氧化还原探针新类型..

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方案一：免疫传感器的制备工艺和电化学机理示意图反应
逐步通过SEM表征免疫传感器的研制。 逐步免疫传感器的研制过程 用扫描电镜监测。 图1显示
•结果 •讨论
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SEM照片（a）（b）aunds，PA / aunds，和（c）抗体 /PA / aunds。 在aunds表面固定PA，与图像观察到模糊的表面（图 1b），这是不同于图1a，说明PA的成功结合表面上。 随后，装载到PA /aunds薄膜，获得了致密的蛋白层 （图1C），这表明AB1被成功地引入通过桥接Pa。
该传感器与不同浓度培养后促红细胞生成素标准溶液。 传感器随浓度的增加促红细胞生成素。图5b，校正曲线具有良好的线性电流和对数的 值之间的关系促红细胞生成素的浓度范围从0.01到80毫升的1个−MIU相关系数0.996。 回归方程为0.681 LG CePO + 2.113与0.0027庙的检测限1在3毫升−σ（其中σ是空白的标 准偏差信号，20）。 结果表明，建议传感器可用于检测EPO定量。特异性，稳定性和可重复性免疫传感器 特异性是一个重要因素抗原抗体结合。潜在的干扰物质在血清中，如免疫球蛋白（抗 体），人血清白蛋白（HSA），血小板衍生生长因子（PDGF），被用来评估所提出的 特异性免疫传感器。
制的电化学过程。
方案二：
1.电化学反应的可 能机制
2.（b）ESP映射 C60（a）和C60（b） （最大值和最小值 的ESP是由红色和 蓝色，分别标记）
3.（c）的HOMO C60（A）和C60（B）
作为实验结果支持图4，可能电化学机理是当方案2(a)所示。 TOA +不存在，C60分子的电子云是均匀的分布和难极化，因此C60很难降低在电位 范围内没有发现氧化还原峰。令人鼓舞的是，当一个存在大量正电荷，TOA +吸附 在C60表面，使C60的电子云分布不均匀，容易极化。CV扫描从0.45到0.3 V后−TOA +能作为一个助推器激发C60内氧化还原活性这样一对可逆的氧化还原峰。 在计算的基础上研究，我们可以得出结论，我们假定的电化学机制是合理的。 该免疫传感器的性能分析。以调查的灵敏度和定量范围提出了免疫，免疫传感器方 法用不同浓度的EPO在0.1 M PBS DPV技术标准溶液（pH7.4）。可以看出（图5A） 的DPV响应c.图5。DPV响应（A）和（B）的校准曲线
图3。CVS（一）和电化学阻抗谱（B）修饰电极在pH值不同 7.4 PBS含5毫米[Fe（CN）6 ] 4−/ 3−作为氧化还原探针：（一） A，（B）aunds / GCE，（c）PA / aunds / GCE，（D）AB1 /尼龙/ aunds / GCE，（E）BSA /样品/尼龙/ aunds / GCE，和（f）。 当aunds直截了当在玻碳电极表面的电沉积，峰电流明显增加（图3A，B曲线）， 这意味着aunds带来优良的导电性和大面积推广电子转移。然而，当被固定到 aunds / GCE（图3A，曲线C），心血管反应明显降低，因为作为电子转移阻挡和 铁氰化钾的扩散阻碍向电极表面。随后，当AB1通过桥接，氧化还原明显下降目 前的观察（图3A，曲线D）。此外，在所得到的电极阻断后的循环响应下降1%牛 血清白蛋白溶液（图3A，曲线E）。最后，当导致免疫40 MIU毫升−促红细胞生成 素孵育1，CV响应再次下降（图3A，曲线F）。这样的降低基本可以归因于一个事 实，AB1，BSA，EPO蛋白层对电极会延缓电子转移。EIS不同修饰电极是在图3b 所示。赤裸的GCE显示一个小的半圆（图3B，曲线），指示低电子转移电阻。当 aunds在电极表面的电沉积，奈奎斯特图为直线（图3B，曲线B），表明多孔多孔 的优良导电性能aunds膜。PA溶液后，电阻增加（图3B，曲线C）因为PA作为电子 转移阻挡层阻碍扩散铁氰化钾在电极表面。随后，当AB1，BSA和EPO，依次固定 在电极表面电阻增加，有序（图3b，曲线D）。
•结 •论
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总之，亲水性的C60纳米材料（au-pamamc60nps） 第一次合成，并作为一个新的类型氧化还原探针构 建的夹心型免疫传感器促红细胞生成素的检测。值 得注意的是，传感器具有良好的稳定性和重现性， 灵敏度，显示潜在的应用在掺杂控制以及在生物分 析中的应用。更重要的是，这一策略可能为新的探 索碳基材料作为氧化还原的途径探针制备各种电化 学免疫传感器，一种常规的生物传感的应用前景。
图6。（一）免疫传感器的选择性：IgG（80 nm），人血清白蛋 白（80 nm），血小板衍生生长因子（80 nm），促红细胞生成素 （40 MIU毫升−1）和混合。（乙）0周，1周和2周的免疫传感器 的稳定性。在目前获得的空白相比试验。 然而，一个戏剧性的增加被发现在目标EPO的存在。即IgGHSA， 和PDGF共存与EPO，DPV响应几乎是相同的与促红细胞生成素的孤 独。这些结果表明高促红细胞生成素的特异性检测。 如图图6b，没有明显的变化是在第一次发现本周和响应变化不到 8.2%电流。保存2周后，它保持了86.3%最初的反应，这意味着该 免疫传感器可接受的稳定性。 通过分析EPO使用五同样的评价免疫传感器在相同条件下，所有 的电极显示近似的电化学响应，RSD获得了6.2%。 实验结果表明制备的免疫传感器保持电位的定量测定EPO具有理 想的可重复性。 应用:方法（酶联免疫吸附法）。从表1可以看出方法的相对偏差 在−8.75到9.76，这清楚地表明潜力建议在免疫分析中的应用真 实生物样品。
确 认
au-pamamc60nps
X射线光电子能谱分析（一）的XPS au-pamam-c60nps全区 域，（B）C 1s的区域，（c）N 1区，（d）O 1s的区域，和 （e）Au 4f
成 功 制 备
对au-pamam-c60nps XPS表征。证明au-pamam-c60nps的 成功合成，XPS表征用于元素分析。正如预期的那样，特点C 1s，N 1，O 1s峰，和Au 4f区域可能在au-pamam-c60nps全 区域明显光谱（图2A）。284.7，399.8，和532.4电子伏特 的峰可以分配给C 1s，1s和N，O 1s，分别（图2B，C，D）。 图2是互惠的4f 。双儿（84和87.7 eV 4F7 / 2和4F5 / 2， 分别）结果金属AU0。在此基础上元素分析，我们可以确认， au-pamamc60nps成功制备。
•实验 •部分
试剂和材料: 促红细胞生成素（EPO) 、促红细胞生成素抗体、富勒烯 （C60） 、氨基终止聚酰胺-胺（PAMAM） 、氯化金四辛基溴化铵 （TOAB). 仪器与测量: 三电极系统中进行修饰玻碳电极（GCE，直径4 mm）为工作 电极，饱和甘汞电极（SCE）为参考电极和铂丝作为辅助电极。 pamam-c60nps的形态特点用透射电子显微镜（透射电子显微镜） 在80千伏的加速电压。扫描。
有氧化还原活性，促红细胞生成素/ BSA /样品/尼龙/aunds / GCE只有培养 TOAB也进行了研究无氧化还原峰（图4A，曲线C）。 这比较清楚地表明，TOA +作为助推器引起au-pamam-c60nps内氧化还原活性，从 而对可逆的氧化还原峰进行了观察。 进一步探讨电子转移的可逆性的过程，在不同的传感器制作的简历扫描速率进 行检测，在PBS（pH 7.4），如图所示4B表明所制备的电化学反应电极是一种扩散控
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•序 •言
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反应C60在电化学行为机制薄膜可以是带正电荷的阳离子四辛基（TOA+） 由C60的电子云分布不均匀、易极化。循环扫描，TOA +可以作为一个助推 器唤醒内在的氧化还原活性C60和青睐的带负电荷的阴离子的生成富勒烯 （C60N−）因此，C60嵌入在TOA +有机薄膜可以很容易地实现电化学氧化还 原反应，但C60在水溶液中的氧化还原活性的抑制作用由于C60分子的水溶 性很差，C60在水溶液中的电化学行为是不稳定的。在这项工作中，我们的 动机是充分利用C60分子内氧化还原活性来获得一个新的类型的氧化还原对 EPO的检测探针。 制备亲水基于氧化还原探针的C60，C60纳米颗粒（c60nps）是首先制 备的相转移法和官能化氨基封端的聚酰胺胺（PAMAM）是一种超支和三维结 构表面活性的结构均匀性和高密度组。32−34 c60nps PAMAM装饰产品 （pamam-c60nps）相比，具有更好的亲水性改性c60nps和具有丰富的胺表 面上的基团作进一步修改。在那之后—金被吸附在pamam-c60nps表面通过 氨基—金的亲和力，以及由此生的au-pamam-c60nps是作为一种新的氧化还 原探针和纳米载体的标签Ab2。通过有效的免疫传感界面的构建与捕获抗体 （Ab1）通过定向固定蛋白质的桥接（PA）35在金纳米簇修饰玻碳电极 （GCE）。后夹心式免疫反应之间的EPO和AB2标记au-pamam-c60nps，所得 的免疫传感器以10分钟一滴TOAB和0.1米的检测。我们吃惊的是，内氧化还 原活性的C60纳米材料（au-pamam-c60nps）引起了一对在CVS−0.45和0.3 V 之间的可逆的氧化还原峰。
au-pamam-c60nps的作用TOAB系统，CVS不同修饰电极
图4。（一）CVS不同修饰电极在pH 7.4的PBS后40 MIU毫升−1促红细胞生成素，然后连续培 养 培养2与偶联物和TOAB（A）；培养与AB2结合无TOAB（B）；与TOAB在孵化AB2型偶联物缺 失（C）。（b）简历的建议在不同的扫描速率传感器（从内到外）：20，50，100，150， 200，300，400，500，600，和700 mV的−1在pH 7.4的PBS。 插入：图的氧化还原峰电流与扫描速率的平方根。所有的电位与SCE。 BSA /样品/尼龙/ aunds / GCE然后先后培养2与偶联物（AB2标记au-pamam-c60nps）和 TOAB。 正如预期的那样，检测传感器在PBS（pH 7.4）和显示一对可逆的氧化还原峰。 阴极和阳极峰电位为0.06 V和−EPA−EPC = 0.14 V（vs SCE），分别，和峰峰值分离是 80个压，这是与工作的协议歌等al.28此外，对照实验完成为了证明的内部氧化还原活性 au-pamam-c60nps由TOA +引起，促红细胞生成素/ BSA /AB1 /尼龙/ aunds / GCE只有 培养AB2偶联物被调查，没有氧化还原峰观察到电位范围（图4A，曲线B）。 TOA +本身具