中国沙棘和西藏沙棘叶中化学成分的UPLCQTOFMS快速分析

中国沙棘和西藏沙棘叶中化学成分的UPLCQTOFMS快速分析

[摘要]基于UPLC/QTOFMS技术对中国沙棘和西藏沙棘叶中的化学成分进行定性分析，比较两沙棘叶中成分差异。采用Waters ACQUITY UPLCT3色谱柱（21 mm×100 mm，17 μm），以乙腈（A）水溶液（B）为流动相梯度洗脱，体积流量05 mL?min-1；在电喷雾负离子模式下采集数据。离子源相关参数：毛细管电压为2 000 V，锥孔电压为40 V，离子源温度为100 ℃，碰撞气体为氩气，鞘流气流量为900 L?h-1，鞘流气温度为450 ℃。结合质谱数据及文献数据，分析、推断出35个化合物，主要为黄酮类成分。其中，29个化合物为两沙棘共有成分，剩余的6个成分中，2个成分为中国沙棘特有，其余为西藏沙棘独有，研究表明两沙棘叶在成分组成上差异较小。采用UPLC/QTOFMS技术，可有效地对中国沙棘和西藏沙棘叶中成分进行快速分析，为今后合理开发利用沙棘资源提供科学依据。

[关键词]UPLC/QTOFMS；中国沙棘叶；西藏沙棘叶；黄酮类化合物

[Abstract]The study is aimed to analyze the chemical components in leaves of Chinese seabuckthorn and Tibetan seabuckthorn qualitatively and compare the differences

between them by using ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupoletimeofflight mass spectrometry （UPLC/QTOFMS）The chromatographic separation of the components was achieved ona Waters ACQUITY UPLCT3 column （21 mm×100 mm，17 μm）using gradient mobile phase consisting of acetonitrile （A）and aqueous solution （B）The identification of the separated compounds was performed on atandem mass spectrometry （MS/MS）by fragmentation patterns under the negative electrospray ionization The parameters of ion source were as follows：capillary voltage，2 000 V；Cone voltage，40 V The ion source temperature，100 ℃；collision gas argon；sheath gas flow rate，900 L?h-1；sheath gas temperature，450 ℃Through the analysis of mass spectrometry data and with the help of literature data，a total of 35 compounds were detected and most of them were flavonoids Among these compounds，29 were common components for the two species，two components were unique to Chinese seabuckthorn and 4 were characteristic components of Tibetan seabuckthorn The results indicated that the compositions of the two kinds of seabuckthorn leaves were quite similar It is also demonstrated that UPLC/QTOFMS method could be applied to rapidly and

effectively analyze and speculate the compounds in leaves of Chinese seabuckthorn and Tibetan seabuckthorn

[Key words]UPLC/QTOFMS；Chinese seabuckthorn；Tibetan seabuckthorn；flavonoids

doi：10.4268/cjcmm20160816

沙棘Hippophae rhamnoides L，胡颓子科沙棘属植物，又名酸刺、沏其日干（蒙名）、达普（藏名）、吉汗（维吾尔名）等，《中国药典》中以果实入药，具有健脾消食，止咳祛痰，活血散瘀的功效[12]。沙棘作为一种药食同源植物，含有丰富的营养物质和生物活性成分，主要活性成分沙棘黄酮，在保护心血管系统、改善血液系统、增强免疫、抗氧化、抗癌、抗过敏、抑菌等方面均具有显著的药理活性，成为衡量沙棘产品质量和理化鉴别的重要指标[34]。近年来研究发现，沙棘叶中也含有大量活性成分，且具有产量大、易收集、采集周期长、生产工艺简单、易贮藏等优于果实的自然优势[5]。研究证实，紫外辐射、光照强度、温度等环境因素均可明显影响黄酮类成分的合成，从而导致化学成分变化（成分组成和含量变化）。本研究中所选用的2样品中国沙棘和西藏沙棘叶地理分布和生长环境不同，前者分布于海拔800～3 600 m温带地区向阳的山嵴、谷地、干涸河床地或山坡，后者一般植株矮小，分布在海拔5 000 m以上的高寒地区的植株[6]。综上所述，本实验基于UPLC/QTOFMS技术，建立中国沙棘

H. rhamoides subsp sinensis Rousi和西藏沙棘H tibetana Schlechtend叶中化学成分快速鉴定的分析方法，分析、比较两沙棘叶中成分特征，不仅有利于阐明沙棘叶中的药效物质基础，也对今后科学开发沙棘资源和扩大沙棘原料来源有重要意义。1材料

ACQUITY IClass 超高效液相色谱仪WatersXevoG2SQTOF MS质谱系统（美国Waters公司），数据采集与处理采用Masslynx 41软件；BSA224S型1/1万分析天平（德国Sartorius 公司）；Centrifuge 5415D型离心机（德国Eppendorf公司）；SB800DTD型超声清洗机，超声功率500W（宁波新芝生物科技股份有限公司）；Pacific TⅡ型超纯水仪（美国Thermo公司）；022 μm hydrohpobic疏水PTFE微孔滤头（Millipor公司，美国）。

槲皮素（批号117395，纯度≥98%）、芦丁（批号153184，纯度≥98%）、槲皮苷（批号522123，纯度≥98%）、异鼠李素3O葡萄糖苷（批号5041827，纯度≥98%）对照品均购于上海源叶生物科技有限公司；山柰酚（批号MUST13121112，纯度≥98%，购于成都曼思特生物科技有限公司）；杨梅素（批号529442，纯度≥98%）、异鼠李素（批号480193，纯度≥98%）、异槲皮苷（批号21637252，纯度≥98%）、鞣花酸（批号476664，纯度≥98%）对照品均购于北京四面体生物科技有限公司；水为超纯水，甲醇、乙腈为色谱纯（美国Fishier