大豆蛋白的提取与含量测定
黄豆中蛋白质含量测定
黄豆中蛋白质含量测定——凯氏定氮法一、仪器和试剂主要仪器:定氮仪。
试剂（除注明外均为分析纯）：1. 浓硫酸。
2. 30%氢氧化钠溶液。
3. 2～4%硼酸溶液。
4. 0.1mol/L 盐酸溶液。
5. 催化剂：硫酸钾——硫酸铜的混合物（K 2SO 4:CuSO4·5H 2O=3.5g:0.1g ）。
二、操作步骤1. 消化准确称取粉碎均匀的黄豆粉0.5g 左右，小心移入干燥的消化瓶中（注意用称量纸将样品加入到消化管底部，勿粘附在瓶壁上），加入适量催化剂及10mL 浓硫酸，按要求安装好消化装置后,设置好消化程序,打开冷凝水, 开始消化程序。
(160℃, 40min; 250℃, 20min; 350℃, 60min; 420℃, 30min)消化程序结束后，消化至溶液透明呈蓝绿色，冷却至室温。
同时做空白对照。
2． 蒸馏、吸收及滴定按要求安装好UDK142蒸馏仪，并将蒸馏仪与自动电位滴定仪连接好。
将所需试剂装到相应的试剂瓶中。
设置好蒸馏程序及滴定程序后，将冷却好的消化管装到蒸馏仪上，打开冷凝水，然后开始程序。
三、结果计算X ——试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（g/100g ）C —— HCl 标准溶液的浓度mol/LV 1 —— 滴定样品吸收液消耗的HCl 标准溶液的体积mLV 2 —— 滴定样品空白液消耗的HCl 标准溶液的体积mL0.0140——1.0mL 盐酸（C(HCl)＝1.000mol/L ）标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g ）m ——试样的质量或体积，单位为克或mL1000140.0)(21⨯⨯⨯⨯-=F mc V V XF ——氮换算为蛋白质的系数。
一般食物为6.25，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉与肉制品为6.25，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵5.30。
计算结果保留三位有效数字。
大豆蛋白的功能性测定
大豆蛋白的功能性测定专业：生物工程班级：08一班学号：060508131 姓名：戴璐成绩：摘要：利用考马斯亮蓝G250测定样品中蛋白含量为百分之十左右远不及样品包装上所说的82%的含量；紫外分光光度计测定大豆蛋白紫外吸收特征，其紫外光谱显示含较多无法除尽的杂质，荧光光度计观察其荧光效应，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其相对分子质量关键词：大豆蛋白蛋白含量测定紫外吸收电泳功能性1.概述蛋白质是组成人体的重要物质。
是人体生命活动的物质基础，是食品的第一大营养素。
大豆是重要的粮油兼用作物，它富含蛋白质、脂肪，是一种营养平衡的食物。
其籽粒含蛋白质一般为40%左右，比一般谷物高2-4被，也比牛奶、鸡蛋和瘦猪肉的蛋白质含量高。
大豆是豆科植物中最有营养而又易于消化的食物，是蛋白质最丰富最廉价的来源。
另外，大豆蛋白不含淀粉，氨基酸也组成比较平衡。
所以，目前许多蛋白质营养品都是用的大豆蛋白。
2.材料与方法1.考马斯亮蓝G250测定蛋白含量【材料】标准蛋白液，样品蛋白，722型分光光度计【方法】1>.标准曲线的制作取7支干净试管，按表一进行编号并加入试管混匀，室温静置3分钟，以第1管委空白，于波长595nm处比色，读取吸光度，以吸光度为纵坐标，各标准浓度作为横坐标作图的标准曲线2>.样液的测定另一支干净试管，加入样液1.0ml及考马斯亮蓝染液4.0ml，混匀，室温静置3min，于波长595nm处比色，读取吸光度，由样液的吸光度查标准曲线即可求出蛋白含量2.大豆蛋白质的紫外吸收特征【材料】标准蛋白液，样品蛋白，UV-9100型紫外分光光度计【方法】将大豆蛋白溶于1mol/L PH值为8.0的Tris-HCl溶液中，配制成2.0mg/mL的蛋白质溶液，以对应的Tris-HCl作参比，做紫外-可见扫描，速度10nm/s，范围200-400nm 之间3.大豆蛋白质的疏水性及荧光光谱【材料】标准蛋白液，样品蛋白，日本岛津RF-5310PC型荧光光度计，离心机，100mL 烧杯2个，玻璃棒1个【方法】将大豆蛋白溶于1mol/L PH值为8.0的Tris-HCl溶液中，配制成0.5，1.0，2.0mg/mL的蛋白质溶液，3000r/min离心10min，以以相对应的Tris-HCl作参比，采用日本岛津RF-5310PC型荧光光度计进行荧光测定，激发波长280nm,发射波长300-800nm之间4.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【材料】直流稳压电泳仪，垂直平板电泳槽⑴分离胶缓冲液 1.5mol/L Tris-HCl (pH8.8)取18.15g Tris, 加80ml重蒸水，用1mol/L的HCL调pH至8.8，用重蒸水稀释至最终体积为100ml，4℃冰箱保存。
大豆中蛋白质含量的测定实验报告
大豆中蛋白质含量的测定实验报告大豆是一种富含蛋白质的植物，因此对大豆中蛋白质含量的测定非常重要。
本实验旨在通过化学方法测定大豆中蛋白质的含量，并对结果进行分析和讨论。
实验材料和仪器：1. 大豆样品2. 硫酸钠溶液3. 氢氧化钠溶液4. 酸性消化液5. NaOH溶液6. 氮气吹扫装置7. 精密天平8. 恒温水浴9. 离心机10. 紫外分光光度计实验步骤：1. 准备大豆样品：将大豆磨成粉末，并将其过筛以获得均匀的颗粒大小。
2. 水解反应：取一定量的大豆样品加入酸性消化液中，放入恒温水浴中进行水解反应，使蛋白质完全水解为氨基酸。
3. 碱解反应：将水解后的溶液中加入适量的NaOH溶液，使溶液呈碱性，以便将其他干扰物质转化为不溶性沉淀。
4. 沉淀处理：将碱解后的溶液进行离心处理，将沉淀分离出来。
5. 沉淀洗涤：用硫酸钠溶液对沉淀进行洗涤，去除杂质。
6. 干燥：将洗涤后的沉淀放入烘箱中干燥，直至恒定质量。
7. 称重：使用精密天平称取干燥后的沉淀质量。
8. 光度计测定：将一定量的沉淀溶解于适量的NaOH溶液中，使用紫外分光光度计测定溶液的吸光度。
9. 蛋白质含量计算：根据标准曲线，计算出大豆中蛋白质的含量。
实验结果与分析：根据实验测定，我们得到了大豆样品中蛋白质的含量。
通过对标准曲线的分析，我们可以得知大豆样品中蛋白质的浓度。
从实验结果中可以看出，大豆中蛋白质的含量较高，这也符合我们对大豆富含蛋白质的认识。
在实验中，我们采用了水解和碱解的方法，这是常用的蛋白质测定方法之一。
水解反应将蛋白质水解为氨基酸，使其更容易测定；碱解反应则将其他干扰物质转化为不溶性沉淀，方便后续步骤的进行。
为了准确测定大豆中蛋白质的含量，我们进行了沉淀处理和洗涤步骤，以去除杂质。
这些步骤的目的是提高测定的准确性和精确度。
同时，干燥步骤的进行可以保证质量的恒定，进一步提高测定结果的可靠性。
通过紫外分光光度计的测定，我们可以得到溶液的吸光度，进而计算出蛋白质的浓度。
测定大豆蛋白粗蛋白含量的不确定度评定
３ ０ ． ２ ０ ０ １ ６ ３ ７ ． ７ ６ Ｏ． １ ０ ０ ２ ９
⑤ 空 白试 验消 耗盐 酸溶 液 引起 的相 对 不确定 度 Ｕ ⑥ 盐酸 标 准溶液 浓 度 引起 的相 对不确 定 度 Ｕ
ｓ ： 、 ／ ∑（ Ｘ —Ｘ ） Ｖ ｎ （ ｎ 一 １ ） ＝ ３ ． ８ ７ ７ ×１ ０
Ｕ １ ＝ ３ ． ８ ７ ７× １ ０ ５ ． ５ ５ ０１ ％ ＝４ ． ５ ３ ２× １ ０ 卅
度评定与分析》计算在测定过程 中的随机效应和系统效应导致的不
确定度 ， 最 终 评 定 结 果 的 不确 定 度 。 关键词 ： 粗蛋 白 不 确 定 度
０ ． ０ ０ ０ １ ／ ｘ ／ ３＝ ５ ． ７ ７ ４ Ｘ １ ０
（ 设 备 ： Ｋ ｊ ｅ ｌ ｔ ｅ ｃ ２ ０ ０ ０ 全 自动 凯 式 定 氮 仪 ＣＰ ２ ２ ５ Ｄ
型 电子天 平。
（ 环境 条件 ： 温度 ２ １ 。 Ｃ 湿度 ５ ５ ％Ｒ Ｈ。
（ 被 测 对象 ： 大豆 蛋 白。
１概 述
４ ． ２ Ｕ ｒ ２ 的计算 检 测蛋 白含量 时 实验 室环 境 温度 为 ２ １度 ， 由此 ， 相 对 不确 定度 为 ：
ｕ ｒ ２ ＝ ２ ． １ ×１ ０ 。 ４ Ｘ １ ／ 、 ／ ３＝ １ ． ２ １ ２ Ｘ １ ０ ４ ． ３ Ｕ 的计 算 电子 天平 ， ｅ ＝ ０ ． ０ ０ ０ １ ｇ，按 矩 形 分布 则 由天平 引起 的 不确 定 度为 ：
化， 使蛋 白质 分解 ， 再用 凯 式定 氮 仪进 行蒸 馏 ， 记 录仪 器 上
显示 的数 据 即 为粗 蛋 白含 量 。
２ 建立 数 学模型
大豆分离蛋白 标准
大豆分离蛋白标准大豆分离蛋白是一种优质的植物蛋白，其蛋白含量高，氨基酸组成均衡，且易于消化吸收。
在食品加工行业中，大豆分离蛋白被广泛应用于肉制品、调味品、乳制品等产品中，以提高其蛋白质含量，改善口感和营养价值。
本文将对大豆分离蛋白的标准进行介绍，以便生产加工企业和相关研究人员了解其质量要求和技术规范。
一、外观特征。
大豆分离蛋白的外观呈淡黄色至浅棕色粉末状，无异物和明显气味。
其颜色应均匀，无结块和异物，符合食品卫生标准要求。
二、蛋白含量。
大豆分离蛋白的蛋白含量应不低于90%，通过蛋白质测定方法进行检测，确保产品的蛋白质含量符合标准要求。
三、氨基酸组成。
大豆分离蛋白的氨基酸组成应符合国家食品安全标准，特别是必需氨基酸的含量要达到一定比例，保证产品的营养价值和生理功能。
四、水分含量。
大豆分离蛋白的水分含量应控制在一定范围内，一般不超过8%，以确保产品的稳定性和保存期限。
五、微生物指标。
大豆分离蛋白产品应符合国家相关的微生物指标标准，包括总菌落数、大肠菌群和霉菌、酵母菌等指标，保证产品的卫生安全。
六、重金属和有害物质。
大豆分离蛋白产品中的重金属和有害物质含量应符合国家相关标准，特别是铅、镉、汞等重金属的含量要符合食品安全标准，保证产品的安全性和可持续发展。
七、储存和包装。
大豆分离蛋白产品在储存和包装过程中，应采取适当的措施，防止产品受潮、变质和污染，保证产品质量的稳定性和持久性。
综上所述，大豆分离蛋白作为一种重要的植物蛋白资源，在食品加工行业中具有广阔的应用前景。
生产加工企业在生产过程中，应严格按照相关标准和技术规范进行生产，确保产品质量符合国家食品安全标准，为消费者提供安全、营养、健康的食品产品。
同时，相关研究人员也应加强对大豆分离蛋白的质量研究和控制技术，推动行业的可持续发展和创新。
希望本文所述的大豆分离蛋白标准能够为相关行业提供参考，促进行业的健康发展和科技进步。
国家标准粮油检验大豆蛋白质脂肪含量测定近红外法编制说明
国家标准《粮油检验大豆蛋白质、脂肪含量测定近红外法》编制说明《粮油检验大豆蛋白质、脂肪含量测定近红外法》国家标准起草组二〇〇八年十月十六日1.工作简况（包括任务来源、协作单位、主要工作过程、国家标准主要起草人及其所做工作等）项目背景和来源近红外分析方法(NIR)是近年来在粮食质量测定中作为迅速、简便、非破坏性检测发展起来的新技术，它是利用粮食中某一成分在近红外谱段中（700nm—2500nm）对特定波长近红外光能量与其含量有等比吸收的原理。
近年来，我国粮食和农业部门引进了世界各国多种型号近红外分析仪，使我国近红外应用技术迅速发展，在农产品质量控制上发挥了一定作用。
近红外分析方法自二十世纪七十年代被美国确定为非破坏检测粮食水分、蛋白质、脂肪的标准方法以来，在美国、法国、丹麦、瑞典、日本、澳大利亚等农业发达国家已经将NIR检测装置作为大豆蛋白质、脂肪证明的认定基准装置。
实践验证，近红外分析仪不仅可以为生产企业的品质控制提供直接快速的信息，使生产企业能够及时调整生产工艺，而且近红外光谱分析仪在粮食质量检测中充分体现了它快速、准确、节省人力物力等优点。
多年来，粮食检验部门和加工企业陆续购置了不少近红外分析仪器，但是由于缺乏标准的支撑，近红外分析技术在粮食检验机构一直未能得到真正应用。
为了规范近红外光谱仪的使用，确保测定结果的可靠性，使各级检测部门、研究机构及厂家在使用近红外光谱分析仪时有标准方法可依据。
通过近红外粮食质量检测系列标准的建立，将为粮食质量保证体系提供良好的技术支撑。
根据国家标准化管理委员会《关于下达2007年第四批国家标准制修订计划的通知》（国标委计[2007]85号）的要求，项目编号为-T-449的《粮油检验大豆蛋白质、脂肪含量测定近红外法》国家标准起草任务由河南工业大学负责起草。
在国家粮食局标准质量中心的组织、协调下，河南工业大学连同有关单位组成了本标准起草小组。
本标准制定主要工作过程本标准重点研究了AACC、ISO等关于近红外测定大豆或饲料方法的标准（草案），同时研究了国内有关近红外测定方法的标准。
D1--MCR-03-01大豆分离蛋白检验标准201108
1、适用范围本标准适用于分离蛋白的检验验收,适用品项：高凝胶蛋白、普通分离蛋白。
2、要求2.1本标准参照GB/T 20371-2006《食品工业用大豆蛋白》要求，产品应符合该标准中大豆分离蛋白的指标要求，另有指标﹡根据公司质量要求修订而成。
2.2感观要求 2.2.1感观要求外观呈淡黄色或乳白色粉末，具有产品应有的滋味和气味，无异味；不含有正常视力可见的外来杂质。
2.2.2理化指标水份≤10％；蛋白质含量（以干基计）≥90％ 灰分（以干基计）≤8％粗纤维含量（以干基计）≤0.5％菌落总数≤30000cfu/g 大肠菌群≤30MPN/100g 致病菌不应检出 总砷（以As 计）≤0.5mg/kg 铅（Pb ）≤1.0mg/kg 2.2.3凝胶强度指标普通分离蛋白，凝胶值>40g.cm 高凝胶分离蛋白，凝胶值>80g.cm2.3符合技术部提出的其它要求；有合同要求的，符合合同附加的合同条款要求。
3、检验方法3.1抽样：3.1.1每批次/货柜随机抽取3～5个样本 3.2理化指标根据GB/T 20371-2006《食品工业用大豆蛋白》测定。
3.2 凝胶强度指标3.2.1用电子称准确称取样品100g ，溶于500g 冰水，稍搅拌均匀；4标签、包装、运输、贮存4.1标签、包装符合GB/T 20371-2006《食品工业用大豆蛋白》要求。
4.2运输运输工具应采用清洁、干燥的车箱，不得与有毒、有害物品混装。
4.3贮存产品贮存于干库中阴凉干燥处。
5、检验要求5.1原料检验合格后，质量部出具检验报告单，方可办理入库。
否则走异常原料处理流程。
5.2厂家变更或有其它大的变更因素时，应填写《样品确认记录表》重新确认样品。
泰州安井食品有限公司编 制 葛真 审 核 类 型 受控文件 批 准 标 题 大豆分离蛋白检验标准版 本 1.0 修改状态 / 编 号TZAJ/FSMS-WP-D001页 数1发布日期201303203、入厂必检3.1检查供应商三证资料是否过期（营业执照，生产许可证，型式检验）；3.2批次检验报告是否合格。
大豆品质分析
大豆品质分析摘要：大豆是豆科大豆属的一年生草本植物，原产于中国，在中国各地均有栽培，同时广泛栽培于世界各地。
大豆是中国重要粮食作物之一，已有五千年栽培历史是一种其种子含有丰富植物蛋白质的作物，大豆用处很广泛，大豆最常用来做各种豆制品、榨取豆油、酿造酱油和提取蛋白质。
是数百种天然食物中最受营养学家推崇的食物。
而大豆的品质对大豆的价值起了决定性作用。
关键词：大豆品质、蛋白质含量测定、脂肪含量测定论文主体内容一、研究背景及意义大豆是我们常见的农作物。
作为食品，大豆富含蛋白质和氨基酸，可提供人们必须的营养物质。
除了直接食用，大豆还可以加工成豆腐、豆浆、豆干、腐竹，酿造酱油、制作豆豉，极大丰富了人们的餐桌。
除此之外大豆用来榨油，加工成饲料，在工业上也是重要的原材料。
大豆的品质和大豆的价值息息相关，只有提升大豆的品质、了解大豆品质的测定方法以选择出优质的大豆，才能让大豆更好的发挥作用。
二、优质大豆品质分析测定指标大豆的测定指标有很多，包括大田产量及各类物质含量，以下几点就是1、蛋白质含量高，则大豆蛋白质含量达45%以上，产量比当地同类品种增产5%。
2、脂肪含量高，则大豆脂肪含量23%以上，产量比当地同类品种增产5%。
3、双高含量的大豆，蛋白质含量42%以上，脂肪含量21%以上，产量比当地同类品种增产5%。
4、适于菜用的大粒品种大豆鲜荚长5.3 cm，宽1.3 cm，含糖量7%，蛋白质36%～37%。
5、外观光滑整洁，无畸形，种脐颜色淡的大豆商品价值最高。
三、大豆品质分析方法（一）、大豆蛋白质的测定（凯氏定氮法）1、把大豆用粉碎机粉碎,取3-5g于已经称量好的皿盒中,在120度的烘箱中烘30分钟。
拿出等待凉后称重,减去皿盒重量，计算水分的百分比。
2、称取0.2gH2SO4，6gK2SO4，把0.5g粉碎好的大豆（不用测量水分的）用滤纸包好放入定氮瓶中，加20ml硫酸,（瓶口上放一个小漏斗,防止蛋白跑掉）开小火在电炉子上消化,等没有碳化颗粒,并处于澄清状态时,拿下来凉一会，再加过氧化氢直到把瓶颈上的蛋白冲洗干净为止，再消化30min，拿下来，等凉.。
实验八大豆蛋白的提取及浓度测定
实验八大豆蛋白的提取及浓度测定实验目的1．掌握大豆蛋白提取的原理和方法。
2．学习Folin—酚法测定蛋白质含量的原理及方法。
3.制备标准曲线，测定未知样品中蛋白质含量。
4．学习计算蛋白质收率。
实验原理榨油工业的副产品——豆粕中含有丰富的蛋白质，依其性质的不同，可分为水溶蛋白，盐溶蛋白，碱溶蛋白，醇溶蛋白。
将豆粕依次用上述溶剂提取，并用有机溶剂沉淀，可制得各部分蛋白质的干粉。
Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。
甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜及酒石酸钾钠组成。
蛋白质中的肽键在碱性条件下，与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用，生成紫红色络合物。
乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。
此试剂在碱性条件下，易被蛋白质中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应，其色泽深浅与蛋白质含量成正比。
此法也适用于测定酪氨酸、色氨酸含量。
用Folin酚法可测出蛋白制品的含量，已知原料的重量，可以求出蛋白质的收率。
本法可测定范围是25—250µg蛋白质试剂和器材（一）、试剂1.标准蛋白质溶液结晶牛血清蛋白或酪蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮的含量，根据其纯度配制成150µg/mL蛋白溶液。
2.Folin—酚试剂（见Folin-酚法测蛋白质）3．其他试剂(1)10％NaCl (2)0．2％ NaOH (3)75％乙醇(4)丙酮(5)6mol／L HCl (6)蒸馏水4测试样品使用前稀释100倍。
（二）、器材试管及试管架，0.5，1及5mL吸量管，恒温水浴，722型分光光度计电动搅拌器，离心机，烧瓶，水泵，吸滤瓶， pH试纸，研钵操作方法（一）大豆蛋白的提取1．将豆粕掰成小块，用研钵磨碎。
2．水的抽提将磨碎之豆粕20g用5～6倍的蒸馏水浸泡，调pH为7．0，在10℃下搅拌抽提15min，离心15min，3500r／min，取上清液，如上清液不清澈再经吸滤(沉淀留下步抽提)。
清液加入等体积在冰箱中预冷的丙酮，用6mol／L HCl调pH4．5～5．0，3000r／min，离心15min，收集沉淀物，反复用丙酮洗涤，得到粉末状蛋白质干粉，待用。
大豆分离蛋白的制备
质量控制点与措施
原料控制
选用优质非转基因大豆，严格控制水分、杂质等质量指标 。
生产过程控制
定期对生产设备进行清洗消毒，确保生产环境卫生；严格 控制生产工艺参数，如温度、时间、pH值等。
产品储存与运输控制
确保产品储存于阴凉干燥处，避免阳光直射和高温；运输 过程中注意防潮、防震，确保产品质量稳定。
浓缩与干燥过程中要控制好温 度、压力、时间等参数，确保 产品的质量和稳定性。
设备选型与配置
01
02
03
04
破碎机
选用高效、节能的破碎机，确 保大豆破碎效果好，提高后续
工艺效率。
离心机
选用性能稳定、分离效果好的 离心机，确保油脂、纤维等成
分被有效分离出去。
压榨机
选用压榨效果好、操作简便的 压榨机，提高分离效率。
大豆分离蛋白的制 备
汇报人： 2023-11-26
目录
• 引言 • 大豆分离蛋白的原料与辅助材料 • 大豆分离蛋白的制备工艺 • 大豆分离蛋白的质量检测与控制 • 大豆分离蛋白的生产成本分析 • 大豆分离蛋白的市场前景与拓展方向
01
原料选择
大豆品种
选择高蛋白质含量、低脂肪的大 豆品种，如黄豆、黑豆等。
，促进动物生长发育。
制备大豆分离蛋白的意义
提高大豆附加值
通过制备大豆分离蛋白，可将大豆加工成高 附加值的产品，提高大豆的经济效益和社会 效益。
满足市场需求
随着人们对健康饮食和功能性食品的需求不断增加 ，大豆分离蛋白的市场需求也在不断扩大。
促进大豆产业提高我国大豆产业的国际竞争力。
干燥与包装
干燥处理
大豆蛋白提取方法的比较总结
大豆蛋白提取方法的比较总结1、酸沉碱提法大豆分离蛋白是一种传统的分离提取方法。
大豆分离蛋白法是利用大豆中大多数蛋白质在等电点(pH415)时沉淀的特性,与其他成分分离，沉淀的蛋白质经调节pH后溶解，因此称之为酸沉碱提法。
酸沉碱提的缺陷是：耗酸、耗碱量大，废水处理费用高，产品收率低。
该分离提取方法有待改进。
但目前仍然是工业化生产的基本方法。
2、膜分离法根据大豆蛋白的分子量大小、形状及膜与大豆蛋白的适应性，选择膜材料和不同截留分子量的膜，对大豆蛋白提取液超滤分离，超滤净化，使非截留组分排除，达到符合标准的分离大豆蛋白液，接着将净化后的大豆蛋白提取液超滤浓缩到所需的浓度后出料，喷雾干燥成粉状大豆分离蛋白。
3、反胶束萃取分离法反胶束是表面活性剂在有机溶剂中形成的一种聚集体，其中表面活性剂的非极性尾在外，与有机溶剂接触，极性头在内，形成极性核，该核具有包含水溶液和溶解蛋白质的能力，因而可以用此含有反胶束的有机溶剂从水相中萃取蛋白质。
利用反胶束技术从全脂豆粉萃取大豆蛋白，可一次萃取50%左右。
大豆蛋白萃取过程非常快，用非扩散模型解释较为合理。
该法需要的主要仪器有：自动水分测定仪、气浴恒温震荡器、离心机、凯氏定氮仪、分析天平、恒温磁力搅拌器和微量进样棒等。
影响反胶束萃取过程的主要因素有表面活性剂的种类及浓度、水相的pH值、离子强度、温度等。
反胶束萃取技术的优点是：选择性高、操作方便、放大容易、萃取剂(反胶束)相可循环利用、分离和浓缩同步进行。
其缺点是:蛋白质在现有反胶束体系中稳定性不高,导致萃取前后蛋白质的活性损失较大，因而制约其工业化应用。
4、反相高效液相色谱法这是对大豆蛋白中7S和11S球蛋白进行快速分离的一种方法。
在分离条件为40℃、流速1mL/min的条件下,9min可完成相应球蛋白的分离。
具体方法为:(1)试剂与试样。
乙腈(CAN) (HPLC级)、三氟乙酸(TFA) (HPLC级)、HPLC级水用于移动相的制备。
大豆蛋白的提取与含量测定
• 引言 • 大豆蛋白的提取 • 大豆蛋白含量的测定 • 实验结果与分析 • 结论 • 参考文献
01
引言
大豆蛋白简介
大豆蛋白是大豆中的重要成分，具有 丰富的营养价值，包括提供人体所需 的氨基酸、蛋白质等。
大豆蛋白具有低脂肪、低胆固醇的优 点，对于降低心血管疾病风险、保持 健康体重等方面具有积极作用。
实验结果
实验结果显示，采用本实验方法提取的大豆蛋白 具有较高的纯度和收率，且操作简便，可用于实 际生产。
对未来研究的建议
深入研究不同溶剂和条件对大豆蛋白提取效果的影响，以进一步优化提取工艺。 探讨大豆蛋白的结构与功能特性，为其在食品、医药等领域的应用提供理论支持。
开展大豆蛋白与其他植物蛋白的比较研究，以全面了解其营养价值和功能特性。
碱提取法
利用碱性溶剂溶解大豆中的 蛋白质，该方法能够较好地 保持蛋白质的生物活性，但 操作较为复杂。
离子交换法
利用离子交换剂吸附大豆中 的蛋白质，该方法具有较高 的选择性，但需要使用大量 的离子交换剂。
膜分离法
利用膜分离技术将大豆中的 蛋白质进行分离，该方法具 有操作简便、分离效果好等 优点。
提取流程
06
参考文献
参考文献
01
参考文献1
大豆蛋白的提取方法主要有碱溶酸沉法、膜分离法、离子交换法等。其
中，碱溶酸沉法是最常用的一种方法，通过调节pH值使大豆蛋白溶解，
再通过调节pH值使其沉淀析出。
02
参考文献2
大豆蛋白的含量测定方法主要有凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法等。
其中，凯氏定氮法是最常用的一种方法，通过测定大豆样品中氮的含量
应用前景
分析大豆蛋白提取与含量测定的实际应用价值，探讨 其在食品、饲料等领域的应用前景。
大豆蛋白质检测方法
大豆蛋白质检测方法1.引言1.1 概述概述部分的内容可以按照以下方式进行编写：在此文中，我们将关注大豆蛋白质的检测方法。
大豆蛋白质是一种重要的植物蛋白质，具有丰富的营养价值和广泛的应用领域。
因此，准确、快速地检测大豆蛋白质的含量和质量对于农业生产、食品工业以及药品生产等领域非常关键。
随着科学技术的不断发展，大豆蛋白质检测方法也得到了不断完善和创新。
文章将介绍两种主要的大豆蛋白质检测方法，并详细阐述它们的原理和步骤。
在第一种方法中，我们将了解到它基于某种特定的原理来进行大豆蛋白质的检测，通过特定的步骤来获取准确的结果。
而在第二种方法中，我们将探讨它采用的另一种不同原理来进行大豆蛋白质的检测，并且与第一种方法进行对比，分析它们各自的优缺点。
通过对这两种方法的介绍和比较，我们希望能提供给读者们一个全面了解大豆蛋白质检测方法的视角，以便在实际应用中选择最适合的方法。
文章的结论部分还将总结分析这两种方法的优缺点，以及它们在实际应用中的可能应用前景。
通过深入研究大豆蛋白质检测方法，我们可以更好地了解大豆蛋白质的特性和含量，为大豆相关产品的研发和质量控制提供科学依据。
同时，这也为食品安全领域和农业生产提供了重要的支持，促进了行业的健康发展。
总而言之，本文旨在探讨大豆蛋白质检测方法，既介绍了两种常用的方法，又对它们的原理和步骤进行了详细说明。
通过对这两种方法的分析和比较，我们可以更好地理解并选择最合适的方法来进行大豆蛋白质的检测。
这对于大豆相关产业的发展和食品安全具有重要意义。
1.2文章结构文章结构是指文章整体的框架和组织，它决定了文章的逻辑性和连贯性。
本文的目的是介绍大豆蛋白质检测方法，为了使读者能够清晰地了解这个主题，本文将分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分将首先对大豆蛋白质检测方法进行概述，介绍大豆蛋白质在食品工业和农业中的重要性以及对其质量检测的需求。
随后，将说明本文的结构和各部分的内容，以使读者对文章有一个整体的了解。
大豆中蛋白质测定换算系数
大豆中蛋白质测定换算系数1.引言1.1 概述大豆作为一种重要的蛋白质来源，其蛋白质含量是衡量其营养价值的重要指标之一。
然而，在实际测定中，不同的测定方法可能会得出不同的蛋白质含量结果。
为了比较和统一不同测定方法的结果，科研工作者们引入了蛋白质测定换算系数的概念。
本文即旨在探讨大豆中蛋白质测定换算系数的相关问题。
在大豆中蛋白质测定方法方面，目前主要常用的方法有几种，例如Kjeldahl法、比色法、生物素标记法等。
每种方法都有其优点和局限性，因此在实际应用中需要选择合适的方法进行测定。
然而，由于不同的测定方法在蛋白质测定上的原理和操作步骤不同，所得结果也会有所差异。
为了比较这些结果，研究人员引入了蛋白质测定换算系数，以将不同方法的结果换算为相同的单位，从而方便进行比较和评估。
蛋白质测定换算系数的意义主要体现在以下几个方面。
首先，通过使用换算系数，可以将不同测定方法得到的蛋白质含量结果进行统一，避免了由于不同方法导致的结果差异。
其次，蛋白质测定换算系数可以用于比较不同品种或不同产地的大豆中蛋白质含量，为科研工作者和生产者提供了重要的参考依据。
此外，蛋白质测定换算系数还可以为食品工程师和营养学家等相关领域的研究提供基础数据，为开发和改良大豆制品提供科学依据。
综上所述，大豆中蛋白质测定换算系数是一个重要的研究课题。
通过比较和分析现有的蛋白质测定方法以及其应用中存在的问题，我们可以更好地理解蛋白质测定换算系数的意义和作用，进而为相关领域的研究和应用提供科学支持。
因此，本文将着重探讨大豆中蛋白质测定换算系数的相关问题，并展望其在未来的应用前景。
1.2 文章结构：本文主要分为引言、正文和结论三个部分进行阐述，每个部分的内容安排如下：引言部分通过概述大豆中蛋白质测定换算系数的重要性和应用背景来引出本文的主题。
其次，介绍了本文的结构，包括正文部分的两个小节以及结论部分的总结和对蛋白质测定换算系数的应用前景展望。
正文部分将分为两个小节讨论大豆中蛋白质测定方法和蛋白质测定换算系数的意义。
大豆蛋白质含量的测定
大豆蛋白质含量的测定实验方案1 原理试样在催化剂存在下用硫酸消解,反应产物用碱中和后蒸馏。
释放出的氨被硼酸溶液吸收,吸收液用硫酸溶液滴定,测定氮含量并计算粗蛋白质含量。
2试剂除参考物质外,只使用经确认无氮的分析纯试剂,试验用水为蒸馏水或去离子水或同等纯度水.警告:2.4、2.8、2.ll和 2.12中提到的试剂应谨慎使用。
2.1 硫酸钾 (K2SO4)。
2.2 五水硫酸铜 (CuSO4·5H20)。
2.3 二氧化钛 (TiO2)。
2.4 硫酸(H2SO4):c(H2SO4)=18mol/L,ρ20(H2SO4)=1.84g/mL。
2.5 石蜡油。
2.6 N-乙酰苯胺 (C8H9NO):熔点114℃,氮含量10.36g/100g。
2.7 色氨酸(C11H12N22):熔点282℃,氮含量13.72g/100g。
2.8 五氧化二磷(P205 )。
2.9 硼酸:水溶液 ,ρ20(H3BO3)=40g/L,或所使用仪器推荐的浓度。
2.10 指示剂:按照所使用仪器的推荐,加入一定体积的溶液A(2.10.1）和溶液B(2.10.2 )(例如:5体积溶液A和1体积溶液B)。
注1:有可能准各使用的硼酸溶液中含有指示剂（2.9+2.10）。
注2:溶液A和溶液B的比例可根据仪器进行调整。
也可以使用pH电极进行电位滴定，PH电极需要每天校准。
5.10.1溶液A:200mg溴甲酚绿（C21H14Br4O5S）溶于体积分数为95%的乙醇（C2H5OH），配制成100mL溶液。
5.10.2溶液B:200mg甲基红（C15H15N3O2）溶于体积分数为95%的乙醇（C2H5OH）,配制成100mL溶液。
5.11 氢氧化钠水溶液（NaOH）:质量分数33%或40%，含氮量少于或等于0.001%。
也可以使用含氮量少于或等于0.001%的工业级氢氧化钠。
5.12 硫酸:标准滴定溶液，c（H2SO4）=0.05mol/L因为硫酸在连接管中不产生气泡，所以推荐用硫酸代替盐酸。
大豆品质分析实验报告
一、实验目的通过对大豆品种的蛋白质、脂肪、水分等成分进行分析，了解大豆的品质特性，为大豆的种植、加工和食用提供参考。
二、实验材料1. 大豆样品：10个不同品种的大豆2. 实验仪器：电子天平、高速离心机、烘箱、蒸馏装置、分析天平、电热恒温水浴锅、移液器、容量瓶、比色皿等3. 实验试剂：无水硫酸钠、苯、硫酸、无水乙醇、氢氧化钠、酚酞指示剂等三、实验方法1. 蛋白质含量测定采用凯氏定氮法测定大豆样品中的蛋白质含量。
（1）准确称取大豆样品1.0000g，加入硫酸消化，定容至50ml。
（2）将消化液转移至蒸馏装置，加入氢氧化钠溶液，蒸馏，用无水硫酸钠吸收。
（3）将吸收液转移至容量瓶中，加入酚酞指示剂，用氢氧化钠溶液滴定至终点。
（4）根据氮含量计算蛋白质含量。
2. 脂肪含量测定采用索氏抽提法测定大豆样品中的脂肪含量。
（1）准确称取大豆样品5.0000g，加入无水硫酸钠，放入索氏抽提器。
（2）将索氏抽提器放入电热恒温水浴锅中，加热至沸腾，维持一定时间。
（3）将抽提液转移至容量瓶中，加入无水硫酸钠，定容至50ml。
（4）用苯溶解抽提液，比色测定脂肪含量。
3. 水分含量测定采用烘干法测定大豆样品中的水分含量。
（1）准确称取大豆样品5.0000g，放入烘箱中，在105℃下烘干至恒重。
（2）根据烘干前后样品质量差计算水分含量。
四、实验结果与分析1. 蛋白质含量分析实验结果显示，10个大豆品种的蛋白质含量在37.2%~45.6%之间，平均值为40.8%。
其中，品种A、B、C的蛋白质含量较高，分别为45.6%、44.2%、43.5%。
2. 脂肪含量分析实验结果显示，10个大豆品种的脂肪含量在18.5%~22.8%之间，平均值为20.6%。
其中，品种D、E、F的脂肪含量较高，分别为22.8%、21.9%、21.3%。
3. 水分含量分析实验结果显示，10个大豆品种的水分含量在8.2%~10.1%之间，平均值为9.2%。
其中，品种G、H、I的水分含量较低，分别为8.2%、8.8%、9.3%。
植物蛋白质的提取和含量测定
五、实验步骤 稀释至1升，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。
5 标准 BSA（0. Folin—酚试剂甲（用前组分一: 组分二 = 50:1） 冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。
（一）蛋白提取 使用时用标准NaOH滴定，酚酞作指示剂，然后适当稀释，约加水1倍，使最终的酸浓度为1N左右。
三、实验器材
1.分光光度计（500nm），比色皿 2.计算纸（9 cm×9 cm） 3.离心机 （离心管100ml 、50ml） 4.组织捣碎机 5.精密pH试纸
四、实验试剂
1.大豆干粉 2. 0.2%NaOH 3. 丙酮 （预冷） 4. 6M HCl，1M HCl 5 标准 BSA（0.5 mg/ml） 6. Folin—酚试剂甲（用前组分一: 组分二 = 50:1） （1） 1克 Na2CO3和0.2克 NaOH溶解于50毫升蒸馏水中。 （2） 0.5克硫酸铜（CuSO4•5H2O）溶解100毫升 1%酒石酸钾钠 （KNaC4H4O6•4H2O）中。
称Fo取lin分3二克=大50豆:1）干粉中蛋白含量）。
Folin—酚试剂乙 （用前稀释一倍） 每次使用前，将50ml（1）与1ml（2）混合，即为试剂甲。 离心机 （离心管100ml 、50ml）
五、实验步骤
（二）蛋白含量测定
1. 制作标准曲线 按照下表操作，以A500nm为纵坐标，以蛋白含量为横坐标建立标曲。 2. 测定提取第2步稀释后样品的蛋白浓度 按上表中样品列操作，根据A500nm查找含量，并计算原始浓度。
量剩余上清液的体积，加入等体积预冷丙酮，先用6mol/L的HCl调pH至，再用1mol/L的HCl小心调pH至，于4000r/min离心15min，(留
取沉淀物)，并用量少剩量丙余酮反上复清(至液少两的次体)搅积拌洗，涤加（在入离等心管体中积进行预）冷，加丙入酮丙酮，后先一定用将6沉m淀搅o拌l/充L分的，H使C沉淀l调脱水pH。
大豆中蛋白质含量
大豆中蛋白质含量大豆中蛋白质含量是大豆质量评价的重要指标之一，也是制备豆制品的重要指标。
大豆是一种非常营养丰富的植物，其中有蛋白质的含量非常丰富，含量的精确测定是进行大豆质量评价和加工处理的基础。
大豆蛋白质含量的测定，根据表面特征可以分为：理化指标法、紫外光谱法、超声波技术、火焰原子吸收法等。
现今使用最多的方法就是火焰原子吸收法，也称Kjeldahl，是一种根据氮的定量测定方法，在经过Kjelrdahl实验后，把原始的大豆样品中氮含量转换为单位重量的蛋白质含量。
由于大豆自身品质变化差异大，蛋白质含量的测定受到因素的影响也较大，比如受品种、栽培环境、生长周期、收获日期等影响。
此外，大豆蛋白质含量在加工过程中也会受到影响，比如烘焙、提取程序等都会影响最终的蛋白质含量。
要准确测定大豆蛋白质含量，还需要考虑采用的采样方法，采样容量，以及采样方法的准确性，确保样品的准确性以及准确测定结果。
此外，实验环境也是非常重要的因素，室内温度、湿度以及实验器材等都会影响测定结果的准确性。
Kjelrdahl是目前用来测定大豆蛋白质含量常用的一种方法，但也有一些其他的测定方法，如紫外光谱测定法，它把大豆中的底物分解成蛋白质，用紫外光谱仪测定吸收率，并转换为蛋白质含量。
测定大豆蛋白质含量的另一种方法是放射免疫法，这种方法是利用山羊抗体抗原反应的原理，来测定大豆中的蛋白质含量。
这种方法有很强的特异性，能够较为准确地测定大豆中蛋白质含量，但它的操作较为复杂，也比较昂贵。
大豆蛋白质含量的准确测定对于大豆加工产品质量、生产效率和结构的研究有重要的意义，同时也是大豆制品产品品质的关键因素之一。
因此，要正确测定大豆中蛋白质含量，需要选择合适的实验方法，同时在实验过程中要做到操作正确，控制各准确性，以确保最终测定结果的准确性。
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蛋白质产物重量 蛋白质产率= ×100% 原料总重量
Folin酚法测定蛋白质浓度见第二实验部分
二、Folin酚法测定蛋白质含量
目的要求
掌握Folin酚法测定蛋白浓度的原理和方法
实验原理
蛋白质浓度可以从它们的物理化学性质，如比重、紫外 吸收，折射率等测定而得知；或用化学方法，如定氮、双缩脲 反应，Folin酚试剂反应等方法来计算。其中双缩脲法和Folin 酚法是一般实验室中常用的方法，它们操作简便，迅速，不需 要复杂而昂贵的仪器。 Folin 酚法灵敏度高，比双缩脲法灵敏 100倍。 Folin酚法所用试剂是由两部分组成，试剂甲相当于双缩 脲试剂，可与蛋白质中的肽链起显色反应。试剂乙中的磷钼酸 和磷钨酸在碱性条件下不稳定，易被酚类还原而呈兰色（钼兰 和钨兰混合物）。
0
0 0
1
0.2 0.04
2
0.4 0.08
3
0.6 0.12
4
0.8 0.16
5
1.0 0.2
S
提取的样品液（ml）
PH7.8的buffer（ml）
0.8
1 1 0.8 1 0.6 1 0.4 1 0.2 1 0 1 0.2 1
Folin-甲试剂 （ml
）
Hale Waihona Puke 于室温下不停地振荡10min
Folin-乙应用液（ml）
由于蛋白质中含有带酚基的酪氨酸还原呈兰色，溶液 兰色的深浅与蛋白浓度成正比。因此用Folin酚法测定 蛋白质含量，灵敏度较高。 样品中含酚类化合物及柠檬酸均有干扰作用，如果样 品酸度较高则显色较浅，要提高碳酸钠一氢氧化钠的 浓度。此法也可测定溶液中酪氨酸和色氨酸的浓度。 Folin酚法有不少个别改进的操作方法，但基本原理都 是一个，只是在各溶液的浓度及填加量上、保温的温 度及保温时间上有所不同而已，本实验所介绍的是本 室常用的，灵敏度较高的操作方法。
4
4
4
4
4
4
立即摇匀，在55℃恒温水浴中保温5min，用流水冷却1min后，测A650
A650值
0
0.184
0.317
0.425
0.536
0.668
？
2、样品测定：取三支试管（平行）各加入待测的蛋白质样品液1ml和空
白 ，如下操作：
试管号
蛋白质稀释液（ml） （mg)
PH7.8的buffer（ml）
实验原理
大豆中含有丰富的蛋白质、根据提取方法及其其性质的不同， 可以分为水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白、碱溶蛋白。将豆粉依 次用上述溶剂提取，并用有机溶剂沉淀，可制得各部分蛋白质的 干粉。本实验主要是水溶提取大豆蛋白。 称出提出蛋白质的重量，已知原料重量，可以求出蛋白质的收 率。
试剂和器材
1、试剂 （1）10%Nacl （2）0.2%NaoH （3）75%乙醇 （4）6mol/L HCL （5） 1mol/L HCL （6）1 mol/L NaoH 2、器材 （1）离心机 （2）烧杯 （3）滴管 （4）PH试纸等
3、器材：
试管10支 试管架一个 移液管：（5ml、1ml） 移液管架 洗瓶 恒温水浴 723型分光光度计
Folin-酚法测定蛋白质含量工作曲线的制作：
取6支试管（干燥的）按下表顺序分别加入各种试剂并进行反应和测定 K=0.308 B=--0.009 R*R=0.9909
试管号
蛋白质标准液（ml） （mg)
操作方法
1、水抽提 将豆粉5g用约50毫升左右的蒸馏水少量多次的添加 搅 拌 ， 常 温 下 搅 拌 抽 提 1 5 min， 3800r/min 离 心 15min，取上清液，如上清液不清澈再经过滤。取上 清液1毫升稀释100倍留做蛋白测定。 其余上清液加入等体积在冰箱中预冷的丙酮，用滴 管少量多次慢慢滴加（搅拌），用6mol/L和1 mol/L HCL， 调 PH4.5~5.0，3800r/min， 离 心 1 5 min， 收集沉淀物，反复用丙酮搅拌洗涤离心2次，放入表面 皿上， 60 度烘干，得到粉末状蛋白质干粉，称重，计 算粗产率。
大豆蛋白的提取与含量测定
指导老师 赵建军 曲宁 夏婷
孟繁新
蛋白质性质与应用技术关系图
肽 氨基酸
疏 水 性 纸 层 析 亲 水 性 极性
酸 碱
酶 离子交换层析 电荷 电泳
蛋白质
形 状
分 子 量
离 心
凝 胶 层 析
一、大豆蛋白的提取
目的要求
1、掌握大豆蛋白的提取原理和方法 2 、计算粗提产率 2、学习计算蛋白质收率
4、Folin试剂乙：在2升磨口回流装置的烧瓶内，加钨酸钠 （ NaWO4· 2H2O）100g，钼酸钠（ NaMoO· 2M2O）25g， 蒸馏水 700ml，85%的磷酸 50ml，浓盐酸 100ml，充分 混合后，小火回流 10 小时，再加硫酸锂（ Li2SO4）150g， 蒸馏水50ml及数滴溴。然后开口沸腾15min，以驱除过量 的溴，冷却后定容到1000ml，过滤后呈金黄色，于棕色瓶 中保存，可使用多年。 上述制备的 Folin试剂乙的贮备液浓度一般在2mol/L左右， 几种操作方案都是把 Folin试剂乙稀释至1mol/L的浓度作为 应用液，我们是把贮备液于作用前稀释 18 倍，使之浓度为 0.1mol/L 略高。这种稀释 18 倍后的 Folin 试剂乙就是下文称 之为应用液， Folin试剂乙贮备液浓度的标定，一般是以酚 酞 为 指 示 剂 ， 用 Folin 试 剂 乙 去 滴 定 1 mol/L 左 右 的 标 准 NaOH溶液，当溶液颜色由红变为紫灰色，再突然变成黑绿 既为终点。如果用 NaOH 去滴定 Folin 乙，终点不太好掌握， 溶液的颜色是由浅黄色变为浅绿色，再变为灰紫色为终点。
试剂和器材
1、材料： 本实验所提取大豆蛋白水提取液，经合适稀释至可测 定范围。 2、试剂： （1）0.03mol/L PH7.8的磷酸缓冲液。 （2）200μg/ml的标准酪（牛血清）蛋白溶液。 （3）Folin试剂甲：（俗称碱性铜试剂）：10g NaoH溶于400ml水中，再加50gNa2CO3； 称 取 0 . 5 g 酒 石 酸 钾 钠 溶 于 8 0 mlH2O 中 ， 再 加 0.25gCuSO4；以上两溶液混合定容到 500ml，冰箱 保存可用一个月。
空白
0
1 1
0 1 4
2 1
0 1 4
1 Folin-甲试剂 （ml） 1