胚胎培养液

胚胎培养液

胚胎培养液的主要成分包括：水、离子、能量物质、氨基酸、维生素、核酸前体、蛋白质、生长因子激素、缓冲系统及气体，都有商品化现成的培养液可供购买。

水是组成任何培养液的主要成分，在IVF实验室，一般使用Milipore-Q系统产生无致热原的高质量的水( Mii-o)准备培养液及洗涤所有玻璃制品及设备。目前我们对离子在种植前的作用了解很少，因为在培养液中有许多复杂的相互作用，很难了解一种离子的单独作用。哺乳动物的输卵管液的特征是高钾和高氯化物浓度。Roblero等报告高钾有利于精子获能和胚胎发育，培养液中离子的最大作用是控制培养液的渗透压，而渗透压对于人的胚胎发育是很重要的。

种植前胚胎的营养物质包括丙酮酸、乳酸和葡萄糖，胚胎从2细胞发育至囊胚期的各个阶段所需要的各种营养物质的浓度是不同的。氨基酸在种植前和种植期间对于哺乳动物的发育有生理作用，Hardy和Gardner等观察到在培养液中加入氨基酸可加速小鼠和金黄地鼠胚胎的发育。人IVF中最常用的蛋白质的来源是血清，一般浓度为5%～10%。蛋白质在胚胎培养液中的作用不仅仅是固定的氮的来源，并可作为有害金属离子的整合物。但Caro等发现人胚胎在含有或不含有母亲血清的T6培养液中培养，其受精率、胚胎分裂率和妊娠率无明显差异。

大多数胚胎培养液利用碳酸氢盐／二氧化碳作为缓冲系统以维持培养液的生理pH值为7.2—7.4，这是哺乳动物细胞周围液体的生理性缓冲液。其缺点是若培养液暴露在空气中时间过长，pH值迅速增加可引起胚胎损伤或坏死。在培养液上覆盖一层油可减慢培养液中的气体交换。磷酸盐( HERPES)作为缓冲系统可不需要二氧化碳内环境维持其在空气中的pH 值。胚胎培养液中的两种气体是氧和二氧化碳，二氧化碳不仅维持碳酸氢盐缓冲液的pH值，还可使种植前各个阶段的小鼠胚胎与蛋白质和核酸结合。大多数IVF中心应用5%的二氧化碳。许多作者证明，在培养液中将氧的水平减低至5%～7%时，与空气中20%的氧相比对胚胎发育更有利。