大肠杆菌
微生物大肠杆菌实验报告
一、实验目的1. 了解大肠杆菌的生物学特性。
2. 掌握大肠杆菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 掌握大肠杆菌的培养和计数方法。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是肠杆菌科的一种细菌，广泛存在于人体肠道中。
本实验通过分离、纯化和鉴定大肠杆菌，了解其生物学特性，并掌握其培养和计数方法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜粪便、营养琼脂平板、营养肉汤、无菌生理盐水、无菌棉签、无菌试管、无菌培养皿、无菌移液器、酒精灯、显微镜等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台等。
四、实验方法1. 大肠杆菌的分离（1）取新鲜粪便样品，用无菌生理盐水进行稀释。
（2）取适量稀释液，用无菌棉签涂布于营养琼脂平板上。
（3）将平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
2. 大肠杆菌的纯化（1）观察平板上的菌落，挑选单菌落，用无菌移液器移至新的营养琼脂平板上。
（2）将平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
3. 大肠杆菌的鉴定（1）观察纯化后的菌落，记录菌落特征，如大小、形状、颜色等。
（2）将纯化后的菌株接种于营养肉汤中，37℃培养24小时。
（3）取培养液，用显微镜观察细菌形态，并进行革兰氏染色。
（4）对培养液进行生化试验，如乳糖发酵试验、吲哚试验等。
4. 大肠杆菌的培养与计数（1）将纯化后的菌株接种于营养肉汤中，37℃培养24小时。
（2）用无菌移液器取适量培养液，进行系列稀释。
（3）取稀释液，涂布于营养琼脂平板上。
（4）将平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
（5）观察平板上的菌落，记录菌落数，并计算大肠杆菌的浓度。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌的分离：在平板上观察到圆形、光滑、白色、半透明的菌落，说明已分离出大肠杆菌。
2. 大肠杆菌的纯化：经过纯化后，菌落特征与分离菌落相同，证明已得到纯化的大肠杆菌。
3. 大肠杆菌的鉴定：通过显微镜观察，发现细菌为革兰氏阴性短杆菌，生化试验结果显示该菌株能发酵乳糖，产生吲哚，表明已鉴定为大肠杆菌。
大肠杆菌
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• 培养特性 • 由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、 葡萄糖的普通培养基上生长良好。 • 最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能 生长，生长温度范围为15-46℃。 • 在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态： • （1）光滑型： 菌落边缘整齐，表面有光泽、 湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。 • （2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐， 易在生理盐水中自凝。 • （3）粘液型：常为含有荚膜的菌株 • 此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生 长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低 于6.0或高于8.0则生长缓慢
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• 生化试验： 将斜面培养物移种到下列培养基中进行 生化试验。 1 色氨酸肉汤：在36±1℃培养24±2h 后,加Kovacs氏试剂0.2～0.3mL,上层出现红色 为靛基质阳性反应
靛基质试验（Indole）原理及照片
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2 MR-VP培养基：在36±1℃培养 48±2h。以无菌操作移取培养物1 mL至 13mm×100mm试管中,加5％α-萘酚乙醇 溶液0.6mL,40％氢氧化钾溶液0.2mL和少 许肌酸结晶,振摇试管后静置2h,如出现伊 红色,为VP试验阳性。 将MR-VP培养物的剩余部分再培养 48h滴加5 滴甲基红溶液。如培养物变红 色,为甲基红试验阳性,若变黄色则为阴性 反应
• 肠杆菌科有一些共同特性，比如都是革兰氏 阴性小杆菌，好氧或兼性厌氧，没有芽孢 • 大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有 动力。 • 有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖 类包膜，革兰氏阴性杆菌。
• MOTILITY TEST • 1. Pseudomonas aeruginosa（铜绿假单胞菌）： Motile 2. Staphylococcus aureus：Non-motile 3. Bacillus subtilis：Motile
大肠杆菌
检测方法
食品中的大肠杆菌进行快速准确的检测已成为了人们经常**的问题。下面阐述食品中的大肠杆菌检测的方法 及分析 。
这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养24h。然后 对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方 法，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等 。
目前国际公认的分类，主要有六个种类的大肠杆菌，即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌 （EPEC）、肠道产毒素性的大肠杆菌（ETEC）、肠道侵袭性的大肠杆菌（EIEC）、肠道出血性的大肠杆菌 （EHEC）、肠集聚性的大肠杆菌（EAEC）以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌 （ESIES），另外，还有能够致使尿道感染的尿道致病性的大肠杆菌（UPEC），以及最新命名的肠道集聚性的黏 附大肠杆菌（EAggEC） 。
用无菌吸管吸取稀释度样品1mL，该样品与乳糖胆盐发酵类似，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于 45℃下的CDLJJD显色培养基中10mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶 液凝固以后，加入5mL左右 ，然后快速摇晃培养基，使其可以均匀覆盖平板表面，等其凝固以后，翻转培养基， 在温度37℃中培养24h左右，然后观察其形态，颜色等变化。
大肠杆菌 国家标准
大肠杆菌国家标准
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，属于肠道菌群中
的一种重要成员。
它在人和动物的肠道中普遍存在，是一种常见的肠道微生物。
大肠杆菌在生物学、医学和食品工业中具有重要的意义，因此各国都对大肠杆菌制定了相应的国家标准，以保障公共卫生和食品安全。
国家标准对大肠杆菌的监测和检测进行了详细规定，主要包括采样方法、检测
方法、限量标准等内容。
在食品工业中，大肠杆菌是一种重要的指标菌，其数量的多少直接反映了食品的卫生状况。
因此，国家标准对食品中大肠杆菌的限量标准进行了严格规定，以保障食品的安全卫生。
在医学领域，大肠杆菌也是一种重要的病原菌。
它能够引起多种感染性疾病，
如泌尿系统感染、肠道感染等。
因此，国家标准对医疗机构和实验室中的大肠杆菌的监测和检测也进行了详细规定，以防止病原菌的传播和感染。
除了食品和医学领域，大肠杆菌在生物学研究中也具有重要意义。
它是一种常
用的实验室模式菌种，被广泛应用于分子生物学、遗传学和生物工程等领域。
因此，国家标准对实验室中的大肠杆菌的保存、传递和使用也进行了规范，以保证实验室操作的安全和准确性。
总的来说，大肠杆菌国家标准的制定和执行，对于保障公共卫生和食品安全具
有重要意义。
通过对大肠杆菌的监测和检测，可以及时发现和控制病原菌的传播，保障人民群众的健康。
同时，国家标准的执行也可以规范实验室操作，保证科研工作的准确性和安全性。
因此，各界应严格遵守大肠杆菌国家标准，共同维护公共卫生和食品安全。
鉴别大肠杆菌的方法
鉴别大肠杆菌的方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌是正常肠道菌群的一部分，但有些菌株可以引起食物中毒和感染。
因此，准确鉴别大肠杆菌的方法对食品安全和公共卫生至关重要。
在鉴别大肠杆菌时，通常需要从样品中分离出细菌，并进行初步的鉴定。
下面是一些常用的鉴别大肠杆菌的方法：1. 培养基选择：大肠杆菌可以在普通富营养的培养基上生长，如营养琼脂和TSA 寒天琼脂。
与其他致病菌不同的是，大肠杆菌具有乳糖发酵能力，因此可以使用含有乳糖的培养基如EOH（大肠杆菌溶血素乳糖琼脂）、MacConkey琼脂和XLD （硫代硫酸亚铁氧化琼脂）来选择性培养大肠杆菌。
2. 形态学特征：在琼脂平板上培养后，大肠杆菌形成小型、粉红色的圆形菌落。
在显微镜下观察，大肠杆菌呈革兰阴性，为杆状细菌，长度约为2微米，直径约为1微米。
此外，大肠杆菌具有移动性，在液体培养基中呈现出活跃的运动。
3. 生化特性：通过测试大肠杆菌的生化特性，可以进一步鉴别该菌株。
常见的生化试验包括蔗糖发酵试验、气体发酵试验、硫化试验和尿素酶试验等。
大肠杆菌通常可以产生气体和酸，而不产生硫化物，同时具有尿素酶活性。
4. 分子生物学方法：PCR（聚合酶链式反应）和基因测序技术能够快速、准确地鉴定大肠杆菌。
通过特定引物放大大肠杆菌特有的基因片段，再进行测序比对，可以确定分离菌株是否为大肠杆菌。
5. 抗生素敏感性测试：鉴别大肠杆菌的方法还可以包括抗生素敏感性测试。
通过对细菌进行抗生素敏感性的测试，可以确定菌株对不同抗生素的敏感程度。
大肠杆菌通常对多种抗生素敏感，但也能产生耐药株。
通过该方法，可以观察和评估细菌感染的治疗方法。
综上所述，鉴别大肠杆菌的方法包括培养基选择、形态学特征观察、生化特性测试、分子生物学方法以及抗生素敏感性测试。
这些方法可以相互配合，提供准确和可靠的鉴别结果，对于食品安全和公共卫生具有重要意义。
大肠杆菌检测原理
大肠杆菌检测原理
大肠杆菌检测是一种用于确定食品、水源或环境中是否存在大肠杆菌的常用方法。
大肠杆菌是一种肠道菌群常见的细菌，其存在通常表明可能存在粪便污染或其他健康危害的风险。
大肠杆菌检测主要基于以下原理：
1. 培养方法：采集样品后，将其接种到含有适宜营养物质的培养基上，利用大肠杆菌特有的形态、生理生化特性以及产生的气体等特点进行初步鉴定。
2. 确认方法：通过进一步的生化试验，如颜色反应、形状、气体产生情况等，进一步确认被培养出的菌落是否为大肠杆菌。
3. 分子生物学方法：利用PCR技术或核酸杂交等方法，针对大肠杆菌特异的基因序列进行扩增或检测。
4. 免疫学方法：利用特异性抗原或抗体与大肠杆菌产生的免疫反应，进行检测和确认。
这些方法都可以用于大肠杆菌的初步筛查和确认，根据不同的检测需求和样品特性选择合适的方法进行检测。
大肠杆菌检测的结果可以用于评估食品、水源、环境等是否存在粪便污染，从而采取相应的控制和预防措施。
大肠杆菌
大肠杆菌（Escherichia coil）是我们了解得最清楚的原核生物，它为分子生物学的发展做出了巨大的贡献。
本文简要介绍大肠杆菌的细胞壁、细胞膜、细胞核、质粒、核糖体、鞭毛等结构与功能以及大肠杆菌的产能方式和生化反应。
大肠杆菌（Escherichia coli）在自然界分布很广，是人和动物肠道中的正常菌群。
正常情况下一般不致病，但它是条件致病菌。
大肠杆菌是单细胞原核生物，具有原核生物的主要特征：细胞核为拟核，无核膜，细胞质中缺乏象高等动植物细胞中的线粒体、叶绿体等具膜结构的细胞器，核糖体为70S，以二分分裂繁殖。
大肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。
其大小为：0.5～0.8μm×1.0～3.0μm。
周身鞭毛，能运动，具致育因子的菌株还具性菌毛。
1．形态结构1.1 细胞壁位于大肠杆菌的最外层，厚约11um，分为两层，即外膜和肽聚糖层。
外膜是大肠杆菌细胞壁的主要成分，占细胞壁于重的80％，厚约8nm，位于肽聚糖层的外侧，主要由磷脂、蛋白质和脂多糖组成。
脂多糖是革兰氏阴性细菌的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有成分，主要和其抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关。
肽聚糖层由1～2层网状的肽聚糖组成，占细胞壁干重的10％，厚约2～3nm，是细菌等原核生物所特有的成分。
大肠杆菌的肽聚糖由聚糖链、短肽和肽桥三部分组成。
聚糖链由N-乙酸葡糖胺和N-乙酚胞壁酸分子通过β-1，4糖苷键连接而成，短肽由L-丙氨酸→D-谷氨酸→内消旋二氨基庚二酸→D-丙氨酸组成，并由L-丙氨酸与胞壁酸相连。
一条聚糖链短肽的D-丙氨酸与另一条聚糖链短肽的内消旋二氨基庚二酸直接形成肽键（肽桥），从而使肽聚糖形成网状的整体结构。
由脂蛋白将外膜和肽聚糖层连接起来，从而使大肠杆菌的细胞壁形成一个整体结构。
1.2 细胞膜大肠杆菌细胞膜的结构和其它生物细胞膜的结构相似。
但其细胞膜中蛋白质的含量高且种类多。
其细胞膜具选择透性，从而可控制营养物质进出细胞。
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点
大肠杆菌鉴别培养基及菌落特点大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌群中的细菌。
它是一种革兰氏阴性、非芽孢杆菌，可以通过合适的培养基进行鉴别和分离。
本文将介绍大肠杆菌的鉴别培养基及菌落特点，并对其进行详细解释。
一、鉴别培养基1. 麦康凯氏培养基（MacConkey agar）：麦康凯氏培养基是一种选择性和区分性培养基，通常用于分离和鉴别肠道革兰氏阴性菌。
它含有麦康凯氏紫（crystal violet）和牛胆盐（bile salts）等抑制革兰氏阳性菌生长的成分，同时含有乳糖和中性红等成分，能够区分能够利用乳糖的细菌和不能利用乳糖的细菌。
大肠杆菌在麦康凯氏培养基上生长良好，形成红色或粉红色的菌落，说明它可以利用乳糖产生酸性代谢产物。
2. EMB培养基（eosin methylene blue agar）：EMB培养基是一种选择性和区分性培养基，常用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性菌。
它含有嗜酸染料亚甲蓝（methylene blue）和伊美司粉（eosin Y）等成分，能够抑制革兰氏阳性菌的生长。
大肠杆菌在EMB培养基上形成绿色或金属光泽的菌落，说明它可以产生酸性代谢产物。
3. XLD培养基（xylose lysine deoxycholate agar）：XLD培养基是一种选择性和区分性培养基，主要用于分离和鉴定肠道沙门氏菌属（Salmonella）和伤寒沙门氏菌（Shigella）。
大肠杆菌在XLD培养基上形成黄色的菌落，与其他肠道致病菌如沙门氏菌和伤寒沙门氏菌形成明显的区别。
二、菌落特点大肠杆菌在以上鉴别培养基上的菌落特点如下：1. 麦康凯氏培养基上的大肠杆菌菌落为红色或粉红色，直径约为2-3毫米，呈圆形或不规则形状。
2. EMB培养基上的大肠杆菌菌落为绿色或金属光泽的菌落，直径约为2-3毫米，边缘清晰。
3. XLD培养基上的大肠杆菌菌落为黄色的菌落，直径约为2-3毫米，表面平整。
大肠杆菌
大肠杆菌学名:Escherichiacoli(T.Escherich1885)大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，学名称作“大肠埃希菌”，属于肠道杆菌大类中的一种，主要寄生于大肠内，约占肠道菌中的1%，是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。
大肠杆菌结构简单，繁殖迅速，正常栖居条件下大多数大肠杆菌不致病，还能竞争性抵御致病菌的进攻，还能合成维生素B和K2，与人体是互利共生的关系；但在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
因此，大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌。
在水和食品中检出，可认大肠菌群数常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。
特点大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。
主要生活在大肠内。
1、大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
2、大肠杆菌的代谢类型是异养兼性厌氧型。
3、人体与大肠杆菌的关系：在不致病的情况下（正常状况下），可认为是互利共生（一般高中阶段认为是这种关系）；在致病的情况下，可认为是寄生。
4、培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
5、大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。
目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。
6、大肠杆菌在生态系统中的地位，假如它生活在大肠内，属于消费者，假如生活在体外则属于分解者。
7、它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子。
同时可以有多个环状质粒DNA。
8、大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子，长度约为4 700 000个碱基对，在DNA分子上分布着大约4 400个基因，每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。
大肠杆菌一般培养方法
大肠杆菌一般培养方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，也是生物学研究中最常用的模式菌株之一、大肠杆菌具有广泛的分布范围，可以在许多环境中生存和繁殖。
本文将介绍大肠杆菌的一般培养方法。
一、培养基的制备大肠杆菌的培养基通常包括两个主要组分：固体培养基和液体培养基。
固体培养基用于菌落计数和细菌分离，并可用于培养单个菌落。
液体培养基则可用于扩大菌种和进行大规模的培养。
1.固体培养基的制备最常用的固体培养基为琼脂培养基。
制备过程如下：（1）称取所需琼脂，加入适量的蒸馏水中，进行均匀搅拌。
（2）加热至100摄氏度，溶解琼脂。
（3）煮沸1-2分钟，消毒琼脂。
（4）冷却至约50摄氏度。
（5）加入所需的培养基成分，如营养物质和抗生素等。
（6）倒入培养皿中，待凝固后即可使用。
2.液体培养基的制备最常用的液体培养基包括LB培养基（Lysogeny Broth）和TB培养基（Terrific Broth）。
制备过程如下：（1）称取所需培养基成分，加入适量蒸馏水中。
（2）加入琼脂和洗涤剂等成分，以调整液体的黏度和表面张力。
（3）调整pH值。
（4）加热并搅拌溶解，待溶解后冷却。
（5）过滤培养基，以去除不溶性杂质。
（6）分装到培养瓶中。
二、大肠杆菌的预培养将保存的大肠杆菌菌种(如冻存菌)挑取一高洁净的培养皿上贴菌，通常可采用菌板上交叉涂布法，用三角稀菌棒反复涂抹菌落。
之后用无菌瓷珠轻压菌落，使其均匀分散于培养皿上。
贴菌后将培养皿倒置，避免水分凝结在盖子上。
培养皿翻转的目的是避免水珠滴入培养基内，影响气体交换。
然后将培养皿放入培养箱中，37℃保温，24小时后进行预培养。
三、大肠杆菌的正式培养预培养后，取适量的大肠杆菌菌落液，加入培养基中，并进行摇床培养。
有时候，还需要在培养基中添加相应的抗生素，以筛选具有特定基因或表现的菌株。
培养条件一般为37摄氏度、摇床转速为200-250转/分钟。
培养时间根据需要和实验目的而定。
大肠杆菌的研究与应用
大肠杆菌的研究与应用大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，具有重要的研究和应用价值。
以下将从研究和应用两个方面进行详细介绍。
一、研究价值1.遗传学研究：大肠杆菌是遗传学研究的重要模式生物之一，其基因组结构简单，易于研究。
人们通过对大肠杆菌的研究，揭示了大肠杆菌基因表达、修复及重组、转座子等一系列重要遗传过程的机制，为遗传学的发展做出了重要贡献。
2.分子生物学研究：大肠杆菌是分子生物学研究中最常用的宿主细胞，广泛应用于基因工程、克隆、蛋白质表达等方面。
大肠杆菌的分子机制研究，为理解生命现象提供了重要的理论基础，并推动了基因工程与生物技术的发展。
3.生物医学研究：大肠杆菌作为人体肠道中的共生菌，常常与人体发生作用。
通过研究大肠杆菌如何与人体免疫系统相互作用，可以深入了解肠道菌群的平衡与失衡对人体免疫系统的影响，为疾病的预防与治疗提供新的思路和方法。
二、应用价值1.生物工程与制药：利用大肠杆菌作为工程菌株，可以通过基因工程手段大规模制备蛋白质、抗生素等生物制品。
大肠杆菌表达系统被广泛应用于医药、食品、农业等领域，成为重要的工业生产菌种之一2.污水处理与废物转化：大肠杆菌具有强大的降解能力，可以分解并处理污水中的有机物和废物，达到净化环境的目的。
利用大肠杆菌进行废物转化，可以将废物转化为有机肥料或能量，减少资源浪费和环境污染。
3.疾病诊断：大肠杆菌在疾病诊断方面也具有重要应用价值。
通过检测大肠杆菌的存在及其代谢产物，可以快速判断水质、食品和生物样本的卫生状况，预防与控制疾病的传播。
4.基因治疗：近年来，大肠杆菌作为基因治疗的载体，被广泛用于基因修复、基因敲除以及基因干预等方面。
大肠杆菌的安全性和高效性为基因治疗的发展提供了重要支持。
总结起来，大肠杆菌作为一种常见的肠道细菌，在研究和应用领域都具有重要的价值。
其在遗传学、分子生物学和生物医学等研究中扮演着重要角色，同时在生物工程、环境治理和医疗诊断等应用领域也有广泛的应用前景。
大肠杆菌生存条件
大肠杆菌生存条件
大肠杆菌是一种能够在不同环境中生存的细菌，其生存条件主要包括以下几个方面：
1. 温度：大肠杆菌能够在较宽的温度范围内生存，最适生长温度一般在37°C左右，但能够在10°C至50°C之间生长。
2. pH 值：大肠杆菌适宜的 pH 值范围为6.0至8.0之间，也能
够在酸性和碱性条件下生存，但适应能力相对较弱。
3. 氧气浓度：大肠杆菌属于兼性厌氧菌，适应在氧气存在的条件下生长，但也能够在缺氧或微氧环境中存活。
4. 湿度：大肠杆菌对湿度要求不高，能够在相对湿度较低的环境下生存。
5. 营养物质：大肠杆菌是一种兼性厌氧菌，能够利用多种碳源和氮源进行生长，如葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖等。
此外，还需要一些微量元素如铁、磷等。
需要注意的是，尽管大肠杆菌在自然环境中有一定的生存能力，但在室内环境中（如食品加工、医疗设施等）仍然存在潜在的感染风险。
为了防止感染和传播，需要进行适当的卫生措施，如正确的食品储存、烹饪处理和消毒等。
大肠杆菌的保存与培养
大肠杆菌的保存与培养大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌，在许多实验室中用作模型生物。
为了长期保存和使用大肠杆菌，需要进行保存和培养。
本文旨在介绍大肠杆菌的保存和培养方法。
大肠杆菌的保存方法冻存法冻存法是保存大肠杆菌最常用的方法之一。
它使用冻干法或液氮法将菌株保存在低温下，以避免菌株变异或污染。
冻干法冻干法是将菌株在液氮下冷冻后进行干燥。
这种方法需要使用冻干器。
冻干器通过减压将菌株冻干，并将其保存在低温下。
液氮法液氮法是将菌株在液氮中冷冻后进行保存。
菌株存储在液氮罐中，使用时取出并解冻。
非冷冻法非冷冻法也可以用于保存大肠杆菌，例如保存在琼脂板上或制备干粉剂。
不过，这些方法缺乏长期保存和使用的稳定性，更适合短期保存。
鉴定编码大肠杆菌可以根据不同的基因、菌株和形态进行分类。
为了便于记忆和识别，每个菌株都有一个独特的编码。
这些编码可以在数据库中查找，以便进行鉴定和分类。
大肠杆菌的培养方法培养基培养基是生长大肠杆菌的基本食物。
常用的培养基包括肉汤培养基、三蔗糖培养基和Luria Broth培养基。
这些培养基提供大量的营养物质和水分，以支持细菌的生长和繁殖。
培养条件大肠杆菌的生长需要适当的环境条件。
最适宜的温度为37°C，pH值为7.0到7.5。
此外，大肠杆菌需要氧气和适当的紫外线照射。
分离和纯化分离和纯化是从混合菌群中收集大肠杆菌的过程。
这些步骤有助于在单独的培养皿中产生纯种大肠杆菌，并减少混杂菌群带来的影响。
分离大肠杆菌的常用方法是麻醉稀释法，也称为涂片法。
涂片法将混合菌群分散到琼脂板的表面上，并等待菌落生长和扩散。
选出大肠杆菌的单一菌群后，可以将其移植到另一培养皿中进行纯化。
大肠杆菌是实验室常见的菌株之一。
为了存储和使用大肠杆菌，需要使用冻存法或其他方法保存，使用培养基提供必要的营养物质支持生长，根据适宜的生长条件进行培养，加强分离和纯化步骤可以提高培养质量。
这些步骤可以帮助实验人员快速高效地进行大肠杆菌的保存和培养。
大肠杆菌检测标准
大肠杆菌检测标准大肠杆菌检测标准大肠杆菌是一种普遍存在于自然界中的细菌，也是人类和动物肠道中必不可少的菌群。
但是，大肠杆菌也可能是食品中的一种危害性细菌，因此对其进行检测非常重要。
本文将介绍大肠杆菌检测的相关标准。
1.检测方法大肠杆菌检测一般采用微生物学方法，主要包括培养法、快速培养法和分子生物学方法。
培养法是传统的检测方法，但需要3-5天才能得到结果。
快速培养法则能够在24小时内获得结果，但价格相对较贵。
分子生物学方法则比较新颖，具有检测速度快、准确性高的优点。
2.检测标准大肠杆菌检测标准通常由国家卫生部门或食品药品监督管理部门制定并发布。
在中国，食品中大肠杆菌的检测标准主要包括以下两个方面。
第一，肉制品中大肠杆菌的检测标准。
国家标准规定，每克肉制品中大肠杆菌的限值应为10000CFU/g，也就是每克肉制品中不能含有超过10000个大肠杆菌单元。
而在欧盟及一些国家，肉制品中大肠杆菌的限值为1000CFU/g，远低于中国的标准。
第二，水产品中大肠杆菌的检测标准。
国家标准规定，每100毫升水产品中大肠杆菌的限值应为100CFU/100ml，也就是每100毫升水产品中不能含有超过100个大肠杆菌单元。
在欧盟及美国等地，水产品中大肠杆菌的限值为10CFU/100ml，远低于中国的标准。
3.影响因素影响大肠杆菌检测结果的因素很多，其中包括环境、采集方法、检测方法等。
环境因素主要包括气温、湿度、光照等，采集方法包括样本采集时的肠道附着物、样本保存条件等。
检测方法的选择也可以影响结果，例如培养方法、快速培养法及分子生物学方法等。
总之，大肠杆菌是一种常见的细菌，对其进行检测对于食品药品安全具有重要的作用。
在检测时需要遵循相关的标准和方法，并注意各种影响因素。
只有保证检测的准确性和可靠性，才能确保消费者的健康和食品安全。
大肠杆菌
3．人体与大肠杆菌的关系：在不致病的情况下（正常状况下），可认为是互利共生（一般高中阶段认为是这种关系）；在致病的情况下，可认为是寄生。
4．在培养基培养时无需添加生长因子，向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。
5．大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。
6．大肠杆菌在生态系统中的地位，假如它生活在大肠内，属于消费者，假如生活在体外则属于分解者。
7．它的基因组DNA为拟核中的一个环状分子。同时可以有多个环状质粒DNA。
8.大肠杆菌细胞的拟核有1个DNA分子，长度约为4 700 000个碱基对，在DNA分子上分布着大约4 400个基因，每个基因的平均长度约为1 000个碱基对。
大肠杆菌
简介
大肠杆菌是人和动物肠道中最著名的一种细菌，主要寄生于大肠内
主要特点
大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身Leabharlann 毛，能运动，无芽孢。主要生活在大肠内。
1、大肠杆菌是细菌，属于原核生物；具有由肽聚糖组成的细胞壁，只含有核糖体简单的细胞器，没有细胞核有拟核；细胞质中的质粒常用作基因工程中的运载体。
大肠杆菌的基因型
大肠杆菌基因型的基本概念
野生大肠杆菌（E.coli）的基因组DNA中有470万个碱基对（bp），内含4288个基因。E.coli基因组中还包含有许多插入序列，如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组分的片段，这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的，由此表明了基因组具有可塑性。利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造，使其中的某些基因发生突变或者缺失，从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化，这种观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型（Phenotype），把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型（Genotype）。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。这些不同基因型特性的菌株在基因工程的研究和生产中具有广泛的应用价值。
大肠杆菌在水中的菌落形态特征
大肠杆菌在水中的菌落形态特征
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种广泛存在于自然界中的
细菌，它在水中的菌落形态特征对于水质监测和环境卫生具有重要
意义。
大肠杆菌是一种革兰氏阴性杆菌，其在水中的菌落形态特征
通常表现为以下几个方面：
1. 形态，大肠杆菌的菌落通常呈现圆形或不规则形状，表面光滑，边缘整齐。
菌落的大小一般在1-3mm左右。
2. 色泽，大肠杆菌的菌落颜色通常为乳白色或淡粉红色，有时
也可能呈现淡黄色。
3. 透明度，大肠杆菌的菌落透明度较高，通常呈半透明状态。
4. 质地，大肠杆菌的菌落质地较为湿润，具有一定的粘稠度。
5. 气味，在培养基上生长的大肠杆菌菌落通常具有一定的气味，有时可能会散发出一种特殊的臭鸡蛋味。
对于水质监测来说，通过观察大肠杆菌在水样中的菌落形态特
征，可以初步判断水质是否受到了污染。
如果水样中存在大肠杆菌，那么在培养基上将会观察到符合上述特征的菌落。
因此，对大肠杆
菌的菌落形态特征进行观察和分析，有助于及时发现水质问题，保
障人们的饮用水安全。
总之，大肠杆菌在水中的菌落形态特征是水质监测中的重要指
标之一，通过对其形态特征的观察和分析，可以及时发现水质问题，保障环境卫生和公共健康。
大肠杆菌是什么病毒吗
大肠杆菌是什么病毒吗
一、大肠杆菌是什么病毒吗1. 大肠杆菌是什么病毒吗2. 感染大肠杆菌的症状 3. 大肠杆菌如何被杀死二、大肠杆菌的传播途径三、大肠杆菌如何预防
大肠杆菌是什么病毒吗
1、大肠杆菌是什么病毒吗大肠杆菌不是病毒,是肠道细菌。
大肠杆菌是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3。
国家规定,每毫升饮用水中的菌落总数小于100,每100毫升水中不得检出总大肠菌群。
大肠杆菌为埃希氏菌属代表菌。
一般多不致病,为人和动物肠道中的常居菌,在一定条件下可引起肠道外感染。
大肠杆菌潜伏期通常为3至4日,但亦会长达9日。
某些血清型菌株的致病性强,引起腹泻,统称致病性大肠杆菌。
该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,在自然界的水中可存活数周至数月,在温度较低的粪便中存活更久。
2、感染大肠杆菌的症状人体感染大肠杆菌后,会引起肠道外感染,以泌尿系感染为主,如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。
也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。
婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者,大肠杆菌可侵入血流,引起败血症。
某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻,同时伴有发热、呕吐等表现。
3、大肠杆菌如何被杀死大肠杆菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。
在自然界的水中可存活数周至数月,在温度较低的粪便中存活更久。
夏季是各种肠道疾病的高发期,要多加小心。
不要食用生冷变质食品,蔬菜要洗净,剩饭菜要充分加热,饭前便后要洗手。
烹饪时,生食及熟食应。
《大肠杆菌》课件
THANKS
感谢观看
。
食物中毒通常发生在食用被污染 的肉类、奶制品、蔬菜等食品后 ，因此食品生产和加工过程中的
卫生控制至关重要。
抗生素抗性与超级细菌
抗生素是治疗细菌感染的重要药物，但长期使用抗生素会导致细菌产生抗药性。
大肠杆菌等细菌在长期接触抗生素的过程中，会逐渐适应并抵抗抗生素的作用，形 成超级细菌。
超级细菌对多种抗生素具有抗药性，给治疗带来了极大的困难，也对全球公共卫生 安全构成了严重威胁。
致病性或提高其生物合成能力，为工业生产和医疗应入探究大肠杆菌的致病机制，为开发更有效的抗 菌药物和治疗方法提供理论支持。
加强跨学科合作
加强生物学、化学、物理学等领域的跨学科合作，利用新 技术和新方法，推动大肠杆菌研究的创新发展。
提高应用价值
将大肠杆菌的研究成果应用于实际生产和医疗实践中，提 高其应用价值和社会效益。同时，需要关注伦理和安全问 题，确保研究工作的合规性和可持续性。
致病性大肠杆菌的传播途径多样，包 括动物-人传播、人-人传播和食物-人 传播。
这些致病性大肠杆菌通过食物、水或 接触污染表面进入人体，导致腹泻、 呕吐、腹痛等症状，严重时甚至会导 致休克和死亡。
食物中毒与感染
食物中毒是指食用了被致病性大 肠杆菌污染的食物而引起的急性
中毒性疾病。
感染后可能出现恶心、呕吐、腹 痛、腹泻、发热等症状，严重时 可导致脱水、电解质紊乱和休克
05
大肠杆菌的研究进展
新技术与新方法
基因组学技术
利用新一代测序技术，对大肠杆 菌基因组进行全面解析，发现新 的基因和基因变异，为研究其生 物学特性和致病机制提供基础。
蛋白质组学技术
通过蛋白质组学方法，研究大肠杆 菌的蛋白质表达和功能，揭示其在 不同环境下的适应机制和调控机制 。
大肠杆菌形态特征
大肠杆菌形态特征大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，是人体和动物肠道中最主要的有益菌之一、它具有以下的形态特征：1.形态特征大肠杆菌呈杆状，通常为直杆状或稍微弯曲。
它的长度约为1.5至6微米，直径约为0.5微米。
细菌细胞之间通常呈单独分离的独立状态。
2.色素特征大肠杆菌没有颜色，通常呈无色透明状态。
然而，一些毒力菌株可能会产生特定的荧光色素，并具有特定的荧光染色。
3.附着结构大肠杆菌具有许多附着结构，包括鞭毛、菌毛和纤毛。
这些结构通过细菌细胞表面的附着蛋白质发挥作用。
鞭毛是长丝状的结构，在细菌移动和感受环境刺激方面起着重要作用。
菌毛比鞭毛短，呈柱状，用于细菌之间的附着和交流。
纤毛也是附着细菌的结构，通常细菌细胞表面具有几百到几千个纤毛。
4.胞外多聚物（胞外多糖）大肠杆菌的表面覆盖有多种胞外多聚物，包括多糖。
这些多糖在保护菌体免受环境的侵害以及与其他细菌或宿主细胞进行交互方面起着重要作用。
5.壁结构大肠杆菌有复杂的细胞壁结构，包括内层质膜、纤维素外层膜和外层膜。
内层质膜起到维持细菌细胞形状和膜蛋白质定位的作用。
纤维素外层膜是由纤维素组成的蛋白质复合物，具有保护细菌免受宿主免疫系统攻击的作用。
外层膜是含脂质的双层结构，与环境中的物质交换起重要作用。
总之，大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，它具有直杆状的形态、无色透明的外观和多种附着结构。
它的表面覆盖有胞外多聚物，并具有复杂的细胞壁结构。
这些形态特征是大肠杆菌在生物学功能和与环境相互作用中的重要基础。
大肠杆菌的检测及原理
大肠杆菌的检测及原理大肠杆菌是一种常见的肠道菌群中的细菌，通常是无害的，但某些毒株可以引起食物中毒和其他健康问题。
因此，检测大肠杆菌在食品和水源中的存在非常重要，以确保公众的健康和安全。
大肠杆菌检测通常通过检测这种细菌的DNA或蛋白质来完成。
这些检测方法可以分为质量检测和定量检测两种方法。
1. 质量检测质量检测是检测大肠杆菌是否存在的一种简单方法。
常用的方法有：(1) 培养法培养法是一种直接检测大肠杆菌存在的方法。
在这个方法中，食品或水样本直接加入含有特定营养成分和染色剂的富营养基质中进行培养。
如果存在大肠杆菌，则可以观察到菌落，并且这些菌落通常呈现出淡粉红色或金属绿色。
(2) 葡萄糖发酵试验这是一种利用大肠杆菌对糖的发酵反应来检测其存在的方法。
在这种测试中，食品或水样本被添加到含有葡萄糖和试剂的培养基中，并在一段时间后观察产生的气体或酸度的变化。
大肠杆菌通常能够迅速发酵葡萄糖，所以如果存在大肠杆菌，则会导致培养基的酸度降低和气泡的产生。
(3) 快速测试条这是一种利用特殊的测试条来检测大肠杆菌存在的方法。
在这种测试中，食品或水样本被加入到测试条上，并观察测试条变色。
这种测试条通常采用专有的化学反应，可以针对大肠杆菌的生长特性进行设计。
(1)酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种高灵敏度、高特异性的定量检测方法。
这种方法是利用特异性抗体与大肠杆菌中的特定蛋白质结合，再结合酶进行检测，检测结果会显示大肠杆菌的数量。
(2)PCR检测法PCR检测法是一种用来扩增DNA段的方法，可以检测大肠杆菌的存在。
PCR检测法利用针对大肠杆菌特定的DNA序列的反应，通过扩增这些特定的DNA段，来检测大肠杆菌在食品和水源样本中的存在。
总的来说，检测大肠杆菌的存在非常重要，因为它可以导致许多健康问题。
以上列举的方法都有自己的优缺点，需要根据实际情况选择合适的方法进行检测。
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大肠杆菌染色体DNA的复制
大肠杆菌染色体DNA的复制是从染色体的一 个特定位置，即复制起始区（oriC）开始的 双向复制，在环状染色体的相对位置上的 终止区（terC）终止。整个复制过程可划分 为3个阶段：复制的发动，复制叉的延伸和 复制的终止。首先是切口酶在复制起点将 一股超螺旋的DNA切开，在解旋酶的作用下 DNA双螺旋解旋形成一个复制泡，此时切口 被封闭，复制泡的两边各形成一个复制叉。 一个顺时针移动，另一个逆时针移动，在 复制叉处开始DNA的复制。
后随链合成的DNA中大部分是以小段形式存 在的称为冈崎片段。每个冈崎片段都由一 个RNA引物引发。当复制叉延伸到复制终点 时，由DNA聚合酶I除去RNA引物并由DNA添 补缺口，最后由DNA连接酶封闭切口，从而 形成两个与原来完全一样的双链DNA环状分 子。
由于大肠杆菌染色体是环形的，所以两个 复制叉汇合在起点对面距起点180°的终点。 这样一个包括复制起点和终点的独立的复 制单位叫复制子。大肠杆菌只有一个起点 和一个终点，整个染色体为一个复制子。 大肠杆菌染色体的复制速度很快，每分钟 复制105核苷酸，完整染色体在40min内完 成复制，从而为细胞的分裂做好了准备， 保证了遗传物质的稳定性和连续性。
肽聚糖层也分为两层，直至中央会合，形 成由细胞质膜和肽聚糖组成的隔膜。隔膜 完全形成后，两个子细胞分开，完成了一 次细胞分裂。
大肠杆菌DNA的复制方式
遗传信息通过实代DNA分子的复制，从亲代 传递给子代，从而保证了遗传的稳定性。 因此DNA的复制对生物的遗传具有重要的意 义。
双链DNA半保留复制
染色体环状复制
大肠杆菌的染色体为双链环形DNA，总长度为 4.6×106bp，DNA总长度可达1 100～1 400μm。凯恩斯通过精辟的实验证明了大肠杆 菌DNA是以环状方式复制的。首先将大肠杆菌 生长在含[3H]胸腺嘧啶的培养基中，这样在放 射性培养基上生长时所合成的全部DNA都是具 放射性的。培养接近两代时，分离出菌体的完 整DNA，可以从其放射自显影图上看到分枝的 环状图式。后来在有些病毒中也发现了环状复 制。因为复制环的图式象希腊字母θ，故称这 种复制为θ复制。
质粒
在大肠杆菌中，除遗传物质的主要载体染 色体之外，还有一种闭合环状的双链DNA遗 传因子，即质粒。质粒具有自我复制的特 性，不同质粒的基因及质粒和染色体基因 均可发生基因重组，质粒可通过细菌的接 合而转移，也可随细胞的分裂而传递或丢 失。由于质粒具有这些特性，所以在分子 生物学和遗传工程中质粒经常作为外源基 因的载体。大肠杆菌中已发现的质粒有F因 子、R因子和Col因子等。
大肠杆菌为兼性厌氧菌，其营养类型为化 能异养。呼吸类型为：在有氧条件下进行 有氧呼吸产能，在无氧条件下进行无氧呼 吸和发酵产能
有氧呼吸
有氧呼吸 有氧呼吸是指以分子氧作为最终电子受体的生 物氧化过程。大肠杆菌可以利用葡萄糖等作为碳源和能 源。葡萄糖经EMP途径分解为丙酮酸，丙酮酸再经TCA 循环彻底氧化为CO2和H2O，并从中获得大量能量。在 此过程中，底物氧化释放的电子通过电子传递链最后交 给氧。电子传递链又称呼吸链，其功能之一是传递电子， 功能之二是将电子传递过程中释放的能量合成ATP，即 电子传递磷酸化作用。大肠杆菌呼吸链的组分与线粒体 呼吸链的组分有所不同，但详细组分还不是十分清楚。 大肠杆菌的呼吸链上有两个部位释放质子（线粒体呼吸 链上有3个部位释放质子）。因此大肠杆菌呼吸链的P： O比为2，即一对电子经呼吸链的电子传递可得到两个分 子的ATP。
在RNA聚合酶的作用下先形成一段与模板互 补的引物RNA，然后在DNA聚合酶的作用下 根据碱基配对原则将脱氧核糖核苷酸添加 到引物RNA的3＇端，使DNA由5＇→3＇复 制，从而使新链不断延长。由于在一个复 制叉上亲代DNA的两条链皆是新DNA合成的 模板，两条链又是反向平行的，而DNA的合 成只能从5＇向3＇方向进行，所以在一个 复制叉上随着复制叉的向前延伸，一条链 的复制是连续的称为前导链，另一条链的
大肠杆菌（Escherichia coli）在自然界分布很 广，是人和动物肠道中的正常菌群。正常情况 下一般不致病，但它是条件致病菌。大肠杆菌 是单细胞原核生物，具有原核生物的主要特征： 细胞核为拟核，无核膜，细胞质中缺乏象高等 动植物细胞中的线粒体、叶绿体等具膜结构的 细胞器，核糖体为70S，以二分分裂繁殖。大 肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。其 大小为：0.5～0.8μm×1.0～3.0μm。周身鞭 毛，能运动，具致育因子的菌株还具性菌毛。
大肠杆菌
大肠杆菌的认识 大肠杆菌的形态结构 生理生化（产能机制） 大肠杆菌的分裂繁殖
大肠杆菌的认识
大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌， 是Escherich在1885年发现的，在相当长的 一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的 组成部分，认为是非致病菌。直到20世纪 中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆 菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼 畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它 是一种普通的原核生物，是人类和大多数 温血动物肠道中的正常茵群
在快速生长时，染色体一次复制尚未结束， 在尚不分开的染色体上又开始了新的复制， 导致染色体复制的时间大为缩短，细胞分 裂的代时（细菌繁殖一代所需时间）大为 缩短。由此可知：抑制DNA的复制，即可抑 制细胞的分裂。如用丝裂霉素C处理对数生 长期的大肠杆菌，由于抑制了DNA的合成， 虽然细菌能继续生长，但却不能分裂。
大肠杆菌的细胞表面还含有一种比鞭毛更 细、较短且直硬的丝状体叫菌毛，可分为 普通菌毛和性菌毛。普通菌毛主要用于吸 附于动植物、真菌以及各种细胞的表面， 有的是噬菌体吸附的位点。性菌毛是在F因 子的控制下形成的，它是细菌接合的“工具”。 通过性菌毛的接合，可在细菌之间传递质 粒或染色体基因等。
大肠杆菌生理生化
拟核
大肠杆菌的细胞核无核膜和核仁，没有固定的 形态，结构简单，称为拟核，也称细菌染色体。 拟核具有高度紧密的结构，由RNA、蛋白质和 超螺旋环状DNA组成。大肠杆菌的全部基因都 包含在这条DNA上。环状DNA的总长度可达 1300μm，大约含有3000～4000个基因，目 前已经确定了1400多个基因的结构、功能及 在基因图上的位置。通过研究大肠杆菌基因的 结构、功能及表达调控可揭示其它生物的遗传 现象和规律。
从不同代期的光谱分析中可以看出：在代期为 0时（亲代DNA）为由15N构成的重密度带。 复制一代以后为14N15N组成的中间密度带。 没有得到15N构成的重密度带，这表明在复制 过程中亲代DNA不能作为完整的单位保留下来； 亦未得到14N轻密度带，表明子代DNA分子不 能重新合成。复制两代以后出现两条带，一条 为轻密度带14N，另一条为14N15N的中间密 度带。随后，随着代期的延长，中间密度带被 稀释，从而说明大肠杆菌DNA的复制为半保留 复制。后来证明这是生物界DNA复制的普遍方 式。
大肠杆菌的分裂繁殖
1.1 染色体复制与分裂的关系 大肠杆菌以分裂 的方式进行繁殖。它的分裂是从染色体的复制 开始的。为了使遗传物质能均等地传给两个子 代，染色体的复制必须与细胞的分裂保持一致。 染色体复制不完成，细胞就不能分裂；复制一 旦完成，即开始分裂。大肠杆菌DNA复制从起 始到完成需40min。在染色体复制完成约 20min后，细菌进行分裂。在生长缓慢时，每 一个大肠杆菌内只有一条染色体，染色体复制 完成后细胞进行分裂，然后才开始下一次复制。
在复制时DNA双链分开，作为合成子链的模板。 复制后双链DNA分子中的一条链为亲代的DNA， 而另一条链则为新合成的DNA。这种方式的复 制称为半保留复制。半保留复制首先是在大肠 杆菌中得到证明的。1958年梅塞尔森和斯塔 尔首先将大肠杆菌在重同位素15N的培养基上 培养十几个小时，以保证全部DNA都被15N所 标记，然后再将大肠杆菌转入14N培养液，间 隔一定时间取样，提取菌体DNA并经氯化铯密 度梯度离心，进行紫外线吸收光谱分析。
细胞膜
大肠杆菌细胞膜的结构和其它生物细胞膜 的结构相似。但其细胞膜中蛋白质的含量 高且种类多。其细胞膜具选择透性，从而 可控制营养物质进出细胞。大肠杆菌细胞 的生物活性非常活跃，含有丰富的酶系。 如各种脱氢酶系，氧化磷酸化酶系，电子 传递系统，透性酶等。因此细胞膜是原核 生物能量转化的场所，并能通过它对外界 环境的各种刺激作出反应，并可传递信息， 参与细胞壁的合成等
一些特殊结构
荚膜 荚膜是某些细菌向细胞壁外分泌的并 位于细胞壁外侧的一层厚度不定的胶状物 质。大肠杆菌的荚菌的荚膜主要由多糖组 成，具有抗原性，构成了大肠杆菌的表面 抗原，即K抗原。
鞭毛 鞭毛是某些细菌长在细胞表面的 长丝状、波曲状的附属物。其数目为一 至数根，长为菌体的苦干倍，最长可达 70μm，直径一般为10～20nm。鞭毛由 鞭毛蛋白组成，构成了细菌的鞭毛抗原。 大肠杆菌为周身鞭毛，和其运动有关。 若将大肠杆菌穿刺接种于半固体培养基， 它将沿穿刺线向周围扩散生长。
大肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆 菌。其大小为：0.5～0.8μm×1.0～3.0μm。 周身鞭毛，能运动，具致育因子的菌株还 具性菌毛。 公司发酵所用的菌种为高效表达重组人粒 细胞的大肠杆菌工程菌株，是由带人粒细 胞刺激因子基因的重组质粒转化的大肠杆 菌菌株。
细胞壁
位于大肠杆菌的最外层，厚约11um，分为两 层，即外膜和肽聚糖层。外膜是大肠杆菌细胞 壁的主要成分，占细胞壁于重的80％，厚约 8nm，位于肽聚糖层的外侧，主要由磷脂、蛋 白质和脂多糖组成。脂多糖是革兰氏阴性细菌 的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞壁的特有 成分，主要和其抗原性、致病性及对噬菌体的 敏感性有关。肽聚糖层由1～2层网状的肽聚糖 组成，占细胞壁干重的10％，厚约2～3nm， 是细菌等原核生物所特有的成分。