关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识

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循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展

循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展循环肿瘤细胞(CTC)检测是指在患者体内检测到的未形成全身转移的单个肿瘤细胞,是肿瘤学在非手术健康筛查中的一种新方法。

目前该技术已被广泛应用于乳腺癌患者的预后评估和治疗监测中。

本文将详细阐述循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展。

一、循环肿瘤细胞检测的方法ICC法是一种通过与CTC表面检测蛋白发生特异反应的免疫染色技术,如使用细胞表面经典肿瘤标志物如上皮细胞抗原(EpCAM),进行免疫染色,来捕获和鉴别CTC。

PCR法是基于甲基化表现芯片组合控制的微流控芯片技术,通过肿瘤细胞分离、分子生物学处理并通过聚合酶链式反应的方法增加敏感性。

1、预后评估一项元分析显示,患者的循环肿瘤细胞阳性率与乳腺癌复发率和生存率密切相关。

另外也发现,治疗初期检测到的循环肿瘤细胞数量多寡与预后有直接相关性。

2、治疗监测一项2019年发表的研究显示,循环肿瘤细胞的检测在治疗监测中有较高的敏感性,该研究以某地区208例乳腺癌患者为研究对象,对分别接受化疗、内分泌治疗和靶向治疗的患者进行了细胞学检测,并分析了循环肿瘤细胞阳性率和客观疗效关系,结果显示在不同治疗阶段循环肿瘤细胞阳性率和治疗效果均存着显著相关性。

3、转移病灶检测循环肿瘤细胞检测也可以作为乳腺癌全身转移病灶的检测工具。

通过选择性的优良表型,如细胞表面上皮细胞抗原,CTC的基本性质和生物学特性订制活动,对于早期乳腺癌患者来说,循环肿瘤细胞检测早期的转移病灶是非常有意义的。

1、特异性问题上皮细胞标记EpCAM在非上皮性肿瘤中表达可能过低,从而影响实验结果。

同时,各种CTC技术所筛选出的CTC互不一致,有些没有想象中的感知强度,也有些CTC另一种或几种检测技术检测不到。

2、药物干扰部分细胞死亡或化疗药物等因素可能导致CTC数量欠缺,从而影响研究的准确性。

因而,对药物本身是否会对CTC的作用、药物的使用时间等因素都需要进行深入的研究。

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测技术的研发及临床应用开发美国肿瘤协会于2006 年发表的年度报告指出,目前全世界范围内每3 人中就有1 人在其一生中会患有某种肿瘤,而且肿瘤发病率在发展中国家随着污染程度的增加,患病几率还会高于1/3 的比例。

现今全世界用于肿瘤治疗与防治的费用每年以16.5% 的比例递增。

仅用于乳腺癌,结直肠癌及前列腺癌(还不包括发病率最高的肺癌)的投资,目前世界范围内已达每年92 亿美元。

目前全世界用于肿瘤诊断的方法可归为三大类:病理学(活检切片);影像学(超声,X光,CT, PET 等)和血清学(血清肿瘤相关蛋白,如CA-125, CA-199, CEA 等),但所有这些方法都有不可避免的缺点,例如灵敏性及特异性差,过于依赖医生判断的主观性等。

因此目前临床急需一种能够为医生及病人提供准确,快速的肿瘤检测手段。

经过长时间的大量研究,美国FDA 认证的人外周血循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell, CTC)检测目前已被公认为最好及最可观的检测手段之一。

目前已有越来越多的国内外医生开始应用此技术作为肿瘤检查的重要辅助手段。

不仅于此,CTC 检测也被公认为是目前国外新近流行的肿瘤治疗方法-即阻断肿瘤细胞入血转移的唯一有效检测指标。

除了上述CTC可作为肿瘤检测手段外,CTC还可成功应用于以下一系列其它方面的用途:(1)个体化治疗的体外肿瘤药物筛选;(2)体内化疗药物药效的快速评估: 相对于每12周一查的CT 诊断,CTC在第1-2周即可显示药效结果,这一点对临床医生和病人尤为重要;(3) 根据CTC数目,判断病人愈后状况及存活时间;(4)肿瘤病人复发的监测与及时诊断;及(5)正常人群体检普查以利于尽可能的肿瘤早期诊断。

除了应用于临床外,CTC 亦可应用于众多药厂和科研机构的基础研究,包括寻找新的肿瘤标识物以及开发新的抗肿瘤药物等。

目前美国FDA已于2004年认证了美国上市公司Immunicon/Veridex的CTC检测技术及其临床应用。

CTC检测技术平台总结

CTC检测技术平台总结

CTC检测技术平台总结CTC(循环肿瘤细胞)检测技术平台是一种能够检测患者体内循环肿瘤细胞的技术。

循环肿瘤细胞是指癌症细胞在血液循环中的一种形态,能够通过血液传播到身体的其他部位,导致肿瘤的转移和复发。

CTC检测技术平台的发展为肿瘤诊断和治疗提供了重要的工具,下面将对CTC检测技术平台进行详细的总结。

CTC检测技术平台基本原理是通过从患者的血液中捕获和分离循环肿瘤细胞,然后对这些细胞进行分析和鉴定。

目前,常见的CTC检测技术平台包括免疫分离、生物物理方法、细胞捕获芯片和基因检测等。

这些技术平台各有优缺点,可以根据具体的研究目的和需求选择合适的方法。

免疫分离是一种常用的CTC检测技术平台,基于肿瘤细胞表面特异性抗原的特点,采用免疫磁珠或免疫细胞分选仪等方法,将循环肿瘤细胞从血液中分离出来。

这种方法具有高灵敏度和高纯度,可以快速准确地分离出循环肿瘤细胞,但需要针对不同肿瘤类型选择不同的抗原进行分离,因此有一定的局限性。

生物物理方法是另一种CTC检测技术平台,包括微通道芯片、微流控和光学技术等。

微通道芯片是一种通过微流控芯片捕获和分离细胞的方法,可以实现高通量和高效率的细胞分离。

微流控是一种利用液体流动特性对细胞进行分离的方法,具有高灵敏度和高特异性。

光学技术是基于肿瘤细胞与正常细胞在光学特性上的差异,通过光谱分析或显微成像等方法对循环肿瘤细胞进行检测和鉴定。

细胞捕获芯片是一种新兴的CTC检测技术平台,可以通过表面修饰和微结构设计实现对循环肿瘤细胞的高效捕获。

这种方法可以同时捕获多种细胞类型,并且可以在不同时间点对细胞进行多次分析,具有高效率和高可靠性。

基因检测是一种通过检测循环肿瘤细胞中的特定基因变异或基因表达水平来进行肿瘤诊断和治疗的方法。

这种方法可以通过PCR、NGS等技术对循环肿瘤细胞的基因组、转录组和表观基因组进行全面分析,为个性化治疗提供重要的参考。

总体来说,CTC检测技术平台是一种能够检测患者体内循环肿瘤细胞的重要工具。

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞C T C检测及临床应用Prepared on 22 November 2020循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要:循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散,进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞在血液中含量稀少,一般先将循环肿瘤细胞富集,然后再进行检测,现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。

本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展,以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。

关键词:循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract:Circulatingtumorcellscomefromtheprimarytumorproliferation,andprolife ration,癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells,CTCs)从原发肿瘤分离,通过循环系统扩散,进入血液或者淋巴系统,在远处形成新的肿瘤,最终导致大多数的癌症病人死亡。

1869年,Ashworth在一例癌症死亡患者的外周血中发现了类似肿瘤的细胞,并首次提出了CTCs的概念。

从此,越来越多的研究表明,CTCs的出现与癌症密切相关。

通过上皮-间质转化(EMT),实体瘤的上皮细胞进行细胞的变化,使他们通过增加流动性和侵袭性脱离组织,进入到血液中,附着,、发展成远端转移。

由于CTCs能够代表原发肿瘤的表型和遗传组成,并能够作为任何转移性肿瘤的”液体活检”,CTCs的富集分离和特征研究,十分具有吸引力。

CTCs的富集和计数技术已经建立,其中CTCs的计数可以成为预测指标,当其大于已知的阈值时,就预示着病人就患有转移性乳腺癌,、前列腺癌,、结直肠癌等。

基于临床试验,美国FDA批准了一种临床检测CTCs的CellSearch技术,用于上述癌症的CTCs的富集和计数。

CellSearch技术成功的证明了CTCs确实表征了疾病的活跃,CTCs数量的增加预示着病情的恶化,可以通过CTCs了解原发性和转移性肿瘤,以CTCs为基础的分析,可以帮助人们实时诊断和预测,对病情做出决定,并取样检测耐药性。

循环肿瘤细胞(CTC)检测

循环肿瘤细胞(CTC)检测

循环肿瘤细胞(CTC)检测一、什么是循环肿瘤细胞(CTC)?循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称,因自发或诊疗操作从实体瘤病灶(原发灶、转移灶)脱落,进入外周血循环的肿瘤细胞。

CTC非常稀少,每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。

大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬,少数能够逃逸并发展成为转移灶,增加恶性肿瘤患者的死亡风险。

二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示,2011年我国新增癌症病例约337万例,比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。

然而,令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶,未来可能还会不断增加。

美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道:在今年将死于癌症的一百万人里,绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。

因此,我们需要明确一点:癌症是一种慢性病,它只是被突然发现,并非是突然发生的。

我们需要尽可能早的发现它,从而提高治愈率。

伴随肿瘤的发生过程,肿瘤细胞的大小也随之增大。

传统方法诊断出癌症的时候,大部分已经是晚期。

晚期癌症的治愈率极低,其五年生存率也很低。

在肿瘤的发生过程中,早期到中期之间是最佳治疗期,因此,如果在早期就可以发现肿瘤的存在,必然可以提高治愈率。

临床癌症研究(Clinical Cancer Research)杂志上发表的荟萃分析(Meta-analysis)证实CTC在乳腺癌预测中的价值,结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。

如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合,那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。

肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。

如果风险等级高,除了改变生活方式外,还可以定期做循环肿瘤细胞检测,即CTC检测,而且检查频率可以适当增加,每2-3个月检查一次,从而达到实时监控的目的。

信和医疗教您如何进行-循环肿瘤细胞(CTC)检测

信和医疗教您如何进行-循环肿瘤细胞(CTC)检测

信和医疗-循环肿瘤细胞(CTC)检测
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是指由肿瘤原发灶或转移灶脱落进入血液循环中的肿瘤细胞。

在影像学尚无法检测原发肿瘤灶的时候,就有可能从血液中检测到CTC,从而提示我们肿瘤的发生;另外一方面,肿瘤的转移与CTC关系密切,肿瘤的转移灶就是由CTC细胞转化生长而来的。

相关理论研究证明,肿瘤发展的任何一个阶段肿瘤细胞都存在脱落入血的风险,针对在尚未形成影像学可见的原发灶而存在的瘤细胞早期入血的情况,CTC从理论上为肿瘤的早期预防和治疗提供了一定的参考价值和应用前景。

CTC检测技术作为一种获取并鉴别肿瘤细胞的方法,不仅适用于血液中肿瘤细胞的检测,同样适用于其他体液中肿瘤细胞的检测,如胸水、脑脊液等,临床工作中,可结合实际情况进行使用。

检测项目:血液疑似肿瘤风险细胞计数。

结果判定
1、易感人群定向体检筛查
CTC检测阳性(计数≥2),请建议患者专科就诊。

2、结合肿瘤标记物、影像学同时筛查
CTC检测阳性(计数≥2)、肿瘤标记物异常升高、影像学发现异常占位,满足至少一项,建议患者专科就诊。

3、临床无明显指向性表征
CTC检测阳性(计数≥2),临床无明显肿瘤发生倾向无症状者,建议增加定期体检频率,随时监测身体状况,并注意保持合理健康饮食及生活习惯。

CTC循环肿瘤细胞

CTC循环肿瘤细胞
上皮来源的CTCs的判定:DAPI(细胞核)阳性、角蛋白CKs阳性、CD45阴性
整理课件
阳性富集- CTCs-Chip
• 芯片的表层排布了78 000个包被抗 EpCAM抗体的微位点
• 血液样本流经芯片时,抗体与肿瘤细胞 结合粘附在芯片上
• 制造相对困难,成本昂贵, • 显微位点周围的血流通畅性限制了与抗
体覆盖位点接触的CTC数量
整理课件
阳性富集- Adna Test 检测系统
➢ 原理: • 联合上皮细胞标志及肿瘤特异性标志通过免疫磁珠分选特异性肿瘤的CTCs • 联合抗MUC1和EpCAM抗体检测乳腺癌和直肠癌 • 通过RT-PCR扩增肿瘤标志物来鉴定CTCs • 特点: • 较单一使用EpCAM抗体更特异 • 不适用于EpCAM和CK阴性或弱化的CTCs • PCR鉴定敏感性高,但易造成假阳性
特异性好、 灵敏度高、 HB芯片可富集到CTM
不能分型、
漏检转移侵袭能力较强的间质 型CTCs
可检测出EpCAM、CK阴性的CTC、 未对CTC进行任何标记
不能分型、 鉴定不稳定、 鉴定时易发生CTCs丢失
CTC丢失少、适用于CK阴性肿瘤、适 用于形态学、免疫学和基因特异性分

不适合小神经内分泌肿瘤细胞、 特异性低、残留大的白细胞
化疗药物的疗效评判
根据化疗前后CTC数目变 化,确定药物是否有效
健康状态 癌前病变 恶性肿瘤 肿瘤转移
CTC 监测分析
整理课件
CTC检测
耐药性检测
动态跟踪CTC数目,判断是否 产生耐药性
肿瘤复发检测
CTC数目增多是肿瘤复发的前 兆
肿瘤新药物的开发
配合研制新的抗肿瘤药物
循环肿瘤细胞的检测

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要:循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散,进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞在血液中含量稀少,一般先将循环肿瘤细胞富集,然后再进行检测,现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。

本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展,以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。

关键词:循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract: Circulating tumor cells come from the primary tumor proliferation,andproliferation, and then enter into the blood or lymphatic system. Circulating tumor cells are rare in the blood. Generally, circulating tumor cells should be enriched first, and then detected. A variety of cell enrichment and detection technologies have been developed. This paper reviews the research progress in CTCs enrichment and detection techniques, as well as analysis of CTCs in clinical and research.Key words: Circulating tumor cells enrichmentcells detectionenrichment detection clinical癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)从原发肿瘤分离,通过循环系统扩散,进入血液或者淋巴系统,在远处形成新的肿瘤,最终导致大多数的癌症病人死亡[1]。

CTC检测以及单细胞手段衡量早期肿瘤定量指标

CTC检测以及单细胞手段衡量早期肿瘤定量指标

CTC检测以及单细胞手段衡量早期肿瘤定量指标肿瘤早期的检测是提高治疗成功率和预后的重要手段。

传统的肿瘤检测方法主要依靠组织活检和血清肿瘤标志物的检测,然而,这些方法受制于侵入性、局部性和缺乏敏感性等限制。

近年来,随着科技的进步,CTC检测以及单细胞手段成为了研究早期肿瘤定量指标的热点。

CTC,即循环肿瘤细胞,是从肿瘤组织中脱落,并进入循环系统的肿瘤细胞。

CTC检测是通过分离和检测血液中的循环肿瘤细胞,从而实现非侵入性的早期肿瘤检测。

与传统的肿瘤标志物相比,CTC具有以下优势:首先,CTC存在于循环血液中,因此可以从全身范围内对肿瘤进行检测,避免了局部检测的限制;其次,CTC作为肿瘤细胞的代表,可以提供更准确、直接的信息,以及肿瘤的分子特征和药物敏感性的检测;最后,CTC的计数和监测可以用于肿瘤早期筛查、预后评估和治疗监测等方面。

当前,常用的CTC检测方法包括免疫磁珠分选、微流控芯片和图像学等技术。

免疫磁珠分选是通过特异性抗体与CTC表面标记物结合,并利用磁珠的磁力分离技术来实现CTC的富集和分离。

微流控芯片利用微米级通道和复杂的流体控制系统实现CTC的捕获和分离,具有高通量和高灵敏度的特点。

图像学技术则通过对CTC的显微镜照片进行分析和计数,识别CTC的形态特征和表型特征。

这些方法在CTC检测方面都取得了一定的进展,但仍面临一些挑战,如检测效率和准确性的提高、标准化流程的建立等。

除了CTC检测,单细胞手段也成为早期肿瘤定量指标的重要手段。

单细胞手段是一种能够对单个细胞进行基因组、转录组和蛋白质组等表达特征的测量和分析的技术。

通过单细胞手段,可以从肿瘤组织中分离出个体细胞,并对其基因或蛋白质表达进行分析,从而揭示不同个体细胞之间的异质性和细胞间的功能差异。

在早期肿瘤定量指标的研究中,单细胞手段可以提供更为细致的信息,如突变的检测和个体细胞的表型特征等。

此外,单细胞手段还可以帮助研究人员了解肿瘤的进化过程、转移行为以及治疗耐药的机制等。

最新循环肿瘤细胞的生物学及临床意义

最新循环肿瘤细胞的生物学及临床意义

最新循环肿瘤细胞的生物学及临床意义循环肿瘤细胞(CTCs)是从原发肿瘤脱落并渗入血液并在血液中循环的肿瘤细胞。

了解CTC的转移级联对于识别抗肿瘤转移的靶点具有巨大的潜力。

在巨大的血细胞中检测这些非常罕见的CTC是具有挑战性的。

然而, 新兴的CTCs检测技术深刻地促进了CTCs生物学研究的深入,促进了CT Cs的临床应用。

转移是癌症最致命的特征。

尽管在过去的几个世纪里癌症诊断和治疗取得了重大进展,但转移仍然是改善癌症患者临床结果的主要障碍。

然而, 在过去的200年里,我们见证了在揭示转移发展的基本概念和创造促进癌症转移研究的新技术方面取得的重大进展。

各种CTCs检测技术应运而生,但这些技术的灵敏度和特异性还有待进一步提高。

基于上皮标志物的CTC检测技术,如CellSearch系统,开创了CTC分析和临床应用的新纪元,但其不足之处正迅速为研究者所认识和重视。

EMT是转移性癌细胞的重要特征,表明基于上皮标志物的CTC 检测技术捕获效率不足。

缺乏对CTCs的全面表征。

CTC的基因组DNA、RNA和蛋白质含量有限,是研究其基因组、转录组、表观基因组和蛋白质组特性的瓶颈。

尽管如此,CTC的新兴基因组和转录组研究最近得益于快速发展的单细胞测序技术,而CTC的蛋白质组研究由于在单细胞水平上探索蛋白质组的技术非常有限,仍然难以捉摸。

就实体肿瘤微环境而言,CTCs周围的血液微环境对肿瘤的生存和侵袭能力也有重要影响。

然而,对于CTC存活背后的潜在机制的了解仍然有限,因为这是一个复杂的过程,不仅涉及剪切力和流体力学,还涉及可溶性因子和肿瘤相关的细胞外小泡。

虽然CTC已显示出初步的临床应用前景,但在CTC分析能够广泛应用于临床之前,仍有许多挑战需要克服。

目前,CTC的临床应用主要依赖于CTC细胞计数和分子表型的分析。

基于CTCs的基因组、转录组和蛋白质组进行更全面的高通量测序将进一步有利于临床应用,但也增加了数据分析的复杂性和难度。

ctc检查方法学

ctc检查方法学

ctc检查方法学
CTC(循环肿瘤细胞)检查是一种新兴的无创性肿瘤检测方法,它通过检测血液中的循环肿瘤细胞来评估肿瘤的进展和治疗效果。

以下是CTC检查方法学的简要介绍:
1. 采集血液样本:患者需要提供一定量的外周静脉血样本,通常为5-10毫升。

2. 分离循环肿瘤细胞:将血液样本送至实验室进行处理,利用特殊的技术将血液中的循环肿瘤细胞分离出来。

3. 鉴定循环肿瘤细胞:对分离出的循环肿瘤细胞进行鉴定,确认其是否为癌细胞以及其来源。

4. 分析循环肿瘤细胞的数量和特征:通过显微镜观察和计数循环肿瘤细胞的数量,同时分析其形态、大小、染色质等特征,以评估肿瘤的进展和治疗效果。

5. 结果解读和诊断:根据循环肿瘤细胞的数量和特征,结合患者的临床资料和其他检查结果,医生可以对患者的病情进行评估和诊断,并制定相应的治疗方案。

CTC检查是一种快速、准确、无创的肿瘤检测方法,可以为患者提供重要的诊断信息和治疗指导。

循环肿瘤细胞的介绍(上)

循环肿瘤细胞的介绍(上)

循环肿瘤细胞的介绍(上)众所周知,癌症是一类一直处于不断变化状态的疾病。

因此能够实时的观察监测到这种变化意义就尤为重大。

传统的病理检测方法虽然被认为是“金标准”但是这一检测方法需要手术后才能得到病理组织,进行检测。

即使采用穿刺活检办法也不能完整的跟踪整个病程,而且会给病人带来极大的痛苦。

尤其当肿瘤的原位灶很小的时候往往多次穿刺都不能准确地收集到肿瘤组织。

介于以上原因,大家更多的把目光集中在了液态活检上。

这一概念早在上个世纪七十年代就有人提出(Sorrells,1974)近来在癌症的研究上越来越突出其作用。

液态活检顾名思义是指以包括血液、尿液、淋巴液、脑脊液腹水等体液在内的样本作为检测对象的一种检测手段。

目前主要包括游离DNA(Cell free DNA),外泌体(Exosome)和循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells)三大类研究对象。

Cell free DNA是血液中肿瘤细胞游离出来的DNA片段,数量稀少不易检测,虽然有相关报道显示Cell free DNA 可以用于癌症的诊断,并使癌症可以提早被发现(Heitzer et al. 2013),但是仍然会因为血液中含有较高的背景而难以达到检测所需的分辨率,并且无法探知Cell free DNA的来源,并不能提示肿瘤的发病部位。

Exosome是一种包裹了核酸蛋白的囊泡,结构稳定但是不易稳定分离,很多标志物还在探索当中。

循环肿瘤细胞发现的最早,而且作为这三类当中唯一的实体瘤,它们的在医学上的意义值得我们进行更加深入的探索。

循环肿瘤细胞的研究进展循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)是包括除白血病和淋巴瘤来源的肿瘤细胞以外的所有类型的肿瘤实体瘤细胞在血液和淋巴管中扩散的肿瘤细胞。

其实在很早之前就有人观察到了这一现象,Ashworth是第一个提出这一概念的人,他在一名因为癌症导致死亡的患者遗体内发现肿瘤细胞本身与血液中的肿瘤相同,这一事实表明同一个人体内可能存在的多种肿瘤的起源模式。

循环肿瘤细胞的研究与应用

循环肿瘤细胞的研究与应用

循环肿瘤细胞的研究与应用随着生物技术和医学研究的不断发展,循环肿瘤细胞成为了近年来备受关注的研究对象。

循环肿瘤细胞,简称CTCs,是指在肿瘤细胞侵袭时,从原发病灶进入血液循环系统并进行远处转移的肿瘤细胞。

它们携带着原发病灶的基因和表型,并具有高度恶性和耐药性,因此对肿瘤的治疗和预后具有重要意义。

本文将就循环肿瘤细胞的研究和应用展开讨论。

一、循环肿瘤细胞的检测方法当前,循环肿瘤细胞的检测方法主要分为两类:常规检测法和新型检测法。

常规检测法包括细胞计数、荧光原位杂交、PCR检测以及CBA等技术,这些技术检测CTCs的成功率很高,检测结果稳定,但检测时间和成本较高。

而新型检测法包括微流控芯片、纳米技术、磁性分选和激光捕获等,这些技术具有快速、准确、高通量、低成本的特点,已经成为研究CTCs的热点方向之一。

二、循环肿瘤细胞的应用CTCs在肿瘤预后评估、肿瘤筛查及监测、肿瘤治疗和个体化治疗等方面应用广泛。

其中,肿瘤预后评估是CTCs应用的最主要领域之一。

CTCs的高度恶性和耐药性使得它们成为肿瘤复发和转移的主要来源,并且预后较差的肿瘤患者体液中CTCs的含量显著高于预后良好的患者。

肿瘤筛查及监测也是CTCs应用的重要领域之一。

CTCs可以帮助早期发现肿瘤并进行监测,及时进行治疗,降低死亡率。

此外,CTCs还可作为肿瘤治疗和个体化治疗方案的重要参考依据。

三、CTCs在肿瘤治疗中的作用近年来,随着药物治疗的不断进步,肿瘤治疗已经从传统的化疗、放疗等单一治疗方式发展到了多学科综合治疗。

在肿瘤细胞的治疗过程中,CTCs具有重要的作用。

首先,CTCs可以通过对肿瘤细胞的检测,制定个体化治疗方案,加强肿瘤治疗的有效性。

其次,CTCs可能会通过参与肿瘤微环境的调节以及肿瘤干细胞的转化等机制,对肿瘤治疗中的复发和转移产生作用。

这些结果表明,针对CTCs的治疗将为肿瘤治疗提供潜在治疗潜力。

四、循环肿瘤细胞的研究进展目前,循环肿瘤细胞的研究主要集中在三个方面:CTCs的分子生物学特征,CTCs与肿瘤干细胞的关系和肿瘤微环境中CTCs的作用。

为什么要检测CTC(循环肿瘤细胞)?CTC的介绍和临床应用

为什么要检测CTC(循环肿瘤细胞)?CTC的介绍和临床应用

为什么要检测CTC(循环肿瘤细胞)?CTC的介绍和临床应用为什么要检测CTC?了解关于CTC的介绍和临床应用 ... ... ...1、什么是CTC循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTC)是指自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞,是恶性肿瘤患者出现术后复发和远处转移的重要原因,也是导致肿瘤患者死亡的重要因素。

近几年CTC在肿瘤诊断、治疗和监控等方面的临床表现逐渐崭露头角,是目前最具发展潜力的肿瘤无创诊断和实时疗效监测手段,临床应用价值极其显著。

与传统的影像学诊断、内窥镜检查以及病理学诊断相比,优势显著,可更加敏感地发现疾病的变化,更加科学、迅速的评价某一治疗方案的效果。

而且分离富集CTC只需抽取患者少量外周血,对患者没有副作用,因此可以高频度的监测,达到实时监测疾病进展的目的。

更为重要的是,CTC可作为分析患者肿瘤生物学特征的实时样本,可以发现患者的实时生物学变化,并根据结果及时调整治疗方案,实现实时的个体化治疗。

2、CTC的发现和起源早在1889年,Paget提出了“种子和土壤”的学说,强调癌细胞和微环境之间的关系,认为肿瘤转移的形成,是处于旺盛生长状态的肿瘤细胞作为“种子”,当遇到合适的器官、组织的基质环境,即“土壤”时,就会发生肿瘤的转移。

在1896年,澳大利亚学者Ashworth在一例转移性肿瘤患者血液中首次观察到从实体肿瘤中脱离并进入血液循环的肿瘤细胞,并率先提出了CTC的概念。

不过长时间以来CTC的检测并未在肿瘤病人的防治中发挥应有的作用,主要原因就是检测技术未取得突破性进展。

从上世纪末以来CTC检测技术得到了不断的改进,随之带来的是CTC检测在临床的应用。

FDA于2004年批准了Cellsearch系统在转移性结直肠癌、乳腺癌和前列腺癌治疗中的应用,随着CTC研究的不断深入,越来越多的肿瘤患者得益于CTC的检测。

3、CTC的临床应用已经完成及正在进行的大量研究已经显示出CTC在临床上具有很大的应用价值,目前,CTC在临床上的应用主要包括以下几个方面:1、临床诊断和分期研究发现在部分早期的肿瘤患者中,利用影像学还未发现病灶时已经可以在外周血中检测到CTC,因此CTC可以用于肿瘤的早期诊断,2007年ASCO就将CTC纳入了肿瘤标志物。

CTC,ctDNA,循环miRNA相关知识整理

CTC,ctDNA,循环miRNA相关知识整理

循环肿瘤细胞(CTC)CTC(循环肿瘤细胞,Circulating Tumor Cell)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称,因自发或诊疗操作从实体肿瘤病灶(原发灶、转移灶)脱落,大部分CTC 在进入外周血后发生凋亡或被吞噬,少数能够逃逸并锚着发展成为转移灶,增加恶性肿瘤患者死亡风险。

通过美国食品药品监督管理局和我国国家食品药品监督管理局批准的唯一的循环肿瘤细胞检测设备—cellSearch系统,通过上皮细胞黏附分子标记磁珠对上皮细胞进行富集,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚阳性、CD45阴性、细胞角蛋白和上皮细胞黏附分子阳性的细胞定义为循环肿瘤细胞。

CTC检测通过捕捉检测外周血中存在的CTC,检测CTC类型和数量变化的趋势,以便实时监测肿瘤动态、评估治疗效果,实现实时个体治疗。

恶性肿瘤都会通过血液传播转移到身体的其他器官,而肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因。

肿瘤细胞侵入到原发肿瘤细胞的周围组织中,进入血液和淋巴管系统,形成循环肿瘤细胞CTC,并转运到远端组织,再渗出,适应新的微环境,最终"播种"、"增殖"、"定植"、形成转移灶。

因此早期发现血液中的CTC,对于患者预后判断、疗效评价和个体化治疗都有着重要的指导作用。

循环肿瘤DNA (ctDNA)人体血液循环系统中,含有不断流动的携带一定特征(包括突变,缺失,插入,重排,拷贝数异常,甲基化等)的循环DNA,来自肿瘤基因组的DNA称为循环肿瘤DNA,其来源于四个部分:1、坏死的肿瘤细胞;2、凋亡的肿瘤细胞;3、循环肿瘤细胞;4、肿瘤细胞分泌的外排体。

ctDNA在恶性肿瘤患者外周血中的含量明显高于健康人,ctDNA所占比例与癌组织的大小和状态有关,可以反映出癌组织DNA 的特征,在肿瘤生长早期,患者临床表现不明显且影像学发现较困难,ctDNA被认为可以用于检测肿瘤早期诊断,进展过程,预后判断及个性化用药指导。

循环肿瘤细胞,告诉你所不知道的(二):解析CTC的最佳用武之地

循环肿瘤细胞,告诉你所不知道的(二):解析CTC的最佳用武之地

循环肿瘤细胞,告诉你所不知道的(二):解析CTC的最佳用武之地上期回顾:循环肿瘤细胞,告诉你所不知道的(一):认识CTC 的真相那么这个天生的定量神器,到底和什么样的“临床事件”或者“临床状态”相关联呢?解析CTC的最佳用武之地NO.1穷途末路——CTC≠预后;基因检测亦惨遭KONO.2天生我才——动态监测,告诉你所不知道的NO.3目击证人——辅助诊断而非鉴别诊断我们最早接受CTC的临床应用是判断预后,即你的病情严不严重,更通俗点即活得长还是活得短,在学术圈有另一个叫法——科学算命。

图2 Kaplan Meier Analysis of overall survival before starting a new line of therapy for patients with metastatic breast, colorectal and prostate cancer. Patients were divided into those with Favorable and Unfavorable CTC (Unfavorable: >5 CTC/7.5mL for breast and prostate, >3 CTC/7.5mL for colon)就像上图里面看到的,我们会说,如果在病人的7.5ml血里面发现了超过5个以上的CTC,那么这个乳腺癌或者前列腺癌病人就活得比较短。

(1)穷途末路——CTC≠预后;基因检测亦惨遭KO在拿到肿瘤诊断报告书的那一刻,几乎所有的患者或家属都会本能地问:“医生,我还能活多久”,10年前在治疗手段相对匮乏的诊疗背景中,这个问题的答案相对明确,看分期,吸烟史,对照1年,2年,5年生存率数值等等。

10年后,驱动基因的发现和相应的靶向药物的问世,将肿瘤治疗带入了一个崭新的时代。

病人肿瘤携带的分子事件信息,决定了他能否有机会接受延长生存的治疗。

不论是肿瘤医生还是患者都更渴望获得这些分子事件的信息。

肝癌的循环肿瘤细胞与液体活检

肝癌的循环肿瘤细胞与液体活检

肝癌的循环肿瘤细胞与液体活检肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种恶性肿瘤,其发展迅速,并且对治疗有很高的耐药性。

循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)和液体活检(liquid biopsy)作为新兴的肿瘤诊断和监测工具,对于肝癌的早期诊断、治疗选择以及预后评估具有重要的临床意义。

一、循环肿瘤细胞的基本特点循环肿瘤细胞是指肿瘤在早期扩散转移过程中脱落,并进入到血液循环系统中的细胞。

它们具有很高的恶性潜能和转移能力,并且能够在远离肿瘤原发灶的部位重新扎根生长,形成转移灶。

CTCs的检测可以通过血液样本进行,相对于传统的组织活检方法,它具有无创、简便、可重复采样的优势。

二、液体活检在肝癌中的应用1. 早期诊断CTCs作为一种很早出现在肝癌患者血液中的标志物,可以帮助医生早期发现肝癌。

通过检测CTCs的数量和CTCs上的特异性标记物,可以有效筛查出早期肝癌患者,从而提供更早的治疗机会。

2. 治疗选择CTCs可以提供对肝癌患者的诊断和治疗效果监测。

在肝癌治疗过程中,CTCs的数量和特征会发生变化,通过监测CTCs的动态变化,可以评估治疗的有效性,根据情况做出及时调整和优化治疗计划的决策。

3. 预后评估CTCs的存在和数量与肝癌患者的预后密切相关。

高水平的CTCs与较差的预后相关。

通过检测CTCs的数量和特征,可以对肝癌患者的生存期进行预测,为临床医生提供预后评估的依据,并帮助制定个体化的治疗方案。

三、挑战与展望尽管液体活检技术在肝癌诊断和管理中呈现出巨大的潜力,但目前仍面临着一些挑战。

首先,CTCs的检测和分离技术需要不断改进,以提高准确性和灵敏性。

其次,血液中的CTCs数量较低,检测困难。

因此需要进一步改进技术,提高检测的敏感性。

另外,CTCs的属性和功能尚不清楚,需要深入研究。

展望未来,液体活检技术在肝癌的应用将不断发展。

随着技术的不断提高和完善,液体活检将成为肝癌诊断、治疗和预后评估的重要工具,有望为肝癌患者的个体化治疗提供更好的支持。

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关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识摘要:通常把进入人体外周血的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cell)。

随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入,尤其是伴随现代检测技术的广泛应用,CTC逐渐被人们所重视。

循环肿瘤细胞的检测可有效地应用于体外早期诊断,化疗药物的快速评估,个体化治疗包括临川筛药、耐药性的检测,肿瘤复发的监测以及肿瘤新药物的开发等。

检测CTC 有着良好的应用前景,随着这一研究领域的不断发展,必将产生新的诊疗手段,从而使肿瘤的治疗提高到一个崭新的阶段。

关键词:循环肿瘤细胞;CTC;检测方法;临床意义早在1896年,Ashworth曾报道1例因癌症死亡的患者外周血中发现了类似肿瘤的细胞,并首次提出循环肿瘤细胞(circulating tumor cell, CTC)的概念[1]。

随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入,尤其是伴随现代检测技术的广泛应用,CTC逐渐被人们所重视。

1、概述CTC指自发或因诊疗操作进入外周血循环的肿瘤细胞。

随着肿瘤细胞的不断增殖,部分细胞可以通过分泌一种抑制黏附因子表达的物质,增加其运动能力并使之与肿瘤母体脱离。

这些脱落的肿瘤细胞再分泌一种蛋白溶解酶,以破坏周边宿主结缔组织并进入脉管系统。

诊疗操作也可使肿瘤细胞扩散进入外周血循环。

2、检测方法2.1免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC)这一检测方法基于抗原抗体结合反应的原理,利用单克隆抗体(McAb)与特异的肿瘤标记物结合,并通过酶与底物反应显色来判断肿瘤细胞的存在。

检测的肿瘤标志物主要分三类:①上皮细胞角蛋白(CK),如CK19;②上皮细胞膜特异性抗原,如黏蛋白类,包括EMA、HMFG、HEA125等;③肿瘤相关糖蛋白(TAG),如TAG12。

1980年,Sloane等首次采用ICC的方法检测乳腺癌患者骨髓中的肿瘤细胞。

该方法可以进行形态学分析,但是检测的细胞量少,敏感性只有10-4~10-5(即在1万~10万个单核细胞中发现一个肿瘤细胞),而且许多分化差的肿瘤不能表达目标抗原,而非上皮细胞中细胞角蛋白和上皮细胞抗原亦可能阳性,故特异性不高。

Braun等[2]认为由于CTC不表达白细胞共同抗原CD45,采用CD45-/CK+双标技术可以提高ICC检测的特异性。

2.2多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)该方法的原理是特异性扩增出肿瘤细胞中因癌基因、抑癌基因突变或染色体重排而产生的DNA异常。

这类基因的改变应满足以下条件:①该基因的突变在待检肿瘤中发生率较高,至少应达50%左右;②基因内发生碱基突变的部位应相对集中,如果过分分散,目前临床应用有困难。

这一方法检测肿瘤细胞的敏感性约1×10-6左右,比Southern印迹杂交法约提高10 000倍。

应用PCR技术检测CTC受到缺乏肿瘤特异性和高表达标记的限制,该方法敏感度高,易出现假阳性,同时由于癌细胞的异质性亦可出现假阴性。

目前多应用突变等位基因扩增(mutant allelie specific amplification, MASA)的PCR技术,检测大肠癌和胰腺癌患者外周血中具有K-ras癌基因突变的肿瘤细胞。

2.3逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)这种方法在PCR的基础上扩增由肿瘤特异性mRNA序列逆转录的DNA片断。

RNA检测的特异性靶mRNA有:①某些基因改变后RNA水平的异常,如点突变(p53、ras)、缺失(BRCA1、BRCA2)、异构(CD44)、扩增(erb- B2、EGFR);②组织特异性标志mRNA,如mucin、cytokeratin、ER、maspin;③肿瘤特异性标志mRNA,如CEA、β-HCG 等。

1991年Smith等[3]首先将RT-PCR应用于外周血黑色素瘤细胞的检测。

此后,这一技术已分别在多种恶性实体瘤中得以应用,如对消化系统肿瘤作CEAmRNA检测,对乳腺癌作MAMmRNA检测,对肝癌作AFPmRNA检测,对前列腺癌作PSAmRNA检测等。

RT-PCR 方法具有高度的敏感性和特异性,其敏感性可达10-6~10-7,特异性在于其扩增模板为mRNA:RNA在细胞外环境中极不稳定,一旦检测到特异性mRNA的表达就意味着有肿瘤细胞的存在;mRNA的表达不受相应编码蛋白表达高低的影响;引物的设计可以跨越两个不同的外显子,避免了整个基因组的扩增,有利于消除假阳性结果。

由于RNA易被RNA 酶降解,同时该方法具有PCR技术的局限性,仍可出现假阳性和假阴性结果。

为提高RT-PCR的特异性和敏感性,新的方法不断产生,在RT-PCR的基础上又增加了定量逆转录多聚酶链反应(QPCR),荧光定量逆转录多聚酶链反应(FQ-PCR)等。

2.4流式细胞术(flow cytometry, FCM)该技术是以流式细胞仪为工具对悬液中的细胞进行测量分析,具有快速、准确的优点,其筛选细胞的速度为103~104个细胞/s。

应用FCM从血液中检测上皮性肿瘤细胞其价值很大程度上依赖于可分析的细胞数量[4]。

尽管FCM不能提供有关细胞形态方面的信息,但是,其在鉴定、计数肿瘤细胞方面比RT-PCR更可靠。

Irene等研究证明FCM可作为一种检测CTC数量的有力工具。

现有的FCM需取大约50ml外周血方可检测肿瘤细胞负荷,若检测前进行特异性富集肿瘤细胞,将在很大程度上提高检测的敏感性。

2.5其它目前,CTC检测方法较多,但检出率仍有限,一些明确存在转移灶的患者CTC阳性率可能很低。

导致这一情况的原因可能是不了解肿瘤细胞释放的规律(CTC的释放可能是间歇性的),且循环中的肿瘤细胞常常成群,单点时间的检测可产生一定的偏倚,而实际表达可能更高。

连续多次取样或加大样本量可能会提高检出率。

再者,检测方法本身也都存在一定的局限性,可能出现假阳性与假阴性。

在设立对照,均衡、优化实验条件的同时,可选用免疫磁性分离技术即磁性激活的细胞筛选(magnetic activated cell separation,MACS)富集肿瘤细胞、激光扫描细胞计数器等来提高检测的敏感性和特异性。

Vona等[5]。

根据上皮肿瘤细胞的大小建立了一种简便、经济的分离计数CTC的方法,即利用上皮肿瘤细胞比外周血细胞大的特点,通过过滤使之得到分离、富集。

该方法敏感度高,1ml血中有1个肿瘤细胞也可检出,适用于多种类型的肿瘤。

已有研究表明,在肝癌患者外周血肿瘤细胞的收集方面,该方法的敏感性比RT-PCR方法更高,若与其它方法联合应用可显著提高检测效率和准确性。

3、临床意义3.1 体检(体外早期诊断):对于肿瘤的常规检测手段来讲,例如影像学。

肿瘤在小于一公分的情况下,医生也不认为它是异常。

通过国外发表的文章可以看到,不要说是一公分,很多肿瘤在一个毫米的情况下已经在血液里查到循环肿瘤细胞,从这个角度讲,它对于早期诊断来讲有不可低估的意义。

3.2 辅助诊断手段:从临床来讲,要确定一个病人是不是得了肿瘤,一直是一个很难明确回答的问题,这就会对很多病人造成误诊。

比如说胰腺癌往往发现确诊以后都是晚期的,为什么会这样?就是因为在早期的时候,胰腺癌的确诊非常困难。

现在发现,在很多难以确诊的病人的血液中,如果说能够检查到循环肿瘤细胞,那对于配合医生下肿瘤诊断的结论是具有积极意义的。

3.3 根据循环肿瘤细胞的个数判断愈后及存活时间:经美国FDA认证的易莫尼康(Immunicon)公司通过多年的科研,在几百个病人身上做了大量的科学研究,最终得出结论,在治疗以后通过计算循环肿瘤细胞的个数,可以明确的告诉病人到底能存活半年还是一年或更长时间。

也就是说循环肿瘤细胞的应用使人们第一次可以以一个量化的指标告诉医生和病人他的存活时间。

3.4 个体化治疗:个体化治疗指的是针对每一个不同的肿瘤病人,医生开出不同的治疗方案。

目前在医院,比如说协和医院,很少做很严格的个体化治疗方案,一般都是医生根据经验来决定给病人用何种化疗药物,但有没有效并不知道。

现在国外已经开始用一种新的方法,即把病人体内的肿瘤细胞拿出来培养,培养好以后在体外做药理实验。

因为化疗药物有多种,究竟哪种最好最有效不应该由经验来回答,而是应该由事实来说话。

把肿瘤细胞培养好以后,用不同的药物来处理肿瘤细胞,看哪种化疗药物对肿瘤细胞杀伤作用最大,然后把杀伤作用最大的药物用在病人身上,这样就增加了治疗的目的性。

随着CTC捕获技术的成熟,人们开始考虑是否可以把CTC作为个体化治疗的基础,从目前来看这是可行的。

即先将CTC捕获出来进行培养,培养好了以后进行药理实验,在此基础上还可以做化疗药效的快速评估。

3.5 快速判断化疗效果:目前不管是国内还是国外,给病人上化疗药物以后,一般都要等三个月才可以去评估病人的治疗效果。

因为只有经过三个月后,肿瘤的大小才能有比较明显的变化。

通过我们的实验以及国外发表的文章可以看出,凭经验给病人上的化疗药物在很多情况下是无效的。

很多情况下,经过三个月以后,肿瘤细胞非但没有减小反而继续长大。

这对病人来讲就白白耽误了三个月的时间。

三个月对于肿瘤病人来讲就意味着有可能最终死亡。

随着CTC技术的成熟,病人不用再等三个月,只需等三周,通过测定CTC数目的变化,如果CTC数目是显著下降的,说明化疗药物是有效的,如果CTC数目还在增加说明药物是无效的,这时医生就应该采取新的治疗方案。

3.6 体内耐药性检测:很多情况下给病人用化疗药物一开始是有效的,但是过一段时间后肿瘤病人的发病并没有得到控制,这有可能是病人对药物产生了耐药性,这一点大家都可以理解,抗体多了容易产生耐药。

目前来讲,对于肿瘤治疗病人会不会产生耐药以及什么时候产生耐药是未知的。

往往是发现病人产生耐药时,病情已得不到控制。

随着CTC技术的成熟,我们可以做动态的观察,也就是对病人做持续跟踪观察,在动态的观察过程中一旦发现CTC 数目显著增加,医生就应该及时的更换新的治疗方案。

3.7 最后就是检测肿瘤复发:这是北京莱尔生物科技有限公司在协和医院及其他医院做临床实验以后病人反响最大的地方。

目前就全世界来说,肿瘤病人经过治疗以后,在恢复的过程中会不会肿瘤复发?以及什么时候复发?没有医生也没有方法可以做出解释。

随着CTC技术的成熟,我们已经知道肿瘤的复发实际上就是肿瘤转移的过程。

很多乳腺癌的病人复发后会转移到脑部,还有很多结直肠癌的病人复发后往往转移到肝脏。

这说明即使原发部位已经切除,肿瘤还会转移到其他部位,这实际上就是一个慢性的肿瘤转移过程。

既然人们已经认识到肿瘤复发和肿瘤转移过程是直接相关的,医生就可以通过监测CTC直接监测病人是否肿瘤复发。

也就是说肿瘤的复发不是一夜形成的,它是一个持续的肿瘤不断释放入血向远端转移的缓慢的过程。

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