第三章食用菌制种技术五
医学课件第三章食用菌制种
⑵ 谷粒培养料的配制
谷粒因其营养较丰富，制作的菌种具有菌 丝萌发早、吃料快、抗衰老能力强、产量高 等优点，在生产中应用较多。一般是采用浸 泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。
4.装袋或装瓶 将培养料拌匀装入菌种瓶（或袋）内、
装料松紧适宜，上下一致，装料高度以齐瓶 （袋）肩为宜。然后用锥形木棒在瓶的中央 向下插一个小洞，塞上棉塞。装好的料瓶 （袋）要当天灭菌，以免培养料发霉变质。
②.去皮马铃薯100克，玉米粉30克，葡萄糖20 克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二 钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克，水1000亳 升，PH值自然。
③.去皮马铃薯100克，玉米粉15克，麸皮15克， 葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾0.5克， 磷酸氢二钾0.1克，硫酸镁0.5克，蛋白胨2克， 水1000亳升，PH值自然。
5.培养基的灭菌
通常采用高压蒸气灭菌法和常压蒸气灭 菌法以达到灭菌的目的。高压灭菌2小时或常 压灭菌于100℃维持8-10小时，灭菌后培养基 最好放在适温下，空白培养5-7天，以检查培 养基灭菌的效果。如在此期间没有出现任何 杂菌，说明灭菌效果良好。待其冷却30℃以 下可接种。
三、栽培种培养基的制备及接种培养
2.培养基配方：
① 木屑培养基：木屑78%，麸皮或米糠 20%，石膏1%，糖1%，水适量。适用于培养 平菇、木耳、香菇、猴头。
② 棉子壳培养基：棉子壳99.5%，石膏 0.3%，水适量。适用于培养平菇、猴头、金 针菇、鸡腿菇。
3.培养料的配制 ⑴ 木屑、棉籽壳培养料的拌料配制
木屑、棉籽壳培养料按配方称量后，堆制 混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水 中再拌入。拌料时要控制料的含水量在60﹪ 左右 。
一、母种培养基的制备及接种培养
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术食用菌作为高蛋白、低脂肪、低卡路里、高营养、健康美味的食品，越来越受到人们的喜爱。
而自己在家制作食用菌，不仅可以保证食材的新鲜和质量，还可以减少购买成本。
本文将介绍几种常见的食用菌制种技术，帮助大家轻松培育出美味的食用菌。
1. 直接播种法直接播种法是一种最简单的食用菌培养方法，适用于种类较少的食用菌，如黑木耳、金针菇等。
具体操作步骤如下：1.将培养土填满培养箱，压紧。
2.在表面撒上食用菌的孢子或生物质体，注意要均匀撒播。
3.用保鲜膜覆盖箱子，确保通风良好。
4.放置在通风、遮光、适温的环境中，每天喷水保持湿度。
5.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
2. 木屑法木屑法是一种比较常见的制种方法，适用于杏鲍菇、香菇、平菇等食用菌的制种。
具体操作步骤如下：1.准备干净的木屑，并用清水浸泡6-8个小时以上。
2.滤干积水，将木屑放入锅中煮沸至消毒，然后捞起沥干。
3.将木屑放进袋子中，用水泡润。
4.取出泡好水的木屑，充分挤干。
5.把泡好水的木屑放入培养箱中，压实。
6.在木屑上撒上种菌剂。
7.用保鲜膜覆盖培养箱，通风，每天喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
3. 液体培养法液体培养法是一种较为复杂的制种方法，可以用来培养多种食用菌，例如秀珍菇、灵芝等。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的液体，可以用食用菌专用的液体培养基或配制自己的发酵液。
2.在菌种液中加入适量的种菌剂，留出足够的空间。
3.用氧气泵将液体中的微生物通入空气，促使其繁殖生长。
4.液态培养箱通电加热，控制好温度。
5.待液体内部产生大量菌株后，将液体转移到菌棒或糠包装置中进行培养。
6.填充培养基。
7.将菌棒或糠包装置放在培养箱内，通风并喷水保湿。
8.等待生长，每个食用菌的生长时间不同。
4. 多菌固体培养法多菌固体培养法是一种在凝胶体内培养多菌的方法，适用于食用菌组合培养和新品种的研究。
具体操作步骤如下：1.准备好菌种发酵用的培养基凝胶体。
第三章 食用菌菌种制作ppt课件
.
2.培养室
培养大量菌种的恒温房
光线暗
要求
密闭好、通风性强 能升温、降温（空调机）
有培养架
.
五、菌种保藏设备
保藏母种：冰箱（4℃）左右
保藏原种、栽培种：
远离污染源
贮藏室
低温（4~8℃） 干燥、通风、遮光
用前要严格消毒杀虫
地面常撒石灰粉
.
三、常用的消毒灭菌药品
再生母种
扩大原种 保藏用种
特点 菌丝弱而少、不可直接栽培
.
.
2.二级种（原种）
将母种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
Байду номын сангаас
概况
培养环境
大口瓶、较粗放的 液体或固体培养基
用途 扩大栽培种
特点 菌丝较多而壮、适应性较强
.
.
3.三级种（栽培种）
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
概况
培养环境 菌种袋、较粗放的 液体或固体培养基
锅
锅盖
安全阀 排气阀
压力表
.
常压
.
三、接种设备
（一）接种环境
1.
要 求
密闭性好
接 种
特 点
简易、利移动 对人体低害
箱
效果好、工效低 喷雾
用 法
清洁、放物品→ 消毒 熏蒸
紫外灯
.
紫外灯 操作孔 观察窗
.
2.接种室
高2.2~2.5m
要求 面积7~9m2
缓冲间：2~3m2 接种间：5~6m2
6个面平滑 两门错开、平拉式 顶装紫外灯
▪ 1、菌种分离材料的表面消毒：子实体未外露的， 用0.1%升汞溶液浸泡1分钟；子实体已外露的种 菇材料，只能用75%酒精棉球擦菌盖表面和菌柄， 不能浸泡在升汞溶液中。
食用菌原种的制作方法
食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。
下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。
1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。
具体方法如下：步骤一：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。
步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。
步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。
步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。
步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。
优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。
缺点：成活率较低，制作时间较长。
2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。
具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。
将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。
步骤二：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。
步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。
步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。
步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。
优点：出菌率高，菌株品质好。
缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。
3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。
具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。
食用菌制种技术
一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备 为了在使用之后能排湿、通风，应在室内顶部
设置小型排风扇，在室内的侧面底部设置玻 璃纤维 过滤进气口。
无菌室(包括缓冲间)除照明用光源外，还应安 装紫外线杀菌灯，吊装在接种操作台的正上 方。
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （3）接种设备
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （2）灭菌设备
手提式高压灭菌锅的 容积小，适用于试管培 养基、三角瓶或平皿、 无菌水、少量菌种瓶及 一些器皿的灭菌。
手提式高压灭菌锅
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备 （2）灭菌设备
立式高压灭 菌锅容量大，可 用于菌种瓶、罐 头瓶及塑料袋装 培养基的灭菌。
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备
A、接种针 I、接种镊
B、接种钩 F、接种耙
（3）接种设备
C、接种环 G、接种刀 D、接种铲 H、接种勺 E、接种锄
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一 、菌种的制作
2、菌种生产的主要设备
在制作一 级种和少量二级 种时，可采用电 热恒温箱或隔水 式电热恒温箱， 目的是控制温度， 适温培养
制作母种时常 用的药品有
琼脂、葡萄糖、蔗糖、 磷酸二氢钾、硫酸镁、 蛋白胨、麦芽汁、酵 母膏和维生素B1等。
原种和栽培种 常用药品有
石膏粉、碳酸钙、过 磷酸钙、蔗糖、红糖、 尿素、硫酸铵等。
29
一 、菌种的制作
3、制种用品及材料 (1)药品 ②消毒及杀菌药品
5％甲醛
75％酒精 0.1％升汞 5％石碳酸
2％～5％漂白粉 0.25％新洁而灭 0.l％高锰酸钾 1％～2％煤酚皂溶液(又称来苏尔)
第三章 食用菌菌种制作
用途
栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
生产总过程
子实体 母种
栽培
原种
栽培种
（二）状态不同的菌种
1.固体 菌种
概念 用固体基质培养的菌种 设备、工艺简单 特点 菌龄长而不一 发酵率较低
概念 用液体基质培养的菌种 2.液体 设备、工艺较复杂 菌种 菌龄短而一致 特点 发酵率高 易老化和自溶
三、菌种生产程序
2、气体灭菌法（熏蒸杀菌法）
适用：接种箱、接种室和菇房消毒。 常用药物：40%甲醛溶液、硫磺、菇保一号、 科达气雾消毒盒、克霉灵气雾消毒剂。
第二节 母种制作
一、母种培养基制作
二、菌种分离 三、母种扩繁
一 母种培养基制作
（一）营养液制作(PDA培养基)
1.
准备工作
（1）材料 马铃薯、葡萄糖（或蔗糖）、琼脂、 水。 （2）仪器用具及消毒药品 电炉子、铝锅、玻 璃棒、漏斗、纱布、止水夹、漏斗架、切菜小刀、切 板、1000ml烧杯、捆扎绳、棉花、试管 （18mm×180mm）、试管架、铁丝筐、1.5cm厚的长木 条、标签、天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、牛 皮纸、皮筋、纱布、恒温培养箱、手提式高压灭菌锅、 超净工作台或接种箱、接种铲、酒精灯、火柴、记号 笔等。消毒药品包括：75％的酒精棉球、0.25%新洁 尔灭溶液、烟雾消毒王或菇保一号等。
二 菌种分离
（一）概念
菌种分离：用无菌操作的方法将所需要的食用菌 从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。
（二）关键
严格按无菌操作规程进行 无菌操作：任何一个操作过程都要注意避免把其 它任何无关的菌体带入到培养基中。 注意二点： 1．严格树立无菌观念； 2．严格遵循无菌操作规程。
食用菌栽培技术(全)
2023-11-11CATALOGUE目录•食用菌基础知识•食用菌栽培技术•食用菌生长环境与控制•食用菌病虫害防治•食用菌采收与加工•食用菌市场与前景•附录：相关法规与政策01食用菌基础知识食用菌定义食用菌是指一类可食用的大型真菌，具有丰富的营养价值和药用价值。
常见种类香菇、平菇、金针菇、木耳、灵芝、银耳等。
食用菌的定义和种类食用菌的营养价值食用菌富含蛋白质，不同种类的食用菌其蛋白质含量有所差异。
蛋白质碳水化合物脂肪维生素和矿物质食用菌中的碳水化合物以多糖为主，具有提高免疫力、抗肿瘤等作用。
食用菌的脂肪含量较低，但富含不饱和脂肪酸，有助于降低胆固醇。
食用菌富含多种维生素和矿物质，如维生素B、维生素D、钙、铁等。
栽培历史食用菌栽培起源于古代中国，已有数千年的历史。
目前，全球各地均有食用菌栽培产业。
栽培现状随着科技的发展，食用菌栽培技术不断改进，出现了许多新型栽培技术，如工厂化栽培、液体深层发酵等。
食用菌的栽培历史与现状02食用菌栽培技术选择交通便利、水源充足且干净、环境卫生良好的地点建立食用菌栽培基地。
同时，考虑到食用菌对土壤质量的要求，基地应远离工业污染源和农业污染源，如化肥厂、农药厂等。
栽培场地选择根据不同食用菌种类和生长需求，搭建不同规格和类型的菇房、菇棚或露天栽培场地。
栽培设施需具备良好的保温、保湿、通风和光照条件，同时要考虑到卫生防疫和环境保护。
栽培设施栽培场地与设施培养料的选择与配制培养料种类与选择根据不同食用菌种类和生长阶段，选择适宜的培养料，如木屑、棉籽壳、麸皮、玉米粉等。
培养料应具备营养丰富、新鲜无霉变、无病虫害等优点。
培养料配制根据不同食用菌种类和生长需求，将各种培养料按照一定的比例混合，同时加入适量的水、石膏粉等辅助物质，调节培养料的湿度和酸碱度，以满足食用菌生长的需要。
菌种制备与选择菌种类型与选择根据不同食用菌种类和生产需求，选择适宜的菌种类型，如固体菌种、液体菌种等。
菌种应具备生长速度快、产量高、抗病能力强等优点。
食用菌生产技术 液体菌种
3.制作饮料、保健品 3.制作饮料、 制作饮料 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→ 食用菌液体培养物经过粉碎→研磨打浆→热 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配， 水浴浸提→过滤→稀释或浓缩→调配，可研 制成功能饮料、保健品。 制成功能饮料、保健品。 4. 制作畜禽饲料 食用菌液体培养物，经过浸提或提取有用成 食用菌液体培养物， 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。 分后的废弃物，还可制作畜禽饲料。
五、液体菌种制作的主要工艺 1.液体种子制备 1.液体种子制备 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 液体种子制备的目的是大量繁殖足够数量的、 健壮的、高纯度的菌丝体。 健壮的、高纯度的菌丝体。 ⑴ 斜面菌种制备 制备方法（培养基配方和操作步骤）同试 制备方法（培养基配方和操作步骤） 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 管斜面母种的制备，在此不再多讲了。 ⑵ 摇瓶种子制备 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 主要操作步骤：称量→煮制→分装→灭菌→ 无菌检验→接种→ 无菌检验→接种→振荡培养管理
四、液体菌种制作的主要设备 1.摇床食用菌为需氧菌，液体菌种培养需 摇床食用菌为需氧菌， 摇床食用菌为需氧菌 要增加氧气的供应，因此， 要增加氧气的供应，因此，不断振荡有 利于菌丝体的快速生长。 利于菌丝体的快速生长。摇床是液体菌 种生产常用的设备 2.种子罐和发酵罐 种子罐和发酵罐 一级种子罐通常为50-100L，二级种子罐 一级种子罐通常为 ， 为500-1000L。 。
六、液体菌种制作的主要参数
1.菌龄 2.接种量 3.温度 1.菌龄 2.接种量 3.温度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 4.通气量 5.搅拌速度 6.酸碱度 7.罐压 8.泡沫控制 7.罐压 8.泡沫控制 9.发酵特点 9.发酵特点
食用菌制种技术（五）
食用菌制种技术（五）人们采取无菌操作的方法，把某种食用菌从混杂的微生物中，单独地分离开来，这个过程叫做菌种分离。
从分离过程中得到的菌丝体纯化后，就是纯菌种。
在实验室条件下，以人工使纯菌种大量生长和繁殖的方法，叫做培养。
一、母种培养(一)菌种分离菌种分离通常采用的方法有孢子分离法、组织分离法和寄主分离三种方法，三种方法各有特点，可根据不同的菌类和生产条件选择使用。
1.孢子分离法孢子分离法，是利用成熟子实体的有性孢子能自动从子实体层中弹射出来的特性，在无菌条件下和适宜的培养基上，使孢子萌发成菌丝，而获得纯种的一种方法。
(1)孢子的采集①种菇的选择用作分离菌种的种菇，应选择出菇早、朵型好、个体肥大、生长健壮、无病虫害、八成熟的菇体。
一进入出菇期，就要注意观察选择，并作好标记。
不同的食用菌选择的具体要求是：香菇菇型圆整，菇体肥大，柄细而短，菌盖呈深褐色，出菇早，无病虫害，一般为八成熟的子实体。
双孢蘑菇菇型圆整，光滑直立，颜色洁白，柄粗盖厚，无病虫害，生长快而健壮的单生菇。
草菇菇型端正，肥大健壮，包被未破，无病虫害的单生菇。
平菇出菇早，菌盖厚实，重叠丛生，菌柄粗短，色泽鲜亮，尚未散发孢子，八成熟而无病虫害的子实体。
木耳选朵大、耳片厚、色黑、生长健壮、褶皱多、无病虫害的春耳。
银耳朵大肉肥、色泽洁白、展片良好、朵型美观、八成熟、无病虫害的子实体。
猴头形状正常、颜色洁白、出菇早、生长健壮、菌刺丰满、无病虫害的子实体。
金针菇出菇早而均匀、生长健壮、朵型正常、菌柄长短适中、无病虫害的子实体。
②种菇的消毒子实体采回后要及时切除基部，并进行表面消毒。
对子实体层未外露的种菇(如蘑菇等)，可浸入0.1%升汞溶液中消毒约1分钟，用镊子捏出后经无菌水冲洗数次，再用无菌纱布将表面水吸干；对于子实层裸露的种菇(如香菇等)，只能用75%酒精揩擦菌盖及菌柄表面；而对于银耳、木耳类子实体，却千万不能接触消毒剂，只能置于烧杯中用无菌水洗涤，然后捏起再经无菌水冲洗数次，同样用无菌纱布吸干表面水。
食用菌简易制种技术
食用菌简易制种技术常规制种，其设备昂员，条件要求严格，技术也复杂，菌种成本高。
建一个菌种厂，设备投资少则上千元，多则几万元。
简易制种技术，就是不需要专门设备，利用家里现有条件就可制种。
（一）蒸汽接种法准备：先把接种操作室打扫干净，保持潮湿清洁。
准备水壶或铝锅1只，煤球炉或电炉1只，接种台1张，接种针或大镊子一把。
蒸料灭菌桶：用铁皮做成比铝锅口径小一点的圆桶，桶底放铁筛架，桶内装菌袋、瓶。
上边口用塑料纸或木盖封口。
操作：将煤球炉或电炉放在操作台旁，再将水壶或铝锅放在炉子上面，锅内装适量的水，接种工具先放在锅内煮沸消毒。
接种时，关好门窗，洗净双手，戴上口罩。
将菌种块直接通过蒸汽放入栽培种的培养料上。
在蒸汽上接种，既舒服又方便，且接种质量可靠。
因为蒸汽在上冒的过程中产生一股冲力，把水壶或锅上的空气排开，蒸汽不断产生，就形成锅上一片无菌区。
由于菌种得到蒸汽的湿润，比在酒精灯上接的种恢复得更快，污染也少。
另外蒸汽接种不使用化学药品，可避免在接种时药品对入体的毒害。
（二）代替琼脂培养基1.绿豆粉培养基：将新鲜、干燥、不霉变的豆粉队放入锅内煮沸调团状，装入试管或三角瓶内，塞好棉塞，用牛皮纸或报纸包扎好试管上部，成捆放于高压锅内，用12公斤／厘米2压力灭菌半小时，然后慢慢放汽，取出试管凝固成斜面即成。
2.麦粒种：将小麦粒用温水浸泡2小时，捞出放入竹筛内，4个小时烧一次清水，约24小时左右，麦粒就萌发小芽约1厘米。
这时再放火锅内煮沸半小时，取出用凉水冷却后，加入石膏、干马粪使之成散粒，然后分装试管、三角瓶、蘑菇瓶、杂酒瓶，装量按常规。
塞好棉塞进行灭菌，15磅压力灭菌1小时。
然后接种。
采用此法可节约大量琼脂。
化学药品。
（三）于实体组织分离简易方法在无菌环境中，直接切取菇体未形成孢子组织块，进行培养即称简易分离技术。
方法：在第一批菇中，选取具有该品种特性的、发育正常、菌盖肥厚、朵大、无病虫害的子实体作种菇。
在蒸汽上用手把子实体一分为二，用消毒过的小刀在萌盖和菌柄交界处切取一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。
食用菌制种技术
食用菌制种技术菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。
其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则相对比较简单。
下面介绍各级菌种的制作技术。
一、母种的分离选育母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。
作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。
1.采集种源从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。
①种菇选择时间。
一般在11月上中旬，在第1批和第2批菇中挑选。
因为这段时间蘑菇生长正是旺盛时期，菌丝生活力强，子实体健壮，质量好，加之气温适宜，蘑菇能正常成熟。
②种菇的标准是：八成熟，朵形圆正，肉质肥厚，颜色洁白，无病虫害。
采集一二朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。
从栽培室采集的应标有原菌株代号。
2.培养基配制琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200克、琼脂16克～18克、葡萄糖20克、水1000毫升。
先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸15分钟～30分钟至薯块酥而不烂为止。
煮后用6层～8层事先浸湿拧干的纱布过滤，过滤后加入琼脂16克～18克（气温低时加16克，气温高时加18克）再煮，并不断搅拌，使固体琼脂完全溶化，再用4层～6层纱布过滤。
将滤液加水至1000毫升加入20克葡萄糖，搅拌溶化趁热分装试管。
装入量为试管高度的1/4～1/5，注意培养基不要粘着试管口，管口用棉塞塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，每瓶装量为20毫升。
然后置于高压锅内，在压力达108千帕，锅内温度为121℃灭菌30分钟左右。
灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。
第三章食用菌制种技术五
一、食用菌菌种的分离技术 2.孢子分离
①单孢子分离 ②孢子印分离 ③孢子弹射分离法
一、食用菌菌种的分离技术
4.生物技术育种
①紫外光照射 ②原生质体融合 ③化学药物诱变
一、食用菌菌种的分离技术
5.野生菌菇的驯化
菌种驯化的原理：驯化是通过人工措施使食用菌菌种逐步 适应某一条件，而定向选育菌种的方法。通过驯化可取得 具有较高耐受力、活动能力以及产量的菌株。驯化常用于 野生蘑菇的选育，以获得对人工环境具有较高的适应能力 的高产菌株。
②原种、栽培种质量的鉴定
具有
菌丝白（符合该菌种的颜色） 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快
没有
无杂色、无黄水、无结皮、 无原基、无干缩脱壁等现象
菌种种类 品种名称 菌种级别 代时 生产厂家 接种日期
用于生产
产生原基
污染
黄 水
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（二）良种的退化 菌种退化是指突然或逐渐丧失原有的生命力和生产性能的 现象。随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转管继代， 菌种本身所具有的优良遗传性状可能得到延续，也可能发 生变异。
外观
好
菌丝白、整齐、粗壮、 有弹性、萌发快等
差Байду номын сангаас
丝干燥、收缩、自溶 产生红褐色液体等
好母种
退化母种
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（一）良种的标准 ②二级菌种和三级菌种 二级菌种和三级菌种无 病虫害、无杂菌感染，菌丝洁白，均匀，粗壮浓 密，不萎缩，不发黄，再生力强，移接后萌发快， 吃料快。长满菌种的培养料有菌种特有的香味。
外因 传代过多，条件不适宜
食用菌栽培种制备技术
食用菌栽培种制备技术随着人们对健康饮食的追求和对生态环境的关注，食用菌的生产与消费逐年增加。
而食用菌的种植技术则成为了菌农们共同关注的话题。
科学的食用菌栽培种制备技术能够帮助农民提高产品的品质和产量，增强种植技术的可持续性，从而更好地满足消费者的需求。
本文将介绍食用菌栽培种制备技术的相关知识，为菌农们提供技术参考。
食用菌栽培种的定义和分类食用菌栽培种指的是经过特定处理的食用菌菌种，是肉眼无法区分的干燥培养基或发酵基质。
食用菌栽培种可分为夏季和冬季两种型号。
根据其用途可分为原种和工厂栽培种，其中原种为一级级的育种并筛选获得，工厂栽培种则是通过培养技术生产的，两种型号的制备过程不相同。
食用菌栽培种制备流程夏季食用菌栽培种的制备方法1.挑选异核型及壳墨雪耳等低温菌株种植，培育至菌丝团均匀后，进行混合接种，即充分混合各品种的菌丝种菌，不断重复此步骤，直至菌种无法接种为止。
2.接种后的养料放入阴凉通风处，温度控制在16-20℃，菌丝进入快速生长期。
待菌丝在其生长介质中生长到一定程度后，会在之后的3-5天内更换生长介质，循环七至十次后即可进行下一步骤。
3.将菌丝在无细菌的环境下细胞切割成等分的小组织块，每一块称为一个“菌种”，即制得菌种。
将菌种放入培养基中的生产容器内，保持在17-25℃范围内，培养两到三周即可得到夏季食用菌栽培种，同时进行菌丝体的缩短工作，以提高菌种的产量和质量。
4.通过分离纯化得到满足要求的的菌种，采用分批生产的方式，得到夏季食用菌栽培种。
冬季食用菌栽培种的制备方法1.冬季食用菌栽培种是获得单株的细胞组织再生分化产生的。
所用的材料可从已成型菌体的盖盖侧褶肉眼观察，稍黑带金黄色的细胞集落中轻微划开闪光下挑选种子,将其放入新鲜环境下进行培养，待菌体长成后进行筛选，挑选成为基础种。
2.将基础种进行45天左右的培养，在其成熟期覆盖在1厘米育种土表层，创造生态环境中进行菌株的扩散。
3.将菌株扩散后的土壤进行筛出，去掉杂质后，将350克固态培养基添加3毫升菌种，在土壤表层铺设采光布，控制温度，适当喷水，等待栽培种长成即可。
食用菌制种原理与技术
实行纯培养
基本 要求
不含任何杂菌
用于 生产
二、菌种类型
目的
保藏用种 实验用种 生产用种
一级菌种
按
级别 二级菌种
三级菌种
状态：固体菌种、液体菌种
种菇或种木选择
种菇或种木处理
原始母种培 养基制备 一级种培 养基制备 二级种培 养基制备 三级种培 养基制备
制种流程
原始母种 一级母种
二级种 三级种
转管扩繁 保存
3.三级种（栽培种）
将原种扩大至粗放培养基上 概念 形成的菌种
菌种袋、较粗放的液体 概况 培养环境 或固体培养基
用途 栽培生产
特点 菌丝多而壮、适应性强
生产总过程
子实体
母种
栽培
栽培种
原种
（二）状态不同的菌种
1.固体 菌种
概念 用固体基质培养的菌种
设备、工艺简单 特点 菌龄长而不一
发酵率较低
煮沸20min，取定量滤液 滤液沸时加入，融后加余料 10%NaOH或HCl 勿污管口，控制装量 准备灭菌
（二）原种、栽培种培养基
1.种类
(1)棉籽壳培养基
配方（%）
主料 棉籽壳87，麦麸10 辅料 白糖1，石灰1，过磷酸钙1
配制
棉壳、麦麸干混 余料溶于水后浇入主料 清水翻拌至含水量
(2)颗粒培养基
斜面培养基 平板培养基
特性
条状
属天然植物多糖
融点96℃以上 凝点40 ℃以下 冷水中不溶
透明度好、粘着力强
不被微生物分解利用
粉状
二、各级菌种的培养基
（一）母种培养基
1.通用配方 马铃薯200 g、葡萄糖20 g
PDA 琼脂15~20 g、水1000 ml
食用菌母种制作技术
食用菌母种制作技术在食用菌生产中，母种的培养是至关重要的一环。
母种质量的优劣，直接影响到食用菌产量的高低和栽培的成败。
下面小编给大家分享了食用菌母种制作技术，一起来了解一下吧!食用菌母种制作技术制作培养基先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。
然后在马铃薯煮汁中加琼脂20克和蔗糖20克煮溶，后补足水至1000毫升，调节pH值在5.5～6。
调好pH值后进行分装，一般将培养基装至试管的1/4处，而后加盖棉塞，再用牛皮纸将试管每10支捆成一捆。
分装时，注意培养基不可沾在近试管口的壁上，以免日后生霉菌。
分装后要立即进行高压灭菌，不可过夜。
高压灭菌将用牛皮纸捆好的试管(棉塞朝上)竖直放入高压锅内进行灭菌。
在0.11兆帕压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。
灭菌时，放汽要充分，否则影响灭菌效果。
开锅取出试管后趁热摆放，使培养基成斜面。
试管的斜面以距棉塞3厘米为宜，斜面摆成后，不宜再摆动。
一级菌种扩管扩管要在无菌条件下进行，先将扩管工具、培养基及菌种放到扩管箱内，然后按每立方米用高锰酸钾5克、40%的甲醛溶液10毫升的量进行熏蒸消毒30分钟。
扩管方法：先将扩管铲在酒精灯火焰上灼烧消毒，然后拔掉母种管上的棉塞，铲一块米粒大的母种，在酒精灯火焰无菌区内迅速送入菌种试管内。
扩管后的母种培育10~15天即可投入生产。
食用菌母种怎么制作母种制作：母种培养基配制：母种培养基的原料是马铃薯，葡萄糖，蛋白胨，水，琼脂粉，以配制一千毫升的母种培养基为例，将马铃薯去皮后称重200克，葡萄糖20克，琼脂粉20克，蛋白胨10克，用量杯量取1000毫升的水倒入锅中，用刀将马铃薯切成片加入锅中，用文火煮沸，煮至用筷子轻轻一插既可插入，这时可以用四层的纱布过滤煮好的马铃薯汁，然后倒在量桶里，看一下，如果不足一千毫升可加水补足一千毫升，在倒入锅中煮，最后加入称好的葡萄糖、琼脂粉、蛋白胨，为了防止锅底烧焦要边加热边搅拌，煮至完全溶化，母种培养基就配制好了。
食用菌母种的制作方法
食用菌母种的制作方法一、食用菌种瓶的选择用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。
二、培养基的配制1．配方：马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂18～20克，水1000毫升。
2．制作：马铃薯挖去芽眼，去皮洗净，切成薄片后加水，在铝锅中煮沸25～30分钟，用4层纱布过滤，取滤液放入铝锅中，加入琼脂，小火加热并不断搅拌，待琼脂溶化后加入葡萄糖，加开水补足1000毫升，搅匀，趁热装入盐水瓶中，每瓶装8～10毫升，塞上棉塞棉塞要求干燥、松紧、长度合适，再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分，用胶圈扎紧瓶口。
三、灭菌采用高压灭菌，若没有专用高压锅，可用家用高压锅进行灭菌。
方法是：将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中，瓶间留有空隙，不可堆放过紧，以利蒸汽循环，灭菌彻底。
当压力表指针指到0．05时，打开放气阀，集中排出冷空气，使压力降到零时，关闭排气阀进行升压灭菌，自动放气后保持30分钟家用普通高压锅灭菌1．5小时，让其自然冷却，取出放置在接种箱中备用。
四、菌种分离主要采用组织分离法。
通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种，操作时，从子实体内切取一小块组织，放在培养基中培养可长出纯菌种，且菌丝萌发快，遗传性状稳定，后代不易发生变异。
1．种菇消毒：种菇采下后，切去菌柄，放入洗净的盘内，在装有紫外灯的接种箱内照射20～30分钟。
2．接种块切取：在已消毒的接种箱内，撕开子实体，用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀，在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块，放入菌种瓶内培养基上培养。
3．接种块选择部位：接种块选择部位因食用菌种类不同而异，菇体肥厚的种菇，在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。
菌体小、盖薄、柄空的菌类如金针菇，应快速击掉菌盖，用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。
菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类，可采用子实层分离法，选取半破膜的子实体，移入培养基上，菌丝萌发后即转入新的培养基上。
对子实体较大、质地结实的多孔菌类，应取子实体外缘菌肉组织块。
食用菌栽培种的制备技术
食用菌栽培种的制备技术
食用菌栽培种的制备技术
栽培种由原种扩大而成，所有的原种培养基均可用于制备栽培种。
栽培种培养料的制备与原种基本相同。
（1）配料的方法和步骤棉籽皮一麸皮培养基（适用于木耳、金针菇、滑菇、平菇等栽培）：棉籽皮44千克、麸皮5千克、蔗糖0．5千克、石膏粉0．5千克。
木屑一麸皮培养基(适用于银耳、黑木耳等栽培种): 木屑38千克、麸皮10千克、石膏粉0 .5千克、蔗糖0.5千克、硫酸镁150克、黄豆粉850克，加水47.5－52.5千克。
棉籽皮-木屑培养基(适用于香菇栽培种): 棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮或米糠10千克、蔗糖0.5千克、石膏粉0．5千克、水3 0千克。
pH 6.5－7为宜。
以棉籽皮一木屑配制为例：首先称量棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮10千克、石膏粉0．5千克、蔗糖0.5千克，加入适量水搅拌均匀；培养料拌好后即可装入聚丙烯袋中，装料时将料的底角内插，上下松紧程度要一致，边装边压实，每袋可装干料300－375克，湿料700－850克。
装好袋后，在培养料中间插一洞穴，深度离袋底1寸左右，袋口放一棉塞，扎紧袋口。
装好袋后当天灭菌，以免培养料发霉变质。
灭菌：塑料袋栽培种灭菌时宜卧放，不要摆的过紧，要留有空隙，以便于蒸气流通。
如果用高压灭菌，在每平方米13．1千克的压力下灭菌2．5小时。
如用土蒸锅，温度达到100℃后再继续灭菌8－10小时。
食用菌菌种管理办法
食用菌菌种管理办法【发文字号】中华人民共和国农业部令第62号【发布部门】农业部(已撤销)【公布日期】2006.03.27【实施日期】2006.06.01【时效性】已被修改【效力级别】部门规章中华人民共和国农业部令（第62号）《食用菌菌种管理办法》已于2006年3月16日经农业部第8次常务会议审议通过，现予发布，自2006年6月1日起施行。
1996年7月1日农业部发布的《全国食用菌菌种暂行管理办法》（农农发[1996]6号）同时废止。
部长杜青林二〇〇六年三月二十七日食用菌菌种管理办法第一章总则第一条为保护和合理利用食用菌种质资源，规范食用菌品种选育及食用菌菌种（以下简称菌种）的生产、经营、使用和管理，根据《中华人民共和国种子法》，制定本办法。
第二条在中华人民共和国境内从事食用菌品种选育和菌种生产、经营、使用、管理等活动，应当遵守本办法。
第三条本办法所称菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。
菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。
第四条农业部主管全国菌种工作。
县级以上地方人民政府农业（食用菌，下同）行政主管部门负责本行政区域内的菌种管理工作。
第五条县级以上地方人民政府农业行政主管部门应当加强食用菌种质资源保护和良种选育、生产、更新、推广工作，鼓励选育、生产、经营相结合。
第二章种质资源保护和品种选育第六条国家保护食用菌种质资源，任何单位和个人不得侵占和破坏。
第七条禁止采集国家重点保护的天然食用菌种质资源。
确因科研等特殊情况需要采集的，应当依法申请办理采集手续。
第八条任何单位和个人向境外提供食用菌种质资源（包括长有菌丝体的栽培基质及用于菌种分离的子实体），应当经所在地省级人民政府农业行政主管部门审核，报农业部批准。
第九条从境外引进菌种，应当依法检疫，并在引进后30日内，送适量菌种至中国农业微生物菌种保藏管理中心保存。
第十条国家鼓励和支持单位和个人从事食用菌品种选育和开发，鼓励科研单位与企业相结合选育新品种，引导企业投资选育新品种。
食用菌的制种技术
食用菌的制种技术作者：杨彦秋蔡正勇柳继三来源：《农村实用科技信息》2009年第07期近年来,食用菌生产发展迅速,成为农民增收的良好途径,在食用菌生产中,制种环节尤为重要,制种技术中比较重要的两个方面是:一､无菌操作技术无菌操作是食用菌制种工作成败的关键｡它包括两方面内容:一是制种过程中使用的全部材料是无菌的;二是必须采用无菌操作方法(也包括培养条件)两者结合起来,才能保证制种的全部过程是无菌的,才能培养出纯菌种｡1､高温灭菌(1)火焰灭菌接种环､接种钩､接种铲､镊子等金属器皿可直接在酒精灯火焰上烧灼灭菌,试管口､瓶口也要通过火焰达到灭菌目的｡方法简单迅速,灭菌彻底｡(2)常压蒸汽灭菌将灭菌物品(培养料)放在蒸笼内蒸煮｡从开锅(100℃)开始算起,连续加热开锅4~12h达到彻底灭菌｡个体户或菌种厂自制的灭菌灶,在生产原种､栽培种或栽培菌袋时,均采用此法灭菌｡此法简单､适用､成本低｡(3)高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是生物灭菌技术中应用最广,灭菌时间短,效果最佳的灭菌技术,原理是根据蒸汽温度随压力增加而提高,压力越大温度越高的原理｡水在封闭的灭菌器中(高压灭菌锅中),通过加热使灭菌器中的水产生水蒸汽,在排除灭菌器内冷空气后,关闭排气阀,蒸汽不能逸出,增加了灭菌器中的压力,水的沸点或蒸汽的温度随之上升,因而获得了比100℃更高的温度,达到有效灭菌的目的｡一般培养基在高压灭菌器中待压力升到℃)时灭40min,也可在｡(126℃)灭30min,达到彻底灭菌,如灭固体培养料在灭菌1~2h即可｡高压灭菌器有手提式､立式､卧式等多种型号｡热源有电源､煤､煤气､蒸汽等等｡2､紫外线杀菌波长在2600~2800A｡的紫外线有很强的杀菌能力｡电子通过水银蒸汽可产生波长2357A｡的紫外线,以此制成的紫外线灯管,杀菌力强而稳定｡距被照物体20~30cm照射3~5min,即可杀死细菌的营养体,十几分钟可杀死细菌的芽孢｡紫外线灯管在生产实践中应用较广,用于空气消毒,但穿透力不大,只能用于表面消毒｡接种室､接种箱､手术室､药厂等均可安装｡接种箱安15w,接种室可视大小安30w或100w,照射30min即可达到灭菌目的｡紫外线对眼黏膜､视神经､皮肤等均有杀伤力,故不能在开着的紫外线灯下工作,必要时需穿防护衣帽,并戴上有色眼镜工作｡3､化学药物杀菌(1)甲醛(福尔马林):40%甲醛溶液用于接种箱､接种室､培养室熏蒸消毒,用量加热时挥发产生气体对空气杀菌｡有两种方法:①直接加热熏蒸:关闭门窗,按空间大小称其用量,倒入铁或铝盒中,放在酒精灯上或电炉上加热,挥发出甲醛气体密闭24h;②氧化熏蒸:高锰酸钾与甲醛混合熏蒸,因为高锰酸钾是一种氧化剂,与甲醛混合时发生氧化还原反应,使甲醛挥发为气体,甲醛与高锰酸钾比例为2∶1,将甲醛倒入瓷碗中,再按2∶1比例加入高锰酸钾,混合后立即产生气体｡甲醛熏蒸应在使用前24h进行｡甲醛蒸气对眼黏膜､呼吸道有强烈的刺激作用,且有毒,熏蒸后短时间不能入室工作,待甲醛蒸气散消后才能入室工作｡(2)硫磺:常用在接种室､培养室熏蒸｡用量关闭门窗,点燃熏蒸,密闭12h｡(3)高锰酸钾:0.1%的高锰酸钾,用于工具､器皿和手的消毒｡(4)来苏儿(煤酚皂液):3%的来苏儿,用于器皿或室内喷雾消毒｡(5)石碳酸:3~5%的石碳酸,用于器皿消毒或室内喷雾消毒｡(6)新洁尔灭:0.1~0.25%的新洁尔灭,用于器皿消毒或室内喷雾消毒｡(7)75%酒精:接种时用于擦手或瓶口等｡(8)石灰:石灰分生石灰和熟石灰两种｡熟石灰配成l%~3%石灰水,用于地面､墙壁消毒;生石灰用于地面､墙壁消毒｡畦底可撒石灰粉消毒,菌床､菌砖等局部发现杂菌可撒石灰粉消毒｡(9)多菌灵或托布津:生料栽培时用0.1%~0.2%多菌灵或托布津拌入料中防止杂菌污染｡(10)苯菌特:是一种高效低毒广谱的内吸杀菌剂,用法同多菌灵｡以上消毒药品可根据情况选用,为避免杂菌产生抗药性,可轮换使用,以提高杀菌效果｡二､无菌操作为避免杂菌污染,菌种韵移接､分离､接种工作要求在一个相对无菌环境下,通过无菌操作进行｡小规模的可在无菌箱内进行,工作量稍大的,可在超净工作台上或无菌室内进行｡1､无菌室(接种室)的设计与要求无菌室应分里外两间｡里间为接种室,面积外间为缓冲间,面积为两间高度均为2~2.5m,过大不易保持无菌状态｡房间的地板､墙壁､天棚要平整光滑,便于擦洗消毒;门设拉门,门窗能关严密闭｡接种室､缓冲间均应安装紫外线灯｡接种室应备有酒精灯､火柴､接种钩､接种铲､剪刀､镊子､75%酒精棉球等等;缓冲间应备有工作服,托鞋､帽子､口罩､消毒药品､喷雾器等等｡2､接种箱的设计与要求接种箱是木柜镶玻璃结构,大小不一,一般为100cm×70cm×50cm｡要求严密,操作口要安装套袖,箱上方装15w紫外光灯,两侧设有能开关并且严密的门,以便取放接种物品｡接种室､接种箱要保持清洁,使用前进行消毒｡消毒方法:(1)熏蒸:用甲醛,硫磺或甲醛与高锰酸钾混合进行熏蒸,按空间大小称其用量,关闭门窗密闭24h,熏蒸完毕,打开门,待甲醛气体扩散后,再入室工作｡(2)喷撒:用3%来苏儿或5%石碳酸向地面喷撒,向空气喷雾以及擦洗桌面进行消毒｡(3)超净工作台:超净工作台是利用多层滤板过滤空气,使操作台上的空气得以净化,是接种的良好设备｡操作台安有15w紫外线灯,接种前照射30min,关灯后工作｡。
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第三章 食用菌制种技术
第七节 菌种的分离、接种与培养
一、食用菌菌种的分离技术 二、食用菌的接种技术 三、食用菌菌种的培养方法
一、食用菌菌种的分离技术
1.组织分离 2.孢子分离 3.基内菌丝分离（菇木分离） 4.生物技术育种 5.野生菌菇的驯化
一、食用菌菌种的分离技术 1.组织分离
基质的处理
麦粒浸透、煮熟 麸皮拌湿
装管
灭菌 接种 培养 干燥器去水
特点
防衰老 保藏时间长 转接后生长旺 易污染，灭菌要彻底
（三）保藏注意
用保种培养基 及时保藏（菌丝占斜面2/3） 最好换胶塞 用时活化 严防棉塞受潮
菌种保藏中心：
中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC亚洲最大） 中国工业微生物菌种保藏管理中心
外因 传代过多，条件不适宜
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
菌种退化的原因：
①菌种转管次数太多 ②杂菌污染 ③人工选择的偏差造成原有优良性状的减弱或消失 ④培养条件不适造成菌种质量下降 ⑤菌种遗传性状改变或出现不良杂交导致种性变化
2.提纯复壮的概念
提纯就是用人工的方法，将优良的食用菌个体从发生了变 化而表现性状不一致的群体中挑选出来，进行繁殖，并在 不断的繁殖过程中，优中选优，使食用菌群体的各种性状 达到优良、整齐一致。 提纯的主要任务是使群体的优良性状达到一致，复壮的主 要任务是使食用菌恢复和加强适应生活的能力
（一）外观鉴定
2.二级菌种和三级菌种的鉴定 不同的食用菌种类，二级菌种和三级菌种的外观也不完全 相同，但是优良的二级菌种和三级菌种有相同特征： ①生长整齐 ②外观色泽正常 ③菌丝丰满，粗壮浓密 ④菇香浓郁 ⑤菌龄合适
二、菌种质量的鉴定
（二）品种试验
1.品种比较试验
食用菌品种比较试验方法很多：
①显微镜观测法
二、菌种质量的鉴定
（一）外观鉴定 外观鉴定就是通过感官直接识别菌种优劣，一般需检验菌 种的形态、色泽、味道、生活力等质量性状。菌丝浓白、 粗壮、富有弹性，则生命力强；如菌丝萎缩、干燥无色泽、 或菌丝体自溶产生了大量红褐色液体，则生活力已变弱， 不宜再用。菌种外观鉴定中，不同的菌种，其外观也不同。
1.一级菌种的鉴定 一级菌种在同一种培养基上应具有菌株的菌落形态特征， 比如菌落的形态、气生菌丝的多寡、菌丝的色泽
2.原种 栽培种 的培养
培养时间：约30天
勿堆放过挤 及时挑拣污染瓶（袋） 栽培种的菌袋缺氧时可刺孔增氧 控制菌龄（菌丝长满后7-10天使用）
刺孔点
第八节 菌种的提纯复壮、鉴定与保藏
一、菌种的提纯复壮 二、菌种质量的鉴定 三、菌种保藏
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（一）良种的标准 ①一级菌种 食用菌的一级菌种在同一种培养基上具有 原菌株的菌落形态特征，无病虫杂菌，菌丝洁白，生长健 壮有力，边缘整齐，不发黄，不老化，菌龄掌握在刚长满 斜面即可，然后用于二级菌种的生产或继代培养。
3.提纯复壮的原理
自然界里，任何生物在生命活动过程中，自始至终都存在 着一对固有的遗传和变异的特性。变异是提供了进化的因 素，自然选择和人工选择保存适应环境的个体，遗传则把 自然选择和人工选择的结果巩固和积累下来，然后在此基 础上再变异、再选择、再遗传，如此循环往复，生物得以 不断进化。所以，生物的进化是遗传、变异、选择三要素 作用的结果。食用菌菌种的提纯复壮就是根据这个道理。
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（三）良种退化的表现 菌丝生长速度减慢，长势变弱，生活力衰退，在培养基上 出现白色浓密的扇形菌落，对不良外界条件（如温度、酸 碱度、CO2、杂菌等）的抵抗力减弱，子实体形成期推迟， 出菇的潮次不分明，菌盖、菌柄畸形、整齐度下降，产量 明显下降。
内因 菌种的遗传物质发生了负变 根源
食用菌菌种质量存在的问题： ①菌种质量参差不齐 ②品种退化和菌种老化严重 ③菌种不纯 ④品种混乱，名称不统一 ⑤种性介绍不真实
二、菌种质量的鉴定
菌种质量鉴定包括两个方面： 一方面是通过菌种的外观特征，如菌种纯度、色泽、均匀 度以及菌丝的生长势等进行评价 二是通过菌种培养以及栽培试验，观察菌丝生长速度、吃 料能力、出菇的快慢、产量的高低、对环境适应能力、抗 病虫害的强弱来综合评价菌种质量的优劣。
①吃料能力 ②成活率 ③出菇快慢 ④菇峰间隔 ⑤子实体形态 ⑥干燥率 ⑦生物学效率
三、菌种保藏
（一）保藏目的及原理 ➢目的 不死亡 不生长 不污染
使菌种 不降低或不丧失其优良性
➢原理
以尽量延长使用时间
创造不利于菌种生长的一切条件， 使其代谢处于休眠状态。
低温
概念：
根据菌种的遗传性能和生理、生化特性，人为地 创 种造原环有缺境的营条特养件性，，使使优其良不菌死不条株亡利件稳、定不地被保污存 染。，干保能燥持长优期良在菌生 产上应用，这就是菌种保藏的主要任务。
无氧
（二）常用保藏法 以母种形式保藏
1.斜面低温法 斜面菌种置4~6℃冰箱中（3~6个月）
特点
简便 保藏时间短 易污染及退化 不适于草菇等菌类
2.矿油保藏法
矿油 处理
灭菌：152kpa、30min 去水：40~50℃烘至无色透明
无菌检验 ？
注入种管 淹没斜面约1cm 口堵胶塞 用时转管再转管
3.自然基质保藏法
外观
好
菌丝白、整齐、粗壮、 有弹性、萌发快等
差
丝干燥、收缩、自溶 产生红褐色液体等
好母种
退化母种
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（一）良种的标准 ②二级菌种和三级菌种 二级菌种和三级菌种无 病虫害、无杂菌感染，菌丝洁白，均匀，粗壮浓 密，不萎缩，不发黄，再生力强，移接后萌发快， 吃料快。长满菌种的培养料有菌种特有的香味。
4.复壮的方法
①繁殖交替法
组织分离
母种
再生 母种
栽培
孢子分离 ②经常改变培养条件
③转管时只取尖端菌丝
子实体
5.防衰措施
保证菌种的纯培养 严格控制传代次数 用适宜菌龄的菌种 用适宜培养条件及保藏条件
二、菌种质量的鉴定
菌种质量包括两个方面： 一是菌种的“种性”，菌种自身的生物学特性，是菌种的 内因与基础 二是菌种的制作质量，配套设施设备、操作技术都会影响 菌种质量
①子实体分离 ②菌核分离 ③菌索分离
一、食用菌菌种的分离技术 2.孢子分离
①单孢子分离 ②孢子印分离 ③孢子弹射分离法
一、食用菌菌种的分离技术
4.生物技术育种
①紫外光照射 ②原生质体融合 ③化学药物诱变
一、食用菌菌种的分离技术
5.野生菌菇的驯化
菌种驯化的原理：驯化是通过人工措施使食用菌菌种逐步 适应某一条件，而定向选育菌种的方法。通过驯化可取得 具有较高耐受力、活动能力以及产量的菌株。驯化常用于 野生蘑菇的选育，以获得对人工环境具有较高的适应能力 的高产菌株。
②原种、栽培种质量的鉴定
具有
菌丝白（符合该菌种的颜色） 均匀、粗壮、有菇香味 接种后萌发快
没有
无杂色、无黄水、无结皮、 无原基、无干缩脱壁等现象
菌种种类 品种名称 菌种级别 代时 生产厂家 接种日期
用于生产
产生原基
污染
黄 水
一、菌种的提纯复壮
1.良种的标准和良种的退化
（二）良种的退化 菌种退化是指突然或逐渐丧失原有的生命力和生产性能的 现象。随着菌种保藏时间的延长或菌种的多次转管继代， 菌种本身所具有的优良遗传性状可能得到延续，也可能发 生变异。
中国农业微生物菌种保藏管理中心 广东省微生物菌种保藏中心（广东省微生物种质资源库）
⑦菌丝高温煅炼试验
②菌丝吃料能力
⑧均一性试验
③菌丝生长速度
⑨液体培养试验
④菌丝生长量测定
⑩菌丝颉（亢页）试验
⑤菌丝长势测定
⑪抗霉性试验
⑥极限培养试验
⑫其他生理及遗传特性分析
二、菌种质量的鉴定
（二）品种试验
2.品种栽培试验 品种栽培试验就是将自行分离或外地引入的品种与当地推 广和栽培的同类型品种，按生物统计原理进行设计栽培， 从而鉴定其品种优劣的一种方法。出菇试验是进行食用菌 良种性状鉴定的重要措施。
二、食用菌的接种技术
无菌操作的要点：
操作前的准备 无菌室的要求 培养室的要求 超净工作台的要求
三、食用菌菌种培养方法
(一)培养条件
场所清洁 光线暗
温度约25℃
空气清新
空气湿度 60%~70%
（二）技术环节
1.母种 培养
培养时间5-10天
及时挑拣污染管 分离的母种要纯化→出菇试验 →使用 控制菌龄（即将长满斜面）
二、菌种质量的鉴定
（一）外观鉴定
1.一级菌种的鉴定 优良的一级菌种，菌落外观饱满、整齐、长势旺盛。菌丝 生长整齐，同一品种、同一来源的一级菌种，扩繁后，只 要使用的培养基相同，菌丝的外观就没有明显的差异。无 病虫杂菌，不发黄，不老化，刚长满斜面即可用于扩接二 级菌种或继代培养。
二、菌种质量的鉴定