细菌培养采样方法PPT课件
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微生物标本的正确采集运送及注意事项PPT课件
4
采集原则与要求
01
02
03
04
无菌操作
采集过程中应严格遵守无菌操 作原则，避免污染标本。
正确选择采集部位
根据不同感染类型选择相应的 采集部位，如呼吸道、泌尿道
、伤口等。
采集足量标本
确保采集到足够数量的微生物 ，以满足后续实验需求。
及时送检
标本采集后应尽快送至实验室 进行检测，避免延误诊断和治
疗。
确保采集顺利进行。
PART 02
微生物标本采集方法
REPORTING
2024/1/28
7
空气微生物采集
采样时间选择
通常在清洁后和消毒前进 行空气采样，避免人为因 素干扰。
2024/1/28
采样高度
距离地面1.5米左右的高度 进行采样，以反映室内空 气污染情况。
采样方法
使用空气微生物采样器， 设置合适的采样流量和时 间，进行空气微生物的收 集。
2024/1/28
5
采集前准备工作
了解患者病情
熟悉患者病史、症状、 体征等，以便选择合适
的采集部位和方法。
2024/1/28
准备采集用品
根据采集部位和需要准 备相应的采集用品，如 无菌棉签、试管、培养
基等。
消毒处理
与患者沟通
对患者采集部位及周围 皮肤进行消毒处理，减
少污染可能性。
6
向患者解释采集目的和 过程，取得患者配合，
标本处理
标本保存
根据标本类型选择合适的处理方法，如涂 片、培养、药敏试验等。
按照相关规定妥善保存标本，确保标本在有 效期内可用于复检或质量控制。
2024/1/28
17
常用检测方法介绍
采集原则与要求
01
02
03
04
无菌操作
采集过程中应严格遵守无菌操 作原则，避免污染标本。
正确选择采集部位
根据不同感染类型选择相应的 采集部位，如呼吸道、泌尿道
、伤口等。
采集足量标本
确保采集到足够数量的微生物 ，以满足后续实验需求。
及时送检
标本采集后应尽快送至实验室 进行检测，避免延误诊断和治
疗。
确保采集顺利进行。
PART 02
微生物标本采集方法
REPORTING
2024/1/28
7
空气微生物采集
采样时间选择
通常在清洁后和消毒前进 行空气采样，避免人为因 素干扰。
2024/1/28
采样高度
距离地面1.5米左右的高度 进行采样，以反映室内空 气污染情况。
采样方法
使用空气微生物采样器， 设置合适的采样流量和时 间，进行空气微生物的收 集。
2024/1/28
5
采集前准备工作
了解患者病情
熟悉患者病史、症状、 体征等，以便选择合适
的采集部位和方法。
2024/1/28
准备采集用品
根据采集部位和需要准 备相应的采集用品，如 无菌棉签、试管、培养
基等。
消毒处理
与患者沟通
对患者采集部位及周围 皮肤进行消毒处理，减
少污染可能性。
6
向患者解释采集目的和 过程，取得患者配合，
标本处理
标本保存
根据标本类型选择合适的处理方法，如涂 片、培养、药敏试验等。
按照相关规定妥善保存标本，确保标本在有 效期内可用于复检或质量控制。
2024/1/28
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常用检测方法介绍
医院环境微生物采样方法及注意事项PPT课件
注意：采样时应无菌操作，正确选用中和剂，采样后1 小时内检测。
五、医用物品的实验室监测
由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医 院感染的一个主要途径。 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在 危险因素。如果对污染的医疗物品操作不当， 对医务工作者也是一个危险因素。 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
六、灭菌质量监测（压力蒸汽 灭菌的监测）
（一）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录 灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。 （二）化学监测法：应进行包外、包内化学指示 物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时， 应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品 旁进行化学监测。 （三）生物监测法：生物指示剂有芽孢悬液、芽 孢菌片以及菌片与培养基混装（自含式）的指 示管。
医院环境微生物采样方法及注 意事项
院感科
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空 气、物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施： 一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施。 二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为； 1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
五、医用物品的实验室监测
由外科手术、创伤性操作的对病人感染也是医 院感染的一个主要途径。 如果医疗物品的消毒不够完善，对病人是潜在 危险因素。如果对污染的医疗物品操作不当， 对医务工作者也是一个危险因素。 对医疗物品尤其是医疗器械消毒十分重要。
六、灭菌质量监测（压力蒸汽 灭菌的监测）
（一）物理监测法：每次灭菌应连续监测并记录 灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。 （二）化学监测法：应进行包外、包内化学指示 物监测。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时， 应直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品 旁进行化学监测。 （三）生物监测法：生物指示剂有芽孢悬液、芽 孢菌片以及菌片与培养基混装（自含式）的指 示管。
医院环境微生物采样方法及注 意事项
院感科
卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空 气、物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
第三十六条 出现医院感染流行或暴发趋势时，应采取下列 控制措施： 一、临床科主必须及时查找原回，协助调查和执行控制措施。 二、医院感染管理科必须及时进行流行病学调查处理，基本 步骤为； 1、证实流行或暴发 2、查找感染源：对感染病人、接触者、可疑传染源、环境、 物品、医务人员及陪护人员等进行病原学检查。 3、查找引起感染的因素 4、制定和组织落实有效的控制措施 5、分析调查资料 6、写出调查报告。
微生物标本的采集方法(共52张PPT)
室内面积＞30㎡设4角及中央5点均距墙壁1米
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒，法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取，涂血擦穿，刺否皮肤则2遍，不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道：吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积，标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换，建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本，病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量：间≤1、00cf采u／m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则
无1、关采物样品时不间得段进：入在手消术毒室处，理洁后净，区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境：洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级：
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒；
☂手术器械、穿刺针等：无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温（25℃）---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如地面、墙壁、台
面）进行培养。到了1970年，CDC和美国医院协会（AHA）主张 停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。
标本采集PPT课件
非越多越好，超过一定的采血量会稀释培养瓶内 的肉汤，影响检测结果。
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
温即可，温度过低会导致对温度敏感的细菌死亡。
培
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、
凝血等其它标本要高，所以要最先采集血培养
标本
1、成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每
养
血培养瓶（厌氧优先） 凝血试管（蓝色） 其 它有抗凝剂管（黑-绿-紫） 无添加剂管（红色，
处理程序
1、护士发现采集标本错误，立即停 止送检，重新采集标本，并做好解释。 2、发现标本有误或检验结果有质疑， 立即核查，通知医生，做好解释，重 新采集标本。 各类标本在采集、暂存与运送过程中 发生标本撒漏、标本容器破损等紧急 意外事件时，立即按医疗垃圾处理标 本，重新采集标本。
谢谢
苏朦朦 2017/11/26
22
2024/5/22
要看懂胸水的报告，首先要分清是漏出液还是渗出液
成功项胸目水展示
漏出液可见于：充血性心力衰竭、上腔静脉阻塞、缩窄性 心包炎、肝硬化、肾病综合征、急性肾小球肾炎、腹膜透 析、粘液性水肿、药物过敏和放射反应等。
渗出液又可分： 1.浆液性：①感染性疾病：结核性胸膜炎，肺炎、病毒、真菌和寄生 虫感染；②恶性肿瘤；③肺栓塞；④结缔组织疾病；⑤Meigs综合征 等。 2.脓胸：①结核性脓胸；②肺部感染引起脓胸；③外伤、食管穿孔、 气胸、胸腔穿刺或术后继发化脓性感染等。 3.血胸：①恶性肿瘤；②外伤；③血气胸；④胸主动脉瘤破裂；⑤肺 栓塞等。 4.乳糜胸：①外伤致胸导管破裂；②丝虫病；③肿瘤致胸导管阻塞等。
血培养，30分钟内完成3套血培养的采集，采集
后立即进行抗菌药的经验治疗。如果24小时内报
告阴性，则继续采集2套血培养。
年度工血作液概述
医院常规空气细菌培养PPT课件
• （10）收取平皿；
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
• （11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点， 放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边 点上的平皿；
医院常规空气细菌培养
10
• 物体表面采样
医院常规空气细菌培养
11
• 1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。
•
2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表
面；被采表面≥100 c㎡，取100 c㎡。
7
• 1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
•
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、
直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分
别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东
南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、
试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
•
(3)剪指甲、洗手；
取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放
相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂
直高度80一150cm;
医院常规空气细菌培养
9
• (6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；
• (7）暴露5分钟；
• (8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采 样人及采样时环境条件（如湿度、温度）
• (9）看表、5分钟；
4、布点方法，室内面积≤30m 2，设一条对角线上取3 点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞ 30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北 点均距墙lm.
医院常规空气细菌培养
2
• 1.面积≤30 m2，设一条对角线取三点，即中间一 点，两端各距墙1米处各取一点（图1)
医院常规空气细菌培养
拭子放人装l0ml采样液的试管中； • （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）
微生物标本检验的采集(共77张PPT)
【标本采集注意事项】
• ①采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注 入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。因为研究已证实，2～3份血培养足以 检测所有的菌血症和真菌血症。
• ②入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。
• ③对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒 战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
•
皮肤消毒程序
• 严格按以下三步法进行：
• ①75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
•
②用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2%碘酊作用30s或碘伏作用
60s，从穿刺点向外以1.5～3cm直径画圈进行消毒
• ③75％酒精脱碘。
•
对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺
支气管刷直接取得标本。 • 3.胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，
有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
• 4.管穿刺法：主要用于厌氧菌培养 • * 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到
刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
【标本采集注意事项】
【标本的送检地点】 • 检验科微生物室，非正常上班时间送检验
科急诊化验室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢 出，避免细菌污染。
上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目 • 上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真
菌涂片、结核菌涂片。 二、标本采集
【标本采集前的注意事项】
• 应在抗生素应用前或停药一周后采集标本 ，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应 用前采集。
医院常规空气细菌培养(自然沉降法)采样方法ppt课件
传染病科及病房。
10
4
四、采样方法
用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖 后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5 分钟后，送检培养。
5Leabharlann 9厘米直径普通琼脂平皿6
放置方法
7
五、结果分析
I类区域： ≦4.0cfu/(30min)·90mm II类区域： ≦4.0cfu/(15min)·90mm III类区域： ≦4.0cfu/(5min)·90mm
8
六、附录
Ⅰ类区域： 层流洁净手术室、层流洁净病房（参
照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、 烧伤病房、重症监护病房。
9
Ⅲ类区域： 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换
药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化 验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：
医院常规空气细菌培养 （自然沉降法）采样方法
1
一、采样时间
选择消毒处理后与进行医疗活动之前采 样
。 二、采样高度
与地面垂直高度80-150厘米。
2
三、布点方法
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三 点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一 点。
3
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南， 北距墙均1
10
4
四、采样方法
用9厘米直径普通琼脂平皿，打开盖 后面朝下斜扣到底盘，在采样点准确暴露5 分钟后，送检培养。
5Leabharlann 9厘米直径普通琼脂平皿6
放置方法
7
五、结果分析
I类区域： ≦4.0cfu/(30min)·90mm II类区域： ≦4.0cfu/(15min)·90mm III类区域： ≦4.0cfu/(5min)·90mm
8
六、附录
Ⅰ类区域： 层流洁净手术室、层流洁净病房（参
照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：
普通手术室、产房、婴儿室、早产儿 室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、 烧伤病房、重症监护病房。
9
Ⅲ类区域： 儿科病房、妇产科检查室、注射室、换
药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化 验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：
医院常规空气细菌培养 （自然沉降法）采样方法
1
一、采样时间
选择消毒处理后与进行医疗活动之前采 样
。 二、采样高度
与地面垂直高度80-150厘米。
2
三、布点方法
1.面积≤30 m2，设一条对角线取三 点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一 点。
3
2．室内面积>30m2，设两条对角线，东， 西，南，北，中取五点，其中东，西，南， 北距墙均1
细菌的培养及鉴定 ppt课件
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
抗酸染色步骤
1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
抗酸染色步骤
2、染色包括初染、脱色、复染三步。
初染
脱色
复染
冲洗
冲洗
石炭酸复红维持 3-5’ 3%盐酸酒精30 ’’ ~1’
冲洗
干燥 油镜观察
细菌的培养及鉴定
美蓝复染1 ’
抗酸染色结果
抗酸菌呈红色， 常堆积成团， 排列无序， 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
细菌培养及鉴定
细菌的培养及鉴定
标本采集原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂 5.采样后立即送检 6.送检标本应注明细菌来的培源养及和鉴定检验目的
咳痰方法
病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群 病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰 以清晨第二口痰为佳 标本采集后放置时间不超过2小时
细菌的培养及鉴定
清洁中段尿液
尽量取早晨第一次尿液 嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水 女性病人 ➢收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水
冲洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿 男性病人 ➢翻转包皮，清洗尿道口 ➢排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿
采集标本后立即送检！
细菌的培养及鉴定
常用的培养基种类和用途
细菌的培养及鉴定
革兰染色步骤
涂片包括涂片、干燥、固定三步。
涂片
干燥
固定
细菌的培养及鉴定
固定的目的：
使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘 得更牢固； 可改变菌体对染料的通透性； 加热固定可杀死细菌，比较安全。
医院常规空气细菌培养ppt
流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。
4、细菌菌落总数检查，
物体表面细菌菌落总数（cfu /
c㎡）=平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍
数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准
面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放 在被检平面物体表面；
(6)点燃酒精灯；
(7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体 表面”的试管，打开试管塞；
（15)对于曲线物体、小型物体等则（门 把手等）采用棉拭子直接涂抹物体的方法 采样；
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、 标记清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢， 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支 在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动 采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子 放人装有l0ml采样液的试管内送检。采样 面积按平方厘米（cm ²）计算。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上 取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。 取出3个培养皿，将培养皿翻转放在采样点 上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、 中；或东南、西南、东北、西北、中5点， 其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。 摆放相应高度的凳子或治疗车、桌，采样 高度与地面垂直高度80一150cm;
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。
Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。
4、细菌菌落总数检查，
物体表面细菌菌落总数（cfu /
c㎡）=平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍
数
采样面积（c㎡)
5、操作步骤与质量标准
面≥100cm²，取100cm²；
(5)将5 cm² x 5 cm²的灭菌规格板，放 在被检平面物体表面；
(6)点燃酒精灯；
(7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体 表面”的试管，打开试管塞；
（15)对于曲线物体、小型物体等则（门 把手等）采用棉拭子直接涂抹物体的方法 采样；
6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、 标记清楚明确。
医护人员手采样
1、采样时间，在接触病人、从事医疗活 动前进行采样。
2、采样面积及方法，被检人五指并拢， 将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支 在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两 次（一只手涂擦面积30cm² )，并随之转动 采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子 放人装有l0ml采样液的试管内送检。采样 面积按平方厘米（cm ²）计算。
(3)剪指甲、洗手；
(4）选择消毒处理后与进行医疗活动
(5）室内面积＜30m2设一条对角线上 取3点，即中心一点，两端各距离墙1 m。 取出3个培养皿，将培养皿翻转放在采样点 上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、 中；或东南、西南、东北、西北、中5点， 其中东南、西南、东北、西北点均距墙1 m， 取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。 摆放相应高度的凳子或治疗车、桌，采样 高度与地面垂直高度80一150cm;
图文细菌培养标本的采集运送与处理
图文细菌培养标本的采集运送与处理细菌培养标本的采集、运送和处理是临床微生物学工作中至关重要的环节之一。
正确的操作能够保障标本的质量，减少误诊率，提高诊断准确性。
本文将介绍细菌培养标本的采集、运送和处理注意事项，为临床人员提供一些指导性意见。
采集标本的注意事项采集时间标本采集应在患者服用抗生素前或停药时间超过7天后进行。
因为在抗生素作用下，细菌数量减少，可能导致假阴性结果。
而停药时间不足7天，则可能出现抗生素抑制菌体繁殖的影响，导致假阴性结果。
采集部位细菌培养标本的采集要点是要选择适当的部位，从病变部位采集标本，以尽可能多地含有病原体。
采集前要先进行消毒处理，避免检测结果的偏差。
常见的采样部位有：•血液：静脉血、动脉血•尿液：中段尿、早晨第一次排尿•痰液：清晨空腹，深喉刺激后咳出的痰液•脑脊液：用腰穿法获取•分泌物：如脓性分泌物，要清洁创面后进行采集采集器具采集器具应为无菌的容器和器械，避免造成二次污染。
选择采集器具时，应以病变部位大小、特点及病因为基础选择适当的采集方法和器械。
标本采集量标本采集量的大小会影响到检验结果的准确性。
采集过程中，应尽量采集足够量的标本，以避免过多或过少对检测结果的影响。
一般来说，采集量不得少于2mL。
标本的运送和保存标本运送标本运送应保证其质量，在保持标本稳定性的同时，避免造成地区性污染。
运输时应按照相关规定要求，采取避光、避热、避冻等措施。
运送过程中，标本应保持无菌状态，防止被粉尘、脏物等污染。
标本保存在采集后未能及时运送的标本，应保存在4℃～8℃冰箱内，以避免培养所需的营养物质的耗损，影响后续检测结果。
冰箱应定期整理清洗，并进行温度调整，以避免异常温度对标本品质的影响。
标本处理标本处理前的准备工作在进行标本处理之前，需要对关键环节进行准备，如检查及清理工作区、准备必要器械和环境、做好相应的操作准备。
标本的处理方法标本处理一般包括离心、涂片、加药涂布和灭菌。
标本处理应按照相关规定进行，避免外界因素干扰或影响检测结果。
物表细菌培养采样方法
物表细菌培养采样方法一、采样前准备了解待采样物表的类型、用途、使用情况等信息，以便选择合适的采样方法和培养基。
准备所需的采样工具和设备，如棉签、试管、培养皿、培养基、无菌水等。
确定采样数量和采样区域，根据实际情况制定采样计划。
二、选择采样点根据待采样物表的类型和使用情况，选择具有代表性的采样点。
采样点应具有代表性，且易于到达，以便进行采样操作。
对于不同的接触表面，应选择不同的采样点，以反映其细菌污染情况。
三、采样方法使用无菌棉签擦拭物表表面，注意要擦拭均匀，避免用力过大或过小。
将擦拭后的棉签放入试管中，加入适量的无菌水，搅拌均匀。
将试管放置在适当的温度下，进行细菌培养。
四、培养基选择根据待采样物表的类型和使用情况，选择合适的培养基。
常用的培养基包括琼脂平板、肉汤培养基等。
在选择培养基时，应注意其成分和性质，以便选择适当的培养条件。
五、培养条件将试管放入恒温器中，设置适当的温度进行培养。
培养时间根据细菌的生长速度和培养基的成分而定，一般需要24-48小时。
在培养期间，应注意观察试管的变化，如出现气泡、浑浊等现象，应及时采取措施。
六、数据分析在培养结束后，对试管中的细菌进行计数和分类。
比较不同采样点的细菌数量和种类，分析其污染情况和分布规律。
根据数据分析结果，评估物表的清洁度和卫生状况。
七、结果报告根据采样和数据分析结果，撰写物表细菌培养报告。
报告应包括以下内容：待采样物表的基本信息、采样点选择及采样方法描述、细菌培养结果及分析、结论和建议等。
结果报告应及时提交给相关部门或人员，以便采取相应的措施。
细菌培养采样方法
4、负责本科室的医院感染知识的宣传。
5、监督执行手术室人员的无菌技术操作。 6、监测结果归档，备查。
7、监督检查本科室抗菌药物使用情况。 8、组织本科室预防、控制医院感染知识培训
2、操作时，前臂不能越过已打开的培养皿；放培 养器皿时，要从内往外放，取时要从外往内，动 作不能粗重，以免影响培养效果。
3、按照平开平放法或平开扣放法放置30间
选择消毒处理后4h内进行采样。
采样面积
被采表面＜100cm²，取全部表面：被采表面≥100cm²，取100cm²
采样方法
用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水 采样液的棉拭纸1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭纸， 连续采样1—4个规格板面积，用无菌剪剪去手接触部分，将棉拭纸放入装 10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体 的方法采样。放入物品前后，瓶口必须按常规在酒精灯上烘烤，然后盖好 盖塞送细菌培养。
医疗用品采样方法
采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射 器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一 部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法 取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉 拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm²，取全 部表面；被采表面≥100cm²，取100 cm²。
采样前准备
洗手，手套，口罩，无菌注射器5ml， 试管，培养皿，酒精灯，打火机， 无菌棉球、持物筒、无菌剪刀，无 菌规格板，无菌棉签、0.9%生理盐 水。
空气采样方法
采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 与地面垂直高度小于80cm。
5、监督执行手术室人员的无菌技术操作。 6、监测结果归档，备查。
7、监督检查本科室抗菌药物使用情况。 8、组织本科室预防、控制医院感染知识培训
2、操作时，前臂不能越过已打开的培养皿；放培 养器皿时，要从内往外放，取时要从外往内，动 作不能粗重，以免影响培养效果。
3、按照平开平放法或平开扣放法放置30间
选择消毒处理后4h内进行采样。
采样面积
被采表面＜100cm²，取全部表面：被采表面≥100cm²，取100cm²
采样方法
用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水 采样液的棉拭纸1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭纸， 连续采样1—4个规格板面积，用无菌剪剪去手接触部分，将棉拭纸放入装 10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体 的方法采样。放入物品前后，瓶口必须按常规在酒精灯上烘烤，然后盖好 盖塞送细菌培养。
医疗用品采样方法
采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射 器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一 部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法 取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉 拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm²，取全 部表面；被采表面≥100cm²，取100 cm²。
采样前准备
洗手，手套，口罩，无菌注射器5ml， 试管，培养皿，酒精灯，打火机， 无菌棉球、持物筒、无菌剪刀，无 菌规格板，无菌棉签、0.9%生理盐 水。
空气采样方法
采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 与地面垂直高度小于80cm。
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医疗用品采样方法
采样时间 在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射 器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一 部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法 取样的特殊医疗用品，可用浸有无菌生理盐水采样液的棉 拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm²，取全 部表面；被采表面≥100cm²，取100 cm²。
采样方法
用5×5cm²的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水 采样液的棉拭纸1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭纸， 连续采样1—4个规格板面积，用无菌剪剪去手接触部分，将棉拭纸放入装 10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体 的方法采样。放入物品前后，瓶口必须按常规在酒精灯上烘烤，然后盖好 盖塞送细菌培养。
消毒液的采样及检查方 法
采样方法
用无菌吸管吸取使用中的消毒液1ML，置于备好的试管内及 时送检，送检时间不超过4时，必要时试管中加中和剂。
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/25
小组工作任务
2015年质控小组实行分工负责制度，定期进行检查、考核、反馈问题， 分析存在原因。督促科室人员认真执行科室的各项规章制度、从手术间 质量管理检查标准。医院内感染监控标准。
医护人员手采样方法（试管法）
医务人员手采样目的：是为了检测医务人员的责任感，防止将带有
细菌的手污染无菌伤口。 1、按无菌操作要求，进行手细菌采样。 2、选定抽查对象，（手术室参加手术者事先不能通知被抽查对象）。
采样时间
在接触病人、从事医疗活动前进行采样
采样面积及方法
被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲 面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面30cm²）并随之转动采 样棉拭纸，用无菌剪剪去手接触部位，将棉拭纸放入装有10ml采样液的 试管内送检。采样面积按平方厘米计算。
细菌培养采样方法
采样前准备
洗手，手套，口罩，无菌注射器5ml， 试管，培养皿，酒精灯，打火机， 无菌棉空气采样方法
采样时间 选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 采样高度 与地面垂直高度小于80cm。
空气采样方法
1、用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露 30min后送检培养。
4、负责本科室的医院感染知识的宣传。
5、监督执行手术室人员的无菌技术操作。 6、监测结果归档，备查。
7、监督检查本科室抗菌药物使用情况。 8、组织本科室预防、控制医院感染知识培训
谢 谢!
SUCCESS
THANK YOU
2019/7/25
2、操作时，前臂不能越过已打开的培养皿；放培 养器皿时，要从内往外放，取时要从外往内，动作 不能粗重，以免影响培养效果。
3、按照平开平放法或平开扣放法放置30分钟，即 送检验室化验结果。
物体表面采样方法
采样时间
选择消毒处理后4h内进行采样。
采样面积
被采表面＜100cm²，取全部表面：被采表面≥100cm²，取100cm²
具体分工
1、每月组织本组成员至少进行一次全面的质控检查，具体内容见 （手术室护理工组质量检查标准），具体日期当月决定。
2、每月15号以后的第一个礼拜二协同组员进行一次细菌培养。内容包 括空气、物表、手表、无菌物品、消毒液、无菌器械的细菌检测，并登 记检测结果。
3、术前负责检查术间平台擦拭，回风口是否打开，空调温湿度是否 合适，术后检查术间术后处置及柜子物品补充情况。