分子生物学zuq题库
分子生物学练习题库及参考答案
分子生物学练习题库及参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、不属于移植配型中常用的分子生物学检测技术是 ( )A、RFLP/PCR-RFLP/PCR-SSPB、PCR-SSCPC、PCR-SequencingD、PCR-SSO/基因芯片技术E、FISH正确答案：E2、定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得：A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案：A3、PCR 反应中延伸的时间取决于A、引物长度B、待扩增片段的长度C、模板的纯度D、Taq DNA 聚合酶的量E、模板的含量正确答案：B4、第三代测序技术的最主要特征：A、对单分子 DNA 进行非 PCR 的测序B、对 SNP 进行非 PCR 的测序C、高通量和并行 PCR 测序D、直接分析 SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP 研究正确答案：A5、下列属于单基因遗传病的是A、糖尿病B、冠心病C、精神与神经疾病D、珠蛋白生成障碍性贫血E、原发性高血压正确答案：D6、采用了所谓酶联级联测序技术的测序方法是A、焦磷酸测序B、边合成边测序C、寡连测序D、双脱氧终止法测序E、化学降解法测序正确答案：A7、一般来说核酸杂交的温度低于其 Tm 值多少度A、40~50℃B、30~40℃C、15~25℃D、5~10℃E、10~15℃正确答案：C8、基因多态性连锁分析中，第一、二、三代遗传标记分别是A、RFLP、SSCP、STRB、RFLP、SNP、STRC、RFLP、STR、SNPD、VNTR、SSCP、SNPE、VNTR、STR、RFLP正确答案：C9、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案：B10、检测目标是 RNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：C11、转录依赖扩增系统的描述错误的是A、以 RNA 为模板B、首先由靶 RNA 合成 DNA 拷贝C、再由DNA 转录生成大量 RNA 拷贝D、产物为 DNAE、为等温扩增正确答案：D12、下列方法中不属于 RNA 诊断的是A、Northern blotB、RNA 斑点杂交C、基因芯片D、mRNA 差异显示 PCR 技术E、逆转录 PCR正确答案：C13、众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、乳腺癌B、肝癌C、肺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案：D14、下列不是目前用于 O157：H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案：E15、DNA 自动化测序技术中，不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案：B16、HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案：A17、镰状细胞贫血患者，代替其血红蛋白β链 N 端第六个氨基酸残基谷氨酸的是A、酪氨酸B、丝氨酸C、丙氨酸D、苯丙氨酸E、缬氨酸正确答案：E18、最早发现与 mtDNA 突变有关的疾病是A、肿瘤B、Leber 遗传性视神经病C、糖尿病D、耳聋E、MELAS 综合征正确答案：B19、线粒体疾病的遗传特征是A、母系遗传B、发病率有明显的性别差异C、近亲婚配的子女发病率增高D、交叉遗传E、女患者的子女约 1/2 发病正确答案：A20、引起急性移植排斥反应最重要的抗原是A、ABO 血型抗原B、HLA 抗原C、超抗原D、异嗜性抗原E、Rh 血型抗原正确答案：B21、下列关于Taq DNA 聚合酶的描述，错误的是A、以 dNTPs 为原料B、催化形成3’,5’-磷酸二酯键C、使 DNA 链沿5’→3’方向延伸D、不具有3’→5’外切酶活性E、扩增的DNA 片段越长，碱基错配率越低正确答案：E22、关于核酸探针的描述下列不正确的是A、可以是 DNAB、可以是 RNAC、可用放射性标记D、可用非放射性标记E、必须是单链核酸正确答案：E23、DCC 基因突变的主要方式不包括A、等位基因杂合性缺失B、5’端纯合性缺失C、3’端纯合性缺失D、DCC 基因过甲基化E、外显子的点突变正确答案：C24、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、发育迟缓或自闭症的患者B、有 FraX 体格或性格阳性征象者C、未诊断的 MR 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、没有 FraX 家族史正确答案：E25、有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案：B26、关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E27、关于电转移下列描述不正确的是A、快速、高效B、需要特殊设备C、缓冲液用 TAE 或 TBED、可产生高温E、常用NC 膜作为支持介质正确答案：E28、以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案：E29、结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：B30、FMR-1 基因上 CGG 重复序列异常扩增导致A、镰状细胞贫血B、脆性 X 综合征C、地中海贫血D、血友病 AE、血友病 B正确答案：B31、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B32、在对病原体检测中，一次性获得信息量最大的技术是 ( )A、ELISAB、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、原位杂交技术E、基因芯片技术正确答案：E33、荧光定量 PCR 检测核酸量的时间段在A、非指数期B、PCR 反应的最初阶段C、PCR 反应最后的时间阶段D、指数期的起始阶段E、指数期的终末阶段正确答案：D34、基因芯片技术的本质是 ( ) ：A、核酸分子杂交B、蛋白质分子杂交技术C、连接酶链反应D、DNA 重组技术E、酶切技术正确答案：A35、珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、出现异常血红蛋白 SD、血红蛋白破坏加速E、铁代谢异常正确答案：A36、以下不需要对引物或探针预先标记的实时定量 PCR 方法是A、TaqMan 水解探针技术B、探针杂交技术C、分子信标技术D、SYBR Green Ⅰ荧光染料技术E、数字 PCR 技术正确答案：D37、以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案：E38、DNA 芯片的样品制备过程错误的是( )A、核酸分子的纯化B、样品的扩增C、样品的标记D、常用的标记物为荧光E、标记后的样品不必再纯化正确答案：E39、关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是：A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案：E40、下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案：C41、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、豚鼠衣原体B、肺炎衣原体C、鹦鹉热衣原体D、沙眼衣原体E、鼠衣原体正确答案：D42、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D43、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案：C44、在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是A、核酸提取效率太低所致的假阴性B、样本吸取错误所致的假阴性C、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性D、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性E、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性正确答案：B45、下列不是影响DNA 复性因素的是A、DNA 浓度B、DNA 的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案：E46、下列叙述哪项是错误的( )A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复序列E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA正确答案：B47、基因诊断与其他诊断比较，最主要的特点在于 ( )A、针对基因结构B、取材方便C、诊断费用低D、针对病变细胞E、诊断周期短正确答案：A48、延伸的温度通常为A、55℃B、72℃C、37℃D、25℃E、95℃49、目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案：D50、关于 HPV 各亚型遗传物质的描述正确的是A、同时存在脱氧核糖核酸和核糖核酸B、都是脱氧核糖核酸C、都是核糖核酸D、有的是脱氧核糖核酸，有的是核糖核酸E、脱氧核糖核酸与核糖核酸可交替互换正确答案：B51、下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案：D52、为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用，最好( )A、将核酸冻干保存B、将核酸沉淀保存C、将核酸溶解保存D、将核酸大量保存E、将核酸小量分装保存正确答案：E53、以下不是在移植配型中常用的分子生物学检测技术是A、核酸分子杂交技术B、PCR 技术C、基因芯片技术D、免疫组化技术E、基因测序技术54、单细胞基因扩增一般采用下列何种技术增加检测的敏感性和特异性A、巢式 PCRB、多重 PCRC、PCR-RFLPD、等位基因特异性 PCRE、PCR-SSCP正确答案：A55、硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案：A56、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT)，有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便，成为探针的重要来源正确答案：E57、关于 Ct 值的描述，不正确的是A、Ct值是荧光定量 PCR 获得的最初数据资料B、Ct代表了反应达到预定设置的阈值时的循环次数C、Ct 与反应模板的初始模板量成正比D、Ct越小代表其模板核酸拷贝数越多E、Ct值处于扩增曲线和荧光本底基线的交叉点正确答案：C58、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的DNA 片段D、克隆于真核载体的DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案：E59、Southern 印迹转移的步骤不包括 ( )A、用限制性内切酶消化 DNAB、DNA 与载体的连接C、用凝胶电泳分离 DNA 片段D、DNA 片段转移到硝酸纤维素膜上E、用一个标记的探针与膜上 DNA 杂交正确答案：B60、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、复杂性B、杂交C、复性D、变性E、探针正确答案：B61、人类基因组的碱基数目为A、4.0×10 bp6B、4.0×10 bp9C、2.9×10 bp6D、4.0×10 bp8E、3.0×10 bp9正确答案：E62、第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A63、基因芯片技术的优点不包括A、高通量C、芯片检测稳定性高D、微缩化E、观察结果直观正确答案：C64、关于逆转录 PCR 的描述，不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外，还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E65、关于抑癌基因的说法正确的是A、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能B、呈隐性作用方式C、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因正确答案：B66、下列密码子中，终止密码子是 ( )A、UUAB、UGAC、UGUD、UAUE、UGG正确答案：B67、大肠杆菌类核结构的组成是A、双链 DNAB、蛋白质+DNAC、支架蛋白D、RNA+支架蛋白+双链 DNA正确答案：D68、描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是：A、分型时间短C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案：D69、不符合分子诊断特点的是A、易于早期诊断B、检测对象为自体基因C、样品获取便利D、灵敏度高E、特异性强正确答案：B70、mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案：D71、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链，这一过程称A、变性B、复性C、杂交D、探针E、复杂性正确答案：B72、Southern 杂交通常是指( )A、DNA 与 RNA 杂交B、DNA 与 DNA 杂交C、RNA 与 RNA 杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA 与蛋白质杂交正确答案：B73、阳性质控品失控的原因不包括A、提取的核酸残留有抑制物B、扩增仪孔间温度不一致C、Taq 酶失活D、核酸提取试剂失效E、扩增产物污染正确答案：E74、线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ，相互影响，相互协调正确答案：A75、线粒体糖尿病属于A、1 型糖尿病B、2 型糖尿病C、新发现的第 5 种糖尿病D、妊娠期糖尿病E、特殊类型糖尿病正确答案：E76、构成完整的病毒颗粒的成分是A、结构蛋白B、核酸C、糖蛋白D、蛋白质E、蛋白质与核酸正确答案：E77、mtDNA 突变不会导致A、综合征型耳聋B、非综合征型耳聋C、神经性耳聋D、药物性耳聋E、氨基糖苷类抗生素耳毒性正确答案：C78、关于 NC 膜下列描述不正确的是A、能吸附单链 DNAB、能吸附单链 RNAC、依赖于高盐浓度结合靶分子D、对小分子 DNA 片段 (<200bp) 结合力强E、易脆正确答案：D79、关于多重 PCR，错误的是A、在同一反应体系中加入多对引物B、同时扩增一份 DNA 样品的靶 DNAC、扩增的产物为序列相同的DNA 片段D、扩增时应注意各对引物之间的扩增效率基本一致E、扩增产物可以通过电泳分离正确答案：C80、关于荧光原位杂交技术叙述不正确的是( )A、可以用于基因定位B、无需经过核酸的提取C、用荧光素标记探针D、可以用于遗传病的产前诊断E、用放射性核素标记探针正确答案：E81、关于SYBR Green Ⅰ 的描述，不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D82、关于定量 PCR 的描述，不正确的是A、可以定量或半定量检测PCR 产物的方法B、定量 PCR 主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中TaqMan 探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E、定量 PCR 在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染正确答案：A83、目前测序读长最大的测序反应：A、焦磷酸测序B、双脱氧终止法C、边合成边测序D、化学裂解法E、连接测序正确答案：B84、常见基因芯片合成的两大类方法是( )A、原位合成和在片合成B、离片合成和直接点样C、分子印章多次压印合成和在片合成D、光引导原位合成和喷墨合成E、原位合成和直接点样正确答案：E85、阴性质控品失控的原因不包括A、扩增产物污染B、标本交叉污染C、放射性污染D、基因组 DNA 或质粒的污染E、试剂污染正确答案：C86、质粒的主要成分是A、多糖B、蛋白质C、氨基酸衍生物D、DNA 分子E、脂类正确答案：D87、人类基因组的组织特点描述不正确的是A、大部分为非编码序列B、功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上C、每个结构基因都有单独的调控序列D、基因组中各个基因的大小和内部组织的差异不大E、基因组含重复序列正确答案：D88、目前所知的原癌基因激活机制不包括A、点突变B、抑癌基因的丢失C、异位激活D、癌基因甲基化程度降低E、原癌基因扩增正确答案：B89、第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案：A90、限制性长度多态性是由于以下哪项所致A、碱基变化发生在微卫星序列上B、碱基变化发生在内含子C、碱基变化发生在增强子上D、碱基变化发生在酶切位点上E、碱基变化发生在外显子正确答案：D91、可以用来判断不同生物体之间的基因组 DNA 信息的是哪一种 PCR 技术：A、反转录 PCRB、原位 PCRC、连接酶链反应D、随机扩增多态性 PCRE、原位杂交 PCR正确答案：D92、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案：C93、SDS 是一种阴离子表面活性剂，其可断开蛋白质分子内和分子间的( )A、氢键B、离子键C、二硫键D、酯键E、疏水键正确答案：A94、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用 ( ) ：A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案：E95、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是 ( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测，避免浪费C、检测快速准确D、同时检测TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案：E96、人类基因组中包含的基因数目约为A、大于 10 万B、1 万~2 万C、4 万~6 万D、6 万~8 万E、2 万~3 万正确答案：E97、细菌感染分子生物学检验的检验对象是A、镜检病原体形态B、测定样本中核酸含量C、测定血清中病原体蛋白含量D、测定血清中蛋白酶活性E、测定血清中抗体抗原正确答案：B98、利用DNA 芯片检测基因突变，杂交条件应：A、短时间内、低盐、高温条件下的高严紧性杂交B、长时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交C、短时间内、高盐、高温条件下的低严紧性杂交D、短时间内、低盐、低温条件下的高严紧性杂交E、短时间内、低盐、高温条件下的低严紧性杂交正确答案：A99、作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案：A100、关于 mtDNA 复制特点的描述正确的是A、线粒体密码子与核基因密码子相同B、mtDNA 以 D-环复制为主要模式，与核 DNA 复制同步C、mtDNA 两条链的复制是同步的D、mtDNA 为自主性复制，不受核内基因控制E、参与 mtDNA 复制所需的酶、调控因子等由核 DNA 编码正确答案：E。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
分子生物学试题库及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。
2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。
几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。
3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。
5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。
6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。
7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。
10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。
产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。
PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。
11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。
12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。
13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。
分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案(整理版)
一、选择题
1.DNA双螺旋结构是由哪两种碱基之间的氢键支撑的？ A. 腺嘌呤和胸腺嘧啶
B. 腺嘌呤和鳌酷嘧啶
C. 胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
D. 腺嘌呤和胸腺嘧啶、胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
2.在RNA转录中，哪种RNA是由RNA聚合酶合成的？ A. mRNA
B. rRNA
C. tRNA
D. snRNA
3.下列哪个过程不属于DNA复制中的信息单向传递过程？ A. 串联扭曲
B. 连续DNA合成
C. 不连续DNA合成
D. 缺氧齿合
二、填空题
1.DNA双螺旋结构中，两根链之间的碱基互为__________。
2.在生物细胞中，DNA的复制是由__________完成的。
3.参与DNA复制的酶包括DNA__________酶、DNA__________酶和
DNA__________酶。
三、简答题
1.请简要说明DNA双螺旋结构的特点和形成方式。
2.什么是DNA复制？简要描述DNA复制的过程。
四、解答题
1.请根据你的理解，解释DNA复制的半保留复制特点。
2.试分析DNA复制过程中可能出现的错误及其纠正机制。
以上为分子生物学试题及答案的整理版，希望能对您的学习有所帮助。
自考分子生物学试题及答案
自考分子生物学试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 分子生物学是研究什么的学科？A. 细胞结构B. 生物大分子的结构与功能C. 遗传信息的传递D. 以上都是答案：D2. DNA复制的起始信号通常是什么？A. 特定蛋白质B. RNA引物C. DNA序列D. ATP能量答案：C3. 在转录过程中，RNA聚合酶的主要功能是什么？A. 提供能量B. 识别启动子C. 连接氨基酸D. 合成RNA答案：B4. 下列哪一项不是真核细胞mRNA的修饰过程？A. 5'端加帽B. 3'端加尾C. 剪接D. 糖基化答案：D5. 基因表达的调控主要发生在哪个阶段？A. DNA复制B. 转录C. 翻译D. 后翻译修饰答案：B6. 哪种类型的RNA在蛋白质合成中起到携带氨基酸的作用？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA答案：B7. 下列哪一项是限制性内切酶的主要功能？A. 连接DNA片段B. 切割DNA片段C. 合成DNAD. 识别特定的DNA序列答案：B8. PCR技术中，引物的作用是什么？A. 提供起始点B. 提供能量C. 稳定DNA双螺旋D. 催化反应答案：A9. 在分子生物学中，Southern blotting用于检测什么？A. DNA片段B. RNA片段C. 蛋白质D. 细胞答案：A10. 下列哪一项是基因克隆的常用载体？A. 质粒B. 病毒C. 线粒体D. 叶绿体答案：A二、填空题（每题2分，共20分）11. 遗传密码是指_________上的三个相邻碱基决定一个氨基酸。
答案：mRNA12. 在中心法则中，遗传信息可以从_________转录成_________，再翻译成蛋白质。
答案：DNA；mRNA13. 真核细胞中，DNA复制主要发生在细胞周期的_________期。
答案：S14. 一个tRNA分子只能携带一种特定的_________。
答案：氨基酸15. 基因治疗是一种将_________转移到患者体内，以治疗某些遗传性疾病的方法。
分子生物学复习题及答案 知识点
分子生物学复习题及答案知识点分子生物学复习题及答案-知识点分子生物学一、单选题1、当一个真核基因处于活跃（转录）时（a）a.其启动子通常不带核小体b.整个基因通常不带核小体c.基因重的外显子一般不带核小体d.基因中的内含子一般不带核小体2、（c）是能够我复制的小型环状dnaa.内含子b.外显子c.质粒d.转座子3、下列关于转座子的描述不正确的是（a）a.所有的转座子均存有is序列b.所有的is元件中均涵盖存有编码转座酶的基因序列c.is元件末端为长的逆向重复序列d.repeats可能会引发基因组dna重排4、乳糖操纵子模型中，真正起至诱导促进作用的就是（c）a.胞外的乳糖b.胞内的乳糖c.别构乳糖d.半乳糖5、以下（d）不是原核生物基因表达的mRNA后调控机制。
a.稀有密码子和偏爱密码子的使用b.重叠基因对翻译偶联现象的调控c.魔斑核苷酸水平对翻译的调控 d.增强子的影响6、关于蛋白质翻译―运转同步机制描述错误的是（d）a.蛋白质定位的信息存在于该蛋白自身结构中b.绝大部分被运出内质网内腔的蛋白质都具有一个信号太c.仅有信号肽无法确保蛋白质运转的出现d.蛋白质达至靶边线的时候，信号肽必须切除术7、地球生命物质最早发生的可能将就是（a）a.rna分子b.dna分子c.蛋白质分子d.质粒8、关于酵母双杂交技术，（d）描述是正确的。
a.用作研究dna与dna的相互作用b.用作研究dna与蛋白质的相互作用c.用作研究dna与rna的相互作用d.用作研究蛋白质与蛋白质的相互作用9、原核细胞信使rna所含几个其功能所所需的特征片段，它们就是（d）a.启动子，sd序列，orf，茎环结构b.启动子，sd序列，orf，polya，茎环结构c.转录起始位点，sd序列，orf，polya，茎环结构d..转录起始位点，sd序列，orf，茎环结构10、真核生物染色体组蛋白的所不具备的特征存有（c）a.进化上的极端保守性b.组蛋白h5富含赖氨酸c.有组织特异性d.肽链上氨基酸分布的不对称性11、如果存有一段dna产生了+1的移码变异，则能够矫正的就是（b）a.突变型氨酰trna合成酶b.存有突变型反密码子的trnac.存有研磨一个核苷酸的酶d.存有四个碱基短的反密码子的trna12、内固醇激素的受体蛋白分子不具备的区域就是（c）a.激素结合区b.转录激活区c.操纵区d.dna结合区13、在什么情况下乳糖操纵子的转录活性最高（a）a.低乳糖、高葡萄糖b.高乳糖、高葡萄糖c.高乳糖、低葡萄糖d.低乳糖、低葡萄糖14、第三代dna遗传标记，可能将也就是最出色的遗传标记方法就是（d）分析法a.限制性片段长度多态性（rflp）b.大卫星dnac.微卫星dnad.但核苷酸多态性（snp）15、以下（c）对于热激活蛋白诱导的基因表达的观点就是错误的。
大学分子生物试题及答案
大学分子生物试题及答案大学分子生物学试题及答案一、选择题（每题2分，共30分）1. DNA双螺旋结构是由以下哪位科学家提出的？A. 沃森和克里克B. 达尔文C. 孟德尔D. 摩尔根答案：A2. 以下哪种碱基配对方式在DNA双螺旋结构中是正确的？A. A-TB. G-CC. A-GD. C-T答案：B3. RNA聚合酶的主要功能是什么？A. 催化DNA复制B. 催化RNA转录C. 催化蛋白质合成D. 催化DNA修复答案：B4. 以下哪种RNA是转运RNA？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA答案：B5. 真核生物中，mRNA的5'端通常具有哪种结构？A. 帽子结构B. 尾部结构C. 茎环结构D. 多聚A尾答案：A6. 以下哪种蛋白质在DNA复制中起解旋酶的作用？A. 拓扑异构酶B. 螺旋酶C. 核糖核酸酶D. 限制性内切酶答案：B7. 以下哪种酶在DNA修复中起作用？A. 限制性内切酶B. 核酸酶C. DNA聚合酶D. 核糖核酸酶答案：C8. 以下哪种物质是DNA复制的引物？A. 核糖核苷酸B. 脱氧核糖核苷酸C. 氨基酸D. 蛋白质答案：B9. 以下哪种蛋白质在翻译过程中起作用？A. 限制性内切酶B. 核糖核酸酶C. 核糖体蛋白D. 拓扑异构酶答案：C10. 以下哪种RNA在mRNA剪接中起作用？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA答案：D11. 以下哪种物质是DNA聚合酶的底物？A. 核糖核苷酸B. 脱氧核糖核苷酸C. 氨基酸D. 蛋白质答案：B12. 以下哪种碱基配对方式在RNA双螺旋结构中是正确的？A. A-UB. G-CC. A-GD. C-T答案：A13. 以下哪种RNA是信使RNA？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. snRNA答案：A14. 以下哪种蛋白质在DNA复制中起连接酶的作用？A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 核糖核酸酶D. 拓扑异构酶答案：B15. 以下哪种物质是mRNA翻译的起始信号？A. 帽子结构B. 多聚A尾C. 起始密码子D. 终止密码子答案：C二、填空题（每空1分，共20分）1. DNA的双螺旋结构由两条_________链组成，它们通过_________配对相互连接。
分子生物学自考试题及答案
分子生物学自考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. DNA复制过程中，下列哪一项不是必需的？A. DNA聚合酶B. 解旋酶C. RNA引物D. ATP答案：D2. 在遗传密码中，决定一个氨基酸的三个连续的核苷酸称为：A. 外显子B. 启动子C. 密码子D. 内含子答案：C3. 下列哪项不是真核细胞mRNA的特点？A. 有5'端帽子结构B. 有3'端多聚腺苷酸尾巴C. 存在内含子D. 通常为单顺反子答案：D4. 基因表达的调控中，转录因子结合的DNA序列是：A. 启动子B. 增强子C. 内含子D. 外显子答案：A5. 下列哪项不是蛋白质合成的起始因子？A. eIF-1B. eIF-2C. eIF-3D. eIF-4答案：D6. 在PCR技术中，用于引物延伸的步骤是：A. 变性B. 退火C. 延伸D. 稳定答案：C7. 下列哪项不是DNA连接酶的功能？A. 连接DNA片段的粘性末端B. 连接DNA片段的平末端C. 连接RNA片段的末端D. 修复DNA双螺旋的缺口答案：C8. 细胞周期中，DNA复制发生在：A. G0期B. G1期C. S期D. G2期答案：C9. 下列哪项是RNA干扰（RNAi）的现象？A. RNA分子催化DNA合成B. RNA分子催化蛋白质合成C. RNA分子介导的基因沉默D. RNA分子作为遗传物质答案：C10. 在下列哪种情况下，一个基因可以产生多种蛋白质？A. 基因突变B. 基因重组C. 替代性剪接D. 转导答案：C二、填空题（每空2分，共20分）11. 真核生物的基因表达包括两个主要过程：________和________。
答案：转录；翻译12. 在转录过程中，RNA聚合酶识别的DNA序列称为________。
答案：启动子13. 密码子位于mRNA上，而反密码子位于________上。
答案：tRNA14. 蛋白质合成的终止发生在________。
答案：到达终止密码子15. 基因克隆的常用载体有质粒、________和病毒。
分子生物学zuq题库
问答题：1 衰老与基因的结构与功能的变化有关,涉及到：1生长停滞；2端粒缩短现象；3DNA损伤的累积与修复能力减退；4基因调控能力减退.2 超螺旋的生物学意义：1超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密,使DNA分子体积变得更小,对其在细胞的包装过程更为有利；2超螺旋能影响双螺旋的解链程序,因而影响DNA分子与其它分子如酶、蛋白质之间的相互作用.3 原核与真核生物学mRNA的区别：原核：1往往是多顺反子的,即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息来自几个结构基因.25端无帽子结构,3端一般无多聚A尾巴.3一般没有修饰碱基,即这类mRNA分子链完全不被修饰.真核：15端有帽子结构23端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴,其长度为20-200个腺苷酸.3分子中可能有修饰碱基,主要有甲基化,4分子中有编码区与非编码区.4 tRNA的共同特征：单链小分子,含73-93个核苷酸.2含有很多稀有碱基或修饰碱基.35端总是磷酸化,5末端核苷酸往往是pG.43端是CPCPAOH序列.5分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合,开成双螺旋,从而构成其二级结构,开头类似三叶草.6三级结构是倒L型.5 核酶分类：1异体催化的剪切型,如RNaseP；2自体催化的剪切型,如植物类病毒等；3内含子的自我剪接型,如四膜虫大核26SrRNA前体.6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程：15端加帽；23端加尾3内含子的切除和外显子的拼接；4分子内部的甲基化修饰作用,5核苷酸序列的编辑作用.7 反义RNA及其功能：碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA,又称调节RNA,这类RNA是单链RNA,可与mRNA配对结合形成双链,最终抑制mRNA作为模板进行翻译.这是其主要调控功能,还可作为DNA复制的抑制因子,与引物RNA互补结合抑制DNA的复制,以及在转录水平上与mRNA5末端互补,阻止RNA合成转录.8 病毒基因组分型：1双链DNA2单链正股DNA3双链RNA4单链负股RNA5单链正股RNA9 病毒基因组结构与功能的特点：1不同病毒基因组大小相差较大；2不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸.3病毒基因组有连续的也有不连续的；4病毒基因组的编码序列大于90%；5单倍体基因组,6基因有连续的和间断的,7相关基因丛集；8基因重叠9病毒基因组含有不规则结构基因,主要类型有：a几个结构基因的编码区无间隔；bmRNA没有5端的帽结构；c结构基因本身没有翻译起始序列.10 原核生物基因组的结构的功能特点：1基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成.2基因组中只有1个复制起点.3具有操纵子结构.4编码顺序一般不会重叠.5基因是连续的,无内含子,因此转录后不需要剪切.6编码区在基因组中所占的比例约占50%远远大于真核基因组,但又远远小于病毒基因组.7基因组中重复序列很少8具有编码同工酶的基因.9细菌基因组中存在着可移动的DNA序列,包括插入序列和转座子.10在DNA分子中具有多种功能的识别区域.11真核生物基因组结构与功能的特点：1每一种真核生物都有一定的染色体数目,除了配子为单倍体外,体细胞一般为双倍体.2真核基因组远远大于原核生物的基因组,结构复杂,基因数庞大.3都由一个结构基因与相关的调控区组成,转录产物为单顺反子.4含有大量重复顺序.5基因组内非编码的顺序占90%以上.6真核基因是断裂基因,7功能相关的基因构成各种基因家族,它们可串联在一起,亦可相距很远,但即使串联在一起的成簇的基因也是分别转录的.8真核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素,这些DNA顺序并无明显生物学功能,似乎为自己的目的而组织,故有自私DNA之称.12 根据同源性程度,主要分五种类型：1核酸序列相同,实际上是多拷贝基因；2核酸序列高度同源,如人类生长激素基因家族；3编码产物具有同源功能区；4编码产物具有小段保守基序；5基因超家族.13 DNA复制的基本过程：1DNA双链解开；2RNA引物的合成；3DNA链的延长；4切除引物、填补缺口、连接相邻DNA片段；5切除和修复错配碱基.14 DＮＡ的损伤方式：１转换：由一种嘧啶变成另一种嘧啶,或种嘌呤变成另一种嘌呤；２颠换：嘧呤与嘌呤互换.转换和颠换只引起ＤＮＡ局部的改变,而ＤＮＡ其它部分的结构不受影响,故称为点突变.３丢失或插入一个或一段核苷酸,可能使下游ＤＮＡ的编码发生改变,此称为移码突变４链内或链间发生共价连结.１５ＤＮＡ损伤的修复：１光修复２切除修复３重组修复４ＳＯＳ修复１６切除修复的机制：通过一种特殊的内切核酸酶将ＤＮＡ分子中的损伤部分切除,同时以另一条完整的ＤＮＡ链为模板,由ＤＮＡ聚合酶Ｉ催化填补被切除部分的空隙,再由ＤＮＡ连接酶封口,使ＤＮＡ恢复正常的结构.１７大肠杆菌的一种需糖基化酶的切除修复过程：１ＤＮＡ糖基化酶识别受损的或错误的碱基,水解糖苷键,释出游离碱基,在ＤＮＡ单链上形成无嘌呤或嘧啶的空位,称为ＡＰ部位；２特异的ＡＰ内切核酸酶在ＡＰ部位切开磷酸二酯键,再由外切核酸酶切下ＡＰ部位的核苷酸；３ＤＮＡ聚合酶Ｉ修补缺口；４ＤＮＡ连接酶封口,完成修复过程.１８逆转录酶功能：１具有ＲＮＡ指导的ＤＮＡ聚合酶活性,能和其它ＤＮＡ聚合酶一样沿５－３方向合成ＤＮＡ,并需要引物提供３－ＯＨ；２具有ＲＮＡ酶Ｈ活性,能特异性水解ＲＮＡ－ＤＮＡ杂交体上的ＲＮＡ；３具有ＤＮＡ指导的ＤＮＡ聚合酶活性,以逆转录合成的单链ＤＮＡ为模板合成互补ＤＮＡ链.１９遗传密码的特点：１起始密码子和终止密码子；２方向性：５－３；３连续性４简并性；５通用性６摆动性.２０常见的摆动现象１反密码子的第一位常出现稀有碱基次黄嘌呤,它可以与密码子的第三位的Ａ、Ｃ或Ｕ配对；２反密码子中的Ｕ可以与密码子中的Ａ或Ｇ配对；３反密码子中的Ｃ可以与密码子中的C、G或U配对.21 核糖体在蛋白质生物合成中的作用：1容纳mRNA的通道,2能够结合起始因子,延长因子及终止因子等参与蛋白质生物合成的因子；3具有结合氨酰-tRNA的部位A位或P位；4具有转达肽酶活性,催化肽键形成；5大亚基上具有延长因子依赖的GTP酶活性,它可能为肽提供能量.22 严谨反应机制：在氨基酸缺乏时,游离核糖体与空载的tRNA增加,在ATP 存在下,产生pppGpp鸟苷-5-磷酸和ppGpp鸟苷-4-磷酸.后者与RNA聚合酶形成ppGpp-RNA聚合酶复合物,进而使RNA聚合酶构象改变,活性降低,rRNA和rRNA合成减少或停止.22 葡萄糖效应及机制：细菌通常优先以葡萄糖作为能源,当培养环境中有葡萄糖时,即使加入乳糖、阿拉伯糖等其它糖,细菌也不利用这些糖,不产生代谢这些糖的酶,直到葡萄糖消耗完毕,代谢其它糖的酶才会根据相应的糖是否存在而被诱导产生,这种现象称为——这是由于葡萄糖代谢产物能抑制细胞腺苷酸环化酶和激活磷酸二酯酶的活性,结果使细胞人cAMP水平降低.当葡萄糖耗尽时,细胞内cAMP水平升高,即可通过CAP调控其它操纵子的表达.23真核生物基因表达在DNA水平的调控方式：1染色质丢失2基因扩增3基因重排4DNA甲基化5染色质结构对基因表达的调控作用.24 反式因子的主要特点：1一般具有三个功能结构域：DNA识别结合域、转录活性域、结合其它蛋白的结合域.这些功能区含有几十到几百个氨基酸残基2能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件.3对基因表达有正性和负性调控作用,即渡海和阻遏基因的表达.25反式作用因子的激活方式及作用方式：激活方式1表达式调节；2共价修饰；3配体结合4蛋白质与蛋白质相互作用.作用方式1成环2扭曲3滑动4Oozing.26 mRNA的选择剪接方式：1外显子选择2内含子选择3互斥外显子4内部剪接位点.27 细胞通讯方式：1细胞间隙连接2膜表面分子接触通讯3化学信号通讯.28 受体发挥其识别和信号转换作用时特点：1高度特异性2高亲和力3可饱合性4可逆性.29MAPK作为细胞内的的关键信号转导分子,如何发挥作用：MAPK由其上游分子MAPKK和MAPKKK通过逐级磷酸化反应而激活.细胞受到生长因子或其它因素刺激后,MAPKK可将AMPK的一个Thr磷酸化,从而使MAPK转变为有活性状态.具体表现为各自的逐级磷酸化,MAPK被激活以后,可转移至细胞核内.在核内,它可使一些转录因子发生磷酸化,从而改变细胞内基因表达的状态.另外,它也可以使一些其它的酶发生磷酸化使之活性发生改变.30 细胞转导信号的基本路线和方式可以表示为：小分子信使浓度或分布变化外源信号—受体—大分子信使化学修饰效应分子构象变化—细胞应答反应蛋白质相互作用31G蛋白偶联受体的信号传递的基本过程包括：1配体与受体结合；2受体激活G蛋白3G蛋白激活或抑抑细胞中的效应分子；4效应分子改变细胞内小分子信使的含量与分布；5细胞内小分子信使作用于相应的靶分子,使之构象改变,从而改变细胞的代谢过程及基因表达等功能.32 G蛋白的循环或活化过程：当物理或化学信号刺激受体时,受体活化,与G蛋白结合并使之发生构象改变.A亚基与GDP的亲和力下降,结合的GDP为GTP所取代.A亚基结合了GTP 后即与BR亚基发生解离,成为活化状态的A亚基.活化了的A亚基此时可以作用于下游的各种效应分子.这种活化状态将一直持续到GTP被A亚基自身具有的GTP酶水解为GDP.33 小分子细胞内信使一般具有的三个特点：1不位于能量代谢途径的中心；2在细胞中的浓度或分布可以迅速地改变；3作为变构效应剂作用于相应的靶分子,已知的靶分子主要为各种蛋白激酶.34 表皮生长因子受体EGFR介导的信号转导途径EGFR——Ras——MAPK1受体二聚体的形成及其磷酸化；2募集接头蛋白Grb2：3调控分子SOS 的活化4低分子量G蛋白Ras的活化；5MAPK的级联激活；6转录因子的磷酸化及其转录调控作用.35 r——干扰素受体介导的细胞转导途径：r-干扰素与受体结合以后.也可以导致受体二聚体化,二聚体化的体可以激活JAL-STAT系统,后者将干扰素刺激信号传入核内.JAK为一种存在于胞浆中的蛋白酪氨酸激酶,它活化后可使干扰素受体磷酸化.STAT可以通过其SH2结构域识别磷酸化的受体并与之结合,然后STAT分子亦发生酪氨酸的磷酸化,酪氨酸磷酸化的STAT形成二聚体并进入胞核.二聚体STAT分子作为有活性的转录因子,影响相关基因的表达,进而改变靶细胞的增殖与分化.36 Klenow片段的用途：1补齐双链DNA的3末端；2通过补齐3端使3末端标记；3在cDNA克隆中,第二股链的合成.4DNA序列分析.37 几种常见修饰酶：1DNA聚合酶I：这个酶除有聚合酶活性外,尚有3-5及5-3核酸外切酶活性.由于它具有5-3核酸外切酶活性,当用缺口平移法标记DNA探针时,常用DNA聚合酶I.2逆转录酶：逆转录酶以RNA为模板合成DAN,合成时需要4种脱氧核苷酸及引物,合成方向为5-3延伸,无3-5外切酶活性.广泛用于mRNA为模板合成cDNA,构建cDNA文库.3T4DNA连接酶：催化双链DNA一端3-OH与另一双链DNA的5端磷酸根形成3、5-磷酸二酯键,使具有相同粘性末端或平端的DNA末端连接起来.4碱性磷酸酶：去除DNA或RNA 5 端的磷酸根,制备载体时,用碱性磷酸酶处理后,可防止载体自身连接,提高重组效率.5末端脱氧核苷酰转移酶：TdT：将脱氧核苷酸加到DNA的3-OH上,主要用于探针标记；或者在载体和待克隆的片段上形成同聚物尾,以便于进行连接.6TaqDNA聚合酶和其它耐热DNA聚合酶.38 作为克隆载体的质粒具备以下特点：1分子量相对较小,能在细菌内稳定存在,有较高的拷贝数.2具有一个以上的遗传标志,便于对宿主细胞进行选择,3具有多个限制酶的单一切点,称为多克隆位点MCS.39 粘性质粒的特点：1含有质粒的抗药性标记2带有入噬菌体的粘性末端cos区；3具有一个或多个限制酶的酶切位点；4其本身分子量小,容纳40kb 左右的DNA片段；5由于非重组粘性质粒很小,不能在体外包装,因而体外包装的主要是重组体,有利于以后的筛选.40 M31噬菌体的优点：1噬菌体颗粒中所含有的是单链DNA,该单链DNA可作为模板用于DNA序列分析；2利用单链M13克隆可制备成单链DNA探针用于杂交分析,检测DNA或RNA,或者作为基因定点诱变的载体.41大肠杆菌与哺乳动物表达载体的不同：大肠杆菌：含有复制位点、抗性基因、克隆位点,可导入大肠杆菌,与克隆载体一样,表达载体中含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号.哺乳动物：真核表达载体中含有一套真核表达元件：；启动子/增强子-克隆位点-终止信号和加polyA信号.42 重组DNA的目的和基本过程：目的：1克隆某个特定的基因；2建立基因组文库、cDNA文库,3将特定的基因片段进行亚克隆以进行DNA序列测定；4构建表达载体以便在特定的宿主细胞中表达某个基因.过程：1制备目的基因和相关载体2将目的基因和有关载体进行连接3将重组的DNA导入受体细胞4DNA重组体的筛选和鉴定5DNA重组体的扩增、表达和其它研究.43 cＤＮＡ的合成过程：先从细胞中提取高质量的mＲＮＡ.因mＲＮA有polyA尾巴,可用12~18寡聚dT片段作为引物,加入4种dNTP,AMV或MMLV逆转录酶催化第一股链的合成.然后用RNaseH去掉mRNA,剩下的单链DNA的3端往往有自发回折原因不明形成的发夹结构,正好可以作为合成第二条DNA链的引物；由T4DNA 聚合酶催化第二股链的合成,即得到双链cDNA的混合体,采用S1核酸酶处理,可得到平端的双链cDNA.44 目的基因的筛选与鉴定：首先筛选出转化菌；然后筛选出带有重组体的克隆；最后是对DNA重组体进行鉴定.方法：遗传学方法插入灭活法、a-互补；免疫学方法；核酸杂交法；PCR技术；酶切鉴定.45 真核细胞转染的基本方法：1磷酸钙共沉淀法2电穿孔法3DEAE-葡萄糖法4脂质体介导基因导入5显微注射法46 在大肠杆菌中表达外源基因,主要考虑以下基本要素：1目的基因如果来自真核细胞必须是cDNA,因为大肠杆菌没有剪切内含子的功能.2从真核基因转录的mRNA缺乏结合细菌核糖体的SD序列,因此,cDNA的起始密码子ATG上游部分5端非编码区是无用的,必须除去.3所用表达载体必须是大肠杆菌表达载体.含有大肠杆菌RNA聚合酶所能识别的启动子和SD序列.47 寡核苷酸介导的诱变技术步骤：1将目的DNA片段插入M13噬菌体载体；2以重组噬菌体制备单链DNA；3设计并合成诱变寡核苷酸引物；4诱变寡核苷酸引物与靶单链DNA杂交；5利用Klenow片段在杂交的寡核苷酸上延伸；6用T4DNA 连接酶将新合成的杂合双链DNA连接成双链闭环DNA分子；7转化宿主细菌；8筛选含有诱变DNA片段的重组噬菌体；9以含有诱变DNA的重组噬菌体制备单链DNA；10测序证实M13噬菌体DNA带有目标诱变而无其它诱变.最后从重组M13噬菌体RF型DNA中回收诱变的DNA片段,克隆到其它适当的载体中,对诱变DNA片段进行进一步研究.48 双脱氧链终止法基本原理：和模板互补结合的引物在DNA聚合酶作用下发生互补链的延伸反应,反应体系中的2,3-双脱氧核苷三磷酸ddNTP与底物脱氧核苷三磷酸竞争结合于延伸互补链末端,造成延伸终止.由于产生一系列分别终止于A、G、C、T位置的不同大小的DNA片段,应用高分辨率聚丙烯酰胺凝胶电泳可分辨仅相差一个核苷酸的20-500碱基的DNA片段,结合放射自显影技术,便能直接读出模板DNA的待测序列.双脱氧终止法测定DNA序列的片段通常克隆于M13或质粒pUC载体,利用多克隆位点两侧的通用引物进行测序反应.较长链的待测DNA片段可采用随机法、嵌套缺失法和引物延伸法进行序列测定.Maxam-Gilbert法基本原理：采用化学试剂处理末端放射标记的DNＡ单链片段,造成碱基特异性切割,由此产生一组具不同长度的ＤＮＡ链的反应混合物,经凝胶电泳按分子大小分离和放射自显影,直接读出待测ＤＮＡ的核苷酸顺序.激光测序技术：应用荧光基团标记引物或４种ddＮＴＰ,采用双脱氧链终止法原理进行测序反应,双脱氧核苷酸终止产物经荧光激发产生信号,通过计算机自动读出被测序列.４９温度对ＤＮＡ复性杂交的影响：温度过高不利于核酸复性,而温度过低,少数碱基配对形成的局部双链不易解离,适宜的复性温度是较Ｔm值低２５℃.在０度时杂交进行非常缓慢,随着温度的升高,杂交率也明显增加,当温度比Ｔm值低２０－２５度时,ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交达到最高杂交率.但在更高温度情况下,双链分子逐渐趋向解链,当温度达到Ｔm－５度时杂交率即非常低.１错配率第增加１％,Ｔm值应相应下降１０－１５度；２ＲＮＡ／ＤＮＡ杂交体的稳定性较ＤＮＡ／ＤＮＡ的稳定性高,Ｔm值应相应增加１０－１５度；３ＲＮＡ／ＲＮＡ杂交体的Ｔm值应相应增加２０－２５度,因此,采用ＲＮＡ探针时,加入适量的甲酰胺以降低Ｔm值是必需的；４寡核苷酸探针的碱基数很少,可以采用下式计算寡核苷酸探针Ｔm值：Ｔm=4G+C+2A+T；寡核苷酸探针杂交反应一般在低于Ｔm值５度下进行.５０常用的Ｓouthern转膜方法：１毛细管虹吸印迹法：２电转印法３真空转移法５１Ｓouthern\Northern印迹法区别：１靶核酸：Ｎ所检测的靶核酸是ＲＮＡ,Ｓ是ＤＮＡ２ＲＮＡ电泳：ＲＮＡ样品依其分子量大小在变性胶中进行分离,凝胶中需加入变性剂,防止ＲＮＡ分子形成二级结构,维持其单链线性状态.３转膜：电泳结束后,不需要再进行变性和中和,直接采用毛细管虹吸法将胶中的ＲＮＡ转移到膜上,也可采用电转移或真空转移法.５２核酸原位杂交步骤：１组织或细胞的固定２组织细胞杂交前的预处理３探针的选择和标记４杂交５杂交结果检测.５３ＲＮＡ酶保护分析法ＲＰＡ基本程序步骤：１制备待测ＲＮＡ２ＲＮＡ探针的标记３杂交４除去单链ＲＮＡ５电泳分析５４探针及标记物的种类：探针１cＤＮＡ探针２基因组ＤＮＡ探针３寡核苷酸探针４ＲＮＡ探针. 标记物：１核素标记物２非核素标记物：半抗原、配体、荧光素、化学发光探针.５５核酸体外标记法分为化学法和酶法：１化学法：利用标记物分子上的活性基团与探针分子上的基团如磷酸基团发生的化学反应将标记物直接结合到探针分子上.２酶法酶促标记法：将标记物预先标记在核酸苷酸ＮＴＰ或dＮＴＰ分子上,然后利用酶促反应将标记的核苷酸分子掺入到探针分子中去,或将核苷酸分子上的标记基团交换到探针分子上.５６酶促标记法：１缺口平移法；２随机引物法３ＰＣＲ标记法４末端标记法５７缺口平移法原理：利用适当浓度的ＤＮaseＩ在ＤＮＡ双链上随机切割单链,造成单链切口.切口处产生一个５末端和一个３末端,３末端即可作为引物,在大肠杆菌ＤＮＡ聚合酶Ｉ的５－３ＤＮＡ聚合酶活性的催化下,以互补的ＤＮＡ单链为模板,依次将dNTP连接到切口的３端羟基上,合成新的ＤＮＡ单链；同时ＤＮＡ聚合酶Ｉ的５－３核酸外切酶活性在切口处将旧链人５末端逐步切除,新合成链不断延伸,从而使原ＤＮＡ分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代.５８ＰＣＲ基本过程：１变性：通过加热至９５度左右,使ＤＮＡ双螺旋的氢键断裂,形成单链ＤＮＡ,作为反应的模板.２退火：将温度降至引物的Ｔm值左右或以下,引物与ＤＮＡ模板互补区域结合,形成杂交链.３延伸：当反应体系温度升至７０度左右时,ＴaqDNA聚合酶催化以引物为起始点的５－３ＤＮＡ链延伸反应,形成新生ＤＮＡ链.５９ＰＣＲ引物设计的基本要求：１引物长度一般为１５－３０个核苷酸.２引物中的碱基组成尽可能随机分布,避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象.３引物自身不应存在互补序列,尤其应避免折叠成发夹结构.４两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免３端的互补重叠.５引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过７０％,引物３末端连续８个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列,否则易导致非特异性扩增６引物３端碱基是引发延伸的起点,因此一定要与模板ＤＮＡ配对７引物与模板结合时,引物的５端最多可以游离十几个碱基而不影响ＰＣＲ反应的进行.６０ＰＣＲ技术的要类型：１筑巢ＰＣＲ２共享引物ＰＣＲ３多重ＰＣＲ４不对称ＰＣＲ５锚定ＰＣＲ６反向ＰＣＲ７彩色ＰＣＲ８原位ＰＣＲ９定量ＰＣＲ１０差异显示ＰＣＲ１１重组ＰＣＲ.６１ＰＣＲ反应体系包括：核酸模板、引物、ＴaqＤＮＡ聚合酶、缓冲液、Ｍg2+、dＮＴＰs、反应温度与循环次数.６２转基因动物及基本原理：转基因动物是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物.基本原理：将目的基因或基因组片段用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中,使目的基因整合到基因组中,然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物园的输卵管或子宫中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物.导入基因的方法有显微注射法、胚胎干细胞法、逆转录病毒感染法、精子载体法.转基因动物中外源ＤＮＡ的检测：１染色体及基因水平的检测：斑点杂交、Ｓouthern杂交和ＰＣＲ分析、原位杂交等；２转录水平的检测：利用Northern杂交、RNase保护分析及ＲＴ－ＰＣＲ方法检测转基因mRNA的存在及表达水平.３蛋白质水平检测,采用Western印迹分析法.６３转基因动物的应用：１对基因组织或阶段特异表达的研究２通过研究转入外源基因后的新表型,可以发现基因的新功能；３导入外源基因后,由于基因的随机插入,可能会导致内源基因的突变,对这些突变表型进行分析,可以发现新的基因４可用于只在胚胎期才表达的基因的结构和功能的研究５建立研究外源基因表达、调控的动物模型６对遗传性疾病的研究７建立人类疾病的动物模型,８动物新品种的培育９基因产品的制备１０在免疫学中,可用于对免疫机制、免疫相关疾病的研究及建立免疫性疾病动物模型等.６４转基因植物技术路线：１选择及获得外源目的基因,２受体细胞培养,３选用适当的转基因方法将目的基因导入受体细胞４将转化细胞进行适当培养５筛选阳性转化细胞６培植阳性转化植株７转基因植株的鉴定.６５转基因植物在医学上的应用：１可成为新的疫苗来源,植物病毒也成为人类疫苗的可能来源２因为植物病毒对动物不致病,因此可利用植物病毒表达抗原蛋白的片段,以诱导哺乳动物免疫系统发生反应.３还可产生单抗,作为化疗药物的靶向载体.６６基因打靶的必备条件：１胚胎干细胞：ＥＳ细胞的特点：能在体外培养,并保留发育的全能性.体外培养要维持细胞的分裂增殖与正常的核型,同时抑制细胞的分化.２打靶载体：a、neo阳性筛选标志：b、ＨＳＶ－tk阴性筛选标志：６７构建打靶载体的基本过程：１获得目的基因待敲除基因的同源片段,将此ＤＮＡ片段克隆到一般的质粒载体中；２从重组质粒中切除目的基因的大部分同源ＤＮＡ序列,只留部分序列在线性质粒载体的两端；３将neo基因克隆到带有目的基因同源顺序的线性质粒中,使之位于残留目的基因同源顺序的中间；４在目的基因同源顺序的外侧线性化重组质粒载体,将ＨＳＶ－tk基因克隆到此线性载体中.６８ＤＮＡ芯片技术的应用：１ＤＮＡ序列测定２基因表达分析３基因组研究４基因诊断５药物研究与开发药物筛选、新药发现、合理用药、中草药鉴定和真假药辨别６９引起ＤＮＡ一级结构变异的诱变剂的作用机制：１碱基类似物诱发突变２改变ＤＮＡ的化学结构３结合到ＤＮＡ分子上诱发移码突变４紫外线及其其它射线引起的ＤＮＡ分子变化.７０突变类型：点突变转换和颠换、缺失一个。
分子生物学练习题库含答案
分子生物学练习题库含答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、乳腺癌分子生物学检测的意义不包括A、帮助减轻化疗的不良反应B、预测早期乳腺癌复发、转移的风险C、反映肿瘤的生物学行为D、筛选易感人群E、筛选适合内分泌、化疗及靶向治疗的患者正确答案：A2、目前测序读长最大的测序反应：A、边合成边测序B、双脱氧终止法C、连接测序D、化学裂解法E、焦磷酸测序正确答案：B3、DNA 芯片的固相载体不可以用A、半导体硅片B、玻璃片C、滤纸D、硝酸纤维素膜E、尼龙膜正确答案：C4、检测靶序列是 DNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A5、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是A、NC 膜B、尼龙膜C、化学活性膜D、滤纸E、PVC 膜正确答案：E6、关于 PCR-RFLP 错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR 产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR 扩增正确答案：D7、结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：B8、人类基因组的碱基数目为A、4.0×10 bp6B、3.0 × 109bpC、4.0×10 bp8D、2.9×10 bp6E、4.0×10 bp9正确答案：B9、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，可使比值降低的是 ( ) ：A、蛋白质B、牛血清白蛋白C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：A10、DNA 提取中不能有效去除蛋白质的是A、酚/氯仿抽提B、SDSC、高盐洗涤D、蛋白酶 KE、RNase正确答案：E11、关于梅毒螺旋体的实验室检测，下列描述正确的是A、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染B、诊断梅毒的传统方法是体外培养C、镜检法简便，特异性高，但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查，对早期梅毒诊断敏感E、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法正确答案：E12、第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A13、SNP 的实质不包括A、碱基转换B、碱基颠换C、碱基缺失D、碱基插入E、碱基转录异常正确答案：E14、遗传病的最基本特征是A、酶的缺陷B、染色体畸变C、先天性D、患儿发病的家族性E、遗传物质发生了改变正确答案：E15、PCR 反应中延伸的时间取决于A、引物长度B、待扩增片段的长度C、模板的纯度D、Taq DNA 聚合酶的量E、模板的含量正确答案：B16、下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA ( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D17、HBV DNA 定量达多少以上可以提示复制活跃( )A、107 copies/mlB、106 copies/mlC、105 copies/mlD、108 copies/mlE、104 copies/ml正确答案：A18、最早应用于 HLA 基因分型的方法是A、RFLP 分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO 技术E、PCR-SSP 技术正确答案：A19、用于基因定位的技术是：A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案：D20、有关 HBV 长链和短链叙述正确的是A、长链和短链 DNA 的5’端位置是固定的，短链3’端的位置是可变的B、长链和短链 DNA 的3’端位置是固定的，短链5’端的位置是可变的C、短链 DNA 的3’端位置是固定的，长链和短链5’端的位置是可变的D、短链 DNA 的5’端位置是固定的，长链和短链3’端的位置是可变的E、长链 DNA 的5’端位置是固定的，长链和短链3’端的位置是可变的正确答案：A21、一般来说，设计的寡核苷酸探针的长度为：A、17~50bpB、200~300bpC、60~100bpD、100~200bpE、2~10bp正确答案：A22、引起急性移植排斥反应最重要的抗原是A、ABO 血型抗原B、HLA 抗原C、超抗原D、异嗜性抗原E、Rh 血型抗原正确答案：B23、对于相同大小的核酸片段，最快的转移方法是A、电转移B、向下虹吸转移C、真空转移D、虹吸转移E、毛细管电泳正确答案：C24、受精卵中的线粒体A、几乎全部来自精子B、几乎全部来自卵子C、精子与卵子各提供 1/2D、不会来自卵子E、大部分来自精子正确答案：B25、关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案：E26、以下为荧光染料技术的优点，不正确的是A、适合任何一个反应体系B、荧光信号量与PCR 反应产物量成正比，可以实时监测C、荧光信号的检测在每一次循环延伸后，简单方便D、不需要进行凝胶分离等二次处理 PCR 产物，避免污染E、特异性高正确答案：E27、下列属于单基因遗传病的是A、原发性高血压B、冠心病C、珠蛋白生成障碍性贫血D、精神与神经疾病E、糖尿病正确答案：C28、目前被 DNA 自动化测序技术广泛采用的酶是A、大肠杆菌 DNA 聚合酶ⅠB、Klenow 片段C、测序酶D、耐热 DNA 聚合酶E、限制性内切核酸酶正确答案：D29、下列不符合转座因子含义的是A、转座因子是 DNA 重组的一种形式B、可在质粒与染色体之间移动的DNA 片段C、转座子是转座因子的一个类型D、可移动的基因成分E、能在一个 DNA 分子内部或两个 DNA 分子之间移动的 DNA 片段正确答案：A30、熔解曲线分析的描述中错误的是A、利用核酸序列不同其熔解曲线不同的原理B、检测突变的技术C、可区分杂合体和纯合体D、PCR 扩增产物需纯化处理后分析E、可用于病原微生物基因型分析正确答案：D31、第二代测序技术不能应用于A、从头测序、重测序B、转录组及表达谱分析C、小分子 RNA 研究D、个体基因组测序和 SNP 研究E、直接测甲基化的DNA 序列正确答案：E32、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用 ( ) ：A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案：E33、目前所知的原癌基因激活机制不包括A、癌基因甲基化程度降低B、原癌基因扩增C、点突变D、抑癌基因的丢失E、异位激活正确答案：D34、关于定量 PCR 的描述，不正确的是A、可以定量或半定量检测PCR 产物的方法B、定量 PCR 主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中TaqMan 探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E、定量 PCR 在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染正确答案：A35、组织 DNA 提取中，EDTA 的作用是A、抑制 DNaseB、沉淀 DNAC、减少液体表面张力D、抑制 RNaseE、去除蛋白质正确答案：A36、在 Southern 印迹中常用的核酸变性剂是A、甲醛B、碳酸钠C、氢氧化钠D、盐酸E、乙醛正确答案：C37、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT)，有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便，成为探针的重要来源正确答案：E38、预杂交中下列不能起封闭作用的是A、ssDNAB、BSAC、小牛胸腺 DNAD、脱脂奶粉E、DTT正确答案：E39、常见基因芯片合成的两大类方法是( )A、原位合成和直接点样B、光引导原位合成和喷墨合成C、离片合成和直接点样D、分子印章多次压印合成和在片合成E、原位合成和在片合成正确答案：A40、首个被证实和克隆的乳腺癌易感基因是A、BRCA1B、BRCA2C、c-erbB-2/HER2D、ATME、p53正确答案：A41、核酸序列的基本分析不包括A、统计分析B、序列变换分析C、限制性酶切分析D、分子量、碱基组成、碱基分布E、测序分析正确答案：A42、有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案：B43、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是 ( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测，避免浪费C、检测快速准确D、同时检测TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案：E44、FMR-1 基因上 CGG 重复序列异常扩增导致A、镰状细胞贫血B、脆性 X 综合征C、地中海贫血D、血友病 AE、血友病 B正确答案：B45、在如下情况时，可考虑通过基因连锁分析进行分子生物学检验A、基因结构变化未知B、基因插入C、基因表达异常D、基因点突变E、基因缺失正确答案：A46、平台效应的出现与下列哪个因素关系最密切：A、引物浓度B、初始模板量C、TaqDNA 聚合酶浓度D、Mg2+浓度E、反应变性时间正确答案：B47、重复序列通常只有 1~6bp，重复 10~60 次并呈高度多态性的 DNA 序列称为A、微卫星 DNAB、小卫星 DNAC、cDNAD、高度重复顺序 DNAE、单拷贝顺序 DNA正确答案：B48、Southern 印迹转移的步骤不包括 ( )A、用限制性内切酶消化 DNAB、DNA 与载体的连接C、用凝胶电泳分离 DNA 片段D、DNA 片段转移到硝酸纤维素膜上E、用一个标记的探针与膜上 DNA 杂交正确答案：B49、表达谱芯片主要用于分析( )A、蛋白质之间作用B、差异基因表达C、单个碱基缺失D、SNPE、目标序列富集正确答案：B50、线粒体疾病的遗传特征是A、近亲婚配的子女发病率增高B、母系遗传C、发病率有明显的性别差异D、女患者的子女约 1/2 发病E、交叉遗传正确答案：B51、被称为第 3 代 DNA 遗传标志的是：A、RFLPB、VNTRC、SNPD、STRE、EST正确答案：C52、被称为细菌“分子化石”的是A、16SrRNAB、IS6110 插入序列C、rfbEO157D、fliCH7E、rpoB正确答案：A53、PCR-SSCP 描述中错误的是A、检测核酸点突变的技术B、需制备成单链 DNAC、根据空间构象由 DNA 的碱基组成决定的原理D、不需电泳E、敏感性与待分离 DNA 的长度有关正确答案：D54、有关 PCR 的描述下列不正确的是A、是一种酶促反应B、引物决定了扩增的特异性C、由变性、退火、延伸组成一个循环D、循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量E、扩增的对象是 DNA 序列正确答案：D55、开展耳聋基因诊断有重要临床意义，但不包括A、可以预测耳聋疾病的病情和预后B、可作为有效治疗耳聋的手段之一C、可以了解患者发生耳聋的分子病因D、可以预测下一代出现耳聋的概率E、可作为听力筛查的一个有效辅助手段正确答案：B56、下列哪一项 PCR 技术可以检测固定组织的DNA 或RNA：A、反转录 PCRB、单细胞 PCRC、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案：C57、DCC 基因突变的主要方式不包括A、等位基因杂合性缺失B、5’端纯合性缺失C、3’端纯合性缺失D、DCC 基因过甲基化E、外显子的点突变正确答案：C58、HBV 的外膜主蛋白是由A、Pre-S1 基因编码的B、Pre-S2 基因编码的C、S 基因编码的D、Pre-S1、Pre-S2 和 S 基因三部分基因区共同编码的E、Pre-S2 和 S 基因区共同编码的正确答案：C59、基因芯片技术的主要步骤不包括( )A、信号检测B、酶切分析C、芯片的设计与制备D、杂交反应E、样品制备正确答案：B60、以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B、在进化过程中，基因序列呈高度保守性C、通过表达产物 DNA 来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案：C61、以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针接合，则该样本为A、不能确定B、纯合体患者C、正常人D、携带者E、杂合体患者正确答案：D62、下列不是临床分子生物学实验室分析前质量控制内容的是A、所用试剂和耗材的质量符合要求B、实验室严格分区C、进行核酸提取的有效性评价D、临床标本的采集、运送和保存符合要求E、定期进行仪器设备的功能检查、维护和校准正确答案：C63、唯一一个在结肠上皮增殖过程中起看门作用的基因是A、MCC 基因B、DCC 基因C、APC 基因D、p53 基因E、HNPCC 基因正确答案：C64、HBV 耐药性的检测在临床上主要是针对A、HBV DNA 聚合酶 S 基因的检测B、HBV DNA 聚合酶 P 基因的检测C、HBV DNA 聚合酶 C 基因的检测D、HBV DNA 聚合酶前 C 基因的检测E、HBV DNA 聚合酶 X 基因的检测正确答案：B65、众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、乳腺癌B、肺癌C、前列腺癌D、结直肠癌E、肝癌正确答案：D66、关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E67、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、已明确母亲为携带者的婴儿B、有 FraX 体格或性格阳性征象者C、发育迟缓或自闭症的患者D、未诊断的 MR 家族史E、没有 FraX 家族史正确答案：E68、荧光定量 PCR 反应中，Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要，以 DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C69、组织 DNA 提取中，苯酚-氯仿抽提离心分三层，DNA 位于A、上层B、中间层C、下层D、中间层和下层E、上下层均有正确答案：A70、变性剂可使核酸的Tm 值降低，常用的变性剂是A、甲酰胺B、稀盐酸C、甲醇D、氢氧化钠E、浓盐酸正确答案：A71、限制性长度多态性是由于以下哪项所致A、碱基变化发生在微卫星序列上B、碱基变化发生在酶切位点上C、碱基变化发生在外显子D、碱基变化发生在增强子上E、碱基变化发生在内含子正确答案：B72、EB 作为核酸电泳指示剂的原理是 ( )A、EB 是一种可视物质B、EB 是核酸转性染料C、EB 特异性结合核酸分子D、EB 在紫外下发射荧光E、EB 插入核酸分子之间并在紫外下产生荧光正确答案：E73、连接酶链反应的描述错误的是A、需要 DNA 聚合酶B、靶 DNA 序列已知C、一对引物在模板上的位置是紧密相连的D、产物是被连接起来的引物E、属于探针序列扩增正确答案：A74、可以用来判断不同生物体之间的基因组 DNA 信息的是哪一种 PCR 技术：A、反转录 PCRB、原位 PCRC、连接酶链反应D、随机扩增多态性 PCRE、原位杂交 PCR正确答案：D75、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的DNA 片段D、克隆于真核载体的DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案：E76、基因诊断与其他诊断比较，最主要的特点在于 ( )A、诊断费用低B、诊断周期短C、针对病变细胞D、针对基因结构E、取材方便正确答案：D77、能发出γ-射线的放射性核素是A、3HB、14CC、32PD、35SE、125I正确答案：E78、与耳聋有关的最主要的 mtDNA 突变是A、点突变B、插入或缺失C、大片段重组D、拷贝数变异E、异质性突变正确答案：A79、HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案：A80、STR 法医鉴定的基础是A、蛋白质空间结构B、孟德尔遗传定律C、基因多态性D、碱基配对原则E、基因扩增技术正确答案：B81、原核生物基因组特点不应包括：A、重复序列B、插入序列C、断裂基因D、操纵子结构E、转录产物为多顺反子正确答案：C82、HIV-1 中最易发生变异的基因是A、tatB、nefC、gagD、envE、pol正确答案：D83、质粒 DNA 提取中，沉淀 DNA 的是A、70%乙醇B、无水乙醇C、酚/氯仿D、SDSE、异丙醇正确答案：B84、单核苷酸多态性检测芯片探针的设计不正确的是 ( )A、一般采用等长移位设计法B、包括与靶序列完全匹配的野生型探针C、三种不同的单碱基变化的核苷酸探针D、靶序列与探针完全匹配的杂交点显示较弱的荧光信号E、可以对某一段核酸序列所有可能的 SNPs位点进行扫描正确答案：D85、双脱氧终止法测定核酸序列时，使用 ddNTP 的作用是：A、作为 DNA 合成的正常底物B、形成特异性终止链C、标记合成的DNA 链D、使电泳时 DNA 易于检测E、使新合成的 DNA 链不易形成二级结构正确答案：B86、下列属于抑癌基因的是 ( )A、c-erb-2B、sisC、mycD、RbE、ras正确答案：D87、理想的质控品应具备的条件不包括A、稳定、价廉、同一批次可大量获得B、含有未灭活的传染性病原体C、基质与待测样本一致D、阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平E、靶值或预期结果已知正确答案：B88、在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、基因结构变化未知B、基因片段插入C、表达异常D、基因片段缺失E、点突变正确答案：A89、可抑制RNA 酶活性防止其对 RNA 样品降解的是( )A、Tris-HClB、EDTAC、酚试剂D、氯仿E、DEPC正确答案：E90、下列有关遗传病的叙述中正确的是A、遗传病一定是先天性疾病B、遗传病是指由遗传物质改变而引起的疾病C、先天性疾病都是遗传病D、遗传病都是由基因突变引起的E、遗传病只能诊断不能治疗正确答案：B91、下列不可以作为核酸探针使用的是A、microRNAB、单链 DNAC、寡核苷酸D、mRNAE、病毒 RNA正确答案：A92、基因诊断对下列哪些疾病最具有确切的临床诊断意义A、多基因遗传病B、染色体疾病C、畸形D、单基因遗传病E、肿瘤正确答案：D93、在 pH 为下述何种范围时，Tm 值变化不明显A、pH 为 8~11B、pH 为 3~5C、pH 为 5~9D、pH 为 5~6E、pH 为 4~5正确答案：C94、原核生物基因组中没有( )A、内含子B、外显子C、转录因子D、插入序列E、操纵子正确答案：A95、人类基因组的组织特点描述不正确的是A、基因组含重复序列B、基因组中各个基因的大小和内部组织的差异不大C、大部分为非编码序列D、功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上E、每个结构基因都有单独的调控序列正确答案：B96、母亲血浆中的胎儿 DNAA、占母亲血浆总 DNA 的 50%以上B、可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体 DNA 突变C、确定 RhD 阳性孕妇所怀胎儿的 RhD 情况D、确定胎儿是否从母亲遗传了X 连锁的基因突变E、血友病 A 的产前诊断正确答案：C97、5’-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4 多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pol ⅠE、DNA pol正确答案：A98、DNA 芯片的样品制备过程错误的是( )A、核酸分子的纯化B、样品的扩增C、样品的标记D、常用的标记物为荧光E、标记后的样品不必再纯化正确答案：E99、下列疾病不可进行基因诊断的是A、组织水肿B、SARS 疑似患者C、肿瘤D、艾滋病E、血友病正确答案：A100、下列属于核苷酸三联体重复序列发生高度重复所致的是A、珠蛋白生成障碍性贫血B、血友病C、迪谢内肌营养不良D、脆性 X 综合症E、镰状细胞贫血正确答案：D。
分子生物学习题及答案
核酸一、填空题1. 碱基互变异构是指碱基的酮式与烯醇式或氨基式与亚氨基式异构体发生互. 的现象, 如果这种现象.DN.复制的时候发生, 则可以导..碱基错.。
然而, 在生.p.下, 碱基主要以酮式或氨基.形式存在。
2．DNA 双螺旋中只存在 2 种不同碱基对。
A 总是与_T___配对, G 总是与 C 配对, 此规则称为Chargaff 法则。
但在RNA 双螺旋中, 还含有第三种碱基配对, 它是GU 。
3. X 线衍射证明, 核苷中碱基与核糖环平面相互垂直。
4. 一个双链RNA 分子与一个双链DNA 分子的差别有分别含U 与T 、核糖与脱氧核糖和A 型与 B 型双螺旋。
5. 核酸在260 nm 附近有强吸收, 这是由于碱基环上的共轭双键。
6. 给动物食用3H 标记的胸苷, 可使DNA 带有放射性, 而RNA 不带放射性。
如果要让RNA 带有放射性, 应该给动物食用3H 标记的尿苷。
7. Tm 是指DNA 热变性时候的熔链温度, 双链DNA 中若GC 含量多, 则其Tm 值高。
DNA 样品的均一性愈高, 其熔解过程的温度范围愈窄。
DNA 所处溶液的离子强度越低, 其熔解过程的温度范围越宽, 熔解温度越低, 所以DNA 应保存在较高浓度的盐溶液中。
8. 双链DNA 热变性曲线通常呈S 形, 这种曲线说明DNA 的变性具有协同效应；在DNA 发生热变性后, 在pH 2以下, 或pH 12 以上时, 其A260 增加, 同样条件下, 单链DNA 的A260 不变。
9. 核酸分子中的糖苷键均为β-N-糖苷键型, 但假尿苷中的糖苷键为β-C-糖苷键。
核苷酸之间通过3,5-磷酸二酯键连接形成多聚物。
10. 细胞内总含...RN...tRN...，它是通.. .的后加... 形成的。
14.11. DN.双螺旋的构型可以有三种, 它们分别...型, .型, .... 。
B-DN.的螺距.3.... nm, 每圈螺旋的碱基对数..1.. , 细胞里.B-DN.每圈螺旋的实际碱基对数. 10..。
分子生物学试题库及答案
分子生物学试题库及答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、DNA双链状态下属于完全回文结构的序列是A、CGTGGTGCB、CGTGCGTGC、CGTGCACGD、GACTCTGAE、CTGAGATC正确答案：C2、目前使用最广的将外源基因注入动物受精卵的方法是A、胚胎干细胞法B、显微注射法C、逆转录病毒载体法D、精子载体法E、脂质体包裹法正确答案：B3、转录起始生成RNA的第一位核苷酸最常见的是A、ATPB、AMPC、GTPD、GMPE、CMP正确答案：C4、DNA分子上特异识别和结合RNA聚合酶的部位是A、启动子B、终止子C、操纵子D、衰减子E、外显子正确答案：A5、下列对大肠杆菌DNA聚合酶的叙述不正确的是A、DNA 聚合酶 I可被酶切产生大小两个片段B、DNA 聚合酶Ⅱ具有3’→5’外切酶活性C、DNA 聚合酶Ⅲ在复制链延长中起主要作用D、DNA聚合酶Ⅱ可切除引物E、以四种脱氧核糖核苷酸作为底物正确答案：D6、当要了解某一基因在某组织细胞中的mRNA表达水平时，采用哪种方法最合适A、Southern blottingB、Northern blottingC、Western blottingD、免疫组化分析E、Dot blotting正确答案：B7、基因有两条链，与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做A、有义链B、反义链C、重链D、cDNA链E、模板链正确答案：A8、关于色氨酸操纵子错误的描述是A、核蛋白体参与转录终止B、衰减子是关键的调控元件C、色氨酸不足时，转录提前终止D、转录与翻译偶联是其转录调控的分子基础E、色氨酸存在与否不影响先导mRNA的转录正确答案：C9、cDNA文库的建立需要A、逆转录酶、DNA模板B、依赖DNA的DNA聚合酶、mRNA模板C、逆转录酶、mRNA模板D、依赖RNA的DNA聚合酶、tRNA模板E、逆转录酶、rRNA模板正确答案：C10、关于加帽修饰，说法正确的是A、snRNA不能被加帽B、由加帽酶催化5' 端加入7甲基鸟苷酸C、加帽酶可以与RNA聚合酶I、II、III相结合D、hnRNA转录终止后才开始加帽E、RNA聚合酶发生磷酸化后，使加帽酶与之脱离正确答案：B11、eIF-2对翻译起始具有重要的调控作用，下列哪项是它的活性形式A、磷酸化B、脱乙酰化C、乙酰化D、脱磷酸化E、ADP-核糖基化正确答案：D12、下列哪项不是原核生物DNA复制是所必需的A、单链结合蛋白B、DNA聚合酶ⅢC、DNA聚合酶ⅡD、Dna G蛋白E、ATP正确答案：C13、核酸分子杂交试验不能用于A、单链DNA分子之间的杂交B、单链DNA分子与RNA之间的杂交C、抗原与抗体分子之间的杂交D、基因组DNA与PCR产物之间的杂交E、RNA与RNA之间的杂交正确答案：C14、关于cDNA的最正确的叙述是A、与mRNA互补的单链DNAB、与mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以单链DNA为模板合成的双链DNAE、与mRNA互补的单链RNA正确答案：C15、关于分解物阻遏的作用机制，说法正确的是A、葡萄糖缺乏时，cAMP浓度低B、葡萄糖缺乏时，CAP浓度低C、葡萄糖缺乏时，cAMP不能与CAP形成复合物D、葡萄糖缺乏时，cAMP-CAP复合物浓度高E、葡萄糖缺乏时，cAMP-CAP复合物失去DNA结合能力正确答案：D16、采用翻译后转运机制的蛋白质是A、免疫球蛋白B、肽类激素C、核DNA编码的线粒体蛋白D、凝血因子E、水解酶正确答案：C17、IPTG诱导乳糖操纵子表达的机制是A、使乳糖－阻遏蛋白复合物解离B、与阻遏蛋白结合，使之丧失DNA结合能力C、与乳糖竞争结合阻遏蛋白D、与RNA聚合酶结合，使之通过操纵序列E、变构修饰RNA聚合酶，提高其活性正确答案：B18、下列哪种染色质结构的变化不利于基因表达A、组蛋白乙酰化B、核小体解聚C、CpG岛甲基化D、基因扩增E、染色质结构松散，对DNA酶I敏感正确答案：C19、大肠杆菌DNA经过复制得到的两个环状DNA分子，需经哪种酶分环A、拓扑异构酶ⅠB、拓扑异构酶ⅡC、单链结合蛋白D、解螺旋酶E、核酸内切酶正确答案：B20、关于大肠杆菌DNA复制终止，正确说法是A、两个复制叉同时终止前进B、两个复制叉终止于同一位点或附近C、复制叉停止时，DNA所有碱基均已被复制D、不需要蛋白质因子参与E、复制叉有可能通过终止区继续复制正确答案：B21、下列哪项不是信号肽的特点A、N端一小段富含亲水氨基酸的序列B、与细胞质中的信号识别颗粒结合C、SRP受体是蛋白进入内质网所必须的D、翻译的同时引导新生多肽链穿过内质网膜E、N端一小段富含疏水氨基酸的序列正确答案：A22、DNA半保留复制不涉及A、冈崎片段B、引物酶C、DNA聚合酶D、氨基酰tRNA合成酶E、DNA连接酶正确答案：D23、真核生物染色体基因组是A、线性双链DNA分子B、环状双链DNA分子C、线性单链DNA分子D、线性单链RNA分子E、环状单链DNA分子正确答案：A24、E,coli RNA聚合酶的核心酶含有的亚基是A、α、β、β'、σB、α、β、σ 、ωC、α、β'、σ 、ωD、α、β、β' 、ωE、β、β'、σ 、ω正确答案：D25、关于Northern印迹的描述，哪一项是不正确的A、DNA-RNA杂交B、将RNA逆转录为cDNAC、探针与靶RNA杂交D、将细胞中提取的总RNA经电泳分离转移到膜上E、杂交后放射自显影观察RNA的大小与表达量正确答案：B26、复制起点被甲基化修饰的序列是A、TTAGGGB、A/TTTTARTTTA/TC、GATCD、ATE、TTGGGG正确答案：C27、实验证实DNA的半保留复制的学者是A、Meselson和StahlB、KornbergC、Vinograd和LebowitzD、Watson和CrickE、Cairns正确答案：A28、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶是A、对称的二聚体B、不对称的二聚体C、一条多肽D、对称的三聚体E、不对称的三聚体正确答案：B29、端粒酶是一种A、依赖DNA的DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、逆转录酶E、拓扑异构酶正确答案：D30、无性繁殖依赖DNA载体的哪种结构A、筛选标记B、启动子C、复制起始点D、多克隆位点E、反应元件正确答案：C31、复制叉前进时，其前方的DNA双螺旋会形成哪种结构A、负超螺旋B、正超螺旋C、右手螺旋D、左手螺旋E、松弛状态正确答案：B32、哪一项不属于基因表达的范畴A、哈哈哈哈哈哈B、DNA模板指导的hnRNA合成C、DNA模板指导的DNA合成D、DNA模板指导的rRNA合成E、DNA模板指导的snRNA合成正确答案：C33、DNA延伸时，不包括哪种过程A、DNA双链解链B、复制叉前进C、释放拓扑张力D、dNTP聚合E、RNA引物消除正确答案：E34、RNA编辑发生在哪一个层次A、复制水平B、转录水平C、转录后水平D、翻译水平E、翻译后水平正确答案：C35、乳糖操纵子的调控方式是A、CAP的正调控B、阻遏蛋白的负调控C、正、负调控机制不可能同时发挥作用D、CAP拮抗阻遏蛋白的转录封闭作用E、阻遏作用解除时，仍需CAP加强转录活性正确答案：E36、真核生物染色质中的组蛋白是A、碱性蛋白质B、酸性蛋白质C、一种转录因子D、带负电荷E、不带电荷正确答案：A37、大肠杆菌中催化mRNA链延长的酶是A、Klenow fragmentB、α2ββ'σ ωC、DNA-pol IIID、α2ββ'ωE、RNA-pol II正确答案：D38、下列哪一项不属于核酸A、操纵子B、复制子C、转录因子D、顺反子E、转录子正确答案：C39、关于加尾修饰，说法错误的是A、组蛋白的成熟mRNA无需加poly A尾B、加尾信号包括AAUAAA和富含GU的序列C、剪切过程需要多种蛋白质因子的辅助D、加尾不需模板E、多聚A形成的过程是缓慢、匀速的反应正确答案：E40、细菌优先利用葡萄糖作为碳源，葡萄糖耗尽后才会诱导产生代谢其他糖的酶类，这种现象称为A、协调调节作用B、衰减作用C、诱导作用D、分解物阻遏作用E、阻遏作用正确答案：D41、不属于特异转录因子的是A、TF II DB、HSFC、AP1D、类固醇激素受体E、NF-κB正确答案：A42、下列有关真核生物结构基因的说法不正确的是A、结构基因大都为断裂基因B、结构基因的转录是不连续的C、含有大量的重复序列D、结构基因在基因组中所占比例较小E、产物多为单顺反子RNA正确答案：B43、下述序列中，在双链状态下属于完全回文结构的序列是A、TGTAATGTB、TGTATGTAC、GGTCGACCD、TACGCTGAE、GTGAGATG正确答案：C44、下列哪种因素对原核生物的翻译没有影响A、microRNAB、稀有密码子所占的比例C、mRNA的稳定性D、反义RNAE、调节蛋白结合mRNA正确答案：A45、RNA引物位于A、前导链和随后链的5’端B、前导链和随后链的3’端C、仅冈崎片段的5’端D、仅冈崎片段的3’端E、前导链和冈崎片段的5’端正确答案：E46、大肠杆菌复制起始点发生最先解链的是A、20~30 bp的片段B、9 bp的短重复序列C、13 bp的短重复序列D、40 bp的片段E、200 bp的片段正确答案：C47、下列有关原核生物的说法不正确的是A、基因组中只存在一个复制起点B、在一个操纵子内，几个结构基因共用一个启动子C、原核生物的结构基因与调控序列以操纵子的形式存在D、操纵元件也是结构基因E、在操纵子中，功能上关联的结构基因串联在一起正确答案：D48、关于限制性内切酶的叙述错误的是A、它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNAB、切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构C、它能专一降解经甲基修饰的DNAD、是DNA重组的重要工具酶E、主要从细菌中获得正确答案：C49、在DNA复制中，RNA引物的作用是A、使DNA聚合酶Ⅲ活化B、使DNA 链解开C、提供5’-磷酸末端作合成新DNA链起点D、提供3’-OH末端作合成新DNA链起点E、提供3’-OH末端作合成新RNA链起点正确答案：D50、E,coli RNA聚合酶的全酶与核心酶的差别在于A、α亚基B、β亚基C、β'亚基D、σ亚基E、以上都包括正确答案：D51、酵母基因组复制时，DNA双螺旋最先解链的是A、区段B1B、区段B2C、区段B3D、ORCE、ORS正确答案：B52、乳糖操纵子中，能结合别位乳糖（诱导剂）的物质是A、AraCB、cAMPC、阻遏蛋白D、转录因子E、CAP正确答案：C53、DNA复制错误较少的原因中，解释正确的是A、DNA聚合酶Ⅰ具有5’ →3’外切酶活性B、DNA聚合酶Ⅱ具有3’→5’外切酶活性C、DNA聚合酶Ⅰ具有3’ →5’外切酶活性D、DNA聚合酶Ⅲ具有3’ → 5’外切酶活性E、以上说法都对正确答案：E54、质粒DNA导入细菌的过程称为A、转化B、转染C、感染D、传染E、连接正确答案：A55、关于真核生物的翻译起始，不正确的说法是A、翻译起始的过程较原核生物复杂B、eIF-2是调节真核翻译起始的关键因子C、起始氨基酰－tRNA进入核糖体的P位D、mRNA的SD序列与其在核糖体上就位有关E、由80S核糖体、mRNA和Met-tRNAiMet组成翻译起始复合物正确答案：D56、下列关于cDNA文库的叙述中，错误的是A、从特定组织或细胞中提取DNAB、从特定组织或细胞中提取RNAC、由反转录酶催化合成与mRNA互补的单链DNAD、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAE、双链DNA与合适载体连接后转入受体菌正确答案：A57、原核生物的基因组主要存在于A、质粒B、线粒体C、类核D、高尔基体E、核糖体正确答案：C58、RNA通常是A、线性双链分子B、环状单链分子C、线性单链分子D、环状双链分子E、以上都不对正确答案：C59、15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长3代，那么由单个大肠杆菌产生的14N-DNA纯合分子是几个A、4B、6C、8D、10E、2正确答案：B60、在上题所述条件下，若要以此DNA片段为模板通过PCR合成新的DNA 分子，需要哪些成分A、dNTP、限制性内切酶、去离子水B、Taq DNA聚合酶、NTP、引物C、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、反应缓冲液D、DNA模板、dNTP、DNA连接酶E、DNA模板、dNTP、Taq DNA聚合酶、引物、反应缓冲液、Mg2+正确答案：E61、合成DNA的原料是A、dAMP、dGMP、dCMP、dTMPB、dADP、dGDP、dCDP、dTDPC、dATP、dGTP、dCTP、dTTPD、AMP、GMP、CMP、TMPE、ATP、GTP、CTP、TTP正确答案：C62、mRNA在蛋白质合成中的功能是A、运输遗传密码所对应的氨基酸B、与蛋白质结合，提供合成场所C、与帽子结合蛋白结合启动翻译D、由三联体密码指引氨基酸的排列顺序E、通过剪切因子切除poly A尾调控翻译效率正确答案：D63、已知一段DNA的序列为有意义链5’-ATGTTGGAGACAGGAG-------TCTCAAGGAAGC-3’反义链3’-TACAACCTCTGTCCTC--------AGAGTTCCTTCG-5’----------------------------------------> 箭头表明DNA复制时的复制叉移动方向，哪条链是合成随后链的模板A、有意义链B、反义链C、两条链均可D、模板链E、负链正确答案：A64、DNA复制时，子代DNA的合成是A、一条链以5’→3’合成，另一条链以3’→5’合成B、两条链均以3’→5’合成C、两条链均以5’→3’合成D、两条链先以3’→5’生成冈崎片段，再连接成长链E、两条链先以5’→3’生成冈崎片段，再连接成长链正确答案：C65、关于端粒的说法，错误的有A、位于真核生物染色体末端B、由RNA和蛋白质组成C、端粒酶催化端粒DNA延长D、在决定细胞寿命中起重要作用E、含短的高度重复序列正确答案：B66、关于大肠杆菌基因组DNA的复制，错误的说法是A、大肠杆菌DNA复制为双向复制B、大肠杆菌DNA复制为滚环复制C、只有一个复制起点D、链的延伸主要靠DNA聚合酶ⅢE、复制依靠碱基配对原则聚合生成子代DNA链正确答案：B67、电子显微镜下观察到原核生物的基因表达呈现羽毛状结构，其根本原因在于A、多聚核蛋白体形成B、转录与翻译偶联进行C、新生的多肽链不脱落D、多个转录过程同时进行E、多个翻译过程同时进行正确答案：C68、真核生物的转录不需要A、依赖DNA的RNA聚合酶B、三磷酸核苷C、DNAD、RNAE、蛋白质正确答案：D69、关于转录和复制的区别，说法正确的是A、DNA双链均复制和转录B、复制的原料是一磷酸脱氧核苷，转录的原料是一磷酸核苷C、复制需要引物，转录不需要引物D、复制酶是依赖DNA的DNA聚合酶，转录酶是依赖RNA的DNA聚合酶E、均遵守碱基配对规律，模板中A对应的产物是T正确答案：C70、作为克隆载体的最基本条件是A、DNA相对分子质量较小B、环状双链DNA分子C、有自我复制功能D、有多克隆位点E、有一定遗传标志正确答案：C71、参与蛋白质合成的蛋白质因子不包括A、反式作用因子B、延长因子C、转肽酶D、起始因子E、释放因子正确答案：A72、原核生物的RNA聚合酶有几种A、1B、2C、3D、4E、5正确答案：A73、酵母基因组DNA复制时，起始识别复合物的结合位点是A、ARSB、ORCC、ORSD、CACE、TBP正确答案：C74、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶正确答案：C75、DNA重组体的构建是指A、对目的DNA片段作选择性扩增和表达的检测B、选择目的基因和表达载体C、将目的基因和载体在体外重组D、用一定方法转移目的基因到宿主细胞E、从细胞中提取DNA，在体外切割所需要的DNA片段正确答案：C76、以DNA为模板合成RNA的过程称为A、DNA replicationB、transcriptionC、reverse transcriptionD、translationE、RNA replication正确答案：B77、下列哪一项是真核生物可调节基因的表达调控特有的机制A、基础转录因子B、衰减子C、RNA聚合酶D、增强子E、阻遏蛋白正确答案：D78、下列哪一项不是蛋白质的分拣信号A、SD sequenceB、signal peptideC、MLSD、KDELE、NLS正确答案：A79、乳糖操纵子模型是在哪个环节上调节基因表达A、转录水平B、翻译水平C、转录后水平D、翻译后水平E、复制水平正确答案：A80、遗传信息在DNA水平的传递是由于A、DNA的半保留复制B、DNA的双向复制C、DNA的连续复制D、DNA可转录生成mRNAE、DNA可表达成蛋白质正确答案：A81、下列哪项不属于真核生物基因的顺式作用元件A、增强子B、衰减子C、激素反应元件D、沉默子E、启动子正确答案：B82、关于大肠杆菌基因组DNA复制，以下说法中错误的是A、在新一轮的复制中会出现有两个以上复制叉的现象B、大肠杆菌的复制尚未完成就可发生分裂C、复制起点可连续发动复制D、复制过程中染色体形成θ形状E、复制起始点两侧分别同时进行复制正确答案：B83、与RNA聚合酶相识别和结合的DNA片段是A、增强子B、衰减子C、沉默子D、操纵子E、启动子正确答案：E84、真核生物的RNA聚合酶发生哪种修饰后，进入转录延长阶段A、磷酸化B、去磷酸化C、甲基化D、去甲基化E、乙酰化正确答案：A85、有关原核生物结构基因的转录，叙述正确的是A、产物多为多顺反子RNAB、产物多为单顺反子RNAC、不连续转录D、对称转录E、逆转录正确答案：A86、复制起点富含哪种碱基时易被与复制有关的酶和蛋白质识别A、GCB、ATC、AGD、CTE、TG正确答案：B87、关于真核生物染色体DNA复制起点，正确说法是A、每条染色体上有一个复制起点B、每条染色体上有多个复制起点C、每条染色单体上有一个复制起点D、每条DNA链上有两个复制起点E、以上都不对正确答案：B88、大肠杆菌基因组DNA复制的起始与哪种碱基的修饰有关A、AB、GC、TD、CE、U正确答案：A89、不符合基因工程中理想载体条件的是A、具有自主复制能力B、分子量很大C、具有限制性内切酶的单一切点D、有一个或多个筛选标志E、易与染色体DNA分离正确答案：B90、原核生物的70S 翻译起始复合物不包括A、50S 亚基B、IF-2C、fMet-tRNAD、mRNAE、30S 亚基正确答案：B91、真核生物的基因组一般比较庞大，但所含基因总数却很少，究其原因下列说法不正确的是A、产物多为单顺反子RNAB、存在大量的重复序列C、非编码区所占比例较大D、存在大量的内含子E、编码区所占比例很小正确答案：A92、原核生物mRNA中的哪种结构与核糖体相结合A、AUGB、SD序列C、ORFD、5' 端非翻译区E、3' 端非翻译区正确答案：B93、逆转录酶催化A、以RNA为模板的DNA合成B、以DNA为模板的RNA合成C、以mRNA为模板的蛋白质合成D、以DNA为模板的DNA合成E、以RNA为模板的RNA合成正确答案：A94、转基因动物是指A、把某基因整合入动物的受精卵中，再导入子宫，从而发育成新个体B、把某基因转入动物某组织细胞C、把某基因从一个动物转移到另一动物D、把致病基因从动物细胞内转走E、把某基因转入动物的受精卵中正确答案：A95、下列哪种氨基酸在转录因子的转录激活结构域中含量丰富A、LysB、ArgC、AspD、HisE、Trp正确答案：C96、蛋白质的生物合成不直接需要A、RNAB、RNA剪切因子C、分子伴侣D、帽子结合蛋白E、GTP正确答案：B97、关于起始tRNA说法错误的是A、在肽链延长阶段，起始tRNA不能继续运输蛋氨酸B、原核与真核起始tRNA所携带的氨基酸不同C、真核生物中识别AUG的tRNA至少有两种D、原核生物的起始tRNA可以辨认AUG、GUG和UUGE、原核生物的起始tRNA可以运输N－甲酰甲硫氨酸、缬氨酸和亮氨酸正确答案：E98、有关基础转录因子的叙述，正确的是A、与非转录核心序列相结合B、决定基因表达的特异性C、其种类和数量在不同组织中差别很大D、辅助RNA聚合酶结合启动子E、在原核生物中的种类比真核生物少正确答案：D99、DNA克隆过程不包括以下步骤A、获取目的基因B、选择与修饰载体C、筛选转化子D、获得重组DNA分子E、合成探针检测基因正确答案：E100、克隆某一目的DNA的过程不包括A、基因载体的选择B、外源基因与载体的拼接C、重组DNA分子导入细菌D、筛选并无性繁殖含重组分子的细菌E、表达目的基因编码的蛋白质正确答案：E。
分子生物学试题库及答案
分子生物学试题库及答案一、单项选择题1. DNA双螺旋结构模型是由以下哪位科学家提出的？A. 沃森和克里克B. 孟德尔C. 摩尔根D. 达尔文答案：A2. 以下哪种分子不是DNA聚合酶的底物？A. dATPB. dTTPC. dGTPD. ATP答案：D3. 在DNA复制过程中，新合成的链与模板链之间的互补关系是：A. 5'到3'B. 3'到5'C. 5'到5'D. 3'到3'答案：A4. 真核生物mRNA的帽子结构是：A. 5'端的甲基化鸟嘌呤B. 5'端的磷酸化鸟嘌呤C. 5'端的磷酸化腺嘌呤D. 5'端的甲基化腺嘌呤答案：A5. 以下哪种酶不是限制性核酸内切酶？A. EcoRIB. HindIIIC. DNA聚合酶D. BamHI答案：C二、多项选择题6. 以下哪些因素可以影响基因表达？A. 温度B. pH值C. 激素D. 营养状况答案：A, B, C, D7. 以下哪些是DNA复制的酶？A. DNA聚合酶B. 拓扑异构酶C. 解旋酶D. 连接酶答案：A, B, C8. 以下哪些是RNA分子？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. DNA答案：A, B, C9. 以下哪些是蛋白质合成过程中的翻译因子？A. 起始因子B. 延伸因子C. 释放因子D. 核糖体答案：A, B, C10. 以下哪些是DNA修复机制？A. 光修复B. 错配修复C. 核苷酸切除修复D. 碱基切除修复答案：A, B, C, D三、填空题11. DNA的双螺旋结构由两条多核苷酸链组成，它们以________的方式排列，并由________连接。
答案：反向平行，氢键12. 在转录过程中，RNA聚合酶识别并结合到DNA上的________序列。
答案：启动子13. 真核生物的mRNA在翻译前需要经过________加工。
答案：剪接14. 蛋白质合成过程中，________是携带氨基酸的转运RNA。
分子生物学试题库及答案
分子生物学试题库及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. DNA双螺旋结构中，碱基配对遵循的规律是：A. A-T，G-CB. A-G，T-CC. A-C，G-TD. A-G，T-A答案：A2. 下列哪种酶在DNA复制过程中不发挥作用？A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. RNA引物酶答案：B3. 真核生物中，mRNA的5'端通常具有的结构是：A. 帽子结构B. 多聚A尾C. 信号肽D. 核糖体结合位点答案：A4. 在蛋白质合成过程中，氨基酸的运输载体是：A. tRNAB. mRNAC. rRNAD. DNA答案：A5. 下列哪种物质不是细胞周期中G1期的主要活动？A. DNA复制B. 酶的合成C. 细胞器的合成D. 细胞生长答案：A6. 转录过程中，RNA聚合酶识别并结合的DNA序列是：A. 启动子B. 增强子C. 终止子D. 内含子答案：A7. 下列哪种细胞器是蛋白质合成的主要场所？A. 线粒体B. 高尔基体C. 内质网D. 核糖体答案：D8. 在遗传密码中，终止密码子不编码任何氨基酸，它们是：A. UAG, UGA, UAAB. AUG, UGG, UAGC. UGA, UAG, UAAD. AUG, UGA, UAU答案：C9. 真核生物中，DNA复制起始点附近的特殊结构是：A. 复制起点B. 复制叉C. 复制泡D. 复制环答案：A10. 下列哪种物质是DNA聚合酶在复制过程中添加到新链上的？A. dNTPsB. NTPsC. rNTPsD. dNDPs答案：A二、填空题（每题2分，共20分）1. DNA双螺旋结构中，碱基之间的配对是通过______实现的。
答案：氢键2. 在转录过程中，______酶负责将RNA聚合酶合成的RNA链加帽。
答案：加帽酶3. 真核生物的mRNA在3'端具有______结构。
答案：多聚A尾4. 在翻译过程中，______是连接氨基酸和tRNA的化学键。
分子生物学题库(附参考答案)
分子生物学题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案：E2.在 pH 为下述何种范围时，Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案：A3.关于SYBR Green Ⅰ 的描述，不正确的是A、荧光染料的成本低B、适用于任何反应体系C、操作亦比较简单D、特异性强E、不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记正确答案：D4.PCR 反应过程中，退火温度通常比引物的Tm 值A、低5℃B、低15℃C、高5℃D、高15℃E、相等正确答案：A5.以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B6.关于真菌，以下描述正确的是A、真菌种类繁多，其中大多数对人类有害B、浅部真菌感染对治疗有顽固性，对机体的影响相对较小C、近年真菌病的发病率有明显下降趋势D、病原性真菌根据其入侵组织部位深浅的不同分为浅部真菌和内部真菌E、真菌感染对人体的危害不大正确答案：B7.标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、变性B、探针C、杂交D、复性E、复杂性正确答案：B8.不符合分子诊断特点的是A、灵敏度高B、特异性强C、样品获取便利D、检测对象为自体基因E、易于早期诊断正确答案：D9.在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、基因结构变化未知B、点突变C、基因片段缺失D、表达异常E、基因片段插入正确答案：A10.关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因C、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能D、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案：A11.变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案：E12.DNA 自动化测序技术中，不正确的荧光标记方法A、用荧光染料标记引物5’端B、用荧光染料标记引物3’-OHC、用荧光染料标记终止物D、使用一种或四种不同荧光染料标记E、使荧光染料标记的核苷酸渗入到新合成的 DNA 链中正确答案：B13.PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案：E14.一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、变性B、复杂性C、探针D、复性E、杂交正确答案：E15.珠蛋白生成障碍性贫血的主要原因是A、珠蛋白链合成速率降低B、珠蛋白基因突变导致氨基酸序列改变C、血红蛋白破坏加速D、出现异常血红蛋白 SE、铁代谢异常正确答案：A16.众多肿瘤中遗传因素最突出的一种肿瘤是A、肺癌B、肝癌C、乳腺癌D、结直肠癌E、前列腺癌正确答案：D17.为封闭非特异性杂交位点，可在预杂交液中加入A、ssDNAB、1 ×SSCC、10×SSCD、5×TBECE、50×TAE正确答案：A18.不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、有 FraX 体格或性格阳性征象者B、发育迟缓或自闭症的患者C、没有 FraX 家族史D、已明确母亲为携带者的婴儿E、未诊断的 MR 家族史正确答案：C19.病毒的遗传物质是A、DNAB、RNA 和蛋白质C、DNA 或 RNAD、RNA 和 DNAE、DNA 和蛋白质正确答案：C20.Alu家族属于A、可变数目串联重复序列B、短串联重复序列C、长散在核原件D、短散在核原件E、DNA 转座子正确答案：D21.检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案：D22.母亲血浆中的胎儿 DNAA、占母亲血浆总 DNA 的 50%以上B、可用于检测胎儿从母亲遗传而来的线粒体 DNA 突变C、确定RhD 阳性孕妇所怀胎儿的RhD 情况D、确定胎儿是否从母亲遗传了X 连锁的基因突变E、血友病 A 的产前诊断正确答案：C23.关于人工合成的寡核苷酸探针，下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案：E24.以下哪种方法是检测耐药基因突变的金标准 ( )A、PCR 技术B、荧光定量 PCR 技术C、PCR-RFLP 技术D、PCR-SSCPE、DNA 测序技术正确答案：E25.5’-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4 多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pol ⅠE、DNA pol正确答案：A26.第三代测序技术测定人全基因组的目标：A、30 分钟的测序时间及 5 万美元的测序价格B、3 小时的测序时间及 5 千美元的测序价格C、30 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格D、3 分钟的测序时间及 5 千美元的测序价格E、3 小时的测序时间及 5 万美元的测序价格正确答案：D27.GeneXpert 全自动结核杆菌检测技术现可进行哪种药物的耐药检测A、乙胺丁醇B、利福平C、链霉素D、异烟肼E、吡嗪酰胺正确答案：B28.不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案：D29.下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA ( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D30.关于 TaqMan 探针技术的描述，不正确的是A、R 基团与Q 基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高B、易受到Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案：C31.下列属于抑癌基因的是 ( )A、sisB、rasC、c-erb-2D、mycE、p53正确答案：E32.荧光定量 PCR 反应中，Mg2+的浓度对 Taq 酶的活性是至关重要，以 DNA 或 cDNA 为模板的 PCR 反应中最好的 Mg2+浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C33.有关 HPV 描述错误的是A、核酸类型为 DNAB、结构蛋白 L1 和 L2 是包膜上的主要和次要蛋白C、HPV 对皮肤和黏膜上皮细胞具有高度亲嗜性D、病毒核酸合成主要发生在棘层和颗粒层E、大多数宫颈癌组织中病毒以整合状态存在正确答案：B34.K-ras 基因最常见的激活方式是A、插入突变B、点突变C、缺失突变D、基因扩增E、染色体重排正确答案：B35.下列 DNA 序列中的胞嘧啶易发生甲基化修饰的是A、5’-CCCCCT-3’B、5’-GGGGCC-3’C、5’-CGCGCG-3’D、5’-GCACAC-3’E、5’-CTCTCCC-3’正确答案：C36.下列哪种病毒在复制过程中可产生 RNA-DNA 杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A37.绝大多数β-地中海贫血系由位于第 11 号染色体上的β-珠蛋白基因中的基因突变所致，下列方法中不能用于分子生物学检验的技术是A、PCR-ASOB、PCR-RDBC、基因芯片D、多重 PCRE、MOEA-PCR正确答案：D38.多基因家族的特点描述错误的是 ( )A、由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因B、通常由于突变而失活C、假基因与有功能的基因是同源的D、所有成员均产生有功能的基因产物E、可以位于同一条染色体上正确答案：D39.关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是：A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案：E40.下列方法中不能分辨野生型和突变型基因的是A、PCR-SSCPB、变性梯度凝胶电泳C、熔解曲线分析D、逆转录 PCR正确答案：D41.下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性：A、随机扩增DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案：B42.下列不是目前用于 O157：H7 型大肠埃希菌分子生物学检验方法的是A、常规 PCRB、多重 PCRC、荧光定量 PCRD、基因芯片技术E、DNA 测序正确答案：E43.未知突变的检测，下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案：D44.任意引物 PCR 的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组 DNA 图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案：A45.巢式 PCR 错误的是A、是对靶 DNA 进行二次扩增B、第二次扩增所用的模板为第一次扩增的产物C、巢式 PCR 可提高反应的灵敏度和特异性D、常用于靶基因的质和 (或) 量较低时E、第二对引物在靶序列上的位置应设计在第一对引物的外侧正确答案：E46.下列不是细菌感染性疾病分子生物学检验技术的是A、PCR-SSCPB、real-time PCRC、ELISAD、PFGEE、PAPD正确答案：C47.通过酶联级联反应检测每次核苷酸聚合所产生的ppi 的测序方法是A、化学降解法B、寡连测序C、焦磷酸测序D、边合成边测序E、双脱氧终止法正确答案：C48.以 SDA 技术检测结核杆菌时扩增靶点是A、SDAB、IS6110 和 18SrRNAC、IS6110 和 5SrRNAD、IS6110 和 16SrRNAE、IS6110 和 15SrRNA正确答案：D49.STR 法医鉴定的基础是A、基因多态性B、碱基配对原则C、蛋白质空间结构D、孟德尔遗传定律E、基因扩增技术正确答案：D50.关于 APC 基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体 5q21 上C、通过编码 APC 蛋白发挥作用D、APC 蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC 蛋白在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E51.Northern 印迹杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、检测靶分子是 RNAD、用于基因定位分析E、用于阳性菌落的筛选正确答案：C52.描述 PCR-RFLP 技术在耐药突变检测方面错误的是：A、分型时间短B、技术简便C、突变要存在限制性内切酶酶切位点D、目前被广泛应用于耐药监测E、只能检测特定的突变位点正确答案：D53.单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、携带者诊断D、症状前诊断E、耐药基因检测正确答案：A54.结核分支杆菌的基因组特征是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案：B55.下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案：E56.最早应用于 HLA 基因分型的方法是A、RFLP 分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO 技术E、PCR-SSP 技术正确答案：A57.编码 HIV 衣壳蛋白的是A、gag 基因B、vif 基因C、pol 基因D、tat 基因E、env 基因正确答案：A58.关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案：E59.下列关于引物设计的原则中，错误的是A、两条引物的Tm 值相差尽量大B、G+C 的含量应在 45%~55%之间C、尽量避免引物二聚体的出现D、反应体系中引物的浓度一般在0.1~0.2μmol/L 之间E、5’端可加修饰基团正确答案：A60.多重 PCR 的描述中正确的是：A、同一个模板，多种不同的引物B、相同的引物，多种不同的模板C、多个模板，多种引物D、引物的Tm 值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近正确答案：A61.PCR 反应体系的描述错误的是A、模板B、一条引物C、dNTPD、DNA 聚合酶E、缓冲液正确答案：B62.关于 FISH 在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH 只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH 的灵敏度高于 PCRE、FISH 是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A63.mtDNA 中基因数目为A、39 个B、27 个C、22 个D、37 个E、13 个正确答案：D64.硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、本底低B、高结合力C、共价键结合D、非共价键结合E、脆性大正确答案：A65.要制订一个能够简洁准确的 DNA 测序方案，首先应考虑A、DNA 片段大小B、测序方法C、实验条件D、测序目的E、测序时间正确答案：E66.寡核苷酸探针的最大的优势是A、易分解B、易标记C、杂化分子稳定D、可以区分仅仅一个碱基差别的靶序列E、易合成正确答案：D67.关于支原体的描述错误的是A、支原体是一类在无生命培养基中能独立生长繁殖的最小原核细胞微生物B、支原体有一个环状双链 DNAC、以二分裂方式进行繁殖D、其分裂与 DNA 复制同步E、解脲脲原体、人型支原体和生殖器支原体均可引起泌尿生殖道感染正确答案：D68.下列几种 DNA 分子的碱基组成比例，哪一种的Tm 值最高 ( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案：A69.PCR 反应必需的成分是A、BSAB、DTTC、Tween20D、明胶E、Mg2+正确答案：E70.Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案：A71.关于非放射性探针标记，下列描述不正确的是A、对人体危害小B、可长时间使用C、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶D、灵敏度不如放射性探针E、目前应用的非放射性标志物都是抗原正确答案：E72.作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团 (如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案：A73.检测靶序列是 DNA 的技术是：A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A74.目前的 DNA 自动化测序技术可以一次性读取的序列长度约A、50bpB、100bpC、500bpD、1000bpE、2000bp正确答案：D75.在人类基因组 DNA 序列中，DNA 甲基化主要发生在A、腺嘌呤的 N-6 位B、胞嘧啶的 N-4 位C、鸟嘌呤的 N-7 位D、胞嘧啶的 C-5 位E、鸟嘌呤的 C-5 位正确答案：D76.有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域，通常不被转录D、形式为 (CA) n/ (TG) n、 (AG) n、 (CAG) n 等E、又称为可变数目串联重复序列 (VNTR)正确答案：D77.关于逆转录 PCR 的描述，不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用DNA 聚合酶外，还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d (T) 理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案：E78.以下不是原癌基因的特点的是A、广泛存在于生物界，是细胞生长必不可少的B、在进化过程中，基因序列呈高度保守性C、通过表达产物 DNA 来实现功能D、在某些因素的作用下会形成能够致瘤的癌基因E、对正常细胞不仅无害，而且是细胞发育、组织再生、创伤愈合等所必需正确答案：C79.PCR-ASO 描述错误的是A、需要寡核苷酸探针B、检测点突变的技术C、PCR 产物必须电泳分离D、需正常和异常两种探针E、需严格控制杂交条件正确答案：C80.下列不是片段性突变引起原因的是A、基因重排B、碱基插入C、碱基缺失D、碱基扩增E、转录异常正确答案：E81.在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是A、试剂失效或 Taq 酶活性降低所致的假阴性B、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性C、样本吸取错误所致的假阴性D、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性E、核酸提取效率太低所致的假阴性正确答案：C82.第一代 DNA 测序技术的核心技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、DNA 自动分析技术正确答案：A83.目前测序读长最大的测序反应：A、边合成边测序B、化学裂解法C、双脱氧终止法D、连接测序E、焦磷酸测序正确答案：C84.以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是 ( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基正确答案：A85.转录依赖扩增系统与其他 PCR 技术的区别是A、模板是 RNAB、模板是 DNAC、引物是 RNAD、模板和产物都是 RNAE、需要热循环正确答案：D86.HBV DNA 中最大的一个开放阅读框是A、P 基因区B、S 基因区C、X 基因区D、前 S1 基因区E、C 基因区正确答案：A87.HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAE、-ssRNA正确答案：A88.第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行 PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A89.硝酸纤维素和PVDF 膜结合蛋白主要靠( )A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案：A90.关于梅毒螺旋体的实验室检测，下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、镜检法简便，特异性高，但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断C、诊断梅毒的传统方法是体外培养D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查，对早期梅毒诊断敏感E、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染正确答案：A91.纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8，可使比值降低的是 ( ) ：B、牛血清白蛋白C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案：A92.能发出γ-射线的放射性核素是A、3HB、14CC、32PD、35SE、125I正确答案：E93.定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得：A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案：A94.在人类基因组中，编码序列占的比例为A、3%B、21%C、5%D、23%E、1.5%正确答案：E95.当标本核酸量非常低难以扩增时，可采用的 PCR 技术是A、逆转录 PCRB、转录介导扩增C、原位 PCRD、巢式 PCRE、荧光 PCR正确答案：D96.聚合酶链式反应是一种A、体外特异转录 RNA 的过程B、体外翻译蛋白质的过程C、体外特异转录 DNA 的过程D、体外特异复制 DNA 的过程E、体内特异复制 DNA 的过程正确答案：C97.下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案：C98.唯一一个在结肠上皮增殖过程中起看门作用的基因是A、MCC 基因B、DCC 基因C、APC 基因D、p53 基因E、HNPCC 基因正确答案：C99.线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话” ，相互影响，相互协调正确答案：A100.下列属于抑癌基因的是 ( )A、rasB、mycC、c-erb-2D、sisE、Rb正确答案：E。
(完整版)-朱玉贤分子生物学习题题库
i m e th e6.DNA 复制之初参与从超螺旋结构解开双股链的酶或因子是A.解链酶 B.拓朴异构酶Ⅰ C.单链结合蛋白D.引发前体E.拓朴异构酶Ⅱ7.关于真核生物DNA 复制与原核生物相比，下列说法错误的是A.引物长度较短B.冈崎片段长度较短C.复制速度较慢D.复制起始点只有一个E.由DNA 聚合酶α及δ催化核内DNA 合成8.端粒酶是一种A.DNA 聚合酶B.RNA 聚合酶C.DNA 水解酶D.反转录酶E.连接酶9.关于大肠杆菌DNA 聚合酶Ⅲ的说法错误的是A.催化dNTP 连接到DNA 片段的5′羟基末端B.催化dNTP 连接到引物链上C.需要4种不同的dNTP 为作用物D.是由多种亚基组成的不对称二聚体E.在DNA 复制链的延长中起主要作用10.在一个复制叉中，以下哪一种蛋白质数量最多A.DNA 聚合酶 B.引发酶C.SSBD.DNA 解链酶E.DNA 拓朴异构酶11.着色性干皮病（XP ）是一种人类遗传性皮肤病，是因什么缺陷而引起的A.DNA 复制B.转录C.转录后加工D.DNA 修复E.翻译12.在紫外线照射引起DNA 分子的损伤中最常见形成的二聚体是A.C-CB.C-TC.T-TD.T-UE.U-C13.下列对大肠杆菌DNA 聚合酶的叙述不正确的是A.DNA-Pol Ⅰ可分为大小两个片段B.DNA-Pol Ⅱ具有3′→5′外切酶活性C.DNA-Pol Ⅲ在复制链延长中起主要作用D.DNA-Pol Ⅲ由4个亚基组成E.以4种脱氧核苷三磷酸作为底物14.下列关于大肠杆菌DNA 聚合酶的叙述哪一项是正确的A.具有3′→5′核酸外切酶活性B.不需要引物C.需要4种不同的三磷酸核苷D.dUTP 是它的一种作用物E.可以将二个DNA 片段连起来15.DNA 复制需要（1）解链酶，（2）引发酶，（3）DNA 聚合酶，（4）切除引物的酶，（5）DNA 连接酶，其作用顺序是A.1,2,4,3,5B.1,2,3,4,5C.1,4,3,2,5D.1,4,2,3,5E.4,3,2,5,116.冈崎片段产生的原因是A.DNA 复制速度太快B.双向复制C.有RNA 引物D.复制与解链方向不同E.复制中DNA 有缠绕打结现象17.滚环复制A.是低等生物的一种复制形式B.不属于半保留复制C.内环链5′→3′延长，外环链3′→5′延长D.不需要DNA 连接酶的作用E.需要NTP 而不是dNTP 作原料18.比较真核生物与原核生物的DNA 复制，二者的相同之处是A.引物长度较短B.合成方向是5′→3′C.冈崎片段长度短D.有多个复制起点E.DNA 复制的速度较慢【单项选择题参考答案】1.E2.C3.D4.B5.C6.A7.D8.D9.A10.C 二、【解释名词】（1）DNA 半保留复制（2）半不连续复制（3）DDDP （4）冈崎片段（5）复制叉（6）反转录（7）基因突变（8）核酶（9）限制性核酸内切酶（10）基因重组（11）DNA 克隆（12）聚合酶链式反应参考答案略三、【简答题】1.比较原核生物和真核生物的DNA 复制有哪些异同点？2.DNA 半保留复制是如何被证实的？3.简述维持DNA 复制高度忠实性的机制。
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分子生物学试题及答案一、名词解释1. cDNA与cccDNA: cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。
2. 标准折叠单位：蛋白质二级结构单元a-螺旋与折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。
几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。
3. CAP环腺苷酸（CAMP受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ）, cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）4. 回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。
5. micRNA 互补干扰RNA或称反义RNA与mRNA序列互补，可抑制mRNA勺翻译。
6. 核酶：具有催化活性的RNA在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。
7. 模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域&信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
9. 弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。
10. 魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。
产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。
PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。
11. 上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA -35区的TGACA 及增强子，弱化子等。
12. DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。
13. SD序列：是核糖体与mRN黠合序列，对翻译起到调控作用。
分子生物学常见试题
分子生物学常见试题分子生物学常见试题一, 名词解释1, 基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位.2, 基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和.3, 端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.4, 操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子.5, 顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.6, 反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子.7, 启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.8, 增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.9, 基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录,翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程.10, 信息分子:调节细胞生命活动的化学物质.其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子. 11, 受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质.12, 分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝.13, 蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶.14, 蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子,与蛋白激酶相对应存在,共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统.15, 基因工程:有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程.16, 载体:能在连接酶的作用下和外源DN**段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子.17, 转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程.18, 感染:以噬菌体,粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增.19, 转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程.20, 转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程.21, DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响.22, DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构.23, 退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链.24, 筑巢PCR:先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段,再用内侧引物以大片段为摸板扩增获取目的基因.可以提高PCR的效率和特异性.25, 原位PCR:以组织固定处理细胞内的DNA或RNA作为靶序列,进行PCR反应的过程. 26, 定量PCR:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定,对此采用的PCR技术就叫定量PCR.27, 基因打靶:是指通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某一特定基因,从而在生物活体内研究此基因的功能.28, DNA芯片NA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA 探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交,通过对杂交信号的检测析,即可获得样品的遗传信息.由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片. 29, 错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变.30, 无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变.31, 同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止,有时虽然有碱基被取代,但在蛋白质水平上没有引起变化,氨基酸没有被取代,这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变.32, 移码突变:在编码序列中,单个碱基,数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质的突变.33, 癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因结构或表达发生异常时,其产物可使细胞无限制增殖,导致肿瘤的发生.包括病毒癌基因和细胞癌基因.34, 细胞癌基因:存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长,增殖,分化和发育等生理功能.在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化.35, 病毒癌基因:存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因.它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用.36, 基因诊断:以DNA或RNA为诊断材料,通过检查基因的存在,结构缺陷或表达异常,对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程.37, RFLP:即限制性片段长度多态性,个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性.若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP.38, 基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法.39, 反义RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段.40, 核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.41, 三链DNA:当某一DNA或RNA寡核苷酸与DNA高嘌呤区可结合形成三链,能特异地结合在DNA的大沟中,并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键.42, SSCP:单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法.相同长度的单链DNA,如果碱基序列不同,形成的构象就不同,这样就形成了单链构象多态性.43, 管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因.44, 细胞全能性:指同一种生物的所有细胞都含有相同的DNA,即基因的数目和种类是一样的,但在不同阶段,同一个体的不同组织和器官中基因表达的种类和数目是不同的.45, SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点.46, 反义核酸技术:是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的,以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子,干扰目的基因的转录,剪接,转运,翻译等过程的技术.47, 核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子.核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子. 48, 周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达,累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行.49, CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白,这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子,使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源.50, 顺反子51, 结构域二, 问答题(一),病毒,原核,真核基因组的特点答:1,病毒基因组的特点:①种类单一;②单倍体基因组:每个基因组在病毒中只出现一次;③形式多样;④大小不一;⑤基因重叠;⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似:内含子;⑦具有不规则的结构基因;⑧基因编码区无间隔:通过宿主及病毒本身酶切;⑨无帽状结构;⑩结构基因没有翻译起始序列.2,原核基因组的特点:①为一条环状双链DNA;②只有一个复制起点;③具有操纵子结构;④绝大部分为单拷贝;⑤可表达基因约50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是连续的,无内含子;⑦重复序列很少.3,真核基因组的特点:①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;④基因组中非编码区多于编码区;⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;⑥存在大量的重复序列;⑦功能相关的基因构成各种基因家族;⑧存在可移动的遗传因素;⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.(二),乳糖操纵子的作用机制答:1,乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.2,阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构, 不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控.3,CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶.4,协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP 的正调控两种机制,互相协调,互相制约.(三),真核生物转录水平的调控机制答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子,顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程.1, 转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA 聚合酶所识别并结合.转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物.在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA 盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成.2, 反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域,转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用.3, 转录起始的调控:反式作用因子的活性调节:①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;②共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配体结合——许多激素受体是反式作用因子;④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成.反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用.反式作用因子的作用方式——成环,扭曲,滑动,Oozing.反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用.(四),真核生物转录后水平的调控机制1),5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义:5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解.(2),mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用(3),mRNA运输的控制(五),受体的特点答:1,高度专一性;2,高度亲和性;3,可逆性;4,可饱和性;5,特定的作用模式(六),表皮生长因子介导的信号传导途径答:表皮生长因子受体是一个典型的蛋白酪氨酸激酶受体,这个信号转导途径的主要步骤是:1, 受体二聚化的形成及其磷酸化:表皮生长因子与受体的结合使受体发生二聚化,从而改变受体构象,使蛋白酪氨酸激酶活性增强,受体自身的几个蛋白酪氨酸残基在激酶的作用下发生磷酸化.2, 募集接头蛋白Grb2:表皮生长因子受体自身被磷酸化后,不仅其激酶活性增强,而且其构象发生变化,从而适合与含SH2结构域的蛋白分子相结合.Grb2是作为接头蛋白结合到受体上. 3, 调控分子SOS的活化:SOS含有可与SH3结构域相结合的富含脯氨酸基序,当Grb2结合到磷酸化的表皮生长因子受体后,它的两个SH3结构域即可结合SOS,使之活化.4, 低分子量G蛋白Ras的活化:SOS可促进Ras释放GDP,结合GTP的反应,使Ras激活.活化的Ras作用其下游分子Raf,使之活化.Raf是MAPK级联反应的第一个分子,由此启动了MAPK的三级激活过程.5, MAPK的级联激活:Raf是一种MAPKKK,它作用于MEK,使之磷酸化而激活,活化的MEK在作用于MAPK家族的ERK1,使之磷酸化激活由此完成了三级激活.6, 转录因子的磷酸化及转录调控作用:活化的ERK可以转至细胞核内,使某些转录调控因子发生磷酸化,从而影响基因的转录.(七),cAMP信号转导途径答:1,组成:胞外信息分子(主要是胰高血糖素,肾上腺素和促肾上腺皮质激素),受体,G蛋白, AC,cAMP , PKA.2,途径:信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶(AC)AC 催化ATP生成cAMPcAMP 活化PKA,PKA使目标蛋白磷酸化,调节代谢酶的活性或调节基因的表达(八),IP3-Ca2+信号途径:信号分子与受体结合,引起受体构象变化受体活化G蛋白活化后的G蛋白激活PLCPLC 水解PIP2生成IP3 和DGIP3 使钙通道打开,细胞内Ca2+升高Ca2+ 与CaM结合,激活Ca2+-CaM依赖的蛋白激酶Ca2+ -CaM依赖的蛋白激酶使目标蛋白磷酸化.(九),分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件答:(1),常用的工具酶1, 限制性核酸内切酶:是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA 分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶.2, DNA连接酶:将两段DNA分子拼接起来的酶.3, DNA聚合酶:催化单核苷酸链延伸.4, 逆转录酶:依赖于RNA的DNA聚合酶,这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶,产物DNA又称互补DNA.5, 末端脱氧核糖核酸转移酶:将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端.6, 碱性磷酸酶:催化去除DNA,RNA等的5磷酸基团.7, 依赖DNA的RNA聚合酶:识别特异性启动子,RNA转录.(2),良好载体的条件1,必须有自身的复制子;2,载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA插入;3,载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和阴性重组子;4,载体分子必须有足够的容量;5,可通过特定的方法导入细胞;6,对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子,前导顺序,增强子,加尾信号等DNA调控元件.(十),蓝-白筛选的原理答:某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列.这些位点上如果没有克隆外源性DN**段,在质粒被导入lac-的大肠杆菌后,质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达,与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补,产生有活性的半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG 后,出现蓝色的菌落.如果在多克隆位点上插入外源DN**段,将使lac Z 基因灭活,不能生成半乳糖苷酶,结果菌落出现白色.由于这种颜色标志,重组克隆和非重组克隆的区分一目了然.(十一)SANGER双脱氧链终止法的原理答:DNA链中核苷酸以3\',5\'-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是2\'-脱氧核苷三磷酸.2\',3\'ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3\'位置缺少一个羟基.在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3\'羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸.在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链, 其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离.在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A,C,G或T位置.(十二),核酸分子杂交的原理答:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下(适宜的温度及离子强度等)碱基互补配对结合,重新形成双链;在这一过程中,核酸分子经历了变性和复性的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂.杂交的双方是待测核酸和已知序列.(十三),影响杂交的因素答:1,核酸分子的浓度和长度:核酸浓度越大,复性速度越快.探针长度应控制在50-300个碱基对为好.2,温度:温度过高不利于复性,而温度过低,少数碱基配对形成的局部双链不易解离,适宜的温度是较TM值低25度.3,离子强度:在低离子强度下,核酸杂交非常缓慢,随着离子强度的增加,杂交反应率增加.高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定,所以进行序列不完全同源的核酸分子杂交时必须维持杂交反应液中的盐浓度和洗膜液中的盐浓度.4,杂交液中的甲酰胺:甲酰胺能降低核酸杂交的TM值.它有以下优点:在低温下探针更稳定;能更好地保留非共价结合的核酸.5,核酸分子的复杂性:是指存在于反应体系中的不同顺序的总长度.两个不同基因组DNA变性后的相对杂交速率取决于样品浓度绝对一致时的相对复杂性(即DNA中的碱基数).6,非特异性杂交反应:在杂交前应对非特异性杂交反应位点进行封闭,以减少其对探针的非特异性吸附作用.(十四),探针的种类和优缺点答:1,cDNA探针:通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.2,基因组探针:从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后,大量扩增,纯化,切取插入片段,分离纯化为探针.3,寡核苷酸探针:根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针. 4,RNA探针:采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.(十五),探针的标记法答:1,缺口平移法:此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口. 切口处产生一个5末端和3末端,3末端就可以作为引物,在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下,以互补的DNA单链为摸板,依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上,合成新的DNA单链;同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除,新合成链不断延伸, 从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代.2,随机引物法:随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物.对于任何一个用作探针的DN**段,随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合,起到DNA合成引物的作用.将这些引物与变性的DNA单链结合后,以4种dNTP(其中一种是标记物标记的dNTP)为底物,合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针.3,PCR标记法:在PCR反应底物中,将一种dNTP换成标记物标记的dNTP, 这样标记的dNTP 就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA 链上.4,末端标记法:只是将DN**段的一端进行标记.(十六),PCR的基本原理答CR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA.PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的.需要重复进行DNA模板解链,引物与模板DNA结合,DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性,低温退火,中温延伸3个步骤构成PCR 反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA 得以迅速扩增.DNA模板变性:模板双链DNA 单链DNA,94℃.退火:引物+单链DNA 杂交链,引物的Tm值.引物的延伸:温度至70 ℃左右, Taq DNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3\'末端为起点的5\'→3\'DNA链延伸反应,形成新生DNA链.新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增.(十七),PCR引物设计的基本要求答:1,引物长度一般为15～30个核苷酸.过短影响PCR的特异性,过长会提高相应退火温度,使延伸温度超过T aqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成.2,引物的碱基尽可能随机,避免出现嘌呤,嘧啶碱基堆积现象.3\'端不应有连续3个G和C.否则会使引物和模板错误配对.G+C含量一般占45% -55%.3\'端和5\'端引物具有相似的Tm值,Tm 值计算公式:Tm=4(G+C)+ 2(A+T) 3,引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构.引物的连续互补序列,一般不超过3bp. 4,两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免3\'端的互补重叠.5,引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70%,引物3\'末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列,否则易导致非特异性扩增.。
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问答题：1 衰老与基因的结构与功能的变化有关，涉及到：（1）生长停滞；（2）端粒缩短现象；（3）DNA损伤的累积与修复能力减退；（4）基因调控能力减退。
2 超螺旋的生物学意义：（1）超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密，使DNA分子体积变得更小，对其在细胞的包装过程更为有利；（2）超螺旋能影响双螺旋的解链程序，因而影响DNA分子与其它分子（如酶、蛋白质）之间的相互作用。
3 原核与真核生物学mRNA的区别：原核：（1）往往是多顺反子的，即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息（来自几个结构基因）。
（2）5端无帽子结构，3端一般无多聚A尾巴。
（3）一般没有修饰碱基，即这类mRNA分子链完全不被修饰。
真核：（1）5端有帽子结构（2）3端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴，其长度为20-200个腺苷酸。
（3）分子中可能有修饰碱基，主要有甲基化，（4）分子中有编码区与非编码区。
4 tRNA的共同特征：（！）单链小分子，含73-93个核苷酸。
（2）含有很多稀有碱基或修饰碱基。
（3）5端总是磷酸化，5末端核苷酸往往是pG。
（4）3端是CPCPAOH序列。
（5）分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合，开成双螺旋，从而构成其二级结构，开头类似三叶草。
（6）三级结构是倒L型。
5 核酶分类：（1）异体催化的剪切型，如RNaseP；（2）自体催化的剪切型，如植物类病毒等；（3）内含子的自我剪接型，如四膜虫大核26SrRNA前体。
6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程：（1）5端加帽；（2）3端加尾（3）内含子的切除和外显子的拼接；（4）分子内部的甲基化修饰作用，（5）核苷酸序列的编辑作用。
7 反义RNA及其功能：碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA，又称调节RNA，这类RNA是单链RNA，可与mRNA配对结合形成双链，最终抑制mRNA作为模板进行翻译。
这是其主要调控功能，还可作为DNA复制的抑制因子，与引物RNA互补结合抑制DNA的复制，以及在转录水平上与mRNA5末端互补，阻止RNA合成转录。
8 病毒基因组分型：（1）双链DNA（2）单链正股DNA（3）双链RNA（4）单链负股RNA（5）单链正股RNA9 病毒基因组结构与功能的特点：（1）不同病毒基因组大小相差较大；（2）不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸。
（3）病毒基因组有连续的也有不连续的；（4）病毒基因组的编码序列大于90%；（5）单倍体基因组，（6）基因有连续的和间断的，（7）相关基因丛集；（8）基因重叠（9）病毒基因组含有不规则结构基因，主要类型有：a几个结构基因的编码区无间隔；bmRNA没有5端的帽结构；c结构基因本身没有翻译起始序列。
10 原核生物基因组的结构的功能特点：（1）基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。
（2）基因组中只有1个复制起点。
（3）具有操纵子结构。
（4）编码顺序一般不会重叠。
（5）基因是连续的，无内含子，因此转录后不需要剪切。
（6）编码区在基因组中所占的比例（约占50%）远远大于真核基因组，但又远远小于病毒基因组。
（7）基因组中重复序列很少（8）具有编码同工酶的基因。
（9）细菌基因组中存在着可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子。
（10）在DNA分子中具有多种功能的识别区域。
11??真核生物基因组结构与功能的特点：（1）每一种真核生物都有一定的染色体数目，除了配子为单倍体外，体细胞一般为双倍体。
（2）真核基因组远远大于原核生物的基因组，结构复杂，基因数庞大。
（3）都由一个结构基因与相关的调控区组成，转录产物为单顺反子。
（4）含有大量重复顺序。
（5）基因组内非编码的顺序占90%以上。
（6）真核基因是断裂基因，（7）功能相关的基因构成各种基因家族，它们可串联在一起，亦可相距很远，但即使串联在一起的成簇的基因也是分别转录的。
（8）真核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素，这些DNA顺序并无明显生物学功能，似乎为自己的目的而组织，故有自私DNA之称。
12 根据同源性程度，主要分五种类型：（1）核酸序列相同，实际上是多拷贝基因；（2）核酸序列高度同源，如人类生长激素基因家族；（3）编码产物具有同源功能区；（4）编码产物具有小段保守基序；（5）基因超家族。
13 DNA复制的基本过程：（1）DNA双链解开；（2）RNA引物的合成；（3）DNA 链的延长；（4）切除引物、填补缺口、连接相邻DNA片段；（5）切除和修复错配碱基。
14 DＮＡ的损伤方式：（１）转换：由一种嘧啶变成另一种嘧啶，或种嘌呤变成另一种嘌呤；（２）颠换：嘧呤与嘌呤互换。
转换和颠换只引起ＤＮＡ局部的改变，而ＤＮＡ其它部分的结构不受影响，故称为点突变。
（３）丢失或插入一个或一段核苷酸，可能使下游ＤＮＡ的编码发生改变，此称为移码突变（４）链内或链间发生共价连结。
１５ＤＮＡ损伤的修复：（１）光修复（２）切除修复（３）重组修复（４）ＳＯＳ修复１６切除修复的机制：通过一种特殊的内切核酸酶将ＤＮＡ分子中的损伤部分切除，同时以另一条完整的ＤＮＡ链为模板，由ＤＮＡ聚合酶Ｉ催化填补被切除部分的空隙，再由ＤＮＡ连接酶封口，使ＤＮＡ恢复正常的结构。
１７大肠杆菌的一种需糖基化酶的切除修复过程：（１）ＤＮＡ糖基化酶识别受损的或错误的碱基，水解糖苷键，释出游离碱基，在ＤＮＡ单链上形成无嘌呤或嘧啶的空位，称为ＡＰ部位；（２）特异的ＡＰ内切核酸酶在ＡＰ部位切开磷酸二酯键，再由外切核酸酶切下ＡＰ部位的核苷酸；（３）ＤＮＡ聚合酶Ｉ修补缺口；（４）ＤＮＡ连接酶封口，完成修复过程。
１８逆转录酶功能：（１）具有ＲＮＡ指导的ＤＮＡ聚合酶活性，能和其它ＤＮＡ聚合酶一样沿５－３方向合成ＤＮＡ，并需要引物提供３－ＯＨ；（２）具有ＲＮＡ酶Ｈ活性，能特异性水解ＲＮＡ－ＤＮＡ杂交体上的ＲＮＡ；（３）具有ＤＮＡ指导的ＤＮＡ聚合酶活性，以逆转录合成的单链ＤＮＡ为模板合成互补ＤＮＡ链。
１９遗传密码的特点：（１）起始密码子和终止密码子；（２）方向性：５－３；（３）连续性（４）简并性；（５）通用性（６）摆动性。
２０常见的摆动现象（１）反密码子的第一位常出现稀有碱基次黄嘌呤，它可以与密码子的第三位的Ａ、Ｃ或Ｕ配对；（２）反密码子中的Ｕ可以与密码子中的Ａ或Ｇ配对；（３）反密码子中的Ｃ可以与密码子中的C、G或U配对。
21 核糖体在蛋白质生物合成中的作用：（1）容纳mRNA的通道，（2）能够结合起始因子，延长因子及终止因子等参与蛋白质生物合成的因子；（3）具有结合氨酰-tRNA的部位（A位或P位）；（4）具有转达肽酶活性，催化肽键形成；（5）大亚基上具有延长因子依赖的GTP酶活性，它可能为肽提供能量。
22 严谨反应机制：在氨基酸缺乏时，游离核糖体与空载的tRNA增加，在ATP存在下，产生pppGpp（鸟苷-5-磷酸）和ppGpp(鸟苷-4-磷酸)。
后者与RNA聚合酶形成ppGpp-RNA聚合酶复合物，进而使RNA聚合酶构象改变，活性降低，rRNA和rRNA 合成减少或停止。
22 葡萄糖效应及机制：细菌通常优先以葡萄糖作为能源，当培养环境中有葡萄糖时，即使加入乳糖、阿拉伯糖等其它糖，细菌也不利用这些糖，不产生代谢这些糖的酶，直到葡萄糖消耗完毕，代谢其它糖的酶才会根据相应的糖是否存在而被诱导产生，这种现象称为——这是由于葡萄糖代谢产物能抑制细胞腺苷酸环化酶和激活磷酸二酯酶的活性，结果使细胞人cAMP水平降低。
当葡萄糖耗尽时，细胞内cAMP水平升高，即可通过CAP调控其它操纵子的表达。
23真核生物基因表达在DNA水平的调控方式：（1）染色质丢失（2）基因扩增（3）基因重排（4）DNA甲基化（5）染色质结构对基因表达的调控作用。
24 反式因子的主要特点：（1）一般具有三个功能结构域：DNA识别结合域、转录活性域、结合其它蛋白的结合域。
这些功能区含有几十到几百个氨基酸残基（2）能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件。
（3）对基因表达有正性和负性调控作用，即渡海和阻遏基因的表达。
25反式作用因子的激活方式及作用方式：激活方式（1）表达式调节；（2）共价修饰；（3）配体结合（4）蛋白质与蛋白质相互作用。
作用方式（1）成环（2）扭曲（3）滑动（4）Oozing。
26 mRNA的选择剪接方式：（1）外显子选择（2）内含子选择（3）互斥外显子（4）内部剪接位点。
27 细胞通讯方式：（1）细胞间隙连接（2）膜表面分子接触通讯（3）化学信号通讯。
28 受体发挥其识别和信号转换作用时特点：（1）高度特异性（2）高亲和力（3）可饱合性（4）可逆性。
29MAPK作为细胞内的的关键信号转导分子，如何发挥作用：MAPK由其上游分子MAPKK和MAPKKK通过逐级磷酸化反应而激活。
细胞受到生长因子或其它因素刺激后，MAPKK可将AMPK的一个Thr磷酸化，从而使MAPK转变为有活性状态。
具体表现为各自的逐级磷酸化，MAPK被激活以后，可转移至细胞核内。
在核内，它可使一些转录因子发生磷酸化，从而改变细胞内基因表达的状态。
另外，它也可以使一些其它的酶发生磷酸化使之活性发生改变。
30 细胞转导信号的基本路线和方式可以表示为：? ?? ?? ?? ???小分子信使浓度或分布变化外源信号—受体—大分子信使化学修饰? ?? ?? ? 效应分子构象变化—细胞应答反应? ?? ?? ?? ?? ?? ?蛋白质相互作用31G蛋白偶联受体的信号传递的基本过程包括：（1）??配体与受体结合；（2）受体激活G蛋白（3）G蛋白激活或抑抑细胞中的效应分子；（4）效应分子改变细胞内小分子信使的含量与分布；（5）细胞内小分子信使作用于相应的靶分子，使之构象改变，从而改变细胞的代谢过程及基因表达等功能。
32 G蛋白的循环或活化过程：当物理或化学信号刺激受体时，受体活化，与G蛋白结合并使之发生构象改变。
A 亚基与GDP的亲和力下降，结合的GDP为GTP所取代。
A亚基结合了GTP后即与BR亚基发生解离，成为活化状态的A亚基。
活化了的A亚基此时可以作用于下游的各种效应分子。
这种活化状态将一直持续到GTP被A亚基自身具有的GTP酶水解为GDP。
33 小分子细胞内信使一般具有的三个特点：（1）不位于能量代谢途径的中心；（2）在细胞中的浓度或分布可以迅速地改变；（3）作为变构效应剂作用于相应的靶分子，已知的靶分子主要为各种蛋白激酶。
34 表皮生长因子受体（EGFR）介导的信号转导途径EGFR——Ras——MAPK（1）??受体二聚体的形成及其磷酸化；（2）募集接头蛋白Grb2：（3）调控分子SOS 的活化（4）低分子量G蛋白Ras的活化；（5）MAPK的级联激活；（6）转录因子的磷酸化及其转录调控作用。
35 r——干扰素受体介导的细胞转导途径：r-干扰素与受体结合以后。