第二章 血液一般检查 第二节 红细胞检查

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【测定方法及方法学评价】
（一）手工法：
1、wintrobe法： 方法：将EDTAK2抗凝血灌注于Wintrobe管，在一定条件下
离心（2264g、３０min）得到红细胞在全血中所占体积的百分 比，称为血细胞比容 。离心后血细胞分五层：分别为血浆层 （淡黄色）、血小板层（白色乳糜）、白细胞层（灰红色）、 有核红细胞层（灰红色）、还原红细胞层（黑色）及带氧红细 胞层，读数红细胞层（还原红细胞层及带氧红细胞层）
男：0.47±0.04;
女：0.42±0.05
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【临床意义】
1、红细胞比积增高： 生理性增高：高原生活、剧烈运动、新生儿 病理性增高：原发性和继发性红细胞增多症、脱水、烧 伤 2、 红细胞比积减低 ： 各种贫血，心衰，输血 3、 可用作真性红细胞增多症、临床输血及输液疗效观察的 一项指标
4、Hct是计算MCV、MCHC的基础数据之一 5、 Hct是影响全血粘度的决定性因素之一
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【方法学评价】
1、氰化高铁血红蛋白测定法（ HiCN ）
是国际血液血标准化委员会推荐的血红蛋白国际标准参考方
法。HiCN法操作简单，显色快且结果可靠，可检测除硫化血红 蛋白（SHb）外的各种血红蛋白，但强调仪器的标准化，在实际 工作中，往往使用HiCN参考液，通过绘制标准曲线求出K值来教 正结果，HiCN法在国内已经普及但并非理想的方法，其致命的 弱点是试剂氰化钾有巨毒。
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（2）病理性减少
1）红细胞生成减少 ①骨髓功能衰竭 ②造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血 2）红细胞破坏过多 ①红细胞内在缺陷如膜缺陷 ②红细胞酶缺陷 ③血红蛋白异常 ④不稳定Hb和红细胞外在异常等 3）红细胞丢失 急性、慢性失血性贫血
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二、血红蛋白测定
【概述】 【检测原理】 【方法学评价】 【参考值】 【质量控制】 【红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义 】
生理性贫血: 如妊娠中晚期、6个月至2岁、老年人。
病理性贫血：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、
2、造血原料不足：缺铁性贫血、巨幼性贫
3、红细胞破坏增加： 4、红细胞的丢失过多
贫血的分度
轻度贫血：成年男性＜ 120g/L，成年女性＜ 110g/L 中度贫血：Hb ＜ 90g/L 重度贫血：Hb ＜ 60g/L 极度贫血：Hb ＜ 30g/L
第二节
红细胞检查
主要内容
一. 红细胞计数 二. 血红蛋白测定 三、血细胞比容测定 四、红细胞平均值的计算 五. 红细胞形态检查 六、网织红细胞计数 七、嗜碱性点彩红细胞计数 八、红细胞沉降率侧定 九、红斑狼疮细胞检查
一. 红细胞计数（red blood cell）
【概述】 【检测原理】 【方法学评价】 【参考值】 【 质量控制】 【临床意义 】
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【检测原理】
红细胞计数：即测定单位体积血液中RBC的数量 。 有显微镜法和仪器法。 1、红细胞显微镜计数法原理：用等渗的稀释液将血 液稀释一定倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定 范围的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细 胞数 红细胞稀释液 ①Hayem液： NaCl： 调节渗透压 Na2SO4：提高比重防止细胞粘连 HgCl2： 防腐 缺点：不适宜高球蛋白血症患者。 ②枸橼酸钠稀释液： ③普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水： 2、血细胞分析仪法：电阻抗和（或）光散射原理
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四、 红细胞平均值计算
（一）平均红细胞体积(MCV)
（二）平均红细胞血红蛋白含量(MCH)
（三）平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)
（四）临床意义
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（一）平均红细胞体积
平均红细胞体积（mean corpuscular volume, MCV）：
指红细胞群体中各个红细胞体积的平均值 单位：fl（10-15 L） MCV=每升血液中红细胞比积/每升血液中红细胞个数 MCV=HCT/RBC
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【质量控制】
1、手工法：
注意避免以下因数：抗凝剂量不准确，混匀不充分，离心 速度不够均会产生误差。红细胞形态异常时可是血浆的 残留增加6%，红细胞增多症时，血细胞比容明显增高是 血浆残留也会增高
2、血液细胞分析仪法：
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【参考值】
温氏法：
男：0.40-0.50 女：0.37-0.47
微量法：
参考值
手工法：80-92fl
1mL=1012fl
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（二）平均红细胞血红蛋白含量(MCH)
平均红细胞血红蛋白含量
（mean corpuscular hemoglobin, MCH ）指红细胞群体 中各个红细胞血红蛋白含量的平均值 单位：pg （10-12 g） MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数 Hb×1012/RBC/L（皮克）
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【概述】
红细胞在正常情况下几乎占血容量的1/2，平均寿命是120
天，每天约有8%的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏，
血红蛋白降解，分解为铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋 白的重新合成。 红细胞外形：双凹圆盘形，平均直径7.2μm，厚约2μm， 无核
主要成分（除水外）：主要是血红蛋白，主要是O2和
CO2 ，并协同维持酸碱平衡。
2、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SLS—Hb）
突出优点是试剂无毒，多用此法代替HiCN，但其摩尔消光系 数还未最后测定，故其用HiCN法间接出结果。破坏白细胞，不 能用此稀释液做白细胞计数。
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【参考值】
成年男性：120~160g/L 成年女性：110~150g/L 新生儿： 170~200g/L
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计算公式
可根据下式进行计算：
Hb（g/L）=A/44×64458（mg）/1000×251
=A×367.7=Hb（g/l） A：为测定管吸光度 44：为毫摩尔消光系数 64458/1000：为1mmol/LHb溶液中所含Hb
251：为稀释倍数
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2、其他方法
1、十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法（SLS—Hb） 2、碱羟血红蛋白（AHD575） 3、叠氮高铁血红蛋白（Hi）
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【方法学评价】
1、手工显微镜法：
是传统的红细胞计数法，不需要特殊的设备，但操作复杂、 费时，现虽不常用，但仍作为： ①血液分析仪的校正。
②与白细胞减少或血小板严重减少时的对照核实。
③血小板受小红细胞干扰时的校正
2、血细胞分析仪法：
仪器法已成为目前细胞计数的主要方法,仪器法比手工法 更精确,且操作简便、快速，已广泛应用。
微量法（microhematocrit）
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【检测原理】
1、wintrobe法和微量法：
均属于离心法。将抗凝的血液（全血）置于孔径统一的温氏 管或标准毛细管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细 胞层占全血的体积比。
2、血液分析仪法：
由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标导出。HCT=红细
胞计数×红细胞平均体积
（1）病理性增多
①相对性增多：暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹 泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。 ②绝对性增多：包括继发性增多的组织缺氧EPO代 偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绀性先天性 心脏病、异常血红蛋白病等；EPO非代偿性增高 如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞 癌、子宫肌瘤、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多 囊肾和肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、 良性家族性红细胞增多症等。
MCHC =Hb/(g/L)/Hct
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Hale Waihona Puke 三. 血细胞比容测定【概述】 【检测原理】 【测定方法及方法学评价】 【质量控制】 【参考值】 【临床意义】
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【概述】
红细胞比积：（hematocrit ,Hct,Ht ,HCT或packed cell
volume , PCV ）以前称为红细胞压积指在一定条件下经离心
沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。其高低与 红细胞数量及大小有关。ISCH建议的缩写符号是PCV表示。 HCT常用于血细胞分析仪上的测定结果。PCV测定的常规方 法分为：常量法（wintrobe法）
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【概述】
1. 化学成分：珠蛋白（含两条α 链和两条非α 链）+亚铁血 红素（Fe+2+原卟啉 ） HbFe2+ + O2 称氧合血红蛋白（Hb O2）。 HbFe2 + CO 碳氧血红蛋白(HBCO) HbFe2+ （99%）称还原Hb (Hbred) . HbFe3+ （1%）高铁血红蛋白(Hi)或正铁血红蛋白(MHB) 2．空间结构：四聚体 3．血红蛋白种类： 正常成人： HbA （ α 2β2） 占96~98% HbA2（ α 2δ2 ） 占2%-3% HbF （ α 2γ2 ） 占2%以下 胎儿主要血红蛋白
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【参考值】
成年男性：(4.0～5.5)×1012/L 成年女性：(3.5～5.0)×1012/L 初生儿： (6.0～7.0)×1012/L
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【 质量控制】
1．计数误差：同白细胞计数 2．白细胞的影响：当WBC＞100 ×109/L，RBC计数应校 正。方法以有两种： （1）可直接将病人红细胞数减去白细胞数。 （2）直接在高倍镜下区别红白细胞。
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【质量控制】
1．技术误差：稀释倍数、分光光度计、比色杯 2．HICN转化液：置于棕色玻璃瓶 3．HICN参考液：部级质量参考标准 4.质控物： （1）ACD抗凝的全血 （2）进口的全血质控物 （3）醛化半固定的红细胞 （4）溶血液 （5）冻干全血
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【红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义】
1．红细胞和血红蛋白增高 标准： 成年男性RBC＞6.0 ×1012/L, 5.0 Hb ＞170g/L 成年女性RBC＞5.5 ×1012/L, 4.8 Hb ＞160g/L (1)生理性变化：①年龄与性别差异: 4.6 ②精神因素: ④气压降低: