(医疗药品)制药用水中总有机碳测定法验证方案

标题：制药用水中总有机碳测定方法确认方案起草：_______________________日期：______________初审：_______________________日期：审核：_______________________日期：批准：_______________________日期：变更历史记录：目录1背景和目的32人员及职责33定义34验证总则35参考文献56实施方案56.1验证前准备56.2操作67偏差处理97.1偏差记录97.2偏差处理跟踪9附表1人员确认10附表2文件确认11附表3材料检查12附表4设备检查13附表5实验记录14附表6偏差跟踪表18附表7偏差记录表191背景和目的本方案是对《制药用水中总有机碳检测法标准操作规程》（TESME063）进行方法的系统适用性、线性、准确度、重复性等参数的确认。

通过确认实验以确认该检测方法对总有机碳含量在0.05mg/L～4.00mg/L范围的样品可以进行准确可靠的测定。

2人员及职责3定义3.1N/A：不适用3.2P&ID：管道仪表图3.3TOP：供应商移交文件3.4NPOC：不可吹出有机碳（Non-PurgeableOrganicCarbon）3.5TOC：总有机碳（TotalOrganicCarbon）3.6POC：吹出有机碳（PurgeableOrganicCarbon）3.7IC：无机碳4验证总则4.1测试对象描述4.1.1本方案主要是对总有机碳含量为0.05mg/L～4.00mg/L的一系列已知浓度的蔗糖标准溶液按《制药用水中总有机碳检测法标准操作规程》（TESME063）进行测量，考察本检测方法的系统适用性、线性、准确度、重复性。

4.1.2选择0.04mg/L、0.05mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L、5.00mg/L七个浓度的蔗糖标准溶液的样品进行实验，考察其线性；4.1.3选择0.05mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L三个浓度的蔗糖标准溶液的样品进行实验考察其准确度及重复性。

4.2执行测试人员测试前需阅读本方案，然后再进行测试，最后填写测试报告，在各项测试表中说明了各项具体验证测试的执行方法。

4.3良好测试规范在进行测试时，所有记录（含偏差记录）和签字应当使用黑色笔。

P&ID等TOP文件的检查采用以下要求：使用黄色荧光笔标记检查过的部分，使用红色笔标记产生的偏差位置。

不能使用可掩盖原始文字的修正液或其它修改方法。

拼写错误和其他变更应参照如下方法修改。

测试报告中没有填写的地方应当清楚的表明“N/A（不适用）”。

完成验证后，填写验证报告之前应当检查文档是否正确和完整。

4.4如何填写测试报告4.4.1此方框中规定了测试验收标准，如需记录数值，相应填写实际数值以及“合格”或“不合格”。

4.4.2若满足验收标准的要求，则填写“pass”。

否则填写“fail”和“偏差编号”，并详细记录偏差。

4.4.3备注用于填写描述说明或其它相关信息，如有偏差，应当填写偏差报告。

4.4.4进行测试/检查的日期以及测试者的签名。

4.4.5验证过程中如供应商（第三方）参与，应当在相应处签名。

否则填写“N/A（不适用）”。

4.5偏差处理如果测试结果与验收标准不符，应当填写验证测试的偏差记录表（附表：偏差记录表）。

每次测试可能不止一项偏差记录，偏差记录编号采用三位数字，起始号位001。

每项偏差都在附件：偏差跟踪表中进行登记。

5参考文献5.1岛津国际贸易有限公司，制药用水中总有机碳的检测[R].2010.5.2王军志.生物技术药物研究开发和质量控制(第二版)[M].北京：科学出版社，2007.5.3中华人民共和国药典2010版二部[M].附录VIIIR制药用水中总有机碳测定法.北京：中国医药科技出版社，2010.6实施方案6.1验证前准备描述在此次确认前应当完成的工作，包括以下内容：6.1.1人员培训记录见附表1：人员确认6.1.2材料、设备和文件6.1.2.1文件清单（附表2）6.1.2.2材料清单（附表3）6.1.2.3设备清单（附表4）6.1.3文件检查6.1.3.1核对验证过程中使用或引用的文件，逐项确认，结果记录在附表2中；6.1.3.2合格标准：所有文件均生效且是最新版，并归档。

6.1.4材料检查6.1.4.1核对材料清单中的材料，逐项确认，结果记录在附表3中；6.1.4.2合格标准：所有材料均合格，且能追溯。

6.1.5验证用设备检查6.1.5.1核对验证用设备情况，逐项确认，结果记录在附表4中；6.1.5.2合格标准：验证用设备经过校验。

且能追溯。

6.2操作6.2.1方法描述6.2.1.1NPOC指不可吹出有机碳（如蛋白、糖类等），当样品中的可吹出有机碳（如苯、甲苯、环己烷等）含量很低，可以忽略时，TOC的浓度就近似等于不可吹出有机碳（NPOC）浓度，因此，只要通过加酸吹扫，去除样品中的IC和POC，测量NPOC的含量，就得到了样品中的TOC含量。

一般来说，自然环境水、公共自来水、超纯水、纯化水、注射用水、清洗过程中TOC含量较低的清洁验证样品等POC浓度很低的样品，应使用NPOC方法进行TOC分析[1]。

本实验将对NPOC法的系统适用性、线性、准确度、重复性进行验证[2]。

6.2.1.2方法参数：●按照《TOC-Vwp总有机碳分析仪操作、维护保养标准操作规程》（EQM059）进行参数设定。

●主要参数设定规定如下图所示：6.2.2前期准备6.2.2.1总有机碳取样瓶：用F1-高浓缩环保型器具清洁剂10%溶液清洗后，然后用去离子水清洗3次以上，24小时内使用，使用前使用样品溶液润洗至少1次。

6.2.2.2总有机碳检查用水：取纯化水或超纯水，检测TOC＜0.10mg/L，电导率＜1.0µS/cm（25℃）即得。

6.2.2.3蔗糖对照品溶液贮备液：除另有规定外，取经105℃干燥至恒重的蔗糖对照品适量，精密称定12.0mg，用500mL总有机碳检查用水溶解并定容（每升含碳10mg）。

6.2.2.41,4-对苯醌对照品溶液贮备液：除另有规定外，取1,4-对苯醌对照品适量，精密称定，精密称定7.5mg，用500mL总有机碳检查用水溶解并定容（每升含碳10mg）。

6.2.2.5过硫酸钠氧化剂溶液：用总有机碳检查用水溶解60g过硫酸钠和15ml的磷酸（85%），使用总有机碳检查用水稀释成500ml的溶液，即得。

6.2.2.6磷酸溶液：在总有机碳检查用水中混合100ml的磷酸（85%），然后使用总有机碳检查用水稀释为500ml的溶液，即得。

6.2.3系统适用性实验6.2.3.1TOC在进行方法验证时，应首先对方法的系统适用性进行确认。

采用《中华人民共和国药典》2010版二部附录的方法[3]：取总有机碳检查用水，蔗糖对照品溶液和1，4-对苯醌对照品溶液依法《制药用水中总有机碳检测标准操作规程》（TESME063）检测，记录响应值，按照下式计算：[(r ss－r w)/(r s－r w)]×100%注：r w为总有机碳检查用水的响应值；r s为蔗糖对照品溶液的响应值；r ss为1，4-对苯醌对照品溶液的响应值6.2.3.2结果判断标准根据上式计算所得到的1，4-对苯醌对蔗糖的响应效率值应在85%~115%的范围内。

6.2.4线性6.2.4.1实验步骤将总有机碳检查用水及浓度分别为0.04mg/L、0.05mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L、5.00mg/L的蔗糖标准溶液，依法《制药用水中总有机碳检测标准操作规程》（TESME063）检测，将检测所得总有机碳值与其对应的浓度采用直线回归进行线性拟合，计算R2值。

6.2.4.2结果判定标准R2应≥0.999。

6.2.5准确度6.2.5.1实验步骤：将总有机碳检查用水、0.05mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L的蔗糖标准溶液，依法《制药用水中总有机碳检测标准操作规程》（TESME063）检测，计算各浓度样品的回收率。

6.2.5.2回收率=T−K×100%B备注：T：标准溶液测量值；K：总有机碳检查用水测量值；B：标准溶液理论值。

6.2.5.3结果判定标准各浓度样品的回收率应在85%~115%的范围内。

6.2.6重复性6.2.6.1实验步骤将浓度分别为0.05mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L的蔗糖标准溶液，依法《制药用水中总有机碳检测标准操作规程》（TESME063）检测，每个浓度的样品进样6次，考察不同浓度的样品的TOC检测值，验证重复性。

6.2.6.2结果判定标准单个浓度精密度的RSD应≤2.0%。

7偏差处理验证实施过程中所发现的偏差情况、采取的措施、处理以及追踪的结果如下：7.1偏差记录（记录见附件7：偏差记录表）7.1.1偏差描述7.1.2偏差处理7.1.3偏差处理结果7.2偏差处理跟踪（记录见附表6）附表1人员确认附表2文件确认附表5实验记录1设备、试剂1.1仪器1.1.1总有机碳测定仪，型号：；编号：；1.1.2电导率仪，型号：；编号：；1.2溶液1.2.1蔗糖对照品溶液：精密量取放至室温的蔗糖对照品溶液贮备液（批号：有效期至）ml，置于ml量瓶中，用总有机碳检查用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；1.2.21，4-对苯醌对照品溶液：精密量取放至室温的1，4-对苯醌对照品溶液贮备液（批号有效期至）ml，置于ml量瓶中，用总有机碳检查用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2系统适用性试验：2.1总有机碳检查用水测量结果：总有机碳检查用水 1 2 平均值要求是否符合要求电导率（µs/cm）＜1.0µS/cm（25℃）□是□否总有机碳（mg/L）＜0.10mg/L □是□否2.2分别取总有机碳检查用水、蔗糖对照品溶液和1，4-对苯醌对照品溶液，依次进样，进样量l，记录仪器响应值。

总有机碳检查用水（r w）：，蔗糖对照品溶液（r s）：，1，4-对苯醌对照品溶液（r ss）：。

响应效率计算：=2.3合格标准：响应效率应为85%～115%。

2.4标准曲线：取蔗糖对照品溶液和总有机碳检查用水，按仪器规定方法，记录标准曲线的斜率：；2.5结果判定：系统适用性试验是否通过□是□否；检验人：复核人：3线性3.1实验步骤：将总有机碳检查用水及浓度分别为0.04mg/L、0.05mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L、5.00mg/L的蔗糖标准溶液，依法（《制药用水中总有机碳检测标准操作规程》）（TESME063）检测，将检测所得总有机碳值与其对应的浓度采用直线回归进行线性拟合，计算R2值。