结核病细菌学检验

结核病细菌学检验

一、目的和任务

结核病人的细菌学检查，是发现传染源的最主要途径和手段，是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据，也是考核疗效、评价防治效果的可靠标准。因此，结核病细菌学检查是国家结核病控制规划(NTP)的重要组成部分，在结核病防治工作中起着不可缺少的重要作用。

二、实验室的职能

为落实国家结核病控制规划中对结核病传染源监控要求，应建立各级结核病细菌学实验室，明确其职能和工作范围。

各级结核病细菌学参比实验室(简称参比实验室)，应明确为各自辖区的结核病控制工作服务的宗旨。

(一)国家结核病参比实验室

在卫生部结核病控制中心领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病细菌学工作的规划，实施等技术管理，并向中心报告工作。

国家结核病参比实验室，应保持适当数量和结构的人员编制：专业人员15～20人，其中高级专业技术职称3名以上，中级10名，初级7名。

参比实验室的职能：

1根据国家结核病控制规划的要求，规划全国结核病细菌学工作，制定实施措施，对全国结核病细菌学监控质量进行督导和评估。国家结核病参比实验室负有指导、协调、督导各省(市、自治区)参比实验室的工作。

2建立结核病细菌学实验技术标准化准则、操作规程及规章制度。推行WHO推荐的国际通用的结核病细菌学检查技术。

3建立可行的涂片镜检、分离培养、药物敏感性试验的质量控制标准和质量控制系统。

4承担非结核分支杆菌菌种的最后鉴定，和其它非常规分析手段的实施。

5建立结核分支杆菌和非结核分支杆菌临床菌株库网。制定库网的管理、交流和资源提供办法。

6开展结核病细菌学等实验诊断新技术，新方法的基础研究，及其实际应用可行性评估。

7对我国结核病控制的实施性研究，提供细菌学服务。此外，对常规结核病细菌学检查方法进行实施性研究。

8培训省(市、自治区)或地、市参比室技术人员。

(二)省(市、自治区)参比实验室

省级参比实验室，是我国结核病控制规划细菌学监测中的重要环节。在省结核病防治所(科)的领导和国家结核病参比实验室的指导下，负责所在辖区结核病细菌学工作计划的制定和实施等技术管理。

省级参比实验室，应有5～10名专业人员，其中含中、高级专业技术职称人员2名以上。

省级参比实验室，至少具有50平方米以上的实验工作场所。具备开展检查项目的相应仪器

和设备，包括：生物安全柜一台、高压蒸汽灭菌锅一台、培养基蒸汽凝固灭菌器一台、恒温培养箱和双目生物光学显微镜均不少于两台、荧光显微镜一台、离心机一台、冰箱1～2台。已建立菌株分库的省参比室，应有-20℃或-80℃冷冻箱。

参比实验室的职能：

1根据国家和省结核病控制规划的需要，规划本省结核病细菌学工作，制定实施措施。协调省内各级细菌实验室工作，对地、县结核病细菌学质量，进行监控、督导和评估。

2开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性检测和临床分离株种的初步鉴定。有条件的省参比实验室，可建立完整的分支杆菌菌种鉴定体系，所有细菌学检查应严格遵照国家参比实验室制定的标准化准则、操作规程及规章制度进行。

3根据国家参比实验室制定的质控标准，对全省痰片镜检和分离培养工作进行质量控制。为地、市参比实验室开展分离培养，提供培养基服务。核准地、市实验室自制培养基。

4承担药物敏感性测定，接受国家参比实验室和跨国参比实验室，定期药物敏感性测定质量控制。

5省临床分离野生株菌库，应参加全国菌株库网，遵守菌库的管理、交流和资源提供办法。

6为省结核病控制规划有关研究工作，提供细菌学服务。

7将省结核病细菌学监测工作、质量控制年报表上报国家参比实验室。

(三)地(市)级细菌学实验室

在省参比实验室的指导下，地(市)级细菌学实验室负责本地(市)结核病细菌学监测。应有相应的专用工作场所和不少于4名专业人员。应能开展痰涂片镜检工作，并具有相应的仪器设备，包括：无菌柜、双目光学显微镜(备油镜镜头)、蒸汽高压灭菌锅、紫外线灭菌灯、冰箱、离心机及染片所需的器材。

实验室职能：

1在省参比实验室的指导下，制定本地(市)结核病细菌学检测工作计划。

2依照国家参比室制定的操作规程，开展痰直接涂片镜检工作。为县(市)结核病细菌学实验室提供抗酸染色液。

3依照国家参比实验室制定的操作规程，为各县(市)提供分离培养服务。其培养基或由省参比实验室供给，或经省参比实验室核准后自制。

4定期督导和评价县(市)细菌学实验室的结核病细菌学检查工作，定期向省参比实验室报告其督导、评价结果和质控报表。

5定期培训所辖县(市)细菌学实验室技术人员。监督辖区内细菌学检验人员培训后上岗制度。

(四)县(市)级细菌学实验室

在省、地(市)参比实验室指导下，负责全县(市)结核病细菌学工作。应有1名以上专职工作人员，开展直接痰涂片镜检工作。应具有单独的涂片检查工作室，配备相应的仪器设备，包括双目光学显微镜(备油镜镜头)、蒸汽高压灭菌锅、紫外线灭菌灯、冰箱及染片所需的器材。

县(市)实验室职能：

1在省、地(市)参比实验室的指导下，制定本县(市)结核病细菌学检测的工作计划。

2接受省、地(市)参比实验室的定期培训。痰检人员应在培训后上岗，并保持稳定。

3按照国家参比室制定的操作规程，开展痰直接涂片镜检工作。

4应用统一的"结核病细菌学实验室登记本"，记录痰涂片镜检结果。

5保存3个月的全部痰涂片，留待上级实验室复验质控后方可销毁。

6运送需作分离培养的标本至上级实验室待检。

7条件具备的县(市)实验室，经省参比实验室核准后，依照国家参比实验室制定的操作规程进行分离培养工作。并从省/地(市)参比实验室获得分离培养基。

8接受省参比实验室的定期质控检查。

(五)乡镇卫生院镜检站

在一些远离县(市)结防所、交通不便的乡镇，可选择乡镇中心卫生院建立涂片镜检站，镜检人员需经地(市)或县(市)实验室培训后方可上岗，人员保持稳定，接受定期复训。其涂片应全部保存，每1～3月由县(市)实验室负责人复验一次。

三、实验室人员培训

(一)国家参比实验室

1国家结核病参比实验室，每年召开省参比实验室负责人会议一次：报告工作，交流经验，研究和讨论工作中出现的问题及解决办法。

2结合工作会议，每二年举办一次结核病细菌学研讨会，介绍有关结核病细菌学流行病学和实验室检测的新理论、新技术和新方法。

3举办省级参比实验室专题培训。

4接受省、地(市)实验人员的进修。

(二)省级参比实验室

每年至少轮流培训下辖地(市)细菌实验室人员一次。培训可扩展至县(市)专业人员，或安排地(市)实验室对县(市)专业人员的培训。

培训内容包括：

1结核病流行病概念和我国及本省结核病流行现状和问题。

2国家结核病控制规划的原则。

3结核病细菌学检查在国家结核病控制规划中的作用。

4痰涂片检查的规范，包括细菌实验室的安全、显微镜使用和保养、涂片的制作，染色液的制备、染色和镜检操作，正确的记录、报告方法等。

5痰涂片镜检，分离培养的质量控制和报告方式。

6结核病细菌学检验工作督导、访视技术，督导报告及要求。

(三)地(市)细菌学实验室

地(市)实验室应按省参比实验室的安排，结合痰片镜检和分离培养质量控制，每年对县级实验室专业人员进行培训。

县(市)新任痰检人员，需经不少于两周的技术培训，方可上岗。

四、痰标本收集和送检的有关规定

(一)对象

1因症求诊者检查：凡因肺结核症状求诊者及转诊的可疑肺结核病人，均应送痰标本作涂片镜检(详见第三章"肺结核病人发现"，第17页)。