试验药物对家兔离体肠管的影响

药物对家兔离体肠管的影响

【目的】

1．观察乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的作用，并分析其作用机制。

2．学习离体肠管的实验方法。

【原理】

消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠管以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的Ach即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用——兴奋肠道平滑肌：收缩增强、张力增高。阿托品与M胆碱受体结合，能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。氯化钡的兴奋肠道平滑肌作用为Ba2+的毒性表现，其作用机制与激动M胆碱受体无关。

【材料】

1．动物：家兔。

2．药物：1×10-5乙酰胆碱溶液、0.5mg/mL硫酸阿托品溶液、0.1g/mL氯化钡溶液、台氏液。

3．器材：RM6240BD多道生物信号分析处理系统（匹配微机、显示器、打印机）；麦氏浴槽，恒温电热器，压力换能器，空气泵；手术缝合器械等。

【方法】

1．取材：取家兔1只，左手执其髂上部，右手握木锤向其枕骨部猛击致死。迅速剖腹，取十二指肠、空肠及回肠，置于盛有冷台氏液的器皿中，沿肠壁剪去肠系膜，并将肠管剪成数段，轻轻压出肠内容物，再换冷台氏液继续冲洗肠管数遍，最后将肠管剪成2～3cm的小段备用。

2．制备离体肠管标本：取备用兔肠一段，两端分别作穿透肠壁（单侧或双侧）的缝合结扎并留线。

3．联接安装离体肠管实验装置：浴槽与恒温电热器联接，恒温电热器中的水温保持在38±0.5℃。离体肠管标本一端用线扎于L型通气管上，放入盛有30mL台氏液的浴槽内，固定L型通气管。标本另一端用线与压力换能器相连，后者联通RM6240BD多道生物信号分析处理系统。用空气泵向浴槽内缓慢输入气泡（2个/s）。

4．调试实验系统：打开相应软件“RM6240并口”，选择“实验／药理学专用实验／离体肠管实验（兔）；工具／坐标滚动；等等”，并正确设置参数（时间常数为直流，灵敏度3g，滤波频率10Hz，采样频率200Hz，扫描速度1s／div。），显示离体肠管活动曲线，并调节基础张力至2g左右。

5．加药：用注射器依次向浴槽内加入下列药物，实时显示并记录曲线变化。

（1）1×10-5乙酰胆碱溶液0.1～0.2mL，当肠管收缩显著时，立即加入；

（2）0.5mg/mL硫酸阿托品溶液0.1mL，当描记曲线下降到基线时再加入；

（3）1×10-5乙酰胆碱溶液，剂量同（1），若作用不明显，接着追加1次。

（4）0.1g/mL氯化钡溶液0.1mL，待作用稳定后立即加入；

（5）0.5mg/mL硫酸阿托品0.1mL。

【结果】

打印肠管收缩曲线图，并在曲线中相应位置注明所加药物及剂量。

【注意事项】

①控制好浴槽内温度：38±0.5℃。

②冲洗干净制作离体肠管标本所需的肠管；离体肠管标本在制作时与使用前应置于冷台氏液中。

③全程操作中，不宜过度牵拉肠管。给药前调好肠肌张力，不要过紧或过松，以不影响肠肌收缩功能及对药物的反应性为原则。实验过程中不得再调整张力。

④浴槽内台氏液应该浸没肠管，实验中应结合标本大小控制液量，依据标本大小和液量调整加药量。

⑤不要把药液直接加在标本上。

⑥用作给氧的气泡不能太大或太快，避免其对描记波形的干扰。

⑦重做实验时，先取出标本、放液，冲洗浴槽三遍后再加入台氏液（可先预热），当浴槽内温度适宜时，重置（新）标本，重新实验。

⑧离体肠管标本不宜过长，两端结扎点相距不超过2cm。

⑨本实验体系还可检验其他多种类别药物对离体肠管的影响，如拟肾上腺素药、抗肾上腺素药，拟组胺药、抗组胺药等。

⑩检测每一种药物对离体肠平滑肌的影响时，都需换液后操作，分步进行。

【讨论】【结论】