番泻叶提取工艺优选
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本文综合考察了乙醇提取番泻叶中番泻苷A的提取条件，通过讨论浸 提温度 、乙醇浓度、提取方法等因素，以番泻苷A 得率为评价指标， 以紫外分光光度法进行测定，以确定乙醇提取番泻叶中总番泻苷的最 佳提取工艺。。
试验方法与过程
标准曲线的建立
对照品溶液的制备 紫外分光光度法测定
提取温度的选择
提取工艺的优选
乙醇提取浓度的选择 提取方法的选择
F0. 05( 2, 2) = 19. 0 F 0. 01 ( 2, 2) = 99. 0
表7 1g药材番泻苷A提取量的方差分析 结果
方差来 源
A B C D(误差) 总
离均差 平方和 0.3156 0.4865 0.1689 0.3773 1.3483
自由度
2 2 2 2 8
方差
0.1578 0.2432 0.0845 0.1886
表6 出膏率方差分析结果
方差来源
离均差平 方和
自由度
A
21.7390 2
B
35.6165 2
C
1.5168 2
D(误差) 1.3434 2
总
60.2156 8
方差
F
P
10.8695 17.8082 0.7584 0.6717
16.1818 26.5118 1.1290
>0.05 >0.05 >0.05
乙醇提取番泻叶总番泻苷的 工艺优选
论文框架
• 研究论述 • 试验方法与过程 • 试验结果 • 分析与讨论
研究论述
◆研究背景 番泻叶为豆科植物狭叶番泻Cassia angustifoliaV ah.l 或尖叶番泻C. acutifo lia Delile的干燥小叶,具有泻热导致、通便利水之功效。番泻叶 含主要有效成分番泻苷A、B、C、D(sennosideA、B、C、D)，临床 常用于急性便秘。
乙醇体积分数/ % 番泻苷A/ ( μg•mL- 1)
0
52.7
20
55.7
30
61.7
40
79.8
50
87.6
60
82.5
70
79.3
80
51.1
提取率/ %
59.3 62.7 69.5 89.8 98.7 92.9 89.3 57.6
表3 不同提取方法提取的番泻苷A 提取率
提取方法
浸渍法 渗漉法 回流法
F
0.8365 1.2894 0.4477
P
>0.05 >0.05 >0.05
F0. 05( 2, 2) = 19. 0 F 0. 01 ( 2, 2) = 99. 0
试验结果
由表5的极差值R 和表6、表7 的方差分析结果可以看出, 以出 膏率为考察指标时, 各因素对提取工艺影响的大小为B> A> C, 其 中B 因素各水平间具有显著性差异。而以1 g 药材番泻苷A提取量 为考察指标时, 三因素各水平间无显著性差异。因此, 以出膏率为 考察指标来优选提取工艺条件, 最优组合为A3B2C1。由于A 因素 各水平间无显著性差异, 结合不同温度下不同时间提取液番泻苷A 含量的试验结果, 12 h 有最大的提取率, 故最优组合为A1 B2C1 , 即 药材以3 倍体积分数50% 乙醇浸泡12 h, 用6 倍体积分数50% 乙 醇以10 mL•min- 1的流速渗漉提取。
分析与讨论
1 番泻苷包括番泻苷A、B、C、D 等 , 由于番泻苷类对照品不易 得到, 而此类物质物理、化学性质相近, 所以暂以番泻苷A 为考察 指标, 建立测定方法,优选番泻苷类化合物的提取工艺。 2 按药典方法[5]进行含量测定,由于二蒽酮类物质性质相近, 用紫 外分光光度法测定番泻苷A 的含量简单、快速、灵敏, 所以在实验 中以番泻苷A的含量作为考察指标优选提取工艺。 3 从不同提取时间、温度与提取液含量的关系可以看出, 番泻苷在 较高温度下是非常不稳定的, 特别是80℃ 和100 ℃ 时1 h 内已有 10% 以上番泻苷氧化或水解。浓缩及分离过程应尽量避免高温。 室温提取尽管耗时较长, 但番泻苷仍可提取完全, 相对变化较少, 更 为经济。 4 在渗漉提取过程中, 一般用2 倍量溶剂浸泡,但由于番泻叶质轻, 2 倍量溶剂无法浸没, 故选用3倍量体积分数50% 乙醇浸泡过夜。
◆研究意义 番泻苷A、B 为番泻叶泻下作用的主要有效成分 ，其泻下作用及刺激 性较其它含蒽醌类的泻药更强，所以研究番泻叶总番泻苷的提取工艺 ，提高其提取率，能够为进一步发挥其广泛药用价值提供一定的基础 。
研究论述
番泻叶总番泻苷常用的提取方法：
◇溶剂提取法—水煎煮法、沸水浸泡法、醇提取法 ◇物理强化法—超声波提取法
表4 因素和水平
因素
水平
A/倍
B/h
1
4
12
2
6
24
3
8
48
C/mL•min- 1 0.01 0.05 0.25
试验号
A B C D 1 g 药材番泻苷A 提取量/ mg·g1
1
1111
2.03
2
1222
2.76
3
1333ຫໍສະໝຸດ Baidu
2.91
4
2123
1.88
5
2231
2.32
6
2312
2.64
7
3132
2.07
其他条件的优选
表1 不同提取温度下的番泻苷A 提取率(n=3)
提取温度/ ℃
番泻苷A/ (μg•mL- 1) 提取率/ %
20
79.2
89.2
30
81.6
91.9
40
84.2
94.6
50
85.5
96.3
60
83.6
94.1
70
78.0
87.8
80
74.4
83.8
90
60.1
67.6
表2 不同体积分数乙醇提取的番泻苷A 提取率
8
3213
2.51
9
3321
1.74
出
K1 19.2 18 21.2 20.5
膏
K2 19.9 22.8 20.2 20.3
量
K3 22.8 21.1 20.5 21.2
R 3.6 4.8 1 0.9
1g药材番 K1 2.6 2 1.7 2
泻苷A提取 K2 2.3 2.5 2.1 2.5
量/ mg·g- 1 K3 2.1 2.4 2.4 2.4
番泻苷A提取率/%
54.4 79.0 66.0
在确定了乙醇体积分数、提取温度、提取方法的基础上, 对影响提取的其他主要因素: 渗漉溶剂用量( A) 、提取时 间( B) 渗漉速度( C)进行正交试验优选。每次试验用中粉 10g ,加入3倍量体积分数50%的乙醇浸泡， 用体积分数 50% 乙醇室温渗漉提取。溶液浓缩定容于50 mL 量瓶中, 取少量过0. 45 Lm 滤膜, 按含量测定方法测定含量。精密 量取25 mL 提取液, 倾入干燥至恒重的蒸发皿中, 水浴蒸 干, 移入烘箱中干燥, 于干燥器中冷却, 立即称定,计算出 膏率。因素水平选择见表4, 试验安排见表5, 方差分析见 表6和7。
试验方法与过程
标准曲线的建立
对照品溶液的制备 紫外分光光度法测定
提取温度的选择
提取工艺的优选
乙醇提取浓度的选择 提取方法的选择
F0. 05( 2, 2) = 19. 0 F 0. 01 ( 2, 2) = 99. 0
表7 1g药材番泻苷A提取量的方差分析 结果
方差来 源
A B C D(误差) 总
离均差 平方和 0.3156 0.4865 0.1689 0.3773 1.3483
自由度
2 2 2 2 8
方差
0.1578 0.2432 0.0845 0.1886
表6 出膏率方差分析结果
方差来源
离均差平 方和
自由度
A
21.7390 2
B
35.6165 2
C
1.5168 2
D(误差) 1.3434 2
总
60.2156 8
方差
F
P
10.8695 17.8082 0.7584 0.6717
16.1818 26.5118 1.1290
>0.05 >0.05 >0.05
乙醇提取番泻叶总番泻苷的 工艺优选
论文框架
• 研究论述 • 试验方法与过程 • 试验结果 • 分析与讨论
研究论述
◆研究背景 番泻叶为豆科植物狭叶番泻Cassia angustifoliaV ah.l 或尖叶番泻C. acutifo lia Delile的干燥小叶,具有泻热导致、通便利水之功效。番泻叶 含主要有效成分番泻苷A、B、C、D(sennosideA、B、C、D)，临床 常用于急性便秘。
乙醇体积分数/ % 番泻苷A/ ( μg•mL- 1)
0
52.7
20
55.7
30
61.7
40
79.8
50
87.6
60
82.5
70
79.3
80
51.1
提取率/ %
59.3 62.7 69.5 89.8 98.7 92.9 89.3 57.6
表3 不同提取方法提取的番泻苷A 提取率
提取方法
浸渍法 渗漉法 回流法
F
0.8365 1.2894 0.4477
P
>0.05 >0.05 >0.05
F0. 05( 2, 2) = 19. 0 F 0. 01 ( 2, 2) = 99. 0
试验结果
由表5的极差值R 和表6、表7 的方差分析结果可以看出, 以出 膏率为考察指标时, 各因素对提取工艺影响的大小为B> A> C, 其 中B 因素各水平间具有显著性差异。而以1 g 药材番泻苷A提取量 为考察指标时, 三因素各水平间无显著性差异。因此, 以出膏率为 考察指标来优选提取工艺条件, 最优组合为A3B2C1。由于A 因素 各水平间无显著性差异, 结合不同温度下不同时间提取液番泻苷A 含量的试验结果, 12 h 有最大的提取率, 故最优组合为A1 B2C1 , 即 药材以3 倍体积分数50% 乙醇浸泡12 h, 用6 倍体积分数50% 乙 醇以10 mL•min- 1的流速渗漉提取。
分析与讨论
1 番泻苷包括番泻苷A、B、C、D 等 , 由于番泻苷类对照品不易 得到, 而此类物质物理、化学性质相近, 所以暂以番泻苷A 为考察 指标, 建立测定方法,优选番泻苷类化合物的提取工艺。 2 按药典方法[5]进行含量测定,由于二蒽酮类物质性质相近, 用紫 外分光光度法测定番泻苷A 的含量简单、快速、灵敏, 所以在实验 中以番泻苷A的含量作为考察指标优选提取工艺。 3 从不同提取时间、温度与提取液含量的关系可以看出, 番泻苷在 较高温度下是非常不稳定的, 特别是80℃ 和100 ℃ 时1 h 内已有 10% 以上番泻苷氧化或水解。浓缩及分离过程应尽量避免高温。 室温提取尽管耗时较长, 但番泻苷仍可提取完全, 相对变化较少, 更 为经济。 4 在渗漉提取过程中, 一般用2 倍量溶剂浸泡,但由于番泻叶质轻, 2 倍量溶剂无法浸没, 故选用3倍量体积分数50% 乙醇浸泡过夜。
◆研究意义 番泻苷A、B 为番泻叶泻下作用的主要有效成分 ，其泻下作用及刺激 性较其它含蒽醌类的泻药更强，所以研究番泻叶总番泻苷的提取工艺 ，提高其提取率，能够为进一步发挥其广泛药用价值提供一定的基础 。
研究论述
番泻叶总番泻苷常用的提取方法：
◇溶剂提取法—水煎煮法、沸水浸泡法、醇提取法 ◇物理强化法—超声波提取法
表4 因素和水平
因素
水平
A/倍
B/h
1
4
12
2
6
24
3
8
48
C/mL•min- 1 0.01 0.05 0.25
试验号
A B C D 1 g 药材番泻苷A 提取量/ mg·g1
1
1111
2.03
2
1222
2.76
3
1333ຫໍສະໝຸດ Baidu
2.91
4
2123
1.88
5
2231
2.32
6
2312
2.64
7
3132
2.07
其他条件的优选
表1 不同提取温度下的番泻苷A 提取率(n=3)
提取温度/ ℃
番泻苷A/ (μg•mL- 1) 提取率/ %
20
79.2
89.2
30
81.6
91.9
40
84.2
94.6
50
85.5
96.3
60
83.6
94.1
70
78.0
87.8
80
74.4
83.8
90
60.1
67.6
表2 不同体积分数乙醇提取的番泻苷A 提取率
8
3213
2.51
9
3321
1.74
出
K1 19.2 18 21.2 20.5
膏
K2 19.9 22.8 20.2 20.3
量
K3 22.8 21.1 20.5 21.2
R 3.6 4.8 1 0.9
1g药材番 K1 2.6 2 1.7 2
泻苷A提取 K2 2.3 2.5 2.1 2.5
量/ mg·g- 1 K3 2.1 2.4 2.4 2.4
番泻苷A提取率/%
54.4 79.0 66.0
在确定了乙醇体积分数、提取温度、提取方法的基础上, 对影响提取的其他主要因素: 渗漉溶剂用量( A) 、提取时 间( B) 渗漉速度( C)进行正交试验优选。每次试验用中粉 10g ,加入3倍量体积分数50%的乙醇浸泡， 用体积分数 50% 乙醇室温渗漉提取。溶液浓缩定容于50 mL 量瓶中, 取少量过0. 45 Lm 滤膜, 按含量测定方法测定含量。精密 量取25 mL 提取液, 倾入干燥至恒重的蒸发皿中, 水浴蒸 干, 移入烘箱中干燥, 于干燥器中冷却, 立即称定,计算出 膏率。因素水平选择见表4, 试验安排见表5, 方差分析见 表6和7。