 课题1 微生物的实验室培养
③接种可疑菌后,在温度为 35 ℃的环境中培养 24 h,液体培养基变浑浊,原因是
。对照组试管中应加入 ,与实验组同时培养 6 h 后,若实验组液体
培养基的浑浊度比对照组 (填“高”或“低”),则可确定疑似患者被炭疽杆菌感染;反之,
则排除。
④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体
3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( ) A.培养基一般都含水、碳源、氮源和无机盐 B.涂布接种时,涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用 C.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 D.观察菌落时,应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数 解析:涂布接种时,涂布器应在酒精灯火焰引燃灭菌,冷却后再使用;用液体培养基培养微生物时, 应放在摇床上,培养皿中的是固体培养基,应倒置放在恒温培养箱内培养;菌落肉眼可见,不需要 借助于显微镜。 答案:A
的原因是
。
解析:实验室中能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等,可用干热灭菌的
方法灭菌。对于一些不耐高温的液体,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高温瞬时消毒法消毒,这种
消毒方法的优点是可以杀死牛奶中的微生物,并且牛奶中的营养成分基本不被破坏。自来水通
常用氯气消毒,氯气与水反应生成次氯酸和氯化氢,次氯酸具有强氧化性,能杀死自来水中的微
6.防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境 解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。 答案:B
人教版 高中生物 选修一 专题二 课题3 分解纤维素的微生物的分离
【情景创设】纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，大量存在于植物的根茎叶等器官中。
地球上40%-60%的纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。
人们要想利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等，就需要对这些微生物进行研究与应用，而要研究这些微生物，首先要将它们从土壤中种类众多的微生物中分离出来。
本课题中，我们就将探讨如何分离土壤中能够分解纤维素的微生物。
【问题设计】1、回顾纤维素的相关知识，说说纤维素酶的组成及作用。
2、筛选纤维素分解菌的原理是什么？3、说说分离分解纤维素的微生物的实验流程，回答P28旁栏思考1.4、简述采集土样的要求，回答P28旁栏思考2、3。
5、如何进行选择培养？结合P29“操作提示（二）”回答楷体字“资料二”相关问题及右栏思考2.6、常用的刚果红染色法有哪些？回答右栏思考1。
【达标检测】（必做）1. 纤维素酶能够分解（ ）A ．纤维素的微生物B ．淀粉的微生物C ．纤维素D ．淀粉2. 刚果红能与哪项物质形成红色复合物( )A ．纤维二糖B ．纤维素C ．葡萄糖D ．麦芽糖3. 寻找纤维素分解菌应到…（ ）A ．湿润的环境中B ．富含纤维素的环境中C ．富含无机盐的环境中D ．池塘中4. 纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有…( )A ． NaNO3B ．KClC ．酵母膏D ．纤维素粉5. 下列哪种生物能产生纤维素酶( )A.纤维素分解菌 B ．牛 C ．羊 D ．兔【使用时间】 第 3 周 第 2 课时 【编辑】李玲珍 刘萍萍 【审核】刘萍萍 【主题】 专题二 课题3 分解纤维素的微生物的分离 2012.02.256.刚果红染色时，加入刚果红可在……( )①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤培养基上长出菌落时A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤7.两种刚果红染色法的结果是（）A．均会出现透明圈 B均不会出现透明圈C方法一出现方法二不出现 D方法一不出现方法二出(选做)有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。
人教版高中生物选修1专题二课题1微生物的实验室培养二测试卷
专题二课题1微生物的实验室培养一一、选择题(共24小题,每小题2分,共48分)1.微生物在哪种培养基上生长会形成肉眼可见的菌落()A．液体培养基 B．固体培养基 C．选择培养基 D．鉴别培养基2.下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误的是()A．此培养基可用来培养自养型微生物B．此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C．表中各成分的含量按照所培养的微生物的营养需要来确定D．若除去①，此培养基可用于培养大肠杆菌3.同学在①②③三种条件下培养大肠杆菌，这三种条件是：①以葡萄糖为碳源的培养基，不断补充培养基，及时去除代谢产物②以葡萄糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基，不补充培养基，不去除代谢产物根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下：假设三种培养基中初始总糖量相等，则①②③三种条件依次对应的趋势图是()A．甲、乙、丙 B．乙、丙、甲 C．丙、甲、乙 D．丙、乙、甲4.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是()A．紫外线照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果B．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒5.在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36小时后，统计大肠杆菌的菌落数(如表)。
下列表述错误的是()A．对照培养皿Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，表明琼脂是培养基中必需的营养成分B．对照培养皿Ⅰ和Ⅱ，说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子C．对照培养皿Ⅱ和Ⅲ，说明糖类是大肠杆菌需要的碳源D．本实验使用的是固体培养基6.下列有关培养基的叙述正确的是()A．培养基中必须含有琼脂B．不同培养基的具体配方一般不同C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在液体培养基上生长时也可形成菌落7.将配制好的培养基进行灭菌，应用()A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌 C．干热灭菌 D．煮沸灭菌8.含C、H、O、N的大分子化合物可以作为()A．异养微生物的氮源、能源B．异养微生物的碳源、氮源C．自养微生物的氮源、能源、碳源D．异养微生物的氮源、能源、碳源9.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。
高中生物选修一知识点总结(7篇)
高中生物选修一知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。
2、有氧发酵：醋酸发酵、谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵、乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）、分裂生殖、孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
C6H12O6→2C2H5OH+2CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌。
在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色。
在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。
8、醋酸菌是单细胞细菌（原核生物）,代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂。
9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
2C2H5OH+4O2→CH3CO OH+6H2O10、控制发酵条件的作用：①醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。
②醋酸菌最适生长温度为30～35℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。
③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。
11、实验流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒（→醋酸发酵→果醋）12、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。
在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。
先在试管中加入发酵液2mL，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色。
13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口是用来取样的。
人教版高中生物选修一专题2微生物的培养与应用_课题1 微生物的实验室培养 (2)
实验组 唯一氮源
的培养基
是否 接种
是
对照组
牛肉膏 蛋白胨
是
培养基
目的 结果
分离 尿素 细菌
只生长 尿素细 菌
判断该 培养基 有无选 择性
生微镜直接计数： 利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下 计算一定容积里样品中微生物的数量。
缺点：
不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
五.课外延伸
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH 升高，指示剂将变红，说明该细菌能够 分解尿素。
测定饮水中大肠杆菌数量的方法是 将一定体积的水用细菌过滤器过滤后， 将滤膜放到 伊红美蓝 培养基上培养， 大肠杆菌菌落呈现黑色，据黑色菌落的 数目可计算出水样中大肠杆菌的数量。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前 都要灭菌。
[二]制备培养基
准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基。每个稀释 度下需要3个选择培养基，1个牛肉膏蛋白胨培养基。
将稀释相同倍数的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基 上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因 此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选择 培养基是否起到了选择作用。
人为提供有利于目的菌株生长的条件 (包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止 其他微生物生长。
什么是选择培养基？
允许特定种类的微生物生长，同 时抑制或阻止其他种类微生物生长 的培养基。
3、本课题所使用培养基：
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4`7H2O 葡萄糖
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 （计数）
人教版 高中生物 选修一 专题二 课题1 微生物的实验室培养(一)
【学习目标】1、阅读“培养基”部分，回答：（1）什么是培养基，有哪些类型？（2）各种培养基共有的营养成分是哪些？（3）培养基除提供主要营养物质外，还应满足什么条件？举例说明。
2、阅读“无菌技术”部分，回答：（1）回答旁栏思考题（2）什么是消毒？什么是灭菌？二者的主要区别是什么？（3）消毒方法有哪些？适用于哪些对象？如何操作？（4）灭菌方法有哪些？列表比较（从适用物品、灭菌条件、灭菌时间方面展开）知识补充1、生长因子：微生物生长必不可少的微量有机物，如维生素、氨基酸、碱基等，一些天然物质如酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等，可为微生物提供生长因子。
2、芽孢：某些细胞在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。
一个细胞只形成一个芽孢，所以芽孢是一个休眠体而没有繁殖功能，芽孢具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压能力，芽孢的休眠能力惊人，可达几十年。
【达标检测】[必做]1、下列叙述正确的是（ ）A 、培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B 、培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C 、固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D 、微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2、关于微生物的营养，下列说法正确的是（ ）A 、同一种物质不可能既是碳源又是氮源B 、凡是碳源都提供能量C 、除水以外的无机物仅提供无机盐D 、无机氮源也能提供能量【使用时间】 第 2 周 第 1 课时 【编辑】申俊云 【审核】刘萍萍 【编号】2262021 【主题】 第二章 第一节 微生物的实验室培养（一） 2012.02.143、关于灭菌和消毒的理解不正确的是（）A、灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B、消毒和灭菌实质上是相同的C、接种环用灼烧法灭菌D、常用的消毒方法有加热法、紫外线法、化学药品法4、高温灭菌的原理是（）A、每种微生物繁殖和生长的最适温度是一定的B、微生物对于高温环境不适应C、高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸D、高温降低了环境中氧的浓度5、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒的方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤[选做]1、某小组同学为了调查湖水中细菌的情况而进行了实验。
人教版 高中生物 选修一 专题二 课题1 微生物的实验室培养(二)
【情景创设】【问题设计】1、阅读“实验操作”部分（1）写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤及如何操作？（2）描述倒平板具体操作步骤，并回答该处4个问题。
（3）列表比较，“平板划线法”和“稀释涂布平板法”。
（4）描述平板划线操作的步骤，并回答该处3个问题。
（5）描述系列稀释操作步骤。
（6）描述涂布平板操作步骤，注意并回答该处讨论问题。
（7）为什么要让接种后的培养基和未接种的培养基都放在恒温箱中培养？2、阅读“结果分析与评价”部分并回答该处问题。
3、阅读“课题延伸” 部分，回答：（1）回答对于频繁使用菌种如何保存？该方法的缺点是什么？（2）回答对于长期保存的菌种如何保存?具体如何操作？【达标检测】[必做]1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序是（ ）A 计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B 计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C 计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D 计算、称量、灭菌、溶化、倒平板2、牛肉膏蛋白胨培养基中常加入琼脂这一理想凝固剂。
下列关于琼脂作用的叙述中，不正确的是（ ）A 不被所培养的微生物分解利用，且对培养的微生物无毒害作用B 在微生物生长的温度范围内保持固体状态C 琼脂凝固点低，有利于微生物的生长D 琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强3、有关平板划线操作的叙述，不正确的是（ ）A 第一次灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B 每次划线前灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 【使用时间】 第 2 周 第 2 课时 【编辑】任丽伟 【审核】刘萍萍 【编号】2262022 【主题】 专题二 课题1 微生物的实验室培养（二） 2012.02.15C 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D 划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者4、下列操作与灭菌无关的是（）A 接种前用火焰灼烧接种环B 培养皿等放在高压蒸汽锅中进行处理C 培养基在50℃时搁置斜面D 接种在酒精灯的火焰旁完成5、在涂布平板操作错误的是（）A 将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直至烧红B 取少量菌液滴加在培养基表面C 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s再用D 涂布时可转运培养皿，使涂布均匀6、获得纯净物的关键是（）A 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B 接种纯种细菌C 适宜环境条件下培养D 防止外来杂菌的入侵7、为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是（）A.对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种，可以采用4℃低温保藏的方法[选做]某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。
高中生物选修一专题二微生物实验室培养知识点填空+答案
专题二微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、课题背景1．研究和应用微生物的前提是。
2．在实验室培养微生物，一方面需要，另一方面需要。
二、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质称为培养基。
2．种类：根据培养基的物理性质可将培养基可以分为、和半固体培养基。
3．琼脂：是一种从红藻中提取的，在℃以上熔化，在℃以下凝固，在常规培养条件下呈现。
琼脂是制备培养基时最常用的剂。
4．营养构成：各种培养基一般都含有水、、和无机盐，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。
例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加，培养霉菌时需将培养基的pH调至，培养细菌时需将pH调至或，培养厌氧微生物时则需要提供的条件。
5．牛肉膏，蛋白胨来源于，含有、和等营养。
三、无菌技术1．获得纯净培养物的关键是防止的入侵。
2．无菌技术围绕着展开，主要包括以下几个方面：(1)对实验操作的、操作者的衣着和进行清洁和。
(2)将用于微生物培养的器皿、和等进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_____ ______相接触。
3．无菌技术的目的：(1)防止，(2)避免。
4．消毒和灭菌四、大肠杆菌的纯化培养(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：1．计算：依据是培养基 的比例，计算配制某一体积（如100ml ）的培养基时，各种成分的用量。
2．称量：牛肉膏比较 ，可用玻棒挑取到 上，同其一块称量。
牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要 ，称后及时 。
3．溶化： 和称量纸＋少量的水（ ）取出_________→ 加_________和_________ →加 (注意：不断用玻璃棒搅拌，防止_____________而导致_____________)。
当_________完全熔化后→ 补加蒸馏水至100 mL 。
调节__________后再进行灭菌。
4．灭菌⎩⎪⎨⎪⎧培养基：_________灭菌培养皿：_____灭菌5．倒平板：待培养基冷却至_____左右时，在 附近倒平板。
高中生物选修1专题2微生物的培养与应用
4.细菌的计数
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 1.土壤取样 2.制备培养基
牛肉膏蛋白胨培养基—对照
选择培养基 -- 尿素为唯一氮源
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
稀释涂布平板接种 稀释液的倍数的范围: 真菌:102～104 细菌:104～106 放线菌:103～105
2.灭菌 以强烈的化学或物理方法消灭体内外所有 微生物,包括芽孢和孢子。
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形 的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、 高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可 以随风飘散。当环境适宜的时候，芽孢又可以萌发，形 成一个细菌.
常用消毒的方法：
每一个浓度做3个或3个以上平板,求平均值
重复实验--增强说服力和准确性
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作 3.接种、培养、观察
时间 细菌 1-2d 放线菌 5-7d 霉菌 3-4d
温度 30～37OC 25～28OC
25～28OC
课题2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 二.实验设计与操作
筛选方法: 用显微镜直接计数 间接计数—统计平板的菌落数
间接计数法（活菌计数法）: 原理: 在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上
所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成 的，即一个菌落代表原先的一个细菌
方法: 稀释涂布平板法
计算公式:（C÷V）x M
注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30— —300的平板上进行计数。
1.土壤取样 2.制备培养基 3.接种、培养、观察 4.细菌的计数
人教版高中生物选修1 专题二 《微生物的培养与应用》测试试题有答案
人教版高中生物选修1 专题二《微生物的培养与应用》测试题一、选择题1.关于微生物培养基的说法正确的是( )A. 牛肉膏不能提供碳源B. 培养硝化细菌可以不加有机碳C. 刚果红使纤维二糖染色D. 酵母菌酿酒时需持续供氧2.下列关于高中生物学实验的叙述，正确的是（）A．在制备果酒和果醋的实验过程中都要持续通入氧气B．分离土壤中不同种类的微生物需采用相同的稀释度C．选择过氧化氢酶作为探究温度对酶活性影响实验的理想材科D．将DNA粗提取后用二苯胺进行鉴定时需要进行水浴加热3.根据实验室守则，下列做法错误的是( )A. 用试管加热任何东西时，试管口不能朝向任何人B. 微生物实验必须严格进行无菌操作C. 若有细菌培养物泼洒出来，应迅速擦拭D. 用过的培养物都必须经过高压灭菌后再作处理4.在微生物培养的过程中，需要通过选择培养或鉴别培养的方法来筛选出目标菌种，下列与之相关的叙述中不正确．．．的是（）A. 纤维素分解菌能够分解刚果红染料，从而使菌落周围出现透明圈B. 尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红C. 在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株D. 在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”5.用高浓度的尿素作为溶剂处理从细胞中分离纯化的蛋白质，可使其失去天然构象变为松散肽链（称为“变性”），除去尿素后，蛋白质又可以自发地恢复原来时空间结构（称为“复性”），且蛋白质分子越小复性效果越好。
这说明（）A. 尿素与肽酶的作用结果相似B. 氨基酸数量会影响蛋白质的空间结构C. 蛋白质在尿素中的溶解度低D. 双缩脲试剂可以鉴定该反应是否完成6.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本流程是（）A. 计算—供量—灭菌—溶化—倒平板B. 计算—称量—溶化—灭菌—倒平板C. 称量—计算—溶化—灭菌—倒平板D. 计算—称量—溶化—倒平板—灭菌7.针对耐药菌日益增多的情况，利用噬菌体作为一种新的抗菌治疗手段的研究备受关注。
人教版高中生物选修1+专题二微生物的培养与应用+专项测试
人教版高中生物选修1 专题二微生物的培养与应用专项测试一．选择题（共25小题）1．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（）A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上2．下列关于细菌的叙述，错误的是（）A．硝化细菌能以NH3，作为氮源和能源物质B．某些细菌可以利用光能因定CO2合成有机物C．生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补弃的营养物质D．含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来签别牛奶中的大肠杆菌3．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理．下列叙述正确的是（）A．培养基分装到培养皿后进行灭菌B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D．培养过程中每隔一周观察一次4．下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是（）A．B． C．D．5．下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是（）A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．最后应将平板倒置，放入培养箱中培养6．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是（）A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源7．如表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（）A．此培养基是天然鉴别培养基B．能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因C．此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准8．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（）A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速沾取菌液后平板划线C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D．步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数9．用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌．二者的共同点有（）①可以用相同的培养基②都要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌．A．①②B．③④C．①③D．②④10．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（）A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒11．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（）A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数12．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．下列有关叙述，出现科学性错误的是（）A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C．将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则13．在农田土壤的表层自生固氮菌较多．用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（）①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒温箱中培养⑧28～30℃恒温箱中培养．A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．②④⑤⑧D．②④⑥⑦14．细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖．下列与此有关的说法正确的是（）A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B．氮源不可能作为细菌的能源物质C．琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质D．以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌15．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水16．某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌．下列操作错误的是（）A．利用平板划线法对细菌进行计数B．以石油为唯一碳源的培养基筛选C．采用稀释涂布平板法分离菌种D．称取和稀释土壤样品时应在火焰旁17．以下关于“分离土壤中的自生固氮菌”的实验操作正确的是（）①对取样的土壤样品要在超净台上进行稀释②分离自生固氮菌的培养基中要加入氮源③对培养基要加热到62℃，保持30min④本实验的接种方法可以采用点接法⑤接种以后对菌种的培养时间不能太长的原因是菌落会分泌含氮化合物，引起杂菌生长．A．①②③B．①③⑤C．①④⑤D．②③④18．幽门螺杆菌（能分解对热不稳定的尿素）是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素．为从带菌者胃黏膜样本中分离出该细菌，相关实验步骤和方法不合理的是（）A．配制培养基并灭菌后，需要加入无菌尿素B．应设置未接种的培养基，做为实验的对照C．统计样本中活菌数量时，可用划线法接种D．可利用酚红指示剂对培养的菌落进行鉴定19．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是（）A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果20．某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤（深5cm左右）为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表．与此有关的叙述不正确的是（）A．探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用B．该实验的自变量为土壤的是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理D．预期结论是1、3组的落叶不被分解，2、4组中的落叶被不同程度的分解21．为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）．下列关于培养基甲和乙是否能用于分离和鉴别纤维素分解菌说法正确的是（）注：“+”表示有，“﹣”表示无．A．培养基甲能，培养基乙不能B．培养基甲不能，培养基乙能C．培养基甲和乙都能D．培养基甲和乙都不能22．在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是（）A．用液体培养基可获得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C．用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质D．用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌23．下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是（）A．通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌B．从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培养可以省略C．该实验用到选择和鉴别培养基D．在用刚果红染色法中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，出现透明圈的菌落即所需菌种24．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（）A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌25．下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是（）A．通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌B．当纤维素被纤维素分解菌释放的纤维素酶分解后，培养基中会出现透明圈C．该实验用的培养基为选择培养基D．在用刚果红染色时只能先培养微生物再加入刚果红，不能在倒平板时加入二．解答题（共15小题）26．人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值，为了增加发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究，请回答下列问题：（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是（填序号）①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水（2）在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图1），图中降解圈大小与纤维素酶的有关，图中降解纤维素能力最强的菌株是（填图中序号）（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图2，推测菌株更适合用于人工瘤胃发酵，理由是27．多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一．如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤．请回答：（1）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能．（2）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是．采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是（3）接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环次（4）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K．为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C②向A、B、C三组锥形瓶中加入的培养液．③向A、B、C三组培养液中分别加入．④28℃恒温培养3天后，测定．28．回答下列关于微生物和酶的问题．高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．（1）①过程称为，②过程是为了．（2）Ⅰ号培养基称为﹣﹣（按功能分）；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分．A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．碳酸氢钠（3）一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了．在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定．图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比．将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图中的曲线②．（4）根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是．A．40℃一50℃B．50℃一60℃C．60℃一70℃D．70℃﹣80℃（5）据图判断下列叙述错误的是．A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降．29．【生物﹣﹣选修1生物技术实践专题】从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．（1）接种前要对培养基进行处理．在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在条件下进行．（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．如培养纤维素分解菌的菌样应从环境中采集．（3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的．（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生来筛选纤维素分解菌．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是．30．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验．实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数．请回答与此实验相关的问题．（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和．除此之外，培养基还必须含有的基本成分是和．（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是．（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验．（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有种细菌．一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越．（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐细菌，这种培养基（按功能分）被称为．31．多环芳烃是具有致癌、致畸、致突变作用的全球性污染物，是煤、石油、有机高分子化合物等有机物不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物．某研究小组从一污水处理厂的污泥中筛选到一株可降解萘、蒽的细菌，命名为BDP01．（1）该研究小组所用的培养基应以萘或蒽作为唯一碳源，其目的是，从功能看该培养基类型属于．（2）接种时所用的接种环通过灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从开始划线，该分离纯化方法称法．（3）下面的图1和图2为该研究小组进行的其中两个实验的实验结果图，菌株的生长量以分光光度计于600nm处测定的光吸收值（OD600）表示．（图1不同培养温度对BDP01在萘、蒽培养基中生长量的影响）（图2不同pH对BDP01在萘、蒽培养基中生长量的影响）①测定菌株生长量时用液体培养基，并需振荡培养．这样一方面可使菌株与培养液充分接触，提高的利用率；另一方面能．②由图1可见，菌株生长量较高的温度范围是．图2结果表明，BDP01对pH的适应范围较小，在酸性条件下的生长量要于碱性条件下的．③结合图2推测，进行图1相关实验时培养基的pH最可能为（用图2中相关数值表示）．32．空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降．某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况．实验步骤如下：①配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；②制作无菌平板；③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数．回答下列问题：（1）该培养基中微生物所需的氮来源于．若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是．（2）步骤③中，实验组的操作是．（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了现象．若将30（即36﹣6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法（填“正确”或“不正确”）．33．回答下列关于微生物的问题．尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们尝试从土壤中筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．他们设计的实验步骤如图所示，如表是培养基成分．（1）此培养基按物理状态属于培养基．（2）培养基中加入尿素的作用是（多选）A．筛选目的菌B．作为氮源C．作为碳源D．杀死杂菌（3）图中稀释步骤的目的是．（4）此实验操作过程中，接种前应对培养基进行灭菌，灭菌温度为；接种时应无菌操作，这两个步骤的目的是为了使培养基接种培养后，培养基中（多选）A．无杂菌B．只有目的菌C．无菌D．有土壤中的固氮菌．34．一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按图甲程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度．各取0.1mL已稀释10 3倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为．（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是．（3）接种技术的核心是．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是或有氧条件抑制了这些细菌的生长．（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是，有透明带菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌．实验结果如图乙显示的A～E五种菌株中，是最理想菌株．（5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：突变株A不能在一般培养基上生长的原因是．突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是．35．土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据图回答相关问题：（1）能分解尿素的细菌代谢类型为，应从富含有机质的土壤表层取土样．（2）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用的培养基进行分离，并加入指示剂进行鉴别．（3）若取土样5g，应加入ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液．取样稀释前，一定要以减少误差．将103﹣107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用将菌液铺平．这种接种方法称为．（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有（现象）的菌落数，结果如下表，其中倍的稀释比较合适．36．尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：（1）分解尿素的细菌都能合成 ，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？ ．写出细菌分解尿素的方程式 ．（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？ （能/不能），原因是 ．（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择 培养基进行培养．培养一段时间后，使用 对微生物细胞进行计数．计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性A ．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数B ．如果方格内微生物细胞数量多于300 个，培养液先稀释后再计数C ．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞D ．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 技术．37．[生物﹣﹣选修l 生物技术实践]下列是对土壤微生物开展探究活动的三个案例，请在相应的空白处作答．（1）案例l ：探究落叶在土壤微生物的作用下是否发生腐烂（分解）．设计思路：对实验组土壤应该进行 处理，尽可能排除 的作用．（2）案例Ⅱ：探究土壤微生物对淀粉的分解作用．实验步骤：①将取自农田的土壤制成土壤浸出液，放在烧杯中静置一段时间．②另取两只烧杯，编号为A、B，放入等量的淀粉糊．在A烧杯中加入30mL土壤浸出液，B烧杯中加入．③在室温条件下放置7天后，从A烧杯中取20mL溶液，分别加入A1和A2两支试管各10mL；从B烧杯中取20mL溶液，分别加入B1和B2两支试管各10mL．④在A1和B1中加入碘液；在A2和B2中加入，并进行处理．⑤观察各试管的，记录实验结果．（3）案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纤维素的细菌的实验过程中，应将土壤浸出液接种在以为惟一碳源的培养基上，并用（试剂）加以鉴别．38．有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．分析回答问题：（1）培养基中加入的化合物A是，为微生物的生长提供，这种培养基属于培养基．（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入．（3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度．若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是，操作时采用灭菌的方法；还可用方法操作．（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是．39．纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题，请回答：（1）自然界中纤维素含量最高的天然产物是．某些微生物能分解纤维素，因为他们能产生纤维素酶，纤维素酶至少包括三种组分，即．（2）实验室中筛选微生物的原理是．筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物，在以纤维素为唯一碳源的（填“固体”或“液体”）培养基上进行选择培养，选择培养的目的是．（3）用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选，刚果红可以与纤维素形。
人教版高中生物选修一专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学案含解析
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C ÷V )×M 。
C ：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M ：代表稀释倍数。
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取其平均值。
.1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)同时抑制或阻止其他微生物的生长。
2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
3．测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。
4．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。
5．鉴定分解尿素细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，依据是否变红进行判断。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3．设置对照(1)对照实验：指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计1．土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养课件选修1
生长 因子
生长必不 可少的微 量有机物
酶和核酸的组成成 维生素、氨基酸、碱
分
基等
营养 要素
含义
在生物体内含量 水 很高，在低等生
物体内含量更高
作用
主要来源
不仅是优良的溶剂， 而且可维持生物大分 子结构的稳定
无机 盐
为微生物提供除 碳、氮元素以外 的各种重要元 素，包括某些大 量元素
细胞内的组成成分， 生理调节物质；
A．制作固体培养基必须加入琼脂 B．加入青霉素可得到放线菌
导学号 06350102
C．培养自生固氮菌不需氮源
D．发酵工程一般用半固体培养基
[答案] C
[解析] 固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的，但不
是唯一的，青霉素可抑制细菌和放线菌的生长，发酵工程一般
用液体培养基。自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培
二、无菌技术
1．获得纯净培养物的关键是防止__杂__菌____的入侵。 2．消毒和灭菌 (1)消毒，常用方法有__煮__沸____消毒法、___巴__氏___消毒法和 __化__学__药__剂___消毒法。 (2) 灭 菌 ， 常 用 方 法 ： ___干__热___ 灭 菌 、 ___灼__烧___ 灭 菌 、 高__压__蒸__汽__灭菌。 三、纯化大肠杆菌的无菌操作 本实验使用__固__体____培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可 分成_制__备__培__养__基___和___纯__化__大__肠__杆__菌____两个阶段进行。
某些化能自养菌的能 源，酶的激活剂
(4)配制原则 ①目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等)。如培养 基可由简单的无机物组成，生产用的培养基内可加入化学成分 不明确的天然物质，而分类鉴定用的培养基内必须加入已知化 学成分的物质。 ②营养要协调。注意各种营养物质的浓度和比例。 ③pH要适宜。各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细 菌、放线菌和真菌的最适pH分别为：～、～和～。
高中生物高考一轮总复习讲义 选修1 专题2 微生物的培养与应用
(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂， 若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌。( )
三、分解纤维素的微生物的分离[填空] 1．纤维素酶 (1)组成：一种________酶，它至少包括三种组分，即 ________。 C1酶 葡萄糖 (2)作用：纤维素――→________ ――→ 葡萄糖 CX酶 苷酶 2．筛选方法 (1)方法：刚果红染色法，即通过是否产生________来 筛选纤维素分解菌。 (2)培养基：以________为唯一碳源的选择培养基。
高中生物高考复习讲义
选修部分
选修1
生物技术实践
专题2 微生物的培养与应用
忆教材 溯本源
研考点 破疑难
明题型 析典例
练真题 悟考情
课时作业
研
基础导学
一、微生物的分离与培养 1．培养基[判断正误] (1)据物理状态的不同，培养基只有液体培养基和固体 培养基两种类型。( )
(2)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种 成分。( )
方法 平板划线法 (1)接种环的灼烧： 注 意 事 项 ①第一次划线前：杀死接种环上的 微生物，避免污染培养物 ②每次划线前：杀死残留菌种，保 证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后：杀死残留菌种，避 免污染环境和感染操作者 稀释涂布平板法 (1)稀释操作时：每支 试管及其中的9 mL
水、移液管等均需灭 菌；操作时，试管口和 移液管应在离火焰1～2 cm处
3．实验流程 土壤取样：富含________的环境 ↓ 选择培养：用________培养，以增加纤维素分解菌的 数量 ↓ 梯度稀释 ↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基 上 ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生________的菌落周围出 现透明圈
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专题二
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要点一 培养基的配制原则和营养要素分析
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1.配制原则 (1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基 可由简单的无机物组成，生产用培养基内可加入化学成分不明
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学习目标
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目标解读 1.了解并掌握培养基的配制、分装方 法，简述有关培养基的基础知识。 2．说出灭菌和消毒的概念，简述常用 的消毒与灭菌方法。 3．掌握实验室灭菌方法及无菌技术。 (重、难点)
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解析：固氮微生物培养基可无氮源，有的无机物如
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NH4NO3可作氮源，H1N1流感病毒必须寄生在细胞内，不能用 培养基培养。
答案：D
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要点二 无菌技术
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凡能提 碳源 供所需 碳元素 的物质
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营养要素
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含义
作用 合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物 不仅是优良的 溶剂，而且可 维持生物大分 子结构的稳定
主要来源 无机化合物：N2、 NH3、铵盐、硝酸盐； 有机化合物：尿素、牛 肉膏、蛋白胨等
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2．对于需要长期保存的菌种，可以采用 甘油管藏 的方
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法，将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀，放于－ 20℃的冷冻箱内保存。
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源。自养微生物最常用的氮源是无机氮源中的铵盐和硝酸盐。
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关于微生物的营养，说法正确的是( A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量
)
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C．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量
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2．营养要素
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微生物的化学组成与其他生物大体相同，也是由C、H、 O、N、P、S等元素组成，其中C、H、O、N占细胞干重的 90%以上，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和
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下面对发酵过程中灭菌的理解不正确的是( A．防止杂菌污染 B．消灭杂菌
有机化合物。培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等。
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营养要素
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含义
作用 构成生物体细胞 的物质和一些代 谢产物，有些是 异养生物的能源 物质
主要来源 无机化合物： CO2、 NaHCO3； 有机化合物：糖 类、脂肪酸、花 生粉饼、石油等
问题思考1：为什么各种培养基的具体配方不同，但一般都
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有水、无机盐、碳源和氮源？ 提示：微生物的化学组成与其他生物大体相同，也是主要 由C、H、O、N、P、S等大量元素和Fe、Mn、Cu、Zn、B、
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Mo、Cl等微量元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种 有机物和无机物，可归纳为碳源、氮源、水和无机盐。
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培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛 奶所采用的灭菌、消毒方法依次是( ①化学消毒 ②灼烧灭菌 )
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③干热灭菌 ④紫外线消毒
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⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ C．⑥②③④①⑤ B．①②③④⑤⑥ D．③④②①⑥⑤
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用巴氏消毒法。
【答案】 A
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(1)接种环或接种针等金属用具一般用灼烧灭菌；培养皿等 玻璃器皿用干热灭菌；培养基用高压蒸汽灭菌。(2)操作者双手 一般用酒精擦拭，即化学消毒。牛奶用巴氏消毒法。
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1.三种常用灭菌方法的比较
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2.常用消毒方法的比较
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专题二
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问题思考2：为什么平板划线法和稀释涂布平板法都可以纯
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化大肠杆菌？ 提示：用平板划线法和稀释涂布平板法接种菌种时，最终 能使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表
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面形成单个的菌落，以达到纯化菌种的目的。
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专题二
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【思路启迪】
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审题关键点：微生物的营养要素。
解题思路：
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【规范解答】
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对异养微生物来说，含C、H、O、N的化
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2．纯化大肠杆菌
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(1)平板划线法：通过接种环在琼脂 固体培养基表面连续划线 的操作，将聚集的菌种逐步 稀释分散 到培养基的表面。 (2)稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的 梯度稀释 ，然后
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将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培 养。
合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不 能提供能量。CO2和N2是无机物，也是微生物的碳源和氮源。 硝化细菌所利用的氮源是无机氮源，同时氨也为硝化细菌提供
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用于化能合成作用的能源。
【答案】
D
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消毒与灭菌的最根本区别：芽孢和孢子是否存活。灭菌杀 死芽孢和孢子，因而灭菌更彻底。消毒未杀死芽孢和孢子，当 环境条件适宜时，每个芽孢的休眠体可萌发出一个个体。孢子
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是微生物的一种生殖细胞，一般是单细胞，个体小，易传播， 条件适宜时产生新的营养体。
1.了解有关培养基 的基础知识。 2．进行无菌技术
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的操作。 3．进行微生物的 培养。
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专题二
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知识梳理
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一、培养基 1．概念：人们按照微生物对营养物质 的不同需求，配制
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出供其 生长繁殖 的营养物质。
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三、纯化大肠杆菌的无菌操作
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本实验使用牛肉膏蛋白胨培养基进行大肠杆菌的纯化培 养，可分成 制备培养基和纯化大肠杆菌 两个阶段进行。
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1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤：计算、称
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量、溶化、 灭菌 、倒平板。
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要 点 导 学
要元素，包括 养菌的能源，酶 某些大量元素 的激活剂
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专题二
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(1)自养微生物和异养微生物类型的划分，主要依据能否以 CO2作为生长的主要或唯一碳源，而不是决定于氮源。(2)对异 养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源又是氮
凡含碳有机物均可作为微生物的能源。
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