蛋白质的起泡性测定方法
检验蛋白质的方法
检验蛋白质的方法蛋白质是有机体内重要的组成部分，它参与细胞内的各种生理过程，在分子水平上反映细胞的特性，具有重要的生物学意义。
因此，检测蛋白质的类型、数量和结构等信息是生物学研究的重要内容。
下面将介绍检验蛋白质的方法。
一、SDS-PAGESDS-PAGE是非蛋白质单层电泳，全称为“聚合物分子量标准化单层电泳”，是一种常用的蛋白质分子大小分析方法。
它主要是将蛋白质和聚合物分子量标准化电泳柱中的离子溶液中，经由电场作用，按照分子大小由外至内依次移动，蛋白质经过移动后在非蛋白质电泳柱上凝聚成带，根据带的大小可以测定蛋白质的分子量。
二、酶标技术酶标技术是根据酶的特异性，将一种特定的蛋白质结合到检测基板上，然后将检测基板放入包含特定抗体的特异性液体中，抗体结合到特定蛋白质上，形成抗原抗体复合物，然后放入含有特定酶的液体中，抗原抗体复合物会被酶分解，酶标板上的特定蛋白质就会被完全除去，最后再用偶标技术检测蛋白质的含量，从而测定蛋白质的含量。
三、蛋白质结晶蛋白质结晶是一种常用的蛋白质检测方法，它利用蛋白质自身的特性，将蛋白质溶液浓缩，当达到某一程度时，蛋白质就会结晶，结晶后可以在X射线衍射仪中分析结构，从而测定蛋白质的结构。
四、质谱技术质谱技术是一种蛋白质检测技术，它是指将蛋白质分解成氨基酸序列，然后通过质谱仪分析每一种氨基酸的含量，最后比较氨基酸的种类和浓度，从而确定蛋白质的类型和结构。
五、荧光技术荧光技术是一种常用的蛋白质检测技术，它是指将荧光标记的抗体与特定的蛋白质结合起来，荧光标记的抗体的激发后，荧光技术可以测定抗体结合的蛋白质的数量，从而测定蛋白质的含量。
总结以上就是关于检验蛋白质的方法，如SDS-PAGE、酶标技术、蛋白质结晶、质谱技术和荧光技术。
它们各自具有不同的特点，可以根据不同的需要灵活使用，从而满足生物学研究的需要。
检验蛋白质的方法及现象
检验蛋白质的方法及现象检测蛋白质的方法有：1、分子量测定法：通过把蛋白质以某种介质流动，使其迅速穿越一定粒径的离子交换层，然后采取液相色谱法测定相应蛋白质的分子量，从而求出特定蛋白质的特征分子量。
2、凝胶电泳：是将蛋白质在 LED-偶联法分子量鉴定，是采用激光电子捕获和驱动，蛋白质和急性偶联物组合结合，以生产一种特殊的类聚多糖化合物，达到电泳分离蛋白质的目的。
3、蛋白质的细胞测定：通过把蛋白质放到不同浓度的离子条件下，以细胞技术手段测定蛋白质的稳定性和可被抑制的性能。
4、体外模拟实验：将不同比例的蛋白质与某种固定化剂混合，模拟体内条件，以测定蛋白质的稳定性和特异性。
5、放射性标记：把蛋白质结合放射性标记的药物标记物，然后使用凝胶电泳，紫外可见光谱等方法测定放射性标记的标记物显示的服用蛋白质的分布和定量，从而评价蛋白质的质量。
6、 DNA 分子测定：采用高效液相色谱法，把蛋白质代谢到个体 DNA 分子中，测试DNA 分子的碱性度，判断蛋白质含量。
7、蛋白质安定性分析：利用数据库软件（如Bridge），研究蛋白质在体外条件及温度、pH值、盐浓度、有机溶剂含量及催化剂等共表征环境中作用时，结构安定性的变化。
蛋白质性现象：1、可均质性降解及易损质：蛋白质对热、酸、碱、抗生素等有不同的稳定性，受物理化学作用的刺激，无论是天然的还是添加的成分，均可使其酶聚及脱氨键，影响溶解性。
2、亲和性：蛋白质分子由于其胞内的环境不同，构成不同的分子结构状态，各种实验条件的变化，均会影响蛋白质的亲合力，从而导致其亲合性的变化。
3、可流动性：蛋白质分子和结构会受到它们离子和结构性结合能力等因素的影响，当环境条件改变时，蛋白质分子之间的排斥力发生增大，从而减少可流动性。
4、免疫原性：由于蛋白质本身的分子结构和结合特性，出现不可逆的结构变化尤其是连锁反应，导致其免疫原性大大增强，从而产生特异性抗体。
5、细胞毒性：在一定条件下，蛋白质被细胞直接吸收，可抑制细胞的生理和代谢活动，使细胞破坏，从而产生细胞毒性。
蛋白质的性质实验报告
蛋白质的性质实验报告蛋白质的性质实验(一)蛋白质的性质实验（一）蛋白质及氨基酸的呈色反应一、目的1．了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。
2．了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。
3．学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
二、呈色反应（一）双缩脲反应1．原理尿素加热至180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。
双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。
蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。
可用于蛋白质的定性或定量测定。
双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。
含有一个肽键和一个—CS—NH2，—CH2—NH2，—CRH—NH2，—CH2—NH2—CHNH2—CH2OH或—CHOHCH2NH2等基团的物质以及一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
2．试剂3．操作取少量尿素结晶，放在干燥试管中。
用微火加热使尿素熔化。
熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。
冷后，加10％氢氧化钠溶液约1mL，振荡混匀，再加1％硫酸铜溶液1滴，再振荡。
观察出现的粉红颜色。
要避免添加过量硫酸铜，否则，生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。
向另一试管加卵清蛋白溶液约1mL和10％氢氧化钠溶液约2 mL，摇匀，再加1％硫酸铜溶液2滴，随加随摇。
观察紫玫瑰色的出现。
（二）茚三酮反应1．原理除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
β-丙氨酸、氨和许多一级胺都呈正反应。
尿素、马尿酸、二酮吡嗪和肽键上的亚氨基不呈现此反应。
因此，虽然蛋白质和氨基酸均有茚三酮反应，但能与茚三酮呈阳性反应的不一定就是蛋白质或氨基酸。
在定性、定量测定中，应严防干扰物存在。
该反应十分灵敏，1∶1500000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应，是一种常用的氨基酸定量测定方法。
茚三酮反应分为两步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。
生物化学实验4
2、淀粉水解实验设计
设计实验方案，试验淀粉能不能水解，水解的条件和产物是什么？怎样判断淀粉是否水解了？
(1)在试管1中加入0.5g淀粉和4ml水，在试管2中加入0.5g淀粉和4ml 20%的硫酸溶液。分别加热试管3~4min。
(2)把试管2中的一部分溶液倒入试管3中，留作下一步实验用。
（二）蛋白质的乳化性
(1)取5g卵黄蛋白加入250ml的烧杯中，加入95ml水，0.5g氯化钠，用电动搅拌器搅匀后，在不断搅拌下滴加植物油10ml，滴加完后，强烈搅拌5min使其分散成均匀的乳状液，静置10min，待泡沫大部分消除后，取出10ml，观察乳状液属水包油型还是油包水型。
（一）水溶性：
蛋白质与水的相互作用，主要是蛋白质中的肽键（偶极-偶极相互作用或氢键），或氨基酸的侧链(解离的、极性甚至非极性基团)同水分子之间发生了相互作用。影响蛋白质水溶性的因素很多：
（1）pH>pI时，蛋白质带负电荷，pH=pI时，蛋白质不带电荷，pH<pI时，蛋白质带正电荷。溶液的pH低于或高于蛋白质的pI都有利于蛋白质水溶性的增加，一方面是加强了蛋白质与水分子的相互作用，另一方面蛋白质链之间的相互排斥作用。等电沉淀。
在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。
淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。
蛋白质功能性的检测
蛋白质功能性质的检测摘要：本实验通过蛋白质水溶性的测定，蛋白质乳化性的测定，蛋白质起泡性的测定，蛋白质凝胶作用的测定探究了蛋白质功能性质的检测。
结果表明，蛋清蛋白加进水有白色沉淀生成，在溶液中逐滴加入饱和氯化钠溶液，摇匀，得到澄清的蛋白质的氯化钠溶液。
加入饱和硫酸铵溶液后，有白色絮状物从溶液中析出，加入粉末硫酸铵后有少量析出；水和油分层明显；加蛋白质后浑浊一段时间后分层；起泡数量多少盒稳定程度酒石酸<氯化钠<蒸馏水；试管中蛋清蛋白，冒泡，沸，逐渐形成乳白色凝胶。
关键词：蛋白质功能性质水溶性乳化性起泡性凝胶作用前言蛋白质的功能性质一般是指能使蛋白质成为人们所需要的食品特征而具有的物理化学性质，即对食品的加工、贮藏、销售过程中发生作用的那些性质，这些性质对食品的质量和风味起着重要的作用。
蛋白质的功能性质与蛋白质在食品体系中的用途有着十分密切的关系，是开发和有效利用蛋白质资源的重要依据。
蛋白质的功能性质可分为水化性质、表面性质、蛋白质-蛋白质相互作用的。
1实验材料与仪器1.1实验材料与试剂2%蛋清蛋白溶液：取2g蛋清加98ml蒸馏水稀释，过滤取清夜,卵黄蛋白：鸡蛋除蛋清后剩下的蛋黄捣碎,硫酸铵、饱和硫酸铵溶液,氯化钠、饱和氯化钠溶液,花生油,酒石酸.1.2实验仪器刻度试管,100ml烧杯,冰箱.2实验方法2.1蛋白质水溶性的测定在10ml刻度试管中加入0.5ml蛋清蛋白，加入5ml水，摇匀，观察其水溶性，有无沉淀产生。
在溶液中逐滴加入饱和氯化钠溶液，摇匀，得到澄清的蛋白质的氯化钠溶液。
取上述蛋白质的氯化钠溶液3ml，加入3ml饱和硫酸铵溶液，观察球蛋白的沉淀析出，再加入粉末硫酸铵至饱和，摇匀，观察清蛋白从溶液中析出，解释蛋清蛋白质在水中及氯化钠溶液中的溶解度以及蛋白质沉淀的原因。
2.2蛋白质乳化性的测定取0.5ml卵黄蛋白于10ml刻度试管中，加入4.5ml水和5滴花生油；另取5ml水于10ml刻度试管中，加入5滴花生油；再将两支试管用力振摇2~3min，然后将两支试管放在试管架上，每隔15min观察一次，共观察4次，观察油水是否分离。
检测蛋白质的常用方法
检测蛋白质的常用方法
以下是 8 条关于“检测蛋白质的常用方法”的内容：
1. 免疫沉淀法，哇塞，就好比警察抓坏人一样，把特定的蛋白质从一堆混合物里精准揪出来！比如在研究某种疾病相关蛋白的时候就超有用呢！
2. 凝胶电泳法，嘿，这就像一场蛋白质的赛跑比赛呀！能让各种蛋白质分开跑，看谁跑得快，从而清楚地分辨它们。
我们在分析蛋白质的分子量和纯度时经常会用到呢。
3. 酶联免疫吸附测定法，哎呀呀，这不就是专门“捕捉”蛋白质的小能手嘛！能灵敏地检测到特定蛋白质的存在。
像是检测食品中的一些微量蛋白质，它可厉害啦！
4. 蛋白质印迹法，你看，这就好像给蛋白质拍个“证件照”，让它们留下独特的印记。
比如要确定某个蛋白在细胞里有没有，用这个方法就超合适的哟！
5. 高效液相色谱法，哇哦，如同给蛋白质来一场高级的“分类选拔”，把它们分得清清楚楚，明明白白的。
在药物研发中检测蛋白质的纯度就靠它啦！
6. 生物质谱法，这可是个厉害的角色呢，简直就是蛋白质的“鉴定大师”呀！快速又准确。
不相信？去看看那些科研实验室里它的大显身手呀。
7. 分光光度法，哈哈，就是用一种神奇的“光魔法”来检测蛋白质的浓度，多有意思呀！在一些常规的蛋白质分析中，它可是常客呢！
8. 同位素标记法，哎呀，就像是给蛋白质贴上一个特别的“标签”，然后追踪它的去向。
这种方法对于研究蛋白质的代谢和功能简直太重要啦！
总之，这些检测蛋白质的方法各有各的厉害之处，就看你在什么情况下需要用哪种啦！。
全氮、(水溶性)蛋白质的测定
全氮、水溶性蛋白质的测定1 安全性评估1.1谨防玻璃割伤使用前检查消化管管口及底部是否有裂痕，发现裂痕直接丢弃；注意轻拿轻放消化管，清洗时佩戴防割手套。
1.2谨防试剂灼伤加入浓硫酸时需佩戴一次性乳胶手套，不裸露手腕位置皮肤。
更换浓硫酸时需佩戴耐酸碱袖套及一次性乳胶手套。
1.3谨防高温烫伤取下消化管架需佩戴防烫手套及长袖白大褂，不裸露手腕位置皮肤。
2 目的规范全氮、（水溶性）蛋白质、蛋白质（折干计）的检测流程，确保检测结果的准确性。
3 范围适用于各种食品中蛋白质的测定例如适用于以大豆或脱脂大豆，经微生物发酵制成的具有特殊色、香、味的液体调味料或辅料；以磨碎的鸡肉或鸡骨或其浓缩抽提物以及其它一些辅料为原料，添加或不添加香辛料和实用香料等增鲜剂加工而成的，具有鸡的浓郁香味和鲜味的汁状复合调味料；以大豆为主要原料，其它为辅料，经磨浆、成胚、培菌及微生物后期发酵的腐乳。
4 凯式定氮仪法4.1依据酱油类：GB/T 18186-2000酿造酱油，鸡精类：SB/T 10371-2003鸡精调味料，鸡粉类：SB/T 10415-2007鸡粉调味料，腐乳类：SB/T 10170-2007腐乳，鸡汁类：SB/T 10458-2008鸡汁调味料，其它：GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定。
4.2原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。
然后加碱蒸馏，使氨逸出。
用硼酸溶液吸收后再以标准盐酸滴定溶液测定。
根据耗用的标准盐酸滴定溶液的体积可以计算出全氮的含量，最后乘以蛋白质系数，即为蛋白质的含量。
4.3 试剂和仪器4.3.1 试剂浓硫酸；氢氧化钠溶液（40 %）；盐酸标准滴定溶液[C（HCl）＝0.1000 mol/L]；硫酸钾--硫酸铜片状催化剂对于2200/8200型定氮仪：硼酸溶液（40 g/L）；混合指示液：1g/L溴甲酚绿乙醇溶液-1g/L 甲基红乙醇溶液（5：1）；对于8400型定氮仪：10g/L硼酸溶液+1g/L溴甲酚绿乙醇溶液+1g/L甲基红乙醇溶液（体积比为1000:10:7）4.3.2 仪器2200/8200型丹麦福斯定氮仪；8400型丹麦福斯定氮仪；FOSS型自动消化装置；电子分析天平（0.0001 g，0.001g）；JJ2000Y型电子天平（0.1 g）。
检验蛋白质的方法
检验蛋白质的方法
第一种方法是生物素标记法。
生物素标记法是通过将生物素与蛋白质结合，然后用生物素与酶的结合作用来检测蛋白质的存在。
这种方法具有灵敏度高、特异性强的特点，适用于检测蛋白质的存在和纯度。
第二种方法是免疫沉淀法。
免疫沉淀法是通过将抗体与蛋白质结合，然后用沉淀剂将蛋白质沉淀下来，最后通过洗涤和电泳等步骤来检测蛋白质的存在。
这种方法适用于检测蛋白质的结构和相互作用。
第三种方法是质谱法。
质谱法是通过将蛋白质进行分子质量的测定，然后通过质谱仪来检测蛋白质的存在和结构。
这种方法具有高灵敏度、高分辨率的特点，适用于检测蛋白质的组成和修饰。
除了以上介绍的方法，还有许多其他的方法可以用来检验蛋白质，比如酶联免疫吸附试验、免疫荧光染色法等。
这些方法各有特点，可以根据实际需要选择合适的方法来进行蛋白质的检验。
总的来说，检验蛋白质的方法有很多种，每种方法都有其特点和适用范围。
在进行蛋白质检验时，我们可以根据需要选择合适的方法来进行检验，以确保检验结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的方法对大家有所帮助，谢谢阅读！。
啤酒泡沫蛋白质的初步分离及测定
作者采用Bradford 法对数十种啤酒样品进行 了测定,并同时采用与实际倒酒相近的国标倾 倒法测定了啤酒泡持性能,试图寻找蛋白质浓 度与泡持性之间的线性关系。在通过采用凝 胶过滤对啤酒泡沫分离测定后,初步确定了主 要的泡沫蛋白质组分和它们的相对含量。
1 实验材料与方法 111 实验材料 考马斯亮蓝G- 250(上海化学试剂公司) 标准牛血清蛋(国产) 标准胰岛素(国产) 标准溶菌酶(国产) Sephdex G- 50 凝胶(Phamacia 进口分装) 721 分光光度计(上海第三分析仪器厂) 112 实验方法 泡沫蛋白质测定方法:Bradford 法
2 实验结果 211 Bradford 法测定泡沫蛋白质结果 将市售啤酒测得的泡沫蛋白质浓度与对应 的用国标法测得的泡持值作线性关系曲线, 结果见图2
图2 Bradford法测定的高分子蛋白质 HMWP与泡持值 HRV 之间的线性关系
由图2 可以看出, Bradford 法测定的高分子蛋白质 (HMWP) 与泡持值(HRV) 之间有着一定的线性关 系,说明测得的蛋白质含量比较接近于啤酒泡沫蛋 白质的真实含量,结果也证明了Bradford 法测定啤 酒泡沫蛋白质的可行性。 212 泡沫蛋白质的生化分离 实验采用凝胶过滤分离泡沫蛋白质,首先使用三种 标准蛋白质作出凝胶柱标准分离洗脱体积结果见 表1。泡沫蛋白质分离图谱见图3。
3 结论 通过对Bradford 法测定啤酒泡沫蛋白质含量方法 的研究发现,该方法用于测定泡沫高分子活性蛋白质 具有一定的可行性。测定结果与泡持值的线性关系 也说明了这一点。因而,作者认为Bradford 法对工厂 粗略测定泡沫活性蛋白质还是有很大实用价值的。 同时通过凝胶过滤色谱Sephdex G-50 对啤酒泡沫 蛋白质的分离测出了主要的三种泡沫活性蛋白质,分 别是大于70 ,000 道尔顿,约30 ,000 道尔顿和 24 ,000道尔顿左右分子量的三种蛋白分布情况。
蛋白质的检验方法
蛋白质的检验方法蛋白质是生命体内最基本的组成部分之一，它在细胞内扮演着重要的角色，参与了生命体内的许多生化过程。
因此，蛋白质的检验方法对于科研工作者和临床医生来说都是至关重要的。
本文将介绍几种常见的蛋白质检验方法，希望能够为相关领域的研究者和医生提供一些帮助。
一、免疫沉淀法。
免疫沉淀法是一种常用的蛋白质检验方法，它利用抗体与特定蛋白质结合的原理，通过沉淀的方式将目标蛋白质分离出来。
这种方法的优点是可以选择性地富集目标蛋白质，适用于复杂样品的检验。
但是，免疫沉淀法也存在一些局限性，比如需要较长的操作时间和较高的成本投入。
二、凝胶电泳法。
凝胶电泳法是一种常见的蛋白质检验方法，它利用蛋白质在电场中的迁移速度差异来分离不同的蛋白质成分。
这种方法的优点是可以直观地观察蛋白质的分布情况，对于分子量较大的蛋白质有较好的分辨率。
但是，凝胶电泳法也存在一些局限性，比如需要较长的电泳时间和较高的电泳电压。
三、质谱法。
质谱法是一种高效的蛋白质检验方法，它利用质谱仪对蛋白质进行分析，可以准确地测定蛋白质的分子量和氨基酸序列。
这种方法的优点是具有很高的灵敏度和分辨率，可以对微量的蛋白质进行检测。
但是，质谱法也存在一些局限性，比如设备昂贵、操作复杂等。
四、酶联免疫吸附试验（ELISA）。
酶联免疫吸附试验是一种常用的蛋白质检验方法，它利用酶标记的抗体与蛋白质结合后，通过酶的底物反应来检测蛋白质的含量。
这种方法的优点是操作简便、结果可靠，适用于大批量样品的检测。
但是，ELISA也存在一些局限性，比如对样品的纯度要求较高、无法直接测定蛋白质的活性等。
综上所述，蛋白质的检验方法多种多样，各有优缺点。
在实际应用中，需要根据具体的实验目的和样品特点选择合适的检验方法，以保证实验的准确性和可靠性。
希望本文介绍的内容能对相关领域的研究者和医生有所帮助。
蛋白功能性测定
1.吸油性测定：准确称取0.5ｇ蛋白产品于10mL离心管中，加入3mL花生油，用玻璃棒搅拌1min后，静止放置30min，用1000r/min的速度离心25min，记下游离油的体积。
吸油性（mL/g）=（3-游离油的体积）/0.52.保水性测定：向10g干试样中加入100mL热水，搅拌均匀，放置20min使之充分吸水，用1000/min离心5min，去除分离水，测定残留物的质量。
保水性=离心后残留物的质量/试样质量*100%3. 吸水性：准确称取0.5ｇ样品加4 mL水，用玻璃棒搅拌1min后，40℃水浴中放置30min，用500r/min离心25min，记下游离水的体积。
吸水性（mL/g）=（4-游离水的体积）/0.54.乳化性与乳化稳定性：乳化性：称取3g样品溶于50mL蒸馏水中，调节pH=7.0，加入50mL花生油，在高速组织捣碎机中均质(1000r/min～1200r/min)2min，再离心(1500r/min)5min，按下式计算乳化性：乳化性(%)=(离心管中乳化层高度/离心管中液体总高度)×100% 乳化稳定性：称取3g样品溶于50mL蒸馏水中，调节pH=7.0，加入50mL花生油，在高速组织捣碎机中均质(10000r/min -12000r/min)2min，置于50℃水浴中30min后，测出此时的乳化层高度，则乳化稳定性为：乳化稳定性(%)=(30min后的乳化层高度/初始时的乳化层高度)×100%5.起泡性与泡沫稳定性：3g样品溶解于100mL蒸馏水中，调节pH=7.0，然后在高速组织捣碎机中1000～1200r/min均质2min，记录下均质停止时泡沫的体积及30min后泡沫的体积。
起泡性=均质停止时泡沫的体积（mL）/100*100%泡沫稳定性=放置30min后泡沫的体积/均质停止时泡沫的体积*100%蛋白含量测定1原理蛋白质是含氮的有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
蛋白质含量的测定方法
蛋白质含量的测定方法
蛋白质是生物体内重要的营养成分之一，它对于人体的生长发育、免疫功能、肌肉修复等方面起着重要作用。
因此，准确测定食物或样品中的蛋白质含量对于科研和生产具有重要意义。
本文将介绍几种常用的蛋白质含量测定方法，希望能够帮助读者更好地了解和掌握这些方法。
首先，常用的蛋白质含量测定方法之一是比色法。
比色法是通过蛋白质与某些特定试剂发生反应后产生有色产物，利用比色计或分光光度计测定其吸光度来计算蛋白质含量的方法。
这种方法操作简单，准确性较高，适用于大多数食品和生物样品的蛋白质含量测定。
其次，还有Kjeldahl法。
Kjeldahl法是一种经典的蛋白质含量测定方法，它通过将样品中的蛋白质分解成氨基酸，再利用氨基酸中的氮含量来计算蛋白质含量的方法。
这种方法需要较长的操作时间和较复杂的操作步骤，但是其测定结果准确可靠，适用于各种类型的样品。
另外，还有紫外吸收法。
紫外吸收法是通过蛋白质中芳香族氨
基酸（如酪氨酸、苯丙氨酸等）在紫外光下的吸收来测定蛋白质含量的方法。
这种方法操作简单，灵敏度高，适用于各种类型的食品和生物样品。
除了上述方法外，还有一些其他的蛋白质含量测定方法，如生物素标记法、荧光法等。
这些方法各有其特点和适用范围，可以根据实际需要选择合适的方法进行蛋白质含量的测定。
总之，蛋白质含量的测定方法有多种多样，每种方法都有其适用的范围和特点。
在进行蛋白质含量测定时，需要根据样品的特点和实际需求选择合适的方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文所介绍的内容能够对读者有所帮助，谢谢阅读！。
桑椹籽蛋白质起泡性影响因素的研究
・５・ ２ ２１年 ００
第 ２期
４月
农 业 与 技 术
Ａ ｃ ｌ ｒ ＆Ｔ ｃ ｎ ｌ ｇ ｕｔ ｅ ｅｈ ｏｏｙ ｕ
Ｖ０ ． ｏ Ｎ ２ １３ ｏ． ｈｐ ． ０ ０ ｒ２ １
桑 椹 籽 蛋 白质 起 泡 性 影 响 因素 的 研 究
李 为 琴
（ 山西师范 大学工程学院 ，山西 临汾 ０ １ ４ ４０ ） ０
体积越多 ，Ｆ Ａ越好 ，当达到一定程度时 ，气体趋
于饱 和 状 态 ，Ｆ Ａ也 趋 于 稳 定 。此 时 若 再 继 续 匀 浆 ，就 可 能破 坏 已经形 成 的稳 定 状 态 ，导致 Ｆ Ａ、 下降 。因此 ，匀浆 时 间选择 ３～ ｒｎ ｄ ｉ。 ａ
２ Ｉ３ 蛋 白质浓 度对 Ｆ ．． Ａ、Ｆ Ｓ的影 响
由图 ２可 以看 出 ，随着 匀 浆 时 间 的增 加 ，Ｆ Ａ 呈增加 趋势 ，而 Ｆ 变 化不 大 。当匀 浆 时 间 在 ３— Ｓ
２ 结 果 与 分 析
４ｉ Ｆ ｍｎ时 Ａ、Ｆ Ｓ效果较 好 ，此 后 再 增加 匀 浆 时 间 ， Ｆ Ａ、Ｆ Ｓ均下 降。匀 浆时 间 的长短 关 系到 进入 界 面
１２ 试验 仪器 与设 备 ．
桑椹 是桑科 植 物桑 （ ｏｕ ｌ ． Ｍ ｒｓ ｂ Ｌ ）的成 熟 聚 ａｌ 花果 ，营养丰 富 兼 有 药理 作 用 ，被 国家 卫 生 部列 为 “ 既是 食 品 又是 药 品” 的农 产 品之 一 ［ 卜 。桑
３１ 紫 外 分 光 光 度 计 日本 日立 公 司 ； １０型 ＰＳ Ｔ Ｈ 一３Ｃ精密数 显酸 度计 司 ；Ｒ Ｅ一５ ２旋转 蒸 发 器 Ｄ —Ｉ ｓ 高速 组织 捣碎机
蛋 白质浓 度 对 桑 椹 籽 蛋 白质 Ｆ Ａ、Ｆ Ｓ的 影 响
蛋白质功能特性
蛋白质功能特性一、蛋白质的水合性质（溶解性、黏度）蛋白质的水合是通过蛋白质的肽键和氨基酸侧链与水分子间的相互作用而实现的。
浓缩蛋白质或离析物在应用时必须水合，食品的流变性质和质构性质也取决于水与其他食品组分，尤其像蛋白质与多糖等大分子的相互作用，水能改变蛋白质的物理化学性质。
此外，蛋白质的许多功能性质，如分散性、湿润性、溶解性、持水能力、凝胶作用、增稠、黏度、凝结、乳化和气泡等，都取决于水—蛋白质的相互作用。
因此了解食品蛋白质的水合性质和复水性质在食品加工中有重要的意义。
1、溶解性蛋白质的溶解度是蛋白质—蛋白质和蛋白质—溶剂相互作用达到平衡的热力学表现形式。
蛋白质的溶解性，可以用水溶性蛋白质（WSP）、水可分散性蛋白质（WDP）、蛋白质分散性指标（PDI）、氮溶解性指标（NSI）来评价。
蛋白质溶解度的大小与pH值、离子强度、温度和蛋白质浓度有关。
蛋白质在水中形成的实际是胶体分散体，作为有机大分子化合物，蛋白质在水中以胶体态存在，并不是真正化学意义上的溶解态，所以蛋白质在水中形成的是胶体分散系，只是习惯上将它称为溶液。
蛋白质的溶解度影响其功能性质，包括增稠、气泡、乳化和凝胶作用，起始溶解性较大的蛋白质，能使蛋白质分子迅速地在体系中扩散，也有利于蛋白质分子向空气或油水界面扩散，有利于蛋白质其他功能性质的提高。
蛋白质溶解度大小在实际应用中非常重要，蛋白质溶解也是判断蛋白质潜在应用价值的一个指标，此外，蛋白质的溶解性也与其在饮料中的应用直接相关。
影响蛋白质溶解性的因素：（1）氨基酸组成与疏水性：疏水相互作用增加了蛋白质与蛋白质之间的相互作用，使其溶解性下降；离子相互作用有利于蛋白质与水的相互作用，增加溶解性。
（2）PH：PH不在PI（等电点）时蛋白质分子溶解性大，PH在等电点时溶解度最小。
（例如β-乳球蛋白、牛血清蛋白在等电点时溶解度高）（3）离子强度：μ<0.5时盐溶效应，增加了蛋白质的溶解性；μ>1时盐析作用，蛋白质和盐离子之间争夺水，其溶解度下降。
蛋白质检测方法
蛋白质检测方法蛋白质是生物体内极为重要的一类生物大分子，它在细胞的结构和功能中发挥着至关重要的作用。
因此，对蛋白质的检测方法显得尤为重要。
本文将介绍几种常见的蛋白质检测方法，希望能够帮助读者更好地了解蛋白质检测的原理和应用。
一、SDS-PAGE。
SDS-PAGE是一种常用的蛋白质检测方法，其全称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。
该方法通过对蛋白质进行变性处理，使其带有负电荷，然后在聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳分离，最终根据蛋白质的大小进行分离。
SDS-PAGE方法简单易行，对蛋白质的分离效果较好，是常用的蛋白质检测方法之一。
二、Western blotting。
Western blotting是一种用于检测特定蛋白质的方法，也称为免疫印迹法。
该方法首先通过SDS-PAGE将蛋白质分离，然后将其转移到膜上，再使用特异性抗体进行检测。
Western blotting方法对蛋白质的特异性检测效果较好，常用于检测蛋白质的表达水平及其修饰状态。
三、ELISA。
ELISA是一种酶联免疫吸附测定法，是一种高灵敏度、高特异性的蛋白质检测方法。
该方法通过将待检测的蛋白质与特异性抗体结合，然后通过酶底物的反应来检测蛋白质的含量。
ELISA方法可以用于检测血清中的蛋白质含量，也可以用于检测细胞中的蛋白质表达水平，具有广泛的应用价值。
四、质谱法。
质谱法是一种基于蛋白质质量的检测方法，包括MALDI-TOF质谱和ESI-MS质谱等。
该方法通过将待检测的蛋白质进行质谱分析，根据蛋白质的质量和荷电量进行检测和鉴定。
质谱法对蛋白质的鉴定效果非常好，能够准确快速地确定蛋白质的分子量和氨基酸序列。
总结。
蛋白质检测方法的选择应根据具体的实验目的和样本特点进行合理选择。
不同的检测方法各有优劣，需要根据实际情况进行选择。
在进行蛋白质检测时，需要注意样本的处理和实验操作的规范性，以确保获得准确可靠的检测结果。
希望本文介绍的蛋白质检测方法能够为读者在科研实践中提供一定的参考价值。
蛋白质的起泡性测定方法
一．蛋白质的起泡性测定方法1.配制l0ml 1%蛋白分散液（pH 8. 05的0.05mo1/L Tris-HC1缓冲液），在室温的条件下，利用高速分散机均质l min，快速转移到25m1的量筒中，，每30min记录一次泡沫体积。
每个样品重复三次，取平均值。
2.采用搅打发泡测定法[29]：将蛋清蛋白溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中，配成3%的蛋清蛋白溶液。
取200ml3%的蛋清蛋白溶液，在A-88组织捣碎匀浆机中，以8000r/min的转速打泡3min,测其泡沫体积，记录为V0，按下式计算起泡度（FAI）： FAI(%)=(V0-200/200) ×100静置30分钟后，测泡沫体积，记录为V1，按下式计算泡沫稳定性（FS）：FS(%)= (V1-200/200 )×1003.参照Hammershoj 等介绍的方法[36]。
首先将全蛋液稀释到5%（v/v），然后取100mL的稀释液，10000r/min速度搅拌1min。
记录均质停止时和停止后30min的泡沫体积与液体体积，起泡力与泡沫稳定性分别用OR与FS表示，计算公式如下：起泡性（OR）=Vf0 /Vli 2-3泡沫稳定性（FS）=Vf30/Vf0 2-4式2-3 与2-4中：Vf0—零时刻时泡沫的体积（mL）；Vli—初始阶段的液体体积（100mL）；Vf30—静置 30min后的泡沫体积。
Hammershoj, M., Qvist, K. B. Importance of hen age and egg storage time for egg albumen foaming [J]. Lebensmittel-Wissenschaft-Technologie, 2001, 34: 118–120.4.二．乳化性及乳化稳定性的测定方法用0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）配制1%的蛋白样品，取1 mL色拉油与3 mL待测溶液于均质机中均质剪切1min，分别于0min和10min时从底部取50 μL用0.1% SDS 25 mL稀释后测OD500乳化活性指数(EA I)=(2.303 × 2 × OD500)/(C × Φ ×L)乳状液稳定指数(ES)=OD500× Δt/ΔOD500式中：EAl ——每克蛋白质的乳化面积，m2/g；Φ——油相所占的分数，在本实验中油相占1/4；C——蛋白质的浓度，1%；L——比色池光径，10mm。
蛋白质的测定方法
蛋白质的测定方法pro的测定方法分为两大类：一类是利用pro的共性，即含氮量，肽链和折射率测定pro含量，另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定pro含量。
但是食品种类很多，食品中pro含量又不同，特别是其他成分，如碳水化合物，脂肪和维生素的干扰成分很多，因此pro的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏，用标准酸液吸收，用标准酸或碱液滴定，由样品中含氮量计算出pro的含量。
由于食品中pro含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法，但它们的基本原理都是一样的。
一凯氏定氮法这种方法是1883年Kjeldahl发明，当时凯氏只使用H2SO4来分解试样，来定量谷物中的pro，他只知用H2SO4分解试样，而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程，所以只使用H2SO4分解试样，需要较长时间，后来由Gunning加入改进，他改进的办法是在消化时加入K2SO4使沸点上升，这样加快分解速度，因为温度由原来硫酸沸点的380上升到400℃，提高了不到67℃所以速度也就加快了，凯氏定氮法至今仍在使用。
我们在检验食品中pro时，往往只限于测定总氮量，然后乘以pro核算等数，得到蛋白质含量，实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物，故称为粗pro。
1 凯氏常量定氮法：不论常量、半微量以及微量定氮法它们的原理都是一样的，首先第一个步骤是消化：（1）消化：样品与硫酸一起加热消化，硫酸使有机物脱水。
并破坏有机物，使有机物中的C、H氧化为CO2和H2O蒸汽逸出，而pro则分解氮，则与硫酸结合成硫酸铵，留在酸性溶液中。
（2）在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解，它与硫酸反应生成硫酸氢钾，可提高反应温度，一般纯硫酸加热沸点330℃，而添加硫酸钾后，温度可达400℃，加速了整个反应过程。
此外，也可以加入硫酸钠，氢化钾盐类来提高沸点。
其理由随着消化过程硫酸的不断地被分解，水分的逸出而使硫酸钾的浓度增大，沸点增加。
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一．蛋白质的起泡性测定方法
1.配制l0ml 1%蛋白分散液（pH 8. 05的0.05mo1/L Tris-HC1缓冲液），在室
温的条件下，利用高速分散机均质l min，快速转移到25m1的量筒中，，每30min记录一次泡沫体积。
每个样品重复三次，取平均值。
2.采用搅打发泡测定法[29]：将蛋清蛋白溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中，配
成3%的蛋清蛋白溶液。
取200ml3%的蛋清蛋白溶液，在A-88组织捣碎匀浆机中，以8000r/min的转速打泡3min,测其泡沫体积，记录为V0，按下式计算起泡度（FAI）： FAI(%)=(V0-200/200) ×100
静置30分钟后，测泡沫体积，记录为V1，按下式计算泡沫稳定性（FS）：FS(%)= (V1-200/200 )×100
3.参照Hammershoj 等介绍的方法[36]。
首先将全蛋液稀释到5%（v/v），然后
取100mL的稀释液，10000r/min速度搅拌1min。
记录均质停止时和停止后30min的泡沫体积与液体体积，起泡力与泡沫稳定性分别用OR与FS表示，计算公式如下：
起泡性（OR）=Vf0 /Vli 2-3
泡沫稳定性（FS）=Vf30/Vf0 2-4
式2-3 与2-4中：Vf0—零时刻时泡沫的体积（mL）；Vli—初始阶段的液体体积（100mL）；Vf30—静置 30min后的泡沫体积。
Hammershoj, M., Qvist, K. B. Importance of hen age and egg storage time for egg albumen foaming [J]. Lebensmittel-Wissenschaft-Technologie, 2001, 34: 118–120.
4.
二．乳化性及乳化稳定性的测定方法
用0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）配制1%的蛋白样品，取1 mL色拉油与3 mL待测溶液于均质机中均质剪切1min，分别于0min和10min时从底部取50 μL用0.1% SDS 25 mL稀释后测OD500
乳化活性指数(EA I)=(2.303 × 2 × OD
500
)/(C × Φ ×L)
乳状液稳定指数(ES)=OD
500× Δt/ΔOD
500
式中：
EAl ——每克蛋白质的乳化面积，m2/g；
Φ——油相所占的分数，在本实验中油相占1/4；
C——蛋白质的浓度，1%；
L——比色池光径，10mm。
各测定过程除特别说明外，均在室温下进行，重复3次，以平均值作为试验结果。
三．溶解度的测定
复配蛋液的蛋白质含量及溶解度采用 Folin-酚的方法进行测定，并以牛血清蛋白为标准蛋白制作标准曲线。
复配蛋液溶解在 0.5 mol/L的 NaCl 溶液中，浓度至 5 mg/mL，测定其中的总蛋白质含量；另取20 mL相同浓度的水溶液，于10,000×g，10 ℃下离心15 min，取上清，测定蛋白质含量[32, 33] 。
取1 mL 上述待测样品，加入 1 mol/L的氢氧化钠2 mL，混匀，放置 15 min；然后加入2 mL与超纯水 1:1 稀释的 Folin-酚试剂，并立刻混匀，反应显色45 min，以超纯水为空白，测定 560 nm 处的吸光值，每个样品测
三次平行取平均值。
溶解度计算公式如下：
蛋白质溶解度=上清蛋白质含量（mg）/总蛋白质含量（mg）×100%。