环境卫生学监测采样手册
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环境卫生学监测及标本采集方法
8、医疗用品的监测
包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。
采样时间：在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。
采样方法：操作人员在认真清洁消毒手后，在净化台内 用无菌的方法，将拟检测的医疗用品：缝合针、针头、手 术刀片等小件物品投入5ml灭菌的生理盐水或营养肉汤内， 对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌 生理盐水的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml灭菌 的生理盐水溶液中。 检测方法：将采样管振打80次，用无菌吸管吸取1ml待检 样品于灭菌平皿内，加入已融化的45℃左右的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37℃温箱培养 48小时，观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。
儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室、供应 室清洁区、急诊室、化验室、 各类普通病房和房间 ≤500
≤5
≤5
III类
≤10
≤5
IV类
பைடு நூலகம்
传染病房
－
≤15
≤15
以上不得检出致病性微生物，如乙型溶血性链球菌，金黄色 葡萄球菌，沙门氏菌等。
四、所用材料
无菌吸管（0.5ml、5ml、 10ml）、 L棒、棉拭 子 、规格板 、普通琼脂平板、 10ml生理盐水等
正确留取细菌培养的临床标本
我国痰细菌培养现状
标本送检率低 结果重复性差 报告速度慢 感染菌与污染菌不易区分 药敏结果与治疗反应存在差距
咳痰标本
正确留取细菌培养的临床标本
咳痰标本不合格，你退检吗？ 如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于10个，应不做 或仅在特殊要求时做培养。 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽 分泌物污染明显”。 复旦大学中山医院的做法 痰液外观：脓性，粘脓，粘液，水样….. 痰标本质量评价：合格，不理想（建议重送） 临床上约半数咳痰标本不合格！
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测；洁净手术部
(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤 器后应进行监测；遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时 随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。
注意事项
采样前，应关好门、窗，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
四、使用中消毒液染菌量监测
图 104—1 局部百级、周围千级
2、局部千级、周围万级：手术区布放 3 点（对脚布点），周边区布放 6 点（长 边内 2 点，短边内 1 点）（图 104—2）
图 104—2 局部千级、周围万级
3、局部万级、周边十万级：手术区布放 3 点（对角布点），周边区布放 4 点（每 边内 1 点）（图 104—3）
5 10 000 级 100 000 级
手术室
（75 个/m）
（150 个/m）
IV 准洁净
5 个/（30min·90 皿）（175 个/m）
5
300 000 级
手术室
注：1.浮游法的细菌最大平均浓度采用括号内数值。细菌浓度是直接所测的结果，不是沉降 法和浮游法互相换算的结果。
2.I 级眼科专用手术室周边区按 10 000 级要求。 3.表面最大染菌数（单位：个/㎡）推荐采用涂抹法，每次采样面积为 100 ㎡。
100 级 1 000 级
手术室
（5 个/m）
（ 10 个/m）
II 标准洁净 0.75 个/（30min·90 皿） 1.5 个/（30min·90 皿） 5 1 000 级 10 000 级
手术室 （25 个/m）
（50 个/m）
III 一般洁净 2 个/（30min·90 皿） 4 个/（30min·90 皿）
医院感染管理手册--环境卫生学监测制度及方法
三十一、环境卫生学监测制度及采样检查方法包括对空气、物体表面和医护人员手消毒效果的监测，及使用中消毒剂染菌量测定。
科室每季度空气监测一次。
医院感染管理科每月对感染高风险部门的物体表面、使用中灭菌消毒剂监测一次；每季对医务人员的手、使用中消毒剂染菌量监测一次。
当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素有关时，应及时进行监测。
（一）环境卫生学采样及检查原则采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h（一般不超过2h）,若样品保存于0--4℃条件时，送检时间不得超过24h 。
（二）空气的消毒效果监测1、空气采样（1）采样要求选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。
（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。
）（2）采样高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m处。
（3）布点方法室内面积≤30㎡，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙壁1m处。
（4）采样方法放：由内外，将直径9cm普通营养琼脂平皿放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规范时间（Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5min；Ⅱ类15 min；Ⅰ类30 min）后。
收：由外内，盖上平皿盖，立即送检。
2、空气样本的检测与报告（1）检测培养将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。
（2）结果处理计算所有平板菌落数，按公式换算结果。
（3）计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿．暴露时间）（4）报告: 沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿．暴露时间）例如：2cfu/(5min·直径9cm平皿) 。
3、空气样本的结果判定（1）Ⅰ类环境：洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循ＧＢ50333．（2）Ⅱ类环境：平均每皿的菌落总数≤4cfu／(15min·直径9cm平皿)。
环境卫生学及管理监测1
与地面垂直80-150cm
9cm直径平皿暴露规定时间后，收集培养皿
37.℃±1℃恒温箱培养48h后观察结果
记录每个平皿上的菌落数 计算结果（平均每平皿的军落数）：.....≤4cfu/(15min.Ф9cm平皿）
.........≤4cfu/(5min.Ф9cm平皿）
洁净手术室静态空气净化效果的监测
。 （4）送检时间不超过6h，若样品保存于0-4度条件
时，送检时间不能超过24小时。 （5）送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取
标本送检。
（6）结果判断
• 方法一：《医疗机构消毒技术规范》A.6.3 • 平均每皿的菌落数报告：cfu/(皿.暴露时间) 1.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产
（五）检测方法
• 将平皿放在室内各采样点处，采样点可布置在地面上或 不高于地面0.8m的任意高度上；在手术区检测时应无手术 台，当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25m； 在100级区域检测时，采样口应对着气时将平板盖打开，扣放于 平板旁，暴露30min，盖好立即送检。采样后的培养皿应 在37℃条件下培养24h，并计算菌落数。
手术区： Ⅰ级 手术台两侧边至少各外推0.9m,两端至少各外
推0.4m后 （包括手术台）的区域；Ⅰ级 眼科专 用手术室手术区每边不 小于1.2m; Ⅱ级 手术台两侧边至少各外推0.6m,两端至少各外 推0.4m后 （包括手术台）的区域； Ⅲ级 手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台 ）的区域； Ⅳ级 不分手术区和周边区。 周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域 。
• （一）采样时间：洁净手术室房间清洁并擦试消 毒后，使净化空调系统达到自净时间并处于开 启 状态，然后进行测试，室内应无工作人员。
9cm直径平皿暴露规定时间后，收集培养皿
37.℃±1℃恒温箱培养48h后观察结果
记录每个平皿上的菌落数 计算结果（平均每平皿的军落数）：.....≤4cfu/(15min.Ф9cm平皿）
.........≤4cfu/(5min.Ф9cm平皿）
洁净手术室静态空气净化效果的监测
。 （4）送检时间不超过6h，若样品保存于0-4度条件
时，送检时间不能超过24小时。 （5）送检过程中如盖子不小心打开，应该重新留取
标本送检。
（6）结果判断
• 方法一：《医疗机构消毒技术规范》A.6.3 • 平均每皿的菌落数报告：cfu/(皿.暴露时间) 1.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产
（五）检测方法
• 将平皿放在室内各采样点处，采样点可布置在地面上或 不高于地面0.8m的任意高度上；在手术区检测时应无手术 台，当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25m； 在100级区域检测时，采样口应对着气时将平板盖打开，扣放于 平板旁，暴露30min，盖好立即送检。采样后的培养皿应 在37℃条件下培养24h，并计算菌落数。
手术区： Ⅰ级 手术台两侧边至少各外推0.9m,两端至少各外
推0.4m后 （包括手术台）的区域；Ⅰ级 眼科专 用手术室手术区每边不 小于1.2m; Ⅱ级 手术台两侧边至少各外推0.6m,两端至少各外 推0.4m后 （包括手术台）的区域； Ⅲ级 手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台 ）的区域； Ⅳ级 不分手术区和周边区。 周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域 。
• （一）采样时间：洁净手术室房间清洁并擦试消 毒后，使净化空调系统达到自净时间并处于开 启 状态，然后进行测试，室内应无工作人员。
环境卫生学监测及标本采集方法
环境卫生学监测及标本采集方法
三、医院各重点部门空气，物体表面，医护人员手 细菌数标准。
环境类别
范围
标准
空气
物体表面 医务人员手
（cfu/ m3） （cfu/ cm2） （cfu/ cm2）
I类
层流洁净手术室、层流洁净
病房
≤10
≤5
≤5
普通手术室、产房、新生儿室
（母婴同室病房）、早产儿室、
II类
普通保护性隔离室、供应室无 ≤200
环境卫生学监测及标本采集方法
阳性对照 黄 黄
效果判定
阴性对照 紫 紫
试验管 紫 黄
结果 灭菌认可 灭菌失败
环境卫生学监测及标本采集方法
7、内镜消毒灭菌效果监测
采样时间：消毒、灭菌后，使用前。
采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注 射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检 • 口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检。
• 计算公式：
• 菌落数/ C㎡＝ •
平均菌落数×稀释倍数 采样面积×0.2
环境卫生学监测及标本采集方法
4、透析液微生物监测
•检测方法：用无菌吸管吸取透析液进出水各2～3ml，放入 无菌试管，检测时可视透析液污染程度分别取原液或10倍稀 释液0.5ml放入2个灭菌平皿内，45 ℃ ～48 ℃的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，将平板置37 ℃培 养24小时，观察结果。
正常人的血液是无菌的，如从患者血液中检出细菌，一般 应视为病原菌（排除采集标本或其他操作过程污染），提 示有菌血症或败血症。
1、采血时间及次数 一般应在抗生素治疗前，发热初期 或高峰时抽血。伤寒患者应在发热一星期内抽血。化脓性 脑膜炎应在发热1～2天内抽血，亚急性心内膜炎的患者除 在发热期采血外，要多次抽血（24小时内3～４次）和增 加抽血量（可增至10毫升）。
三、医院各重点部门空气，物体表面，医护人员手 细菌数标准。
环境类别
范围
标准
空气
物体表面 医务人员手
（cfu/ m3） （cfu/ cm2） （cfu/ cm2）
I类
层流洁净手术室、层流洁净
病房
≤10
≤5
≤5
普通手术室、产房、新生儿室
（母婴同室病房）、早产儿室、
II类
普通保护性隔离室、供应室无 ≤200
环境卫生学监测及标本采集方法
阳性对照 黄 黄
效果判定
阴性对照 紫 紫
试验管 紫 黄
结果 灭菌认可 灭菌失败
环境卫生学监测及标本采集方法
7、内镜消毒灭菌效果监测
采样时间：消毒、灭菌后，使用前。
采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注 射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检 • 口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检。
• 计算公式：
• 菌落数/ C㎡＝ •
平均菌落数×稀释倍数 采样面积×0.2
环境卫生学监测及标本采集方法
4、透析液微生物监测
•检测方法：用无菌吸管吸取透析液进出水各2～3ml，放入 无菌试管，检测时可视透析液污染程度分别取原液或10倍稀 释液0.5ml放入2个灭菌平皿内，45 ℃ ～48 ℃的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，将平板置37 ℃培 养24小时，观察结果。
正常人的血液是无菌的，如从患者血液中检出细菌，一般 应视为病原菌（排除采集标本或其他操作过程污染），提 示有菌血症或败血症。
1、采血时间及次数 一般应在抗生素治疗前，发热初期 或高峰时抽血。伤寒患者应在发热一星期内抽血。化脓性 脑膜炎应在发热1～2天内抽血，亚急性心内膜炎的患者除 在发热期采血外，要多次抽血（24小时内3～４次）和增 加抽血量（可增至10毫升）。
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
照射强度：
普通30 W新紫外线灯辐照强≥90μW/cm2为合格 使用中紫外线灯辐照强度≥70 μW/cm2为合格 30 W高强度紫外线灯的辐射强度≥180 μW/cm2为合格 监测频率：新灯管使用前监测
使用中灯管半年监测一次。
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判定：
洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要求。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿 Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ
环境卫生学监测采样方法
五、紫外线灯照射强度监测
环境卫生学监测采样方法来自监测方法：环境卫生学监测采样方法
结果判断：
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
2020/11/23
环境卫生学监测采样方法
外科手消毒：
监测的细菌菌落总 数应≤5cfu/cm2
不能检出致病性微生物
环境卫生学监测采样方法
二、物体表面消毒效果监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
照射强度：
普通30 W新紫外线灯辐照强≥90μW/cm2为合格 使用中紫外线灯辐照强度≥70 μW/cm2为合格 30 W高强度紫外线灯的辐射强度≥180 μW/cm2为合格 监测频率：新灯管使用前监测
使用中灯管半年监测一次。
环境卫生学监测采样方法
六、环境卫生学监测结果分析流程
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判定：
洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要求。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿 Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ
环境卫生学监测采样方法
五、紫外线灯照射强度监测
环境卫生学监测采样方法来自监测方法：环境卫生学监测采样方法
结果判断：
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
2020/11/23
环境卫生学监测采样方法
外科手消毒：
监测的细菌菌落总 数应≤5cfu/cm2
不能检出致病性微生物
环境卫生学监测采样方法
二、物体表面消毒效果监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
环境卫生学监测采样方法
院感监测采样
• 【合格标准】
• 消毒后内窥镜：细菌总数小于 20cfu，不能检出致病菌
• 灭菌后内窥镜：无菌生长
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• 【方法】
• 棉签涂抹法
• 【材料】
• 10ml的无菌生理盐水
采样
• 1、在物表消毒处理后，或消毒 后4小时内进行采样
• 2、操作者取无菌棉签1支浸入无 菌生理盐水采样液当被采表面规 则且面积大于等于100平方厘米 时，用5*5平方厘米的标准灭菌 规格板内采样100平方厘米，在 规格板内横竖往返涂抹5次，并 随之转动棉签，连续采样1~4个 规格板面积。
将平板放在各采样点，与地面垂直高度 80~150cm处，打开平板盖，并扣放于平 板边缘上，暴露15min后盖好，立即送检 （琼脂底面朝上）
方法
（二）手卫生的效果监测
• 采样时间：在接触患者或从 事医疗活动前进行采样
• 【范围】 • 洗手、卫生手消毒、外科手
消毒【方法】 • 棉签涂抹法 • 【材料】 • 10ml的无菌生理盐水
• 3、当被采表面不规则（ 如门把手等）或被采表 面小于100平方厘米时， 应取其全部表面。
• 4、剪去手接触部位，将 采样端棉签装10ml采样 液的试管中，立即送检。
（四）使用中消毒剂的监测
• 【范围】
• 戊二醛、碘伏、过氧乙酸、含氯 消毒剂、酚类、醇类等液体消毒 剂
• 【方法】
• 原液吸取法
（一）空气消毒效果监测
• 医院空气中微生物含量 可以反映空气污染或洁 净的程度，是空气卫生 学的重要指标。在对经 空气传播的病原体引发 的感染、特殊环境有意 义。
非洁净区空气消毒效果监测
• 【范围】
• 消毒后内窥镜：细菌总数小于 20cfu，不能检出致病菌
• 灭菌后内窥镜：无菌生长
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• 【方法】
• 棉签涂抹法
• 【材料】
• 10ml的无菌生理盐水
采样
• 1、在物表消毒处理后，或消毒 后4小时内进行采样
• 2、操作者取无菌棉签1支浸入无 菌生理盐水采样液当被采表面规 则且面积大于等于100平方厘米 时，用5*5平方厘米的标准灭菌 规格板内采样100平方厘米，在 规格板内横竖往返涂抹5次，并 随之转动棉签，连续采样1~4个 规格板面积。
将平板放在各采样点，与地面垂直高度 80~150cm处，打开平板盖，并扣放于平 板边缘上，暴露15min后盖好，立即送检 （琼脂底面朝上）
方法
（二）手卫生的效果监测
• 采样时间：在接触患者或从 事医疗活动前进行采样
• 【范围】 • 洗手、卫生手消毒、外科手
消毒【方法】 • 棉签涂抹法 • 【材料】 • 10ml的无菌生理盐水
• 3、当被采表面不规则（ 如门把手等）或被采表 面小于100平方厘米时， 应取其全部表面。
• 4、剪去手接触部位，将 采样端棉签装10ml采样 液的试管中，立即送检。
（四）使用中消毒剂的监测
• 【范围】
• 戊二醛、碘伏、过氧乙酸、含氯 消毒剂、酚类、醇类等液体消毒 剂
• 【方法】
• 原液吸取法
（一）空气消毒效果监测
• 医院空气中微生物含量 可以反映空气污染或洁 净的程度，是空气卫生 学的重要指标。在对经 空气传播的病原体引发 的感染、特殊环境有意 义。
非洁净区空气消毒效果监测
• 【范围】
环境卫生学监测及标本采集方法(PPT 69页)
常用消毒剂中和剂及其浓度表
消毒剂
甲醛
戊二醛
过氧乙酸 含氯消毒剂类
季铵盐类
碘（溴）制剂 酚类 氯已定 汞制剂 醇类 酸类 碱类
中和剂及其浓度
亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 氨水 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
甘氨酸（1.0%）；赖氨酸 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提
基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂. 8.送检标本应注明来源和检验目的
正确留取细菌培养的临床标本
2、抽血部位及抽血量 以无菌方法从患者肘静脉、股动 脉采血。采血量以培养基的1/10为宜，成人一次采血5～ 10ｍｌ，婴儿为1～2ｍｌ，血液抽出后，立即以无菌手续 注入血培养瓶，充分混合后送检。
采血培养前质量保证: 静脉穿刺程序 1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 >30秒钟 2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点
三、医院各重点部门空气，物体表面，医护人员手 细菌数标准。
环境类别
范围
标准
空气
物体表面 医务人员手
（cfu/ m3） （cfu/ cm2） （cfu/ cm2）
I类
层流洁净手术室、层流洁净
病房
≤10
≤5
≤5
普通手术室、产房、新生儿室
（母婴同室病房）、早产儿室、
II类
普通保护性隔离室、供应室无 ≤200
医院环境卫生学监测
医院环境卫生学监测
采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在物体表面划过10次后送检培养。
结果计算：
N
物体表面细菌菌落总数（cfu/cm2）=
AT
式中A：平板面积：cm2
T：平板划过物体表面时间___
N：平均菌落数cfu/平皿
C、医护人员手采样及检查方法：
采样时间：选择医护人员进行医疗活动之前或消毒处理后进行采样。
采样方法：用9cm直径普通营养琼脂平板在医护人员手指尖、手掌、指缝等部位分别擦拭后送检培养。
结果计算：N
医护人员手细菌菌落总数（cfu/cm2）=
AT
式中A：平板面积：cm2
T：平板擦拭手部表面时间___
N：平均菌落数cfu/平皿
五）监测结果处理
监测结果应当及时反馈给相关部门，并进行分析处理。
对于超标的部门，应当制定整改措施，并进行复查，直至符合标准为止。
对于重大问题，应当及时上报上级主管部门。
同时，监测结果应当作为医院环境卫生管理的重要依据，加强对医护人员的培训和管理，保障医院环境卫生的安全。
环境卫生学监测及标本采集方法
戊二醛 过氧乙酸 含氯消毒剂类
季铵盐类
碘（溴）制剂 酚类
氯已定
汞制剂 醇类 酸类
卵磷脂（1.0%～2.0%）
硫代硫酸钠；亚硫酸钠；半胱氨脂（0.1%） 吐温－80 碱类
碱类
酸类
用无菌吸管吸取中和采样液0.2ml，转种于营养琼脂平板中， 用L棒涂抹于普通琼脂平板，置36 ℃温箱培养48小时观察结 果。
效果判定
阳性对照 黄 黄 阴性对照 紫 紫 试验管 紫 黄 结果 灭菌认可 灭菌失败
7、内镜消毒灭菌效果监测
采样时间：消毒、灭菌后，使用前。 采样方法：监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注 射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检 口注入，用无菌试管从活检出口收集，及时送检。 检测方法：将送检液充分震荡，取0.5ml，加入2只直 径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45℃左 右营养琼脂15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于 35℃培养48小时后计数。 细菌菌落数/件＝2个平皿菌落数平均值×20
五、采样方法
1、手卫生监测： 采样时间：一般情况下每季度监测一次。当 发生医院感染流行、高度怀疑或确定与医务人员 手的污染有关时，应及时进行监测。常规监测在 洗手后从事治疗操作前，特殊监测随时采样。 采样方法：棉拭子涂布法和直接压印法，
棉拭子涂布法
被检人五指并拢，用浸湿灭菌生理盐水的棉 拭子在医护人员手指曲面从指根到指端往返涂擦 2次，并随之转动采样棉拭子，采完后剪去操作 者手接触部分，将棉拭子投入10ml灭菌生理盐 水试管内立即送检。
8、医疗用品的监测
包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。
采样时间：在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。
采样方法：操作人员在认真清洁消毒手后，在净化台内 用无菌的方法，将拟检测的医疗用品：缝合针、针头、手 术刀片等小件物品投入5ml灭菌的生理盐水或营养肉汤内， 对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌 生理盐水的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml灭菌 的生理盐水溶液中。 检测方法：将采样管振打80次，用无菌吸管吸取1ml待检 样品于灭菌平皿内，加入已融化的45℃左右的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37℃温箱培养 48小时，观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。
环境卫生学采样
卫生手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤10cfu/cm2
外科手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤5cfu/cm2
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
准备用物：紫外线强度指示卡、拉杆、墨镜、 计时器。
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
监测方法：开启紫外线灯5分钟后，将紫外线强
度指示卡）置于紫外线灯下垂直1米处，有图案一面 朝上，照射1分钟，观察指示卡色块的颜色，将其与 标准色块比较，读出照射强度。 结果判定： 使用中（普通30W）紫外线灯辐照强度≥70uW/cm2为 合格。 新领紫外线灯辐照强度≥90uW/cm2为合格。
一、环境卫生学监测 空气监测结果判定
2、其他部门：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人 流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、急诊室、 化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房、 传染科空气中的细菌菌落总数≤4cfu/（5min·直径9cm 平皿）。
一、环境卫生学监测 空气监测注意事项
采样前彻底湿打扫室内卫生，关闭门窗，紫外 线照射1小时后，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
紫外线灯使用注意事项
1、保持紫外线灯表面清洁，每周用75%-80%乙 醇棉球擦拭一次。发现灯管表面有灰尘、油 污时，及时擦拭。
2、消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥， 减少尘埃和水雾。温度＜20 ℃或＞40℃时， 或相对湿度＞60%时，应适当延长照射时间。
3、室内有人时不应使用紫外线灯照射消毒。
清洁、消毒与灭菌效果监测
清洁、消毒与灭菌效果监测
一、环境卫生学监测 二、消毒灭菌效果监测
一、环境卫生学监测
1、空气的采样及结果判定。 2、物表的采样及结果判定。 3、手的采样及结果判定。
二、消毒灭菌效果监测
外科手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤5cfu/cm2
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
准备用物：紫外线强度指示卡、拉杆、墨镜、 计时器。
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
监测方法：开启紫外线灯5分钟后，将紫外线强
度指示卡）置于紫外线灯下垂直1米处，有图案一面 朝上，照射1分钟，观察指示卡色块的颜色，将其与 标准色块比较，读出照射强度。 结果判定： 使用中（普通30W）紫外线灯辐照强度≥70uW/cm2为 合格。 新领紫外线灯辐照强度≥90uW/cm2为合格。
一、环境卫生学监测 空气监测结果判定
2、其他部门：儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人 流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、急诊室、 化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房、 传染科空气中的细菌菌落总数≤4cfu/（5min·直径9cm 平皿）。
一、环境卫生学监测 空气监测注意事项
采样前彻底湿打扫室内卫生，关闭门窗，紫外 线照射1小时后，在无人走动的情况下，静止 10分钟后采样。
紫外线灯使用注意事项
1、保持紫外线灯表面清洁，每周用75%-80%乙 醇棉球擦拭一次。发现灯管表面有灰尘、油 污时，及时擦拭。
2、消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥， 减少尘埃和水雾。温度＜20 ℃或＞40℃时， 或相对湿度＞60%时，应适当延长照射时间。
3、室内有人时不应使用紫外线灯照射消毒。
清洁、消毒与灭菌效果监测
清洁、消毒与灭菌效果监测
一、环境卫生学监测 二、消毒灭菌效果监测
一、环境卫生学监测
1、空气的采样及结果判定。 2、物表的采样及结果判定。 3、手的采样及结果判定。
二、消毒灭菌效果监测
环境卫生学采样
手的采样方法：被检人五指并拢，手心向上，用浸有 10毫升生理盐水棉拭子，在被检测者双手手指屈面 从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约 30cm2,并随之转动采样棉拭子，将棉拭子投入试管内， 立即送检。
一、环境卫生学监测 物表、手消毒效果
注意事项：棉试子不能倒置，要有对照监测。
一、环境卫生学监测 手消毒效果结果判定
二、消毒灭菌效果监测 消毒剂、灭菌剂监测结果判断
使用中灭菌用消毒液；无细菌生长；使用中皮 肤黏膜消毒液染菌量：≤10 CFU/ml；其中使 用中消毒液染菌量≤100 CFU/ml。
二、消毒灭菌效果监测 清洁用品的消毒效果监测
采样时间：消毒后、使用前进行监测
结果判定：未检出致病菌为消毒合格。
卫生手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤10cfu/cm2
外科手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤5cfu/cm2
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
准备用物：紫外线强度指示卡、拉杆、墨镜、 计时器。
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
监测方法：开启紫外线灯5分钟后，将紫外线强
度指示卡）置于紫外线灯下垂直1米处，有图案一面 朝上，照射1分钟，观察指示卡色块的颜色，将其与 标准色块比较，读出照射强度。 结果判定： 使用中（普通30W）紫外线灯辐照强度≥70uW/cm2为 合格。 新领紫外线灯辐照强度≥90uW/cm2为合格。
布皿应从内向外放置，取皿应从外向内取，减 少人员流动，减少污染。
须有对照皿。 采样前衣帽整齐并进行手卫生，细菌培养要求
无菌操作，取皿、放皿不要跨域无菌区。
插入视屏
一、环境卫生学监测 物体表面效果监测
物体表面的消毒效果监测：主要高频接触物表
温度计 氧气流量计 控制台 血压计袖带 呼叫按钮 床架和控制器 电话 床头桌 床上托盘 电视遥控器 床上用台灯 床边便桶 输液泵和支架
一、环境卫生学监测 物表、手消毒效果
注意事项：棉试子不能倒置，要有对照监测。
一、环境卫生学监测 手消毒效果结果判定
二、消毒灭菌效果监测 消毒剂、灭菌剂监测结果判断
使用中灭菌用消毒液；无细菌生长；使用中皮 肤黏膜消毒液染菌量：≤10 CFU/ml；其中使 用中消毒液染菌量≤100 CFU/ml。
二、消毒灭菌效果监测 清洁用品的消毒效果监测
采样时间：消毒后、使用前进行监测
结果判定：未检出致病菌为消毒合格。
卫生手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤10cfu/cm2
外科手消毒：监测的细菌菌落总数 应≤5cfu/cm2
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
准备用物：紫外线强度指示卡、拉杆、墨镜、 计时器。
二、消毒、灭菌效果监测 紫外线辐照强度监测
监测方法：开启紫外线灯5分钟后，将紫外线强
度指示卡）置于紫外线灯下垂直1米处，有图案一面 朝上，照射1分钟，观察指示卡色块的颜色，将其与 标准色块比较，读出照射强度。 结果判定： 使用中（普通30W）紫外线灯辐照强度≥70uW/cm2为 合格。 新领紫外线灯辐照强度≥90uW/cm2为合格。
布皿应从内向外放置，取皿应从外向内取，减 少人员流动，减少污染。
须有对照皿。 采样前衣帽整齐并进行手卫生，细菌培养要求
无菌操作，取皿、放皿不要跨域无菌区。
插入视屏
一、环境卫生学监测 物体表面效果监测
物体表面的消毒效果监测：主要高频接触物表
温度计 氧气流量计 控制台 血压计袖带 呼叫按钮 床架和控制器 电话 床头桌 床上托盘 电视遥控器 床上用台灯 床边便桶 输液泵和支架
环境卫生学监测手册(新)
环境卫生学监测手册医院感染管理办公室2018年11月目录紫外线灯消毒效果监测................................................................... - 1 -空气消毒效果监测 .......................................................................... - 3 -物体表面的消毒效果监测............................................................. - 11 -手的消毒效果监测 ........................................................................ - 15 -消毒剂的监测................................................................................ - 18 -皮肤的消毒效果监测 .................................................................... - 20 -储血冰箱的监测............................................................................ - 21 -血液透析及相关治疗用水的监测 ................................................. - 22 -软式内镜的清洗、消毒、灭菌效果的监测 .................................. - 23 -生物安全柜空气生物监测............................................................. - 26 -医用织物消毒效果监测................................................................. - 27 -消毒供应中心清洗消毒灭菌监测 ................................................. - 29 -医院餐厅消毒效果监测................................................................. - 35 -紫外线灯消毒效果监测一、监测前准备：操作者：穿着工作衣，戴口罩、帽子及手套等，尽量减少皮肤暴露。
环境卫生学监测及标本采集方法
8、医疗用品的监测
包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。
采样时间：在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。
采样方法：操作人员在认真清洁消毒手后，在净化台内 用无菌的方法，将拟检测的医疗用品：缝合针、针头、手 术刀片等小件物品投入5ml灭菌的生理盐水或营养肉汤内， 对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌 生理盐水的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml灭菌 的生理盐水溶液中。 检测方法：将采样管振打80次，用无菌吸管吸取1ml待检 样品于灭菌平皿内，加入已融化的45℃左右的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37℃温箱培养 48小时，观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。
菌落数/ml＝
平均菌落数×稀释倍数 0.2
结果判断
• 使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml，不得检出致 病微生物。 • 无菌器材保存液必须无菌生长。
6、压力蒸汽灭菌效果监测
指示菌：嗜热脂肪杆菌芽胞（产品应根据厂家说明 书在有效期内使用）
方法：灭菌完毕，取出自含式生物指示物，至少冷却10 分钟以上，将安瓿折断或挤破，让管内溴甲酚紫蛋白胨 水培养基与嗜热脂肪杆菌芽胞菌片融为一体，同时将一 未经灭菌的生物指示物一同培养，56 ℃ 48小时后进行灭 菌效果判定。
采血培养前质量保证: 静脉穿刺程序 1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 >30秒钟 2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点 向外画圈消毒,直径>3cm 3.70%酒精脱碘 培养瓶接种程序 1.70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待60秒 2. 用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然 后注入血液。
戊二醛 过氧乙酸 含氯消毒剂类
季铵盐类
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IV类环境：普通门（急）诊及其检查 室、治疗室；感染性疾病科门诊和病 区
物体表面平均菌落数： I类环境：≤5cfu/cm2 II类环境：≤5cfu/cm2
III类环境：≤10cfu/cm2 IV类环境≤10cfu/cm2
小型物体表面的结果计算， 用cfu/件表示
三、空气消毒效果监测采样方法
结果判断：
照射强度：
普通30 W新紫外线灯辐照强≥90μW/cm2为合格 使用中紫外线灯辐照强度≥70 μW/cm2为合格 30 W高强度紫外线灯的辐射强度≥180 μW/cm2为合格 监测频率：新灯管使用前监测
使用中灯管半年监测一次。
六、环境卫生学监测结果分析流程
一、医务要员手消毒效果监测采样
七步洗手法洗手2-3次后采样 （卫生手消毒） 手术室医务人员落实外科洗手和手消毒方法后采样 （外科手消毒）
采样菌菌落总数 应≤10cfu/cm2
外科手消毒：
监测的细菌菌落总 数应≤5cfu/cm2
消毒方法是否正确。 规范采集标本的意义： 采集标本准确，无污染，培养结果才准
确
采样前准备：
环境准备：物表清洁、消毒
物品准备： 检验科准备：培养皿，无菌试管、无菌棉拭子等
科室准备：无菌镊子、无菌剪刀、无菌棉签、无 菌手套、酒精灯、打火机、胶布、笔等
操作者准备：着装整齐、口罩、帽子、手套、
监测方法
洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）
未采用洁净技术净化空气的房间采用平板暴露法
将普通营养琼脂平皿（φ９０ｍｍ）放置各采样点， 采样高度为距地面０.８ｍ－１.５ｍ
采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时 间（I类环境暴露30min,Ⅱ类环境暴露１５ｍｉｎ， Ⅲ、Ⅳ类环境暴露５ｍｉｎ）后盖上平皿及时送检。
环境卫生学监测采样方法
院院感办
赵金凤
北仑大港医
主要内容：
一、手消毒效果监测采样方法 二、物体表面消毒效果监测采样方法 三、空气消毒效果监测采样方法 四、使用中消毒液染菌量监测采样方法 五、紫外线灯管强度监测方法 六、环境卫生学监测结果分析流程
环境卫生学监测的目的： 监测消毒效果是否达到标准要求，追寻
不能检出致病性微生物
二、物体表面消毒效果监测采样方法
物体表面消毒效果监测结果判定
医院环境分类：
I类环境：洁净手术部和其它洁净场所
II类环境：非洁净手术部、产房、导 管室、血液病病区、烧伤病区、重症 监护病区、新生儿室
III类环境：母婴同室、消毒供应中心 的检查包装灭菌区和无菌物品存放区 、血液透析中心、其它普通住院病区
对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂，
使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细
菌检测，未检出细菌为合格。
结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ
五、紫外线灯照射强度监测
监测方法：
换高效过滤器后应进行监测 遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并
进行相应致病微生物的检测。
注!医疗环境应强调通风
四、使用中消毒液染菌量监测
采样方法：
用无菌吸管吸取使用中消毒液１ｍｌ，加入９ｍ ｌ含有相应中和剂的采样管。
采样后１ｈ内送检（4小时检测)。 使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应每月 进行监测。
采样方法
结果判定：
洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要求。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿
Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测 洁净手术部(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更
物体表面平均菌落数： I类环境：≤5cfu/cm2 II类环境：≤5cfu/cm2
III类环境：≤10cfu/cm2 IV类环境≤10cfu/cm2
小型物体表面的结果计算， 用cfu/件表示
三、空气消毒效果监测采样方法
结果判断：
照射强度：
普通30 W新紫外线灯辐照强≥90μW/cm2为合格 使用中紫外线灯辐照强度≥70 μW/cm2为合格 30 W高强度紫外线灯的辐射强度≥180 μW/cm2为合格 监测频率：新灯管使用前监测
使用中灯管半年监测一次。
六、环境卫生学监测结果分析流程
一、医务要员手消毒效果监测采样
七步洗手法洗手2-3次后采样 （卫生手消毒） 手术室医务人员落实外科洗手和手消毒方法后采样 （外科手消毒）
采样菌菌落总数 应≤10cfu/cm2
外科手消毒：
监测的细菌菌落总 数应≤5cfu/cm2
消毒方法是否正确。 规范采集标本的意义： 采集标本准确，无污染，培养结果才准
确
采样前准备：
环境准备：物表清洁、消毒
物品准备： 检验科准备：培养皿，无菌试管、无菌棉拭子等
科室准备：无菌镊子、无菌剪刀、无菌棉签、无 菌手套、酒精灯、打火机、胶布、笔等
操作者准备：着装整齐、口罩、帽子、手套、
监测方法
洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）
未采用洁净技术净化空气的房间采用平板暴露法
将普通营养琼脂平皿（φ９０ｍｍ）放置各采样点， 采样高度为距地面０.８ｍ－１.５ｍ
采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时 间（I类环境暴露30min,Ⅱ类环境暴露１５ｍｉｎ， Ⅲ、Ⅳ类环境暴露５ｍｉｎ）后盖上平皿及时送检。
环境卫生学监测采样方法
院院感办
赵金凤
北仑大港医
主要内容：
一、手消毒效果监测采样方法 二、物体表面消毒效果监测采样方法 三、空气消毒效果监测采样方法 四、使用中消毒液染菌量监测采样方法 五、紫外线灯管强度监测方法 六、环境卫生学监测结果分析流程
环境卫生学监测的目的： 监测消毒效果是否达到标准要求，追寻
不能检出致病性微生物
二、物体表面消毒效果监测采样方法
物体表面消毒效果监测结果判定
医院环境分类：
I类环境：洁净手术部和其它洁净场所
II类环境：非洁净手术部、产房、导 管室、血液病病区、烧伤病区、重症 监护病区、新生儿室
III类环境：母婴同室、消毒供应中心 的检查包装灭菌区和无菌物品存放区 、血液透析中心、其它普通住院病区
对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂，
使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细
菌检测，未检出细菌为合格。
结果判断
灭菌用消毒液的菌落总数应为０ｃｆｕ／ｍｌ 皮肤粘膜消毒液的菌落总数≤１０ｃｆｕ／ｍｌ 消毒用消毒液的菌落总数≤１００ｃｆｕ／ｍｌ
五、紫外线灯照射强度监测
监测方法：
换高效过滤器后应进行监测 遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并
进行相应致病微生物的检测。
注!医疗环境应强调通风
四、使用中消毒液染菌量监测
采样方法：
用无菌吸管吸取使用中消毒液１ｍｌ，加入９ｍ ｌ含有相应中和剂的采样管。
采样后１ｈ内送检（4小时检测)。 使用中消毒剂应每季度进行监测，灭菌剂应每月 进行监测。
采样方法
结果判定：
洁净手术部和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数符合 ＧＢ５０３３３的要求。
Ⅱ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／１５ｍｉｎ·平皿
Ⅲ、Ⅳ类区域：细菌总数≤４ｃｆｕ／５ｍｉｎ·平皿
监测频度 医院应对感染高风险部门每季度进行监测 洁净手术部(室)及其他洁净场所.新建与改建验收时以及更