免疫血液学实验的质量控制培训课件
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3.实验室的基本设备应包括离心机、水浴箱、显 微镜、各种冷冻冷藏设备及其他专用设备。集 中化检测实验室应配备与其功能相适应的检测 设备。应对实验室的关键设备进行确认，定期 校准和维护。
免疫血液学实验的质量控制
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4. 建立和实施试剂的管理程序，包括： 4.1试剂的评估程序，包括生产商和供应商的（
国家规定的相应）资质，试剂的技术要求。 4.2试剂的确认程序，包括实施确认的人员、方
3
抗体筛选和抗体鉴定，检测方法为直接血凝试验 、抗人球蛋白试验、聚凝胺试验。检测结果呈 无凝结反应，为抗体筛选阴性，反之，抗体阳 性。并确定其特异性。
交叉配血，检测方法为直接血凝试验、抗人球蛋 白试验、聚凝胺试验。检测结果呈无凝结、无 溶血反应为配合。
免疫血液学实验的质量控制
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2.对血液免疫血液学检测项目，应使用不同厂商 生产的试剂，对每项试验均要作阴阳性对照。
法、质量控制方法、接受标准、每批试剂投入 使用前应进行确认。 4.3试剂的库存管理程序，应包括试剂的贮存条 件和库存量的监控，试剂应在有效期内使用。
免疫血液学实验的质量控制
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5. 建立和实施实验室内部质量控制程序，其基 本要求如下：
5.1 在每次试验时，观查试剂是否有不正常外观 ，包括试剂红细胞有无明显的溶血或混浊：血 清试剂无沉淀物和颗粒或胶状物形成。
5.7应实施日常的质控试验记录，包括试验的反 应性，商业来源试剂的批号，试验日期和试验 者的签名。
免疫血液学实验的质量控制
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6. 建立对新的试剂进行检测程序，新的试 剂应在常规工作中试用一周，或至少做 五十份标本，包括2～3份ABO亚型和2～3 份弱D抗原。
7.完成检测后的血清或血浆标本，应在2 ～8℃的条件下保存2周。
免疫血液学实验的质量控 制
一、免疫血液学检测基本要求
1. 对血液免疫血液学检测项目、方法和结果的判 定标准如下：
ABO血型鉴定，检测方法为直接血凝试验，检测 结果以正反定型相符合方可确定其血型。如正 反定型不符，应作进一步试验。
ABO亚型鉴定，检测方法为直接血凝试验、血凝 抑制试验、吸收放散试验，根据病史和以上试 验结果，确定被检者血型。
免疫血液学实验的质量控制
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练习
写一份购买ABO血型试剂和红细胞试剂 的步骤说明， 并设计试剂认证的策略
免疫血液学实验的质量控制
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试剂认证的原则
注意： 试剂必须具有： ➢ 特异性 ➢ 可接受的亲和力和效价 ➢ 无污染 ➢ 微生物检测为阴性 ➢ 不引起溶血 ➢ 标准的标识识别颜色 ➢ 尽可能是单克隆
免疫血液学实验的质量控制
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说明书也要有实际运用时的考虑事项，如： ➢ 体积 ➢ 一滴的体积 ➢ 瓶子质地（玻璃/塑料） ➢ 供应和输送
➢ 如果购买试剂，需要给出派送的各个细节要求 。相同批号的试剂至少能保证用到一年。
免疫血液学实验的质量控制
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二、免疫血液学实验的质量控制
1、免疫血液学实验的影响因素 1.1设备 包括离心机、水浴箱、显微镜、各种冷冻
冷藏设备及其他专用设备。
免疫血液学实验的质量控制
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离心机，应使用血库专用离心机。
要注意的是离心力≠离心转速，离心力还与转子 的半径有关，标准的离心力900~1000g 。不同 的实验要求的离心力是不同的，离心力过高， 易形成亚型判断失误或假阳性
离心力/离心时间也影响实验结果：
定型、各类判读结果的试验离心15秒（1000g or 3400rpm） ；
免疫血液学实验的质量控制
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试剂必须标有： ➢ 特异性 ➢ 批号 ➢ 生产日期 ➢ 有效期 ➢ 生产商厂 ➢ 保存条件
免疫血液学实验的质量控制
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试剂的说明书中必须附有的其它信息： ➢ 使用方法 ➢ 克隆的名称/编号 ➢ 使用的限制条件 ➢ 储存标准 如果需要还可以有以下的内容： ➢ CE/FDA的证书或相关的证书
O2)，抗体筛选谱细胞，Coombs 质控细 胞 ( IgG-致敏细胞)。 反应增效剂： Liss ,LIM等。
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严格试剂管理程序，包括： 1、试剂生产商和供应商资质，生产的技术要求
。 2、试剂的确认程序，每批试剂使用前进行确认
。 3、试剂的包装和运输。 4、试剂的库存管理，包括试剂的贮存条件和库
各类洗涤细胞的试验离心60秒。
离心机每六个月应校正一次，以保证其准确性。
水浴箱使用的关键是控制其温度，有时其自带的 温度计不准确，要另用温度计测试水温。
冷藏设备要注意温度和电源，要定时记录温度，
保证温度在正常允许范围。
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1.2 试剂 常用的试剂有： 试剂抗血清抗-A, 抗-B, 抗-AB, 抗-D； 其他血型试剂；抗人球蛋白血清。 试剂红细胞： A、B细胞；筛选细胞 (O1,
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5.5 抗球蛋白试剂（抗IgG和抗C3d）应与任何 ABO血型的非致敏红细胞与相容的血清孵育后 无溶血和凝集反应；与被稀释的抗IgG(D)和红 细胞的敏感性凝集在显微镜下可见1+～2+。
5.6 抗体筛选和鉴定细胞（纯合子剂量效应）， 需用在生理盐水中反应弱的抗P和抗人球蛋白 中反应1+～2+的抗D来测定。
5.2 在每项试验中，注意试剂敏感性和特异性： ABO正定型阴阳性对照细胞反应需清晰明确： 反定型与抗A、抗B（抗AB）反应需清晰。
5.3 RH(D)血型试剂与已知的阳性和阴性质控细 胞反应清晰。
5.4 抗人球蛋白试验质控细胞与抗人球蛋白试剂
反应有1+～2＋，与免疫生血液理学实盐验的水质量反控制应阴性。
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RH系统血型鉴定，检测方法为直接血凝试验或抗 人球蛋白试验，检测结果以呈凝结反应为阳性 ，无凝结反应为阴性。
RH(D)阴性确认，检测方法为血凝试验、抗人球 蛋白试验，以三个不同克隆株或不同人的IgG 抗D血清进行检测，全部不凝为RH阴性，部分 凝结为D变异型。
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存量，在有效期内使用。
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ABO和Rh(D)抗血清的最低标准(卫生部）
抗血清 AnБайду номын сангаасi-A
Anti-B Anti-D
试验细胞 效价*
A1
128
A2
64
A2B
64
B
128
R1r（DdCcee) 16
亲和力( sec ) 15 30 45 15 60
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4. 建立和实施试剂的管理程序，包括： 4.1试剂的评估程序，包括生产商和供应商的（
国家规定的相应）资质，试剂的技术要求。 4.2试剂的确认程序，包括实施确认的人员、方
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抗体筛选和抗体鉴定，检测方法为直接血凝试验 、抗人球蛋白试验、聚凝胺试验。检测结果呈 无凝结反应，为抗体筛选阴性，反之，抗体阳 性。并确定其特异性。
交叉配血，检测方法为直接血凝试验、抗人球蛋 白试验、聚凝胺试验。检测结果呈无凝结、无 溶血反应为配合。
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2.对血液免疫血液学检测项目，应使用不同厂商 生产的试剂，对每项试验均要作阴阳性对照。
法、质量控制方法、接受标准、每批试剂投入 使用前应进行确认。 4.3试剂的库存管理程序，应包括试剂的贮存条 件和库存量的监控，试剂应在有效期内使用。
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5. 建立和实施实验室内部质量控制程序，其基 本要求如下：
5.1 在每次试验时，观查试剂是否有不正常外观 ，包括试剂红细胞有无明显的溶血或混浊：血 清试剂无沉淀物和颗粒或胶状物形成。
5.7应实施日常的质控试验记录，包括试验的反 应性，商业来源试剂的批号，试验日期和试验 者的签名。
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6. 建立对新的试剂进行检测程序，新的试 剂应在常规工作中试用一周，或至少做 五十份标本，包括2～3份ABO亚型和2～3 份弱D抗原。
7.完成检测后的血清或血浆标本，应在2 ～8℃的条件下保存2周。
免疫血液学实验的质量控 制
一、免疫血液学检测基本要求
1. 对血液免疫血液学检测项目、方法和结果的判 定标准如下：
ABO血型鉴定，检测方法为直接血凝试验，检测 结果以正反定型相符合方可确定其血型。如正 反定型不符，应作进一步试验。
ABO亚型鉴定，检测方法为直接血凝试验、血凝 抑制试验、吸收放散试验，根据病史和以上试 验结果，确定被检者血型。
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练习
写一份购买ABO血型试剂和红细胞试剂 的步骤说明， 并设计试剂认证的策略
免疫血液学实验的质量控制
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试剂认证的原则
注意： 试剂必须具有： ➢ 特异性 ➢ 可接受的亲和力和效价 ➢ 无污染 ➢ 微生物检测为阴性 ➢ 不引起溶血 ➢ 标准的标识识别颜色 ➢ 尽可能是单克隆
免疫血液学实验的质量控制
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说明书也要有实际运用时的考虑事项，如： ➢ 体积 ➢ 一滴的体积 ➢ 瓶子质地（玻璃/塑料） ➢ 供应和输送
➢ 如果购买试剂，需要给出派送的各个细节要求 。相同批号的试剂至少能保证用到一年。
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二、免疫血液学实验的质量控制
1、免疫血液学实验的影响因素 1.1设备 包括离心机、水浴箱、显微镜、各种冷冻
冷藏设备及其他专用设备。
免疫血液学实验的质量控制
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离心机，应使用血库专用离心机。
要注意的是离心力≠离心转速，离心力还与转子 的半径有关，标准的离心力900~1000g 。不同 的实验要求的离心力是不同的，离心力过高， 易形成亚型判断失误或假阳性
离心力/离心时间也影响实验结果：
定型、各类判读结果的试验离心15秒（1000g or 3400rpm） ；
免疫血液学实验的质量控制
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试剂必须标有： ➢ 特异性 ➢ 批号 ➢ 生产日期 ➢ 有效期 ➢ 生产商厂 ➢ 保存条件
免疫血液学实验的质量控制
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试剂的说明书中必须附有的其它信息： ➢ 使用方法 ➢ 克隆的名称/编号 ➢ 使用的限制条件 ➢ 储存标准 如果需要还可以有以下的内容： ➢ CE/FDA的证书或相关的证书
O2)，抗体筛选谱细胞，Coombs 质控细 胞 ( IgG-致敏细胞)。 反应增效剂： Liss ,LIM等。
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严格试剂管理程序，包括： 1、试剂生产商和供应商资质，生产的技术要求
。 2、试剂的确认程序，每批试剂使用前进行确认
。 3、试剂的包装和运输。 4、试剂的库存管理，包括试剂的贮存条件和库
各类洗涤细胞的试验离心60秒。
离心机每六个月应校正一次，以保证其准确性。
水浴箱使用的关键是控制其温度，有时其自带的 温度计不准确，要另用温度计测试水温。
冷藏设备要注意温度和电源，要定时记录温度，
保证温度在正常允许范围。
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1.2 试剂 常用的试剂有： 试剂抗血清抗-A, 抗-B, 抗-AB, 抗-D； 其他血型试剂；抗人球蛋白血清。 试剂红细胞： A、B细胞；筛选细胞 (O1,
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5.5 抗球蛋白试剂（抗IgG和抗C3d）应与任何 ABO血型的非致敏红细胞与相容的血清孵育后 无溶血和凝集反应；与被稀释的抗IgG(D)和红 细胞的敏感性凝集在显微镜下可见1+～2+。
5.6 抗体筛选和鉴定细胞（纯合子剂量效应）， 需用在生理盐水中反应弱的抗P和抗人球蛋白 中反应1+～2+的抗D来测定。
5.2 在每项试验中，注意试剂敏感性和特异性： ABO正定型阴阳性对照细胞反应需清晰明确： 反定型与抗A、抗B（抗AB）反应需清晰。
5.3 RH(D)血型试剂与已知的阳性和阴性质控细 胞反应清晰。
5.4 抗人球蛋白试验质控细胞与抗人球蛋白试剂
反应有1+～2＋，与免疫生血液理学实盐验的水质量反控制应阴性。
免疫血液学实验的质量控制
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RH系统血型鉴定，检测方法为直接血凝试验或抗 人球蛋白试验，检测结果以呈凝结反应为阳性 ，无凝结反应为阴性。
RH(D)阴性确认，检测方法为血凝试验、抗人球 蛋白试验，以三个不同克隆株或不同人的IgG 抗D血清进行检测，全部不凝为RH阴性，部分 凝结为D变异型。
免疫血液学实验的质量控制
存量，在有效期内使用。
免疫血液学实验的质量控制
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ABO和Rh(D)抗血清的最低标准(卫生部）
抗血清 AnБайду номын сангаасi-A
Anti-B Anti-D
试验细胞 效价*
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