沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究

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沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】

沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】

沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】沼泽红假单胞菌培养条件研究摘要:对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的培养条件及培养基配方进行了研究。

新筛选的培养基配方具有成分少、易配制、价格低的特点。

试验结果表明,沼泽红假单胞菌(B9)是一株较耐低营养的微耗氧的菌株,在500~5000lx光照下能良好生长,最适的生长温度为30e,培养周期为4d。

关键词:光合细菌;沼泽红假单胞菌;培养条件A Study on Conditions of Culture of Photosynthetic BacteriaAbstract:This paper studied on conditions and prescriptions ofculture ofphotosynthetic bacteria with Rhodopseudomonas palustris B9.New media is low cost and very simple. The results showed that suitable conditions of PSB were at 30e,4000~5000lx and 4days.Kew words:photosynthetic bacteria; Rhodopseudomonas palustris; conditions andprescriptions of culture随着光合细菌在水产养殖、污水净化等领域的应用,对光合细菌菌剂的需求量增加,本试验对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的主要培养条件进行研究,为光合细菌菌剂生产提供可靠依据。

1材料与方法1.1菌种光合细菌(PSB)沼泽红假单胞B9菌株,由沈阳农业大学微生物教研室光合细菌课题组分离提供。

活菌数测定方法,见参考文献[4]。

1.2营养条件对PSB生长的影响按照表1设计培养基配方,配制培养基。

EDTA和微量元素配制成母液。

分装500mL滴流瓶,每瓶400mL,胶塞封口, 121e,灭菌30min。

沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究

沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究

应用提供试验数据 . 方法 : 采用单 因素试验设计分别对 沼泽红假单胞茵培养的接种量 、p 值 、温度 、光照强度四种 因 H
素的 不同水平进行 比较试验,确定其各 自最佳试验 水平;采用 L ( ) 交试验设计从 9种培 养基 成分 组合 中选择 出最优 9 正 3
化试验配方组合. 结果 : 沼泽红假单胞 菌生长最优条件为: 接种 量为 1%、H值 为 7 、 5 p . 温度为 3 ℃、 2 5 光照强度 为 20x 0 0l
菌体富含各种生物活性蛋白、泛酸、叶酸和 B 族等多种维生素, 并且活性菌株含有某些抗病抗逆性物质, 在经 济植物种植上已得到较为广泛应 用I . 据报道, 将该菌直接作为叶面肥使用, 既能促进植物的生长发育和体 内 酶的合成, 增强光合作用, 加速植物对养分的吸收和转化, 有利于提高作物的产量和品质 ; 同时又能够改善土壤 菌群的分布, 提高土壤 的肥力[ ]但是, 8 - 9 沼泽 红假单胞菌培养基成分的配搭以及各种培养条件 的研究仍然是制 约该菌广泛应用的主要 因素之一【 . l 本文采用单 因素试验设计分别对沼泽红假单胞菌培养 的菌接种量、p … H ・ 然 学版 自
M a .2 2 y 01
沼泽红假 单胞 菌培养基 配方及培养条件 优 化实验研 究
全 亚玲,戴静 ,马 力,郝葆青
( 西南民族 大学生命科 学与技术学院,成都 604 ) 10 1

要 :目的: 定沼泽红假 单胞 菌培 养的最优化培 养基成分组合和培养条件, 确 为沼泽红假 单胞 菌直接作 为光合叶 面肥
西南民族大学学报 ・ 然科学版 自
第 3 卷 8
超净工作台( 苏净集团安泰公司) G 一7B多段可编程光照培养箱( 、P X2 0 宁波东南仪器有限公司) 、电热恒温鼓 风干燥 箱( 上海 精 宏实验设 备有 限公司) 、紫外可见 分光光度 计( 上海龙 尼柯仪器 有 限公 司) 、高 压灭菌 锅 (O ,ei —u oy , pn、 电子天平、酸度计 T MYN r k , k o aa) ma T J

沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究

沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究

沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究作者:颜纲邹宁高乐天来源:《农业灾害研究》2022年第07期摘要沼泽红假单胞菌是应用较为广泛的一种光合细菌,在污水处理、农业种植、畜牧与水产养殖等领域都有较多应用。

在自然培养条件下优化培养基配方,对培养条件中对影响细菌生长的因素进行探究。

最终确定最佳C源乙酸钠添加浓度为10 g/L,最优N、P源为复合肥2(N:P:K=15:15:15),最佳添加浓度为0.5 g/L。

细菌适宜生长的培养条件为温度25℃以上、光照强度 4 000 lx以上、pH值范围为7.5~8.0。

在植物病害防治实验中,结果表明:沼泽红假单胞菌对枣锈病病原菌、根腐病病原菌、褐腐病病原菌、叶霉病病原菌具有显著的抑制效果。

关键词沼泽红假单胞菌;培养优化;植物病害防控中图分类号:X703 文献标识码:B 文章编号:2095–3305(2022)07–0028–03沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom-onas palustris),红螺菌科,红假单胞菌属,属于光合细菌中紫色非硫细菌属的代表菌种之一,也是目前应用较广泛的光合细菌之一。

王兰等[1]利用沼泽红假单胞菌和纤细红螺菌、球形红假单胞菌的混合菌液处理虾池养殖废水,4 d后发现混合菌体对养殖废水中的COD、氨氮的去除率分别达到了72.59%、89.2%。

崔艺久等[2]对沼泽红假单胞菌的培养基和培养条件进行了优化以获得类胡萝卜素,在培养7d 后,类胡萝卜素最大产量达2.863 mg/g。

杨素萍等[3]探究了沼泽红假单胞茜Z菌株光合产氢的主要影响因素,研究结果表明:在标准状况下,菌株的最大产氨速率可达19.4 mL/(L·h)。

易力等[4]从洛河水域分离筛选得到2株光合细菌,分别为沼泽红假单胞菌、万尼氏红微菌,这2种菌对模式菌株金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有较好的抑制作用,且沼泽红假单胞菌对大肠杆菌的抑制效果优于万尼氏红微菌,后者对金黄色葡萄球菌的抑制效果优于前者。

沼泽红假单胞菌发酵条件的响应面优化研究

沼泽红假单胞菌发酵条件的响应面优化研究

沼泽 红 假单胞 菌 培养过 程 中各 因素 研究 ,探 索最 佳
培养 条 件 ,为光合 细 菌 的研究 开发 及应 用提 供参 考
食 品 与 发 酵 科 技
Fo d a d F r n a i n T c olgy o n e me t to e hn o
第4 6卷 ( 4期 ) V 1 6 N . 第 o4 , o . 4
沼 泽 红 假 单 胞 菌 发 酵 条 件 的 响应 面 优化 研 究
夏 兵 兵 , 建 平 苏 波 , 拥 军 , 文 渊 , 静 康 , 王 谢 黄
K e w o ds y r :Rho o e do na !srs e e t to ;r s o e s f c p i iain. d ps u mo spau ti;fr n ai n e p ns ura e o tm z to m
d i 03 6 / i n 1 7 - 0 X 2 l .4 0 7 o:1 . 9js . 4 5 6 - 0O — 0 9 .s 6 0
光合 细 菌(h t y tei B cei 是 自然界 比较 P o snh t a tr ) o c a 古老 的最 广泛 存在 的细 菌类 群 ,具 有原 始 光能 合 成
体 系 , 在厌 氧条件 下进 行不 放 氧 的光 合作 用 。 能 沼
向发展 具有重 要 意义 , 应 用前景 也 十分广 阔 。 其
X A Bn - ig K N in pn S o WA G Y n -u , I n y a , U N ig I ig bn , A G J — ig , U B , N o g jn X E We — u n H A G Jn a
(i unA a e )o odadF r nao d s i , h nd 1 10 Sc a cd m h fFo n emett nI ute C eg u6 1 3) i n rs

沼泽红假单胞菌

沼泽红假单胞菌

沼泽红假单胞菌的生物学特性与研究进展摘要:沼泽红假单胞菌,是地球上最古老的具有原始光能合成体系的原核生物,沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物,是一类以光为能源,利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体,并能进行光合作用的生物。

在生物学分类中,属于真细菌纲、红螺菌目、红螺菌科、红假单胞菌属。

当前广泛应用于以下几个方面:①高浓度工农业有机废水的处理及资源化;②水质净化剂,水产养殖的水质调控及促进健康生长;③高营养饲料添加剂;④农业生产中的高效活性菌肥。

本文针对沼泽红假单胞菌的生物学特性、发酵条件或培养的情况(培养基、培养条件)、生化特征、生理特性、应用及研究进展进行先关阐述。

关键字:光合细菌沼泽红假单胞菌生物学特性生理生化实验研究进展光合细菌:光合细菌(PhotosyntheticBacteria,简称PSB)是自然界最广泛存在的比较古老的、能进行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生物的总称,具有原始光能合成体系,能在厌氧条件下进行不放氧的光合作用,是水体兼性厌氧层中主要的初级生产者,并在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用。

它包括有红螺菌科(Phodospirillaceae)、着色菌科(Chromati-aceae)、绿杆菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chlo-roflexaceae)4科。

光合细菌广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥、土壤、极地或温泉(包括高热水体)以及高盐、高有机质含量等不同生态环境中,它可以光能异养、化能异养、光能自养方式生活,存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型,能利用多种基质。

光合细菌细胞内含有细菌色素(如类胡萝卜素、菌绿素)、卟啉类化合物、泛醌等多种有效的自由基清除物质,可保护细胞膜、DN等自身细胞的重要组份不受损伤。

光合细菌具有多重代谢方式,尤其在对高浓度有机废水的净化处理中,表现出负荷低、效率高及投资少的优点;在禽畜养殖方面,光合细菌可作为一种饲料蛋白补充,还可以起到益生菌的作用。

沼泽红假单胞菌R-3去除水体中氨氮的特性研究

沼泽红假单胞菌R-3去除水体中氨氮的特性研究

49--土壤肥料•资源环境 DOI:10.16498/ki.hnnykx.2017.006.015随着水产养殖规模化的发展,水体中的氮素大量积累,严重制约了水产养殖业的健康可持续发展。

水体中的氮素分为有机氮和无机氮,其中无机氮常指氨氮、硝态氮和亚硝态氮,无机氮的积累使水质恶化,抑制水产动物的正常生长,严重时会引发养殖动物患病或死亡[1-2]。

微生态制剂是将从天然环境中分离筛选出来的微生物培养后制成含有大量有益菌的活性菌制剂。

研究表明,向水体中合理投放微生态制剂可以有效地净化养殖水体,促进养殖业的健康发展[3-4]。

沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris )是我国农业部允许使用的饲料级微生物之一,是近年来水质净化领域常用的菌种[5-6]。

实验室在前期研究中,从水体中分离获得一株对氨氮具有良好去除能力的沼泽红假单胞菌R-3菌株。

为了考察该菌株在实际生产中的应用价值,在室内开展了模拟试验,探讨了温度、光照、水体的氨氮浓度和pH 值等环境因素对菌株R-3去除氨氮能力的影响。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 菌种来源 沼泽红假单胞菌R-3由实验室从长沙县一养殖水体中驯化富集分离获得。

1.1.2 沼泽红假单胞菌发酵培养基 CH 3COONa2.0 g/L ,乳酸钠2.0 g/L ,(NH 4)2SO 4 1.0 g/L ,蛋白胨0.5 g/L ,酵母膏1.0 g/L ,NaCl 1.0 g/L ,KH 2PO 4 1.0 g/L ,K 2HPO 4 0.5 g/L ,pH 值7.0。

1.1.3 仪器设备 超净工作台、紫外分光光度计、灭菌锅、离心机、人工气候光照培养箱。

1.2 试验方法1.2.1 菌株R-3菌液的制备 接种菌株R-3种子液到发酵培养基中,30℃、3 000 Lux 光照厌氧培养4 d ,离心收集菌体细胞,用无氨水反复洗涤3次,目的是 沼泽红假单胞菌R-3去除水体中氨氮的特性研究  文 刚,汪 彬,刘 标,贺月林 (湖南省微生物研究院,湖南 长沙 410009)摘 要:为了降低养殖水体中的氨氮,以1株具有氨氮去除效果的沼泽红假单胞菌R-3菌株为材料,通过单因素试验,分别研究了初始氨氮浓度、温度、pH 值和光照强度对其降解氨氮能力的影响。

沼泽红假单胞菌的选育及对酚降解性能探讨

沼泽红假单胞菌的选育及对酚降解性能探讨
状 , 突变株 的环境适应能力 比单 独诱 变的好 。 其
关键词 : 沼泽红假单胞 菌:复合诱变 ;降解 ;含酚废水
中图 分 类 号 : 7 文献 标 识 码 : X12 A 文章 编 号 :6 2 2 4 (0 70 — 8 9 0 17 — c i n o h n l d g a i g M u a t f o o s u o n s a u ti n m p r s n o h i h n l d — ee t fP e 0 — e r d n t n s o o Rh d p e d mo a l srs a d Co p a i fT e r P e o — e o
c ln e oo e p n d a dt e go h r tsao gwi e y r g n s c ii e r b iu l ih r h n t a f oh t ei i a tan a d oo isc lr e e e , n r wt ae ln t d h d o e a e a t t sweeo vo syh g e a t t t l r i n d h h vi t h ob h n i s sn l tn y UV, S a d N in T ed g a ain efee c e f h n l yc mp u d mu a t we eh g e a a ysn l t n s n ig emu a t b DE n o . h e r d t f i n i s e o o o n t n s r ih r h nt t i ge mu a t i o i op b t h b
g a ng Ca acte r di p iis
W U F n — n HU Xi — n L u , HANG i— i J ANG Mu x a a gf g, u f g , I Z a a L Ja q I , — in

沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性

沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性

沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性摘要采用改良的Hungate厌氧培养技术一滚管法,从淀粉厂的污泥中,分离得到一株革兰氏阴性,弯曲杆状,出芽繁殖,既能在光照厌氧,也能在黑暗好氧条件下生活的光能异养型Y6菌株.经形态观察、生理特性的测定,确证Y6菌株为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudpmonaspalustris).关键词:紫色非硫光合细菌,沼泽红假单胞菌,厌氧培养技术利用光合细菌净化高浓度有机废水,己是废水生物处理法中的一个重要方法.它具有有机负荷高,占地面积小,投资费用少,动力消耗低,除氮效果好和耐盐能力强等优点.同时,产生的菌体污泥是优质的饲料和肥料,可加以综合利用.因此,近几年来用光合细菌法(PSB)净化废水正受到人们的广泛重视.目前,用于有机废水净化的光合细菌,主要是紫色非硫细菌红螺菌科(Rhodo‘Pi({llaceac)的一些菌株·这些菌一般均为兼性光合细菌·应用于有机废水净化的菌株,要求对有机质有较强的代谢能力和较高的耐受性,对不良环境因素,如温度、pH和盐度等有较强的适应性.为了进一步开展紫色非硫细菌在净化有机废水中的应用研究,我们从淀粉厂污泥中分离到一株光能异养型Y6菌株.经初步测试,表明具有利用基质广泛、生长速度快、耐受有机质浓度较高等特点.经鉴定确认,Y‘菌株为沼泽红假单胞菌(Rhodo脾udomonas尸alustr哟.现将分离鉴定结果和某些生理特性报导如下.材料和方法.1菌株来源Y6菌株从济南市槐荫区淀粉厂污水排放沟污泥中分离获得..2培养基vanNiel培养基〔‘〕Molisch琼脂培养基〔2〕YP琼脂培养基〔,〕RCVBN培养基〔3〕,3菌种分离和纯化*收稿口期:1990一l!一16第3期于温旭等:紫色非硫光合细菌的研究·345·取污泥样品在VanNiel培养基中富集培养,30℃,Zo00Lx光照厌氧培养3一4天后,培养基呈绛红色.再经4次连续转接培养,使光合细菌的生长在富集液中占绝对优势,然后采用改良Hungat。

沼泽红假单胞菌优化培养及检测方法的研究

沼泽红假单胞菌优化培养及检测方法的研究

沼泽红假单胞菌优化培养及检测方法的研究欧小兵;张小琴;李涵依;车晨;郝葆青【期刊名称】《西南民族大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2013(039)005【摘要】目的和意义:研究培养基各组分的优化组合,提升活菌数;比较不同培养方法,探索简便有效菌落检测计数模式的建立.本实验研究有利于实际生产和应用中提升菌落培养和检测计数的效率,可为简便、快速的菌落检测计数模式的建立提供一定的理论依据.方法:采用L27(3)13正交表,对沼泽红假单胞菌所需的营养组分在一定的范围内进行优化试验,筛选出最佳组合的配方;分别采用三种培养方法(双层平板稀释涂法,平板稀释涂布法及半固体试管法)进行培养,比较试验检测计数的结果,确定出方便、快捷检测计数的培养方法.结果与结论:经优化实验研究得到能提升菌数的培养基配方为酵母膏0.4g,NH4Cl 0.3g/L,Na2HPO4 0.06g/L,CH3COONa 2.5g/L,Mgcl2 0.03g/L,微量元素液1.5ml/L,生长因子溶液1ml/L,pH 7.8+0.2.在此培养基配方情况下,双层平板平板法及半固体试管法培养方法能较显著提升菌落检测计数的准确度和效率.【总页数】5页(P679-683)【作者】欧小兵;张小琴;李涵依;车晨;郝葆青【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;阿坝师范高等专科学校化生科学系,四川汶川 623002;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041【正文语种】中文【中图分类】Q93【相关文献】1.沼泽红假单胞菌产类胡萝卜素培养条件的优化研究 [J], 李福枝;刘飞;江南;邓靖2.沼泽红假单胞菌的分离鉴定、纯化及计数培养基优化研究 [J], 欧小兵;全亚玲;戴静;李涵依;车晨;郝葆青3.沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究 [J], 全亚玲;戴静;马力;郝葆青4.沼泽红假单胞菌培养基的优化研究 [J], 幸晶晶;王瑞品;柳忠玉;马立安5.沼泽红假单胞菌发酵培养条件优化研究 [J], 刘德海;陈国参;解复红;胡宜亮;周伏忠;马焕;庞向宇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

沼泽红假单胞菌处理HMX研究

沼泽红假单胞菌处理HMX研究

硫酸铵 、 结晶硫酸镁 、 磷酸氢二钾、 微量元素 、 维 生素、 苹果酸 、 酵母膏 、 柠檬酸铁、 磷酸二氢钾、 乙二 胺 四乙酸二 钠 、 酸 、 乙烯 醇 、 MX、 氨 基 苯 磺 硼 聚 H 对 酸 、 萘基乙二胺二盐酸等。 一 水浴恒温振荡器、 紫外 一 分光光度计 、 台式离心
1 材 料 与 方 法
1 1 菌 种 .
衰弱 , 中枢神经紊乱 ; 对人体产生的直接症状是心血 管抑郁或萎缩 , 出现机能亢进和抽搐 , 使其对光 、 振 动 和刺激 的敏 感 性 增 加 … 。对 于 含 炸 药 废 水 的 治
理, 近些年来 已有相 当多 的研究 。但 由于炸 药 一 般含 硝基 , 有 危 险性 、 具 生物 毒 性及 化学 稳 定性 , 且
恒定的水平 。
关键词 : 沼泽红假单胞菌 ; MX; H 降解
中 图 分 类 号 :Q 6 T 5 文献标识码 : A 文 章 编 号 :0 47 5 (0 2 0 -0 80 10 -00 2 1 )20 0 —3
奥克 托今 ( X) 当前 已使 用 的能 量 水 平 最 HM 是
发 展方 向 引。本 文 研 究 了 沼 泽 红 假 单 胞 菌 及 其 主
配 成溶 液 , 取定 量 的 K O 、 P 配 成 磷 液 , 再 H P K H O
在降解过程中很容易产生毒性更大 的其他 中间产
物, 因此它们 的降解更 加 困难 。 目前 , 药废 水处 理方 法包括 物理 法 、 学法 和 炸 化 生物 法 J 。化 学 法 存 在 处 理 费 用 高 、 艺 条 件 复 工 杂 、 程不易 控制 等缺 点 ; 理法 中吸附法 的吸 附剂 过 物
二者用 8层纱布、 4层报纸封 口, 放人灭 菌锅 内, 在 高温 、 高压下灭菌。二者按一定 比例配合使用。

沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究

沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究

沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究全亚玲;戴静;马力;郝葆青【摘要】目的:确定沼泽红假单胞菌培养的最优化培养基成分组合和培养条件,为沼泽红假单胞菌直接作为光合叶面肥应用提供试验数据.方法:采用单因素试验设计分别对沼泽红假单胞菌培养的接种量、pH值、温度、光照强度四种因素的不同水平进行比较试验,确定其各自最佳试验水平;采用L9(34)正交试验设计从9种培养基成分组合中选择出最优化试验配方组合.结果:沼泽红假单胞菌生长最优条件为:接种量为15%、pH值为7.2、温度为35℃、光照强度为2000x1时;最佳培养基组成配方为:NH4C11.0g、K2HPO40.5g、NaHCO33.0g、酵母膏2.0g.结论:优化的生长条件和培养基配方组成能有效促进沼泽红假单胞菌生长和繁殖.【期刊名称】《西南民族大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(038)003【总页数】4页(P383-386)【关键词】沼泽红假单胞菌;培养条件;培养基优化;单因素试验;正交试验设计【作者】全亚玲;戴静;马力;郝葆青【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041【正文语种】中文【中图分类】S182光合细菌简称PSB, 是地球上最古老的菌种之一, 广泛存在于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处,具有原始光能合成体系, 能以光作为能源, 在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用[1-3]. 按照《伯杰细菌鉴定手册》(1974年第8版)[4]分类, 光合细菌分为45种, 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris) 属于光合细菌分类中的红螺菌科、红假单胞菌属. 沼泽红假单胞菌菌体富含各种生物活性蛋白、泛酸、叶酸和 B族等多种维生素, 并且活性菌株含有某些抗病抗逆性物质, 在经济植物种植上已得到较为广泛应用[5-7]. 据报道, 将该菌直接作为叶面肥使用, 既能促进植物的生长发育和体内酶的合成, 增强光合作用, 加速植物对养分的吸收和转化, 有利于提高作物的产量和品质;同时又能够改善土壤菌群的分布, 提高土壤的肥力[8-9]. 但是, 沼泽红假单胞菌培养基成分的配搭以及各种培养条件的研究仍然是制约该菌广泛应用的主要因素之一[10]. 本文采用单因素试验设计分别对沼泽红假单胞菌培养的菌接种量、pH值、温度、光照强度进行了最佳试验水平的检测, 并且采用L9(34)正交试验设计对培养基成分配搭进行了优化试验;最终确定该类菌株的最优生长条件和培养基配方组成.1.1 实验材料1.1.1 菌种沼泽红假单胞菌(本实验室所保存)1.1.2 基础培养基NH4Cl、K2HPO4、NaHCO3、酵母膏、蒸馏水1.1.3 主要仪器超净工作台(苏净集团安泰公司)、PGX-270B多段可编程光照培养箱(宁波东南仪器有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)、紫外可见分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公司)、高压灭菌锅(TOMY,Nerima-ku,Tokyo,Japan)、电子天平、酸度计1.2 实验方法1.2.1 沼泽红假单胞菌种的制备将实验室保存的菌株在无杂菌的条件下转接3次, 于30℃、2000lx光照条件下培养48h.1.2.2 沼泽红假单胞菌培养条件的优化实验单因素实验设计, 选用四个因素即沼泽红假单胞菌接种量(5%、10%、15%、20%、25%)、pH值(6.0、6.5、7.0、7.5、8.0)、温度(15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃)、光照强度(1500lx、2000lx、2500lx、3000lx、3500lx、4000lx). 分别测试出每个培养条件因素中最佳水平的指标.1.2.3 沼泽红假单胞菌培养基配方优化实验采用 L9(34)正交试验设计, 选择沼泽红假单胞菌培养基中四种成分作为试验设计的因素, 见表 1, 每个因素选三个水平, 分别进行试验组合. 然后对这9种不同组合的培养基按25%接种量分别接种沼泽红假单胞菌菌株,于35℃、2000lx光照条件下培养48h.2.1 沼泽红假单胞菌培养条件的优化实验2.1.1 接种量对沼泽红假单胞菌生长的影响将扩大培养的沼泽红假单胞菌株按接种量为5%、10%、15%、20%、25%分别接入100mL基础培养基中, 于35℃、2000lx光照条件下培养48h. 结果如图1所示, 沼泽红假单胞菌培养随着接种量的增多, OD值呈缓慢增加的趋势, 即菌落数增长与接种量正比关系. 结合最佳生长和培养基营养承载力, 选择接种量为25%为宜.2.1.2 pH对沼泽红假单胞菌生长的影响将扩大培养的沼泽红假单胞菌株按25%接种量分别接种于pH值为6.0、6.5、7.0、7.5、8.0的100mL培养基中, 于35℃、2000lx光照条件下培养48h. 结果如图2所示, 当pH值为6和6.5时, OD值变化不显著, 表明沼泽红假单胞菌生长受到抑制. 当pH值为7时, OD值发生显著变化, 及生长达到最快. 由此可知, pH值过酸或过碱都不利于沼泽红假单胞菌的生长.2.1.3 温度对沼泽红假单胞菌生长的影响将扩大培养的沼泽红假单胞菌株分别按25%接种量接种到pH值为7的培养基中, 在不同培养温度下15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃进行培养. 48h后分别测定其菌液在波长为660nm处得OD值. 结果所图3所示,当温度在15℃到40℃范围内, 沼泽红假单胞菌都能生长, 尤其在35℃时, OD值为最大, 表明在此温度左右菌株生长较有优势.2.1.4 光照强度对沼泽红假单胞菌生长的影响将扩大培养的沼泽红假单胞菌按25%的接种量分别接种到pH值为7.0的培养基中, 设定培养箱温度为35℃,然后分别在光照强度为1500lx、2000lx、2500lx、3000lx、3500lx、4000lx的条件下培养48h. 试验完后, 分别测定其OD值. 结果如图4所示, 沼泽红假单胞菌在1500lx到4000lx范围内OD值变化不是较显著, 表明在此范围均能生长. 相对而言, 在2500lx左右时, 该菌株长势头较好.2.2 沼泽红假单胞菌培养基优化实验根据正交试验设计, 对本实验所用培养基配方进行优化, 其结果如表2所示, 实验组8的OD值为最大, 因此可认为该组为最优培养基配方比, 即当NH4Cl1.0g、K2HPO40.5g、NaHCO33.0g、酵母膏2.0g时, 沼泽红假单胞菌浓度较大, 生长较好.本实验对沼泽红假单胞菌的培养条件进行了优化, 结果显示, 该菌株最佳培养条件为接种量 25%、pH值7.0、温度35℃、光照强度2000xl. 在菌株接种量试验中, 接种量与菌体生长呈正比系. 不过, 随着培养时间的延长, 培养基营养成分耗尽, 菌体死亡速度也随之加快, 因此我们认为选择25%接种量最为适宜. pH值是影响菌株生长最关键的因素之一, 当 pH过高或过低时, 菌体的生长受到了很大影响. 温度对于该菌株来说也较重要, 当温度达到30℃时, 菌体生长开始加速, 35℃时生长量达到最, 而当温度大于35℃时, 沼泽红假单胞菌生长量则显著下降. 光照强度对该菌株的生长影响的变异性不是很大, 即在一定照度范围内其长势都较好, 可表明沼泽红假单胞菌光合作用能力较强. 在沼泽红假单胞菌株培养基组成的优化实验中, 对正交实验设计得到的 9种配方组合分别进行了培养试验, 其结果显示最优配方组合为: NH4Cl1.5g、K2HPO40.4g、NaHCO3 2.0g、酵母膏3.0g. 其中, 实验数据表明, 酵母膏对该菌株生长起着关键作用. 另外, 该菌株对NH4Cl的需求量也较高, 说明沼泽红假单胞菌对氮的需求量较大. 由于沼泽红假单胞菌在农作物、水产养殖业及污水净化方面应用效果较好. 因此, 对沼泽红假单胞菌培养的最优化培养基成分配搭和培养条件的研究, 可为该类光合菌的规模培养和工业化生产提供依据, 同时也光合菌直接作为叶面肥使用提供试验数据.【相关文献】[1] 刘茵, 王运吉, 曹方等. 光合细菌培养研究[J]. 大连轻工业学院学报, 1993, 6(12): 37-38.[2] ZHU X, XIE X, LIAO Q. Enhanced hydrogen production by Rhodopseudomonas palustris CQK 01 with ultra-sonication pretreatment in batch culture[J]. Bioresour Technol, 2011, 102(18): 8696-8699.[3] SIMON SCHEURING, RUI PEDRO GONCALVES, VALERIE PEIMA. The Photosynthetic Apparatus of Rhodopseudomonas palustris:Structures and Organization[J]. J Mol Biol, 2006, 358:83-96.[4] R E BUCHANAN. 伯杰细菌鉴定手册[M]. 北京: 科学出版社, 1974.[5] 王秋菊. 光合细菌在植物上的研究现状与展望[J]. 黑龙江八一农垦大学学报, 2006,18(5): 25-29.[6] 古军, 杨旭. 光合细菌菌肥在蔬菜种植上的应用[J]. 黑龙江农业科学, 2002(6):4-6.[7] 魏克强, 杨俊仙, 魏治中. 光合细菌改善新型烟草品质的初步研究[J]. 微生物学通报, 2008, 35(2): 220-224.[8] 张信娣, 曹慧, 徐冬青, 等. 光合细菌和有机肥对土壤主要微生物类群和土壤酶活性的影响[J]. 土壤, 2008, 40(3): 443-447.[9] 张信娣, 史永军, 陈银科. 光合细菌和有机肥对土壤主要微生物类群的影响[J]. 中国土壤与肥料, 2007(3): 102-105.[10] 陈秀丽, 陈有光, 王育锋, 等. 光合细菌培养基配方的优化研究[J]. 渔业现代化, 2007, 34(6): 47-48.。

沼泽红假单胞菌的研究进展及其应用

沼泽红假单胞菌的研究进展及其应用
王 跃先 ’ 。 刘 德海
( 1 . 河南省饲草饲料站 , 河南 郑州 4 5 0 0 0 8 ; 2 . 河南省科学院生物研究所)


要: 对沼泽红假单胞菌的 生物学分类 、 营养成分 分析评价 、 生产 、 检测及其在饲料养 殖业应 用等 方
面 进行 了综述 . 研 究 其作 为一 种 新 型 生物 饲 料 级微 生 态制 剂 在 畜禽 养 殖 上 的 应 用 。
径0 . 6 ~ 0 . 9 t x m, 极 生 鞭 毛运 动 或不 运 动 ; 生长 有 极性 , 不 对 称 出芽分 裂 。革 兰 氏染色 阴性 。 片层 状 光合 内膜位 于细 胞 膜 下且 与之 平 行 。 光合 色 素 为 叶绿 素 a 、 叶绿 素 b 和类 胡萝 卜 素, 能 利用 苯 甲酸 、 柠 檬 酸钠 、 硫 代硫 酸 钠 为碳 源 , 主要醌 类 为 Q 一 1 0 。最 佳生 长 方式 是利 用 各种 有机 化 合物 作 碳源 和 电子供 体 进行 光照厌 氧 生长 。厌 氧条 件 下 以氢 、 硫 代硫 酸钠 、 硫化 氢 等作 电子供 体也 可 光 自养生 长 。也 可 在 微好 氧 至好 氧条件 下进 行化 能异 养 生长 。
新 中华 人 民共 和 国农 业 部公 告第 2 0 4 5 号公 告公 布 的允 许 使 用 的 饲 料 添 加 剂 品 种 目录 中 , 饲 料级 微 生物 添 加 剂 中
胞菌的蛋 白质 、 可溶性糖类 、 氨基酸 、 粗脂肪 、 类胡萝 卜 素、
2 0 1 5 年( 第3 6 卷) 第1 期
利用基因组学和免疫原性分析学等生物信息学, 选择
编码 蛋 白质功 能 区的基 因 片段作 为免 疫原 , 这样 在很 大程 度上 省 去 了抗 原 体外 表 达 、 纯 化 等 中 间步 骤 , 加 快 抗体 的

沼泽红假单胞菌的研究

沼泽红假单胞菌的研究

作用机理
能量代谢途径
沼泽红假单胞菌等光合细菌胞内具有能光合作用的载色体,这些载色体为球状或胞状, 由细胞膜分化而成,直径约在60-100nm之间,包含着大量类胡萝卜素和叶绿素,能进行光 合磷酸化反应和光氧化还原反应。 在好氧光照条件下 起初菌体细胞内缺少这种载色体,但是它们能快速形成,为菌体提供物质、能量代谢条 件。 在好氧黑暗条件下 通过三羧酸循环进行有机酸代谢,在厌氧光照条件下,它能把有机酸异化反应、氧化还 原同化反应和光氧化还原反应这三者进行结合,改变代谢途径,使菌体能够更加灵活的对不 同种类的有机物进行代谢吸收和讲解
22
实际应用
03 在工业水处理中的应用
利用假单胞菌降解TNT废水,有研究发现在最佳外加氮源(KNO3)浓度为 0.1g/L时,沼泽红假单胞菌降解TNT废水的最佳组合为:TNT浓=50mg/L, 温度=30℃,pH=7,接种量为108个/mL。 在不同条件下对活性大红的脱色效果研究表明在最佳条件下,光照厌氧条件 下的脱色效率远高于光照好氧条件下的脱色效率,脱色率浓度。
4
研究背景
光和细菌的简介
光合细菌作为一种最原始的具有光能合成体系的原核生物,不仅能在光源作为能源 的条件下利用有机物进行光合作用,还能进行固氮固碳脱氢等作用
光和细菌的分类
在《伯杰式细菌系统手册》中,光合细菌划分为蓝色红菌门和红螺菌目两类,其中 后者又可以划分为不同的菌科,包含有红假单胞菌属、红螺菌属和红微菌属。
23
前景 展望
前景展望
广泛应用于废水的净化
01
如高浓度有机废水、重金属废水、养殖废水等,其存在于废水中时,能大量同化氮磷并降解废 水中的有机物,降低高浓度有机废水毒性,调节水体pH,使废水得以净化,同时不带来二次 污染,且能改善水质质量。

沼泽红假单胞菌优化培养及检测方法的研究

沼泽红假单胞菌优化培养及检测方法的研究

基 金项 目:西南民族大 学研 究生“ 创新 型科研项 目” ( c x2 0 1 3 s p 8 2 )
6 8 0 1 . 2 计数培养基
西南3 . 0 g , 蛋白胨5 . O g , 氯化钠2 . 0 g , 硫酸镁0 . 5 g , 琼脂1 4 g , 蒸馏水 l O 0 0 m l , p H 7 . 8 . 1 . 3 主要仪 器 p H 测试仪、电热恒温鼓风干燥箱、薄膜滤菌器、P G X 2 7 0 B 多波段可编程光照培养箱( 宁波东南仪器有限公

自然
学版
s e p t .2 o l 3
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / i . i s s n . 1 0 0 3 - 4 2 7 1 . 2 0 1 3 . 0 5 . 0 4
沼泽红假 单胞 菌优 化培养及检测方法 的研 究
欧小兵 , 张 小 琴 , 李涵 依 ,车晨 ,郝 葆青
长 因子溶液 1 m l / L , p H 7 . 8 4 - 0 . 2 . 在此培 养基 配方情 况下, 双层平板 平板 法及半 固体试管法培 养方法能较 显著提升 菌落
检测计数 的准确度和效率.
关键词 :沼泽红假 单胞菌:正 交试验设计 : 培 养基4 L4 e  ̄ ;计数 方法;菌落数
第3 9卷第 5 期
J l ・ u r a l S c i e n c e E d i t i o n o u r n a 1 o fS o u t h westUni ve rs i t yf o r Na t i on a l i t i e s Nat
西 南 民族 大 学学报
式的建立.本 实验研 究有 利于 实际生产和应 用 中提升 菌落培养和检测计数 的效率,可为 简便 、快速 的菌落检测计数模式 的建立提供 一定的理论依据.方法:采用 L 2 7 ( 3 ) 正 交表,对沼泽红假单胞 菌所需的营养组 分在一定的范 围内进行优化 试验,筛选 出最佳组合 的配方:分别采用三种培 养方法( 双层平板稀释涂法,平板稀释涂布法及半 固体试管法 ) 进行培 养, 比较试验检 测计数的结果,确 定出方便 、快捷检 测计数 的培 养方法.结果与结论:经优化 实验研 究得到能提升 菌数 的培 养基配 方为酵母 膏 0 . 4 g , NH 4 C 1 0 . 3 g J L , Na 2 HP O 4 0 . 0 6 g / L , C H3 C O ON a 2 . 5 e # L , Mg c l 2 O . 0 3 g / L ,微量元素液 1 . 5 ml / L ,生

沼泽红假单胞菌的分离鉴定、纯化及计数培养基优化研究

沼泽红假单胞菌的分离鉴定、纯化及计数培养基优化研究
胞 菌 准确 及 简捷 的计 数 .
关键 词: 沼泽红假单胞 菌; 光合 菌; 分离与纯化
中图 分 类 号 : S I 8 2 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 3 . 4 2 7 1 ( 2 0 1 3 ) 0 3 - 0 3 2 2 — 0 5
光合菌( P h o t o s y n t h e t i c B a c t e i r a , 简称 P S B ) , 是一大类能在厌氧或兼性厌氧条件下进行光合作 用不产氧 的微 生物, 广泛分布在海洋、江河、湖泊、水沟或土壤中. 光合菌大部分菌科都可利用有机物作为碳源与光合作用的 供氢体,同时同化芳香族化合物、 碳水化合物及脂肪酸等多种有机物,因此它们在有机 废水及污水处理中效果明 显. 光合菌中的着色菌科、红螺茵科、绿柳茵科与绿色丝状茵科的光合茵¨ 茵体成分营养十分丰富, 包括蛋 自 质、脂肪、组纤维与可溶性糖, 还含有 V B 1 、V B 2 、B 1 2 、烟酸和叶酸等维生素, 紫色非硫菌红螺菌科的沼泽红 假单 胞菌 就属 于这 类菌 科 J .光合 菌在食 品与保 健行 业新 产 品的开 发、 医疗领 域 的抗肿 瘤与 提高 免 疫性 的研 发、 清洁 能源 的氢气代 替 石 油的开 创 以及化妆 品等领 域 都成 了研 究的热 点 . 目前光合茵的检测指标主要为活菌密度, 并且检测方法亦无统一的标准. 市售光合菌制剂种类繁多, 存在 菌种 复合 、杂 菌污 染 、培 养基 质干 扰 以及色 素掺 假等 问题 ,仅 靠光 电 比色 法 、显微 镜直 接 计数 法 以及 双层 平 板 法计数法是完全不够的, 还必须结合菌落计数来准确确定. 沼泽红假单胞茵培养基的配方较 多, 不同配方的培 养基培养得到细菌活茵数不 同, 并且检测结果的误差也相当大. 本文采用正交试验设计法优化培养基组分, 配 制计 数 培 养基 ( 即一 种 有 利 沼泽 红假 单胞 菌 生长 或 增殖 ,同时抑 制杂 菌 繁殖 的选择 性 培养 基 ) .该计 数培 养 基 对 光合 菌 具有 富集 作 用 、检测 准确 和 简便 等优点 ,可 为光合 菌 实 际生产 和研究 提供 较 为准 确 的活菌 落数 或检 测 数

沼泽红假单胞菌应用的研究进展

沼泽红假单胞菌应用的研究进展

六溴环十二烷( HBCD) 等污染物。 沼泽红假单胞菌 51ATA
红假单胞菌 PSB1 对废水中氨氮的降解率可达 99% [28] 。 氯
代苯甲酸( CBAs) 是一种由氯化物分解而产生的环境污染
物。 沼泽红假单胞菌 RCB100 通过将 3-氯苯甲酸(3-CBA)
转化为 3-氯苯甲酰辅酶 A 和将其还原脱卤生成苯甲酰辅酶
Abstract Rhodopseudomonas palustris is widely distributed in nature. Because of its unique physiological characteristics, it has been applied
in many fields. In this paper, the application of Rhodopseudomonas palustris in agriculture, aquaculture, environmental treatment and chemical
等方面起重要的作用。
属,是研究光合磷酸化、固氮调节、产氢以及厌氧降解芳香族
水稻、烟草[5] 和白菜等植物体内,能够释放 IAA 和 5-ALA 等
氧的光合细菌,为紫色非硫细菌,属于红螺菌科,红假单胞菌
化合物的模式生物。 沼泽红假单胞菌具有多种营养类型,如
进行厌氧光能自养、厌氧光能异养和好氧异养生长,它可以
生长[26] 。
3 环境修复方面的应用
沼泽红假单胞菌具有较高的氨氮去除能力,并吸附、降
叶绿素含量,提高了过氧化氢酶( CAT)、抗坏血酸过氧化物
解废水中的污染物,包括染料、氯代苯甲酸和 1,2,5,6,9,10-
的抗氧化活性。 沼泽红假单胞菌 TN114 可以通过分泌 EPS,
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第12卷第3期集美大学学报(自然科学版)V o.l12N o.3 2007年7月Journa l o f Ji m e iU n i ve rsity(N atura l Sc i ence)Ju.l2007[文章编号]1007-7405(2007)03-0198-06沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究蔡慧农1,2,倪辉1,2,苏文金1,2(1.集美大学生物工程学院,福建厦门361021;2.厦门市食品生物工程技术研究中心,福建厦门361021)[摘要]对沼泽红假单胞菌的培养基进行了优化,并对其降氨氮效果进行了研究.结果表明:沼泽红假单胞菌可以利用多种碳源和氮源,乳酸和草酸铵是实验室培养沼泽红假单胞菌的最适碳源和氮源,乳酸根的质量浓度及碳氮比对沼泽红假单胞菌生长具有显著影响,而磷酸根浓度对沼泽红假单胞菌生长没有显著影响;用正交试验获得最适于培养沼泽红假单胞菌的乳酸质量浓度为1%,碳氮比为115,磷酸二氢钾的质量浓度为115g/L;在自然光照、30e条件下,沼泽红假单胞菌的延滞期为2d,对数生长期为2~10d,稳定期为10~20d;沼泽红假单胞菌具有很强的综合降氨氮作用,但其降氨氮效果受水质的影响而不稳定.[关键词]沼泽红假单胞菌;培养基优化;降氨氮[中图分类号]S154139[文献标识码]A0引言光合细菌是自然界广泛存在的一类具有光能合成体系的原核生物,它不仅能进行光合作用,还能固定、同化和降解有机物及某些有毒物质[1-2].在养殖水域中添加光合细菌不仅可提高区域生态的生产力水平[1],还可降低COD、BOD、氨氮量,增加溶氧[3-4],降低硫化氢[5],改善水质.随着养殖业的快速发展及绿色养殖、健康养殖的推广,光合细菌作为一种养殖益生菌受到了越来越多的关注[5-8].沼泽红假单胞菌(Rhod op seudo m ona s palu stris)属非硫红螺菌科、红假单胞菌属,是近年水质净化领域应用和研究中常用的光合细菌[9-10].集美大学生物工程学院微生物与发酵研究室分离获得了一株沼泽红假单胞菌,为了开发该菌株在水产养殖中的应用技术,需要对该菌的培养及净化水质效果进行深入研究.前人对影响沼泽红假单胞菌生长的环境因子进行了全面的研究[11-12],但关于营养成分对沼泽红假单胞菌生长影响方面的研究报道却很少.因此,本文对沼泽红假单胞菌的碳源、氮源、培养基主要成分配比及降氨氮作用进行了研究,为该菌株的大规模培养及运用营养生态学的基本原理调节光合细菌的生长、提高其净化水质的效果提供了理论基础.1材料与方法111实验材料11111菌种沼泽红假单胞菌PSB-J030323:由集美大学生物工程学院微生物与发酵研究室从厦门集美附近的虾池中分离获得.[收稿日期]2006-03-31[作者简介]蔡慧农(1957-),男,教授,主要从事生物工程方面的研究.通讯作者:苏文金(1956-),男,教授,博士生导师,从事海洋微生物生物活性物质研究.第3期蔡慧农等:沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究11112 培养基保种培养基(g /L ):C H 3COONa 310,N a H C O 3510,(NH 4)2SO 4110,蛋白胨5,酵母膏110,M gSO 4015,N a C l 110,KH 2PO 4110,K 2H P O 4015,Ca C l 20105,碳酸钙20,琼脂20,pH 713.基础培养基(g /L):C H 3COON a 310,Na H CO 3510,(NH 4)2SO 4110,蛋白胨5,酵母膏110,M gSO 4015,NaC l 110,KH 2PO 4110,K 2H PO 4015,CaC l 20105,碳酸钙20,pH 713.11113 试剂蛋白胨、酵母膏、牛肉膏等购买于上海生化试剂有限公司;其它试剂均为分析纯.11114 仪器S W -CJ-1型水平流净化工作台(吴江市净化设备总厂)、5410CC275TH Z H 恒温光照培养箱(杭州雪中碳科技有限公司)、TDL-40B 型普通台式离心机(上海安亭科学仪器厂)、F A 1004N 电子天平(上海精密科学仪器有限公司)、101-3B 型电热鼓风干燥箱(上海实验仪器总厂).112 实验方法11211 沼泽红假单胞菌种制备用接种铲挑取少量保存在琼脂柱中的沼泽红假单胞菌PSB -J030323接入装有15mL 培养基的具塞试管(试管总体积约为20mL)中并密封,30e 、静置光照(光强2000lx)培养至微红色;吸取这种光合细菌培养液10mL 转接入装有250mL 培养基的磨口三角瓶(总体积为300mL )中并密封,30e 、2000lx 光照培养7d 后备用.11212 沼泽红假单胞菌培养基优化实验在500mL 的具塞试剂瓶中装入400m L 培养基,灭菌冷却后接入6mL 沼泽红假单胞菌PSB -J030323液体菌种,密封后在30e 、2000l x 的光照条件下静置培养,用单因素试验考察单种培养基成分对沼泽红假单胞菌生长的影响,用正交试验优化沼泽红假单胞菌的培养基成分配比.11213 沼泽红假单胞菌降氨氮实验在5L 的生物反应器中加入4L 培养基或养殖废水,接入1%的沼泽红假单胞菌PSB -J030323液体菌种,敞口、静置,30e 自然光照培养,定时取样并用纳氏试剂比色法测定氨氮质量分数.11214 沼泽红假单胞菌生物量测定方法用干重法测定沼泽红假单胞菌生物量.2 实验结果211 碳源对沼泽红假单胞菌生长的影响以1g /L 的硫酸铵为氮源,以011g /L 的酵母膏为生长因子,分别用乙酸钠、碳酸氢钠、乙醇、甘油、乳酸、苹果酸、丙酮、葡萄糖、乙酸乙酯、酒石酸、琥珀酸、柠檬酸、草酸钙等为碳源配制培养基(以含碳量计为5g /L),接种沼泽红假单胞菌进行培养试验.11d 后,以乳酸、柠檬酸、苹果酸、乙酸钠、琥珀酸、酒石酸为碳源的光合细菌培养液都变成红色,说明这些物质都可以作为碳源培养沼泽红假单胞菌.图1是培养11d 后沼泽红假单胞菌生物量的比较结果,生物量最大的4种培养基所采用的碳源分别是乳酸、柠檬酸、苹果酸和乙酸#199#集美大学学报(自然科学版)第12卷钠.以这4种物质为碳源,分别配制培养基,接种沼泽红假单胞菌进行培养试验,沼泽红假单胞菌在这4种培养基中的生长曲线如图2所示,以乳酸为碳源配制培养基培养沼泽红假单胞菌,在对数生长期内生长速率最大,所获得的生物量最大.212 氮源对沼泽红假单胞菌生长的影响以乳酸为碳源,控制培养基的含氮量与1g /L 的硫酸铵相当,分别用硝酸钾、亚硝酸钠、磷酸氢二铵、柠檬酸三铵、碳酸铵、尿素、乙二胺四乙酸、乙酸铵、草酸铵、柠檬酸铁铵、酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、氨水、硫酸铵为唯一氮源配制培养基,接种培养沼泽红假单胞菌.11d 后,以草酸铵、磷酸氢二铵、酵母膏、蛋白胨、柠檬酸三铵、牛肉膏、碳酸铵等为氮源的培养液变成了红色,说明这些物质可用作沼泽红假单胞菌培养的氮源.图3是11d 时沼泽红假单胞菌的生物量比较图,以草酸铵、牛肉膏、碳酸铵和酵母膏为碳源配制培养基,生物量明显大于其它氮源配制的培养基.分别以这4种物质为氮源,配制培养基培养沼泽红假单胞菌,培养结果如图4所示,在以草酸铵为氮源培养沼泽红假单胞菌所获得的生物量最大,在对数生长期内生物量增长最快.213 沼泽红假单胞菌培养基的优化以乳酸为碳源,草酸铵为氮源,磷酸二氢钾为磷源,用正交试验法优化沼泽红假单胞菌培养基的碳源质量浓度、碳氮比(培养基中碳与氮物质的量之比)及磷酸根浓度,按表1所示的实验设计配制培养基,接种沼泽红假单胞菌11d 后,实验结果如表1所示,用DPS 数理统计软件对实验结果进行方差分析,因素A 、B 、C 的显著水平分别为310%、416%和6910%,说明因素A 和B 对沼泽红假单胞菌的生长具有显著影响,而因素C 在试验的水平范围内对结果没有显著影响.由表1可知,因素A 对结果的影响大于因素B 所产生的影响;培养基的最适水平组合为A 2B 1C 2,即在培养沼泽红假单胞菌时,应控制乳酸的质量浓度为1%,碳氮比为115,磷酸二氢钾质量浓度为115g /L ,按此配比配制培养基,接种沼泽红假单胞菌,试验结果(见图5)表明,沼泽红假单胞菌的延滞期为0~2d ,对数生长期为2~10d ,过渡期和稳定期为10~20d,20d 后为衰亡期.#200#第3期蔡慧农等:沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究表1 沼泽红假单胞菌培养基优化试验结果Tab 11 Results o fm ed iu m op tm i iza tion forcu lt u ring R ho do pse udom o na s pa l us tri s 试验号乳酸质量浓度(A )/%碳氮比(B )磷酸二氢钾质量浓度(C )/(g #L -1)生物量/(g #L -1)11(0.5)1(1.5)1(0.5)0.42221(0.5)2(8.5)2(1.5)0.36431(0.5)3(15.5)3(2.5)0.16242(1.0)1(1.5)2(1.5)0.51252(1.0)2(8.5)3(2.5)0.45662(1.0)3(15.5)1(1.5)0.34173(1.5)1(1.5)3(2.5)0.26883(1.5)2(8.5)1(0.5)0.18493(1.5)3(15.5)2(1.5)0.098K 10.3160.4010.316K 20.4360.3350.325K 30.1830.2000.295R 0.2530.2010.030214 沼泽红假单胞菌对人工合成废水氨氮的影响 控制乳酸质量浓度为1%,碳氮比为115,磷酸二氢钾质量浓度为115g /L ,配制培养基,灭菌后分别接入1%的自来水、1%的虾池底泥混合物、1%的枯草芽孢杆菌培养物、1%的沼泽红假单胞菌培养物,定时取样并测定样品中氨氮的变化,研究不同微生物群系对相同的人工合成废水氨氮的影响,实验结果如图6所示.接种底泥的培养液的氨氮上升最快,氨氮峰值最高,且持续时间最长,这表明底泥中的微生物群系分解代谢产生了大量的氨氮,且同化吸收氨氮的能力弱.而接种沼泽红假单胞菌的培养液的氨氮峰值最小,且持续的时间最短,这表明沼泽红假单胞菌分解代谢产生的氨氮少,吸收同化氨氮能力强.5~12d 内,接种沼泽红假单胞菌的培养液的氨氮量明显比接种自来水、底泥、枯草芽孢杆菌的培养液的低;13d 后,由于营养物的消耗各试验组氨氮的差别不大.结果表明,相对于枯草芽孢杆菌、虾池底泥混合物及自来水中的微生物,沼泽红假单胞菌分解产生氨氮的能力最弱,而同化吸收氨氮的能力最强,综合降氨氮的效果最好.215 沼泽红假单胞菌对养殖废水氨氮的影响取不同养殖区域的养虾废水,分别接入1%的沼泽红假单胞菌,测定氨氮随时间变化的情况,实验结果如表2所示.水样1、水样2和水样4接种沼泽红假单胞菌10d 后,氨氮质量浓度基本降到011m g /L 以下,用平均值的成对二样本分析的t 检验对这3种水样的试验结果进行检验,水样1、水样2和水样4的t 值分别为4184、10123和8161,实验组与对照组之间的显著水平分别为012400%、010077%和010017%,差异极显著,实验组的氨氮水平显著低于对照组;水样3和水样5接种沼泽红假单胞菌后,氨氮并没有呈现出明显的下降趋势,用平均值成对二样本分析的t 检验对这两种水样的实验结表2 沼泽红假单胞菌对养殖废水氨氮的降解效果Tab 12 E ff ects o f R ho do pse udom o na s pa l us tri s on ammon ia n itrogen o f fishe ry wastewa t e r 时间/d 水样1对照试验水样2对照试验水样3对照试验水样4对照试验水样5对照试验01.35a 1.28a 1.40c 1.39a 2.41c 2.39c 1.68a 1.64a 1.11cd 1.06d 51.20b 0.45b 1.45c 0.63b2.35c 2.37c 1.52b 0.71b 1.21c 1.28c 101.16b 0.05c 1.72b 0.09c 2.68b 2.71a 1.42c 0.15c 1.67a 1.76a 150.84c 0.04c 1.69b 0.08c 2.74ab 2.78a 1.15d 0.05d 1.42b 1.51b 200.56d 0.05c 1.78b 0.11c 2.81a 2.77a 0.84e 0.04d 1.23c 1.22c 250.41de 0.04c 1.80b 0.09c 2.41c 2.62ab 0.75e 0.03d 1.15c 1.12d 300.32e0.08c1.95a0.07c2.31c2.52b0.62f0.02d1.08d1.12d注:表中不同的英文字母表示5%显著水平上的不同数值.#201#集美大学学报(自然科学版)第12卷果进行检验,t值分别为1181和1198,对照组与实验组的显著水平分别为6146%和5123%,差异不显著.实验组与对照组的氨氮差异不明显,这说明对于不同区域的养殖废水,沼泽红假单胞菌的降氨氮效果是不一样的.这主要是因为不同养殖废水的水质条件差别很大,只有水样的水质条件适于沼泽红假单胞菌生长时,才会显示出降氨氮作用,而当水样的水质条件不适于沼泽红假单胞菌生长时,则不会显示降氨氮作用,该结果与目前其它光合细菌使用效果不稳定有一定的相似性.3结论311沼泽红假单胞菌的营养特性沼泽红假单胞菌能利用多种小分子有机醇和有机酸为碳源,并利用铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐和小分子有机氮等为氮源,这表明沼泽红假单胞菌可以同化吸收许多小分子有机碳源和铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、小分子有机氮等多种含氮物质,因而利用沼泽红假单胞菌降低环境的COD、BOD、氨氮和硝态氮从理论上分析是可行的.312沼泽红假单胞菌的培养基相对其它实验的碳源和氮源来说,用乳酸为碳源、草酸铵为氮源培养沼泽红假单胞菌所获得的生物量最大,对数生长期内菌体生长最快,因而,宜用乳酸作为培养沼泽红假单胞菌的碳源、草酸铵作为培养沼泽红假单胞菌的氮源,使其快速生长.碳源质量浓度及碳氮比是影响沼泽红假单胞菌生长的主要因素,而磷酸根的浓度对沼泽红假单胞菌生长的影响不大,优化的沼泽红假单胞菌的培养基中乳酸的质量分数是1%、碳氮比是115、磷酸二氢钾质量浓度是115g/L.在这种培养基中,沼泽红假单胞菌的延滞期为2d左右,而对数生长期为2~10d,过渡期和稳定期为10~20d,20d后为衰亡期.313沼泽红假单胞菌的降氨氮作用沼泽红假单胞菌培养液中的氨氮远低于其它微生物培养液中的氨氮,这主要是因为沼泽红假单胞菌分解代谢产生氨氮的能力较弱,而同化吸收氨氮的能力较强.因此,用培养沼泽红假单胞菌的方法来降低或去除氨氮,从理论上来说是可行的.由于不同养殖水样的水质不同,沼泽红假单胞菌对不同养殖水样中氨氮的影响差别非常大,只有当水质条件适于沼泽红假单胞菌生长时才具有降氨氮效果,因而在使用沼泽红假单胞菌降低养殖水域中的氨氮时,一定要注意水质条件对沼泽红假单胞菌生长的影响,应采取适当的措施调节水质条件促进沼泽红假单胞菌生长,才能取得良好的效果.此外,沼泽红假单胞菌的降氨氮所需的时间比较长,需要10d左右才能使氨氮趋于稳定.因此,在使用沼泽红假单胞菌稳定养殖水体中氨氮时,应在氨氮高峰期出现前10d左右提前投放光合细菌,这样才能产生良好的降氨氮作用.[参考文献][1]韩梅,陈锡时,张良,等.光合细菌研究概况及其应用进展[J].沈阳农业大学学报,2002,33(5):387-389.[2]吴向华,杨启银,刘五星,等.光合细菌的研究进展及其应用[J].中国农业科技导报,2004,6(2):35-38.[3]N agado m iH,T akahasiT,SasakiK,et a.l Si m ultaneous re m oval of chem ical ox ygen de m and and nitrate i n aerobic trea-tm ent o f sew age wastewa ter usi ng i m m ob ili zed pho tosynt hetic bacter i u m of po rous cera m i c plates[J].W or l d Jou rna l ofM-i crob i o logy and B i o techno l ogy,2000,16:57-62.[4]郭秒,慕跃林,黄遵锡.复合光合细菌对热带鱼养殖水质净化作用的研究[J].水产科学,2004,23(2):30-32.[5]N ag ado m iH,K ita m ura T,W atanabe M,et a.l S i m u ltaneous re m ova l of che m ica l oxygen de m and(COD),phosphate,nitrate andH2S i n the syntheti c se w ag e w aste w ater us i ng porous cera m ici m mob ilized pho t o syn t hetic bacter i a[J].B iotech-# 202 #第3期蔡慧农等:沼泽红假单胞菌培养基的优化及降氨氮作用的研究no l ogy Le tters ,2000,22:1369-1374.[6]沈锦玉,尹文林,刘问,等.光合细菌HZPSB 对水产养殖水质的改良和对鱼类促生长作用[J].科技通报,2004,20(6):481-484.[7]王兰,廖丽华.光合细菌的分离鉴定及对养殖水的净化作用[J].微生物学杂志,2004,24(2):7-10.[8]徐良梅,滕小华.光合细菌的基本特性及在水产养殖上的应用[J].东北农业大学学报,2005,36(2):230-234.[9]N ag ado m iH,K ita m ura T,W atanabe M,e t a.l S i m u ltaneous re m ova l of chem i ca l 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for cult u ring R hodop seudo m onas pal u stris is opti m ized and its capab ility of re m o -ving a mm on ia n itrogen fro m w ater syste m is studied.The results sho w t h at R hodopseudo m onas palustris has the ab ility to u tilize m any kinds of carbon sources and n itr ogen sources and it is best to culture Rhodop seudo m onas palustris i n laborato ri a l experi m entsw ith lactic ac i d as carbon source and oxa mm ite as n itrogen source ,respec -ti v e l y .R esults a lso i n dicate that concentration of carbon source and rati o of carbon source to n itrogen source are m ain facto rs that influence the gro w th o f Rhodop seudo m onas palustris ,w hereas concentration o f potassium di h ydrogen phosphate has not re m arkable effects on the g r ow th of t h is pho tosyn t h etic bacterium .Fro m t h e re -su lt o f orthogona l experi m en,tit is suggested that keeping concentration o f lactic ac i d at 1%,rati o o f carbonsource to nitrogen source at 115and concen trati o n o f potassum d i h ydrogen phosphate at 115g /L is suitable to cu lture this photosynthetic bacteri u m.It is seen fro m batch cu lture experi m ents w ith opti m ized m ediu m and under 30e and nature li g hting conditi o n that lag phase o f this photosynthetic bacteria is bet w een 0to 2d ,exponentia l phase is bet w een 2d to 10d ,stati o nary phase is be t w een 10d to 20d .Rhodop seudo m onas palus -tris is superi o r to other i n vesti g ated m icrob i a l co mm unity w it h regar d to the capab ility of re m oving a mmonia n-i trogen,but its capab ility of re m ov i n g a mm on ia n itrogen str ong ly depends on the w ater quality of the sa m ple and is not stab le .K ey w ords :Rhodop seudo m onas palustris ;m ed i u m opti m izati o n ;a mm on ia nitrogen re m ova l(责任编辑 马建华)#203#。

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